农药残留快速检测流程(卡片法)

农药残留快速检测流程(卡片法)
农药残留快速检测流程(卡片法)

农药残留快速检测流程

一、前处理

(一) 市场抽样:市场蔬菜样品的抽取应从同一货批的不同位置随机取样。

1、包装蔬菜的抽样:对于包装蔬菜(周转箱、纸箱、袋装等),同一货批样品,随机抽样,每件样品的取样量为1公斤。

2、散装蔬菜的抽样:散装蔬菜的抽样应与其总量相适应,每一货批蔬菜至少抽取5个样点。在蔬菜个体较大情况下(大于2kg/个,样品至少由5个个体组成。

(二)样品的取样、制备和保存

1 随机取5-10克样品(叶菜类取叶尖部位,瓜果类连皮带肉取样),放入小烧杯中,用剪刀剪成0.5cm*0.5cm大小,加蒸馏水至刚好将样品浸没。

2 置于超声波清洗器中震荡3分钟(如没有超声波清洗器可以用玻璃棒搅动,使菜叶与水分充分接触用手振摇1分钟)。

3 第一批最好做9个检样,同时做一个纯净水空白对照。

4 每剪完一个样品,剪刀要洗净后方可处理另一个样品,以免互相污染。

5、样品制备:将抽取的蔬菜样品混合,缩减成两份,一份作为检验样品,一份作为留样。

6、样品保存:样品应尽快检测。当天不能检测,应保存于4度冷藏室中。留样应低温冷冻保存。

二、样品测定步骤

1 将农药残留速测仪接上电源预热,达到设定温度后即鸣笛提示。取出速测卡,先将透明膜盖揭去,将速测卡沿中线对折一下,按农药残留速测仪说明书中的要求,将橙色药片向上插入试纸槽中。

2 用滴管吸取少量提取液,滴三滴至药片上,使其形成一个饱满的水珠。

3 加样完毕后,按开始键(START),速测仪自动计时,10分钟反应结束后会发出急促的提示音,此时合上仪器上盖,让橙红色药片与白色药片接触,3分钟显色反应完成后发出和缓的提示音。

结果判定

打开速测仪上盖,观察和记录农药速测卡白色药片的颜色变化,蓝色为阴性,表明合格;浅蓝色为弱阳性,有微量农药残留,通常小于1mg/kg;白色为强阳性,表明农药残留大于1mg/kg

不合格。

三、检测后处理

1 将前处理装置,包括烧杯、滴管、剪刀等清洗干净,以免交叉污染。

2 用纸巾将仪器清洁,包括残留的水珠、菜叶、药片试剂。

3 定期拿酒精或蒸馏水擦拭仪器。

农药残留主要的检测方法

农药残留主要的检测方法1 农业生产中农药的应用地位 农业的可持续发展关系到国家经济建设和社会稳定的全局。农作物病、虫、草害等是农业生产的重要生物灾害。据资料记载中国有害生物为2,300多种,这些有害生物不仅种类多、分布广泛,而且成灾条件复杂,发生频繁。如不进行防治,每年将损失粮食总产量15%、棉花20%-25%、蔬菜25%以上。我国农药每年实际产量约40万吨,仅次于美国据世界第二位,年用量约27万吨,居世界前列。据统计,九十年代我国农业平均每年发生病虫草鼠44亿亩次,防治面积为49亿亩次,仅以防治有害生物计算,每年挽回的粮食损失即达6,500多万吨,相当于亿人的口粮(按每人每年200千克计算)。 在生物灾害的综合治理中,根据目前植物保护学科发展的水平,化学防治仍然是最方便、最稳定、最有效、最可靠、最廉价的防治手段。尤其是当遇到突发性、侵入型生物灾害发生时,尚无任何防治方法能够代替化学农药,唯有化学防治方能奏效。在可预见的未来,农业生产离不开农药。 2 农药残留检测的必要性 随着农业产业化的发展,农产品的生产越来越依赖于农药、抗生素和激素等外源物质。我国农药在粮食、蔬菜、水果、茶叶上的用量居高不下,而这些物质的不合理使用必将导致农产品中的农药残留超标,影响消费者食用安全,严重时会造成消费者致病、发育不正常,甚至直接导致中毒死亡。农药残留超标也会影响农产品的贸易。

3 农药残留主要的检测方法 国际上用于农药残留快速检测方法种类繁多,究其原理来说主要分为两大类:生化测定法和色谱快速检测法。 生化检测法是利用生物体内提取出的某种生化物质进行的生化反应来判断 农药残留是否存在以及农药污染情况,在测定时样本无需经过净化,或净化比较简单,检测速度快。生化检测法中又以酶抑制法和酶联免疫法应用最为广泛。 色谱快速检测法通过尽可能的简化样品净化步骤,直接提取进样分析蔬菜和水果中的有机磷类农药残留。上述快速检测方法在具体应用中可以根据实际情况和方法各自适用范围及优缺点来选择使用。 (一)、农药残毒速测法 农药残毒速测法只限于检测蔬菜和水果中的有机磷和氨基甲酸酯类农药残毒,是依据有机磷和氨基甲酸酯类农药抑制生物体内乙酰胆碱酯酶的活性来检测上述两类农药残毒的原理。 近年来,每年因食用残留量严重超标农产品引起急性中毒事故时常发生,特别是食用了高毒有机磷类农药和氨基甲酸酯类农药严重超标的蔬菜和水果极易引起急性中毒,甚至导致食用者死亡。由于蔬菜、水果类鲜食农产品保存时间相对短的特点,因此市场急需有机磷和氨基甲酸酯类农药(这两种农药中高毒农药比例大,比如甲胺磷、对硫磷、氧化乐果、甲拌磷、克百威、涕灭威等)残毒快速检测方法。 农药残毒速测法可以快速检测上述两类农药严重超标的蔬菜、水果,通过将一部分含农药残毒的蔬菜不允许上市场,达到防止食用引起急性中毒问题出现。同时该方法还具有短时间能够检测大量样本、检测成本低,对于检测人员技术水平要求低,易于在基层(如:蔬菜、水果生产基地和批发市场等)推广等特点,是目前阶段我国控制高毒农药残留的一种有效方法,也是目前国内应用最为广泛的农药残毒快速检测方法。但是农药残毒速测法也有其本身局限性,如:检测农药种类只限于有机磷和氨基甲酸酯类农药,不能给出定性、定量检测结果,检测限普遍高国际和国内规定的残留限量标准值,因此不能作为法律仲裁依据。农业部农药检定所依据酶抑制法原理制定了甲胺磷、氧化乐果等8种有机磷农药,克百威、涕灭威等10种氨基甲酸酯类农药的蔬菜农药残毒快速检测法农业行业标准。尽管农药残毒快速检测法还存在一定缺陷,但是在东南亚一些国家如韩国、泰国、越南以及我国的台湾、香港地区仍然得到了广泛使用,特别是在台湾应用是从1985开始,经过20多年的持续发展,已经形成了一整套完整的管理制度,快速检测方法涵盖苯硫磷等27种有机磷、丁硫克百威等13种氨基甲酸酯类农药。

蔬菜农药残留快速检测技术介绍及注意事项

蔬菜农药残留快速检测技术介绍及注意事项 发布时间:2009-9-30责任编辑:ggxnongab点击:165来源:甘谷县农安办 农药是把“双刃剑”,它是当前农业生产用于防治病、虫、杂草对农作物危害不可缺少的有毒化学物质,对促进农业增产有极其重要的作用。但是由于长期大量地不合理使用农药,极易形成农药残留。农药残留指使用农药后残留于生物体、农副产品和环境中的微量农药及其有毒的代谢物的总量。鉴于目前我国出现的农产品安全性问题以农药残留污染最为常见和严重,监控农药的合理使用,杜绝农药残留超标产品上市销售成为农产品质量安全工作的重中之重。控制农产品中农药残留量的关键环节之一就是对农产品中农药残留量及时、准确的分析检测,因此,在流通领域中加强对农残的快速检测已成为十分必要的监管措施。 一、农药残留检测方法 农药残留检测方法大致可分为三大类:生物测定法、化学分析法、兼生物及化学的免疫分析法和生化检测法。 (一)、农药残留的生物测定技术 利用指示生物的生理生化反应来判断农药残留及其污染情况,该方法一般作为引起中毒农产品现场检测。 (二)、农药残留的化学检测 用于农药残留的化学检测方法有分光光度法、极谱法、原子吸收光谱法、薄层层析法、气相色谱法、液相色谱法、同位素标记法、核磁共振波谱法、色质联用法等,这些分析方法有的灵敏度不高,有的需要昂贵的仪器,还有的需要特殊的设备。 (三)、农药残留的生化检测 有机磷与氨基甲酸酯农药共为神经系统乙酰胆碱脂酶抑制物,因此可以利用农药靶标酶-乙酰胆用碱酯酶(AChE)受抑制的程度来检测有机磷和氨基甲酸酯类农药。该方法具有快速方便、前处理简单、无需仪器或仪器相对简单,适用于现场的定性和半定量测定,目前已开发出了相应的各种速测卡和速测仪。我国现阶段的农药残留快速检测就是用了该方法,已上升为农业部行业标准,标准号为NY/T448-2001,名称为蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类农药残毒快速检测方法,但方法只能用于测定有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂,其灵敏度和所使用的酶、显色反应时间和温度密切相关,经酶法检测出阳性后,需用标准仪器检验方法进一步检测,以鉴定残留农药品种及准确残留量。 (四)、农药残留的免疫分析法 有放射性免疫分析、酶免疫分析、多组份分析物免疫分析、免疫传感器分析等,因为免疫法成品试剂盒依赖从国外进口,没有大范围推广使用。 二、速测仪法(酶抑制分光光度法)介绍 由农药残留生化检测法开发的速测卡法(酶抑制显色纸片法)和速测仪法(酶抑制分光光度法),前者在80年代在省级部门小范围使用过,后被后者取代。目前我省广泛使用农药残留检测方法主要有两大类—色谱检测法和速测仪法。色谱检测法用作农残定量分析,可为农药残留执法提供

蔬菜农药残留的快速检测方法原理及检验标准

蔬菜农药残留的快速检测方法原理及检验标准 1、目前农药在蔬菜中残留的问题 1.1、农药是把“双刃剑”,对促进农业增产有极其重要的作用。但由于农药本身固有的化学属性和对其使用不当,导致农产品农药残留严重超标,严重危害到广大人民群众的健康。 1.2、在我国农药中,70%为有机磷农药,而在我国生产使用的有机磷农药中,70%为剧毒、高毒类,而且较多是禁止在蔬菜作物上使用的。 2、农药中毒事件常有报道,究其原因 2.1、农产品不按规定的用药量、次数、方法或安全间隔期施药,或施用不允许在蔬菜上使用剧毒、高毒类农药; 2.2、现在标准施行的农药残留测定需要通过有机溶剂提取、净化和用大型分析仪器进行,无法对廉价的蔬菜进行随时随地或快速检测而形成的监管不到位。 3、农药分类: 3.1、矿物源农药 3.1.1、有效成分起源于矿产无机物和石油的农药。 3.1.2、代表有硫酸铜、硫磺、石硫合剂、磷化铝、磷化锌和石油乳剂等。 3.2、生物源农药

3.2.1、包括植物源农药和动物源农药及微生物源农药。 3.2.2、植物类别有植物毒素、植物内源激素、植物源昆虫激素、拒食剂、引诱剂、驱避剂、绝育剂、增效剂、植物防卫素、易株克生物质等。 3.2.3、动物资源开发的农药包括动物毒素、昆虫激素、昆虫信息素和天敌等。 3.3、按作用方式分类 3.3.1、胃毒素农药(敌百虫、敌敌畏、甲胺磷、马拉硫磷) 3.3.2、触杀性农药(对硫磷、敌敌畏、甲胺磷、马拉硫磷) 3.3.3、内吸性农药(乐果、甲胺磷、氧乐果、久效磷) 3.3.4、熏蒸性农药(溴甲烷、磷化铝、敌敌畏) 3.3.5、特异性农药(乙烯利、毒霉素、灭幼脲) 4、目前所使用的农药按其化学结构大致可以分为以下几类: 有机氯类、有机磷类、氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类、杂环类化合物、其他(苯氧羧酸类、脲类化合物)等。 A、有机磷类 敌敌畏、甲拌磷、乐果、对氧磷、对硫磷、喹硫磷、优杀硫磷、敌百虫、氧化乐果、磷胺、甲基嘧啶磷、马拉硫磷、辛硫磷、亚胺硫磷、甲胺磷、地亚农、甲基毒死蜱、毒死蜱、倍硫酸、杀扑磷、乙酰甲胺磷、巴胺磷、甲基对硫磷、杀螟硫磷、异柳磷、异柳磷等。 B、有机氯类 α -666、β -666、γ-666、δ-666、op -DDE、pp’-DDE、op’-DDD、pp’-DDT、op’-DDT、异菌脲、五氯硝基苯、林丹、乙烯菌核利、三氯杀螨醇、功夫、氯硝胺、百菌清、粉锈宁、甲氯菊酯、氯菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯等。 C、氨基甲酸酯类 涕灭威砜、涕灭威亚砜、灭多威、3-羟基呋喃丹、涕灭威、呋喃丹、甲萘威、叶蝉散、仲丁威、速灭威等。 d、拟除虫菌酯类

农药残留快速检测规程

上海浩丰果蔬专业合作社 农药残留快速检测规程 一、目的:对基地的原料进行农残检测,以确保原料符合相应的法律法规和客户要 求。 二、范围:适用于基地所有原料蔬菜的农药残留快速检测。 三、职责:基地采收负责人从即将采收的地块中选取菜样交给基地检测员检测。检测 员负责完成原料蔬菜的农残检测,填写检测记录。 四、操作流程 1、采收负责人在采收前一天按照取样程序选取菜样后交给检测员检测。 2、检测员在收到菜样后须在24 小时内完成检测。 3、检测前需对检测器具状况、试剂库存数量进行检查,清洁操作台,保证检测过 程顺利进行。 4、农残检测具体操作过程参照CNY-858C型残留农药测试仪试剂配制及使用说明执 行。 5、检测完毕后,出具检测报告,对不合格样品及时通知采收负责人并采取相应措 施。 6、清洁检测室及检测器具,锁闭检测室。 7、农场场长审核检测结果,签字确认后存档,有效期为二年。 五、检测室管理 1、农残检测室是确保食品安全的场所,要专室专用,不得存放公私杂物,不得进行 其他无关活动。 2、检测室由专人负责,需经常保养,及时维修,做好防腐、防锈、防虫等工作。 3、检测室须保证设备齐全,分类存放,布局规范,整齐清洁。 4、爱护仪器设备,出现故障要及时维修,不能维修的要及时购买新的补充。 5、建立健全设备仪器档案,保留产品说明、维修记录等。 6、严格按照规定操作,冷静处理意外情况。 7、做好安全用电、用水、防火、防盗、防污染等工作,避免造成人身伤害和财 产损失

蔬菜原料田间取样程序 一、 叶类蔬菜取样方法:去掉明显腐烂和萎蔫部分的茎叶,菜花和花椰菜分析花序 和茎。采集样本量至少为4个?12个个体,不少于1kg 。代表种类:菠菜、甘蓝、 大白菜、萬苣、甜菜叶、花椰菜、萝卜叶、菊苣等。 二、 果菜类(果皮可食)取样方法:除去果梗后的整个果实 ,采集样本量为6个?12 个个体,代表种类有:黄瓜、胡椒、茄子、西葫芦、西红柿等。 三、 采收负责人提前确定采样批次、地点,并准备好相关器具:不锈钢刀、铁铲、 样品纸袋(箱)、样品标签、铅笔等。 四、 布点:一般采用定点法(5点法)和对角线法(5?15个点),混合采样。 五、 具体方法: 对于采样区面积较小(10亩以内),地势相对平坦均匀的地块,采用定点法,设点 5 个; 对于采样区面积较大(10亩以上),或地块形状不够平坦和规范的地块, 采用对角线 法,设分点10-15个; 对于单个大棚内的采样, 六、 各分点混匀后用四分法取0.5-1kg 样品装入样品袋,多余部分弃去。 七、 对每一样品粘贴标签进行区分,详细记录。 責 ☆ ☆ ☆ ☆ ☆ ☆ ☆ ☆

食品中农药残留检测实验方法步骤(精)教学内容

食品中农药残留检测实验方法步骤(精)

实验一粮食、水果和蔬菜中有机磷农药测定的气相色谱法 Experiment 1 Determination of Organophosphorus Pesticide Residues in Foodstuff, Fruits and Vegetables by Gas Chromatographic Method 1. 方法原理 样品中有机磷农药残留在加入无水硫酸钠后,用有乙酸乙酯提取、过滤、浓缩、定容,用气相色谱氮磷检测器(NPD或火焰光度检测器(FPD检测,根据色谱峰的保留时间定性,外标法定量。 2. 方法适用范围 本法规定了粮食(大米、小麦、玉米、水果(苹果、梨、桃等、蔬莱(黄瓜、大白菜、西红柿等中速灭磷(mevinphos、甲拌磷(phorate、二嗪磷(diazinon、异稻瘟净(iprobenfos、甲基对硫磷(parathionmethyl、杀螟硫磷(fenitrothion、溴硫磷(bromophos 、水胺硫磷(isocarbophos、稻丰散(phenthoate、杀扑磷(methidathion等多组分残留量的测定。 3. 仪器与试剂 3.1 试剂 无水硫酸钠:分析纯,650℃灼烧4h ,冷却后贮于密闭容器中备有。丙酮:分析纯,重蒸馏。 乙酸乙酯:分析纯,重蒸馏。 所需有机磷农药标准溶液:纯度≥98.0%。 3.2 仪器与设备 气相色谱仪:配FPD 或NPD 高速组织捣碎机

微量注射器:5μL ,10μL 。 梨形瓶:200mL 具塞刻度试管:10mL 。 鸡心瓶:100mL 。 4. 样品处理步骤 4.1 提取和净化 称取试样25.0g 置于组织捣碎机中,加入25.0g 无水硫酸钠和50.0mL 乙酸乙酯,高速匀浆3min ,提取液经铺有无水硫酸钠的漏斗过滤,残渣用10mL 乙酸乙酯洗涤2次,合并滤液于梨形瓶中,用旋转蒸发器在45℃水浴减压浓缩后定容至5.0mL ,采用GC 测定。在分流/不分流进样口的玻璃衬管中填入0.5cm 高的石英棉,进样70次后,更换石英棉。 4.2 测定 4.2.1 色谱条件 (1 色谱柱:BP-10石英毛细管柱(25m×0.22mm×0.35μm (2 色谱柱温度:60(2min→10/min→200(0.2min →2/min→250℃℃℃℃℃ (3 进样口温度:270℃ (4 检测器温度:270℃ (5 载气和尾吹气:N2≥99.99%,0.5mL/min,尾吹气:35mL/min (6 氢气(FPD:40mL/min;空气(FPD:120mL/min (7 进样方式:不分流进样

蔬菜农药残留的快速检测方法原理及检验标准

蔬菜农药残留的快速检测方法原理及检验标准、目前农药在蔬菜中残留的问题1、农药是把“双刃剑”,对促进农业增产有极其重要的作用。但由于 农药本身固有的化学属性和对其1.1 使用不当,导致农产品农药残留严重超标,严重危害到广大人民群众的健康。为剧毒、高毒类,而70%1.2、在我国农药中,70%为有机磷农药,而在我国 生产使用的有机磷农药中,且较多是禁止在蔬菜作物上使用的。、农药中毒事件常有报道,究其原因2、农产品不按规定的用药量、次数、方法或安全间隔期施药,或施用不 允许在蔬菜上使用剧毒、高毒2.1 类农药;、现在标准施行的农药残留测定需要通过有机溶剂提取、净化和用大型分析仪器进行,无法对廉价的2.2 蔬菜进行随时随地或快速检测而形成的监管 不到位。、农药分类:3、矿物源农药3.1 3.2、生物源农药 3.3、按作用方式分类目前所使用的农药按其化学结构大致可以分为以下几类:4、有机氯类、有机磷类、氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类、杂环类化合物、其他(苯氧羧酸类、脲类化合物)等。A、有机磷类敌敌畏、甲拌磷、乐果、对氧磷、对硫磷、喹硫磷、优杀硫磷、敌百虫、氧化乐果、磷胺、甲基嘧啶磷、马拉硫磷、辛硫磷、亚胺硫磷、甲胺磷、地亚农、甲基毒死蜱、毒死蜱、倍硫酸、杀扑磷、乙酰甲胺磷、巴胺磷、甲基对硫磷、杀螟硫磷、异柳磷、异柳磷等。B、有机氯类、异菌脲、op'-DDT、op'-DDD、pp'-DDT、、δ、-666α、β-666γ-666、-666、op -DDEpp'-DDE五氯硝基苯、林丹、乙烯菌核利、三氯杀螨醇、功夫、氯硝胺、百菌清、粉锈宁、甲氯菊酯、氯菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯等。C、氨基甲酸酯类仲丁威、速灭威等。呋喃丹、甲萘威、3-羟基呋喃丹、涕灭威、叶蝉散、灭多威、涕灭威砜、涕灭威亚砜、、拟除虫菌酯类d联苯菊酯、二氧苯醚菊酯、功夫菊酯、溴氰菊酯、氰戊菊酯、氟氰菊酯、氟氯氰菊酯,戊菊酯、甲氰菊酯、氯氟氰菊酯、呋喃菊酯、苄呋菊酯、右旋丙烯菊等。 5、最大残留限量标准 最大残留限量(Maximum Residue Limit,MRL) 在农畜产品中农药残留的法定最高允许浓度,又称最高残留限量,以每千克农畜产品中农药残留的毫克数(毫克/千克)表示。 目的:控制食品中过量农药残留以保障食用者安全,对超标的产品采取措施,即禁止食用。执行和指导合理用药,农产品监测超标时,表明未按规定用药。减少国际贸易纠纷,各国均制订本国的MRL。 《食品中农药最大残留限量》标准. A、GB2763-2014,规定了387种农药最高残留限量。国家标准作为一项加强农药管理的措施。 B、其中,针对蔬菜、水果、茶叶等鲜食农产品农药残留超标多发、易发问题,新标准重点增了蔬菜、水果等鲜食农产品的限量标准。水果农药残留限量增加473项,蔬菜(包括食用菌)农药最大残留限量增加431项。 6、高毒农药禁限用管理措施 6.1、农业部、工业和信息化部、环境保护部、国家工商行政管理总局和国家质量监督检验检疫

农残快速检测原理及操作流程

农残快速检测原理及操作流程 农残快速检测原理:有机磷和氨基甲酸酯类农药是我国目前使用量最大的农药,而且较多的是禁止使用在果品、蔬菜上的。该类农药在生物体内可以与乙酰胆碱酯酶(Ache)结合,并不易分离,即乙酰胆碱酯酶的活性被抑制,致使人体神经传导中的乙酰胆碱不能水解而积累,神经过度兴奋,出现中毒症状甚至死亡。 基于此原理,以乙酰胆碱酯酶同蔬菜的萃取液反应,若受到抑制即表示该萃取液中含有有机磷或氨基甲酸酯类农药的残留,由于酶的活性被破坏,使之不能正常分解乙酰胆碱,根据乙酰胆碱酯酶活性变化程度来测定果品蔬菜样品中的残留农药。 农残检测操作流程:(SJ-10农药残留检测仪)(在网方式) (一)、前期准备 1、启动SJ-10农药残留检测仪让其自检并预热10~15分钟,以确保光源稳定; 2、打开电脑,登录复讯农药残留检测系统,进行端口设置并连接检测仪。 3、对前一天对照液的参照值及检测信息进行清零。 (二)、对照液的制备及测试 1、对照液的制备取酶100ul,缓冲液2.5ml,加入比色皿中,混匀,再加入显色剂100ul,底物20ul。摇匀后立即将比色皿放入仪器中

进行对照测试。 2、对照液测试结果的保存测试结果应在0.3~0.8之间,若超出此范围,疑似操作有误或显色时间过长,需重做,直至合格后保存结果。 (三)、待测样品信息的录入:按待测样品的编号顺序录入该样品的生产、被检单位,样品名称、检测标准等信息。 (四)、检测样品液的制备 1、取2g果蔬样品(叶菜剪成1厘米见方的小片,瓜果取1厘米见方的横截面)放入三角瓶中,加入10ml缓冲液,振荡提取2分钟后过滤,取出清夜即为待测试液; 2、取酶100ul,待测液2.5ml,加入比色皿中,混匀(静置抑制10分钟)后,加入显色剂100ul,底物20ul。盖上比色皿颠倒两次后立即把比色皿放入仪器中进行样品测试。 农残检测结果判定:(SJ-10农药残留检测仪) 1、若样品的抑制率小于50%,说明试样中的农药残毒性小,该样品合格; 2、若样品的抑制率大于或等于50%,说明试样中的农药残毒性大,该样品不合格,通知暂停交易,并进行追踪改进和报告主管部门; 3、若样品的抑制率在40%~50%之间为疑似农残超标样品,需复查。如果复查后抑制率还是在40%以上,则需气相色谱等仪器分析法作进一步的确认或通知暂停交易,并进行追踪改进和报告主管部门。

蔬菜农残速测与农药速测卡

蔬菜农残速测与农药速测卡 一、蔬菜农残速测工作守则 为进一步推进和规范蔬菜农药残留速测工作,提高从业人员的素质和速测技术水平,特制定本工作守则。 1、蔬菜农药残留速测人员(以下简称检测人员)必须具有良好的职业道德,严格的科学态度, 认真的工作作风,对国家、对人民、对集体高度的负责。 2、检测人员应具备初中以上文化程度,并接受专门的技术培训。具有相应的岗位操作证书。 3、检测人员应每年接受相关技术培训1~2次,以利提高自身的业务水平。 4、检测人员应熟悉掌握所使用的仪器性能及操作方法;严格按照速测技术操作规程进行工作; 不准擅自增减操作步序、试剂数量和等待时间。 5、速测过程中,检测人员必须对每一个检测数据负责。不受任何干扰,如实汇总和上报检测结 果,并在汇总上报数据材料上签名。 6、蔬菜农药残留速测室应具备独立、干净、整洁,满足速测需要的环境条件。检测所用的仪器、 设备以及酶、试剂等必须是经有关权威部门检验合格的产品。 7、采样应遵循真实、随机和如实反映客观情况的原则。所采样本应选正在上市的或即将上市的 蔬菜。每一速测批次不少于20个样本,每样本数量不少于200~500克。 8、样本采集后,应分别保存。并应在24小时内检测完毕。采集的样本应标明生产者、品种、 生产地点(或田块)、采样日期。 9、对于某些可疑数据,应进行3次重复测试,选取相对一致的数据作为速测结果。 10、如对检测数据产生异议或有争议的,可请上级主管部门重检,也可委托有资质的检测机构 检测,检测费由双方协商解决。 11、每次速测开始前,检测人员应对仪器进行校验,校验合格方可试用。如有问题,应及时与 仪器生产厂家联系,尽快予以解决。 12、每次检测完毕,应对仪器进行适当维护,擦试干净,放于通风、干燥处。当次检测结束, 应将仪器及配件认真擦试,装箱保存,保持仪器的干燥、清洁。 13、在检测过程中,对用过的试管、烧杯、比色皿等要及时用蒸馏水冲洗干净;每次检测完毕, 对用过的烧杯、试管等都应认真清洗后,放于干燥处,盖上清洁纱布,以防灰尘。 14、配制好的试剂、酶、底物等检测液应置于4℃的冰箱内保存。 15、检测人员有责任对速测的仪器、设备及配套的试剂进行定期检查、维修、校正,以保证工 作的正常开展。 16、检测人员如不遵守工作守则,在检测过程中出现严重失误或失责的,应调离本岗位。造成 严重后果的,将追究经济和行政责任。 17、个别检测人员由于不按操作规程检测而多次出现失误的(虽未出现事故),经批评、教育不 改的,应建议调离本岗位。 18、对认真工作,忠于职守,取得突出成绩的检测人员,建议上级有关部门给予必要的奖励。

农药残留检测仪操作流程

农药残留检测仪操作流程 一、农药残留的危害 可以说,蔬菜最大的食品安全问题就是农药残留所造成的危害。遗憾的是,现代农业已经离不开农药了,我们的餐桌上几乎找不到没喷洒过农药的蔬菜。我们只能要求蔬菜中的农药残留量在安全范围内。 那么,现状又怎样呢?全世界每年大约有200万人因农药污染而得病,其中死亡人数高达4万左右。农药残留的危害不仅是造成急性中毒,更令人担忧的是慢性中毒,以及致癌、致畸和致突变。因为这些危害进程缓慢,往往容易被忽视,对人体的危害性更大。现代农业已经离不开农药了,我们的餐桌上几乎找不到没喷洒过农药的蔬菜。农药残留检测仪在快速检测果蔬农药残留上的应用 二、使用农药有哪些安全问题 一是违反规定大量使用剧毒或高毒农药。有的菜农为了追求杀虫效果、节省成本,使用国家禁用的剧毒或高毒农药。这些农药虽然杀虫效果好,用量少,费用低廉,但对人体的危害非常大。 二是施用农药的安全间隔期大大缩短。农药喷洒在蔬菜上以后会逐渐分解,杀虫作用也逐渐减弱、消失。经过一定天数后,残留的农药对人的毒性就小了。所以,农作物经过施药以后,过了安全间隔期再食用,就比较安全。由于各种农药的稳定性存在差异,不同农药对各种农作物的安全间隔期也各不相同。让人忧心的是,在蔬菜供应紧张的季节,有少数不法菜农为了抢季节、卖高价,今天施药,短短几天后就收割上市供应。这些农药残留量高的蔬菜如果在食用前未经彻底清洗,就可能引发中毒事件。 一、简述 检测标准:依据国家标准方法(GB/T5009.199-2003)以及世界卫生组织WHO、世界粮农组织FAO残留农药检测标准、世界环境保护局EPA参照摄入量等要求来设计。采用酶抑制率比色法对水果、蔬菜等农林产品中有机磷和氨基甲酸酯类农药含量进行快速准确的检测。 1.1适用范围 本仪器适用于种植基地、批发市场、超市、餐厅、及相关监管部门的农药残留速测。 1.2主要特点 1、主控芯片:采用32位ARM处理器,运转速度更快,稳定性强。 2、显示方式:5英寸触摸屏,人性化操作界面,操作直观、简单。 3、打印功能:高速热敏打印机,检测完成可自动打印检测报告。 4、分析光源:采用进口单波长冷光源,具有功耗低、精度高、稳定性强、响应速度快等优点。 5、移动存储:可外接U盘保存检测结果,方便数据管理 6、便携电源:直流12V供电,安全便捷,可直接和车载电源连接。 7、检测速度:三分钟出结果,并可根据实际情况调整检测时间。 8、汉字录入:内置拼音输入法,可编辑相关中英文信息。 9、菜名管理:内置常见蔬菜水果数据库,可继续添加和删除。 10、可配通道:各通道独立工作,不用的可关闭,每个通道可选择不同种类蔬菜名称。

农药残留快速检测流程(卡片法)

农药残留快速检测流程 一、前处理 (一) 市场抽样:市场蔬菜样品的抽取应从同一货批的不同位置随机取样。 1、包装蔬菜的抽样:对于包装蔬菜(周转箱、纸箱、袋装等),同一货批样品,随机抽样,每件样品的取样量为1公斤。 2、散装蔬菜的抽样:散装蔬菜的抽样应与其总量相适应,每一货批蔬菜至少抽取5个样点。在蔬菜个体较大情况下(大于2kg/个,样品至少由5个个体组成。 (二)样品的取样、制备和保存 1 随机取5-10克样品(叶菜类取叶尖部位,瓜果类连皮带肉取样),放入小烧杯中,用剪刀剪成0.5cm*0.5cm大小,加蒸馏水至刚好将样品浸没。 2 置于超声波清洗器中震荡3分钟(如没有超声波清洗器可以用玻璃棒搅动,使菜叶与水分充分接触用手振摇1分钟)。 3 第一批最好做9个检样,同时做一个纯净水空白对照。 4 每剪完一个样品,剪刀要洗净后方可处理另一个样品,以免互相污染。 5、样品制备:将抽取的蔬菜样品混合,缩减成两份,一份作为检验样品,一份作为留样。 6、样品保存:样品应尽快检测。当天不能检测,应保存于4度冷藏室中。留样应低温冷冻保存。

二、样品测定步骤 1 将农药残留速测仪接上电源预热,达到设定温度后即鸣笛提示。取出速测卡,先将透明膜盖揭去,将速测卡沿中线对折一下,按农药残留速测仪说明书中的要求,将橙色药片向上插入试纸槽中。 2 用滴管吸取少量提取液,滴三滴至药片上,使其形成一个饱满的水珠。 3 加样完毕后,按开始键(START),速测仪自动计时,10分钟反应结束后会发出急促的提示音,此时合上仪器上盖,让橙红色药片与白色药片接触,3分钟显色反应完成后发出和缓的提示音。 结果判定 打开速测仪上盖,观察和记录农药速测卡白色药片的颜色变化,蓝色为阴性,表明合格;浅蓝色为弱阳性,有微量农药残留,通常小于1mg/kg;白色为强阳性,表明农药残留大于1mg/kg 不合格。 三、检测后处理 1 将前处理装置,包括烧杯、滴管、剪刀等清洗干净,以免交叉污染。 2 用纸巾将仪器清洁,包括残留的水珠、菜叶、药片试剂。 3 定期拿酒精或蒸馏水擦拭仪器。

蔬菜中农药残留检测方法研究

蔬菜中农药残留检测方法研究 【摘要】随着栽培技术的不断进步,农药残留的问题越来越严重,对消费者的身体健康构成了严重威胁。开展蔬菜中农药残留检测方法的研究是控制农药残留保证食品安全的基础,具有重大的意义。本文介绍了蔬菜中农药残留检测的各种方法并对前景进行了展望。 【关键词】蔬菜、农药残留、检测、研究进展 随着栽培技术的不断进步,蔬菜的生长期已越来越短,而随着环境污染的加剧,蔬菜的病虫害也越来越重,绝大部分蔬菜需要连续多次放药后才能成熟上市。农药污染较重的有叶类蔬菜,其中韭菜、油菜受到的污染比例最大。茄果类蔬菜如青椒、番茄等,嫩荚类蔬菜如豆角等,鳞茎类蔬菜如葱、蒜、洋葱等,农药的污染相对较小。农药残留监测体系的建立,对农药残留的监测手段和检测水平提出了更高要求,并促进了农药残留快速检测方法的研究和应用进展,使农药残留检测技术朝着更加快速方便、灵敏可靠的方向发展,逐渐以农药残留专业检测机构的少量检测为中心,向现场检测及实验室的大量检测辐射翻。 1 仪器分析法 由于农药的活性成分大多是小分子有机化合物,故多使用气相色(GC,)~41、高效液相色谱(HPLC,)~、气相色谱一质谱联用(GC-MS)嘲和高效液相色谱一质谱联用(HPLC—Ms)同等技术。其中研究最多的是色质联用技术。因为色质联用特别适合于多种标样残留分析,所以国外把它也划为农药残留快速检测技术之列。大部分农药(如有机氯、有机磷、拟除虫菊酯等)残留可使用GC—MS检测昀,检出限一般为1~10 b~g/kg,但对分子量较大、极性或热不稳定性太强的农药及其化合物,GC-MS不适用,需采用高效液相色谱一质谱联用(HPLC-MS)和其他的方法来检测。 1.1 固相萃取技术 固相萃取法是1种基于液相色谱分离机制的样品制备方法,已广泛应用于农药残留检测工作。它根据液相分离、解析、浓缩等原理,使样品溶液混合物通过柱子后,样品中某一组分保留在柱中,选择合适的溶剂把保留在柱中的组分洗脱下来,从而达到分离、净化的目的。SPE克服了液一液萃取技术及一般柱层析的缺点,具有高效、简便、快速、安全、重复性好、便于前处理自动化等特点。根据柱中填料大体可分为吸附型(如硅胶、大孔吸附树脂等)、分配型(c。,c 、苯基柱等)和离子交换型。1L.R_odriguez等人采用固相萃取法通过改变移动相中缓冲液的浓度、pH值、表面活性剂的浓度和类型对蔬菜中的木精、笨基苯酚、锑比灵和有机磷残留量进行分析,结果表明:pH9.2,缓冲液中含有4mmoUL硼酸和75mmol/L胆酸钠能够得到最好的结果。 1.2 固相微萃取 加拿大Waterloo大学Pawliszyn 1990年首创的一种无需溶剂的萃取技术,它是在固相萃取的基础上发展起来的一种新型的预处理技术。SPME技术由固相萃取技术(SPE)发展而来,对目标化合物有较好的选择性,并且有较高的灵敏度,

食品中农药残留检测实验方法步骤(精)

实验一粮食、水果和蔬菜中有机磷农药测定的气相色谱法 Experiment 1 Determination of Organophosphorus Pesticide Residues in Foodstuff, Fruits and Vegetables by Gas Chromatographic Method 1. 方法原理 样品中有机磷农药残留在加入无水硫酸钠后,用有乙酸乙酯提取、过滤、浓缩、定容,用气相色谱氮磷检测器(NPD或火焰光度检测器(FPD检测,根据色谱峰的保留时间定性,外标法定量。 2. 方法适用范围 本法规定了粮食(大米、小麦、玉米、水果(苹果、梨、桃等、蔬莱(黄瓜、大白菜、西红柿等中速灭磷(mevinphos、甲拌磷(phorate、二嗪磷(diazinon、异稻瘟净(iprobenfos、甲基对硫磷(parathionmethyl、杀螟硫磷(fenitrothion、溴硫磷(bromophos 、水胺硫磷(isocarbophos、稻丰散(phenthoate、杀扑磷(methidathion等多组分残留量的测定。 3. 仪器与试剂 3.1 试剂 无水硫酸钠:分析纯,650℃灼烧4h ,冷却后贮于密闭容器中备有。丙酮:分析纯,重蒸馏。 乙酸乙酯:分析纯,重蒸馏。 所需有机磷农药标准溶液:纯度≥98.0%。 3.2 仪器与设备 气相色谱仪:配FPD 或NPD 高速组织捣碎机

微量注射器:5μL ,10μL 。 梨形瓶:200mL 具塞刻度试管:10mL 。 鸡心瓶:100mL 。 4. 样品处理步骤 4.1 提取和净化 称取试样25.0g 置于组织捣碎机中,加入25.0g 无水硫酸钠和50.0mL 乙酸乙酯,高速匀浆3min ,提取液经铺有无水硫酸钠的漏斗过滤,残渣用10mL 乙酸乙酯洗涤2次,合并滤液于梨形瓶中,用旋转蒸发器在45℃水浴减压浓缩后定容至5.0mL ,采用GC 测定。在分流/不分流进样口的玻璃衬管中填入0.5cm 高的石英棉,进样70次后,更换石英棉。 4.2 测定 4.2.1 色谱条件 (1 色谱柱:BP-10石英毛细管柱(25m×0.22mm×0.35μm (2 色谱柱温度:60(2min→10/min→200(0.2min →2/min→250℃℃℃℃℃ (3 进样口温度:270℃ (4 检测器温度:270℃ (5 载气和尾吹气:N2≥99.99%,0.5mL/min,尾吹气:35mL/min (6 氢气(FPD:40mL/min;空气(FPD:120mL/min (7 进样方式:不分流进样

蔬菜农药残留快速检测的影响因素及解决措施

内容摘要: 摘要着重讨论了有机磷和氨基甲酸酯类农药在蔬菜中的残留问题以及蔬菜中农药残留快速检测技术的方法原理,分析了不同检测环节在检测过程中易出现的问题,并针对这些问题提出相应的解决措施,以减少误差,提高检测结果的准确性。 摘要着重讨论了有机磷和氨基甲酸酯类农药在蔬菜中的残留问题以及蔬菜中农药残留快速检测技术的方法原理,分析了不同检测环节在检测过程中易出现的问题,并针对这些问题提出相应的解决措施,以减少误差,提高检测结果的准确性。 关键词蔬菜农药残留快速检测;原理;影响因素;解决措施 目前,常用的蔬菜农药残留快速检测技术是一种生化检测法。生化检测法中又以酶抑制法应用最为广泛,该方法根据乙酰胆碱酯酶被抑制的程度(抑制率)来检测蔬菜上的有机磷和氨基甲酸酯类农药的残留,用于蔬菜中的水分、碳水化合物、蛋白质、酯类等物质的检测不会对农药残留物的检测造成干扰,具有快速方便、前处理简单、成本较低等优点,适用于现场定性和半定量测定,特别适合在蔬菜生产基地、批发市场及农产品检测部门开展快速检测工作。该方法可对有农药残留的蔬菜进行粗筛,将一部分农药残留含量较高的蔬菜控制在市场之外,避免因农药残留发生中毒事件。蔬菜农药残留的快速检测方法适用于叶菜类、果菜类、豆菜类、根菜类(除胡萝卜、茭白、韭菜、蘑菇等)中的有机磷类(如甲胺磷、氧化乐果、对硫磷、甲拌磷、久效磷等)和氨基甲酸酯类(如克百威、抗蚜威等)等农药残留的快速检测。 1蔬菜农药残留检测技术的原理 该方法是根据有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制昆虫中枢和周围神经系统中的乙酰胆碱酯酶的活性造成神经传导介质乙酰胆碱的积累,影响正常传导,导致昆虫中毒致死的原理而设计[1]。如果蔬菜中不含有机磷和氨基甲酸酯类农药,乙酰胆碱酯酶水解后,水解产物可与显色剂反应产生颜色,如果蔬菜中含可以抑制乙酰胆碱酯酶的活性的有机磷和氨基甲酸酯类农药,这种酶就不能被水解,从而无显色反应。在溶液中加入乙酰胆碱酯酶和显色剂,用此判断有机磷和氨基甲酸酯类农药残留是否存在。在溶液中反应后,用分光光度计测定吸光值随时间的变化, 计算出抑制率,当抑制率小于70%时为合格,以此判断蔬菜中含有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的情况。 2蔬菜农药残留快速检测中的影响因素及解决措施 该技术对生化反应条件要求严格,在检测过程中会出现各种影响因素,致使检测同一批次的蔬菜样品重现性不好,对此要采取一些相应的解决措施。 (1)检测室室内的温度影响。检测室温度在20~30 ℃之间时,使用改进后的酶,可以直接在室温下培养,22 ℃左右培养20 min,25 ℃以上培养15 min;如果室温低于20 ℃,必须放进37~38 ℃培养箱中培养[2]。

农残检测操作流程

农残检测操作流程 取出冰箱内的酶试剂→开机预热15分钟→蔬菜样品的全部秤取→加提取液→酶试剂的配制→仪器调“0”→仪器调“100”→提取样品→加酶液和显色剂→做好记录→检测对照→检测样品→联网上传数据 注意事项: 1、采样 采样要做好记录,所采样品为即将上市或正在上市的蔬菜,样品要新鲜、洁净、不带泥浆。绿叶菜类蔬菜至少从不同5个点上取5株,对于大棵绿叶菜可取不同点上5株蔬菜外叶;茄果瓜类等大果型蔬菜至少从不同3个点上取3个果实。要求每个样品单独存放,并做好标记。 2、酶试剂保存 (1)未开封酶制剂存放在-18℃。 (2)每次检测时先将酶和底物取出,等降到室温后再进行配置。 (3)配置好的酶和底物最多在4℃的冰箱内存放4天,使用时降到室温后重做对照。 (4)显色剂:存放于棕色瓶,避光保存,最多使用30天。 (5)提取液:每次配置时清洗试剂瓶,配置好的试剂在常温下保存,如在冰箱内存放的,要在降到室温后再提取。3、秤取 (1)叶菜类:至少取不同株上的5片叶片叠加,剪成1cm见方秤取1克。如芹菜、香菜、草头等羽状或小叶片直接剪叶片。 (2)茄果瓜类:取果实的表皮,1cm见方,至少从不同的3个果实上削取1克。 (3)特例:番茄要削取青、坚硬部分果皮。红椒、葱蒜类、芳香类蔬菜尽量减少伤口,可以采用同比例放大提取方法。 4、提取 (1)使用移液枪或移液管提取5ml提取液,严禁使用针筒、试管等移液。 (2)烧杯中的蔬菜要放平,提取液要埋没蔬菜。 (3)提取时间:静置10分钟,使用振荡器3分钟。 (4)使用移液枪提取2.5ml提取液,严禁直接倒入带有刻度的试管,目测。 5、酶制剂配置 (1)酶制剂配置一定要使用蒸馏水;(2)酶和底物等降到室温后再配置。 6、校正 (1)每次检测,速测仪都要进行调“0”和调“100”。 (2)联机后,每个通道先放入黑块,调“0”,之后取出黑块,放入比色皿,调“100”。 (3)在调“0”和调“100”时要等数值或曲线稳定5秒后,再点确认。 7、加试剂 (1)加试剂时移液枪一定要垂直试管,不能让试剂留在试管壁上,加好后要摇匀。 (2)每组加酶和显色剂后要记录好时间,并列表每5分钟加一组酶和显色剂。在第一组反映15分钟后加底物。 8、对照 (1)每开一瓶酶试剂要做一次对照;(2)对照时间要和检测时间同步,各为3分钟。 (3)对照可以在加酶和显色剂后直接加底物,马上上机检测。 9、上机检测 要求加一个底物马上上机点“检测”,不可以一组全部加好底物,上机,再一个一个点检测。 10、烧杯 每次使用完毕后要清洗干净倒置在干净纱布上,每周要进行一次浸泡清洗,保持烧杯壁干净透明,不留水垢。11、试管 每次使用完毕后要清洗干净倒置在试管架上,每周要进行一次浸泡清洗,保持试管壁干净透明,不留水垢。 12、比色皿 (1)每次使用后用蒸馏水冲洗3次,方可再次使用。使用完清洗后要倒置,等水渍干后放入比色皿盒中保存。 (2)比色皿的光面不能用手触摸,当光面透明度下降时要更换新的使用。 13、洗液瓶 每次使用完毕后要清洗,并倒置。 上海温瑞果蔬种植专业合作社

蔬菜农药残留检测室筹建方案

铁锁乡果蔬农药残留检测室筹建方案 农业产业化的发展使农产品的生产越来越依赖于农药、抗生素和激素等外源物质。我国农药在农产品的用量居高不下,而这些物质的不合理使用必将导致农产品中的农药残留超标,影响消费者食用安全,严重时会造成消费者致病、发育不正常,甚至直接导致中毒死亡。为了确保铁锁乡蔬菜质量安全,让广大群众吃上放心菜,推进无公害蔬菜产业的健康发展,农技中心拟按照相关标准建立一个完备的蔬菜农药残留检测室,具体要求和规划如下: 一、检测室基础设施 1.1 有满足检测工作需要的固定的工作场所,面积要求不少于20平方米,保持室内清洁、整齐。 1.2 采光良好,具有通风设施。周围没有震动、噪音、粉尘、磁物等不良因素影响 1.3水、电及其他必要的能源设施齐全。具有防火设施,消防器材;保持室温,要有温度调节器;低温保存冰箱材等。 二、组织机构与人员 2.1有专门负责检测工作的负责人。 2.2检测室配备检测人员2名,要求:参加过县级以上检测技术培训班学习,培训学时12小时以上;能熟练掌握快速农残检测仪的使用方法,掌握农残检测样本采集方法,会使用农残检测结果网络式报送方法 三、检测室仪器和设施配备 3.1实验台根据房屋的大小设置边实验台,宽70-75

厘米,长度根据需要而定,颜色以浅色调为宜 3.2仪器柜放置公用药品、托盘天平及一些仪器、用品的台子和放置各种塞子、导管、橡胶管、乳胶管等材料的抽屉和柜子。宽60厘米,高2米,长度根据需要而定 3.3铁架台、三角架等其他用的器具一般应按指定地点,有序放置。 3.4农残检测设备已配置。 3.5抽检用器材:取样保鲜袋、标签。 3.6检测用器材:取样器2个,橡胶垫2个,镊子1个,电子天平(精确度0.1克)1台,提取瓶20个,振荡器1台,大试管架2个,试管20个,比色皿架3个,比色皿20个,定量加液器(20毫升)1个,储液瓶2个,量筒(500毫升)2个,烧杯2个,滤纸20张、擦镜纸20张,标准口三角瓶100mm2个,台式培养箱1台,移液枪(40--200微升2个、1--5毫升1个),管嘴(40--200微升15个、1--5毫升22个),移液管1ml ,10ml各2支,吸尔球2支,洗瓶2支(500m),试管刷(平底)5个,废液桶1支。 3.7检测药品:专用酶(广口试剂瓶5个)、底物、显色剂、提取试剂。 3.8为便于数据上传,配联想电脑、打印机各一台。仪器设备 四、仪器设备维护和使用 4.1仪器设备必须经过检定(校验、检验)合格后,方可使用,并保证在检定周期内使用。 4.2仪器设备应有详细的操作规程(使用说明),置于操作台附近,便于参照使用。每次使用都应记录,填写《仪

农残检测步骤

农残速测步骤 试剂配制 缓冲液:将一包缓冲剂倒入510ml蒸馏水中搅拌溶解。 酶:倒入10ml缓冲液至瓶中,摇匀溶解。 显色剂:倒入10ml缓冲液至瓶中,摇匀溶解。 底物:加入10ml蒸馏水至瓶中,摇匀溶解。 试剂配制好后放入冰箱冷藏,保质期为3个月。 二、仪器预热及空白对照。 提前将仪器开机预热,此过程一般10分钟。登陆账号和密码均为000000。预热结束后点空白对照,观察每个通道显示的光强度,在10000-40000则光源正常。 三、样品制备、提取 将样品剪至1cm左右大小,称取2g样品至样品瓶中。块茎类称4g。 加入10ml缓冲液振荡1-2分钟,放置10-15分钟备用。若液体浑浊 或杂质较多,则过滤后备用。 加试剂 每个样品提取液分别吸取2.5ml至刻度试管中,另取一只试管加入2.5ml缓冲液代替样品作为空白对照。 加入100ul酶、100ul显色剂到各试管中,混匀反应15分钟。若室温低于25℃,需37℃水浴下反应。 加入100ul底物至各试管中,摇匀。 四、上机比色 1、将试管中液体倒入比色皿,放入速测仪检测通道。第一通道放入空白对照,其余通道放入样品溶液。(毛玻璃面对准自己。) 2、关上盖子,点击“试剂对照”--开始,等待3分钟即可。 结果 通过数据管理可查看和打印结果。 若抑制率大于50%,则结果判定为阳性。出现阳性时需复测1-2次,若仍为阳性,方可下结论。 注意 1、葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中,含有对酶有影响的植物次生物质,容易产生假阳性。处理这类样品时,可采取整株(体)蔬菜浸提或采用表面测定法。 2、对一些含叶绿素较高的蔬菜(缓冲液浸提后,明显颜色较深的样品),也可采取整株(体)蔬菜浸提的方法,减少色素的干扰。

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