植物组培实验室配置清单

植物组培实验室建设

目录

1、功能简述 (1)

1)准备室 (1)

2)灭菌室 (1)

3)缓冲间 (2)

4)无菌操作室 (2)

5)培养室 (2)

6)驯化室 (3)

7)温室 (3)

8)辅助实验室（非必要） (3)

①细胞学实验室 (3)

②生理生化分析室 (4)

2、设备及耗材清单 (4)

1)试验设备清单 (4)

2)常备试剂清单 (6)

①MS培养基必备试剂 (7)

②常备激素及辅助试剂 (7)

植物组培实验室建设

1、功能简述

植物组织培养实验室一般应包括准备室、洗涤灭菌室、无菌操作室、培养室、缓冲间，这也是组织培养实验所必须具备的基本条件。要培养成大田苗还要有相应的驯化室、温室。

1)准备室

用途：又叫化学实验室，进行一切与实验有关的准备工作。完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、器皿洗涤、晾置、培养基配制与分装、培养基和培养器皿的灭菌、培养材料的预处理等。

设备：准备室应具备实验台、药品柜、水池、落水架、仪器、药品、防尘橱（放置培养容器）、冰箱、天平（0.1g、0.0001g分度各一台）、干热消毒柜（可省去）、蒸馏水器（可省去）、酸度计(又称pH计，为节约成本和减少维护可用pH试纸代替)、过滤灭菌器、培养皿、培养瓶、三角瓶、试管、电磁炉、水浴锅、漏斗、量筒、刻度移液管（为操作简便起见可购买移液枪1ml、5ml各一个代替）、玻璃棒、酒精灯、镊子、试管架、琼脂、纱布、棉塞、封口膜、大量元素、微量元素、蔗糖、有机物和植物激素的母液（详细内容见附表）、NaOH、盐酸、滤纸、脱脂棉、橡皮筋、牛皮纸等。

图1 准备室图2 灭菌室

2)灭菌室

用途：完成各种器具的保存、培养基的灭菌等。

1

设备：中央实验台、高压灭菌锅、超声波清洗器、干燥灭菌器（电烘箱）70%的酒精、2%的次氯酸钠等。

3)缓冲间

用途：是进入无菌室前的一个缓冲场地，减少人体从外界带入的尘埃等污染物。工作人员在此换上工作服、拖鞋，戴上口罩，才能进入无菌室和培养室。进入无菌操作室前在此更衣换鞋，以减少进出时带入接种室杂菌。

设备：1-2盏紫外灯、水槽、试验台、鞋帽架、柜子、灭菌后的工作服、拖鞋、口罩等。

图3 缓冲间图4 无菌室

4)无菌操作室

用途：也叫接种室，主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技术程序，是植物离体培养研究或生产中最关键的一步。

设备：紫外灯、空调、解剖镜、消毒器、酒精灯、接种器械（接种镊子、剪刀、解剖刀、接种针），实验台和搁架，还有超净工作台和整套灭菌接种仪器、甲醛和高锰酸钾等杀菌药品。

5)培养室

用途：对接种到培养瓶等器皿中的植物离体材料进行控制条件下的培养的场所。

2

设备：安装日光灯照明的培养架（控温控光控湿）、摇床、自动控时器、紫外灯、光照培养箱或人工气候箱、生化培养箱、除湿机、显微镜、温湿度计、空调等。

要求：约需10-20平方米左右，培养室的大小可根据需要培养架的大小、数目、及其他附属设备而定，其设计以充分利用空间和节省能源为原则。基本要求是能够控制光照和温度，并保持相对的无菌环境，因此，培养室应保持清洁和适度干燥；为满足植物培养材料生长对气体的需要，还应安装排风窗和换气扇等培养室的换气装置；为节省能源和空间，应配置适宜的培养架，并安装日光灯照明。

图5 培养室

6)驯化室

用途：组培苗（试管苗）移栽前进行炼苗。

设备：空调机、加湿器、恒温恒湿控制仪、喷雾器。

7)温室

用途：保证试管苗不分季节地常年生产。

设备：温度控制装置、通风口、喷雾装置、光照调节装置、杀菌杀虫工具及相应药物。

8)辅助实验室（非必要）

根据研究或生产的需要而配套设置的专门实验室，主要用于细胞学观察和生理生化分析等。由于并非必要，因此该项目所涉及仪器设备不出现在后续清单中。

①细胞学实验室

3

功能：用于对培养物的观察分析与培养物的计数，对培养材料进行细胞学鉴定和研究，由制片室和显微观察室组成。制片是获取显微观察数据的基础，配备有切片机、磨刀机、温箱及样品处理和切片染色的设备。应有通风橱和废液处理设施。显微观察室主要是显微镜和图像拍摄、处理设备。

②生理生化分析室

功能：培养细胞产物为主要目的的实验室，应建立相应的分析化验实验室，随时对培养物成分进行取样检查。大型次生代谢物生产，还需有效分离实验室。要求：明亮、清洁、干燥、防止潮湿和灰尘污染。

设备：离心机、倒置式生物显微镜及配套的摄影、录像和图像处理设备；电泳仪、萃取和层析设备、紫外分光光度计、高效液相色谱仪、气相色谱仪、酶联免疫测定系统等，根据需要来配置。

表1、组培实验室仪器配置表

功能单元面积（平米）配置仪器

准备室（兼

储藏室功能）50

药品柜、冰箱（柜）、水槽、操作台、纯水制水

器、酸度计、显微镜、天平、防尘柜、常用玻璃

仪器

灭菌室15 高压灭菌器、烘箱、

缓冲室 5 紫外灯、鞋架、挂钩、医用白大褂

接种室15 紫外灯、内置空调、超净工作台、消毒器、酒精灯、接种器械

培养室50×2 培养架（控光、温、湿）

温室大于300平方米喷灌设施和可移动苗床

2、设备及耗材清单

1)试验设备清单

表2、器材数量及参考价格

品名规格数量单价总价实验台2m×4m 1

高压灭菌锅100L 2

超净工作台双人垂直流 2

空调

落水架

防尘橱

冰箱 2

4

天平0.01g、0.0001g 2

干热消毒柜

蒸馏水器

酸度计

过滤灭菌器

电磁炉

不锈钢锅 1 85 85 培养架20

摇床低于240转 1

自动控时器10

紫外灯10

光照培养箱或人工气候箱 2

生化培养箱 1

加湿器 2

喷壶 5

温湿度计 2

超声波清洗器 1

解剖镜 1

鞋帽架、柜子 2

工作服、拖鞋、口罩

药品柜 3

水浴锅 1

脱脂棉 1

漏斗

培养皿

培养瓶及瓶盖250ml 10000

三角瓶150ml 50

三角瓶250ml 50

三角瓶500ml 10

试管5ml 50

试管15ml 50

试管25ml 50

试管塞、试管架

移液吸管 1 ml 6 8 48 移液吸管 2 ml 6 8 48 移液吸管 5 ml 6 8.5 51 移液吸管10 ml 12 8.5 102 温度计200度 6 4.5 27

5

试纸 5.4-7 30 2.5 75 玻璃棒9 1.5 13.5 量筒2000 ml 3 49 147 量筒1000 ml 3 20 60 量筒500 ml 3 30 90 量筒100 ml 6 7.5 45 烧杯500 ml 9 6.5 58.5 烧杯250 ml 6 4.5 27 不锈钢药勺9 4 36 容量瓶100 ml 6 7.5 45 容量瓶250 ml 6 9.5 57 容量瓶500 ml 6 13 78 容量瓶1000 ml 12 16 192 白口小瓶1000 ml 21 9 189 白口小瓶250 ml 9 5.5 49.5 洗耳球30 4 120 勺子9 86.7 漏斗9 2 18 移液器1-100ul 3 248 744 移液器100-1000ul 3 248 744 移液器1000-5000ul 3 248 744 消毒器JZ-100-B立式 6 580 3480 酒精灯12 96 镊子20cm 12 32 384 手术剪18cm 12 27 324 手术刀柄4# 12 23 276 手术刀片23# 12 3 36 培养皿15 cm 30 4.8 144 滤纸中速滤纸11cm 3 10 30 瓶盖6cm带透气膜100000 0.26 26000 组培灯32W 220套65 14300 花瓶鱼形 6 20 120 白大褂大中小50 26 1300 帽子20 2 40 线手套50 1.5 75 橡胶手套9

2)常备试剂清单

6

①MS培养基必备试剂

表3、MS培养基必备试剂

大量元素微量元素铁盐有机物其他

KNO3H3BO3FeSO47H2O 肌醇蔗糖

NH4NO3MnSO4 4H2O Na2EDTA 2H2O 烟酸琼脂MgSO4 7H2O ZnSO4 7H2O 盐酸硫胺素

KH2PO4Na2MoO4 2H2O 盐酸吡哆醇

CaCl2 2H2O CuSO4 5H2O 甘氨酸

CoCl2 6H2O

KI

②常备激素及辅助试剂

激素：6-BA、NAA、KT、2,4-D

辅助试剂：HCL、NaOH、CaNO3、蛋白胨、活性炭、水解酪蛋白、95%乙醇、70%乙醇、次氯酸钠、甲醛、高锰酸钾。

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