分子生物学常用母液的配置方法

分子生物学常用母液的配置方法
分子生物学常用母液的配置方法

分子生物学常用母液的配置方法

(1)0.5M EDTA,PH=8.0

往175ml超纯水中加入46.525克Na2EDTA 2H2O,然后加入10克的NaOH,在磁力搅拌器上溶解,用酸度计测量PH值,根据PH值决定再次加入NaOH的量,直至调节PH值至8.0,然后定容至500ml,灭菌后贮存备用。

(2)1M Tris-Hcl, PH=8.0

在160ml超纯水中加入24.2克的Tris碱,然后用浓盐酸调PH值至8.0(约需8.4ml的浓盐酸),最后用超纯水定容至200ml。(用酸度计测PH值)。灭菌后贮存备用。

(3)TE缓冲液(10mM Tris-Hcl, PH=8.0;1 mM EDTA,PH=8.0)

配置100 ml溶液需加入:

①1M Tris-Hcl, PH=8.0 1.0ml

②0.5 M EDTA,PH=8.0 0.2 ml

③超纯水98.8 ml

灭菌后贮存备用。

(4) 5M Nacl

称146克Nacl 溶于400 ml 超纯水中,然后用超纯水定容至500 ml。

(5) 3.0 NaAc,PH=5.2

称24.6克乙酸钠,溶于70 ml超纯水中,然后用冰乙酸调PH值至5.2,最后定容至100 ml。(6)5M KAc

在50 ml 超纯水中溶49.1克的KAc,然后定溶至100 ml。

(7) 2%CTAB提缓冲液(用于DNA提取)

①1M Tris-Hcl, PH=8.0 20 ml 100 mM

②0.5 EDTA,PH=8.0 8 ml 20 mM

③5M Nacl 56 ml 1400 mM

加入CTAB 4克,水浴(65℃)或用磁力搅拌器加热溶解,冷却至室温后定容至200 ml。

灭菌后备用。

(8)氯仿/异戊醇(24:1)

氯仿96 ml

异戊醇4 ml

(9)SDS法提取DNA缓冲液(现用现配)配40 ml (最后定容至40 ml)

母液量终浓度

①1M Tris-Hcl, PH=8.0 4ml 100 mM

②0.5 EDTA,PH=8.0 4ml 50 mM

③5M Nacl 1.2 ml 150 mM

④10%SDS 8 ml 2%(V/W)

⑤巯基乙醇30~800μl 0.07~2%(v/v)

(10) 10%SDS 溶于80 ml 无菌超纯水中,然后定溶至100 ml。

(11)电泳加样缓冲液(6×)(0.1%溴酚蓝;30%甘油)。使溴酚蓝充分溶解后,于4℃保存。

(12)1×TBE :54gTris ,27.5g硼酸,20 ml 0.5 M PH=8.0 的EDTA,定容到1L,然后加4L蒸馏水。

各种皮试液配制及皮试方法

各种皮试液配制及皮试方法 注:药物是否须要皮试及所用皮试液的配制方法请按说明书为准则,原则上原药皮试。 1、青霉素80万U/瓶:50u 80万青霉素加生理盐水溶解至4ml;(20万U/ml) 取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2万U/ml) 取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2千U/ml) 取上液0.25ml+生理盐水至1ml;(500U/ml) 取上液0.1ml作皮试(即50U)皮试结果判断同青霉素。 2、美洛西林舒巴坦钠1.25g/瓶 以上所需药物加生理盐水溶解至5ml;(250mg/ml) 取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(25mg/ml) 取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2.5mg/ml) 取上液0.2ml+生理盐水至1ml;(0.5mg/ml) 取上液0.1ml作皮试(即0.05mg) 皮试结果判断同青霉素。 3、阿莫西林舒巴坦钠1. 5g/瓶、派拉西林舒巴坦钠1.5g/瓶 以上所需药物加生理盐水溶解至6ml;(250mg/ml) 取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(25mg/ml) 取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2.5mg/ml) 取上液0.2ml+生理盐水至1ml;(0.5mg/ml) 取上液0.1ml作皮试(即0.05mg) 皮试结果判断同青霉素。 4、美洛西林0.5g/瓶、派拉西林0.5g/瓶、氨苄西林0.5g/瓶 以上所需药物加生理盐水溶解至2ml;(250mg/ml) 取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(25mg/ml) 取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2.5mg/ml) 取上液0.2ml+生理盐水至1ml;(0.5mg/ml) 取上液0.1ml作皮试(即0.05mg) 皮试结果判断同青霉素。 5、先锋铋1g/瓶、头孢替唑1g/瓶: 以上所需药物加生理盐水溶解至4ml;(250mg/ml) 取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(25 mg/ml) 取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2.5mg/ml) 取上液0.2ml+生理盐水至1ml;(0.5mg/ml)(500ug/ml) 皮试时取0.1ml(即50ug/0.1ml) 皮试结果判断同青霉素。 6、头孢拉定0.5g/瓶、头孢呋新钠0.5g/瓶、头孢地嗪钠0.5g/瓶、头孢派酮钠舒巴坦钠0.5g/瓶、头孢唑林钠0.5g/瓶: 以上所需药物加生理盐水溶解至2ml;(250mg/ml) 取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(25 mg/ml)

分子生物学名词解释

名词解释(在“分子生物学试题及答案”中找答案) 1.cDNA与cccDNA:cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA;cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2.标准折叠单位:蛋白质二级结构单元α-螺旋与β-折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块,此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型,乃至他们的组合型来予以描述,因此又将其称为标准折叠单位。3.CAP:环腺苷酸(cAMP)受体蛋白CRP(cAMP receptor protein ),cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP(cAMP activated protein ) 4.回文序列:DNA片段上的一段所具有的反向互补序列,常是限制性酶切位点。5.micRNA:互补干扰RNA或称反义RNA,与mRNA序列互补,可抑制mRNA的翻译。6.核酶:具有催化活性的RNA,在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7.模体:蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域8.信号肽:在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段,引导蛋白质的跨膜。9.弱化子:在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。 10.魔斑:当细菌生长过程中,遇到氨基酸全面缺乏时,细菌将会产生一个应急反应,停止全部基因的表达。产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸(pppGpp)。PpGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子,而是影响一大批,所以称他们是超级调控子或称为魔斑。 11.上游启动子元件:是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列,-10区的TATA、-35区的TGACA及增强子,弱化子等。 12.DNA探针:是带有标记的一段已知序列DNA,用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。 13.SD序列:是核糖体与mRNA结合序列,对翻译起到调控作用。 14.单克隆抗体:只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。 15.考斯质粒:是经过人工构建的一种外源DNA载体,保留噬菌体两端的COS区,与质粒连接构成。 16.蓝-白斑筛选:含LacZ基因(编码β半乳糖苷酶)该酶能分解生色底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)产生蓝色,从而使菌株变蓝。当外源DNA插入后,LacZ基因不能表达,菌株呈白色,以此来筛选重组细菌。称之为蓝-白斑筛选。 17.顺式作用元件:在DNA中一段特殊的碱基序列,对基因的表达起到调控作用的基因元件。 18.Klenow酶:DNA聚合酶I大片段,只是从DNA聚合酶I全酶中去除了5’3’外切酶活性 19.锚定PCR:用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴,然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。 20.融合蛋白:真核蛋白的基因与外源基因连接,同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。 二、填空 1.DNA的物理图谱是DNA分子的()片段的排列顺序。2.RNA酶的剪切分为()、()两种类型。 3.原核生物中有三种起始因子分别是()、()和()。 4.蛋白质的跨膜需要()的引导,蛋白伴侣的作用是()。

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常用分子生物学工具汇总 书目资料库管理系统 1、ReferenceManager v11.0 【说明】ReferenceManager是一个专门设计来管理书目参考文献的资料库程序。任何需要收集参考文献做研究之用或需要制作书目的人都可以使用Reference Manager更轻易地管理资料。Reference Manager受到全球学术机构以及商业、研究机构的研究人员、图书馆员和学生广泛地使用。 【功能】 a、快速地从草稿中准备格式化的内文引用文献和参考书目 b、建立并维护部门的研究资料库 c、追踪再版馆藏 d、为研究人员或图书馆赞助者管理新知通报服务 e、从不同的参考文献来源(如:联机、光碟、网际网络资料服务)收集参考文献 f、为学生建立指定阅读清单 g、建立教职员出版品清单 h、编目特殊馆藏 2、Endnote7.0

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1、NCBI-Genbank 【说明】GenBank是美国国家生物技术信息中心(NCBI)建立的DNA序列数据库,从公共资源中获取序列数据,主要是科研人员直接提供或来源于大规模基因组测序计划( Benson等,1998)。为保证数据尽可能的完全,GenBank 与EMBL(欧洲分子生物学实验室)、DDBJ建立了相互交换数据的合作关系。 【功能】 a、Entrez检索:将核酸、蛋白质序列和基因图谱、蛋白质结构数据库整合在一起。 b、Blast检索:通过已知序列检索其同源序列(序列类型为核酸或核苷酸)。 c、序列分类检索:高通量基因组序列(HTG)、表达序列标记(EST)、序列标记位点(STS)和基因组概览序列(GSS)。序列文件的基本单位是序列条目,包括核甘酸碱基排列顺序和注释两部分。

常用皮试液的配置方法及注意事项

各种常用皮试液的配制方法 (一)青霉素 ①皮试药液配制方法: 青霉素1瓶80万u,注入4ml生理盐水,则1ml含20万u?? 取上液0. 1ml,加生理盐水至1ml,则1ml含2万u?? 取上液0. 1ml,加生理盐水至1ml,则1ml含2000u?? 取上液或0. 25ml,加生理盐水至1ml,则1ml含200 u 或500u,即成青霉素皮试液。 ②皮试方法及结果观察 皮内注射0. 1ml(含20 u 或50 u?) A:阴性:皮丘大小无改变,周围无红肿,无红晕,全身无自觉症状,无不适表现。 B:阳性:皮丘局部隆起增大,并出现红晕,直径大于1㎝,周围有伪足伴局部痒感。可有头晕、心慌、恶心甚至发生过敏性休克。 ③注意事项 A、青霉素过敏试验前必须详细询问患者的用药史、过敏史及家族史。 B、凡初次用药、停药3天后再用,以及在应用中更换青霉素批号时,均需常规做 过敏试验。 C、已知有青霉素类或青霉素皮试试验阳性患者禁止皮试。 D、皮试液必须现配现用,浓度与剂量必须准确。 E、首次注射后须观察30分钟,注意局部和全身反应,倾听患者主诉,并做好急救 准备工作。 F、皮试阳性者不可使用青霉素,并在体温单、病历、医嘱单、床头卡醒目注明, 同时将结果告知患者及家属。 G、如对皮试结果有怀疑,应在对侧前臂皮内注射生理盐水 ml,以作对照,确认青 霉素皮试结果阴性方可用药。使用青霉素过程中要继续严密观察反应。 (二)链霉素 ①皮试溶液的配制 取链霉素1g(100万u)加生理盐水3.5ml溶液后即成4ml(每毫升含25万u)。取上液0.lml加生理盐水稀释至lml(每毫升含2.5万U)。 取上液0.lml加生理盐水稀释至lml(每毫升含2500U)。 ②皮试方法及结果观察 皮内注射0. 1ml(含链霉素250U) 皮内注射后观察20分钟.其结果判断标准同青霉素试验。 ③注意事项 A.对链霉素或其他氨基糖苷类过敏的患者禁用。 B.一旦发生过敏性休克,其救治措施与青霉素过敏性休克基本相同。 C.患者若有抽搐,可用10%葡萄糖酸钙或5%氯化钙静脉缓慢推注,若有肌肉无力或呼吸困难,宜用新斯的明皮下注射或静脉注射。 (三)破伤风抗毒素(TAT)1500u/支 ①皮试溶液的配制

(完整版)分子生物学总结完整版

分子生物学 第一章绪论 分子生物学研究内容有哪些方面? 1、结构分子生物学; 2、基因表达的调节与控制; 3、DNA重组技术及其应用; 4、结构基因组学、功能基因组学、生物信息学、系统生物学 第二章DNA and Chromosome 1、DNA的变性:在某些理化因素作用下,DNA双链解开成两条单链的过程。 2、DNA复性:变性DNA在适当条件下,分开的两条单链分子按照碱基互补原则重新恢复天然的双螺旋构象的现象。 3、Tm(熔链温度):DNA加热变性时,紫外吸收达到最大值的一半时的温度,即DNA分子内50%的双链结构被解开成单链分子时的温度) 4、退火:热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性,称为退火 5、假基因:基因组中存在的一段与正常基因非常相似但不能表达的DNA序列。以Ψ来表示。 6、C值矛盾或C值悖论:C值的大小与生物的复杂度和进化的地位并不一致,称为C值矛盾或C值悖论(C-Value Paradox)。 7、转座:可移动因子介导的遗传物质的重排现象。 8、转座子:染色体、质粒或噬菌体上可以转移位置的遗传成分 9、DNA二级结构的特点:1)DNA分子是由两条相互平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成;2)DNA分子中的脱氧核苷酸和磷酸交替连接,排在外侧,构成基本骨架,碱基排列在外侧;3)DNA分子表面有大沟和小沟;4)两条链间存在碱基互补,通过氢键连系,且A=T、G ≡ C(碱基互补原则);5)螺旋的螺距为3.4nm,直径为2nm,相邻两个碱基对之间的垂直距离为0.34nm,每圈螺旋包含10个碱基对;6)碱基平面与螺旋纵轴接近垂直,糖环平面接近平行 10、真核生物基因组结构:编码蛋白质或RNA的编码序列和非编码序列,包括编码区两侧的调控序列和编码序列间的间隔序列。 特点:1)真核基因组结构庞大哺乳类生物大于2X109bp;2)单顺反子(单顺反子:一个基因单独转录,一个基因一条mRNA,翻译成一条多肽链;)3)基因不连续性断裂基因(interrupted gene)、内含子(intron)、外显子(exon);4)非编码区较多,多于编码序列(9:1) 5)含有大量重复序列 11、Histon(组蛋白)特点:极端保守性、无组织特异性、氨基酸分布的不对称性、可修饰作用、富含Lys的H5 12、核小体组成:由组蛋白和200bp DNA组成 13、转座的机制:转座时发生的插入作用有一个普遍的特征,那就是受体分子中有一段很短的被称为靶序列的DNA会被复制,使插入的转座子位于两个重复的靶序列之间。 复制型转座:整个转座子被复制,所移动和转位的仅为原转座子的拷贝。 非复制型转座:原始转座子作为一个可移动的实体直接被移位。 第三章DNA Replication and repair 1、半保留复制:DNA生物合成时,母链DNA解开为两股单链,各自作为模板(template)按碱

常用分子生物学软件简介

常用分子生物学软件简 介 公司内部编号:(GOOD-TMMT-MMUT-UUPTY-UUYY-DTTI-

常用分子生物学软件 一、基因芯片: 1、基因芯片综合分析软件。 ArrayVision 一种功能强大的商业版基因芯片分析软件,不仅可以进行图像分析,还可以进行数据处理,方便protocol的管理功能强大,商业版正式版:6900美元。Arraypro Media Cybernetics公司的产品,该公司的gelpro, imagepro一直以精确成为同类产品中的佼佼者,相信arraypro也不会差。 phoretix? Array Nonlinear Dynamics公司的基因片综合分析软件。 J-express 挪威Bergen大学编写,是一个用JAVA语言写的应用程序,界面清晰漂亮,用来分析微矩阵(microarray)实验获得的基因表达数据,需要下载安装JAVA运行环境后后,才能运行。 2、基因芯片阅读图像分析软件 ScanAlyze ,斯坦福的基因芯片基因芯片阅读软件,进行微矩阵荧光图像分析,包括半自动定义格栅与像素点分析。输出为分隔的文本格式,可很容易地转化为任何数据库。 3、基因芯片数据分析软件 Cluster

斯坦福的对大量微矩阵数据组进行各种簇(Cluster)分析与其它各种处理的软件。 SAM Significance Analysis of Microarrays 的缩写,微矩阵显着性分析软件,EXCEL软件的插件,由Stanford大学编制。 4.基因芯片聚类图形显示 TreeView 斯坦福开发的用来显示Cluster软件分析的图形化结果。现已和Cluster成为了基因芯片处理的标准软件。 FreeView 是基于JAVA语言的系统树生成软件,接收Cluster生成的数据,比Treeview增强了某些功能。 5.基因芯片引物设计 Array Designer DNA微矩阵(microarray)软件,批量设计DNA和寡核苷酸引物工具 二、RNA二级结构。 RNA Structure RNA Sturcture 根据最小自由能原理,将Zuker的根据RNA一级序列预测RNA二级结构的算法在软件上实现。预测所用的热力学数据是最近由Turner实验室获得。提供了一些模块以扩展Zuker算法的能力,使之为一个界面友好的RNA折叠程序。允许你同时打开多个数据处理窗口。主窗口的工具条提供一些基本功能:打开文件、导入文件、关闭文件、设置程序参数、重排窗口、以及即时帮助和退

常用皮试液配制方法

常用皮试液的配制方法 1.青霉素皮试药液配制方法 青霉素1瓶80万u,注入4ml生理盐水,则1ml含20万u; 取0. 1ml,加生理盐水至1ml,则1ml含2万u; 取0. 1ml,加生理盐水至1ml,则1ml含2000u; 取0. 25ml,加生理盐水至1ml,则1ml含500u,即成青霉素皮试液。皮内注射0.1ml含50 u 。 简化记:4ml两个0.1一个0.25都到1ml 2.阿莫西林克拉维酸钾皮试液的配制 在阿莫西林克拉维酸钾1.2g/支中加入生理盐水6ml,使每ml含200mg;取0.1ml加入生理盐水至1ml,使每ml含20mg; 取0.1ml加入生理盐水至1ml,使每ml含2mg; 取0.3ml加入生理盐水至1ml,使每ml含600μg. 皮内注射0. 1ml含60μg。 头胞类皮试液的配制方法 3.头孢曲松皮试液配制: 在1g的头孢曲松钠中加入生理盐水5ml,充分溶化,使每毫升含200mg;取0.1ml,加生理盐水至1ml,使每毫升含20mg; 取0.1ml,加生理盐水至1ml,每毫升含2mg; 取0.25ml,加生理盐水至1ml,每毫升含500μg.。 皮内注射0. 1ml含50μg。 简化记:5ml两个0.1一个0.25都到1ml 4.头孢呋辛钠皮试液的配制方法 在头孢呋辛钠1.5g/支中加入生理盐水6毫升,使每1毫升含250mg; 取0.2ml加入生理盐水至1ml,使每1ml含50mg; 取0.1毫升加入生理盐水至1ml,使每1毫升含5000μg; 取0.1毫升500μg加入生理盐水至1毫升,使每1毫升含500μg. 皮内注射0. 1ml含50μg。 简化记6毫升,一个0.2ml两个0.1ml都到1ml。

分子生物学复习题(有详细答案)

绪论 思考题:(P9) 1.从广义和狭义上写出分子生物学的定义? 广义上讲的分子生物学包括对蛋白质和核酸等生物大分子结构与功能的研究,以及从分子水平上阐明生命的现象和生物学规律。 狭义的概念,即将分子生物学的范畴偏重于核酸(基因)的分子生物学,主要研究基因或DNA结构与功能、复制、转录、表达和调节控制等过程。其中也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。 2、现代分子生物学研究的主要内容有哪几个方面?什么是反向生物学?什么是 后基因组时代? 研究内容: DNA的复制、转录和翻译;基因表达调控的研究;DNA重组技术和结构分子生物学。 反向生物学:是指利用重组DNA技术和离体定向诱变的方法研究已知结构的基因相应的功能,在体外使基因突变,再导入体内,检测突变的遗传效应,即以表型来探索基因结构。 后基因组时代:研究细胞全部基因的表达图式和全部蛋白质图式,人类基因组研究由结构向功能转移。 3、写出三个分子生物写学展的主要大事件(年代、发明者、简要内容) 1953年Watson和Click发表了?脱氧核糖核苷酸的结构?的著名论文,提出了DNA的双螺旋结构模型。 1972~1973年,重组DNA时代的到来。H.Boyer和P.Berg等发展了重组DNA 技术,并完成了第一个细菌基因的克隆,开创了基因工程新纪元。 1990~2003年美、日、英、法、俄、中六国完成人类基因组计划。解读人类遗传密码。 4、21世纪分子生物学的发展趋势是怎样的? 随着基因组计划的完成,人类已经掌握了模式生物的所有遗传密码。又迎来了后基因组时代,人类基因组的研究重点由结构向功能转移。相关学说理论相应诞生,如功能基因组学、蛋白质组学和生物信息学。生命科学又进入了一个全新的时代。 第四章 思考题:(P130) 1、基因的概念如何?基因的研究分为几个发展阶段? 概念:基因是原核、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遗传效应的核苷酸序列,是遗传的基本单位和突变单位以及控制形状的功能单位。 发展阶段:○120世纪50年代以前,主要从细胞的染色体水平上进行研究,属于基因的染色体遗传学阶段。 ○220世纪50年代以后,主要从DNA大分子水平上进行研究,属于分

分子生物学常见名词解释完全版

分子生物学常见名词解释完全版(中英文对照) A Abundance (mRNA 丰度):指每个细胞中mRNA 分子的数目。 Abundant mRNA(高丰度mRNA):由少量不同种类mRNA组成,每一种在细胞中出现大量 拷贝。 Acceptor splicing site (受体剪切位点):内含子右末端和相邻外显子左末端的边界。Acentric fragment(无着丝粒片段):(由打断产生的)染色体无着丝粒片段缺少中心粒,从而 在细胞分化中被丢失。 Active site(活性位点):蛋白质上一个底物结合的有限区域。 Allele(等位基因):在染色体上占据给定位点基因的不同形式。 Allelic exclusion(等位基因排斥):形容在特殊淋巴细胞中只有一个等位基因来表达编码的 免疫球蛋白质。 Allosteric control(别构调控):指蛋白质一个位点上的反应能够影响另一个位点活性的能力。Alu-equivalent family(Alu 相当序列基因):哺乳动物基因组上一组序列,它们与人类Alu 家族相关。 Alu family (Alu家族):人类基因组中一系列分散的相关序列,每个约300bp长。每个成员 其两端有Alu 切割位点(名字的由来)。 α-Amanitin(鹅膏覃碱):是来自毒蘑菇Amanita phalloides 二环八肽,能抑制真核RNA聚 合酶,特别是聚合酶II 转录。 Amber codon (琥珀密码子):核苷酸三联体UAG,引起蛋白质合成终止的三个密码子之一。Amber mutation (琥珀突变):指代表蛋白质中氨基酸密码子占据的位点上突变成琥珀密码 子的任何DNA 改变。 Amber suppressors (琥珀抑制子):编码tRNA的基因突变使其反密码子被改变,从而能识 别UAG 密码子和之前的密码子。 Aminoacyl-tRNA (氨酰-tRNA):是携带氨基酸的转运RNA,共价连接位在氨基酸的NH2 基团和tRNA 终止碱基的3¢或者2¢-OH 基团上。 Aminoacyl-tRNA synthetases (氨酰-tRNA 合成酶):催化氨基酸与tRNA 3¢或者2¢-OH基团共价连接的酶。 Amphipathic structure(两亲结构):具有两个表面,一个亲水,一个疏水。脂类是两亲结构,一个蛋白质结构域能够形成两亲螺旋,拥有一个带电的表面和中性表面。 Amplification (扩增):指产生一个染色体序列额外拷贝,以染色体内或者染色体外DNA形 式簇存在。 Anchorage dependence (贴壁依赖):指正常的真核细胞需要吸附表面才能在培养基上生长。Aneuploid (非整倍体):组成与通常的多倍体结构不同,染色体或者染色体片段或成倍丢失。Annealing (退火):两条互补单链配对形成双螺旋结构。 Anterograde (顺式转运):蛋白质质从内质网沿着高尔基体向质膜转运。 Antibody (抗体):由B 淋巴细胞产生的蛋白质(免疫球蛋白质),它能识别特殊的外源“抗 2 原”,从而引起免疫应答。 Anticoding strand (反编码链):DNA 双链中作为膜板指导与之互补的RNA 合成的链。Antigen (抗原):进入基体后能引起抗体(免疫球蛋白质)合成的分子。 Antiparallel (反式平行):DNA双螺旋以相反的方向组织,因此一条链的5¢端与另一条链的3¢端相连。

各种皮试液的配置方法

各种皮试液的配置方法 1、细胞色素C:15mg/2ml,皮试浓度:0.75mg/ml 取0.1ml+0.9ml注射用水 2、破伤风抗毒素(TAT):1500U/ml,皮试浓度:150U/ml 取0.1ml+0.9ml注射用水 3、普鲁卡因:用原液做皮试 4、脉通:用原液做皮试 5、结核菌素:5U/ml 皮内注射0.1ml 6、碘过敏试验: 口服法:口服5%-10%碘化钾5ml ,每日3次共3天 皮内注射法:皮内注射碘造影剂0.1ml,20分钟后观察结果 静脉注射法:静脉注射碘造影剂(30%泛影葡胺)1ml,5-10分钟后观察结果 7、维生素B1:100mg/2ml/支,皮试浓度:5mg/ml 取0.1ml+0.9ml注射用水 8、胸腺肽:50mg/支,皮试液浓度25μg/ml 用5ml注射用水溶解后,取0.1ml+0.3ml注射用水,取上液0.1ml+0.9ml注射用水 9、青霉素:160万U/支,皮试液浓度200U/ml 用4ml注射用水溶解后,取0.1ml+0.1ml注射用水,其余2步按青霉素80万U/支皮试液配置 10、头孢类抗生素皮试液配置方法:皮试液浓度:0.5mg/ml 0.5头孢类抗生素 取0.5g内加生理盐水5m l:含100mg/ml 取0.5ml+0.5ml生理盐水:含50mg/ml 取0.1ml+0.9ml生理盐水:含5mg/ml 取0.1ml+0.9ml生理盐水:含0.5mg/ml 取0.1ml皮内注射 0.75g头孢类抗生素 取0.75g内加生理盐水6m l:含125mg/ml 取0.4ml+0.6ml生理盐水:含50mg/ml 取0.1ml+0.9ml生理盐水:含5mg/ml 取0.1ml+0.9ml生理盐水:含0.5mg/ml 取0.1ml皮内注射 1.0g头孢类抗生素 取1.0g内加生理盐水5m l:含200mg/ml 取0.25ml+0.75ml生理盐水:含50mg/ml 取0.1ml+0.9ml生理盐水:含5mg/ml 取0.1ml+0.9ml生理盐水:含0.5mg/ml 取0.1ml皮内注射1.5g头孢类抗生素取1.5g内加生理盐水6m l:含250mg/ml 取0.2ml+0.8ml生理盐水:含50mg/ml 取0.1ml+0.9ml生理盐水:含5mg/ml 取0.1ml+0.9ml生理盐水:含0.5mg/ml 取0.1ml皮内注射 2.0g头孢类抗生素 取2.0g内加生理盐水8m l:含250mg/ml 取0.2ml+0.8ml生理盐水:含50mg/ml 取0.1ml+0.9ml生理盐水:含5mg/ml 取0.1ml+0.9ml生理盐水:含0.5mg/ml 取0.1ml皮内注射 3.0g头孢类抗生素 取3.0g内加生理盐水6m l:含500mg/ml 取0.1ml+0.9ml生理盐水:含50mg/ml 取0.1ml+0.9ml生理盐水:含5mg/ml 取0.1ml+0.9ml生理盐水:含0.5mg/ml 取0.1ml皮内注射 11、阿洛西林或美洛西林皮试液配置:皮试液浓度300μg/ml 将3g阿洛西林或美洛西林溶于5ml生理盐水:600mg/ml 取0.1ml+0.1ml生理盐水:含30mg/ml 取0.1ml+0.9ml生理盐水:含3mg/ml 取0.1ml+0.9ml生理盐水:含300gμ/ml 取0.1ml皮内注射 12、美洛西林/舒巴坦:1g/0.25g,皮试液浓度300μg/ml 将原药溶于2ml生理盐水中 取0.6ml+0.4ml生理盐水:含300mg/ml 取0.1ml+0.9ml生理盐水:含30mg/ml 取0.1ml+0.9ml生理盐水:含3mg/ml 取0.1ml+0.9ml生理盐水:含300gμ/ml 取0.1ml皮内注射 13、氨苄西林、强力阿莫仙、哌拉西林、氧哌嗪青霉素、亚胺培南(泰能)、美罗培南、口服阿莫西林均做青霉素皮试 14、去甲万古霉素不用做皮试

分子生物学主要研究内容

分子生物学主要研究内容 1. 核酸的分子生物学。 核酸的分子生物学研究 核酸的结构及其功能。由于 核酸的主要作用是携带和传 递遗传信息,因此分子遗传 学是其主要组成部分。由于 50年代以来的迅速发展,该 领域已形成了比较完整的理 论体系和研究技术,是目前分子生物学内容最丰富的一个领域。研究内容包括核酸/基因组的结构、遗传信息的复制、转录与翻译,核酸存储的信息修复与突变,基因表达调控和基因工程技术的发展和应用等。遗传信息传递的中心法则是其理论体系的核心。 2. 蛋白质的分子生物学。 蛋白质的分子生物学研究执行各种生命功能的主要大分子──蛋白质的结构与功能。尽管人类对蛋白质的研究比对核酸研究的历史要长得多,但由于其研究难度较大,与核酸分子生物学相比发展较慢。近年来虽然在认识蛋白质的结构及其与功能关系方面取得了一些进展,但是对其基本规律的认识尚缺乏突破性的进展。 3.细胞信号转导的分子生物学。 细胞信号转导的分子生物学研究细胞内、细胞间信息传递的分子基础。构成生物体的每一个细胞的分裂与分化及其它各种功能的完成均依赖于外界环境所赋予的各种指示信号。在这些外源信号的刺激下,细胞可以将这些信号转变为一系列的生物化学变化,例如蛋白质构象的转变、蛋白质分子的磷酸化以及蛋白与蛋白相互作用的变化等,从而使其增殖、分化及分泌状态等发生改变以适应内外环境的需要。信号转导研究的目标是阐明这些变化的分子机理,明确每一种信号转导与传递的途径及参与该途径的所有分子的作用和调节方式以及认识各种途径间的网络控制系统。信号转导机理的研究在理论和技术方面与上述核酸及蛋白质分子有着紧密的联系,是当前分子生物学发展最迅速的领域之一。 4.癌基因与抑癌基因、肽类生长因子、细胞周期及其调控的分子机理等。 从基因调控的角度研究细胞癌变也已经取得不少进展。分子生物学将为人类最终征服癌症做出重要的贡献。

分子生物学常用技术 习题

第五章常用分子生物学技术的原理及其应用习题(引自网络精品课程) 一、选择题 (一)A型题 1 .分子杂交实验不能用于 A .单链DNA 与RNA 分子之间的杂交 B .双链DNA 与RNA 分子之间的杂交 C .单链RNA 分子之间的杂交 D .单链DNA 分子之间的杂交 E .抗原与抗体分子之间的杂交 2 .关于探针叙述错误的是 A .带有特殊标记 B .具有特定序列 C .必须是双链的核酸片段 D .可以是基因组DNA 片段 E .可以是抗体 3 .下列哪种物质不能用作探针 A .DNA 片段 B .cDNA C .蛋白质 D .氨基酸 E .RNA 片段 4 .印迹技术可以分为 A .DNA 印迹 B .RNA 印迹 C .蛋白质印迹 D .斑点印迹 E .以上都对 5 .PCR 实验延伸温度一般是 A .90 ℃ B .72 ℃ C .80 ℃ D .95 ℃ E .60 ℃ 6 .Western blot 中的探针是 A .RNA B .单链DNA C .cDNA D .抗体 E .双链DNA 7 .Northern blotting 与Southern blotting 不同的是 A .基本原理不同 B .无需进行限制性内切酶消化 C .探针必须是RNA D .探针必须是DNA E .靠毛细作用进行转移 8 .可以不经电泳分离而直接点样在NC 膜上进行杂交分析的是 A .斑点印迹 B .原位杂交 C .RNA 印迹 D .DNA 芯片技术 E .DNA 印迹 9 .下列哪种物质在PCR 反应中不能作为模板 A .RNA B .单链DNA C .cDNA D .蛋白质 E .双链DNA 10 .RT-PCR 中不涉及的是 A .探针 B .cDNA C .逆转录酶 D .RNA E .dNTP 11 .关于PCR 的基本成分叙述错误的是 A .特异性引物 B .耐热性DNA 聚合酶 C .dNTP D .含有Zn 2+ 的缓冲液 E .模板 12 .DNA 链末端合成终止法不需要 A .ddNTP B .dNTP C .引物标记 D .DNA 聚合酶 E .模板 13 .cDNA 文库构建不需要 A .提取mRNA B .限制性内切酶裂解mRNA C .逆转录合成cDNA D .将cDNA 克隆入质粒或噬菌体 E .重组载体转化宿主细胞 14 .标签蛋白沉淀是 A .研究蛋白质相互作用的技术 B .基于亲和色谱原理 C .常用标签是GST D .也可以是6 组氨酸标签 E .以上都对 15 .研究蛋白质与DNA 在染色质环境下相互作用的技术是 A .标签蛋白沉淀 B .酵母双杂交 C .凝胶迁移变动实验 D .染色质免疫沉淀法 E .噬菌体显示筛选系统 16 .动物整体克隆技术又称为

临床常用药物皮试液配制方法全

临床常用药物皮试液配 制方法全 Document serial number【NL89WT-NY98YT-NC8CB-NNUUT-NUT108】

临床常用药物皮试液配制方法 1、过敏试验法: 2、1、评估: 3、1)仔细询问过敏史:青霉素类询问青霉素过敏史,头孢菌素类询问头孢菌素过敏 史。如有青霉素过敏史则停止该项试验。有其他药物过敏史或变态反应疾病史应慎用。 4、2)曾使用该药,停药3天(TAT7天)后再次使用,或在使用过程中改不同批号的制 剂时,需要重做皮试,确定结果为阴性才能继续用药。 5、计划: 6、1)用物准备:必需备%盐酸肾上腺素,(其他略) 7、2)病人准备:A、病人不宜空腹进行皮试,因个别人于空腹时注射用药会发生眩 晕、恶心等反应,宜与过敏反应相混淆。B、让病人了解注射目的,懂得观察期间不可随意离开;不可搔抓或揉按皮试局部;如有异常随时告知医护人员。(病人输注完任何药物后必须在院观察30分钟始才可离院)。 8、实施: 9、1)配制方法; 2)皮内试验:于前臂内侧皮内注射皮试液,15-30分钟后观察皮试 结果。 4、过敏性休克的急救措施: 1)、立即停药,使病人平卧。 2)、立即皮下注射%肾上腺素1ml,小儿酌减。症状如不缓解,可每隔半小时皮下或静脉注射该药。直至脱离危险期。

3)、给予氧气吸入,改善缺氧症状。呼吸受抑制时,应立即进行人工呼吸,并使用呼吸兴奋剂。喉头水肿引致窒息时,应尽快实行气管切开。 4)、根据医嘱静脉注射地塞米松5-10mg,应用抗组胺类药,如盐酸异丙嗪等。 5)、静脉滴注10%葡萄糖溶液或平衡液扩充血容量。血压仍不回升,可按医嘱加入多巴胺等。 6)、若心跳骤停,则立即进行复苏抢救。 7)、密切观察病情,记录病人呼吸、脉搏、血压、神志和尿量等变化。 一、青霉素类药物皮试液配制方法 按《中国药典》2000年版临床用药须知规定,使用青霉素类抗生素前均需 做青霉素皮肤试验,阳性反应者禁用。青霉素类药物在应用前可用青霉素G钠皮试液进行皮试。 原则:青霉素皮试液浓度为每毫升含200--500u; 其它青霉素类药物皮试液浓度为:每ml含500ug; 因此溶解药物时每溶解几毫升,共稀释三次,第二次稀释后就余零点几毫升,第三次再稀释至1ml即可。 青霉素皮试结果判断标准: 在观察反应的同时,应询问有无胸闷、气短、发麻等过敏症状。 阴性:皮丘无改变,周围不红肿,无红晕、无自觉症状。 阳性:局部皮丘隆起增大,出现红晕硬块,直径大于1cm,周围有伪足伴局部痒感;严重时可有头晕、心慌、恶心,甚至发生过敏性休克。 皮试结果阳性者不可该药,并要在病历、医嘱单、床头卡和注射单上加以注明,以及将结果告知病人及其家属。如出现过敏性休克,按过敏性休克抢救。

分子生物学常见名词解释

专业《分子生物学》复习题 (仅供参考) 一名词解释: 1、基因gene:基因是产生一条多肽链或功能RNA所必须的全部核苷酸序列,是决定遗传性状的功能单位。 2、基因组genome:细胞或生物体的一套完整单倍体的遗传物质的总和。 4、顺式作用元件:是指基因序列中可在原位发挥作用并影响其在物理上相连的基因表达的保守结构。如启动子、上游启动子元件、增强子、终止子等。 5、反式作用因子:是指真核细胞内含有的大量可以通过直接或间接结合顺式作用元件而调节基因转录活性的蛋白质因子。如RNA聚合酶。 6、启动子promoter:是与RNA聚合酶特异性结合并起始转录的DNA区域。 7、增强子enhancer:位于真核基因中远离转录起始点,能明显增强启动子转录效率的特殊DNA序列。它可位于被增强的转录基因的上游或下游,也可相距靶基因较远。 8、基因表达gene expression:是指生物基因组中结构基因所携带的遗传信息经过转录、翻译等一系列过程,合成特定的蛋白质,进而发挥其特定的生物学功能和生物学效应的全过程。 9、分子克隆molecular expression:在体外对DNA分子按照既定目的和方案进行人工重组,将重组分子导入合适宿主,使其在宿主中扩增和繁殖,以获得该DNA分子的大量拷贝。 10、基因工程genetic engineering:有目的的通过分子克隆技术,人为的操作改造基因,改变生物遗传性状的系列过程。 11、 DNA变性Denaturation:在物理或化学因素的作用下,导致两条DNA链之间的氢键断裂,而核酸分子中的所有共价键则不受影响。 12、 DNA复性renaturation:当促使变性的因素解除后,两条DNA链又可以通过碱基互补配对结合形成DNA双螺旋结构。 13、退火annealing:指将温度降至引物的TM值左右或以下,引物与DNA 摸板互补区域结合形成杂交链。 14、反义RNA antisense RNA:碱基序列正好与有意义的mRNA互补的RNA 称为反义RNA。可以作为一种调控特定基因表达的手段。 15、核酶ribozyme:具有催化活性的RNA,在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 16、管家基因(House-keeping gene):在生物体生命的全过程都是必须的,且在一个生物个体的几乎所有细胞中持续表达的基因。 17、奢侈基因(luxury gene):又称可调节基因(regulated gene)、可诱导基因,是在特殊类型的细胞中为特化功能蛋白质编码的基因,其表达和调控都受环境条件的影响。 18、重叠基因(overlapping gene):它是指两个或两个以上的结构基因共用一段DNA顺序的现象。 19、C值矛盾C value paradox:一个单倍体基因组的全部DNA含量总是恒定的。这是物种的一个特征,通常称为该物种的C值。一般而言,随着生物的进化,生物体的结构和功能越来越复杂,其C值就越大。但由于人们无法用已知功能

常用皮试液配制方法完整版

常用皮试液配制方法 Document serial number【NL89WT-NY98YT-NC8CB-NNUUT-NUT108】

各种皮试液的配制方法 1、青霉素皮试液的配制 以青霉素一瓶(80万u)为例,注入等渗盐水4ml则每ml含20万u. 取加等渗盐水至1ml,每ml含2万u. 取加等渗盐水至1ml,每ml含2000u. 取加等渗盐水至1ml,每ml含200万u. 取青霉素皮试液(含20u)作皮内注射,观察20分钟后,判断试验结果。 2、头孢唑啉钠皮试液的配制 0.5g/瓶头孢唑啉钠加等渗盐水至5ml -→ml 取瓶加等渗盐水至5ml -→2mg/ml 取瓶加等渗盐水至5ml -→60μg/ml 取头孢唑啉钠皮试液(含6μg)作皮内注射,观察20分钟后,判断试验结 果。 3、头孢曲松皮试液的配置 在1 g的头孢曲松钠中加入生理盐水4 ml,充分溶化,使每毫升浓度为250 mg/ml。 用1 ml注射器从上液中抽取 ml,加生理盐水至1 ml,使其浓度为50 mg/ml。 取 ml,加生理盐水至1 ml,使其浓度为5 mg/ml。 取 ml,加生理盐水至1 ml,即成浓度为500 μg/ml的皮试液。 取头孢曲松皮试液(含50 μg/ml)作皮内注射,观察20分钟后,判断试验结果。 4、氨苄青霉素皮试液的配制 0.5g/瓶加等渗盐水至2ml -→250mg/ml 取0.1ml加等渗盐水至1ml -→25mg/ml 取0.1ml加等渗盐水至1ml -→ml 取0.1ml加等渗盐水至1ml -→ml 取氨苄青霉素皮试液(含25μg)作皮内注射,观察20分钟后,判断试验结 果。 5、破伤风抗毒素皮试液的配制 (1)每支安瓿内含TAT1500U,加生理盐水至1ml(因原液只有) (2)取加生理盐水充分摇匀,每ml含150u. 取(含15U)于前臂掌侧下段局部消毒后皮内注射,20min观察局部反应。 6.门冬酰胺酶①皮试液的配制 a.取门冬酸胺酶1000u加生理盐水lml溶 解后即成1000u/ml. b.取上液0.lml加生理盐水稀释至lml即成。 ②皮试方法及结果观察取皮试液0.lml在前臂作皮内试验,结果判断同青 霉素皮试。阳性者不可田。 ③注意事项 a.不同药厂、不同批号产品的纯度和过敏反应均有一差异,使 用时必须慎重。 b.有过敏史的病人应十分小心或不用。 (二)头孢类药物皮试液配制方法 原则:头孢类药物皮试液浓度为每ml含300-500ug(每含30-50ug),因此溶解药物时每溶解几毫升,共稀释三次,第二次稀释后就余零点几毫升,第三次 再稀释至1ml即可。 1、头孢类药物如:头孢拉定瓶、头孢呋新钠瓶、头孢地嗪钠瓶、头孢派酮钠

各种皮试液的配制方法

各种皮试液的配制方法 专业 2009-07-02 22:59 阅读203 评论0 字号:大大中中小小 一、青霉素皮试药液配制方法: 青霉素1瓶80万u,注入4ml生理盐水,则1ml含20u 取0. 1ml,加生理盐水至1ml,则1ml含2万u 取0. 1ml,加生理盐水至1ml,则1ml含2000u 取0. 25ml,加生理盐水至1ml,则1ml含500u,即成青霉素皮试液。皮内注射0. 1ml含50 u 二、破伤风抗毒素(TAT)皮试液的配制方法: TAT 每支1500IU约0.7 ml,加水至1ml,抽取0. 1ml,加生理盐水稀释至1ml(含150IU),皮内注射0. 1ml 含15IU。 三、细胞色素C皮试液的配制方法: 细胞色素C 每支2 ml含15mg,取0. 1ml,加生理盐水至1ml(1ml含0.75 mg), 皮内注射0. 1ml含0.075 mg。 四、先锋酶素皮试液的配制方法: 先锋酶素0.5 g加生理盐水2 ml,则1ml含250mg 取0.12ml,加生理盐水至1ml,则1ml含30mg 取0. 1ml,加生理盐水至1ml,则1ml含3mg(3000 ug) 取0. 1ml,加生理盐水至1ml,则1ml含300 ug 皮内注射0. 1ml含30ug 五、长效青霉素皮试液的配制方法; 长效青霉素1瓶120万u,注入4ml生理盐水,则1ml含30万u 8[<1?[b 取0. 1ml l含3万u,作画痕试验。

六、碘过敏试验: 30%泛影葡胺1ml缓慢静脉注射 七、链霉素皮试液的配制方法: 链霉素1瓶1g(100万u),加生理盐水至3. 5ml溶解后为4ml,则1ml含0.25 g(25万u) 取0. 1ml,加生理盐水至1ml,则1ml含2. 5万u 取0. 1ml,加生理盐水至1ml,则1ml含2500u 皮内注射0. 1ml含250万 八、精制抗狂犬病血清皮试液的配制方法: 抗血清每支400IU, 取0. 1ml,加生理盐水0·9ml,皮内注射0. 05ml,观察30分钟。 九、须做皮试药: 青霉素新青2 哌拉西林钠安络欣安苄青霉素阿乐欣凯兰欣先舒元欣(奥格门订)联邦他唑仙怕得灵舒敌诺塞林 . 再补充几个现在临床常用的。中国药典未发布的所以仅供参考。 头孢唑林钠 0.5g头孢唑林钠,加生理盐水2ml,取0.1ml,加至1ml,再取0.1ml ,加至1ml,再取0.1ml,加至1ml,即可,注射0.1ml。 头孢菌素类皮试液的配制: 用原药做试验,具体配制方法根据剂量不同,稀释方法也不同,但最后的含量一致,为300ug/ml 1g+5ml 200mg/ml 取上液0.1ml加至1 ml 20mg/ml 取上液0.1ml加至1 ml 2000ug/ml

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