蛋白酶抑制剂MG132在联合NGF诱导PC12细胞分化过程中的作用及机制
细胞毒性实验方案
细胞毒性实验设计方案 1.准备材料：DMEM(高糖) 胰酶双抗(青霉素/链霉素）DAPI MTT(5mg/mL) DMSO PBS 4%多聚甲醛指甲油 6孔培养板 96孔培养板超薄载玻片培养瓶(25mL) 一包0.45μm滤膜 灭菌： 50mL，10mL，5mL离心管两种枪头 2.实验方案 本实验所用的材料为载药的通过二硫键桥连透明质酸的夹心二氧化硅 （SiO 2 -SS-HA/DOX），在高谷胱甘肽条件下，二硫键断裂，透明质酸脱离，同时 夹心二氧化硅中药物得以释放。本实验的目的为测定透明质酸修饰的夹心二氧化 硅（SiO 2-SS-HA/DOX）的细胞毒性。实验组为SiO 2 -SS-HA/DOX、SiO 2 -SS-HA、DOX， 空白对照组为纯细胞,分别采用HepG2人肝癌细胞为肿瘤细胞模型和L929成纤维 细胞为正常细胞模型。 采用HepG2人肝癌细胞为肿瘤细胞模型，实验组为SiO 2 -SS-HA/DOX、 SiO 2 -SS-HA、DOX，空白对照组为纯细胞。培养基中含有10% (v/v) FBS和1% (w/v) 双抗(青霉素/链霉素)。配制不同浓度的SiO 2-SS-HA/DOX、SiO 2 、HA、DOX药物载 体培养基溶液。 (1).以HepG2人肝癌细胞为肿瘤细胞模型: 培养基的配置：双抗 1% 血清12% DMEM 87% 具体操作步骤： 细胞的复活： ①将冻存于液氮中的细胞取出，迅速放入37℃温水中，使细胞快速溶解。 ②将悬浮的细胞移至离心管中，加5mL无血清培养基，1000rmp,5min离心去上清，再加5mL有血清培养基，转移至培养瓶中。（每次转移时，将之前的离心管洗涤，并用移液枪来回吸，使液体混合均匀。） ③将培养瓶放入培养箱中培养。 细胞的传代： 将0.25%的胰酶分装至小离心管中，每个管中2mL，冻存于-20℃，每次使用一管，避免反复冻融。 ①将培养瓶从培养箱中取出，盖子旋紧，喷75%的酒精放入超净台。 ②将培养液倒入废液缸，残留培养基用吸管吸干净，操作完成后，培养瓶口
《细胞是生命活动的基本单位》知识点复习检测
第3章 细胞是生命活动的单位 一、复习目标 1.掌握细胞的结构和功能，说出动植物细胞的形态结构的共性和区别 2.说出细胞含有的物质，以及细胞膜具有控制物质进出的功能 3.理解细胞中的物质和能量，细胞核是细胞生命活动的控制中心 4.了解并描述细胞分裂的基本过程 二、复习提纲 *1、除病毒外的绝大多数生物都是由细胞构成的，细胞是生命活动的基本单位；细胞是生物体结构和功能的单位。 *2、光学显微镜的结构 *3、显微镜的使用：取镜安放→对光→放置玻片标本→观察→收放。对光时， 应首先转动转换器，使低倍物镜对准通光孔；再转动遮光器，把最大的光圈对准通光孔。观察显微镜时，一般应该用左眼注视目镜内。使镜筒缓缓下降时，眼睛一定要从侧视注视物镜，直到物镜接近玻片标本2—3mm 为止。 *4、显微镜的放大倍数=目镜的放大倍数×物镜的放大倍数。显微镜下看到的物 像是放大的倒像。显微镜下物像移动的方向与标本的移动方向相反。 *5、临时装片制作的一般步骤：擦片→滴水→放标本→盖片→染色（一般用碘液） *6、 细胞膜：保护；控制物质进出细胞 细胞质：线粒体等 细胞核：细胞生命活动的控制中心；遗传物质贮存和复制 的场所 *7、 细胞壁：保护和支持 动物细胞的基本结构和功能 植物细胞的基 本结构和功能
细胞膜：保护；控制物质进出细胞 细胞质：内有液泡（含细胞液）、线粒体、叶绿体等 细胞核：细胞生命活动的控制中心；遗传物质贮存和复制 的场所 （动、植物细胞结构图：教材） *8、动、植物细胞的比较：植物细胞有细胞壁、液泡、叶绿体（绿色部分），动物细胞没有上述结构。（教材P43动、植物细胞结构比较图、动、植物细胞结构比较表） 9、液泡中有细胞液，其中溶有多种物质，有的可能有不同的味道，有的能使细 胞呈现出颜色。细胞质中的线粒体，使细胞内的有机物分解和释放能量，供给生命活动使用。细胞质中的叶绿体，利用光能将无机物转变为贮存能量的有机物。 10、较小细胞的表面积相对较大，更易于保证细胞与外界进行物质交换，从而 保证细胞正常的生命活动。 11、细胞通过分裂产生新细胞，细胞分裂是生物生长、发育、繁殖的基础。细 胞分裂时，首先是细胞核一分为二。 *12、在细胞分裂过程中，细胞核里的遗传物质经过复制而数量倍增，并且平均分配到两个新细胞中，这样就保证新细胞与亲代细胞具有相同的遗传物质。 三、复习检测 1.如果在目镜为5×、物镜为10×时，显微镜视野里可观察到的细胞如右图所示。那么，在物镜放大倍数不变的情况下，把目镜改为15×，视野里可观察到的细胞数目是（）
细胞培养与病毒培养实验步骤
实验二传代细胞培养与病毒在传代细胞中的培养 一、实验目的 了解倒置显微镜的构造与使用，了解不同传代细胞的形态及接毒后的病变特征，掌握细胞的传代培养法、病毒接种法及收毒法。 二、常用细胞的种类 BHK-21：仓鼠肾传代细胞 PK-15：猪肾传代细胞 IBRS-2：猪肾传代细胞 Hela：人的子宫瘤细胞 Vero：非洲绿猴肾细胞 Marc-145：来源于Vero细胞 TK-143：人的胸苷激酶阴性细胞 Sf9：昆虫细胞 三、材料 1、100ml细胞瓶、吸管、吸球、96细胞培养板、加样器、枪头 2、BHK-21（baby hamster kidney）细胞
3、0.25%胰酶 4、生长液：含10%犊牛血清、200U/ml青、链霉素的DMEM 维持液：含2-5%犊牛血清、200U/ml青、链霉素的DMEM 5、伪狂犬病病毒液（PRV） 四、传代细胞培养的条件要求 1）细胞密度：2-3×105个/ml 2）pH围最适pH7.0-7.4，耐受pH6.6-7.8 3）培养温度 哺乳动物细胞一般为37℃ 昆虫细胞28-30℃ 五、常用细胞分散剂与作用原理 1、胰酶使精氨酸或赖氨酸的羧基和其他氨基酸的氨基之间的多肽链发生水解， 导致细胞间质水解而使细胞或组织块消化为分散的单个细胞。 2、乙二胺四乙酸二钠（EDTA）：与二价钙、镁离子结合，从而使细胞分散。 3、灰色链丝菌酶：由灰色链丝菌提取的一种酶制剂，是蛋白酶、氨肽酶和羧肽 酶的混合物。
六、营养液 1、人工综合营养液 氨基酸、糖类、无机盐类、维生素、辅酶、嘌呤、嘧啶、辅助生长因子。2、血清 1）血清的种类 胎牛血清、新生犊牛血清、成年牛血清、马血清、鸡血清、兔血清、羊血清、人血清，其中以新生犊牛血清使用最为广泛。 2）血清的处理 无菌采集，过滤除菌。用前56℃灭活30min。 3）血清的作用 A、能提供细胞生存、生长和增生所必须的生长调节因子。 B、能补充基础培养液中没有或量不足的营养成分。 C、含有一些可供贴壁依赖型细胞在培养器皿表面贴附和铺展的生长基质成分。 D、有中和毒性物质保护细胞不受伤害的作用。 E、给培养液提供良好的缓冲系统。 F、提供蛋白酶抑制剂，保护细胞免受细胞释放的蛋白酶的损害。
免疫学期末复习参考
免疫学期末复习参考 第四章抗体 抗体概述 免疫球蛋白(Ig):具有抗体活性或化学结构类似于抗体的免疫球蛋白抗体(抗体，Ab):一种免疫球蛋白(Ig)，其中b细胞被抗原刺激增殖并分化成浆细胞产生的糖蛋白，该糖蛋白与相应的抗原特异性结合并存在于体液中它以分泌型(sIg)和膜型(mIg)存在。 血清蛋白分为白蛋白、α1、α2、β和γ球蛋白，抗体活性主要存在于γ球蛋白区 免疫球蛋白(Ig):具有抗体活性或化学结构类似于抗体的球蛋白；抗体是免疫球蛋白，其不一定是抗体 第一抗体(1)的重链和轻链 重链的结构，450-550个氨基酸残基，五大类 IgG-γIgA-αIgM-mu(μ)* IgD-δIgE-ε(ε) 轻链，轻链是重链的1/2。约214个氨基酸κ型:λ型= 2: 1 (2)可变区和恒定区 1。在可变区(V区)的 重链和轻链的N-末端附近的大约110个氨基酸的序列变化很大，在高变区(HVR)，以及在V区中变化最剧烈的特定部分有3个L链和3个H链，也称为互补决定区的框架区。V区高变区以外的位置是2。恒定区(C区)的C端附近的其余氨基酸序列是相对稳定的(III)链区
位于CH1和CH2之间；对蛋白酶敏感，易于拉伸和弯曲 (iv)结构域 结构域:h链和l链可以通过链内二硫键折叠成几个球形结构。每个结构域包含约110个氨基酸 。本节总结了 1。抗体的基本结构:由两条相同的重链(h链)和两条相同的轻链(l 链)通过链间二硫键连接而成的四肽链结构？(1)重链和轻链: ？1.重链-由450–550个氨基酸残基组成: ？？根据氢链恒定区的结构特异性，免疫球蛋白分为五类: γ-免疫球蛋白；α—IGa；μ—IgM；δ—IgD；ε—IgE？2.轻链-由大约214个氨基酸残基组成: ？？根据L链的结构特异性，Ig分为κ型和λ型，比例为2: 1？(2)可变面积和恒定面积: ？1.可变区(V区):重链和轻链N端附近的大约110个氨基酸的序列变化很大，为 ？？高变区(HVR)和互补决定区(CDR):V区变化最大的区域是 ，其中重链和轻链各有3个特定位置，总共有6个区域可以与表位紧密互补。？骨架区:在V区高变区之外的区域稳定了高变区的结构；？2.恒定区(c区):重链和轻链c端附近的其余氨基酸序列相对稳定，不同类型ig的重链结构和长度相差 ？(3)铰链区:位于CH1~CH2之间，容易拉伸和弯曲？(4)结构域:每个结构域包含约110个氨基酸
CDC ADCC细胞毒性
1 Antibody-dependent cellular cytotoxicity (ADCC)抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用 In antibody-dependent cellular cytotoxicity (ADCC), Fc gamma receptors (FcγR or FCGR) on the surface of immune effector cells bind the Fc region of an antibody, itself specifically bound to a target cell. The cells that can mediate ADCC are nonspecific cytotoxic cells such as natural killer cells, macrophages, monocytes and eosinophils. Upon FCGR binding to the antibody, the FCGR ITAM is phosphorylated, which triggers the activation of the effector cell and the secretion of various substances (lytic enzymes, perforin, granzymes, TNF) that mediate the destruction of the target cell. The level of ADCC effector function is high for human IgG1 and IgG3, low for IgG2 and IgG4, and for these last two subclasses, the level of binding depends on the FCGR isotype and on the cell type. 2 Complement-dependent cytotoxicity (CDC) 补体依赖的细胞毒性作用 In complement-dependent cytotoxicity (CDC), the C1q binds the antibody and this binding triggers the complement cascade which leads to the formation of the membrane attack complex (MAC) (C5b to C9) at the surface of the target cell, as a result of the classical pathway complement activation.
第十九章补体参与的反应及补体测定ComplementMediated
第十九章补体参与的反应及补体测定 Complement Mediated Reactions and Assays of Complement 第一部分目的要求和教学内容 一、目的要求 掌握：免疫溶血试验及CH，。测定的原理及意义；熟悉：补体参与的反应试验类型、补体依赖的细胞毒试验的原理、旁路途径溶血活性测定；了解：补体结合试验和免疫黏附试验的原理、C4和B因子活性测定的原理。 二、教学内容 1．补体参与的反应：免疫溶血试验，补体结合试验，补体依赖的细胞毒试验，免疫黏附试验。 2．补体的测定：补体活性的测定，补体含量的测定，补体测定的临床意义。 第二部分测试题 一、选择题 (一)单项选择题(A型题) 1．溶血素效价滴定判定的温度和时间是 A．37℃、30min B．4℃、30min C．37℃、15min D．40℃、30min E．56℃、30min 2．在补体连锁反应中最终形成的攻膜复合体是 A．C5b6789 B．C4b2a3b C．C4b2b D．C3bBb E．C3b4b 3. 下列哪项试验没有补体参加 A．CH试验 B．CDC试验 C．溶血空斑试验 D．ADCC试验 E．Raji细胞试验 4．补体结合试验中所用补体是哪种动物血清 A．马血清 B．绵羊新鲜血清 C．豚鼠新鲜血清 D．大白鼠新鲜血清 E．山羊新鲜血清
5．下列哪项试验不能用于补体缺陷的过筛诊断 A．CDC式验 B．CH50试验 C．血清C3含量测定 D．血清Cl含量测定 E．C4溶血活性试验 6．B因子溶血活性测定中，在缓冲液中加．),．EGTA是为了螯合反应体系中的A．Mg2+离子 B．Ca2+离子 C．zn2+离子 D．Fe3+离子 E．P3+离子 7．在单个补体成分溶血活性测定中，用氨水处理是为了去除哪个补体成分A．C1 B．C2 C．C4 D．C5 E．C3 8．检测免疫小鼠脾细胞分泌到细胞外的抗SRBC抗体的试验是 A．CH50试验 B． CFT C，APH50测定 D．B因子活性测定 E．溶血空斑试验 9．利用溶血反应作为指示系统，判断抗原抗体是否相对应的试验是 A．CHs50试验 B．CFT C．APH50测定 D．B因子活性测定 E．抗补体试验 10．补体经典途径的最重要激活物是 A．特异性抗原 B．特异性抗体 C．抗原抗体复合物 D．细菌脂多糖 E、酵母多糖 11.正常血清中,补体含量最低的是 A.C1q B. C5aR C. C1rR D.Df E.C1INH 12.正常血清中,补体含量最高的是 A.C1 B.C2 C.C3
高中生物 1.1 细胞是生命活动的基本单位学案 新人教版必修1
第1节细胞是生命活动的基本单位 一、细胞学说及其建立过程 1．细胞学说 (1)创立者：徳国植物学家施莱登和动物学家施旺。 (2)主要内容 ①细胞是一个有机体，一切动植物都由细胞发育而来，并由细胞和细胞产物所构成。 ②细胞是一个相对独立的单位，既有它自己的生命，又对与其他细胞共同组成的整体的生命起作用。 ③新细胞是由老细胞分裂产生的。 (3)意义：在细胞这个结构基础上统一了复杂的生物界，揭示了细胞的统一性和生物体结构的统一性。 2．细胞学说的建立过程 詹森：发明显微镜→观察到小昆虫的整体形态 ↓ 罗伯特·虎克：观察木栓结构→发现并命名细胞 ↓ 列文虎克：观察到原生生物、细菌、红细胞、精子 二、细胞是基本的生命系统 1．生命活动与细胞的关系 2．多细胞生物生命活动的基础[连线] 3．生命系统的结构层次 (1)写出图中各数字表示的生命系统结构层次名称 ①细胞；②组织；③系统；④种群；⑤群落；⑥生物圈。
(2)生命系统各层次的关系 ①最基本的生命系统：细胞。 ②最大的生命系统：生物圈。 ③地球上最早的生命形式：单细胞生物。 1.判断下列叙述的正误 (1)一切生物都由细胞发育而来，并由细胞和细胞产物构成( ) (2)细胞是生物体结构和功能的基本单位( ) (3)病毒是生命系统的结构层次( ) (4)蛋白质和核酸等生物大分子也属于生命系统的结构层次( ) 答案：(1)×(2)√(3)×(4)× 2．细胞学说的建立过程[连线] 3．下列关于细胞学说的叙述，正确的是( ) A．列文虎克是细胞的发现者 B．所有生物都由细胞构成 C．细胞具有相对独立性 D．动植物细胞结构是一样的 解析：细胞是一个相对独立的单位，既有它自己的生命，又对与其他细胞共同组成的整体的生命起作用。 答案：C 4．下列选项不属于生命系统结构层次的是( ) A．细胞 B．分子 C．种群 D．生态系统 解析：分子不属于生命系统的结构层次。 答案：B 5．地球上的生命千姿百态，从生物圈到细胞，生命系统层层相依，又各有特定的组成、结构和功能。下列属于生命系统结构层次中细胞层次的是( ) A．一个病毒 B．一个受精卵
细胞是生命活动的单位
第二节细胞是生命活动的单位 学习目标 1.认识变形虫的运动摄食等生命活动 2.了解细胞膜、细胞核的作用，理解细胞是生命活动的单位 学习重点 细胞膜控制物质进出；细胞核是遗传的控制中心 学习难点 理解细胞是生命活动的单位 知识链接 变形虫是一种单细胞生物，主要生活在清水池塘，或在水流缓慢藻类较多的浅水中，以至一般泥土也可找到，亦可成寄生虫寄生在其他生物里面。由于变形虫身体仅由一个细胞构成，没有固定的外形，可以任意改变体形，因此得名。它的分布很广，生活在清水池塘或在水流缓慢藻类较多的浅水中，通常在浸没于水中的植物上就可找到。大变形虫在运动时，由体表任何部位都可形成临时性的细胞质突起，称为伪足，是变形虫的临时运动器。活的大变形虫的体形在不断地改变着，但里面的结构却比较简单。它的体表为一层极薄的质膜。在质膜的下面没有颗粒，均质透明的一层为外质，在外质的里面为流动的内质，内具有颗粒，其中有扁盘形细胞核、伸缩泡、食物泡以及处不同消化程度的食物颗粒。 一、知识回顾 1、动物细胞的基本结构是_____________、_____________、____________。 2、植物细胞的基本结构、、、 、。 二、自主学习 1.变形虫的结构非常简单，身体只由细胞构成。 2.变形虫的运动和摄食是靠（） A足 B翅 C伪足 D鳍 3.变形虫的将细胞与外部环境分开，既有保护作用又能进行物质交换。 4.变形虫从外界获取的食物中含有、、 、等多种物质，其中能提供能量的有、 。
5.人每天都要吃和喝，这些营养物质被身体吸收后最终到达（）。 A．全部排泄出去 B．细胞 C．肠道 D．胃里 6. 是细胞中最重要的结构，对细胞的生命活动起着作用。 三、合作探究 单细胞生物变形虫的生命活动： 1.变形虫是如何与外界沟通（物质交换）的？ 2.变形虫是怎样获取能量的？ 3.看图P47变形虫实验进行讨论，细胞核的作用是什么？ 四、新知应用 思考多细胞生物是怎样进行生命活动的呢？ 五、课堂检测 8．对细胞的生命活动起着控制作用的结构是( ) A．细胞质 B．细胞核 C．细胞壁 D．线粒体 9．植物细胞中，能将太阳能转化成化学能的结构是( ) A．细胞核 B．叶绿体 C．线粒体 D．细胞膜 10．细胞中与"种瓜得瓜，种豆得豆"现象有关的结构是（） A．细胞壁 B．细胞膜C．细胞质D．细胞核 六、学后反思
细胞是生命活动的基本单位测试卷
细胞是生命活动的基本单位单元测试 一、选择题 1.医生给危重病人吸氧，点滴葡萄糖，归根结底是让病人获得生命活动所需要的能量，这一能量转换作用是在病人细胞的结构中完成。（） A细胞核 B线粒体 C细胞膜 D叶绿体 2．有关植物细胞的叙述中正确的是（） A．生命活动主要在细胞核内进行 B．液泡具有支持和维持细胞形态的作用C．在放大镜下，可观察到植物细胞 D．植物细胞一般有细胞壁和液泡 3．线粒体主要与细胞的什么生命活动有关（） A．光合作用 B．呼吸作用 C．吸水作用 D．保护作用 4．DNA的中文名称是（） A．染色体 B．蛋白质 C．脱氧核糖核酸 D．脱氧核糖 5．一般用显微镜观察洋葱表皮细胞时，看不到的结构是（） A．细胞壁 B．细胞核 C．液泡 D．叶绿体 6．用红墨水对细胞染色时，死细胞整个细胞都呈红色，这是因为（）A．细胞壁阻挡有害物质进入的功能丧失了 B．细胞核的遗传功能丧失了C．细胞膜控制物质进出的功能丧失了 D．细胞壁的保护功能丧失了7．下列关于植物细胞结构和功能的叙述中，错误的是（） A．植物细胞是植物体的基本结构和功能单位 B．植物细胞具有细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核 C．植物细胞多数具有叶绿体和液泡 D．植物细胞的细胞核与细胞质相互隔开、互不相通 8．制作洋葱鳞片叶表皮细胞的玻片标本中，相关的制作步骤错误的是（）A．先在载片上滴水，后取材 B．先染色后盖盖玻片 C．染色时盖片的一端先滴上碘液，另一端用吸水纸吸干 D．先用正确方法盖盖玻片，后用正确方法染色 9．动物和植物细胞相比，动物细胞中没有（） A．线粒体和叶绿体 B．叶绿体和细胞壁 C．细胞核和液泡 D．细胞膜和染色体 10．玉米、高梁等植物叶的光合作用比一般植物叶的光合作用强，人的眼皮有单眼皮及双眼皮等性状，控制生物体生理特性及形态的遗传信息准确地说是存在于（） A．细胞核内 B．细胞膜上 C．染色体上 D．DNA上 11．构成人体的细胞有1014个，这些细胞的哪方面是一样的（） A．大小B．形状 C．基本结构 D．基本功能 12．下列关于植物细胞的说法，正确的是：（） A．所有的植物细胞都具有中央大液泡 B．植物细胞的形态多种多样，结构基本相似 C．洋葱鳞片叶内表皮细胞含有大量的叶绿体 D．植物细胞的细胞质能控制细胞内外物质的进出，保持细胞内部环境的相对稳定 13．关于显微镜的使用，下列说法错误的是：（） A．取用显微镜时，必须用右手握住镜臂，从显微镜箱中取出显微镜
第四章 补体系统
第四章补体系统（Complement system） 19世纪人们在新鲜免疫血清中加入相应的细菌，无论进行体内或体外实验，均可以发现细菌的溶解，称之为免疫溶菌现象，如将免疫血清加热60℃，30min则可丧失溶菌能力。证明免疫血清中含有二种物质与溶菌现象有关。一种对热稳定的抗体，另一种对热不稳定的称为补体，单独的抗体或补体均不能引起细菌的溶解现象。 第一节补体系统的组成和理化性质 一、补体分子的组分和理化性质 补体分子是分别由肝细胞、巨噬细胞以及肠粘膜上皮细胞等多种细胞产生的，均为多糖蛋白，大多数电泳迁移率属α、γ球蛋白。 补体系统是由将近20多种血清蛋白组成的多分子体系，具有酶的活性和自我调节作用，它至少有两种不同的活化途径，其生物学意义不仅是抗体分子的辅助和增强因子，也具有独立的生物学作用，对机体的防御功能，免疫系统功能的调节以及免疫病理过程都发挥重要意义。 1968年世界卫生组织对其进行了统一命名, 分别以C1-C9命名。1981年对新发现的成分和因子也进行了统一命名。 如C1, C2, C3┅┅C9，其中C1又分为3个亚单位，分别为C1q, C1r, C1s。 1.每一分子的酶解片段用小写的英文字母表示，如C3a; C3b。 2.具有酶活性的可在其上面划一横线，如C1。 3.对灭活的补体成分加i表示，如C2ai。 4.对具有酶活性的复合物则应用其片段表 5.补体系统的其他因子以英文大写字母表示，如B因子, P因 子等。示，如C3转化酶，可以用C4b,2a表示。
补体系统各成分的理化性质 补体成分分子量 (KD) 电泳区 带 血清含量 (μg/ml) 裂解 片段 产生部位 第一组 C1q C1r C1s 390 95 85 γ2 β α 70 35 35 小肠上皮细胞, 脾, 巨噬细胞 C2117 β130 C1aC 2b 巨噬细胞C3190 β11300 C3aC 3b C3cC 3d 巨噬细胞,肝 C4(A因 子) 180 β2430 C4aC 4b C4cC 4d 巨噬细胞,肝 C5190 β175 C5a， C5b 巨噬细胞C6128 β260 肝 C7120 β255 ? C8163 γ155 肝 C979 α200 肝 第二组B因子 D因子 P因子 95 25 220 β α γ2 240 2 25 Ba， Bb 巨噬细胞,肝 巨噬细胞,血小板 巨噬细胞 第三组C1INH C4bp I因子 H因子 S蛋白 105 1100 93 150 80 α β β α 180 250 50 400 500 噬细胞 噬细胞 噬细胞,细小板 血清中：C3含量最高1300μg/ml，其次为C4，S蛋白，H因子各约C3，含量的1/3，其他成分仅为C3的1/10以下。
细胞培养与病毒培养实验步骤
实验二传代细胞培养与病毒在传代细胞中得培养 一. 实验目得 了解倒置显微镜得构造与使用，了解不同传代细胞得形态及接毒后得病变特 征,掌握细胞得传代培养方法、病毒接利方法及收毒方法。 二、常用细胞得种类 BHK-21:仓鼠肾传代细胞 PK-15：猪肾传代细胞 IBRS-2:猪肾传代细胞 Hela ：人得子宫瘤细胞 Ver 。：非洲绿猴肾细胞 Marc-145:来源于Vero 细胞 TK-143:人得胸昔激酶阴性细胞 Sf9：昆虫细胞 三、材料 1、lOOml 细胞瓶、吸管、吸球、96孔细胞培养板、加样器、枪头 BHK-21 (baby hamster kidney)细胞 生长液:含10%犊牛血清、200U/inl 青、链霉素得DMEM 2、 3、 0、25%胰酶 4、
维持液:含2-5%犊牛血清、200U/inl青、链霉素得DMEM 5、伪狂犬病病毒液(PRV) 四.传代细胞培养得条件要求 1)细胞密度:2-3X105个/ml 2)pH 范围最适 pH7、0-7、4,耐受 pH6、6-7、8 3)培养温度 哺乳动物细胞一般为37°C 昆虫细胞28-3(rC 五、常用细胞分散剂与作用原理 1、胰酶使精氨酸或赖氨酸得竣基与其她氨基酸得氨基之间得多肽链发生水解, 导 致细胞间质水解而使细胞或组织块消化为分散得单个细胞。 2、乙二胺四乙酸二钠(EDTA):与二价钙、镁离子结合■从而使细胞分散。 3、灰色链丝菌酶川I灰色链丝菌提取得一种酶制剂,就是蛋口酶、氨肽酶与竣肽 酶得混合物。 六、营养液 1、人工综合营养液 氨基酸、糖类、无机盐类、维生素、辅酶、嚓吟、陀唏、辅助生长因子。 2、血清 1)血清得种类 胎牛血清、新生犊牛血清、成年牛血清、马血清、鸡血清、兔血清、羊血清、人血清，其中以新生犊牛血清使用最为广泛。
免疫学检验复习题选择题
一、单选题(A1／A2型题) 1．最早将抗原抗体反应原理及方法应用于临床血清学诊断的学者是(A ) A．Widal B．Landsteiner C．KOhler D．ManciniE．Coons 2．下列各项用于反映B细胞功能的试验是( B) A。淋巴细胞转化B．血清免疫球蛋白检测C．迟发型超敏反应皮肤试验D．移动抑制试验E．CD3检测 3．对流免疫电泳的沉淀线出现在抗原抗体之间且靠近抗原孔可说明(B) A．抗原强阳性B．抗原弱阳性C．抗原阴性 D．抗体弱阳性E．抗体阴性 4。下列何种抗原是触发移植排斥反应的首要抗原(D) A．HLA-A、B 、C B．HLA-DP C．HLA-DQ D．HLA-DR E．HLA-D 5．人类MHC基因位于第几对染色体上(B ) A．第1对B．第6 对C．第9对D．第12 对E．第19 对 6．机体的免疫系统具有杀灭或排斥突变细胞功能称为(C ) A．免疫防御B.免疫自稳 C.免疫监视D.免疫应答 E.兔疫识别7．用异硫氰荧光色素(FITC)作标记时其激发光波长近于(D ) A．365nm B．435nm C．450mn D．490nm E．500nm 8.血清中含量最高的补体分子是( C) A．C1 B．C2 C．C3 D．C4 E．C5 9．检测不完全抗体可使用的凝集反应(D ) A．协同凝集反应B．间接凝集反应C．间接血凝试验 D．Coombs试验E．直接凝集反应
10．ELISA试验时易造成空白值增高的原因主要来自于(C ) A．加样不准B保温时间短C洗涤不彻底D比色误差E包被不好11．GVHR的中文全称为( B) A．宿主抗移植物反应B移植物抗宿主反应C补体依赖的细胞毒作用D．荧光偏振免疫分析E人类白细胞抗原 12．为提取高纯度特异性IgG通常采用的方法是(C) A．区带电泳B．凝胶过滤C．亲和层析D．选择性沉淀E．超速离心13．初次应答中首先产生的抗体是(C ) A．1gA B．IgG C．IgM D．IgE E．IgD 14．用于前列腺癌初筛的首选肿瘤标志物是(B ) A．AFP B．PSA C．CEA D．CAl9-9 E．HCG 15．不完全抗原的特点是(B ) A．仅具有免疫原性B仅具有反应原性C具有免疫原性及反应原性D．与抗体不产生沉淀反应E．不可能是病原微生物的产物16．化学发光的基本原理是发光物由于(D ) A．在一定波长激发光照射下发光B．在化学反应中获得能量而发光C．在电子激发态时发光D在电子激发态返回基态时释放能量而发光E．某物在化学反应中生成发光物而发光 17．组织相容性抗原指的是(C ) A．同种异型抗原B．隐蔽的自身抗原C同种移植抗原 D．有核细胞表面抗原E．N曾异性抗原
细胞是生命活动的基本单位
. 第二单元细胞是生命活动的基本单位 第二章细胞怎样够成生物体 本章内容概览 细胞通过分裂可以增加数量，但是亿万个细胞简单地堆砌起来不能成为生物体。只有当生物体的各种结构有机地结合起来构成统一整体时，才能完成复杂的生命活动。本章讲述“细胞怎样构成生物体”，共分四节。第一节“细胞通过分裂产生新细胞”，主要讲述了细胞的分裂和生长过程，特别强调了动植物细胞分裂的异同以及在细胞分裂时细胞核内物质的明显变化。第二节“动物体的结构层次”，首先讲述细胞通过分裂和分化形成了组织，然后以人体为例，从细胞、组织、器官、系统到个体，按照从微观到宏观的顺序介绍了高等动物体的结构层次。第三节“植物体的结构层次”，以绿色开花植物为例，从个体、器官、组织到细胞，按照从宏观到微观的顺序介绍了高等植物体的结构层次。第四节“单细胞生物”，主要以草履虫为例，介绍了单细胞生物尽管只有一个细胞，但也具有较复杂的结构，能够独立完成各项生命活动，这样更有助于我们理解细胞是生物体结构和功能的基本单位。 重点难点提示 本章重点： (1)描述细胞分裂的基本过程。 (2)概述生物体的各种组织是由细胞分裂、分化形成的。 (3)举例说明动物体和植物体的结构层次。 (4)说明植物的几种主要组织。 (5)举例说明单细胞生物可以独立完成生命活动，与人类生活有密切关系。 本章难点： (1)细胞分裂过程中染色体变化的结果。 (2)生物体的各种组织是由细胞分裂、分化形成的。 (3)人体的四种基本组织和植物体的几种主要组织。 . . 单细胞生物可以独立完成生命活动。(4) 使用显微镜观察草履虫。(5) 细胞通过分裂产生新细胞第一节 学习目标：
人教版 必修一 细胞是生命活动的基本单位 教案
第1节细胞是生命活动的基本单位 内容标准要求核心素养对接学业质量水平 1.分析细胞学说的建立过程。 2.简述生命活动与细胞的关系和生命系统的结构层次，认同细胞是最基本的生命系统。 1.生命观念——运用生物学观点 认识生物的统一性。 水平一2.科学思维——归纳与概括生命 活动与细胞的关系； 认同细胞是最基本的生命系统。 水平二研读教材·梳理探究 细胞学说的建立过程 ———————————————知识梳理———————————————1.建立过程 1665年英国的罗伯特·虎克用显微镜观察、发现并命名了细胞。 观察到的是死细胞 17世纪，荷兰的列文虎克观察到不同形态的细菌、红细胞和精子等。 观察到的是活细胞 19世纪，德国的施莱登、施旺提出细胞是构成动植物体的基本单位。 1858年，德国的魏尔肖总结出细胞通过分裂产生新细胞。 2.提出者 施莱登、施旺 3.主要内容 (1)细胞是一个有机体，一切动植物都由细胞发育而来，并由细胞和细胞产物所构成。
不是“一切生物”，如病毒没有细胞结构 (2)细胞是一个相对独立的单位，既有它自己的生命，又对与其他细胞共同组成的整体生命起作用。 (3)新细胞是由老细胞分裂产生的。 施莱登、施旺未发现细胞分裂。 4.建立意义 揭示了动物和植物的统一性，从而阐明了生物界的统一性。 没有揭示生物界的多样性 [典例1]在“细胞学说”最初创立时，下列关于其主要内容的叙述中不准确的一项是() A.一切动物和植物都由细胞发育而来，并由细胞和细胞产物所构成 B.细胞是一个相对独立的有机体，具有自己的生命 C.细胞对与其他细胞共同构成的整体的生命起作用 D.从老细胞核中长出一个新细胞，或者是在细胞质中像结晶那样产生新细胞 解析施莱登和施旺初始建立的“细胞学说”提出一切动植物都由细胞发育而来；细胞既有它自己的生命，又对与其他细胞共同组成的整体的生命起作用；新细胞可从老细胞中产生，后来魏尔肖又进行补充，认为“细胞通过分裂产生新细胞”，故D项叙述不准确。 答案 D [变式训练] (2019·大庆实验中学高一期中)关于细胞学说及其建立的叙述，错误的是() A.它揭示了动植物细胞的统一性和多样性 B.建立者主要是施莱登和施旺 C.显微镜的发明是细胞学说建立过程的重要一环 D.是多位科学家在探索中开拓、继承、修正和发展而建立的 解析细胞学说揭示了动物和植物的统一性，并未揭示动物和植物细胞的多样性，
细胞是生命活动的基本单位
第1课时细胞是生命活动的基本单位1．(2018大庆)某学生在实验中使用显微镜，她用的目镜倍数是“5×”，要把观察的材料放大200倍，她应该选的物镜倍数为() A．10×B．20× C．40×D．100× 2．(2018湘潭)在“观察洋葱鳞片叶内表皮细胞”的实验操作考试中，小明在显微镜视野内只能看清细胞壁和细胞核，看不清液泡。为了能让细胞质与液泡的界面更明显，此时可() A．改用凹面镜反光，放大光圈B．改用平面镜反光，缩小光圈 C．改用凹面镜反光，缩小光圈D．改用平面镜反光，放大光圈 3．(2018东营模拟)如图，从甲到丙是用显微镜观察人口腔上皮细胞的三个视野，下列说法正确的是() A．从甲到乙需将低倍镜换成高倍镜B．从乙到丙需将玻片向左上方移动 C．产生N主要是因为取样操作不当D．从甲到丙不需要调节细准焦螺旋 4．如图表示显微镜下观察到的人体口腔上皮细胞①和污物②。若要将①移至视野正中央并进行观察，下列相关说法正确的是() A．装片应向左下方移动B．视野亮度将会变暗 C．②可能会被移出视野D．视野中①的数量会增加 5．(2018湘潭)菠菜叶肉细胞比人体肌肉细胞多的结构有() A．叶绿体、细胞质B．细胞核、液泡 C．细胞壁、叶绿体、液泡D．细胞壁、线粒体 6．(2018衡阳)如图是动、植物细胞结构示意图，下列有关说法错误的是()
A．①是细胞壁，起支持和保护作用 B．②是细胞膜，能控制物质进出细胞 C．⑥是细胞的控制中心 D．西瓜甘甜可口，主要是因为⑤中含有较多的糖分 7．(2018台州)红蛇果的果皮细胞因含花青素而呈红色。将某品种的红蛇果浸泡在热水中，热水变红色；浸泡在冷水中，冷水不变红。这一现象说明热水破坏了果皮细胞的() A．细胞壁B．细胞膜 C．细胞质D．细胞核 8．(2017齐齐哈尔)植物细胞和动物细胞都具有的能量转换器是() A．线粒体B．叶绿体 C．液泡D．叶绿体和线粒体 9．(2018新疆)未成熟葡萄中的酸性物质主要存在于() A．细胞核内B．细胞膜上 C．液泡内D．细胞壁 10．(2018北京)下列关于草履虫的叙述，不正确的是() A．生活在水中B．由一个细胞构成 C．不需要从外界获取营养物质D．能独立完成各项生命活动 11．(2018怀化节选)如图为两个细胞的显微结构示意图，请据图回答： (1)制作人口腔上皮细胞临时装片时，染色用的是________。 (2)用显微镜观察制作好的洋葱表皮细胞临时装片，在镜下已经找到洋葱表皮细胞。如果想要更清楚地观察细胞核、液泡等，应调节显微镜的______________。
第二讲 细胞是生命活动的基础
第一课时光学显微镜 一、光学显微镜结构： 1、右图是一台普通光学显微镜的结构示意图，请将相应的名称填在横线上。 ⑴⑵ ⑶⑷ ⑸⑹ ⑺⑻ ⑼⑽ ⑾⑿ ⒀⒁ 物镜、目镜：放大物象粗准焦螺旋、细准焦螺旋：调焦距 压片夹：固定玻片标本转换器：调换物镜 遮光器：调节光线强弱反光镜：是光线射入镜筒 通光孔：光线通过的孔道，位于载物台中央载物台：放置玻片标本 2、显微镜使用步骤： 1）取镜安放：一手握住镜臂，一手托住镜座，放在偏左方 2）对光：选最大光圈和低倍物镜对准通光孔，转动反光镜，将光线反射到镜筒里，直到整个视野呈雪白色为止（即可看到一个白亮的圆形视野） 3）观察：①从侧面注视物镜、双手缓慢顺时针方向转动粗准焦螺旋使镜筒下降、直到物镜距离玻片标本2-3mm为止 ②再逆时针方向转动粗准焦螺旋是镜筒上升直至视野中出现物像； ③再微调细准焦螺旋，使物像更加清晰
几点重要的结论： 1）显微镜的放大倍数= 目镜和物镜的放大倍数的乘积 2）显微镜物象和实物是上下左右都相反（从目镜内看到的物象是倒像） 3）要将视野中的某个方向的物象移到视野的中央，玻片就往那个方向移动，要将视野中央的物象移向某个方向，就将玻片往相反的方向移动 4）放大倍数越小，视野范围越大，看到细胞数目越多，物象越小，光线越亮；放大倍数越大，视野范围越小，看到细胞数目越多，物象越大，光线越暗 5）目镜越长，放大倍数越小；物镜上有螺纹，物镜越长，放大倍数越大 6）视野中的污点有三种情况：物镜上，目镜上，装片上。移动目镜，如果污点随之移动，则污点在目镜上；移动玻片标本，污点随之移动，则污点在玻片标本上 7）光线调暗应选择小光圈和平面镜；光线调亮应选择大光圈和凹面镜；要使模糊物像变清晰，应调节细准焦螺旋 二、制作并观察洋葱表皮细胞临时装片： ①擦：用纱布把载玻片和盖玻片擦干净 ②滴：在载玻片中央滴一滴清水 ③撕：用镊子撕去洋葱鳞片叶的内表皮，置于载玻片的清水中 ④展：用解剖针将表皮展平（防止细胞重叠） ⑤盖：用镊子夹取盖玻片，使其一边接触液体、然后缓慢地盖下去（防止产生气泡） ⑥染：先在盖玻片一侧滴一滴碘液，再用吸水纸从盖玻片对侧引流 三、制作并观察人体口腔上皮细胞临时装片 ①擦：用纱布把载玻片和盖玻片擦干净 ②滴：在载玻片中央滴一滴生理盐水（目的是维持细胞正常形态） ③刮：先用清水漱口，用消毒牙签粗的一端在口腔内侧壁上轻轻刮几下 ④涂：将牙签上附着的碎屑放在载玻片的生理盐水中涂抹几下 ⑤盖：用镊子夹取盖玻片，使其一边接触液体、然后缓慢地盖下去（防止气泡产生） ○6染：先在盖玻片一侧滴一滴碘液，再用吸水纸从盖玻片对侧引流（先滴后吸）
免疫学练习题12
肿瘤免疫及检验 一、选择题 （一）单项选择题（A型题） 1．肿瘤特异性抗原 A．是细胞癌变过程中过度表达的抗原物质 B．非肿瘤细胞所特有，在正常细胞上也有微量表达 C．是细胞癌变过程中出现的新抗原及过度表达的抗原物质的总称 D．是仅存在于肿瘤细胞表面而不存在于正常细胞的抗原 E．有明显的病毒特异性 2．目前认为，下列属于肿瘤特异抗原的是 A．MAGE-1 B．AFP C．CEA D．EB病毒蛋白 E．HPV(人乳头瘤状病毒)蛋白 3．以下关于自发性肿瘤抗原的叙述正确的是 A．它是由病毒感染诱发的肿瘤 B．它是除病毒感染诱发的肿瘤之外的所有肿瘤 C．它是由理化因素诱发的肿瘤 D．它是无明确的诱发因素的肿瘤 E．人类肿瘤极少数属于此类 4．关于肿瘤免疫的描述，错误的是: A．实验证实在某些肿瘤细胞表面存在肿瘤特异性抗原 B．血清CEA升高有助于结肠癌的诊断 C．人乳头瘤病毒感染与人宫颈癌发生有关 D．血清抗AFP抗体水平升高可辅助诊断原发性肝癌 E．抗EB病毒抗体阳性可辅助诊断鼻咽癌 5．以下关于癌胚抗原的叙述错误的是 A．正常人血清中CEA水平极低 B．结肠癌、直肠癌患者血清中的含量急剧增加 C．观察CEA动态水平，有助于临床疗效的判断及复发、转移的观察 D．由于早期结肠癌CEA的检测率低，一般不用于早期诊断 E．它是一种分泌性胚胎抗原 6．肿瘤细胞的“漏逸”是指 A．在机体免疫系统的作用下，某些肿瘤抗原表位减少或丢失，从而逃逸免疫系统识别 B．肿瘤细胞分泌高水平唾液多糖，可“覆盖”抗原 C．由于机体抗肿瘤免疫效应的产生不能赶上肿瘤细胞迅速生长的速度，致使大量生长的肿瘤细胞不能 被有效清除 D．血清中存在的封闭性抗体与肿瘤抗原结合 E．血清中存在的分泌性抗原与肿瘤抗原竞争同TCR结合 7．高水平血清甲胎蛋白(AFP)见于 A．孕妇 B．重度嗜烟者 C．酒精性肝硬化病人 D．结肠癌切除术后病人 E．生殖细胞畸胎瘤病人 8．关于对肿瘤的排斥作用，下列哪项是正确的？ A．T细胞介导的细胞毒 B．ADCC C．补体依赖的细胞毒 D．吞噬细胞对肿瘤细胞的破坏 E．以上全部 9．下述有关系的组合是哪项 A．AFP—肿瘤相关抗原 B．备解素－淋巴因子 C．过敏毒素—免疫球蛋自 D．干扰素－佐剂 E．EPO—补体系统 10．应用IL-2抗肿瘤治疗是扩增 A．抗体产小细胞 B．单核细胞 C．TIL细胞 D．嗜中性粒细胞 E．肥大细胞 11．近年表明，应用抗独特型血清可清除B细胞淋巴瘤，但用同法治疗浆细胞瘤则无效，其原因是由于 A．浆细胞瘤无肿瘤特异抗原 B．浆细胞瘤对ADCC效应不敏感 C．浆细胞无表面Ig D．浆细胞表面的独特型与B细胞表面的独特型不同 E．浆细胞瘤只能被带有相同MHC—I类抗原的细胞毒性T细胞杀伤 12．病毒诱发的肿瘤抗原的特点是 A．无明显的个体、组织特异性，但有明显的病毒特异性 B．无明显的个体、组织特异性，也无明显的病毒特异性 C．抗原性较弱 D．有明显的个体、组织特异性，也有明显的病毒特异性 E．有明显的个体、组织特异性，但无明显的病毒特异性 13．活化的单核巨噬细胞
细胞是生命活动的单位
细胞是生命活动的单位
存在。这说明了，同种植物的不同部位的细 胞之间，结构上存在着一定的异同点。 在着一定的异同点。 知识拓展：切洋葱时，为什么会被熏得流眼泪呢？师：大家一定有过这样的经历，在切洋葱 时被洋葱熏的直掉眼泪。这与洋葱细胞中 的哪个结构有关呢？答案是液泡，液泡中 存在着细胞液，细胞液里面溶解着色素， 有机酸，糖分等等。不同的水果的味道不 同，就与液泡这个结构有一定的关系。刚 分裂的植物细胞没有液泡，发育过程中的 植物细胞具有多个液泡，而成熟的植物细 胞则含有一个中央大液泡。 设计意图：解决生活 中常见的问题；落实 考点。 植物细胞的细胞结 构师：综上所讲，植物细胞的结构是都有细 胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核，它们被 称为植物细胞的基本结构。有的植物细胞 还有液泡和叶绿体。其实，在植物细胞中 还含有像线粒体这样的亚显微结构，只不 过在光学显微镜下，无法看到如此细小的 结构罢了。 设计意图：再次梳理 植物细胞结构，帮助 记忆。同时，提醒同 学们植物细胞结构还 有很多知识需要留在 高中去做介绍。 总结分享师：通过今天的学习，大家学到了哪些知 识呢？和大家分享一下吧。设计意图：让学生自己去消化和领悟课堂知识，将其内化为自身掌握的知识。 【学习反馈】 1.在观察临时装片时，如在视野中看到中央发亮，周边黑暗的圆圈，该圆圈可能是（）A．污物 B．气泡C．细胞 D．墨水2．下图表示“制作洋葱鳞片叶表皮细胞临时装片”实验的部分操作步骤，步骤②和④滴加的液体分别是（）。 A．清水.清水 B．清水.碘液 C．碘液.清水 D．碘液.碘液答案解析： 1、本题考查的是装片制作过程中的注意事项。在制作临时装片时因操作不当，可能引起观察时视野中出现气泡，气泡的特点是边缘呈黑色，中间明亮。因此该题的答案是B。 2、本题考查的是洋葱鳞片业内表皮临时装片的制作步骤。在制作洋葱鳞片叶内表皮细胞临时装片时有两次滴加的过程：②过程中往载玻片上滴加的是清水，以达到维持细胞形态，以达到便于观察的目的；④过程中滴加碘液进行染色，以达到便于观察的目的。因此该题答案为C。 【板书设计】 第二节植物细胞 一、玻片标本的类型：切片、涂片、装片 二、玻片标本的制作过程 三、植物细胞的结构 基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核特别结构：叶绿体、液泡