HIV初筛实验室样品采集和处理程序

HIV初筛实验室样品采集和处理程序
HIV初筛实验室样品采集和处理程序

1 范围

本文件规定了用于人免疫缺陷病毒(HIV)检测的全血、血清、血浆、细胞样品的采集和处理方法,适用于HIV抗体检测、抗原检测、核酸检测、耐药检测,CD4+和CD8+T淋巴细胞测定和HIV分离培养。

2 样品种类及相应的用途

●全血、血清、血浆样品可用于HIV抗体检测。

●抗凝全血可用于CD4+和CD8+T淋巴细胞测定。

●血浆可用于HIV-1病毒载量、基因型及耐药检测。

●全血、血浆样品可用于HIV核酸的定性检测。

●全血可用于HIV-1分离培养。

3 操作步骤

3.1 采样前准备

根据检测项目的具体要求,确定采集样品的种类、处理、保存及运输的时限和方法,按照临床采血技术规范的要求操作,遵守生物安全要求。

要检查所需物品是否已备齐,是否在有效期内,有无破损,是否足量,特别应检查受检者信息与样品容器表面的标记是否一致,并注明样品采集时间。选择合适的室内(外)采血空间,受检者坐(卧)于合适的位置,准备采血用具、皮肤消毒用品、采血管及试管架、硬质废弃物容器等。

●采血前,先对装有样品的离心管或滤纸进行标记,标记的内容至少应包括:

患者姓名、送检科室、床号

3.2 样本采集和处理

●抗凝全血:消毒局部皮肤,用加有抗凝剂(EDTA钠盐或钾盐、枸橼酸钠、肝素钠)的真空

采血管抽取适量静脉血,或用一次性注射器抽取静脉血,转移至加有抗凝剂的试管中,轻轻颠倒混匀6~8次,备用。

●末梢全血:消毒局部皮肤(成人和1岁以上儿童可选择耳垂、中指、无名指。1岁以下儿童

采用足跟部)。用采血针刺破皮肤,用无菌纱布擦掉第一滴血。收集滴出的血液,备用。

●血浆:将采集的抗凝全血1500~3000r/min离心15min,上层即为血浆,吸出置于合适的容

器中,备用。

●血清:根据需要,用一次性注射器(或真空采血管)抽取5~10ml静脉血,室温下自然放

●置1~2h,待血液凝固、血块收缩后再用1500~3000r/min离心15min,吸出血清,置于合

适的容器中,备用。

●根据检测要求选用适当的抗凝剂,如CD4+和CD8+T淋巴细胞测定可选用EDTA钠盐或钾盐、

枸橼酸钠、肝素钠,HIV病毒分离、核酸定性/定量检测可选用EDTA钠盐或钾盐或枸橼酸钠。

●采血完成后的穿刺针头必须丢弃于尖锐危险品容器里,妥善处理,防止发生职业暴露。

●样品采集后处理、保存、运输的时限和条件,因不同的检测项目而异,应参见不同检测项

目要求。

●采样之后,应及时在登记本上作记录,记录的内容至少包括:

患者姓名、性别、年龄、送检科室、床号、送检项目、标本类别、采集时间、采集者

3.3 样品的保存

●用于抗体和抗原检测的血清或血浆样品,短期(1周)内进行检测的可存放于2~8℃,一

周以上应存放于-20℃以下。

●用于核酸检测的血浆和血细胞样品4天内进行检测的可存放于4℃,3个月以内应存放于

-20℃以下。3个月以上应置于-70℃以下。

●艾滋病检测筛查实验室检测的筛查阳性样品应及时送确证实验室,筛查阴性样品,可根据

具体需要决定保存时间,一般实验室保存期为7天。特殊用途或专项项目的样品根据具体要求确定保存时间。

3.4 样品的运送

●应符合生物安全要求;要获得相应部门批准并由具有资质的人员专程护送。

●应采用三层容器对样品进行包装,随样品应附有与样品唯一性编码相对应的送检单。送检

单应标明受检者姓名、样品种类等信息,并应放置在第二层和第三层容器之间。

第一层容器:直接装样品,应防渗漏。样品应置于带盖的试管内,试管上应有明显的标记,标明样品的唯一性编码或受检者姓名、种类和采集时间。在试管的周围应垫有缓冲

吸水材料,以免碰碎。

第二层容器:容纳并保护第一层容器,可以装若干个第一层容器。要求不易破碎、带盖、防渗漏、容器的材料要易于消毒处理。

第三层容器:容纳并保护第二层容器的运输用外层包装箱。外面要贴上醒目的标签,注明数量、收样和发件人及联系方式,同时要注明“小心轻放、防止日晒、小心水浸、防止

重压”等字样,还应易于消毒。

●用于抗体检测的血清和血浆样品应在冻存条件下运送。用于CD4+和CD8+T淋巴细胞测定的

样品应在室温下(18~25℃)或4℃(特殊要求时)运送。用于病毒载量检测的样品应在-20℃以下运输。DBS样品应在室温下(18~25℃)运送。每一件包装的体积以不超过50mL为宜。

●运送样品必须有记录。

3.5 样品的接收

●样品接收必须在具有处理感染性材料能力的实验室内,由经过培训的、穿戴好工作服、戴

好乳胶手套的工作人员接收。

●核对样品与送检单,检查样品管有无破损和溢漏。如发现溢漏应立即将尚存留的样品移出,

对样品管和盛器消毒,同时报告实验室负责人和上一级实验室技术人员。

●检查样品的状况,记录有无严重溶血、微生物污染、血脂过多以及黄疸等情况。如果污染

过重或者认为样品不能被接受,应将样品安全废弃。并将样品情况立即通知送样人。

●接收样品时应在样本送检登记本上填写相应的信息,至少应包括:

送检人、接收时间、接收人。

3.6 样本检测后的处理

●检测后的标本暂存于标本冰箱7天,以备核查;对于可疑阳性标本,用一次性离心管(子

弹头)装血清标本,留存血清量600—800 ul,将标本冷冻保存于免疫室冰箱内,保存标本应标示清楚:受检者姓名、标本类型、采集时间;并在“HIV可疑标本送检筛查结果记录本”

上作相应的记录。

●血液标本存放7天后处理时,先用5000 mg/L次氯酸钠溶液浸泡2小时以上,然后用双层

专用黄色医用垃圾袋专人收集所有废弃医用垃圾,送专门存放医用垃圾处,交接给南宁市医疗垃圾处理中心统一焚化处理,并做好登记。

4 支持性文件

《全国艾滋病检测技术规范(2009年修订版)》

5、相关记录

科室样本送检登记本

HIV可疑标本送检筛查结果记录本

废弃物处理登记本

【hiv初筛实验室培训】HIV初筛实验室管理制度

【hiv初筛实验室培训】HIV初筛实验室管理制度 HiV初筛实验室管理制度 HiV初筛实验室管理制度 1.目的为加强本实验室艾滋病初筛检测工作的规范化管理,提高检测工作,根据《全国艾滋病检测工作管理办法》,特指定本实验室的管理制度。 2.范围适用于HiV初筛实验室。 3.人员组成:本实验室由三名参加过省疾病控制中心HiV初筛检测技术培训,并获得培训证书,人员均具有2年以上从事病毒性疾病血清学检测工作经验。人员承担负责人为一名具有中级卫生技术职称人员并获得了省疾病控制中心HiV初筛检测技术培训的资格证书的人员担任。 4.HiV初筛实验室为省卫生厅、省疾控中心省批的二级生物实验室。 5.管理制度 5.1,热爱本职工作,遵守卫生人员服务守则与工作原则; 5.2,坚持不歧视原则,与服务对象建立良好关系,关心他人; 5.3,做好合格和规范的预防艾滋病传播的宣传工作; 5.4,严格执行《全国艾滋病检测工作管理办法》;遵照本实验室的相关SoP文件工作;

5.5,严格执行实验室生物安全通用要求,工作人员要熟悉生物安全操作知识,和消毒技术; 5.6,不得在实验室内喝饮料,抽烟,吃食物和化装等,不得在实验室会客; 5.7,实验室用品(包括工作服)不得用作其他用途;不可将私人用品和无关用品带入实验室; 5.8,工作时,要戴手套,穿工作服,操作时手套破损应立即丢弃,洗手并戴上新手套; 5.9,不要用戴手套的手触摸暴露皮肤、口唇、眼睛、耳朵和头发等; 5.10,尽量避免使用尖锐物品和器具;宜用不易破碎材料制品;禁止用口吸任何物品; 5.11,工作认真负责。严格执行本实验室的质量管理控制程序规则;做好室间质评和室内质控工作;保证检测结果准确无误,杜绝差错事故的发生; 5.12,工作结束后,要对工作台面消毒,如用消毒液清洁后要干燥20分钟以上;操作时要有标本,检测试剂外溅时,应及时消毒;平时要保持环境整洁; 5.13,工作完毕,脱去手套后洗手,再脱去工作服,用肥皂和流动水洗手; 5.14,遇到以外事故,应立即处理并报告上级,妥善即使处。 6.相关文件 6.1,样本的采集,接收登记和处理

艾滋病检测筛查实验室基本标准

艾滋病检测筛查实验室基本标准

艾滋病检测筛查实验室基本标准 (一)艾滋病筛查中心实验室及艾滋病筛查实验室。 1、人员条件 至少由3名医技人员组成,其中具有中级卫生技术职称人员至少1名。负责筛查试验的技术人员需具有2年以上从事病毒性疾病血清学检测工作经验,接受过省级以上艾滋病检测技术培训,并获得培训证书。 2、建筑条件:实验室或检测区域应分为清洁区、半污染区和污染区,应符合二级生物安全实验室(BSL-2)要求。 3、仪器设备条件 配备艾滋病病毒抗体筛查试验所需设备,至少包括酶标读数仪、洗板机、普通冰箱、水浴箱(或温箱)、离心机、加样器(仪)、消毒与污物处理设备、实验室恒温设备、安全防护用品和生物安全柜。 (二)艾滋病检测点。 1、人员条件:至少由2名经过艾滋病检测技术培训并获得培训证书的专业人员组成。 2、建筑条件:需有艾滋病检测区域或专用实验台,能开展简便、快速检测。 3、设备条件:需配备快速试验所必须的物品,包括普通冰箱、消毒与污物处理设备、一次性消耗品、安全防护用品。

艾滋病检测筛查实验室职能 包括艾滋病筛查中心实验室、艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点。艾滋病筛查中心实验室设在市(地)级疾病预防控制中心;艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点可设在疾病预防控制机构、医疗机构、采供血机构、计划生育技术服务机构等。 1、艾滋病筛查中心实验室职能。 (1)负责职责范围内艾滋病病毒抗体筛查试验,根据需要可开展其他艾滋病检测工作。 (2)负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品送艾滋病检测确证实验室。 (3)定期汇总艾滋病检测资料,并上报艾滋病检测确证实验室。配合艾滋病检测确证实验室做好个案调查、登记等随访工作。 (4)负责对职责范围内艾滋病检测筛查实验室的技术指导;协助艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点开展自愿咨询检测工作,给予技术支持和指导。 2、艾滋病筛查实验室职能。 (1)开展艾滋病病毒抗体的筛查试验,根据需要可开展其他艾滋病检测工作。 (2)负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品送当地艾滋病筛查中心实验室或艾滋病检测确证实验室。 (3)定期汇总艾滋病检测资料,并上报当地艾滋病筛查中心实验室或艾滋病检测确证实验室。 (4)对自愿咨询检测工作提供技术支持。 3、艾滋病检测点职能。 (1)开展艾滋病病毒抗体的筛查试验。 (2)负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品送当地艾滋病筛查实验室或艾滋病筛查中心实验室。 (3)定期汇总艾滋病检测资料,并上报当地艾滋病筛查实验室或艾滋病筛查中心实验室。 (4)开展艾滋病自愿咨询检测工作。

艾滋病初筛实验室标准操作规程

HIV抗体初筛实验室SOP文件 适用部门:检验科 目录 第一部分工作制度.............................................................................................................. - 1— 实验室工作制度 (1) HIV标本采集与接收登记制度1-?— 艾滋病实验室保密制度................................................................................................ — 2 -艾滋病筛查实验室常规消毒清理工作制度2—?— 差错事故处理制度........................................................................................................ - 3 —报告单签发审核制度................................................................................................... - 3 -设备管理制度................................................................................................................ - 4-试剂管理制度................................................................................................................ — 4- 艾滋病筛查实验室安全防护制度5-?— 艾滋病病毒职业暴露预防处理方案5 -?— 第二部分标准操作规程...................................................................................................... — 8 - 第二章样品采集与处理........................................................................................... —8-第二章标准操作程序8 —?- 一、北京金豪...................................................................................................... —8 — 二、上海科华生物................................................................................................. — 9 — 三、英科新创...................................................................................................... — 10- 第三章结果报告与注意事项.................................................................................... - 12—第三部分设备SOP文件13—?- 一、多功能自动酶标仪RT—2100C................................................................... -13- 二、KHB ST-36W洗板机16-?— 三、电热恒温水箱18 —?- 第四部分流程图........................................................................................................... -20- 一、HIV抗体筛查流程图20-?- 二、暴露级别得评估.................................................................................................. — 21 -附件:血清加样表22-?- 第一部分工作制度 实验室工作制度 1.室内应经常保持整洁,各种仪器设备要安装适当,器皿试剂摆放整齐,标志清

(完整版)食品微生物检验教案第三章食品检验样品的采集和处理

第三章食品检验样品的采集和处理 一、样品的采集与处理 食品检验样品采集的原则: 1、所采样品应具有代表性 每批食品应随机抽取一定数量的样品,再生产过程中,再不同时间内各取少量样品予以混合。固体或半固体的食品应从表层、中层和底层、中间和四周等不同部位取样。 2、采样必须符合无菌操作的要求,防止一切外来污染 一件用具只能用于一个样品,防止交叉污染。 3、再保存和运送过程中应保证样品中微生物的状态不发生变化 采集的非冷冻食品一般在0—5度冷藏,不能冷藏的食品立即检验。一般在36h内进行检验。 4、采样标签应完整、清楚 每件样品的标签须标记清楚,尽可能提供详尽的资料。 在食品的检验中,所采集的样品必须具有代表性,即所取样品能够代表食物的所有部分。如果采集的样品没有代表性,即使一系列检验工作非常精密、准确,其结果也毫无价值,甚至会出现错误的结论。食品因加工的批号、原料情况(来源、种类、地区、季节等)加工方法、保藏条件、运输、销售中的各环节及销售人员的责任心和卫生认识水平等无不影响着食品的卫生质量,因此要根据一小份样品的检验结果去说明一大批食品的质量或一起食物中毒的性质,就必须周密考虑,设计出一种科学的取样和样品制备方法。而采用什么样的取样方案主要取决于检验的目的,目的不同,取样的方案也不同。检验的目的可以是判定一批食品合格与否,也可以是查找食物中毒病原微生物,还可以是鉴定畜禽产品是否有人畜共患的病原体。目前国内外使用的取样方案多种多样,如一批产品按百分比抽样,才若干个样后混合在一起检验;按食品的危害程度不同抽样等。不管采取何种方案,对抽样代表性的要求是一致的。最好对整批产品的单位包装进行编号,实行随机抽样。 (一)样品的种类 样品可分为大样、中样、小样三种。大样指一整批;中样是从样品各部分取的混合样,一般为200g;小样又称为检样,一般以25g为准,用于检验分析。 (二)样品的采集 采样必须在无菌操作下进行。 采样的工具,如探子、铲子、匙、采样器、试管、广口瓶、剪子和开罐器等,必须是无

艾滋病初筛实验室标准操作规程

-- - HIV抗体初筛实验室SOP文件 适用部门:检验科 目录 第一部分工作制度- 1 - 实验室工作制度- 1 - HIV标本采集与接收登记制度- 2 - 艾滋病实验室XX制度- 2 - 艾滋病筛查实验室常规消毒清理工作制度- 2 - 差错事故处理制度- 3 - 报告单签发审核制度- 4 - 设备管理制度- 4 - 试剂管理制度- 5 - 艾滋病筛查实验室安全防护制度- 6 - 艾滋病病毒职业暴露预防处理方案- 7 - 第二部分标准操作规程- 10 - 第二章样品采集与处理- 10 - 第二章标准操作程序- 11 - 一、金豪- 11 - 二、XX科华生物- 12 - 三、英科新创- 13 - 第三章结果报告与注意事项- 15 - 第三部分设备SOP文件- 17 - 一、多功能自动酶标仪RT-2100C- 17 - 二、KHB ST-36W洗板机- 19 - 三、电热恒温水箱- 22 - 第四部分流程图- 23 - 一、HIV抗体筛查流程图- 23 - 二、暴露级别的评估- 24 - 附件:血清加样表- 25 -

第一部分工作制度 实验室工作制度 1.室内应经常保持整洁,各种仪器设备要安装适当,器皿试剂摆放整齐,标志 清晰,有良好的通风设备。 2.实验室工作人员工作时一律穿制服,保持衣帽整洁,试验过程中应专心致志、 认真负责,坚守工作岗位,不得随意串岗、闲谈,保持实验室安静,下班离开实验室前要检查并关好水、电、门、窗等,注意实验室安全。 3.认真开展实验室质量控制工作,仪器设备应定期保养,有温度记录,检测标 本的保存要求符合规X要求。 4.实验室不得放置与测试无关的物品,水、温、湿度、光照、防震、防尘、防 噪声等,环境必须符合实验室的工作要求。 5.实验和楼道内必须配置足够的安全防火措施,并定期检查保养。 6.对不同属性、品种和含量水平的试样,应有足够的试验区域,予以分离检验, 尤其是已知具有生物危害的试样必须分离检验。防止损害工作人员健康和污染环境。 7.与检验无关人员不得进入实验室,外单位人员联系工作,一律在办公室接待。 8.实验结束后,应及时清理实验现场和用品,对染菌带毒的器具废弃物应严格 进行消毒无菌处理。 9.实验室内禁止吸烟、用餐和进食。

HIV初筛实验室废弃物处置和消毒措施

HIV初筛实验室废弃物处置和消毒措施 1、废弃物处置 废弃物处置应符合《实验室生物安全通用要求》(GB 19489-2004)和《消毒技术规范(2002年版)》。 从艾滋病实验室出来的所有废弃物,包括不再需要的样品、培养物和其它物品,均应视为感染性废弃物,应置于专用的密封防漏容器中,安全运至消毒室,并在高压消毒后再进行处理或废弃。 2、HIV常用的物理消毒方法 压力蒸汽消毒,121℃,保持15~20min; 干燥空气烘箱消毒(干烤消毒),140℃,保持2~3h。 3、HIV常用的化学消毒方法 HIV最常用的化学消毒剂是含氯消毒剂(次氯酸钠,含有效氯2000~5000mg/L)、75%乙醇和2%戊二醛,保持10~30 min。 4、废弃物缸:5000mg/L 次氯酸钠。 5、生物安全柜工作台面和仪器表面:75%乙醇。 6、溢出物:5000mg/L次氯酸钠。 7、污染的台面和器具:2000mg/L 次氯酸钠,也可以用过氧化氢或过氧乙酸。器械可用2%戊二醛浸泡消毒。 8、实验台消毒 8.1、实验台消毒措施必须符合艾滋病实验室的通用生物安全要求。由专人按特定程序和方法进行清洁和消毒。

8.2、台面的清洁消毒,保持清洁、湿式打扫。每天开始工作前用湿布抹擦1次,地面用湿拖把擦1次,禁用干抹干扫。抹布和拖把等清洁用具实验室专用,不得混用,用后洗净晾干,下班前用含氯消毒剂(次氯酸钠,含有效氯2000mg/L)、0.2~0.5%过氧乙酸或75%乙醇抹擦1次。也可用便捷式高强度紫外线消毒器近距离照射消毒。 8.3、应象操作未知传染风险样品一样进行消毒与灭菌,小心存放、拿取和使用所有可能有传染性的血液、质量控制和参考物质,若被上述物品明显污染,如具传染性的标本或培养物外溢,溅泼或器皿打破,洒落于台面,应立即用消毒液消毒,用5000mg/L有效氯消毒剂、过氧乙酸或乙醇洒于污染的台面,并使消毒液浸过污染表面,保持30~60 min后再擦拖把用后浸于上述消毒液内1h以上。 8.44、各类在实验室实验台上操作后的废弃物品均应视作物染物分类处理,所有废弃物应视为HIV污染物品,按照《传染病防治法》处理。 9、消毒液的配制及使用 9.1、HIV实验室最常用的化学消毒剂是含氯消毒剂(次氯酸钠,含有效氯2000-5000mg/L)、75%乙醇和2%戊二醛,保持10~30 min。 9.2、含氯消毒剂的配制:次氯酸钠原液使用前进行1:20~1:50稀释(2000-5000mg/L)或联昌84使用前进行1:10~1:25(2000-5000mg/L)稀释后,用于实验室内的消毒。 9.3、乙醇,俗称“酒精”,能够杀灭多种细菌,对HIV病毒有一定的杀灭作用,70~75%的效果最好。因此,使用前新鲜配置足量70~75%的乙醇,用于生物安全柜、工作台面和仪器表面的消毒,可以达到最佳的消毒效果。 9.4、过氧乙酸也是目前使用比较广泛的一种高效消毒剂,新鲜配置1~3%的过氧乙酸熏蒸,用于地面、墙壁、实验器材及实验室内资料、文件、书本等物品的消毒。0.04%的过氧乙酸用于实验室工作人员手浸泡1~20分钟,再用肥皂洗手。

艾滋病检测筛查实验室基本标准

艾滋病检测筛查实验室基本标准 (一)艾滋病筛查中心实验室及艾滋病筛查实验室。 1、人员条件 至少由3名医技人员组成,其中具有中级卫生技术职称人员至少1名。负责筛查试验的技术人员需具有2年以上从事病毒性疾病血清学检测工作经验,接受过省级以上艾滋病检测技术培训,并获得培训证书。 2、建筑条件:实验室或检测区域应分为清洁区、半污染区和污染区,应符合二级生物安全实验室(BSL-2)要求。 3、仪器设备条件 配备艾滋病病毒抗体筛查试验所需设备,至少包括酶标读数仪、洗板机、普通冰箱、水浴箱(或温箱)、离心机、加样器(仪)、消毒与污物处理设备、实验室恒温设备、安全防护用品和生物安全柜。 (二)艾滋病检测点。 1、人员条件:至少由2名经过艾滋病检测技术培训并获得培训证书的专业人员组成。 2、建筑条件:需有艾滋病检测区域或专用实验台,能开展简便、快速检测。 3、设备条件:需配备快速试验所必须的物品,包括普通冰箱、消毒与污物处理设备、一次性消耗品、安全防护用品。

艾滋病检测筛查实验室职能 包括艾滋病筛查中心实验室、艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点。艾滋病筛查中心实验室设在市(地)级疾病预防控制中心;艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点可设在疾病预防控制机构、医疗机构、采供血机构、计划生育技术服务机构等。 1、艾滋病筛查中心实验室职能。 (1)负责职责范围内艾滋病病毒抗体筛查试验,根据需要可开展其他艾滋病检测工作。 (2)负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品送艾滋病检测确证实验室。 (3)定期汇总艾滋病检测资料,并上报艾滋病检测确证实验室。配合艾滋病检测确证实验室做好个案调查、登记等随访工作。 (4)负责对职责范围内艾滋病检测筛查实验室的技术指导;协助艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点开展自愿咨询检测工作,给予技术支持和指导。 2、艾滋病筛查实验室职能。 (1)开展艾滋病病毒抗体的筛查试验,根据需要可开展其他艾滋病检测工作。 (2)负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品送当地艾滋病筛查中心实验室或艾滋病检测确证实验室。 (3)定期汇总艾滋病检测资料,并上报当地艾滋病筛查中心实验室或艾滋病检测确证实验室。 (4)对自愿咨询检测工作提供技术支持。 3、艾滋病检测点职能。 (1)开展艾滋病病毒抗体的筛查试验。 (2)负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品送当地艾滋病筛查实验室或艾滋病筛查中心实验室。 (3)定期汇总艾滋病检测资料,并上报当地艾滋病筛查实验室或艾滋病筛查中心实验室。 (4)开展艾滋病自愿咨询检测工作。

艾滋病初筛实验室

附件1: 艾滋病初筛实验室标准 一、必备条件 (一)人员条件 有3名以上的医技人员,其中中级卫生技术职称人员1名以上(采供血机构的HIV抗体检测人员须具有技师以上卫生技术职称),从事病毒血清学检测技术工作2年以上,接受过国家或省级HIV抗体确认中心举办的HIV抗体检测学习班培训,并获得合格证书。 (二)设备条件 有独立的实验室用房(或至少有专用的检测台),污染区和清洁区要分开。从我国HIV抗体检测工作发展要求,要以酶联免疫法测定考虑所需的检测器材,包括酶标读数仪和洗板机、精确的移液器、专用的普通冰箱、低温冰箱、离心机以及各种消毒与污物处理设施、安全防护用品和恒温设施。 二、HIV抗体检测程序 (一)检测试剂 初筛用的HIV抗体检测试剂,必须是HIV-1/2混合型,经卫生部批准或注册,经过批检检定合格,并在有效期内。常用的检测方法有固相酶联免疫吸附试验(Enzyme Linked Immuno-Sorbent Assay,ELISA)等。(二)HIV抗体检测程序及其流程图 1、血液标本验收合格后,用初筛试剂进行检测,如呈阴性反应,则作HIV抗体阴性报告; 2、初筛检测结果呈阳性反应的标本,须进行重复检测。复检时用两种不同的初筛检测试剂复测; 3、如两种试剂复检结果均呈阴性反应,则作HIV抗体阴性报告;如均呈阳性反应,或有一份阳性,该标本需送上级实验室加以进一步证实。送检时应将重新采集的该受检者血液标本和原有血液标本一并送检。 4、初筛检测的流程图 三、检测结果的判定和处理 对HIV抗体阳性者应做好咨询、保密和报告工作。对HIV抗体阴性者,如近期有高危行为如性乱史、吸毒史、受血史,或有急性流感样症状等情况,为排除窗口期的可能,建议每3个月复查一次,连续2次。对HIV抗体可疑的对象要做好咨询和随访工作。 四、反馈与报告程序 (一)初筛检测中发现HIV抗体阳性反应的标本,应尽快(城区一般要求在48小时内,农村要求在96小时内)将血样连同原始实验资料(包括厂家批号、试剂种类、有效期,如ELISA实验应附上阴性、阳性对照值,Cut off值及样品OD值)和送检化验单送卫生行政部门指定的初筛中心实验室,再转送确认实验室,或直接送至HIV抗体确认实验室。送检化验单必须由初筛实验室一名直接实验操作人员和一名中级技术职称以上的负责人员签名。初筛实验室不得向受检者宣布初检阳性反应结果;

土壤分析样品的采集和处理方法

土壤分析样品的采集和 处理方法 标准化管理部编码-[99968T-6889628-J68568-1689N]

Ⅰ-土壤分析样品的采集和处理方法配方施肥是一种以最少的肥料投入得到农作物最高产量的农业新技术,这一技术的基础是测出土壤中已有的养分含量,然后根据种植作物的品种、目标产量决定该施什么肥、施多少肥。 土壤样品采集是决定分析结果是否准确的重要环节,因此请严格按下列方法采集土样。 对作物根系较浅的种植地只需取耕层20厘米深的土壤,对作物根系较深的种植地如小麦应适当增加深度,果园土壤样品在耕层40厘米深处采集,采样点的多少可根据试验区耕地面积大小和地形而定,地块面积较小的要采5个点以上,地块面积较大的应采20个点以上。取样点的分布最好采用S型采样法或十字交叉法。(见图一) 采来的样品数量太多可用四分法弃去一部分保留1斤土样即可(见图二)。其方法是:把采来的土样倒在干净的木板或塑料布上,用手将土块捏碎,用镊子夹去土样中的作物根系、昆虫、石块等杂物,放于室内阴凉通风处风干,注意不能在阳光下曝晒及火烤,以免发生氧化反应。把风干后的土样用木棍或玻璃瓶碾碎(不可用金属制品),然后用1—2毫米筛子筛一遍。把筛过的土样平铺成四方形,如数量仍然很多,可再用四分法处理,直至所需数量为止,一般用50克土样即可,完成土样处理后,请填写土壤登记表。 注:如一户有几个土样或几户各有一个土样可将土壤登记表分别填好,并在土样包装上做上与登记表同样内容的标记,以免搞错。 避免在粪堆底上和同一垄上以及田边,路边,沟边和特殊地形部位采样。 采样时在确定的采样点上用小土铲向下切取一片片的土样样品,每个样品点采取的土壤厚、薄、深、浅、宽、狭应大体一致,集中起来混合均匀。 有机肥分析样品的采集和处理方法:堆肥、厩肥、沤肥、草塘肥、沼气肥、牲畜粪尿以及人粪尿等都是有机肥,这些肥料大都是很不均匀的,采样时应注意多点取样,一般应在翻堆混匀后,选择10—20个采样点,大块和散碎的肥料比例相近,把采到的若干样品放在一块干净的塑料布上,送入室中风干,摊开晾干,再把样品弄碎、剪细、混匀,再用四分法缩分至500克左右,磨细并全部通过1毫米孔径筛子,装入样品瓶中。 如果有机肥样品中夹有较多石块,应捡出另外称重,并计算其占原有样品的百分数,如需测定有机肥料中的NH4和NO3,则需用新鲜样品,即不经风干立即进行测定。 粪尿和沼气肥是液体和固体混合肥,可先混匀在未分层前取出500毫升左右放入密闭容器中,用玻璃棒将固体充分捣碎,在分析称样前应反复振摇容器充分混匀。 四分法: Ⅱ-土壤养份测试方法

艾滋病初筛实验室标准操作规程

HIV抗体初筛实验室SOP文件 适用部门:检验科 目录 第一部分工作制度.................................................................................................................... - 1 - 实验室工作制度.................................................................................................................. - 1 - HIV标本采集与接收登记制度.......................................................................................... - 1 - 艾滋病实验室保密制度...................................................................................................... - 2 - 艾滋病筛查实验室常规消毒清理工作制度...................................................................... - 2 - 差错事故处理制度.............................................................................................................. - 3 - 报告单签发审核制度.......................................................................................................... - 3 - 设备管理制度...................................................................................................................... - 4 - 试剂管理制度...................................................................................................................... - 4 - 艾滋病筛查实验室安全防护制度...................................................................................... - 5 - 艾滋病病毒职业暴露预防处理方案.................................................................................. - 5 - 第二部分标准操作规程............................................................................................................ - 8 - 第二章样品采集与处理.................................................................................................... - 8 - 第二章标准操作程序........................................................................................................ - 8 - 一、北京金豪.............................................................................................................. - 8 - 二、上海科华生物...................................................................................................... - 9 - 三、英科新创............................................................................................................ - 10 - 第三章结果报告与注意事项.......................................................................................... - 12 - 第三部分设备SOP文件 ........................................................................................................ - 13 - 一、多功能自动酶标仪RT-2100C .................................................................................. - 13 - 二、KHB ST-36W洗板机............................................................................................. - 16 - 三、电热恒温水箱............................................................................................................ - 18 - 第四部分流程图...................................................................................................................... - 20 - 一、HIV抗体筛查流程图................................................................................................ - 20 - 二、暴露级别的评估........................................................................................................ - 21 - 附件:血清加样表.................................................................................................................... - 22 -

艾滋病病毒(HIV)初筛实验室室内质量控制标准操作程序

艾滋病病毒(HIV)初筛实验室室内质量控制标准操作程序 保证ELISA检测结果准确可靠, 充分发挥其方法学的优点。 【目的】 保证ELISA检测结果准确可靠, 充分发挥其方法学的优点。 【该SOP变动程序】 本标准操作程序的变动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:科主任、专业主管。 【方法】 【分析前质控】 一、人员培训 实验是人操作的,因此检验人员需经过培训,熟练掌握本专业如下几方面的技术知识: 1、检验项目的基本原理(ELISA原理)。 2、临床意义。 3、熟悉检测技巧,了解易出差错的环节及难点。 4、熟悉检测试剂性能(包括试剂盒组成,包被片段及其组成)。 5、熟悉检测仪器的原理及性能;掌握数据处理的能力和质量控制知识。 6、需参加有关部门组织的专门培训班,测试合格后持证上岗。 二、室内质控血清的制备: 1、收集阳性血清(无明显溶血、黄胆、脂肪血和污染血清,到一定量(够本室使用3-6个月的量)。 2、传染性病毒阳性需经56℃、30分钟灭活后使用。 3、过滤,除纤维沉淀物。 4、稀释,用正常人血清或10%小牛血清PBS溶液稀释。 5、测定值,和定值参考品进行对比、求值,一般定在Cut Off值附近的阳性值。 6、分装小瓶(每日用量),加盖、贴签,-20℃冻存备用。 【试剂盒选择】 必须使用经卫生部生物制品检定所检定合格,并贴有防伪标签的产品。 【试剂盒评价】 试剂评价需要有权威的血清考核盘(Panel)进行检测,价格昂贵,操作繁琐,一般实验室不易开展,可以通过以下信息,了解试剂质量。 1、根据该试剂生物制品鉴定所的批批检定报告,了解其质量水平,按照质量计划选择灵敏度高的或特异性高的试剂。 2、通过询问试剂包被物的组成,如原料来源(基因工程或合成多肽),片段的组合(按比例混合或化学合成),片段的长短等判断试剂的优劣。

艾滋病初筛实验室年终工作总结

艾滋病初筛实验室年终工作总结 在过去的一年里,我科艾滋病初筛实验室在上级卫生主管部门和疾控部门的领导下,在医院和科室主任的支持下,我们工作人员严格按照实验室的规范化管理要求进行各项工作,从提高实验室的检测技术水平,操作人员的业务水平入手,规范细致的做好检测的每一项工作。现将一年来的工作进行认真的分析总结,从中吸取经验和教训,从而在今后的工作中能逐步提高和改进。 一、认真学习HIV 筛查实验室的各种规章制度,严格按照并执行各种规章制度。 二、开展HIV 筛查试验的情况,全年共接收HIV 筛查标本562 份,无一例阳性标本,受血前检测占85%,孕产前检查占14%,其他就诊检测占1%。 三、开展HIV 实验室规范化管理,积极改进检测工作 1、对照HIV 筛查实验室管理办法,加强规章制度的健全和落实,健全了各种工作记录,使HIV 筛查实验室工作走向规范化、法制化、程序化。 2、对工作人员加强医疗安全教育,特别是工作时的防护,结果的解释,质量控制、待复检标本上报的程序等。 3、对有放试剂、样品血清的冰箱应上锁,专人管理。 4、制作了标本转运盒,确保标本转运的安全。 5、开展实验室全面质量控制确保检验质量:进行了仪器校准,加样器校准,制作了HIV 临界质控血清, 通过室内质量控制活动检验工作质量,并从中发现问题、解决问题。 6、废弃物处理 1 / 2

从HIV 实验室出来的所有废弃物,包括不再需要的样品,培养物和其他物品,均应视为感染性废弃物, 处理应符合《实验室生物安全通用要求》?我科采用高压蒸汽消毒,121° C,保持15—20 min. 7、实验室工作人员年度体检,采血检测HIV 抗体,乙肝,甲肝,梅毒抗体,丙肝抗体等,并备案. 8、11 月3日我科派出二人参加市级HIV 初筛实验室培训班。 我们科决心继续在上级领导和相关部门的指导下,加强HIV 筛查实验室的规范化建设,努力工作,开拓创新,为保障人民健康继续做出应有贡献。 (范文素材和资料部分来自网络,供参考。可复制、编制,期待你的好评与关注) 2 / 2

土壤样品采集与处理实验报告

土壤样品采集与处理实 验报告 Document number:WTWYT-WYWY-BTGTT-YTTYU-2018GT

实验一土壤样品的采集与处理 土壤样品的采集是土壤分析工作中的一个重要环节,是关系到分析结果和由此得出的结论是否正确的一个先决条件。由于土壤特别是农业土壤的差异很大,采样误差要比分析误差大若干倍,因此必须十分重视采集具有代表性的样品。此外,应根据分析目的和要求采用不同的采样方法和处理方法。 一、土壤样品的采集 (一)采样时间 土壤中有效养分的含量随季节的改变而有很大变化。分析土壤养分供应情况时,一般都在晚秋或早春采样。同一时间内采取的土样,其分析结果才能相互比较。 (二)采样方法 采样方法因分析目的和要求的不同而有所差别: 1.土壤剖面样品研究土壤基本理化性质,必须按土壤发生层次采样。 2.土壤物理性质样品如果是进行土壤物理性质测定,须采原状样品。 3.土壤盐分动态样品研究盐分在剖面中的分布和变动时,不必按发生层次取样,而自地表起每l0cm 或20cm 采集一个样品。 4.耕层土壤混合样品为了评定土壤耕层肥力或研究植物生长期内土壤耕层中养分供求情况,采用这种方法。 (1)采样要求 在采样时,要求土样有代表性,因此需多点取样,充分混合,布点均匀,混合样品的取样数量应根据试验区的面积以及地力是否均匀而定,通常为5~20个点,采样深度只需耕作层土壤0~20cm ,最多采到犁底层的土壤,对作物根系较深的,可适当增加采样深度。 (2)采样方法 根据地形、样点数量和地力均匀程度布置采样点。面积不大,比较方正,可采用对角线取样法;面积较大,形状方正,肥力不匀的地块可采用棋盘式采样方法(方格取样法);面积较大,形状长条或复杂,肥力不匀的地块多采用 土时应除去地面落叶杂物。采样深度一般取耕作层土壤20cm 左右,最多采到犁底层的土壤,对作物根系较深的土壤,可适当增加采样深度。 对角线取样法 棋盘式取样法蛇形取样法法

样品的采集与处理

样品的采集与处理 样品的采集 样品可分为检样、原始样品、平均样品、试验样品。 由组批或货批中所抽取的样品称为检样。 将许多份检样综合在一起称为原始样品。 将原始样品按照规定方法经过混合平均,均匀地分出一部分,称为平均样品。平均样品一般不少于1kg。 平均样品经过混合分样,根据需要从中称取一部分作为试验用的样品,称为试验样品,简称试样。 对于粮食、油料等固体颗粒状物品,由原始样品充分混合均匀,进而分取平均样品或试样的过程,称为分样。 ⑴采样的要求及注意事项 采样时必须注意样品的生产日期、批号、代表性和均匀性,一式3份供检验、复验与备查用,每一份不少于0.5kg,具体规定如下。 ①外地调入的食品应结合运货单、兽医卫生人员证明、商品检验机关或卫生部门的化验单,了解起运日期、来源地点、数量、品质及包装情况。 ②液体、半流体食品,若用大桶或大罐盛装着,应先行充分混匀后再采样。样品应分别盛装在3个干净的容器中,盛装样品的容器不得含有待测物质及干扰物质。 ③粮食及固体食品应自每批食品的上、中、下三层中的不同部位分别采取部分样品混合后按四分法对角取样,再进行几次混合,最后取有代表性的样品。 ④肉类、水产等食品应按分析项目要求分别采取不同部位的样品或混合后样品。 ⑤罐头、瓶装食品或其他小包装食品应根据批号随机取样。 ⑥要认真填写采样记录。写明采样单位、地址、日期、样品批号、采样条件、包装情况、采样数量、检验项目及采样人。 ⑦样品应按不同检验项目妥善包装、运输、保管,送实验室后,应立即检验。 样品的处理 样品制备的目的是为了保证样品的均匀性,使平均样品在拣取任何部分进行检验时都能代表全部样品的成分,以求得正确的结果。 制备时应注意以下几点: ①对于食品类原料,应先去除去可食部分,然后在进行处理。 ②制备过程中注意不要使物料组分发生变化。 ③防止外来物质对物流的污染。 ④防止鲜活物质中因酶的作用而导致物料组分的变化。 ⑤制备好的样品应尽快地进行检验。 样品预处理的常用方法分为以下几种。 ①有机物破坏法,又分为干法灰化法和湿法灰化法。选择的原则应是: a.方法简便,使用试剂越少越好。 b.方法耗时间越短,有机质破坏越彻底越 好。c.被测元素不受损失,破坏后的溶液容易处理,不影响以后的测定步骤。

HIV初筛实验室常用表格

附表1 HIV抗体筛查报告 REPORT OF HIV ANTIBODY SCREENING TESTING 秘密SECRET 编号NO. PRINTED BY CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION 中国疾病预防控制中心制订

附表2 HIV抗体复检化验单 秘密编号 中国疾病预防控制中心制订

附表3 HIV抗体确认检测报告单 REPORT OF HIV ANTIBODY CONFIRMATORY TESTING 秘密SECRET 编号NO. PRINTED BY CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION中国疾病预防控制中心制订

附表4 HIV感染流行病学监测疫情报告单 REPORT OF HIV SEROEPIDEMIOLOGY SURVEILLANCE 秘密SECRET 报告单编号NO.第页共页

附表5 HIV抗体替代策略检测报告单 REPORT OF HIV ANTIBODY ALTERNATIVE STRATEGY TESTING 秘密SECRET 编号NO. PRINTED BY CHINESE CENTER FOR DISEASE 中国疾病预防控制中心制订CONTROL AND PREVENTION

附表6HIV抗体检测数季报表 __________年季度 填报单位:E-mail:__________________ No. 单位(盖章):填表人(签字):报告日期:年月日附表7艾滋病职业暴露个案登记表

样品的采集和处理

第一章样品的采集和处理 1 范围 本章规定了用于人免疫缺陷病毒(HIV)检测的全血、血清、血浆、细胞、唾液、尿液以及滤纸干血斑(DBS)样品的采集和处理方法,适用于HIV抗体检测、抗原检测、核酸检测、耐药检测,CD4+和CD8+T淋巴细胞测定和HIV分离培养。 2 规范性引用文件 《艾滋病和艾滋病病毒感染诊断标准》中华人民共和国卫生行业标准 WS 293-2008 《艾滋病病毒感染者及艾滋病患者CD4+T淋巴细胞检测质量保证指南(试行)》(中国疾病预防控制中心,2006年2月) 《HIV-1病毒载量测定及质量保证指南(试行)》(中国疾病预防控制中心,2008年2月)Guidelines for Using HIV Testing Technologies in Surveillance WHO/CDS/CSR/EDC/2008 《可感染人类的高致病性病原微生物菌(毒)种或样本运输管理规定》,卫生部第45号令2006年2月1日 3 样品种类及相应的用途 3.1 全血、血清、血浆、唾液、尿液以及DBS样品可用于HIV抗体检测。 3.2 抗凝全血可用于CD4+和CD8+T淋巴细胞测定。 3.3 血浆可用于HIV-1病毒载量、基因型及耐药检测。DBS样品可用于HIV-1基因型及耐药检测。 3.4 全血、血浆、淋巴细胞富集液、外周血淋巴细胞(PBMC)及DBS样品可用于HIV核酸的定性检测。 3.5 PBMC、全血、淋巴细胞富集液等可用于HIV-1分离培养。 4 操作步骤 4.1 采样前准备 根据检测项目的具体要求,确定采集样品的种类、处理、保存及运输的时限和方法,按照临床采血技术规范的要求操作,遵守生物安全要求(参见本规范第八章实验室生物安全)。 要检查所需物品是否已备齐,是否在有效期内,有无破损,是否足量,特别应检查受检者信息与样品容器表面的标记是否一致,并注明样品采集时间。选择合适的室内(外)采血空间,受检者坐(卧)于合适的位置,准备采血用具、皮肤消毒用品、采血管及试管架、硬质废弃物容器等。 4.1.1 样品的编码和记录 4.1.2 应制定样品编码的标准操作程序(SOP),规定样品编码的原则和方法,为样品制定唯一性编码(编号),保证其唯一性。 4.1.3 采血前,先对装有样品的离心管或滤纸进行标记,核对后编码。要将标签贴在试管的侧面,最好使用预先印制好的、专门用于冷冻储存的耐低温标签。 4.1.4 应使用专门的样品记录本或登记表记录样品,同时录入电脑保存。 4.2 采集和处理样品 4.2.1 血液 4.2.1.1 抗凝全血:消毒局部皮肤,用加有抗凝剂(EDTA钠盐或钾盐、枸橼酸钠、肝素钠)的真空采血管抽取适量静脉血,或用一次性注射器抽取静脉血,转移至加有抗凝剂的试管中,轻轻颠倒混匀6~8次,备用。

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