2012学生用动物解剖生理实验讲义(1)

解剖学实验部分（12学时）

实验一骨、骨连接及肌肉的解剖（4学时）

一、实验目的与要求

1．掌握人体的标准姿势、轴、面和方位术语，躯干骨、颅骨以及四肢骨的名称、位置排列、结构及连接方式。

2．掌握头颈部、躯干及四肢各肌群的位置、形态结构和功能。

3．了解肌的命名原则和辅助结构。

二、实验用品

1．解剖模型 2．挂图各相关内容挂图

三、实验内容

（一）骨

1．中轴骨颈椎7块；胸椎12块；腰椎5块；骶骨1块；尾骨1块；完整的骨性脊柱；肋骨12对；完整的骨性胸廓；

2．附肢骨骼锁骨、肩胛骨、肱骨、桡骨、尺骨、完整手骨标本；髋骨、完整骨盆标本、股骨、胫骨、腓骨、完整足骨标本。

（二）骨连接

1. 中轴骨连结躯干骨和胸廓的连接 2．颅骨的链接

3．附肢骨的连接上肢骨和下肢骨的连接

（三）肌肉

1．面肌（枕额肌、颊肌、眼口轮匝肌等）；咀嚼肌(示翼内肌、翼外肌、颞肌、咬肌)

2．全身半边浅层肌（示胸锁乳突肌、胸大肌、前锯肌、腹外斜肌、斜方肌、背阔肌、三角肌、肱二头肌、肱三头肌、臀大肌、缝匠肌、股四头肌、股二头肌、小腿三头肌、颈部三角、腋窝和肘窝、股三角、等）3．颈肌（示舌骨上、下肌群、颈阔肌等）

四、注意事项

1.人体全身骨架为穿制而成的骨骼标本，注意不要在骨与骨的连接处暴力扭转，造成断裂。

2. 不要过分用力拉扯肌肉。

3. 注意肌肉跨越关节的关系，学会分析重要肌的作用。同时，学习骨骼肌要和活体结合起来，识别重要的肌性标志。

五、作业绘制长骨及肱二头肌。

实验二消化和呼吸系统的解剖（4学时）

一、实验目的与要求

1．掌握消化管及消化腺的位置、分部、形态、结构和功能。

2．掌握呼吸道和肺的位置、形态、结构和功能。

二、实验用品

1．解剖模型 2．挂图各相关内容挂图

三、实验内容

（一）消化系统的解剖一口腔

1．口腔各壁

在活体上利用压舌板观察口腔的前壁、外侧壁、上壁和口底。注意辨认腭帆、腭垂、腭舌弓、腭咽弓和腭扁桃体。

腭帆为软腭后部游离的部分，腭垂为腭帆后缘中央向后下方的突起。自腭帆向两侧延伸的两条弓形皱襞，前面的称腭舌弓，后面的腭咽弓，二者之间的隐窝称扁桃体窝，腭扁桃体位于其间。

2. 舌及口底

在活体上观察舌背面：在舌前2/3与舌后1/3交界处可见“∧”的界沟,沟的尖端有舌盲孔,沿界沟前方排列有7-11个轮廓乳头,呈圆形突起,周围有环状沟。舌根部粘膜内有淋巴组织使其表面出现许多大小不等的泡状突起,称舌扁桃体。

3. 牙在活体上观察。

二咽

1. 咽的分部及各部重要结构

在头颈部正中矢状切面上观察。咽为一上宽下窄、前后略扁的肌性管道，上起颅底，下至第6颈椎下缘续食管。软腭水平以上为鼻咽，会厌水平以下为喉咽，中段为口咽。各部前壁均不完整。

鼻咽侧壁上的圆拱形隆起为咽鼓管圆枕，其下方的开口称咽鼓管咽口，圆枕后方的隐窝称咽隐窝。

喉咽部喉口两侧各有一深陷的梨状隐窝，注意其与甲状软骨的关系。

2. 咽的淋巴组织

在鼻咽的侧壁有咽鼓管扁桃体，后壁有咽扁桃体；口咽有腭扁桃体、舌扁桃体；它们都有围绕在口咽和鼻咽的周围呈环形分布，有重要的防御功能，称之为咽淋巴环。

三食管

在完整模型上观察食管各部，注意其行程和各部的毗邻关系。在颈段行于气管和第7颈椎之间。在胸段首先位于气管和脊柱之间，而后从主动脉弓、左主支气管后方通过，再在左心房后方向左下方斜跨胸主动脉，在第10胸椎水平穿膈肌。腹段很短续胃贲门。食管的三个狭窄除穿膈肌处较明显外，其余都不明显。

四胃

1．胃的位置、形态及分部

在完整模型上观察。大部分位于左季肋区，小部分位于腹上区。仅胃的前壁小部分与腹前壁相邻，胃小弯邻肝左叶，胃大弯邻膈、脾脏，胃后壁邻胰腺。利用游离胃标本观察。胃小弯为其右侧缘或上缘，胃大弯为其左侧缘或下缘。入口处为贲门，用手捏因无明显括约肌而较柔软；出口处为幽门，有较厚的环形括约肌，捏之较硬。

近贲门处为胃的贲门部；自贲门水平向上突出的部分为胃底部；中间大部分为胃体部；近幽门的部分为幽门部，幽门部左侧较为扩大称幽门窦，右侧呈管状为幽门管。各部并无明显分界，但组织学上有结构差异。

角切迹为小弯侧的最低点急弯处，可认为是胃体部与幽门部的分界标志。

五肝、胰

1.用离体的肝模型配合观察。外形及分叶：肝脏是一不规则的楔形实质器官。它的上面接触膈肌称膈面，下面与其他脏器接触称脏面。在脏面的中部有几个沟和窝，它们大致排列成“H”形，包含二个纵沟一个横沟。左纵沟的前半含有由脐静脉闭锁而成的肝圆韧带（即脐静脉索，向前离开此沟后即被包裹在镰状韧带的游离缘中，连脐），左纵沟的后半含有静脉导管闭锁而成的静脉韧带。右纵沟的前半，由一长圆形浅窝形成称为胆囊窝，后半由一深而长的窝构成，称为腔静脉沟，内有下腔静脉。二纵沟之间的横沟称为肝门，是肝固有动脉左、右支、肝左管、肝右管、肝门静脉左、右支以及神经和淋巴管进出的门户，这些进出肝门的结构称肝蒂。由此“H”形沟裂，可以把肝脏分成四叶，右纵沟右侧的区域为右叶，左纵沟左侧的区域为左叶。左右纵沟之间，横沟以前的区域称方叶；左右纵沟之间，横沟以后的区域叫尾状叶。

2.肝外胆道：胆囊位于胆囊窝内，呈梨形。胆囊管弯曲，向下行至小网膜右缘内，与肝总管会合成胆总管。循胆总管向肝门方面追索，可见肝总管分左、右肝管入肝；向下方追索，可见胆总管经十二指肠降部与胰头之间，在十二指肠降部中点斜穿肠壁开口于十二指肠大乳头。

（二）呼吸系统的解剖

一鼻

鼻腔：取头部正矢状切面标本观察，可见鼻腔由鼻中隔分成左右两腔，每个鼻腔又分为前部（鼻前庭）、后部（固有鼻腔）二部。

1．鼻前庭——位于鼻腔前下方鼻翼内面，内表面为皮肤，生有粗短的鼻毛。

2．固有鼻腔——具有上、下、内、外四壁，全衬有厚而富有血管的粘膜。

其中上壁狭长呈拱形，上邻颅前窝。下壁宽平即口腔上壁。内侧壁即鼻中隔。外侧壁结构最复杂也最重要，应仔细观察。取头部正中矢状切面的湿标本观察，可见外侧壁表面有三片结构，向内下突出，前后方向平行排列，由下而上为下鼻甲、中鼻甲、上鼻甲。每鼻甲的下方有前后纵行的空隙称为鼻道，上鼻甲的下方为上鼻道，中鼻甲下方为中鼻道，下鼻甲下方为下鼻道。在上鼻甲后上方的小陷凹名蝶筛隐窝。蝶筛隐窝及各鼻道内分别有鼻旁窦和鼻泪管的开口。除蝶窦开口于蝶筛隐窝，后筛窦开口于上鼻道外，其余鼻旁窦均开口于中鼻道。

二喉

喉的软骨

（一）甲状软骨：为喉所有软骨中最大的一块，组成喉的前、外侧壁，由两个对称四边形软骨板构成。二板前缘于正中线上约以直角相连形成前角，前角上端向前突出叫喉结，可在体表模到，成年男性特别突出。前角上缘二板之间的凹陷叫甲状软骨切迹。二板后缘游离，向上向下各形成一突起叫上角和下角。下角与环状软骨形成关节。

（二）环状软骨——形如指环，位于甲状软骨的下方。环状软骨的后部宽大名环状软骨板，前部狭窄名环状软骨弓。

（三）杓状软骨——左右各一，位于环状软骨板上缘的两侧，形如三角锥状，尖向上，底向下。底为凹面与环状软骨板关连，底有向前、向外二突起，外侧突为肌突，前突为声带突。

（四）会厌软骨——形如树叶，下部细长，上部宽阔，下端贴附在甲状软骨前角的内面，前面稍隆凸，后面凹陷对向喉腔。

喉腔在喉口与前庭裂平面之间的部分叫喉前庭。前庭裂平面至声门裂平面之间部分叫喉中间腔，其两侧突入前庭襞与声襞之间的隐窝叫喉室。声襞以下为声门下腔，接气管。

三气管、支气管及肺

气管为一软骨膜性管，管的后面扁平与食管紧邻，起自环状软骨下缘（平第6颈椎下缘处）下行至第4和第5胸椎体交界处（平胸骨角水平）分为左、右主支气管进入两肺，右侧主支气管较陡直而粗短。左主支气管较平斜而细长。

肺为呼吸系的主要器官，左右各一，位于胸腔内，两肺间隔以纵隔。在取下的肺标本上观察，首先区别左右肺。左肺为二叶，右肺为三叶，左肺前缘有心切迹。

其次观察肺的形态，肺有一尖，一底，三缘和二面。

肺尖：圆锥形。前面高出锁骨内侧1/3上方2cm-3cm。肺底：位于膈肌上面，向上隐入又名膈面。肋面：对向肋及胸骨。内侧面亦称纵隔面对向纵隔，此面中间的凹隐称肺门。

前缘为肋面与纵隔面前部之间，左肺的前缘在第四肋以下向外倾斜，形成肺的心切迹。

下缘为围绕肺底的边缘。后缘为内侧面与肋面后部之间，圆钝而不明显。

两肺均可见自后上斜向前下的斜裂。右肺另有一自斜裂水平向前达肺前缘的水平裂。左肺斜裂前上为上叶，后下是下叶。右肺由斜裂和右肺副裂划分为上叶、中叶和下叶。

肺根与肺门：进出肺的结构，包括支气管、肺动脉、肺静脉、支气管动脉、支气管静脉、神经和淋巴管等，叫肺根。这些结构出入肺的地方叫肺门。

五、作业绘制胃及肺的形态。

实验三泌尿、脉管系统的解剖及人体胚胎的发育过程（4学时）

一、实验目的与要求：

1．掌握肾的位置、形态、结构和功能。

2．掌握心脏、胸腺和脾的位置、分部、形态、结构和功能。

3．了解人体胚胎发育的过程。

二、实验用品

1．解剖模型2．挂图各相关内容挂图

三、实验内容

（一）泌尿系统的解剖（此部分如能再具体些则更好）

1．肾脏模型的观察。2．输尿管的观察。

（二）脉管系统的解剖

1．心的位置、外形

约2／3在身体正中线的左侧，1／3在正中线的右侧。心似倒置的圆锥体，心尖钝圆，朝向左前下方，心底较宽与大血管相连，朝向右后上方，故心的长轴是倾斜的，约与正中矢状面成45°角。

将离体心放在解剖位置上进行观察，心除一尖一底外，还有两面三缘。前面在胸骨体和肋软骨的后方，称胸肋面。后下面贴附在膈上，称膈面。右缘圆钝而近垂直。左缘钝而斜。前下缘较锐，位置水平。左缘和前下缘在心尖处相接。

2．心腔

心分为右心房、右心室、左心房、左心室四部分。

3．心的构造

（1）心纤维骨骼

（2）房间隔：自右心房观察房间隔，可见在下腔静脉入口的左上方，有一椭圆形的浅凹，名卵圆窝。

（3）室间隔：

（三）人体胚胎发育过程（此部分如能再具体些则更好）

1．逐个观察胚胎大小。（是胚胎发育过程的观察，还是胚胎大小的观察？）

2．双胎、多胎。

四、作业绘制肾脏及心脏形态。生理实验部分

实验一坐骨神经腓肠肌标本的制备

一、实验目的

1.学习生理学实验基本的组织分离技术；

2.学习和掌握制备蛙类坐骨神经-腓肠肌标本的方法；

3.了解刺激的种类。

二、实验原理

蛙类的一些基本生命活动和生理功能与恒温动物相似，若将蛙的神经-肌肉标本放在任氏液中，其兴奋性在几个小

时内可保持不变。若给神经或肌肉一次适宜刺激，可在神经和肌肉上产生一个动作电位，肉眼可看到肌肉收缩和舒张一次，表明神经和肌肉产生了一次兴奋。在生理学实验中常利用蛙的坐骨神经-腓肠肌标本研究神经、肌肉的兴奋、兴奋性；刺激与反应的规律和肌肉收缩的特征等，制备坐骨神经腓肠肌标本是生理学实验的一项基本操作技术。

三、实验仪器与材料

蟾蜍或蛙、任氏液、食盐、1% H2SO4滤纸、普通剪刀、手术剪、眼科镊（或尖头无齿镊）、金属探针（解剖针）、玻璃分针、蛙板（或玻璃板）、蛙钉、细线、培养皿、滴管、锌铜弓（或电子刺激器）、酒精灯。

四、方法与步骤

1．破坏脑、脊髓取蟾蜍一只，用自来水冲洗干净（勿用手搓）。左手握住蟾蜍，使其背部向上，用大拇指或食指使头前俯(以头颅后缘稍稍拱起为宜)。右手持探针由头颅后缘的枕骨大孔处垂直刺入椎管（图1-1）。然后将探针改向前刺入颅腔内，左右搅动探针2～3次，捣毁脑组织。如果探针在颅腔内，应有碰及颅底骨的感觉。再将探针退回至枕骨大孔，使针尖转向尾端，捻动探针使其刺入椎管，捣毁脊髓。此时应注意将脊柱保持平直。针进入椎管的感觉是，进针时有一定的阻力，而且随着进针蟾蜍出现下肢僵直或尿失禁现象。若脑和脊髓破坏完全，蟾蜍下颌呼吸运动消失,四肢完全松软，失去一切反射活动。此时可将探针反向捻动，退出椎管。如蟾蜍仍有反射活动，表示脑和脊髓破坏不彻底，应重新破坏。

2．剪除躯干上部、皮肤及内脏用左手捏住蟾蜍的脊柱，右手持粗剪刀在前肢腋窝处连同皮肤、腹肌、脊柱一并剪断，然后左手握住蟾蜍的后肢，紧靠脊柱两侧将腹壁及内脏剪去(注意避开坐骨神经),并剪去肛门周围的皮肤，留下脊柱和后肢。

3．剥皮一只手捏住脊柱的断端（注意不要捏住脊柱两侧的神经），另一只手捏住其皮肤的边缘,向下剥去全部后肢的皮肤（图1-2）。将标本放在干净的任氏液中。将手及使用过的探针、剪刀全部冲洗干净。

图1-1 破坏蟾蜍脑脊髓图1-2 横断蟾蜍脊柱

4．分离两腿用鑷子取出标本,左手捏住脊柱断端,使标本背面朝上，右手用粗剪刀剪去突出的骶骨（也可不进行此步）。然后将脊柱腹侧向上，左手的两个手指捏住脊柱断端的横突，另一手指将两后肢担起，形成一个平面。此时用粗剪刀沿

正中线将脊柱盆骨分为两半 (注意，勿伤坐骨神经)。将一半后肢标本置于盛有任氏液中备用,另一半放在蛙板上进行下列操作。 5．认蛙后肢的主要肌肉，蛙类的坐骨神经是由第7、8、9对脊神经从相对应的椎间孔穿出汇合而成，行走于脊柱的两侧，到尾端（肛门处）绕过坐骨联合，到达后肢背侧，行走于梨状肌下的股二头肌和半膜肌之间的坐骨神经沟内，到达膝关节腘窝处有分支进入腓肠肌（图1-3）。

6．游离坐骨神经和腓肠肌用蛙钉或左手的两个手指将标本绷直、固定。先在腹腔面用玻璃分针沿脊柱游离坐骨神经,然后在标本的背侧于股二头肌与半膜肌的肌肉缝内将坐骨神经与周边的结缔组织分离直到腘窝，但不要伤及神经，其分支待以后用手术剪剪断。

同样用玻璃分针将腓肠肌与其下的结缔组织分离并在其跟腱处穿线、结扎。

7．剪去其它不用的组织操作从脊柱向小腿方向进行。

剪去多余的脊柱和肌肉将后肢标本腹面向上，将坐骨神经连同 2～3节脊椎用粗剪刀从脊柱上剪下来。再将标本背面向上，用镊子轻轻提起脊椎，自上而下剪去支配腓肠肌以外的神经分支，直至腘窝（图1-4(A)），并搭放在腓肠肌上。沿膝关节剪去股骨周围的

图1-3

肌肉，并将股骨刮净，用粗剪刀剪去股骨上端的1/3（保留2/3），制成坐骨神经-小腿的标本。

完成坐骨神经腓肠肌标本将脊椎和坐骨神经从腓肠肌上取下，提起腓肠肌的结扎

线剪断跟腱。用粗剪剪去膝关节以下部位，便制成了坐骨神经-腓肠肌标本（图1-4(B)）。

8．检验标本用沾有任氏液的锌铜弓触及一下（或电刺激刺激）坐骨神经或用鑷子夹持坐骨神经中枢端,如腓肠肌发生迅速而明显的收缩，说明标本的兴奋性良好。标本浸入盛有任氏液的培养皿中备用。然后再依次用热玻棒、食盐（或1% H2SO4滤纸）刺激坐骨神经中枢端（或肌肉），观察肌肉收缩有何变化? 如果放上食盐肌肉无动静,用任氏液将盐冲洗掉,再观察冲洗过程中肌肉收缩有何变化?

图 1-4 分离坐骨神经坐骨神经腓肠肌标本

五、注意事项

1.避免蟾蜍体表毒液和血液污染标本，压挤、损伤和用力牵拉标本，不可用金属器械触碰神经干。

2.在操作过程中，应给神经和肌肉滴加任氏液，防止表面干燥，以免影响标本的兴奋性。

3.标本制成后须放在任氏液中浸泡数分钟,使标本兴奋性稳定,再开始实验效果会较好。

4.热玻棒的温度防止过高,以免烫伤标本。

六、思考题

1．剥去皮肤的后肢能用自来水冲洗吗?为什么?

2．金属器械碰压或损伤神经与腓肠肌，可能引起哪些不良后果?

3．如何保持标本的机能正常?

4．用锌铜弓检验标本兴奋性时，在神经和肌肉内部发生了哪些事件？

5．刺激有几种形式?如何解释对食盐的不同处理对肌肉收缩的影响?

试验二血红蛋白含量的测定及血细胞计数

血红蛋白含量的测定

一、实验目的

学会测定血红蛋白含量的原理和方法。

二、实验原理

血红蛋白是一种结合蛋白质。当受试者的全血与氰化高铁血红蛋白稀释剂混合后，将两价铁血红蛋白氧化成三价铁血红蛋白，再与氰化物结合形成稳定的棕红色的氰化高铁血红蛋白。氰化高铁血红蛋白是一种稳定的色素，其浓度与吸光度直接成比例。因此在光电比色计上即可测定血红蛋白浓度。

三、实验仪器与材料

75%酒精棉球、氰化高铁血红蛋白标准液、氰化高铁血红蛋白稀释剂、HB1002血红蛋白仪、一次性采血针及吸管

四、实验方法与步骤

1.准备工作

开机预热30分钟。

调零：按下“测试”按钮，重复三次吸入蒸馏水调整“调零”旋钮，使读数显示为“000”，然后弹出“测试”按钮。

校正：按下“测试”按钮，吸入已知的氰化高铁血红蛋白标准液，根据显示的刻度，调整“校正”旋钮，然后弹出“测试”按钮。

2.采血

消毒→快速扎针→吸取20微升全血→与氰化高铁血红蛋白稀释剂混匀→静置5分钟后待测。

3.测试

将测试样品放入吸管下→按下“测试”按钮→仪器显示出的数值即为人体血红蛋白数值。

正常成年男子：130—170g/L；女子：120—150g/L。

五、注意事项

实验开始前先对仪器进行校正后再进行测定，测定样品较多时中间需进行校正，测试指标完成后用蒸馏水对仪器进行冲洗。

六、思考题

1.血红蛋白含量的测定原理是什么？

2.血液中血红蛋白含量的多少是否能反映机体的健康状况？为什么？

3.血红蛋白含量的变化和红细胞数目的增减是否一定呈线性平行关系？为什么？

红细胞计数

一、实验目的

学习红细胞的人工计数方法。

二、实验原理

将一定量的血液经一定倍数的等渗盐水稀释后，置于血细胞计数盘的计数室内，计数一定容积溶液内的红细胞，然后再推算出1mm3或1L血液内的红细胞数。

三、实验仪器与材料

家兔、红细胞稀释液、75%酒精棉球、血细胞计数板、一次性定量毛细取血管（10μl、20μl）、移液管（1ml、2ml、5ml）、滴管、小试管、显微镜、一次性刺血针、玻璃棒。

四、实验方法与步骤

1． 红细胞稀释液的配制（如无下述稀释液时，也可用新鲜配制的等渗盐水代用）

NaCL 0.5g Na 2SO 410H 2O 2.5g HgCL 2 0.25g 蒸馏水 加至100ml 2．采血及稀释

用2ml 移液管吸取1.98ml 红细胞稀释液并放入小试管中备用

常规消毒兔耳耳尖部的耳缘静脉采血部位，待耳缘静脉充血后，用刺血针刺破血管，让血液自然流出，擦去第一滴血液，用一次性毛细取血管准确吸取血液10μl ，擦净管外沾染之血，将毛细取血管插入放有上述盛有稀释液的试管底部，轻轻吹出血液，并用上清液清洗毛细吸血管2～3次，轻轻摇动试管1～2min ，使血液与稀释液充分混匀。 3．血细胞计数板

血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的。玻片中有四条下凹的槽。构成三个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面，刻有一个方格网如图2.2.1。方格网上刻有9个大方格，每一大方格的长和宽各为1mm ，深度为0.1mm ，盖上盖玻片后，载玻片与盖玻片之间的高度为0．1mm ，所以计数室的容积为0．1mm 3。中央大方格被划分为25个中方格，每个中方格又得16个小方格，位于正中及四角5个中方格是红细胞计数区域。四角的4个大方格是白细胞计数区域，用单线划分为16个中方格。如图2.2.2将盖玻片放入计数板中央，用洁净玻璃棒蘸取少量已稀释混匀后的血细胞悬浮液，于盖玻片边缘一次性滴入计数室内，使之灌满，静置2～3min 后，待细胞下沉后进行计数。计数血小

板的血细胞悬液应静置15min 。滴入计数室的细胞悬液不能过多或过少。在计数红细胞、白细胞和血小板时，可各使用一个计数室。

图2.2.1

图2.2.2

4．计数方法

用低倍镜巡视计数室内被计数的特定血细胞分布是否均匀，分布均匀者方可计数。用高倍镜依次计数中央大方格内四角和正中5个中方格内的红细胞，按数上不数下，数左不数右的原则进行目视计数。正常数值范围内，两次红细胞计数相差不得超过5%。

5．计算方法：红细胞数/L ＝5个中方格内红细胞数×50×200×106 五、注意事项

1．充池前应将细胞悬液充分混匀，但要防止因剧烈震荡而破坏红细胞。将细胞悬液充入计数池时要一次完成，不能产生满溢、气泡或充池不足的现象。

2

．红细胞在计数池中若分布不均要重新充池计数。大小方格内压线细胞的计数遵循数上不数下、数左不数右的原则，

避免多数或漏数。

六、思考题

1．小结在该项操作过程中，那些因素可能会影响血细胞计数的准确性。

2．各种血细胞的基本功能。

表 2-1 血细胞计数室各计数区的计数对象、范围和单位换算

出血时间和凝血时间的测定

实验目的会做出血时间与凝血时间的测定，能评价出血时间和凝血时间是否正常。

实验用品采血针、75%酒精棉球、干棉球、钟表、滤纸、玻片及大头针等。

实验步操

1）出血时间测定以酒精棉球消毒耳垂或指端后，用消毒过的采血针刺人2~3mm深，让血自然流出，从血液开始流出记下时间，并每隔半分钟用滤纸轻触血滴吸干流出的血，每次吸血要更换滤纸上的位置，使滤纸上的血点依次排列，直到无血可吸为止。计算开始出血到止血的时间，或以滤纸上血点数除以2即为出血时间。

2）凝血时间测定同上操作，刺破耳垂或指端，用玻片接下自然流出的第一滴血，记下时间。然后每隔半分钟用大头针尖挑血一次，直至挑起细纤维血丝止，即表示凝血开始。计算开始流血至挑起纤维状血丝的时间，即为凝血时间。

注意事项

(1)采血针应锐利，深度适宜，勿使组织损伤较严重，血中混入组织液较多，会使凝血时间缩短。

(2)针尖挑动血液时应朝一个方向横穿直挑，勿过多挑动，否则易破坏纤维蛋白网状结构，造成不凝的假象。

(3)应选伤口流出的第1滴血测定，不能挤压伤口，否则血中易混人组织液，凝血时间缩短。

结果分析

(1) 将实验结果作以下记录:

被测者姓名，性别，室温(℃) ，出血时间，凝血时间。

（2）讨论测定出血时间与凝血时间的临床意义。

ABO血型鉴定

实验目的学会鉴定ABO血型的方法，加深理解血型分型的依据以及鉴定的意义。

实验用品显微镜，抗A和抗B标准血清，生理盐水，采血用具，双凹玻片，玻璃蜡笔，75%酒精棉球，干棉球，牙签。

实验步骤

(1)取干净玻片一块，用玻璃蜡笔在两端分别标明抗A、抗B字样。

(2)在抗A端、抗B端中央凹槽处分别滴抗A和抗B标准血清各1滴，注意不可混淆。

(3)消毒耳垂或指端后，用消毒针刺破皮肤，用两根牙签各血液一滴，分别加人抗A和抗B标准血清中，并用牙签使其充分混匀。

(4)放置10~l5min后，用肉眼观察有无凝集现象，然后根据观察结果判定受检者的血型。

注意事项

(1)用牙签混匀时，严防两种血清接触。

(2)肉眼不能确定有无凝集现象时，应在低倍显微镜下观察。

(3)红细胞混悬液和标准血清均须新鲜，否则可产生假凝集。

结果分析

(1)将实验结果作以下记录:

受检者姓名，性别，室温（℃），抗A标准血清中，抗B标准血清中，血型判定为型。

(2)讨论为什么输同型血还必须做交叉配血试验。

实验三心音的听诊及微循环的观察

心音的听诊

一、实验目的

学习心音听诊的方法，识别第一心音与第二心音，加深理解正常心音的特点及产生机理。

二、实验原理

在每一心动周期中，心脏节律性的收缩和舒张引起的振动（包括各瓣膜的关闭，心肌收缩和血流等因素）所产生的声音即为心音。这些振动波可传导到心前区的胸壁上，用听诊器在胸壁上可直接听取到。在每一心动周期内可以听到两个心音，即第一心音和第二心音。

第一心音：音调较低（音频为25～40次/s）而历时较长（0.12s），声音较响，是由房室瓣关闭和心室肌收缩的标志，其响度和性质变化，常可反映心室肌收缩强、弱和房室瓣膜的机能状态。第二心音：声调较高（音频为50次/s）而历

时较短（0.08s），较清脆，主要是由半月瓣关闭产生振动造成的。由于半月瓣关闭与心室舒张开始几乎同时发生，因此，第二心音是心室舒张的标志，其响度常可反映动脉压的高低。通过心音听诊可计数心率、了解心跳的节律和强弱等情况。

三、实验仪器与材料

人、听诊器

四、方法与步骤

1．受试者安静端坐，胸部裸露，检查者坐受试者对面。

2．检查者带好听诊器，注意听诊器的耳具应与外耳道开口方向一致（向前）。以右手的食指、拇指和中指轻持听诊器胸具紧贴于胸部皮肤上，依次由左房室瓣听诊区→主动脉瓣听诊区→肺动脉瓣听诊区→右房室瓣听诊区，仔细听取心音，注意区分两心音。如难以区分两心音，可同时触诊心尖搏动或颈动脉脉搏，此时出现的心音即为第一心音。比较不同部位的两个心音的强弱。（正常心音听诊口诀：第一心音低而长，心尖部位最响亮。一二之间间隔短，心尖搏动同时相。第二心音高而短，心底部位最响亮。二一之间间隔长，心尖搏动反时相。）

①三尖瓣听诊区：胸骨右缘第四肋间或胸骨剑突下。

②主动脉瓣听诊区：胸骨右缘第二肋间。

③主动脉瓣第二听诊区：胸骨左缘第三肋间。

④肺动脉瓣听诊区：胸骨左缘第二肋间。

⑤二尖瓣听诊区：在第五肋间与左锁中线交点的稍内侧（心尖搏动处）

五、注意事项

1．实验室内必须保持安静，以利听诊。

2．听诊器耳端应与外耳道方向一致，橡皮管不可交叉扭结，不可与其他物体摩擦，以免发生摩擦音，影响听诊。

3.如呼吸音影响听诊，可令受试者暂停呼吸片刻。

六、思考题

1.第一心音和第二心音是怎样形成的？它们有何临床意义？

2.各瓣膜听诊区所听到的心音有何不同？为什么？

微循环的观察

一、实验目的

1．了解微循环各组成部分的结构和血流特点。

2．观察某些药物对血管舒、缩活动的影响。

二、实验原理

微循环区是血液与组织液直接进行物质交换的场所，其血流情况可以借助于显微镜来观察。蟾蜍的肠系膜部位的组织薄，适合于直接观察微循环区血管的舒缩与血流情况。

动脉与小动脉的血流是从主干（比较大的血管）流向分支，即从肠系膜的中央流向肠管的。其特点是流速快、有搏动，红细胞在血管中有轴流（血细胞在血管中央流动）现象。

毛细血管透明，近乎无色，最细的毛细血管在高倍镜下可见到单个红细胞流动，速度虽有快、慢的差异，但流速均匀，无搏动，无轴流现象。

小静脉与静脉的血流方向均为从肠管流向肠系膜的中央、由分支汇流入主干。血管愈粗则红色愈浓，速度愈快，但无搏动，也无轴流现象。

三、实验仪器与材料

蛙或蟾蜍、显微镜、蛙针、大头针、外科剪刀、镊子、解剖针、有孔蛙板、任氏液、0.01%肾上腺素、0.01%组织胺

四、实验方法与步骤

图4-8 蛙微循环

A. 显微镜下蛙肠系膜小血管

B. 显微镜下蛙蹼内小血管俯卧法观察血液循环

1．取一只蟾蜍或蛙，先用蛙针破坏蛙（或蟾蜍）的脑和脊髓。剖开腹腔拉出一段小肠，展开一片肠系膜，覆于蛙板的孔上，并用大头针将肠襻在蛙板上固定。然后在肠系膜上滴一滴任氏液，以免干燥。将蛙板放于显微镜的载物台上，使置有肠系膜的蛙板大孔对准接物镜，然后进行下述观察。

2．在低倍镜观察血液循环，识别动脉、静脉、小动脉、小静脉、毛细血管、动静脉吻合支及直捷通路等各类血管。3．在肠系膜或膀胱上滴几滴组织胺溶液，观察血流的变化。出现变化后立即用任氏液冲洗。

4．待血流恢复正常后，再滴几滴去肾上腺素溶液，观察血流的变化。

五、注意事项

1.肠系膜要展平，不能扭转，也不能拉太紧，更不能允许出血，否则都会造成血液循环的不正常。

2．实验过程中，要随时用任氏液湿润肠系膜，以防干燥。

3．若用蛙蹼作为观察标本，则难以观察到血管对药物的反应。

4．滴加各种溶液时不要污染显微镜。观察结束后，要将显微镜仔细擦拭干净。

六、思考题

1．滴加组织胺和肾上腺素对毛细血管的影响主要是通过什么途径引起的?结合休克的发生说明维持或调节微循环的正常因素是什么?

2．毛细血管内血流特点对物质交换有何影响?

3．为什么微循环各部分的血流快慢不同?

实验四呼吸运动的调节

一、实验目的

1．学习记录家兔呼吸运动的方法。

2．观察并分析肺牵张反射及不同因素对呼吸运动的影响。

二、实验原理

人体及高等动物的呼吸运动所以能持续地、节律性地进行，是由于体内调节机制的存在。体内、外的各种刺激，可以直接作用于中枢或不同部位的感受器，反射性地影响呼吸运动，以适应机体代谢的需要。肺的牵张反射参与呼吸节律的调节。

三、实验仪器与材料

家兔、20～25%氨基甲酸乙酯、生理盐水、3%乳酸溶液、兔手术台、哺乳动物手术器械一套、气管插管、张力传感器与滑轮或动物呼吸传感器、计算机采集系统、20ml与1ml注射器、橡皮管、CO2气袋、烧杯、棉线、纱布。

四、实验方法与步骤

1．动物准备

用20%（或25%）氨基甲酸乙酯（1g/kg）由耳缘静脉缓慢注入，待动物麻醉后仰卧，将四肢和头固定于手术台上。用毛剪剪去颈部的毛，沿颈部正中纵向切3～4cm长切口。分离气管并穿一棉线，在气管表面做一“⊥”形的切口，将气管插管向肺端插入气管并结扎固定。用组织钳将切口处皮肤拉开，暴露气管旁的软组织，即可见到位于气管旁的颈总动脉鞘，用玻璃分针分离出迷走神经（三根神经中的最粗者）和颈总动脉，分别在下面穿一线备用。同样方法分离对侧迷走神经和颈总动脉，穿线备用。手术完毕后用温生理盐水纱布覆盖手术野。

2．仪器连接与调试

用蛙心夹夹住胸腹部呼吸运动最明显处，蛙心夹另一端通过棉线与张力换能器相连，将张力换能器连接生物信号采集系统的输入端接口相连，进入生理学实验教学系统，选择“实验项目”中“呼吸运动的调节”模块，根据信号窗口中显示的波形，适当调定各实验参数以获得最佳的实验效果。

3．观察项目

（1）描记正常呼吸曲线并以其作为对照，注意观察其频率、节律和幅度，辨认曲线的呼气相和吸气相。(注意：下列每一实验项目前必须先等待呼吸曲线恢复正常)

（2）增加吸入气中CO

2将气管插管一端侧口夹闭，另一侧口与CO

2

气袋相通，观察呼吸运动有何变化，呼吸发生明显

变化后后应立即打开夹闭的侧管和移去CO

2

气袋，使呼吸恢复正常。

（3）增大无效腔把1.5m长的橡皮管连接于侧管上，兔通过这根长管进行呼吸，观察一段时间后呼吸运动有何变化，呼吸发生明显变化后立即去掉橡皮管，使其恢复正常。

（4）增大气道阻力夹闭气管插管的一侧管，另一侧用止血钳夹住一部分，增大气道阻力，观察呼吸运动的变化。（5）血中酸性物质增多时的效应由耳缘静脉注射3%乳酸2ml，观察呼吸运动的变化过程。

（6）肺牵张反射的观察和分析将吸入20ml空气的20ml注射器连入气管套一侧，记录正常呼吸曲线后，在吸气末，夹闭一侧气管套管，另一侧注入20ml 空气，使肺维持在扩张状态。实验后立即打开夹闭的侧管，待呼吸恢复正常后，于

呼气末，夹闭一侧气管套管，另一侧用注射器抽取肺内气体，使肺维持于萎缩状态。实验结束后，打开夹闭侧管。(注意:注气与抽气时间仅限于三个呼吸节律的时间,然后立即打开夹闭的侧管)

（7）同时结扎双侧迷走神经(两人同时操作,结扎一定要紧,务必阻断神经冲动的传导),记录结扎前后呼吸运动的变化。重复实验6，记录实验结果。

（8）迷走神经的作用描记一段对照呼吸曲线，先切断一侧迷走神经，观察呼吸运动有何变化，再切断另一侧迷走神经，呼吸运动有何变化，然后以不同刺激强度和频率刺激一侧迷走神经的中枢端和外周端，再观察呼吸运动的变化。五、实验结果与分析

六、注意事项

1．各项实验前，均需记录一段正常呼吸曲线，作为对照。

2．气管插管前一定注意对气管切口进行止血和气管内清理干净再进行插管。

3．经耳缘静脉注射乳酸时，要选择静脉远端，注意不要刺破静脉，以免乳酸外漏，引起动物挣扎躁动。

七、思考题

1．缺O2、PCO2升高和血中H+浓度升高对呼吸有什么影响？它们影响呼吸活动的机制有何异同之处？

2．迷走神经对维持正常节律性呼吸有何作用？

实验五胃肠运动的直接观察和离体小肠平滑肌的生理特性

离体小肠平滑肌的生理特性

一、实验目的

1．学习离体肠段平滑肌的实验方法。

2．了解肠段平滑肌的生理特性。

二、实验原理

哺乳动物消化管平滑肌具有肌组织共有的特性，如兴奋性、传导性和收缩性等。但消化管平滑肌又有其特点，即兴奋性较低，收缩缓慢，富有伸展性，具有紧张性、自动节律性，对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等。小肠平滑肌在体内受中枢神经系统和体液因素的调节，离体肠段虽然失去外来神经的支配，但肠壁神经丛仍存在，在适宜的条件下，仍能保持平滑肌收缩的特性及肠壁神经丛的作用。将离体组织器官置于模拟体内环境的溶液中，可在一定时间内保持其功能。

三、实验仪器与材料

兔、台氏液、肾上腺素、乙酰胆碱、阿托品针剂、1mol/L NaOH溶液、lmol/L HCl溶液、2%CaCl2溶液。万能支架、双凹夹、恒温平滑肌槽、烧杯、张力传感器，计算机采集系统、温度计、棉线、长滴管、注射器、纱布。

四、实验方法与步骤

1．实验材料准备用木槌猛击兔头枕部，使其昏迷或沿家兔耳缘静脉注射空气，令其窒息死亡。立即剖开腹腔，在胃幽门与十二指肠交界处，快速取长20～30cm的肠管，剪去肠系膜后置于38℃左右台氏液中，用注射器将肠内容物冲洗干净。将洗净的肠管剪成2-3cm小段，每段两端各系一条线，置于38℃左右的台氏液中备用。

2．仪器安装与调试恒温水浴锅控制加热，恒温工作点定在38℃。将小肠段的一端与通气管相连，一端与张力换能器相连。适当调节换能器的高度，使其与标本之间松紧度合适。此相连的线必需垂直，并且不能与浴槽壁接触，避免摩擦。控制通气量，使氧气从通气管前端呈单个而不是成串逸出。

3．实验观察

3.1温度的影响将浴槽内台氏液放出，注入25℃台氏液，观察平滑肌收缩有何改变，当效应明显后再换入38℃台氏液，持续一段时间后，再换入42℃台氏液，观察收缩活动的变化（亦可根据室温的具体情况选做其中的一项）。

3.2待标本稳定后，记录小肠平滑肌收缩的对照曲线。

3.3乙酰胆碱的作用用滴管吸入0.01%乙酰胆碱向灌流浴槽内滴1～2滴。观察到小肠平滑肌明显变化后，立即更换台氏液，并用新鲜台氏液反复冲洗，以洗涤或稀释残留的乙酰胆碱，使之达到无效浓度，待小肠运动恢复正常后进行下一项实验。

3.4肾上腺素的作用同上述方法，在浴槽内加入1～2滴0.01%肾上腺素，观察并记录结果。

3.5阿托品的作用按上述方法加入3滴阿托品，观察并记录曲线变化。

3.6氯化钙的作用加2%CaC1

溶液2～3滴入灌流浴槽内，观察并记录曲线变化。

2

3.7盐酸的作用加1～2滴1mol/L HCl溶液入浴槽内，观察并记录曲线变化。

3.8氢氧化钠的作用在(7)基础上加等容量的1mol/L NaOH溶液入浴槽内，观察其反应。

五、实验结果与分析

剪贴实验记录曲线如下图，并做好标记、注释。分析各种因素对小肠运动的影响，并简要说明其机制

六、注意事项

1. 实验过程中必须保证标本的供氧(通气)及浴槽内台氏液的恒温(38℃)，以维持标本活性。

2. 灌流浴槽内的液面高度应保持恒定。

3. 放大器零点调好后不要再移动旋钮，以免影响基线。

4. 上述各药液加入的量系参考数据，效果不明显者可以添加。

5. 每次实验效果明显后立即放掉含药液的台氏液，并冲洗多次，以免平滑肌出现不可逆反应。6．各项处理必须有处理标记。

七、思考题