氢氧化钠与过量氯化钙反应生成沉淀

氢氧化钠与过量氯化钙反应生成沉淀
氢氧化钠与过量氯化钙反应生成沉淀

氢氧化钠是一种重要的化工基础原料,广泛地应用于造纸、纺织、石油化工、印染等行业.

(1)氢氧化钠固体曝露在空气中时容易吸收水分而溶解,还易与空气中的二氧化碳(CO2)发生反应而变质.

(2)氢氧化钠与硫酸反应的化学方程式为2NaOH+H2SO4=Na2SO4+2H2O .(3)实验室有一瓶久置的固体,标签上写着“氢氧化钠”.为了检验里面是否还存在NaOH,实验员取少量该固体样品进行以下实验:根据溶液变红这一现象说明样品中含有C (填序号).

A、CaCl2

B、Na2CO3

C、NaOH

D、Na2CO3和NaOH 如果白色沉淀中含有两种物质,这两种物质是CaCO3、Ca(OH)2(填化学

式).

习题“氢氧化钠是一种重要的化工基础原料,广泛地应用于造纸、纺织、石油化工、印染等行业.(1)氢氧化钠固体曝露在空气中时容易吸收水分而溶解,还易与空气中的____发生反应而变质.(2)氢氧化钠与硫酸反应的化学方程式为_...”的分析与解答如下所示:

分析

(1)根据氢氧化钠易与二氧化碳反应考虑;(2)根据方程式的书写方法考虑;(3)根据碱能使酚酞试液变红,碳酸钙属于沉淀,氢氧化钙微溶于水考虑.

解答

解:(1)由于氢氧化钠易吸收空气中水而潮解,易与二氧化碳反应生成碳酸钠和水而变质;

(2)氢氧化钠与硫酸反应的反应物是氢氧化钠和硫酸,生成物是硫酸钠和水,用观察法配平,所以方程式是:2NaOH+H2SO4=Na2SO4+2H2O;(3)碱能使酚酞试液变红,所以根据溶液变红这一现象说明样品中含有氢氧化钠;由于碳酸钠与氯化钙反应生成碳酸钙沉淀和氯化钠,碳酸钙属于白色沉淀,溶液中含有氯化钙、还含有氢氧化钠,所以会结合成氢氧化钙,因为氢氧化钙属于微溶物,所以沉淀中含有氢氧化钙.

故答案为:(1)二氧化碳(CO2);(2)2NaOH+H2SO4=Na2SO4+2H2O;(3)C; CaCO3、Ca(OH)2

点评

解答本题关键是要知道氢氧化钠易与二氧化碳反应而变质,知道方程式的书写方法,知道碱能使酚酞试液变红,碳酸钙属于沉淀,氢氧化钙微溶于水.

氯气与碳酸钠的反应(2018年11月浙江选考第27题第3问)

一氧化二氯是次氯酸的酸酐,其相关的制备,在中科大无机化学书上有的,浙江高考的模拟卷里面也有涉及。 例1.(18年11月学考27)已知化合物X由3种元素组成,某学习小组进行了如下实验: ①取适量X,加水完全溶解,无气体产生,溶液呈碱性; 进行焰色反应,透过蓝色钴玻璃观察到火焰呈紫色; ②取1.685 g X溶于水,加入含HCl 0.02000 mol的盐酸恰好中和; 中和后所得溶液与硝酸酸化的过量AgNO3溶液反应,得到4.305 g白色沉淀。 请回答: (1) X中3种元素是________(用元素符号表示)。 (2) X与水反应的化学方程式是________________________________。 (3) X中一种元素对应的单质,可与足量的Na2CO3溶液反应得到Cl2O,写出该反应 的化学方程式________________________________。 【答案】:例1. (1) K、Cl、O (2) K3ClO+H2O===2KOH+KCl (3) 2Na2CO3+2Cl2+H2O===Cl2O+2NaHCO3+2NaCl

1.(15分)(2014?全国大纲卷)A,B,D,E,F为短周期元素,非金属元素A最外层电子数与其周期数相同,B的最外层电子数是其所在周期数的2倍.B在D中充分燃烧能生成其最高价化合物BD2,E+与D2﹣具有相同的电子数.A在F中燃烧,产物溶于水得到一种强酸,回答下列问题; (1)A在周期表中的位置是,写出一种工业制备单质F的离子方程式 (2)B,D,E组成的一种盐中,E的质量分数为43%,其俗名为,其水溶液与F单质反应的化学方程为,在产物总加入少量KI,反应后加入CCl4并震荡,有机层显色. 的化学式;的化学式为;的电子式为;d的晶体类型是 (4)有A和B、D元素组成的两种二元化合物形成一类新能源物质.一种化合物分子通过键构成具有空腔的固体;另一种化合物(沼气的主要成分)分子进入该空腔,其分子的空间结构为. 解答:解:A,B,D,E,F为短周期元素,非金属元素A最外层电子数与其周期数相同,则A为H;B的最外层电子数是其所在周期数的2倍,则B为C或S,B在D中充分燃烧能生成其最高价化合物BD2,则D为O,B的最高正价为+4价,则B为C; E+与D2﹣具有相同的电子数,则E为Na;A在F中燃烧,产物溶于水得到种强酸,则F为Cl; (1)已知A为H在周期表中位于第一周期ⅠA族;工业上常用电解饱和食盐水的方法来制备氯气,其电解离子方程式为:2Cl﹣+2H2O2OH﹣+H2↑+Cl2↑; 故答案为:第一周期ⅠA族;2Cl﹣+2H2O2OH﹣+H2↑+Cl2↑(; (2)C、O、Na组成的一种盐中,Na的质量分数为43%,则为碳酸钠,其俗名为纯碱(或苏打);碳酸钠与氯气反应生成氯化钠、次氯酸钠、碳酸氢钠,反应的化学方程式为:2Na2CO3+Cl2+H2O═NaCl+NaClO+2NaHCO3;次氯酸钠能与KI反应生成碘单质,反应后加入CCl4并震荡,有机层显紫色; 故答案为:纯碱(或苏打);2Na2CO3+Cl2+H2O═NaCl+NaClO+2NaHCO3;紫; (3)这几种元素只有Na能与H形成离子化合物,则a的化学式为NaH;含有非极性共价键的二元离子化合物,且原子数之比为1:1,则为Na2O2和Na2C2;已知COCl2 结构式为Cl﹣﹣Cl,则其电子式为;只存在一种类型作用力且可导电的单质晶体为Na,Na属于金属晶体;

CaCl2法制备大肠杆菌感受态细胞

CaCl2法制备大肠杆菌感受态细胞 原理: 转化(Transformation):将外源DNA分子引入受体细菌,使之获得新的遗传性状。 受体细菌一般是限制修饰系统缺陷的变异株,不含限制性内切酶和甲基化酶的突变体(R-,M-),可以容忍外源DNA分子进入体内并稳定地遗传给后代。受体细胞经过一些特殊方法,如电击或CaCl2、RbCl/KCl等化学试剂的处理后,细胞膜的通透性增高,成为感受态细胞(Compenent cells),使外源DNA分子得以进入。 目前常用的感受态细胞制备方法有CaCl2和RbCl/KCl法,RbCl/KCl法制备的感受态细胞转化效率较高,但CaCl2法简便易行,且其转化效率完全可以满足一般实验的要求,制备出的感受态细胞暂时不用时,可加入无菌甘油至总体积15%,于-70℃保存半年之久,因此CaCl2法为使用更广泛。 准备: 1、配制0.05mol/L CaCl2-15%甘油(可用0.1mol/L CaCl2和30%甘油等体积混合) 混合溶液,高温高压灭菌; 注:CaCl2必须为分析纯以上。 2、实验中所需的所有试管、培养瓶、离心管等均要用去离子水彻底清洗干净, 高温高压灭菌; 注:最好有制备感受态细菌专用的一套实验器材。 3、受体菌的培养:从非选择性LB平板上挑取E.coli单菌落,接种于3-5ml LB液 体培养基 ( )中,37℃振荡培养过 夜至对数生长中后期。将该菌悬液以1:100的比例接种于50~100ml LB液体培养基中,37℃振荡培养2.5小时至OD600=0.5。注:培养时间不宜超过2.5小时,否则不能达到最高转化效率。 实验步骤: 1、细菌的收获:培养液冰浴5分钟后,4℃5000g离心5分钟。 注:(1)冰浴时间不要超过10分钟;(2)或者4℃8000g离心2分钟,速度太快或时间太长对细菌状态不利,并且不利于下步洗涤。(3)若出现很多黑色沉淀(细菌碎片),说明有多量细菌死亡,此时细菌状态并不好,但若只有少量黑色沉淀,或对转化效率要求不高,亦可继续进行。 2、用预冷的去离子水洗涤沉淀,4℃5000g离心5分钟。 注:(1)洗去细菌碎片和残留的培养液;(2)洗涤时间宜短不宜长。 3、沉淀加入2ml预冷的0.05mol/L CaCl2-15%甘油混合溶液,轻吹散,冰浴5分 钟,4℃5000g离心5分钟。 注:此时可见细菌沉淀为白色,体积也胀大为最初沉淀体积的数倍。 4、沉淀加入2ml预冷的0.05mol/L CaCl2-15%甘油混合溶液,轻吹散,即成为感 受态细胞悬液。分装成50~100μl的小份,贮存于-70℃可保存半年。

氯化钙法质粒转化

氯化钙法进行质粒转化 利用冰冷的CaCl2 制备competent cells,以传统方法进行质体的转形。 仪器用具:37℃培养箱;42℃水浴;冰浴 药品试剂: 0.1 M CaCl2置冰浴中 2 M glucose: 取18 g glucose溶于水中,并调体积至50 mL,无菌过滤,分装后置-20℃贮存。 2 M Mg2+: 取20.3 g MgCl2·6H2O及24.65 g MgSO4·7H2O溶于水中,并调体积至100mL,无菌过滤的,分装小瓶置-20℃贮存。亦可以MgCl2完全取代MgSO4. SOB 液体培养基: 32 Methods in Biotechnology Vol 1 2% Bacto tryptone, 0.5% yeast extract, 10 mM NaCl, 2.5 mM KCl,高压灭菌,使用前加入2 M Mg2+,使最终浓度为10 mM. SOB 固体培养基:

2% Bacto tryptone, 0.5% yeast extract, 10 mM NaCl, 2.5 mM KCl, 1. 5% Bactoagar,高压灭菌,倒plate前加入2 M Mg2+ 使最终浓度为10 mM. SOC/Amp 固体培养基: SOB 中另外添加20 mM glucose 及100 μg/mL ampicillin. SOC 液体培养基:SOB 中加入20 mM glucose (使用前加入)。 大肠杆菌菌株:JM109 #1~#5 接合反应液 方法步骤: 1)进行转形实验前16~20 h,自-70℃取出贮存的菌种,以划单一菌落方式将菌株JM109 接种在SOB固体培养基上,在37℃培养。 2)取40 mL SOB培养基装入125 mL已灭过菌的三角瓶(请记得加入Mg 2+)。另取1 mL SOB加于微量离心管中。由SOB固体培养基上选4~6 个约2~3 mm大小的单一菌落接入1 mL SOB中,震荡将菌体打散后,加入40 mL S OB中,于37℃震荡培养约2~3 h,直至细胞数约为4~7×107/mL. 可于接菌2 h后每隔20~30 min测A600估计 3)收集菌液于离心管中,置冰浴中10~15 min. 4)以750~1,000 g 离心12~15 min (4℃)。

氯化锂化学品安全技术说明书

氯化锂化学品安全技术说明书 说明书目录 第一部分:化学品名称第二部分:成分/组成信息 第三部分:危险性概述第四部分:急救措施 第五部分:消防措施第六部分:泄漏应急处理 第七部分:操作处置与储存第八部分:接触控制/个体防护第九部分:理化特性第十部分:稳定性和反应活性第十一部分:毒理学资料第十二部分:生态学资料 第十三部分:废弃处置第十四部分:运输信息 第十五部分:法规信息第十六部分:其他信息 第一部分:化学品名称 Cas No.: 7447-41-8 中文名称:氯化锂 英文名称:Lithium chloride 分子式:LiCl 第二部分:成分/组成信息 有害物成分含量CAS No. 氯化锂≥99% 7447-41-8 第三部分:危险性概述 GHS 危险性类别: 警示词: 危险信息: 防范说明

预防措施: 事故响应: 安全储存: 废弃处置: 危害描述 物理化学危险: 第四部分:急救措施 一般性建议:急救措施通常是需要的,请将本SDS 出示给到达现场的医生。 皮肤接触:立即脱去污染的衣物。用大量肥皂水和清水冲洗皮肤。如有不适,就医。 眼睛接触:用大量水彻底冲洗至少15 分钟。如有不适,就医。 吸入:立即将患者移到新鲜空气处,保持呼吸畅通。如果呼吸困难,给于吸氧。如患者食入或吸入本物质,不得进行口对口人工呼吸。如果呼吸停止。立即进行心肺复苏术。立即就医。 食入:禁止催吐,切勿给失去知觉者从嘴里喂食任何东西。立即呼叫医生或中毒控制中心。 对保护施救者的忠告:清除所有火源,增强通风。避免接触皮肤和眼睛。避免吸入粉尘。使用防护装备,包括呼吸面具。 对医生的特别提示:根据出现的症状进行针对性处理。注意症状可能会出现延迟。 第五部分:消防措施

CaCl2法制备感受态

准备: 1,1L或0.5L大三角瓶(氧气充分,利于细菌生长),装入100mlLB液体培养基培养基中加100ul 4MNaOH 2,50ml干净(最好较新)塑料离心管 3,1ml枪头和200ul枪头足够数量 4,足够数量的分装用1.5mlEp管 5,80mMMgCl2+20mMCaCl2 以上灭菌,1室温放置,2-5冷冻储藏 制备: 1,活化菌种,5mlLB不加抗生素,1:100接菌,37度振荡培养过夜,同时接一管加抗生素的看是否长菌(让菌复苏,进入对数期的早中期。此时更容易制得感受态细胞) 1:500-1000转接入100ml培养基中,培养2-3h(减少达到所需亮的均所需繁殖的世代数,以减少菌的变异。) 2,无菌台中将菌液转移到冰预冷的50ml离心管中,冰浴10’,4度4000rpm 10’,超净台中弃上清,(使细菌的生长停止,代谢减慢。因为这时已经没有培养基了,如果细菌仍有很高的代谢效率,则有大量细菌死亡) 3,用10ml冰预冷的5液体重悬100ml菌液所得菌体(一定要轻吹,这时细胞壁打开,十分脆弱),冰浴10’(细菌处于00C,CaCl2低渗溶液中,菌细胞膨胀成球形,外源DNA形成抗DNA酶的羟基-钙磷酸盐混合物黏附于细胞表面(羟基来源于细胞壁上的糖,磷酸来源于DNA,经短时间420C热激处理,促进细胞吸收DNA 复合物。) 4,4度4000rpm 10’收菌 每100ml菌体用4ml冰预冷的0.1MCaCl2+10%甘油重悬(除去所有的LB以及细胞破损后释放出来的细胞内含物。防止细胞分裂,以致大量细胞死亡。(一定要轻吹,这时细胞壁打开,十分脆弱) 5,) 6,4度放置5hr 7,分装100ul/冰预冷的1.5EP,-80度保存 8,取两支分别转质粒和不转验证

专题1.1.2 物质的转化(解析版)

第一章 第一节 物质的转化 班级 姓名 编号 03 一、选择题 1.铁、稀盐酸、澄清石灰水、氯化铜溶液是初中化学中常见的物质,四种物质间的反应关系如图所示。图中两圆相交部分(A 、B 、C 、D)表示物质间的反应,其中对应四个反应类型的说法正确的是 A .复分解反应、复分解反应、化合反应、置换反应 B .中和反应、置换反应、复分解反应、置换反应 C .复分解反应、复分解反应、置换反应、置换反应 D .分解反应、复分解反应、置换反应、置换反应 【答案】C 【解析】酸碱中和反应属于两种化合物相互交换成分生成另外两种化合物的反应,为复分解反应,氢氧化钙和稀盐酸反应生成氯化钙和水,所以A 为复分解反应、中和反应;B 的反应属于两种化合物相互交换成分生成另外两种化合物的反应,为复分解反应,氢氧化钙和氯化铜反应生成氢氧化铜沉淀和氯化钙,所以B 为复分解反应;C 的反应为一种单质和一种化合物反应生成另外的单质和化合物的反应,属于置换反应,Fe 和氯化铜反应生成Cu 和氯化亚铁,所以C 属于置换反应;D 的反应为一种单质和一种化合物反应生成另外的单质和化合物的反应,属于置换反应,铁和稀盐酸反应生成氯化亚铁和氢气,所以D 属于置换反应;故答案为C 。 2.下列物质的转化能实现的是 A .242+Ba O H Cl H S Cl B .23+NaOH CO Na CO C .()2 +NaCl Cu OH NaOH D .()3332+BaCO N O a N B a NO 【答案】A 【解析】 A 、发生反应2424=H SO +BaCl BaSO +2HCl ↓ ,过滤除去硫酸钡可得HCl ,符合题意; B 、一氧化碳和氢氧化钠不发生反应,不符合题意; C 、 氢氧化铜和氯化钠不发生反应,不符合题意; D 、 硝酸钠和碳酸钡不发生反应,不符合题意。 故选A 。 3.下图是有关物质的转化,下列说法不正确的是

初中化学碳酸钠与碳酸氢钠的性质应用

初中有关碳酸钠和碳酸氢钠考点总结 碳酸钠(Na2CO3) 碳酸钠俗名苏打、纯碱,白色固体,易溶于水,水溶液显碱性。 化学性质:(1)水溶液显碱性,能使无色酚酞试液变成红色,使紫色石蕊试液变成蓝色;(2)与酸反应放出二氧化碳气体:Na2CO3+2HCl==2NaCl+H2O+CO2↑ 规律:反应物中的酸在初中阶段一般指盐酸、硫酸、硝酸。 (3)与碱反应:例如Na2CO3+Ca(OH)2==CaCO3↓+2NaOH 规律:反应物都可溶,若反应物中的碱一般是氢氧化钙和氢氧化钡,生成物其中之一为沉淀。(4)和盐反应:例如Na2CO3+CaCl2==CaCO3↓+2NaCl 规律:规律:反应物都可溶,生成物至少有一种不溶于水。盐一般是氯化钙、氯化钡;硝酸钙或硝酸钡等。 (5)碳酸钠和水、二氧化碳反应生成碳酸氢钠:Na2CO3+CO2+H2O=2NaHCO3 用途:石油精炼、粗盐精制、硬水软化、制烧碱,广泛用于冶金、玻璃、纺织、造纸等工业,印染和洗涤剂生成等。 工业制备方法(侯氏制碱法): 我国化工专家侯德榜于1938-1940年用了三年时间,成功研制出联合制碱法,后来命名为“侯氏联合制碱法”。其主要原理是: NH3+CO2+H2O== NH4HCO3 NH4HCO3+NaCl ==NaHCO3↓+NH4CI 2NaHCO3==Na2CO3+H2O+CO2↑ (1)NH3与H2O,CO2反应生成NH4HCO3。 (2)NH4HCO3与NaCl反应生成NaHCO3沉淀。主要原因是NaHCO3的溶解度较小。 (3)在第(2)点中过滤后的滤液中加入NaCl,由于 NH4CI在低温时溶解度非常低,使NH4Cl 结晶析出,可做氮肥。 (4)加热NaHCO3得到Na2CO3. 优点:保留了氨碱法的优点,消除了它的缺点,提高了食盐的利用率,NH4Cl可做氮肥,同时无氨碱法副产物CaCl2毁占耕田的问题。 碳酸氢钠(NaHCO3)

制备感受态细胞 氯化钙法

氯化钙法(Calcium Chloride) 本方法适用于批量制备大肠杆菌感受态细胞,所得感受态细胞可以获得5 x 106 到2x 107 转化克隆/微克超螺旋质粒DNA 材料(MA TERIALS) 缓冲液和溶液(Buffers and Solutions) (冰冷的)CaCl2?2H2O (1 M) 冰冷的MgCl2-CaCl2 s溶液(solution, ice cold) 培养基(Media) 用于初始培养物培养的LB肉汤(L-broth for initial growth of culture) LB agar plates containing appropriate antibiotic 核酸(Nucleic Acids) 质粒DNA (Plasmid DNA) 或经过重组的质粒(recombinant plasmid) 方法 1.从37°C过夜(16-20 hours)培养平皿内挑取一个直径约为2到3毫米的单菌落。把这样的单菌落接种于一只装有5毫升LB肉汤的30毫升灭菌试管中,于37°C下振荡培养过夜。 2. 转移0.2毫升过夜培养物于一只装有15或20毫升LB的50毫升灭菌三角瓶中. 于37°C下振荡培养2到2.5小时(此时细菌处于对数生长期)。 3. 室温下,4000 rpm离心5分钟收集对数期细胞。弃培养基,保留细胞沉淀。 5. 加入10毫升冰冷的MgCl2-CaCl2 溶液,并轻微打匀。 6. 4°C下,4000 rpm离心10分钟收集细胞。 7. 弃MgCl2-CaCl2 溶液,保留细胞沉淀。 8. 加入0.8毫升(每25毫升初始培养物加入1毫升)冰冷的0.1M的CaCl2 溶液,并轻微打匀。冰浴放置若干小时为最好。 9. 此时的感受态细胞可以依照下面的步骤10到16直接进行转化操作,也可以分装,加入甘油后于-70°C冰冻保藏。 10. 向事先灭菌,并经冷处理的1.5ml 聚丙烯管中转移100微升感受态细胞悬浮液。向每个转化管中加入DNA(一般含量是10微升或更低的体积中所含量应不超过50纳克)。细心混匀管中成份。于冰浴放置30到40分钟。 11. 把转化管转移至放于42°C循环水浴锅中预热的试管架上,准确计时90秒。(此时不能摇动转化管) 12. 把试管迅速转移至冰浴2到3分钟。 13. 向每只试管中加入500微升LB肉汤。37°C放置45到90分钟,以使细菌复原,并容许质粒所编码的抗生素抗性的表达。 14. 转移适量体积(如果使用90毫米平板,一半涂布量不应超过100微升)的经转化处理的感受态细胞涂布于含有相应抗生素的LB-琼脂平板上。 15. 室温放置平板直到其上液体被吸收。 16. 于37°C倒置平板培养。转化克隆应该于12-16 小时区间出现

Na2Co3性质

碳酸钠为白色粉末或颗粒.无气味.有碱性.是碱性的盐.有吸湿性.露置空气中逐渐吸收1mol/L水分(约15%).400℃时开始失去二氧化碳.遇酸分解并泡腾.溶于水(室温时3.5份,35℃时2.2份)和甘油,不溶于乙醇.水溶液呈强碱 性,pH11.6.相对密度2.53.熔点851℃.半数致死量(30日)(小鼠,腹腔)116.6mg/kg.有刺激性.可由氢氧化钠和碳酸发生化学反应结合而成. 碳酸钠易溶于水,甘油,微溶于无水乙醇,不溶于丙醇. 碳酸钠是一种强碱盐,溶于水后发生水解反应(碳酸钠水解会产生碳酸氢钠和氢氧化钠),使溶液显碱性,有一定的腐蚀性,能与酸进行复分解反应 (Na2CO3+H2SO4==Na2SO4+H2O+CO2),生成相应的盐并放出二氧化碳. 稳定性较强,但高温下也可分解,生成氧化钠和二氧化碳.长期暴露在空气中能吸收空气中的水分及二氧化碳,生成碳酸氢钠,并结成硬块.吸湿性很强,很容易结成硬块,在高温下也不分解.含有结晶水的碳酸钠有3种:Na2CO3·H2O、Na2CO3·7H2O 和Na2CO3·10H2O. 在空气中易风化. 与酸反应 Na2CO3+ 2HCl(过量)==== 2N aCl + H2O + CO2↑ Na2CO3+ HCl(少量)==== NaCl + NaHCO3 与碱反应 Na2CO3+ Ca(OH)2==== 2NaOH + CaCO3↓(碳酸钙白色沉淀,难溶于水,但可溶于酸) 与盐反应 Na2CO3+ BaCl2==== 2NaCl + BaCO3↓(碳酸钡白色沉淀,难溶于水,但可溶于酸)

3Na2CO3+ Al2(SO4)3+ 3H2O ==== 2Al(OH)3↓+ 3Na2SO4+ 3CO2↑ Na2CO3+CaCl2=====2N aCl+CaCO3↓ (氢氧化铝白色沉淀,难溶于水,可溶于酸、碱) 与H2O、CO2反应 Na2CO3+ H2O + CO2==== 2NaHCO3(于碱性环境中沉淀析出)PoorLUU 2014-09-23

CaCl2法制备感受态细胞

大肠杆菌感受态细胞的CaCl2法制备及质粒转化 实验原理 处于对数生长期的细菌经CaCl2 处理后接受外源DNA的能力显著增加。细菌处于容易吸收外源DNA的状态叫感受态。 在自然条件下,很多质粒都可通过细菌接合作用转移到新的宿主内,但在人工构建的质粒载体中,一般缺乏此种转移所必需的mob基因,因此不能自行完成从一个细胞到另一个细胞的接合转移。如需将质粒载体转移进受体细菌,需诱导受体细菌产生一种短暂的感受态,以摄取外源DNA。 转化(Transformation)是将外源DNA分子引入受体细胞,使之获得新的遗传性状的一种手段,它是微生物遗传、分子遗传、基因工程等研究领域的基本实验技术。转化过程所用的受体细胞一般是限制修饰系统缺陷的变异株,即不含限制性内切酶和甲基化酶的突变体(R-,M-),它可以容忍外源DNA分子进入体内并稳定地遗传给后代。受体细胞经过一些特殊方法(如电击法,CaCl2 ,RbCl(KCl)等化学试剂法)的处理后,细胞膜的通透性发生了暂时性的改变,成为能允许外源DNA分子进入的感受态细胞(Compenent cells)。进入受体细胞的DNA分子通过复制、表达实现遗传信息的转移,使受体细胞出现新的遗传性状。将经过转化后的细胞在筛选培养基中培养,即可筛选出转化子(Transformant,即带有异源DNA 分子的受体细胞)。目前常用的感受态细胞制备方法有CaCl2和RbCl(KCl)法,RbCl(KCl)法制备的感受态细胞转化效率较高,但CaCl2法简便易行,且其转化效率完全可以满足一般实验的要求,制备出的感受态细胞暂时不用时,可加入占总体积15%的无菌甘油于-70℃保存(半年),因此CaCl2法使用更广泛。 主要试剂 (1)0.1mol/L CaCl2溶液 (2)LB液体培养基 (3)30%甘油:30mL甘油溶于100mL蒸馏水,高压灭菌。 主要设备 (1)超净工作台 (2)冷冻离心机 (3)恒温摇床 (4)-70℃冰箱 (5)10mL移液管 (6)吸耳球 (7)1mL、200μL移液枪(配套枪头) (8)50mL 离心管 (9)1.5mL离心管 实验材料 (1)大肠杆菌DH5α(R-,M-,Amp-)

CaCl2法制备感受态细胞知识讲解

C a C l2法制备感受态 细胞

大肠杆菌感受态细胞的CaCl2法制备及质粒转化 实验原理 处于对数生长期的细菌经CaCl2 处理后接受外源DNA的能力显著增加。细菌处于容易吸收外源DNA的状态叫感受态。 在自然条件下,很多质粒都可通过细菌接合作用转移到新的宿主内,但在人工构建的质粒载体中,一般缺乏此种转移所必需的mob基因,因此不能自行完成从一个细胞到另一个细胞的接合转移。如需将质粒载体转移进受体细菌,需诱导受体细菌产生一种短暂的感受态,以摄取外源DNA。 转化(Transformation)是将外源DNA分子引入受体细胞,使之获得新的遗传性状的一种手段,它是微生物遗传、分子遗传、基因工程等研究领域的基本实验技术。转化过程所用的受体细胞一般是限制修饰系统缺陷的变异株,即不含限制性内切酶和甲基化酶的突变体(R-,M-),它可以容忍外源DNA分子进入体内并稳定地遗传给后代。受体细胞经过一些特殊方法(如电击法,CaCl2 ,RbCl(KCl)等化学试剂法)的处理后,细胞膜的通透性发生了暂时性的改变,成为能允许外源DNA分子进入的感受态细胞(Compenent cells)。进入受体细胞的DNA分子通过复制、表达实现遗传信息的转移,使受体细胞出现新的遗传性状。将经过转化后的细胞在筛选培养基中培养,即可筛选出转化子(Transformant,即带有异源DNA 分子的受体细胞)。目前常用的感受态细胞制备方法有CaCl2和RbCl(KCl)法,RbCl(KCl)法制备的感受态细胞转化效率较高,但CaCl2法简便易行,且其转化效率完全可以满足一般实验的要求,制备

出的感受态细胞暂时不用时,可加入占总体积15%的无菌甘油于-70℃保存(半年),因此CaCl2法使用更广泛。 主要试剂 (1)0.1mol/L CaCl2溶液 (2)LB液体培养基 (3)30%甘油:30mL甘油溶于100mL蒸馏水,高压灭菌。 主要设备 (1)超净工作台 (2)冷冻离心机 (3)恒温摇床 (4)-70℃冰箱 (5)10mL移液管 (6)吸耳球 (7)1mL、200μL移液枪(配套枪头) (8)50mL 离心管 (9)1.5mL离心管 实验材料 (1)大肠杆菌DH5α(R-,M-,Amp-) 实验步骤 (一)受体菌的培养

ecoli感受态细胞的制备和转化

实验九 e.coli感受态细胞的制备和转化 [实验目的] 1. 学习分子生物学的实验操作技术。 2. 掌握 e. coli感受态细胞的制备和转化的方法。 [实验原理] 未经处理的受体菌细胞对受纳重组分子不敏感,难以实现转化。当用理化方法诱导细胞,使细胞处于最适摄取和容忍外来dna的生理状态一感受态后,才有较高的转化频率,这种细胞称为感受态细胞。 将重组dna转化受体菌,技术关键是通过化学方法诱导细菌进人感受态,以利于外源dna 被导入。这项技术始于mandel和hiag1970年的观察。他们发现细菌经过冰冷氯化钙溶液处理及短暂热休克(hea shock)后,容易被λdna感染;随后cohen于1972年进一步证明质粒dna用同样方法也能进入细菌。其原理是:细菌处于0℃氯化钙低渗溶液中,细胞膨胀成球形。转化混合物中的dna形成抗dna酶的羟基鸟磷酸复合物粘附于细胞表面;经42℃短时间热休克处理,促进细胞吸收dna复合物。在丰富的培养基上生长数小时后,球状细胞复原并分裂增殖。被转化的细菌中,重组的基因得到表达,在选择性培养基平板上可筛选出所需的转化因子。 除化学法转化细胞外,还有电击法。电击法不需要预先诱导细菌进人感受态,只依靠短暂的电击,促使dna进人细胞。因其操作简单方便、转化率高,愈来愈为人们接受。 [实验用品] 一、试剂 1. lb(luria—bertani)培养基 配制每升培养基,应在950ml去离子水中加入: 细菌培养用胰化蛋白胨 10g 细菌培养用酵母提取物 5g 氯化钠 10g 摇动容器直至溶质完全溶解,用5 mnaoh(约0.2ml)调至ph7.0,加人去离子水至总体积为1 000ml,高压灭菌20分钟。 2. lb(20%葡萄糖) 100ml lb中加人20g葡萄糖

氯化钙法制备感受态

一、我制氯化钙法感受态的步骤: 二、1) 取大肠杆菌单菌落接种于2 ml LB液体培养基中,37 ℃ 200 rpm过夜培养; 三、2) 取0.5 ml菌液接种于50 ml LB液体培养基中,37 ℃ 200 rpm培养2.5 h (OD600nm介于0.4-0.5); 四、3) 菌液倒入冰浴预冷的50 ml离心管中,冰浴20 min,随后利用台式冷冻离心机 在4 ℃以4100 rpm转速离心10 min,弃上清,在超净台中预先紫外照射灭菌的卫生纸上倒置1 min; 五、4) 50 ml离心管中加入30 ml冰浴预冷的0.1 M CaCl2,涡旋振荡重悬浮细菌,冰 浴30 min,4 ℃以4100 rpm转速离心10 min,弃上清,在超净台中预先紫外照射灭菌的卫生纸上倒置片刻; 六、5) 离心管中加入2 ml冰浴预冷的0.1 M CaCl2,涡旋振荡重悬浮细菌,以滴管分 装,滴加2滴(约100 μl)于每个1.5 ml EP管中,冰浴放置,以备马上使用,余下加入甘油,使甘油终浓度约15%,同上分装于1.5 ml EP管中,-20 ℃冻存(-80冰箱存更好,但咱舍不得总去开它),冻存感受态可在一周内使用(转化效率将随保存时间延长而有所下降)。 七、 八、需要注意的是:氯化钙经常是水合物,你得看清楚你用的氯化钙水合物的分子量, 然后再换算。氯化钙溶液是过滤除菌的,使用液用前需要预冷。 九、另外,要是总弄不好也可以买商业化的感受态,不贵。 十、 十一、热激法转化大肠杆菌 十二、1) 将质粒5 μl (这个不固定,根据你质粒浓度调整即可)加入到新制的感受态中,轻柔旋转EP管以混合,置冰浴30 min; 十三、2) 随后静置于42 ℃水浴90 s,之后迅速置于冰中2 min; 十四、3) 加入895 μl(凑个1ml的总体积,其实多点少点没啥的) LB液体培养基,37 ℃水浴45 min(摇床也行,但是转速要在50rpm内,太快了容易让质粒丢失); 十五、4) 将水浴后的转化菌液取200 μl滴加于含抗生素的LB琼脂板,并用涂布棒涂布均匀; 十六、6) 余下菌液以4100 rpm离心2 min,倾倒上清,以残留的培养基(~200 μl)混悬细菌,滴加于上述琼脂板,并用涂布棒涂布均匀; 十七、7) 待菌液被完全吸收后,倒置培养皿,并放于37 ℃温箱过夜培养至菌落长到合适大小。 十八、 十九、二、制电击感受态的步骤(摘自cDNA文库组标准流程,大肠杆菌我很少用电转,主要是连接产物懒得纯化): 二十、 二十一、 1. 用枪头挑取单克隆菌落,投入盛有10ml LB液体培养基的50ml离心管中。(同时做培养基和枪头的空白对照) 二十二、 2. 37℃,220rpm,培养14-16个小时。 二十三、 3. 第二天,以1:100的比例将这10ml菌液倒入1000ml LB液体培养基中,37度,220rpm,振摇2-3小时,每半小时测一次OD,当OD值达到0.3-0.4时,停止培养。 二十四、 4. 将菌液在冰上预冷30分钟,随后将菌液分装到500ml 预冷的离心杯中,4℃,2500rpm离心10分钟。

氯化钙热力学物性参数

氯化钙热力学物性参数 1氯化钙理化性质及其应用 氯化钙的相对密度为2.15g/cm3,熔点782℃、沸点1600℃以上。具有极强的吸湿性,暴露于空气中极易潮解。易溶于水,同时放出大量的热。文献[1]详细介绍了氯化钙的应用和生产工艺:氯化钙的应用按级别分为:工业级氯化钙[2]和食品级氯化钙[3]。1.1工业级氯化钙 工业级氯化钙具有遇水发热且凝点低的特点,可用于融雪和除冰[4-6]。并有吸水性强的功能,还可用作干燥剂,如用于氮气、氧气、氢气等气体的干燥。还是港口消雾[7]和路面集尘[8]、织物防火的最佳材料[9]。氯化钙水溶液是冷冻机用和制冰用的重要制冷介质[10]。另外氯化钙还可当作脱水剂、防冻剂、絮凝剂及生产色淀颜料的沉淀剂等。 1.2食品级氯化钙应用 在食品生产中,氯化钙可用于食品加工的稳定剂、稠化剂、吸潮剂、口感改良剂等。在医药领域,氯化钙还可用于药物合成的原料。 1.3氯化钙用于热泵 氯化钙主要是用于化学热泵(Chemical Heat Pump 简称CHP),它是利用不同条件下的一对耦合的可逆化学反应所产生的吸收放热现象来实现热量的传递的,它是一种将热能转化为化学能,从而将蓄热机和热泵机合二为一的新型节能技术[11]。文献[11]研究了化学热

泵为CaCl 2/CH 3OH 体系,它利用了如下化学反应: 23232()2()CaCl CH OH g CaCl CH OH s ??→+?←?? 该反应是一个气固两相的可逆络合反应,反应的正方向是放热反应。 以CaCl 2/CH 3OH 体系设计的化学热泵的工作原理图如下: 下面是氯化钙的部分热力学性质图表:

CaCl2 转化

氯化钙法进行质粒转化 摘要:利用冰冷的CaCl2 制备competent cells,以传统方法进行质体的转形. 利用冰冷的CaCl2 制备competent cells,以传统方法进行质体的转形. 仪器用具:37℃培养箱;42℃水浴;冰浴 药品试剂: 0.1 M CaCl2置冰浴中 2 M glucose: 取18 g glucose溶于水中,并调体积至50 mL,无菌过滤,分装后置-20℃贮存. 2 M Mg2+: 取20.3 g MgCl2 ·6H2O及24.65 g MgSO4 ·7H2O溶于水中,并调体积至100mL,无菌过滤的,分装小瓶置-20℃贮存.亦可以MgCl2完全取代MgSO4. SOB 液体培养基: 32 Methods in Biotechnology Vol 1 2% Bacto tryptone, 0.5% yeast extract, 10 mM NaCl, 2.5 mM KCl,高压灭菌,使用前加入2 M Mg2+,使最终浓度为10 mM. SOB 固体培养基: 2% Bacto tryptone, 0.5% yeast extract, 10 mM NaCl, 2.5 mM KCl, 1.5% Bactoagar,高压灭菌,倒plate前加入2 M Mg2+ 使最终浓度为10 mM. SOC/Amp 固体培养基: SOB 中另外添加20 mM glucose 及100 μg/mL ampicillin. SOC 液体培养基:SOB 中加入20 mM glucose (使用前加入). 大肠杆菌菌株:JM109,#1~#5 接合反应液方法步骤: 1)进行转形实验前16~20 h,自-70℃取出贮存的菌种,以划单一菌落方式将菌株JM109 接种在SOB固体培养基上,在37℃培养. 2)取40 mL SOB培养基装入125 mL已灭过菌的三角瓶(请记得加入Mg2+). 另取1 mL SOB 加于微量离心管中.由SOB固体培养基上选4~6 个约2~3 mm大小的单一菌落接入1 mL SOB 中,震荡将菌体打散后,加入40 mL SOB中,于37℃震荡培养约2~3 h,直至细胞数约为4~7×107/mL. 可于接菌2 h后每隔20~30 min测A600估计 3)收集菌液于离心管中,置冰浴中10~15 min. 4)以750~1,000 g 离心12~15 min (4℃). 5)倒去上清,并尽量将液体倒干,或以微量移液器头吸干净. 6)沉淀加入1/3 菌液体积冰冷的0.1 M CaCl2,稍加震荡,混合均匀,置冰浴中10~15 min. 7)同上4), 5)的操作.再重复6), 4), 5)的操作,以使反应更完全,增加成功率. 8)加入1/25 菌液体积冰冷的0.1 M CaCl2,稍加震荡使混合均匀. ◆Competent cells 制备完成! 9)DNA 样品(<10 μL)先装于微量离心管中,置冰浴中预冷,另取一微量离心管,标上#0,不加入任何DNA (作为negative control),亦置冰浴中预冷. 每个样品加入200 μL 菌液,震荡混合后,置冰浴中20~40 min. 10)42℃加热90 s (温度及时间均需很准确,请事先检查水浴锅的温度,不可超过42℃). ◆Heat shock! 11)置冰浴中2 min. 12)加入800 μL SOC,混合后,于37℃震荡培养30~60 min. 13)将各管转形液上下摇动混合均匀后.#5 取20 μL 至另一离心管中,加入180μL SOC (稀

氯化钙法制备感受态

一、我制氯化钙法感受态的步骤: 1) 取大肠杆菌单菌落接种于2 ml LB液体培养基中,37 ℃200 rpm过夜培养; 2) 取0.5 ml菌液接种于50 ml LB液体培养基中,37 ℃200 rpm培养2.5 h (OD600nm 介于0.4-0.5); 3) 菌液倒入冰浴预冷的50 ml离心管中,冰浴20 min,随后利用台式冷冻离心机在4 ℃ 以4100 rpm转速离心10 min,弃上清,在超净台中预先紫外照射灭菌的卫生纸上倒置 1 min; 4) 50 ml离心管中加入30 ml冰浴预冷的0.1 M CaCl2,涡旋振荡重悬浮细菌,冰浴30 min, 4 ℃以4100 rpm转速离心10 min,弃上清,在超净台中预先紫外照射灭菌的卫生纸上 倒置片刻; 5) 离心管中加入2 ml冰浴预冷的0.1 M CaCl2,涡旋振荡重悬浮细菌,以滴管分装, 滴加2滴(约100 μl)于每个1.5 ml EP管中,冰浴放置,以备马上使用,余下加入甘油,使甘油终浓度约15%,同上分装于1.5 ml EP管中,-20 ℃冻存(-80冰箱存更好,但咱舍不得总去开它),冻存感受态可在一周内使用(转化效率将随保存时间延长而有所下降)。 需要注意的是:氯化钙经常是水合物,你得看清楚你用的氯化钙水合物的分子量,然后再换算。氯化钙溶液是过滤除菌的,使用液用前需要预冷。 另外,要是总弄不好也可以买商业化的感受态,不贵。 热激法转化大肠杆菌 1) 将质粒5 μl (这个不固定,根据你质粒浓度调整即可)加入到新制的感受态中,轻 柔旋转EP管以混合,置冰浴30 min; 2) 随后静置于42 ℃水浴90 s,之后迅速置于冰中2 min; 3) 加入895 μl(凑个1ml的总体积,其实多点少点没啥的)LB液体培养基,37 ℃水 浴45 min(摇床也行,但是转速要在50rpm内,太快了容易让质粒丢失); 4) 将水浴后的转化菌液取200 μl滴加于含抗生素的LB琼脂板,并用涂布棒涂布均匀; 6) 余下菌液以4100 rpm离心2 min,倾倒上清,以残留的培养基(~200 μl)混悬细菌, 滴加于上述琼脂板,并用涂布棒涂布均匀; 7) 待菌液被完全吸收后,倒置培养皿,并放于37 ℃温箱过夜培养至菌落长到合适大 小。 二、制电击感受态的步骤(摘自cDNA文库组标准流程,大肠杆菌我很少用电转,主 要是连接产物懒得纯化): 1. 用枪头挑取单克隆菌落,投入盛有10ml LB液体培养基的50ml离心管中。(同时做 培养基和枪头的空白对照) 2. 37℃,220rpm,培养14-16个小时。 3. 第二天,以1:100的比例将这10ml菌液倒入1000ml LB液体培养基中,37度,220rpm, 振摇2-3小时,每半小时测一次OD,当OD值达到0.3-0.4时,停止培养。 4. 将菌液在冰上预冷30分钟,随后将菌液分装到500ml 预冷的离心杯中,4℃,2500rpm 离心10分钟。 5. 弃上清,离心杯中加入少量ddH2O,使沉淀悬浮后,再将水注满离心杯,4℃,4000rpm 离心10分钟。

高中化学碳酸钠的知识点以及解题方法总结

高中化学碳酸钠的知识点以及解题方法总 结 高中学习网为大家整理了高中化学碳酸钠的知识点以及极端假想法、整体思维分析法、守恒法、差量法等多种解题方法归纳总结,希望对大家学习高中化学有帮助! 高中化学碳酸钠的知识点总结(一) 以碳酸氢钠为主体的知识总结

问题1.向饱和碳酸钠溶液中通入过量的CO2气体有何现象? 解析:CO2与Na2CO3溶液发生反应: CO2+Na2CO3+H2O=== 2NaHCO3,由于碳酸氢钠的溶解度小于碳酸钠的溶解度,所以向饱和的碳酸钠溶液中通入过量的CO2气体会出现浑浊。 问题2.向碳酸钠的浓溶液中,逐滴加入稀盐酸,直到不在生成二氧化碳为止,在此过程中,溶液中的HCO3-浓度变化趋势如何? 解析:首先,Na2CO3===2Na++ CO32-发生H++ CO32-===HCO3-,所以HCO3-的浓度先逐渐增大,而

后,因为H++HCO3-===H2CO3, H2CO3===CO2↑+H2O,所以溶液中HCO3-的浓度逐渐减小。故HCO3-浓度先逐渐增大,而后逐渐减小。 问题3.不用其他试剂能否鉴别碳酸钠溶液和盐酸? 解析:能。①向盐酸中逐滴滴入碳酸钠溶液(开始时盐酸过量),有气体放出:Na2CO3+ 2HCl===2NaCl + H2O + CO2↑;②向碳酸钠溶液中逐滴滴入盐酸(开始时盐酸不足),开始时无气体放出,先发生反应:Na2CO3+ HCl===NaHCO3+NaCl,后又发生反应:NaHCO3+ HCl===NaCl + H2O + CO2↑,有气体产生,所以不同的滴加顺序产生不同的现象,不用其它试剂就能鉴别碳酸钠溶液和盐酸。 问题4.设计实验:有NaOH 40 g,以过量的CO2、蒸馏水为原料,如何制取最大量的Na2CO3固体? 解析:把40g NaOH配成溶液平均分成两等分,向其中一份通入过量的CO2,然后与另一份NaOH溶液充分混合后加热蒸发即得。原理:CO2+NaOH===NaHCO3,NaHCO3+NaOH===Na2CO3+H2O。 高中化学碳酸钠的知识点总结(二)

氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞

氯化钙法制备感受态细胞 下面的方案是Clhen等(1972)所用方法的变通方案,常用于成批制备感受态细菌,这些细菌可使每微克螺旋质粒DNA产生5x106-2x107个转化菌落,这样的转化效率足以满足所有在质粒中进行的常规克隆的需要。该方法完全适用于大多数大肠杆菌菌株,并且快速,重复性更好。该法制备的感受态细胞可贮存于-70℃,但保存时间过长会使转化效率在一定程度上受到影响。 1)从于37℃培养16-20小时的新鲜平板中挑取一个单菌落(直径2-3mm),转到一个含有100ml LB或SOB培养基的1L烧瓶中。于37℃剧烈振摇培养约3小时(旋转摇床,300转/分)。为得到有效转化,活细胞数不应超过108细胞/ml,可每隔20-30分种测量OD600值来监测培养物的生长情况。在菌株与菌株之间,OD600值和每毫升中活细胞数间的关系变化很大,因此有必要通过测量特定大肠杆菌菌株的生长增减物在生长周期的不同时相的OD600值,并将各浓度的增减物铺于无抗生素的LB琼脂平皿以计算每一时相的活细胞数,从而使分光光度读数得到标化。2)在无菌条件下将细菌转移到一个无菌、一次性使用的、用冰预冷的50ml聚丙烯管中,在冰上放置10分钟,使培养物冷却至0℃。切记:下述所有步骤均需无菌操作。 3)于4℃以4000转/分离心10分钟,以回收细胞。 4)倒出培养液,将管倒置1分钟以使最后残留的痕量培养液流尽。5)以10ml用冰预冷的0.1mol/L CaCl2重悬每份沉淀,放置于冰浴上。我们发现将1mol/L CaCl2贮存液[用纯水(Mille-Q级或与其相当的级

别)配制]以10ml小份贮存于-20℃煞是方便。制备感受态细胞时,取一小份融化,用纯水稀释至100ml,用Nalgene滤器(0.45μm孔径)过滤除菌,然后骤冷到0℃即可。对于大多数大肠肝菌菌株(除MC1061外),在这一步采用TFB代替氯化钙可得到相同的或更好的结果。 6)于4℃以4000转/分离心10分钟,以回收细胞。 7)倒出培养液,将管倒置1分钟以使最后残留的痕量培养液流尽。8)每50ml初始培养物用2ml用冰预冷的0.1mol/L CaCl2或TFB重悬每份细胞沉淀。此时,可将细胞分成小份,放于-70℃冻存[加DMSO保存感受态细胞的方法与步骤:每4ml感受态细胞加0。75mlDMSO冰上放置10min再分装放入-70℃冰箱]。在这些条件下,尽管长期保存后转化效率会稍有下降,但细胞仍可保持处于感受态。Dagert和Ehrlich(1979)曾表明细胞可以于4℃在CaCl2溶液中保存24-48小时,在贮存的最初12-24小时内,转化效率增加3-5倍,然后降低到初始水平。 9)用冷却的无菌吸头从每种感受态细胞悬液中各取200μl转移到无菌的微量离心管中,每管加DNA(体积∞10μl,DNA∞50ng),轻轻旋转以混匀内容物,在冰中放置30分钟。 10)将管放到预加温到42℃的循环水浴中放好的试管回上,恰恰放置90秒,不要摇动试管。 11)快速将管转移到冰浴中,使细胞冷却1-2分钟。 12)每管加800μlSOC培养基。用水溶将培养基加温至37℃,然后将管转移到37℃摇床上,温育45分钟细菌复苏,并且表达质粒编码的抗生素抗性标记基因。如果要求更高的转化效率,在复苏期中,应温和地摇

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