分子生物学实验流程及相关试剂、仪器概述

常规材料

组织器官原生质体\细胞细菌\真菌\酵母

特殊材料

少量起始材料特殊病变组织亚细胞结构

PCR或RACE

电泳

凝胶成像系统长波紫外观察箱

切胶

胶回收试剂盒

T载体、平末端载体

转化细菌并铺板培养

筛选目标菌落

提取目标质粒

常用仪器使用与试剂保存及化学实验安全练习

常用仪器使用与试剂保存及化学实验安全练习 一、常用仪器 1、中学化学常见化学仪器的识别: 填写上述仪器的名称: 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、 2 3、24、25、26、27、28、

2、基本化学仪器及其使用: ①试管:用作少量试剂的或的仪器,可直接,加热时外壁要 ,用夹住或用铁夹固定在上;加热固体时,管口倾斜,固体在管底;试管盛液量不超过容积的,加热时不超,加热液体时,管口倾斜,与桌面成,切忌管口向着人。试管夹持位置离管口为全长的处; ②烧杯:配制、浓缩、稀释溶液,也可作反应器、水浴加热器,加热时垫,液体不超过; ③烧瓶:用作加热或不加热条件下较多液体参加的反应容器,圆底烧瓶加热(“需要”或“不需要”)垫石棉网,或水浴加热; ④蒸馏烧瓶:作液体混合物的或,也可装配气体发生器,加热 (“需要”或“不需要”)垫石棉网; ⑤集气瓶:收集气体,装配洗气瓶,气体反应器,固体在气体中燃烧的容器。加热,作固体在气体中燃烧的容器时,要在瓶底加或一层; ⑥坩埚:用于灼烧固体使其反应可加热至高温,放在上,用 夹取,不可骤冷。 (2)计量仪器 ①滴定管(酸式和碱式):进行滴定反应;准确量取液体体积。酸式滴定管盛性、 性溶液,碱式滴定管盛溶液,二者不能互相代替,使用前要洗净并,先润洗再装溶液,‘0’刻度在,自而,刻度值由小变大,精确度为。 ②量筒:用于量取一定体积液体的仪器。使用量筒来量取液体时,首先要选用与所量取液体体积的量筒。量筒加热,不能量取的液体,它不能作为化学反应和配制溶液的仪器。零刻度,自下而上,刻度值由变。 ③容量瓶:用于准确配置一定物质的量浓度的溶液,瓶身标有三个标志:、 、。要在所标下使用,加液体用引流,不能长期存放溶液。使用前要。检漏的操作: 。 ④托盘天平:用来称量固体物质质量的仪器,它的精确度是克。使用托盘天平称量前,先要,然后左、右两盘各放大小相同的同种纸。易潮解、腐蚀性药品放在称量,称量时要遵循“”的原则。取用砝码要用,绝对

常见实验室仪器设备清单!(附实验室图)

一、疾病预防控制中心实验室仪器设备清单 1 气相色谱仪:定性定量分析 2 阿贝折射仪:测透明半透明液体或固体的折射率和平均色散 3 氨气分析仪:测样品中氨的含量 4 测汞仪:测固、体液体样品中汞含量 5 电导率仪:测电解质溶液电导率值 6 二氧化硫测定仪:大气环镜中二氧化硫浓度的自动监测 7 二氧化碳测定仪:大气环镜中二氧化碳浓度的自动监测 8 离子交换纯水器:使用离子交换法制纯水 9 粉层采样器:该采样器适用于煤矿及其它粉层作业环镜中进行粉层采样 10 光电浊度仪:测量浊度 11 光照度计:测定光照强度 12 火焰光度计:监床化验用病理研究 13 激光粉层仪:检测粉层浓度 14 紫外可见分光光度计:测量物质对不同波长单色辐射的吸收程度、定量分析 15 紫外辐射照度计:紫外辐射照度测量 16 自动量程照度计:测定光照强度 17 自动旋光仪:测物质旋光度,分析物质的浓度、纯度、含糖量 18 酶标仪:定性定量 19 冷原子荧光测汞仪:专用测贡仪器,测痕量贡 20 离子计:测离子浓度 21 CO分析仪:测大气环镜中一氧化碳含量 22 双道原子荧光光度计:固、液体中汞、砷、硒、锑、锗、锡含量测定析 23 手持糖量计:测体的含糖量 24 生化分析仪:测定样品的浓度,酶反映速率和酶的活性等数十种生化参数 25 洗板机:与酶标仪配套使用 26 微量可调移液器:移微量液体 27 显微镜:观察微小物质 28 荧光分光光度计:分析和测试各类微生物,氨基酸、蛋白质、核酸及多种监床药物 29 医用净化工作台:提供无尘无菌高洁净工作环镜 30 便携式红外线人析器:测定公共场所中的CO2浓度 31 电子微风仪:适用于工厂企业通风空调,镜污染览测动压平衡自动跟踪等速烟尘采样器的采样 32 放射性污染计量仪:测试放射性污染是否超标 33 热敏电阻(测辐射热计):用于辐射探测 34 紫外光功力计:测试检测紫外光功率 35 热球式电风速仪:测定室内外或模型的气流速度时,是一种测量低风速的基本仪器 36 红血蛋白仪:检测血红蛋白

建立一个分子生物学实验室所需的仪器

分子生物学技术信息 关于筹建一个分子生物学实验室所需的仪器 一、上游分子克隆 分子克隆技术是分子生物学的核心技术,这项技术的主要目的是获得某一基因或DNA片段的大量拷贝,从而可以深入分析基因结构与功能,并可达到人为改造细胞及物种个体的遗传性状的目的。 1. 分子克隆的基本技术路线: 1) 分离制备目的基因或DNA片段; 2) 目的DNA与载体在体外进行连接; 3) 重组DNA分子转入宿主细胞; 4) 筛选及鉴定阳性重组体; 5) 重组体的扩增。 2. 分子克隆常用仪器:

二、核酸分子杂交 核酸分子杂交技术是分子生物学领域中最常用的技术之一。其基本原理是具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下可按碱基互补原则形成双链。由于核酸分子杂交的高度特异性及检测方法的高度灵敏性,使其在分子生物学领域中被广泛应用于分子克隆的筛选,基因组中特定基因序列的定量定性检测,基因表达和基因突变分析及疾病的基因诊断等。根据核酸种类分为Southern印迹法和Northern印迹法。 核酸分子杂交中常用的仪器: 三、下游蛋白的表达及分离纯化 目的基因能否发挥其效应,只能通过其表达有功能的蛋白质来实现,因此蛋白质的表达及分析方法成为分子生物学中必不可少的组成部分。 1. 蛋白的表达 大肠杆菌是自然界中最为人知的生物体之一。由于其具有操作简易,产量高和成本低廉等优点,使其成为蛋白质表达的首选宿主。缺点是:表达缺乏翻译后加工,得到的蛋白可能缺乏某些天然蛋白所具有的活性。 酵母作为单细胞低等真核生物,具有易培养,繁殖快,便于基因操作等优点,渐渐被开发作为目的基因的表达系统。其中甲基酵母作为外源基因的表达

(完整版)实验室仪器操作规程

数显式压力试验机操作规程 一、使用前应先检查油箱内的油液是否充足,可查看右侧面油标, 如不足,则应打开后箱板向油箱内添加,至液面在油标处为宜。 二、检查各油管接头和紧固件是否有松动,如有松动则拧紧。检 查防尘罩应完整无损。检查电气接地、保险熔丝等安全防护措施是否有效。 三、首次使用时,检查油路和电路是否运行正常。 参数设置,选择合适的测量范围、显示方式和加荷方式。四、将试件表面擦拭干净,检查外观有无明显缺陷,如有必须更 换无损试件。 五、按下启动按扭,手柄放在“上升”位置,调控送油旋钮,按 需要速率平稳进行加荷试验,至试件被压碎,负荷下降。随即关闭送油,手柄放在“下降”的位置,使油液迅速流回油箱。 六、试验结束时,按面板上“打印”键,打印机即可打印输出该 次的试验报告。 七、操作中禁止将手等人体任何部分置于上下压板之间,并注意 试件破碎时碎片崩出伤人;试后随即清除破碎试块,以待下次试验。当不再做试验时,要打开回油阀,关闭送油阀,切断电源。

万能材料试验机操作规程 一、开机预热,检查设备运行状态。 二、根据试样和需要,选用相应的变形、负荷测量范围和显示方 式。 三、根据试样形状及尺寸,把相应的钳口装入上下钳口座内。 四、开动油泵拧开送油阀使试台上升10mm,然后关闭送油阀,如 果试台 已在升起位置时,则不必先开动油泵送油。 五、按动钳口夹紧按扭,将试样的一端夹在上钳口中(必须给电 磁阀送电); 六、开动电动机,将下钳口升降到适当高度,将试件另一端夹在 下钳口中(须注意试样放置在轴线上)。 七、在试样上安装引伸计(注意:引伸计一定要夹好)。 八、调整变形显示为“零”。 九、按试验要求的加荷速度,缓慢的拧开送油阀进行加荷试验(加 荷时电磁阀应在无电状态)。 十、油缸升起后加荷前应按负荷和位移清零。 十一、根据需要,在特征点出现后取下引伸计。 十二、试样断裂后,卸载。 十三、取下断裂后的试样。 十四、注意加载过程中不能离人、不能超载,注意设备、人身安全。

高中化学实验常用仪器

高中实验专题——1、高中化学实验常用仪器1、反应容器 仪器图形与名称主要用途使用方法及注意事项 试管用作少量试剂的溶解 或反应的仪器,也可 收集少量气体、装配 小型气体发生器 (1)可直接加热,加热时外壁要擦干,用试管夹夹 住或用铁夹固定在铁架台上;(2)加热固体时,管 口略向下倾斜,固体平铺在管底;(3)加热液体时 液体量不超过容积的1/3,管口向上倾斜,与桌面 成45°,切忌管口向着人。装溶液时不超过试管容 积的1/2。 烧杯配制、浓缩、稀释、 盛装、加热溶液,也 可作较多试剂的反应 容器、水浴加热器 加热时垫石棉网,外壁要擦干,加热液体时液体量 不超过容积的1/2,不可蒸干,反应时液体不超过 2/3,溶解时要用玻璃棒轻轻搅拌。 圆底烧瓶平底烧瓶用作加热或不加热条 件下较多液体参加的 反应容器 平底烧瓶一般不做加热仪器,圆底烧瓶加热要垫石 棉网,或水浴加热。液体量不超过容积的1/2。 蒸馏烧瓶作液体混合物的蒸馏 或分馏,也可装配气 体发生器 加热要垫石棉网,要加碎瓷片防止暴沸,分馏时温 度计水银球宜在支管口处。 不溶性块状固体与液 体常温下制取不易溶 于水的气体 控制导气管活塞可使反应随时发生或停止,不能加 热,不能用于强烈放热或反应剧烈的气体制备,若 产生的气体是易燃易爆的,在收集或者在导管口点

启普发生器 锥形瓶滴定中的反应器,也 可收集液体,组装洗 气瓶。 同圆底烧瓶。滴定时只振荡,因而液体不能太多, 不搅拌。 2、盛放容器 集气瓶收集贮存少量气体,装 配洗气瓶,气体反应器、 固体在气体中燃烧的容 器 不能加热,作固体在气体中燃烧的容器时,要在瓶 底加少量水或一层细沙。瓶口磨砂(与广口瓶瓶颈 磨砂相区别),用磨砂玻璃片封口。 试剂瓶(广口瓶、细口 瓶)放置试剂用。可分广口 瓶和细口瓶,广口瓶用 于盛放固体药品(粉末 或碎块状);细口瓶用 于盛放液体药品。 都是磨口并配有玻璃塞。有无色和棕色两种,见光 分解需避光保存的一般使用棕色瓶。盛放强碱固体 和溶液时,不能用玻璃塞,需用胶塞和软木塞。试 剂瓶不能用于配制溶液,也不能用作反应器,不能 加热。瓶塞不可互换。 滴瓶盛放少量液体试剂的容 器。由胶头滴管和滴瓶 组成,滴管置于滴瓶内, 滴瓶口为磨口,不能盛放碱液。有无色和棕色两种, 见光分解需避光保存的(如硝酸银溶液)应盛放在 棕色瓶内。酸和其它能腐蚀橡胶制品的液体(如液 溴)不宜长期盛放在瓶内。滴管用毕应及时放回原

分子生物学实验技术考试题库

一、名词解释 1.分配常数:又称分配系数,是指一种分析物在两种不相混合溶剂中的平衡常数。 2.多肽链的末端分析:确定多肽链的两末端可作为整条多肽链一级结构测定的标志,分为氨基端分析和羧基端分析。 3.连接酶:指能将双链DNA中一条单链上相邻两核苷酸连接成一条完整的分子的酶。 4.预杂交:在分子杂交实验之前对杂交膜上非样品区域进行封闭,用以降低探针在膜上的非特异性结合。 5.反转录PCR:是将反转录RNA与PCR结合起来建立的一种PCR技术。首先进行反转录产生cDNA,然后进行常规的PCR反应。 6.稳定表达:外源基因转染真核细胞并整合入基因组后的表达。 7.基因敲除:是指对一个结构已知但功能未知或未完全知道的基因,从分子水平上设计实验,将该基因从动物的原基因组中去除,或用其它无功能的DNA片断取代,然后从整体观察实验动物表型,推测相应基因的功能。 8.物理图谱:人类基因组的物理图是指以已知核苷酸序列的DNA片段为“路标”,以碱基对(bp,kb,Mb)作为基本测量单位(图距)的基因组图。 9.质谱图:不同质荷比的离子经质量分析器分开后,到检测器被检测并记录下来,经计算机处理后所表示出的图形。 10.侧向散射光:激光束照射细胞时,光以90度角散射的讯号,用于检测细胞内部结构属性。

11.离子交换层析:是以离子交换剂为固定相,液体为流动相的系统中进行的层析。 12.Edman降解:从多肽链游离的N末端测定氨基酸残基的序列的过程。 13.又称为限制性核酸内切酶(restriction endonuclease):是能够特异识别双链DNA序列并进行切割的一类酶。 14.电转移:用电泳技术将凝胶中的蛋白质,DNA或RNA条带按原位转移到固体支持物,形成印迹。 15.多重PCR:是在一次反应中加入多对引物,同时扩增一份模板样品中不同序列的PCR 过程。 16.融合表达: 在表达载体的多克隆位点上连有一段融合表达标签(Tag),表达产物为融合蛋白(有分N端或者C端融合表达),方便后继的纯化步骤或者检测。 17.同源重组:发生在DNA同源序列之间,有相同或近似碱基序列的DNA分子之间的遗传交换。 18.遗传图谱又称连锁图谱(linkage map),它是以具有遗传多态性的遗传标记为“路标”,以遗传学距离为图距的基因组图。 19.碎片离子:广义的碎片离子为由分子离子裂解产生的所有离子。 20.前向散射光:激光束照射细胞时,光以相对轴较小角度向前方散射的讯号用于检测细胞等离子的表面属性,信号强弱与细胞体积大小成正比。 21.亲和层析:利用共价连接有特异配体的层析介质分离蛋白质混合物中能特异结合配体的目的蛋白或其他分子的一种层析法。(利用分子与其配体间特殊的、可逆性的亲和结合

实验室常用仪器操作规程

实验室常用仪器操作 规程

实验室常用仪器操作规程 技术部仪器操作规程 河北宝恩生物科技有限公司 目录 一、自动双重纯水蒸馏器使用操作规程及维护保养.....................1 二、循环水真空泵的使用操作规程..........................................2 三、旋转蒸发器使用操作规程................................................3 四、旋片式真空泵使用操作规程.............................................4 五、离心机的使用操作规程...................................................5 六、电子恒温水浴锅使用操作规程....................................6 七、机械加码分析天平使用操作规程.......................................7 八、真空干燥箱的使用操作规程..........................................8 九、电热套使用说明............................................................9 十、电热鼓风干燥箱使用操作规程及注意事项........................10 十一、PH计的使用操作规程及维护.......................................11 十二、高效液相色谱仪使用操作规程及注意事项.....................12 十三、紫外分光光度计的使用操作规程.................................13 十四、气相色谱仪操作规程................................................14 十五、电子天平的使用操作规程..........................................15 十六、超声波清洗机操作规程.............................................16 十七、精密增力电动搅拌器操作规程....................................17 十八、托盘天平的操作规程 (18) 自动双重纯水蒸馏器使用操作规程及维护保养一、操作规程: 1、将控制箱后面的电源插头插入市电220V/50HZ插座中,功率3KW,使用结束

实验仪器操作流程

TYE—2000KN压力试验机操作规程 一.一般规定: (1)本机由本室指定的试验人员进行操作,非本室人员未经许可,不得随意摆弄,以防事故发生。 (2)试验操作人员在试验前必须对本机进行检查,看贮油是否足够,油管接头是否松动,如油不足应加油,松动的油管接头应拧紧。(3)每次试验完毕,应及时关闭油泵,切断电源后应清理试台上的渣物,并盖好防尘罩。 二.操作方法: (1)首次对试样的最大荷载,应有所估计,然后根据所估计的最大荷载,合理选择并悬挂应力弹簧,校正指针回零。 (2)将试件放在下压板中心,顺时针旋动上压板手轮直至上压板接触试件。 (3)接通电源开动油泵,关闭加油阀,打开送油阀,按要求速度加荷,至试件破坏后,立即徐徐松开回油阀,关闭送油阀,读取从动指针所指荷载值并记录之(大弹簧读取外圈值,小簧读取内圈值)。(4)反时针转动上压板手轮,取出已破坏的试件。

ZBSX-92型振筛机操作规程 一. 一般规定: 使用人员在使用前,仔细阅读使用说明书,了解本机的有关事项,方可使用。 二. 操作步骤: 2.1接通电源。 2.2先将装有试样的套筛固定在振筛机上; 2.3将旋扭转至要求定时位,即可开始工作,若中途停机,应切断电源开关,让定时片中自行停止位置,不可强行扭回。 2.4将筛好的试样分别称重。 三. 注意事项: 1.1开机前,加足润滑油至螺孔面。 3.2转动旋扭时,不应过快,过猛,以免损坏零件。 3.3每隔6个月更换机油一次,使用时注意避免盖板上脦根导杆变形。

101型电热恒温干燥箱 一. 一般规定 使用人员在使用前,仔细阅读使用说明书,了解本机的有关事项,方可使用。 二. 操作方法 1. 打开电源开关。 2. 将温控仪设定所需温度,温控仪绿灯灭,此时箱内开始升温,同时打开鼓风机开关,使鼓风机工作,并注意鼓风机运转状况是否正常。 3. 恒温时,可关闭辅助加热开关,只留一组工作,以免功率过大,影响恒温波动度。 三. 注意事项 1. 本箱装置时必须用导线连接通地。 2. 本箱非防爆型,故带腐蚀性及易燃性物品禁止放入箱内干燥,

实验所需的仪器和试剂

实验所需的仪器和试剂 ①溶解氧(DO)——碘量法 一次实验 硫酸锰溶液;碱性碘化钾溶液;硫酸;硫代硫酸钠溶液;淀粉溶液。 ㈠试剂:480g硫酸锰,500g氢氧化钠,150g碘化钾,2ml(1+5)硫酸溶液,1g可溶性淀粉,0.1g水杨酸,1.2258g重铬酸钾,3.2g硫代硫酸钠,0.2g碳酸钠。 ㈡仪器:棕色瓶,1000ml容量瓶,250ml碘量瓶,250ml锥形瓶。 ②化学需氧量(COD)——重铬酸钾法 一次实验 重铬酸钾溶液,硫酸-硫酸银溶液,重蒸馏水,试亚铁灵指示液,硫酸亚铁铵标准溶液,硫酸汞。 ⑴试剂:12.258g重铬酸钾,1.458g邻菲啰啉,0.695g硫酸亚铁(7H2O),39.5硫酸亚铁铵,520mL浓硫酸,5g硫酸银,0.4g硫酸汞。 ㈡仪器:250ml锥形瓶的全玻璃回流装置,加热装置,50ml酸式滴定管,1000ml容量瓶,棕色瓶,500ml锥形瓶。 ③磷——钼锑抗分光光度法

一次实验 10%抗坏血酸溶液,(1+1)硫酸,钼酸盐溶液,浊度—色度补偿液, 磷酸盐标准溶液,磷酸盐贮备溶液。 ⑴试剂:(1+1)硫酸,10g抗坏血酸,13g钼酸铵,0.35g酒石酸锑氧钾,0.2197g 纯磷酸二氢钾。 ⑵仪器:分光光度计,7个50ml具塞比色管。 ④总氮-------紫外分光光度法 一次实验: l硝酸钾标准溶液;碱性过硫酸钾;(1+9)盐酸. ⑴试剂:无氨水;35g氢氧化钠;40g过硫酸钾;(1+9)盐酸;硝酸钾标准溶液 (0.7218g硝酸钾,2ml三氯甲烷)。

⑵仪器:紫外分光光度计,民用压力锅,25ml具塞玻璃磨口比色管,聚乙烯瓶。 ⑤氨氮——纳氏试剂光度法 一次实验:铵标准使用液,酒石酸钾钠溶液,钠氏试剂,1mol/L氢氧化钠溶液,按标准贮备液。 ⑴试剂:27g碘化钾,10g二氯化汞,60g氢氧化钾, 16g氢氧化钠, 10g碘化汞,50g酒石酸钠,3.819g纯氯化铵。 ⑵仪器:分光光度计;PH计。 ⑥生化需氧量(BOD5)——碘量法 一次实验:磷酸盐缓冲溶液;硫酸镁溶液;氯化钙溶液;氯化铁溶液;0.5mol/L 盐酸溶液;0.5mol/L氢氧化钠溶液;0.025mol/L亚硫酸钠溶液;葡萄糖-谷氨酸标准溶液。 试剂:8.5g磷酸二氢钾;21.75g磷酸氢二钾;33.4g七水合磷酸氢二钠;1.7g 氯化铵;22.5g七水合硫酸镁;27.5无水氯化钙;0.25g六水合氯化铁;40ml (1.18g/ml)盐酸;20g氢氧化钠;1.575g亚硫酸钠;150mg葡萄糖; 150mg谷氨酸.

实验室仪器操作使用规范流程

实验室仪器操作使用规程 文件编号:SH/ZJ-05/02-2011 版本:A/01 页数:21 生效日期:2011年9月1日 编写:日期: 审核:日期: 批准:日期: 分发号:受控印章: 质量总监: 01 质检部部长:02 分发日期: 第1节质检部仪器设备一览表

第2节仪器操作使用规程 1. 高速组织捣碎机(DS-1) 1、将刀对准机轴,按下联轴节弹性元件至尺槽,使其居于容器盖园孔,方可启动电机。

2、物料须缓缓倒入容器中,先开慢速(1 ) ,后开快速(2 ) ,但慢速只能作起步作用,不宜长用。 3、由于电动机高速运转,不能长时间使用,必须每使用三分钟,休息五分钟,方可继续使用。 2. 绞肉机(MM8) 一、注意事项 1、机器旋转过程中严禁用手伸入绞肉筒,以免发生伤手事故; 2、需绞的肉一定要去净皮、骨、筋,并把肉切成细条状,以免损坏机器; 3、空机启动,螺杆转向必须与箭头指示牌所指的方向一致,导正常运转后,才可把肉放进绞肉筒进行绞肉,否则容易造成肉卡住机件,使机不能启动和正常运转,严重时会挤破绞肉筒、出肉轮,甚至会烧坏电动机: 4、如发现电动机运转不正常,应立即切断电源,停机检查原因,看是否有皮、骨、筋卡住; 5、如果出现肉呈糊状,可能由以下原因造成: ①出肉轮太松造成,切肉入与出肉孔板接触不良,应重新调整; ②出肉孔板堵塞,要给予疏通; ③切肉刀太钝,应修磨或更换;

二、使用方法 使用时,绞肉部分各零件应清洗干净,步骤如下: 拧出出肉轮,按顺序取出出肉孔板、切肉刀、送肉螺杆,然后松开夹紧手柄,取出绞肉筒,清洗完后,再装回绞肉筒,板动夹紧手柄至夹紧位置,然后,依次装入送肉螺杆,切肉刀、出肉孔板,再旋上出肉轮,要注意出肉轮不要旋得太紧,只需旋至刚与出肉孔板接触即可,通电旋转,再将出肉轮的松紧调至适当位置,否则会影响机器的使用寿命及出肉质量。以上工作做完即可进行绞肉,开机后把预先去掉皮、骨、筋并切成长条状的肉投入绞肉筒,如果出肉太慢,可用塞肉棒(严禁直接用手)把绞肉筒的肉条适当往下推送,但也不能送得太急,以免超过电动机承载能力,损坏电动机。 使用完毕,应将绞肉部分各零件卸下清洗抹干,以备下次使用。 3. 电子计数天平(LT200OA) 一、构造 本仪器由称盘、外壳、电源、检定分度值等部件组成; 二、使用方法 1、预热:接通电,打开开关,天平显示从“F…… 2 ”到“F…… 9 ”后即显示“0.0”或“0”,然后预热30 分钟左右,方能使称量准确;

分子生物学实验技术全攻略

分子生物学实验技术 目录 实验一细菌的培养 2 实验二质粒DNA的提取 3 实验三紫外吸收法测定核酸浓度与纯度 4 实验四水平式琼脂糖凝胶电泳法检测DNA 5 实验五质粒DNA酶切及琼脂糖电泳分析鉴定 7 实验六植物基因组DNA提取、酶切及电泳分析 8 实验七聚合酶链反应(PCR)技术体外扩增DNA 9 实验八 RNA提取与纯化 11 实验九 RT-PCR扩增目的基因cDNA 13 实验十质粒载体和外源DNA的连接反应 15 实验十一感受态细胞的制备及转化 16 实验十二克隆的筛选和快速鉴定 18 实验十三 DNA分析——Southern杂交 19 一基本操作 实验一、细菌培养 实验二、质粒DNA提取 实验三、紫外吸收法测定核酸浓度与纯度 实验四、水平式琼脂糖凝胶电泳法检测DNA 实验五、质粒DNA酶切及琼脂糖电泳分析鉴定 实验六、植物基因组DNA提取、定量、酶切及电泳分析实验八、植物RNA提取及纯化 二、目的基因获取

实验七、聚合酶链式反应(PCR)技术体外扩增DNA 实验九、RT-PCR扩增目的基因cDNA 三、目的基因的克隆和表达 实验十、质粒载体和外源DNA的连接反应 实验十一、感受态细胞的制备及转化 实验十二、克隆的筛选和快速鉴定 实验十三、DNA分析——Southern杂交 实验一细菌的培养 一、目的 学习细菌的培养方法及培养基的配置。 二、原理 在基因工程实验和分子生物学实验中,细菌是不可缺少的实验材料。质粒的保存、增殖和转化;基因文库的建立等都离不开细菌。特别是常用的大肠杆菌。 大肠杆菌是含有长约3000kb的环状染色体的棒状细胞。它能在仅含碳水化合物和提供氮、磷和微量元素的无机盐的培养基上快速生长。当大肠杆菌在培养基中培养时,其开始裂殖前,先进入一个滞后期。然后进入对数生长期,以20~30min复制一代的速度增殖。最后,当培养基中的营养成分和氧耗尽或当培养基中废物的含量达到抑制细菌的快速生长的浓度时,菌体密度就达到一个比较恒定的值,这一时期叫做细菌生长的饱和期。此时菌体密度可达到 1×109~2×109/mL。 培养基可以是固体的培养基,也可以是液体培养基。实验室中最常用的是LB培养 基。 三、实验材料、试剂与主要仪器 (一)实验材料 大肠杆菌 (二)试剂 1、胰蛋白胨 2、酵母提取物

实验室仪器标准操作规程的编写规范

适用范围 本规范适用于本单位仪器设备标准操作规程的编写。 操作规程编写的基本要求 1格式要求 1.1文件名称及编码 1.1.1文件名称命名方式为“生产厂家(或者品牌)简称+型号+仪器名称+标准操作规程”,例如:安捷伦1200高效液相色谱仪标准操作规程。 1.1.2编码方式为“ZY+序号-5.5-2013”,例如:ZY12-5.5-2013。 1.1.3字体均为宋体小四,并加粗。 1.2实施日期 1.2.1实施日期格式参照“2013.01.01”,字体均为宋体小四,并加粗。 1.3规程内容格式 1.3.1全部字体均为宋体小四,行距为1.5倍,内容小标题加粗。规程中的层次划分及编号,一律采用阿拉伯数字,层次的划分,一般不超过4部分,且首行不缩进。 2内容要求 2.1依据仪器设备使用说明、培训教程和上级已发布的标准操作规程编写,且与有关规定相协调。 2.2文字表达应准确、简明、通俗易懂,逻辑严谨,避免产生不易或不同理解的可能。 2.3规程中的图样、表格、数值、公式和其他技术内容应正确无误。 2.4规程中的术语、符号、代号应统一,与有关标准相一致,同一术语应表达同

一概念。 3规程一般由以下部分构成 3.1操作程序 3.1.1操作前准备 3.1.1.1核对和确认所用设备与检测目的所要求的一致性。 3.1.1.2识别设备计量检定状态标志和技术状态标志应符合规定;需要时,应标明对设备进行检定(自验)与检定周期的要求。 3.1.1.3设备使用技术条件和工作环境条件的检查与确定。 3.1.1.4安全与劳动保护条件的检查与确认。 3.1.1.5设备正确停机状态的检查与确认。 3.1.1.6检查并加油、加水、加燃料(必要时),达到规定要求。 3.1.2开机与运行 3.1.2.1接通电源,观察指示信号的要求与规定。 3.1.2.2必要时,仪器的预热或预置的要求与规定。 3.1.2.3校准或调零的要求与规定。 3.1.2.4设备自身系统误差的测定。 3.1.2.5必要时(如长时间停机后初次运行时)开机空运行,观察运行的稳定性。 3.1.2.6对样品的要求与规定 3.1.2.7上样和运行的操作步骤,要求与规定 3.1.2.8读取检测数据的方法。 3.1.2.9必要时(如长期停机,初次运行)在首次运行前,采用非检验试样做试验,观察设备运行的稳定性、可靠性。 3.1.3停机与保养 3.1.3.1检测完毕,停机状态的要求与规定。 3.1.3.2切断电源,观察指示信号的要求与规定。

高中化学实验专题 常用仪器

高中实验专题——1、高中化学实验常用仪器 1、反应容器 仪器图形与名称主要用途使用方法及注意事项 试管用作少量试剂的溶解或 反应的仪器,也可收集 少量气体、装配小型气 体发生器 (1)可直接加热,加热时外壁要擦干,用试管夹夹住或用 铁夹固定在铁架台上;(2)加热固体时,管口略向下倾斜, 固体平铺在管底;(3)加热液体时液体量不超过容积的1 /3,管口向上倾斜,与桌面成45°,切忌管口向着人。装 溶液时不超过试管容积的1/2。 烧杯配制、浓缩、稀释、盛 装、加热溶液,也可作 较多试剂的反应容器、 水浴加热器 加热时垫石棉网,外壁要擦干,加热液体时液体量不超过 容积的1/2,不可蒸干,反应时液体不超过2/3,溶解时要 用玻璃棒轻轻搅拌。 圆底烧瓶平底烧瓶用作加热或不加热条件 下较多液体参加的反应 容器 平底烧瓶一般不做加热仪器,圆底烧瓶加热要垫石棉网, 或水浴加热。液体量不超过容积的1/2。 蒸馏烧瓶作液体混合物的蒸馏或 分馏,也可装配气体发 生器 加热要垫石棉网,要加碎瓷片防止暴沸,分馏时温度计水 银球宜在支管口处。 启普发生器不溶性块状固体与液体 常温下制取不易溶于水 的气体 控制导气管活塞可使反应随时发生或停止,不能加热,不 能用于强烈放热或反应剧烈的气体制备,若产生的气体是 易燃易爆的,在收集或者在导管口点燃前,必须检验气体 的纯度。 锥形瓶滴定中的反应器,也可 收集液体,组装洗气瓶。 同圆底烧瓶。滴定时只振荡,因而液体不能太多,不搅拌。 2、盛放容器

集气瓶收集贮存少量气体,装配洗 气瓶,气体反应器、固体在 气体中燃烧的容器 不能加热,作固体在气体中燃烧的容器时,要在瓶底加少 量水或一层细沙。瓶口磨砂(与广口瓶瓶颈磨砂相区别), 用磨砂玻璃片封口。 试剂瓶(广口瓶、细口瓶)放置试剂用。可分广口瓶和 细口瓶,广口瓶用于盛放固 体药品(粉末或碎块状); 细口瓶用于盛放液体药品。 都是磨口并配有玻璃塞。有无色和棕色两种,见光分解需 避光保存的一般使用棕色瓶。盛放强碱固体和溶液时,不 能用玻璃塞,需用胶塞和软木塞。试剂瓶不能用于配制溶 液,也不能用作反应器,不能加热。瓶塞不可互换。 滴瓶盛放少量液体试剂的容器。 由胶头滴管和滴瓶组成,滴 管置于滴瓶内, 滴瓶口为磨口,不能盛放碱液。有无色和棕色两种,见光 分解需避光保存的(如硝酸银溶液)应盛放在棕色瓶内。 酸和其它能腐蚀橡胶制品的液体(如液溴)不宜长期盛放 在瓶内。滴管用毕应及时放回原瓶,切记!不可“串瓶”。 干燥器用于存放需要保持干燥的 物品的容器。干燥器隔板下 面放置干燥剂,需要干燥的 物品放在适合的容器内,再 将容器放于干燥器的隔板 上。 灼烧后的坩埚内药品需要干燥时,须待冷却后再将坩埚放 入干燥器中。干燥器盖子与磨口边缘处涂一层凡士林,防 止漏气。干燥剂要适时更换。开盖时,要一手扶住干燥器, 一手握住盖柄,稳稳平推。 贮气瓶用做实验中短期内贮备较 多量气体的专用仪器。 贮气瓶等所有容器类玻璃仪器均不能加热,使用时也 切记骤冷骤热。 贮气前要检查气密性。 3、测量仪器 托盘天平称量药品(固体)质量,精 度≥0.1g。 称前调零点,称量时左物右码,精确至0.1克,药品不能 直接放在托盘上( 两盘各放一大小相同的纸片),易潮解、 腐蚀性药品放在玻璃器皿中(如烧杯等)中称量, 温度计测定温度的量具,温度计有 水银的和酒精的两种。常用 的是水银温度计。 使用温度计时要注意其量程,注意水银球部位玻璃极薄 (传热快)不要碰着器壁,以防碎裂,水银球放置的位置 要合适。如测液体温度时,水银球应置于液体中;做石油 分馏实验时水银球应放在分馏烧瓶的支管处。

实验仪器标准操作规程

实验仪器标准操作 规程

微波炉标准操作规程 1. 操作程序: 1.1插上电源,打开柜门,放进需要加热的物品,关上柜门。 1.2选择火力,融化培养基一般用中高火即可。 1.3选择时间:融化培养基须注意边加热边拿出观察培养基融化情况,防止培养基爆沸。其它物品加热时间视情况调整时间。1.4加热完毕,将定时器调至0位置,小心拿出加热物品,关闭柜门。 2.微波炉操作注意事项: 2.1 微波炉上不得堆放杂物,微波炉周边不应放置其它电子产品。 2.2炉内未放入加工原料时,不要通电工作,不可使微波炉空载运行,否则会损坏磁控管。 2.3 凡金属的餐具,竹器,塑料,漆器等不耐热的器皿,有凹凸状的玻璃制品,均不可放入炉内使用。瓷制碗碟不能镶嵌有金属边的容器,不能放入炉内。 2.4袋密封包装及金属罐的食品不能直接放入炉内,以免爆炸伤人。 2.5 一定要关好炉门,确保连锁开关和安全开关的闭合。 2.6炉子关掉后,不宜立即取出加热物品,因为此时炉内尚有余热,物品还可继续加工,应过1分钟后再取出物品。

2.7定期检查炉门四周和门锁,如有损坏,密闭不严,应停止使用。以防微波泄漏,不一把脸贴近微波炉观察窗,防止眼睛因微波辐射而损伤,也不宜长时间受到微波照射,以防止引起头晕,目眩,乏力,消瘦,脱发等症状,使人体损伤。 2.8如设备发生问题,第一时间告知主管,设备停止使用,报维修部维修。 2.9光波烹调为烧烤专用,一般情况下不使用光波烹调和组合烹调按钮。 WD-A型电子连锁传递窗标准操作规程 1 .操作程序: 1 .1电子连锁传递窗任何状态下只能打开一扇门,以达到两边空气的严格隔离。 1 .2接通传递窗电源红色电源指示灯亮,操作人员可经过两个按键操作菌灯或开门。 1 .3按开门键(红色钮),一侧门开,货物进入传递窗内,关窗门(据需要开启灭菌灯)。 1.4另一侧门按红色键,取出物品,关闭窗门(若灭菌完需先关闭紫外灯)。 1 .4停电应急开启:传递窗两侧都设有小孔,停电时只要在小孔内插入细铁丝往中间拨动即可开锁。 2维护和保养与清洁 2.1每次使用完毕均需要进行紫外照射舱体。

化学实验常用仪器的主要用途和使用方法

化学实验常用仪器的主要用途和使用方法 ①烧瓶:主要用于溶液之间或液、固之间的反应,可加热,但需垫石棉网,还可组装气体发生装置。 ②烧杯:主要用于液体之间的反应,溶解固体,配制溶液组装过滤器,可以加热,但需要垫石棉网。 ③锥形瓶:可用于反应容器,例如中和滴定;蒸馏实验中承接各种馏分,组装气体发生装置,可以加热,但需垫石网。 ④蒸发皿:用于浓缩溶液或去掉结晶水合物中的结晶水。可以直接加热。 ⑤试管:少量物质间的反应容器,组装简易气体发生装置,收集少量气体,可直接加热。 ⑥集气瓶:用于气体与其它物质的反应,收集气体。 ⑦广口瓶:用于组装气体发生装置 ⑧量筒:粗略量取液体的体积,不能用于反应容器,读取液体体积时应注意视线与凹液面的最低点相切。 ⑨容量瓶:用于准确量取一定体积的液体,或配制一定物质的量浓度的溶液。不能用做溶解的容器。 ⑩滴定管:中和滴定的主要仪器,也可用于准确量取液体。酸式滴定管不能盛放碱性试剂,碱式滴定管不能盛放酸性试剂和氧化性试剂。 胶头滴管:滴加少量液体用,不能倒置,滴加时尖嘴不能伸入容器内部(个别例外),应在接受容器上口边缘0.5cm处垂直滴加。 托盘天平:粗略称量质量用,使用前应先调好零点,使指针指在标尺中间,两边托盘放大小相同的纸,若称取有腐蚀性的药品时,应放在玻璃容器中称量,左盘放称量物,右盘放砝码。 酒精灯:需加热的实验中做热源。酒精灯中酒精的容量在 1/4~2/3 之间。用外焰加热,用完后用灯盖盖灭 漏斗:向小口容器内倾倒液体,制出有刺激性气味的极易溶于水的气体时用于组装尾气吸收装置,组装过滤装置。 分液漏斗:滴加液体时需控制滴加速率时用到,组装气体发生装置,分液、萃取。 长颈漏斗:添加液体,组装气体发生装置(用于形成液封)。 温度计:在需要控制温度的实验中用于测量温度,不能代替玻璃棒。 玻璃棒:搅拌,引流

试验仪器设备操作规程完整

三十、试验仪器设备操作规程 液塑限联合测定仪操作规程 1.将仪器放置在平面工作台上,调整水平螺旋脚,使水泡聚中。 2.将仪器的电源插头插好,打开电源开关,预热5分钟。测量前用手轻轻托起锥体至限位处,此时显示屏上的数字为随机数,测量时会自动消除。 3.将调好的土样放入试杯中,刮平表面,放到仪器上的升降座上,这时缓缓地向逆时针方向调节降旋纽,当试杯中的土样刚接触锥尖时,接触指示灯立刻发亮,此时应停止旋动,然后按测量键。 4.测量:按下测量键,锥体落下,与此同时,时间音响发出嘟。。。。的声音。当测量时间一到,叫声停止,此时显示屏上显示出5秒钟的入土深值。 第二次测量时,需将锥体再次向上托起至限位处,向顺时针方向调节升降旋纽至能改变锥尖与土的接触位置,(锥尖两次锥入位置不小于1厘米),将锥尖擦干净,再次测量,重复上述步骤进行。 分析电子天平操作规程 一、预热:通电后应进行预热,时间不低于60分钟。 二、开机:打开玻璃窗,按开/关键,显示屏全亮,然后显示CEO~CE8 进入天平的自动检测工作,一切正常则显示该天平

的型号。 三、分析电子天平校准 1、清除称盘上的物品,按去皮TARE键,使天平显示为“0”。 2、按校准CEL键,天平显示“C。 3、参照“技术参数表格”将相应数值的校准砝码放在称盘上。 4、约过几秒钟后,天平显示校准砝码数值,并发出“嘟”的一声,说明校准完毕,天平自动回到称重状态,去下砝码即可进行正常工作。 5、若天平不稳定或称盘上有物品时,按校准CAL键后,天平显示出错误信号“CE”,此时可将称盘上的物品拿掉,或清除不稳定因素,再按去皮TARE键,使天平返回到称量状态,重新操作。 四、分析电子天平称重 1、将待称物品放到称盘上,当稳定标志“g”出现时,表示读数已稳定,此时天平的显示值即为该物品的质量。 2、如需在称盘上称第二种物品,可按去皮TARE键,使天平显示为“0”。 3、放上第二种物品,显示值即为该物品的质量。 4、此时再按去皮TARE键,使天平显示为“0”。 5、将称盘上的物品全部拿掉,天平显示两物品的总质量。 五、关机使用完毕后清除称盘上的物品,然后按ON/OFF键,

分子生物学实验技术实验内容

2006 年《分子生物学实验技术》实验内容 RT-PCR (一)总 RNA的提取 实验安排:每两人抽提一管。为了使操作同步以节省时间,各组样品请一起离心。 操作步骤: TM(苯冰预冷的900μlLS -Biotragents液体样品加入 1.5ml Ep管中,再加入1、将100μ l 酚和异硫氰酸胍的混合物)。 2、将样品剧烈混合后,在室温放置5min。 3、加入200μl 氯仿,颠倒Ep 管混和两次,并剧烈振荡混和10s。 4、在4℃条件下,以10000×g 离心15min。 5、将上层水相转移到一个新的Ep 管中,加入等体积的异丙醇(Isopropanol)并混匀,然后在4℃放置至少10min。 6、在4℃条件下,以10000×g离心15min 后,小心并尽可能地去除全部上清夜。 7、用1ml 75%乙醇洗涤RNA 沉淀和管壁。 8、将RNA 沉淀进行干燥(不能完全干燥)处理后,用10μl 无RNase污染的水(RNase- Free Water)将RNA 溶解并于-20℃保存。 注意事项: 1、所有的玻璃器皿均应在使用前于180℃的高温下干烤6hr 或更长时间。 2、所用的塑料材料,如吸头、离心管等需用0.1% DEPC 水浸泡过夜。 3、配制的溶液应尽可能用0.1% DEPC,在37℃处理12hr 以上。然后用高压灭 菌除去残留的DEPC。不能高压灭菌的试剂,应当用DEPC 处理过的无菌双蒸水 配制,然后经0.22μm 滤膜过滤除菌。 4、操作人员需在超净工作台上操作,并戴一次性口罩、手套,实验过程中手套要勤换。 二)反转录 实验安排: 每人做一管反应体系(20μ l):按下列顺序加样 μl4 5× Buffer

试验仪器的操作规程

液塑限测定仪操作规程 1、调节底脚螺母,使工作面水平。 2、接通电源,放上测试土样,在使电磁头吸住圆锥仪,使微分尺垂直于光轴。 3、调节投影物镜,使微分尺影象清晰,在调零线调节旋扭,使屏幕上的零线与微分尺线影象重合。 4、转动平台升降螺母,当锥尖刚与土面接触,计时指示管亮,如果此时处于自动测量状态,则圆锥仪即自由落下,延时5秒,读数指示管亮,且机内蜂鸣器响,提示操作者读取数据。如处于手动测量状态,当锥尖与土面接触时,接触指示灯亮,而圆锥仪不下落,需按手动测量扭,圆锥仪才自由落下,延时5秒读数指示管亮,机内蜂鸣器响,可读取数据。 5、读数后,要按复位按扭,以便进行下一次测量。

砂浆稠度仪操作规程 1、将拌制好的试验用砂浆放入锥形盛料容器内。 2、调整锥架使标准锥体的尖端与砂浆混合物表面接触,并紧固好。 3、调节螺母使表针对准零位,移动表盘升降架使齿条滑杆下端与试锥滑杆上端轻轻接触。 4、松开螺钉使标准锥体以其自身重量沉入砂浆混合物中。 5、标准锥体不再往砂浆中沉入时,拧紧螺钉转动螺母使齿条滑杆向下滑动直至与试锥滑杆接触。此时即可在表盘上读出所测的沉入深度,以此深度即可查出相应的沉入体积。

水泥电动抗折试验机操作规程 1、接通电源。 2、调整零点(调整配重驼,使游驼在”0”位上;主杠杆处于水平上)。 3、清除夹具上圆异表面粘着的杂物,将试体放入抗折夹具内,并调整夹具将试件夹紧使主杠杆产生一个仰角(此仰角的大小根据试件存放天数和操作经验决定)。 4、按启动按钮指示灯亮(红)电动机带动丝杆转动,游驼移动加载,当加到一定数值时,试件折断主杠杆右端定位针压合微动开关电机停转,即可在主尺刻度上读取抗折强读的数值。 5、压游驼上的按内按钮推动游驼回到“0”位上。 6、试验完毕后关闭电源使游驼回复到“0”位上。

医学分子生物学实验技术

1、基因:是遗传的物质基础,是DNA 或者RNA分子中携带遗传信息的特定核苷酸序列。 2、基因组:是指单倍体细胞核、细胞器或病毒粒子所含的全部DNA 或RNA分子,每个生物的基因组携带者构成和维持该生物体生物形式所必需的所有生物信息。 3、逆转录:以RNA为模板,由反转录酶催化四种dNTP聚合,产生DNA的过程。 4、聚合酶链反应:是一种由引物介导利用DNA聚合酶在体外扩增目的基因的方法,也叫基因扩增技术。 5、限制性核酸内切酶:是一类能识别双链DNA分子中的某些特定核苷酸序列,并由此切割DNA双链的核酸内切酶。 6引物:是一种与DNA模板链互补的线性核苷酸变短,其3’末端为游离的-OH,细胞内复制所需的引物是一小段RNA。催化游离dNTP之间相互聚合。 7、TaqDNA聚合酶:从一种嗜热菌株中分离得到的耐热的DNA聚合酶。 8、退火:热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性,这一过程成为退火。 9、启动子:是位于转录起始点附近,且为转录所必需的序列元件。 10、DNA变性:当DNA收到某些理化因素作用时,DNA双链互补碱基对之间的氢键和相邻碱基之间的堆积力受到破坏,DNA分子被解开成单链,逐步形成为无规则线团的构象,不涉及核苷酸间共价键的断裂。

1、RT-PCR的基本原理 将RNA反转录与PCR过程结合的一种PCR技术,在反转录酶的作用下,以mRNA为模板,反转录生成DNA,再以cDNA为模板进行PCR扩增。 2、DNA电泳的基本原理,按照支持物不同可以分为几类 基本原理:核酸是两性电解质,在中性或偏碱性的pH溶液中均带负电,在电场中向正极泳动,不同的核酸在相对分子质量、分子形状等方面各有不同,在凝胶的空隙中泳动时电泳迁移率各不相同,因此借助电泳即可使其得到分离。 分类:1琼脂糖凝胶电泳AGE 2聚丙烯酰胺凝胶电泳PAGE 3 毛细管电泳 3、总RNA提取后,如何鉴定RNA的纯度 (1)紫外分光光度法:先通过A260与A280的比值判断核算的纯度,纯RNA的A260与A280的比值等于2.0,比值升高或降低均表示样品不纯。 (2)琼脂糖凝胶电泳法:基因组DNA的分子量远远大于RNA,两者之间电泳迁移率存在很大差别,用荧光染料EB为示踪剂的AGE即可观察到RNA分子中是否含有DNA,细胞RNA的琼脂糖凝胶电泳一般可见三条条带,条带模糊比例不合适及弥散明显说明RNA有严重降解。

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