血液标本采集的基本常识

血液标本采集的基本常识

1 病人的准备

做血液检验项目检验的病人，一般要求采血前禁食12~14小时，采血的前一天避免吃高脂肪、高蛋白类食物，避免饮酒。否则，会引起血脂及某些血清酶结果升高，甚至血清出现混浊，影响整个检验结果；进行葡萄糖耐量试验的病人，在试验前3天给予适量的碳水化学物饮食，有利于取得正确的结果；做碘131吸收试验者，在试验前一个月停服一切含碘的药物和含碘丰富的食物，如海产品类。

2 采血时间

血液生化检验一般要求早晨空腹安静时采血。因为体内的各种化学成份受许多因素调节：如饮食后大量葡萄糖及脂类物质吸收入血，使血糖和血脂上升，游离脂肪酸及无机磷降低；运动后会使乳酸、丙酮酸、乳酸脱氢酶、转氨酶、肌酸激酶等升高，血糖降低；昼夜变化大的成份有皮质醇、血清铁、胆红素等；日间变化大的主要是代谢废物成份如尿素、尿酸等；大量饮水可致血液稀释等等。所以，做血液生化检验时应掌握好采血时间。但是，对重症昏迷或急症病例，可随时采血送检糖、钾、钠、钙、血气分析、淀粉酶等项目。但在输液时采血应避免送检项目受输液成份的影响，如输液中补钾、补糖、补硷时送检，对血钾、血糖、二氧化碳结合力等项目均有影响。

3 采血部位

成人一般取肘部静脉，肥胖者可用腕背静脉；婴儿常用颈部静脉、股动脉或前囟静脉窦；刚出生的婴儿可收集脐带血；尸体解剖者取心脏血；血气分析一般采动脉血；检验只需微量全血时，成人从耳垂或指尖取血，婴儿从大脚趾或脚跟取血；输液病人采血应避免在输液的同一侧上肢或下肢采血，烧伤患者采血应避免穿剌炎症或水肿部，以免影响结果。

4 采血操作及送检的注意事项

4．1 采血器械：采血用的注射器、试管必须干燥清洁。注射器及针头不宜用酒精消毒。目前多用一次性注射器及试管。

4．2 采血操作：必须按无菌操作，采血部位皮肤必须干燥，止血带不可缚扎过久，抽血时速度不可过快，以免血细胞破裂，采血后应卸下针头再将血液沿管壁徐徐注入试管内。

4．3 防止气体逸散：采集血气分析样本，抽血时注射器内不能有空泡，抽出后立即用小橡皮密封针头，隔绝空气。因空气中的氧分压高于动脉血，二氧化碳分压低于动脉血；作二氧化碳结力测定时，盛血标本的容器亦应加塞盖紧，避免血液与空气接触过久，影响检验结果。

4．4 防止分解及自身变化：采血后应尽快送检。因血液中有些化学成份于离体后极易分解，使其含量改变，如血糖及酶类测定，时间过久，血细胞酵解可使血糖下降，酶活力变化等。有些化学成份在细胞内外相差悬株，离体时间过长，细胞内外浓度会发生变化，影响测定结果。如肌酸激酶、乳酸脱氢酶、电解质等。

4．5 防止污染：有些检查项目要求极严格，其采血器具及标本容器必须经过化学清洁。如血氨、铜、锌、铁等项目，因其含量极低，稍有污染即影响结果。作淀粉酶测定时，要防止唾液污染，因唾液中含有大量的淀粉酶，污染后会引起假性淀粉酶升高。

4．6 防止溶血：作各类生化检验，要防止血细胞破裂溶血，因溶血引起细胞内外浓度改变，可使钾、胆红素、氯化物、无机磷、ALT、AS T、LDH等升高，钠、钙、AKP等降低，溶血对某些实验的反应过程干扰：如血红蛋白可直接抑制脂肪酶的活性，使脂肪酶降低。溶血可影响呈色反应终点为红色的实验，如酶法测定血糖、胆固醇、甘油三酯、胆红素的重氮反应、尿素的二乙酰肟法等。

5 抗凝剂的选择

生化检验大部份项目都采用血清，但有些项目需用血浆或全血，采集的血液必须加入抗凝剂。抗凝剂的种类较多，如选择不当，亦会影响检验结果的准确性。下面介绍几种生化检验常用的抗凝剂及其用途：

5．1 草酸钾：常用于尿素、肌酐、纤维蛋白原等测定，不能用钾、钙等测定，对LDH、丙酮酸激酶、AKP和淀粉酶有抑制作用。

5．2 肝素：常用于电解质、血气分析、血氨等测定。其钠盐可使淀粉酶升高。

5．3 氟化钠：常用氟化钠—草酸钠混合抗凝剂作血糖测定的抗凝剂，它可抑制血细胞葡萄糖酵解酶的作用，延长标本的保存时间。

5．4 二乙胺四乙酸钠盐（EDTA-Na2）：生化常用的抗凝剂，但不能用于钙、钠、及含氮物质的测定，对淀粉酶、肌酸激酶、AKP、ACP、5’-核苷酸酶等可抑制，对丙酮酸激酶有明显升高的作用。

正确的血液收集方法

采集步骤：

查看检验单，询问病史，查对检验单上病人姓名、性别、年龄等项目与病人是否吻合，耐心检查需要空腹血检验项目要询问病人是否8小时以内没有能量摄入，询问病人在检验前是否有足够的休息；需要增添项目时先与出具检验申请单的医生联系。

请患者准备。（“请将左手衣袖挽起，手伸直平放，拳头握紧。”）对孩子应多哄劝，避免剧烈躁动、哭闹。对于紧张或有晕血史的病人要进行安慰（“您可以侧过身去，不看很快会好”）。采血器材准备，选择相应的真空采血管；并记录采集时间。

选择穿刺血管：扎好压脉带，观察血管走向，选择穿刺点，松开压脉带（压脉带压迫时间不能超过1分钟），正在输液的病人绝对不可同侧采血，更不可以利用原有的输液针头采血。消毒：以穿刺点为圆心，用蘸有碘伏的棉签由内到外螺旋型涂抹，消毒范围为直径大约3厘米，注意消毒过的地方不能重复涂抹，在涂抹的过程中棉签必须也要同时旋转。

采样及混匀：等待碘伏干了以后（必须等到干了以后，否则达不到消毒效果），再次扎好压脉带，将针头平面朝上与手臂成15°穿刺，最好一针见血。拔出采血管后立即进行颠倒8次混匀。在抽血时要询问病人感受（如有无心慌，头晕等情况），当出现异常时如：?病人出汗、面色苍白、晕倒时立即拔出针并急救?操作失败，取得病人谅解，再次进行操作（“对不起，由于……的原因需要再取一次血，请原谅”）。采样尽量在1分钟内完成。

止血：采血结束后，解开压脉带，退针后请病人“手指压住棉球，手伸直抬高于心脏，保持两分钟”（如果是有出血倾向患者如紫癜，ITP，血液病等要压迫5～10分钟直到无血渗出）。标本前处理：将采血管与相应的检验单裹好，分类，尽快送检验项目所对应的采血管：

1.生化检验黄头管

2.凝血试验蓝头管

3.血常规紫头管

采血顺序：红头管→蓝头管→紫头管→黄头管，注：除红头管外，其他各种采血管均须颠倒混匀8次。

以下检验项目须特别注意

1.所有生化项目、微量元素、血沉必须用空腹血；乙肝三对最好用空腹血。

2.糖耐量试验：（方法一）空腹抽血→吃饭（3分钟内进食75克葡萄糖或二两馒头一个）→饭后30分钟抽血→饭后60分钟抽血→饭后120分钟抽血

（方法二）空腹抽血→吃饭（3分钟内进食50克葡萄糖）→饭后60分钟抽血注：血糖正常的人吃葡萄糖，高血糖的人吃馒头.

3. 激素检查：病人必须空腹且在抽血前要静坐30分钟，激素全套要抽血5ml。

临床化学检验血液标本的采集和处理

临床检验的目的是为临床提供准确可靠的实验诊断依据。为了保证实验数据的可靠性，在检验医学中必须坚持全面质量控制（total quality control,TQC。即指对影响临床检验结果可靠性的各方面因素及各个环节进行质量控制）和全过程质量控制（即指对实验工作的全过程进行质量控制和质量管理）。全过程质量控制包括实验前（分析前）、实验中（分析中）和实验后（分析后）三个阶段的质量控制。在实验误差中实验前误差占70%，因而实验前质量保证对减少实验误差显得尤其重要。

实验前质量保证包括病人准备、标本收集、处理、贮存和运输等，因而能否正确地、规范化地采集和处理标本，是能否做到实验前质量保证的重要内容。在临床化学检验中，血液标本是最多应用的生物体液，血液标本因素是影响临床化学分析准确性和可靠性的最重要、最直接的因素。我国从我们的国情出发，参考了美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）的有关规定，对临床化学检验血液标本的有关问题也提出了相应的要求。我国卫生标准技术委员会临床检验标准专业委员会（CCCLS）已对“临床化学检验血液标本的收集与处理”提出了“中华人民共和国卫生行业标准”，旨在通过标本方面的质量控制达到临床化学分析的质量保证。目前该“标准”文件正在待批中。

一、临床化学检验血液标本的定义

临床化学检验血液标本是指为完成某项或多项临床化学检验项目而采集的一定量的血液，包括抗凝及非抗凝血。

二、血液标本的采取

（一）采取部位

１．静脉采血：应用最多的采血方式。常用的静脉为肘前静脉、腕背静脉，小儿和新生儿有时用颈静脉和前囟静脉。

２．动脉采血：主要用于血气分析时。常用的动脉为股动脉、肱动脉、桡动脉和脐动脉。

３．毛细血管采血：适用于仅需微量血液的试验或婴幼儿。常用部位为耳垂、指端，小儿有时为大趾和足跟。采血针刺入皮肤深度应为2mm (<2.5mm), 采血局部应无炎症、水肿等。

（二）标本类型

临床化学检验血液标本分为血清、血浆和全血3种。血清和血浆为临床常用，除前者不含纤维蛋白原外，其余多数化学成分无差异；全血只有在红细胞内成分与血浆成分相似时才用；血气分析、血红蛋白电泳等时用全血，一般临床化学分析多不用全血。

三、全血处理为血清或血浆

血液标本采取后应尽可能早地自然地使血清（浆）从与血细胞接触的全血中分离出来。一般应于采血后2h内分离出血清或血浆。全血处理为血清或血浆分为离心前、离心中和离心后三个阶段，对各不同阶段均有具体要求。

（一）离心前阶段

即指标本采集到离心处理前的一段时间。

１．血清：标本离心前一般应令其自行凝集，不可用木棍等剥离凝血块。通常于室温（22~25oC）放置30~60 min 血标本可自发完全凝集；冷藏标本凝集缓慢；加促凝剂时凝集加快（标本采集后应轻轻颠倒混合5~10次，以确保促凝剂作用）。

２．血浆：需用血浆标本时，必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，而且采血后必须立即轻轻颠倒采血管混合5~10次（以确保抗凝剂发挥作用），5~10 min 后即可分离出血浆。

３．冷藏标本：标本冷藏可抑制细胞代谢，稳定某些温度依赖性成分 但全血标本一般

不能冷藏；血钾测定标本冷藏不得超过2h。血液中儿茶酚胺、pH ／血气、氨、乳酸、丙酮酸、胃泌素、甲状腺激素等检测时需用制冷的标本。

标本需要冷藏（2~8oC）时，标本采取后应立即将标本置于冰屑或冰水混合物（不可用大冰块），并且必须保证标本与制冷物充分接触，保证制冷物达到标本的高度。

４．代谢抑制剂和防腐剂：某些添加剂加入血液标本中能抑制细胞代谢，可以防止血液标本贮存时分析物浓度的变化。血液葡萄糖测定时，如在血液中加入氟化钠，在血细胞未分离的情况下，葡萄糖在22~25oC时可稳定24h，2~8oC 时可以稳定48h；但在新生儿和儿童标本，由于红细胞压积高，用氟化钠难以控制细胞的糖酵解作用；甲醛－草酸钾抗凝保存剂不适合血糖测定；氟化钠－麝香草酚混合剂因能抑制酶活性，不适用于酶学测定。

５．标本采集现场：(1)标本采集后应尽快送往实验室，尤其当收集区温度超过22oC时此点更为重要；(2)血液标本采集后血管必须加塞、管口向上、垂直放置，以减少管中内容物振动，促进凝血完全，防止标本蒸发、污染和外溅等；(3)已收集的血液标本应温和地处理，要防止标本管振荡所造成的溶血；溶血可影响测定结果。有严重影响（使结果升高）的项目有：乳酸脱氢酶、血清门冬氨酸氨基转移酶、血清钾和血红蛋白；引起值得注意的影响的项目有：血清铁（↑）、血清丙氨酸氨基转移酶（↑）和血清甲状腺素（↓）；轻度受影响（增加）的有：总蛋白、白蛋白、血清磷、血清镁、血清钙和酸性磷酸酶；(4)应避免对光线敏感的分析物暴露在人造光或太阳光（紫外线）照射下。如V A、VB6 、β－胡萝卜素、卟啉、胆红素等测定时，标本管应该用铝箔或类似物质包裹保护起来。

６．标本运送：全血标本应尽快从采血现场运送至实验室，如果运送距离较远，特别是因分析物稳定性有影响，必要时可于采血现场分离出血清或血浆后，再送往实验室；标本运送过程中要注意标本的包装、温度要求、处理方法等，要确保分析成分的稳定性；标本管在运送过程中要保持管口封闭、向上垂直放置。

７．实验室接受标本及离心标本准备：(1)要有标本收取记录（应认真核对检验中清单，对有关情况要认真记录，标本接收及处理应签字登记）；(2)对接受的标本要予以分类准备离心；(3)实验室接受标本后应仍保持标本管于密闭封口、管口向上，垂直位放置。管塞移去后血中CO2丢失，会造成pH增加，离子钙和酸性磷酸酶减少，尤其ｐＨ变化会影响某些检测结果的准确性；(4)标本凝集时间要充分；加抗凝剂的血液标本可以立即离心；加促凝剂的标本可于采血后5~15 min 尽早离心；抗凝的全血标本（锌、锂、原卟啉等测定时）可以不离心；(5)冷藏（2~8oC）标本应保持这个温度直到准备离心。推荐用温度控制离心机；(6)离心标本前不主张用小木棒或类似器材去剥离附着于试管壁和管塞上的凝块，人为剥离会诱导溶血。如果必须露出试管壁或取下管塞时，一定要十分注意，动作一定要轻柔。

（二）离心阶段

即指标本处于离心机里的一段时间。

１．离心时间和相对离心力(RCF)：临床化学分析血液标本离心时，RCF(1000~1200)×ｇ，离心时间为5~10 min。

２．温度控制离心：离心时产热不利于分析物稳定，临床化学分析血液标本离心时必须采用温度控制离心机。一些温度依赖性分析物（如促肾上腺皮质激素、环腺苷酸、儿茶酚胺等）应在4oC分离；无特殊温度要求的分析物，离心温度应设定在20oC ~22oC；温度低于15oC可以人为地使血钾测定值增高；冷藏运送的标本必须在要求的温度下离心。

３．关于再离心：标本离心最好一次完成，若需再次离心，应距上次离心相隔时间很短；对于含有分离物质的血标本绝不可以再离心。

（三）离心后阶段

指标本离心后和用于检测的血清或血浆被取出一定量之前的一段时间。

１．血清或血浆与接触的血细胞和凝块的分离应在采血后尽快（2h内）完成。

２．分离的血清或血浆的贮存：实验室的室温和血清或血浆的贮存温度、时间，是分析物稳定性和测定结果准确性的重要参数。(1)于22 oC~25oC血清或血浆的保存不超过8h；

(2)实验于8h内不能完成时，血清或血浆应置2o C~8oC保存；(3)48h内不能完成的实验项目，或分离的血清或血浆需贮存48h以上时，应于-20o C保存；(4)标本不可反复冻融（只能冻融一次），且不可贮存于无霜冰箱（可造成样品温度变化）；(5)离心后分离凝胶（凝胶屏障）上面的血清可保存2~5天，但必须保证凝胶的完整性；但应用非凝胶分离物质时，离心后必须立即将血清或血浆移出。(6)血清或血浆必须保存于密闭的试管中。

四、血清或血浆分离物质

是指将血清或血浆从全血中分离出来的物质，包括凝胶物质与非凝胶物质。

（一）凝胶物质

为一类具有特定粘度和特殊比重（介于血清或血浆与凝块之间的比重）的惰性凝胶物质，用（1000~1100）×ｇRCF离心10 min，能在血清或血浆与凝块之间形成不可穿透的凝胶屏障，从而将血清或血浆与其接触的血细胞、凝块分开。

（二）非凝胶物质

是由惰性物质（玻璃、塑料、纤维、毛毡等）构成的小珠、盘、滤器、纤维塞等组成。具有介于血清或血浆与凝块之间的比重，将其轻轻加入血管中，用(1000~ 1100)×ｇRCF 离心10 min时，可透过血液移动至血清或血浆与血细胞、凝块之间，形成一个界面，使血清或血浆被分离出来。

（三）完整的凝胶管系统

该系统是由一个真空采血管（硅化塑料管）、内含惰性凝胶物质、促凝剂或抗凝剂组成。使用时要注意该产品必须具有相应性能证书和有效期，并且必须在其有效期内正确使用。随着检验方法日益完善，高精档次的自动化仪器的大量应用，以及检验的科学管理和检验工作人员技术水平不断提高，明显降低检测过程中的影响因素和干扰，而分析检测前的各类影响或干扰因素相对增多。现代检验医学对检测标本的留取与收集提出较高的要求，而广大就诊患者也必需了解留取标本的基本知识，遵照嘱托，配合检验人员，以使检验结果更准确准确可靠。

门诊检验常见的标本一般包括血液(指血，静脉血)、尿、粪便、脑脊液、胸水、腹水、前列腺液、精液、阴道分泌物等，这些标本收集的时间、方法和保存都有一定的要求。

标本采集注意事项

一、血液标本

尽量避免生理因素的影响，有些生理因素，如吸烟、进食、运动、情绪波动、妊娠、体位等均可影响血液中某些成分的变化，有些甚至还有昼夜变化。采集血液标本的条件应尽量一致为宜，如无法避免，应说明在标本上注明该因素。

1．外周血

一般选取左手无名指内侧采血，该部位应无冻疮，炎症，水肿，破损。如该部位不符合要求，以其他手指部位代替。对烧伤病人，可选择皮肤完整处采血。由于部分血液常规检测(如白细胞计数、分类等)受生理因素影响波动过大，比较时宜便条件尽量一致。出、凝血功能的检测项目(如血小板计数，出血时间或凝血时间等)的检测，不宜服用抗凝、促凝药物，以免影响测定结果。

2.静脉血

除涉及各种止血和血栓检测等项目需采用抗凝静脉血血浆外，目前绝大多数检测项目的分析检测可直接采用静脉血的血清。在血清检测项目中，有些(如血糖，血脂等)受饮食及昼夜因素影响较大，一般以清晨空腹血标本为宜，有些在血中衰变较快(血清酶活性测定如ACP活性等)，0 ～4℃贮存活性减弱也不一，这些项目的检测必须及时而快速，有些(如肌酸激酶等)受运动等因素影响较大。抽血时避免溶血的发生也十分重要，尤其涉及血钾，LDH等的测定。切忌在输液的同侧静脉抽血做各项检验。

二、尿液标本

同血标本一样，尿液标本受饮食、运动、药物量等因素的影响也较大，特别是饮食的影响，故一般来说晨尿优于随机尿。晨尿是指清晨起床后的第一次尿标本，较浓缩和酸化，有形成分(如血细胞，上皮细胞，管形)相对集中便于观察。随机尿即随意一次尿，留取方便，但受饮食、运动、药物影响较甚，易于出现假阳性和假阴性结果，如饮食性蛋白尿，饮食性糖尿，维生素C干扰潜血结果等。餐后尿(午餐后2小时收集的患者尿液)适用于尿糖，尿蛋白和尿胆原的检查，此时的尿标本可增加试验敏感性，检出较轻微的病变。12小时尿细胞计数，即Addis (前晚8时排空膀胱后留取至次日8时的所有尿液)，因时间较长，细菌易繁殖，须加入防腐剂甲醛。

24小时尿(第一天晨8时排空膀胱后留取至次日晨8时的所有尿液)中化学物质的定量，包括蛋白，糖，Ca2十等，检测不同的物质，选择不同的防腐剂防腐。清洁中段尿多用于尿细菌培养，要求无菌，冲洗外明后留取标本。所有尿标本的收集都应足量，最少12m1 ，最好50ml，定时尿须全部收集，对女性患者应避免阴道分泌物、经血污染尿标本。

三、粪便标本

粪便标本的检测对判断消化系统疾病有重要参考价值。采集时要求用干净的件签选取含有粘液、脓血等异常病变成分的粪便，对外观无异常的粪便须从表面、深处及粪端多处取材。找寄生虫虫体及作虫卵计数应收集24小时粪便。查痢疾阿米巴滋养体应于排便后立即检查，从有脓血和稀软处取材，保温送检。

查日本血吸虫虫卵时应取粘液、脓血部分，孵化毛蚴时至少留取30g粪便，且需尽快处理。检查蛲虫卵须用透明薄膜拭子于晚12时或清晨排便前自肛门周围皱处处拭取并立即镜检。隐血试验(化学法)，试验前3日禁食肉类及含动物血食物并禁服铁剂，维生素C等。所有粪便标本采集后1小时内应检查完毕，以防止有形成分受消化酶及pH的破坏。

四、脑脊液标本

脑脊液标本采集后立即送检，放置过久将影响检验结果：如细胞变性，破坏，导致计数和分类不被：有些化学物质如葡萄糖等将分解含量减少：细菌发生自溶影响细菌的检出率。脑脊液抽取后一般分装三个无菌管，第一管作细菌培养，第二管作化学分析和免疫学检查，第三管作一般性状及显微镜检查，三管顺序不宜颠倒。因标本采集较难，全部送检和检测过程应注意安全。

五、胸腹水标本

与脑脊液标本一样，采集后的标本注意安全，及时送检。一般也分装三管，一管作常规细胞学检查，一管生化检查，一管细菌培养，顺序以与脑脊液相同为宜。

六、前列腺液标本

前列腺液标本由前列腺按摩后采集，液量少时直接滴在载玻片上及时送检，须注意防止标本蒸干，量多时收集在洁净干燥的试管中。若按摩不出前列腺液，可检查按摩后的尿液沉渣。

七、阴道分秘物标本

阴道标本采集前24小时应禁止房事、盆浴、明道检查、明道灌洗及局部上药等．取材所用器械需要清洁。一般用盐水浸湿棉拭子自阴道或阴道弯后部、宫颈管口取材，制生理盐水涂片后观察分泌物标本，经期的女性患者不宜检查阴道分泌物标本。