凝胶过滤层析的基本操作

①凝胶介质的选择

根据待分离蛋白质的分子量选择具有相应分离范围的凝胶。对于未知蛋白，应选用分离范围较宽的凝胶，如用Sephacryl S-300。对于分子量在3~5kDa的蛋白质，脱盐时应选用Sephadex G 50或G 25；而对于小分子量多肽物质（1~5kDa），脱盐则应选用Sephadex G 10或Sephadex G 15。

②凝胶介质的处理和装柱

商品凝胶一般是干粉，使用前应用水溶胀。一般情况下，1份凝胶加十份水，自然溶胀至少24小时。溶胀后，将上清中细小的凝胶碎块弃除，重新搅拌悬起，待凝胶沉淀后，再次弃去凝胶碎块，重复数次，直到液相澄清为止。为加速溶胀，可将凝胶煮沸一小时，该法同时具有灭菌的作用。

凝胶过滤层析柱的长与直径的比例应为50~100:1。装柱时柱体要垂直，先在柱内加入约1/3柱床体积的水或缓冲液，然后沿柱一侧将缓冲液中的凝胶（凝胶：缓冲液=3：1）搅拌均匀，缓慢并连续地一次性注入柱内。装柱过程中，要避免柱内缓冲液流干，注意保持柱体凝胶均匀无气泡和裂缝。装完后，可用2 ml蓝色葡聚糖溶液检查柱体的均匀性。如柱体均匀，可见蓝色区带均匀平稳地通过凝胶，不留任何条纹。要保持凝胶和缓冲液温度一致，以减少气泡的产生。

③上样

凝胶过滤柱层析对于样品的体积有严格的要求。样品体积不应超过柱床体积的1~5 %，如超过5 %，则会导致分离效率降低，低于1 %则分离效率也不会提高，所以蛋白质样品应尽可能浓缩至10~20 mg/ml。样品本身对洗脱液的相对粘度不能超过2，样品粘度过高，会使层析区带不稳定，或流速不规律，区带变宽或扭曲。上样前样品应经0.2 μm 孔径滤膜过滤或10，000 g离心5 min，去除残渣，加样时避免破坏柱体表面，保持其表面均匀平整。

④洗脱

洗脱液应保持一定的离子强度以消除凝胶中含有的游离羧基和硫酸根等与蛋白质的结合作用。Sephadex和Sepharose CL凝胶层析所用的洗脱液的离子强度至少应为0.02 mol/L；Sephacryl凝胶应为0.05 mol/L。有时洗脱溶液的离子强度甚至可达0.2 mol/L，以保证蛋白质不与凝胶介质结合。

在凝胶过滤层析过程中，洗脱速度要恒定。流速不应过高，一般在1ml/min左右，低流速可提高分辨率。可以用恒流泵控制流速。

⑤分离蛋白的监测和收集

凝胶过滤层析中，分离蛋白的监测和搜集与离子交换层析相同。

⑥层析柱的再生与保存

洗脱完成后，继续用3-5个柱床体积缓冲液洗涤柱体，即可使凝胶再生。也可用0.2 mol/L NaOH或1 mol/L NaCl或非离子型去垢剂0.2~1% NP-40去除吸附过紧的杂质，再用双蒸水充分洗脱除去离子，加0.02% NaN3（抑菌剂）保存。也可在20 %乙醇中保存（如Sephacryl HR或Sepharose CL等）。

目前常用的凝胶介质

①葡聚糖凝胶（Sephadex）是以葡聚糖为基本骨架，含大量羟基，亲水性高。不溶于弱酸、碱、盐、有机溶剂及水。但在强酸中，凝胶的糖苷键易水解。如果长期与氧化剂接触，也容易被破坏。

②交联丙烯基葡聚糖凝胶（Sephacryl）是由丙烯基葡聚糖与N’-亚甲基双丙烯酰胺共价交联制备的刚性凝胶。刚性极强，流速高,不溶于所有的溶剂。可在室温下，经低浓度NaOH （0.2mol\L）处理100小时，其孔径也不发生大小变化。但在低pH时,葡聚糖会发生部分降解。是一种应用较广的凝胶。

③琼脂糖凝胶Sepharose Cl-6B 是2，3-二溴丙醇与琼脂糖在强碱条件下交联形成。其刚性好，孔径大。它的化学和物理稳定性均优于琼脂糖。可在变性剂中使用，可被消毒。适用于大分子蛋白质、DNA、RNA及病毒的分离。

④ Sephacryl HR 是丙烯基葡聚糖与双丙烯酰胺的聚合物。具有高分辨率，高稳定性和高流速的优点。分离范围从几千道尔顿到8，000，000道尔顿。这是一种新的凝胶介质。

凝胶过滤层析的用途

凝胶过滤层析在蛋白质分离中有以下几个方面的用途：①依据分子量大小对蛋白质进行分离；②纯化过程中的除盐，除盐速度快于透析法（常用的凝胶是葡聚糖凝胶G-25）；③分子量的测定；④检测蛋白质二聚体或寡聚体的存在。

样品（其中含有大、小不同的分子）加在柱子的顶端；2.样品溶液经过层析柱，小分子通过扩散作用进入凝胶颗粒的微孔中，二大分子被排阻在颗粒之外。大小分子引向下移动速度不同而被分离开；3.随着洗脱液的洗脱，大小分子分开的距离加大；4.大分子已流出层析柱

如果将凝胶作为固定相，洗脱液作为流动相，分子在柱中移动的速度取决于该分子在固定相和流动相间的分配系数Kd (distribution coefficient)，Kd是用来表示某一分子在特定的凝胶柱内的洗脱行为。Kd是一个函数，与凝胶床的形状无关。

Kd = (Ve-Vo) / Vi （2-7）

式中Ve代表某一物质从层析柱内完全被洗脱下来时所需洗脱液的体积；Vo是层析柱内凝胶颗粒间空隙的总体积，也称为外水体积；Vi为层析柱内凝胶颗粒微孔的总容积，也称为内水体积。

如果样品中的分子大于凝胶的孔径则先流出柱外，其Kd=0；如果样品中的分子小于凝胶的孔径则后流出柱外，其Kd=1。Kd值是在0-1之间变化。与此可见，不同溶质经过层析柱流出的顺序与其Kd值由小到大的顺序是一致的。Kd小的先流出，Kd大的后流出。

凝胶过滤层析的基本操作

凝胶过滤层析的基本操作 Company Document number：WTUT-WT88Y-W8BBGB-BWYTT-19998

凝胶过滤层析的基本操作 ①凝胶介质的选择根据待分离蛋白质的分子量选择具有相应分离范围的凝胶。对于未知蛋白，应选用分离范围较宽的凝胶，如用Sephacryl S-300。对于分子量在3~5kDa的蛋白质，脱盐时应选用Sephadex G 50或G 25；而对于小分子量多肽物质（1~5kDa），脱盐则应选用Sephadex G 10或Sephadex G 15。 ②凝胶介质的处理和装柱商品凝胶一般是干粉，使用前应用水溶胀。一般情况下，1份凝胶加十份水，自然溶胀至少24小时。溶胀后，将上清中细小的凝胶碎块弃除，重新搅拌悬起，待凝胶沉淀后，再次弃去凝胶碎块，重复数次，直到液相澄清为止。为加速溶胀，可将凝胶煮沸一小时，该法同时具有灭菌的作用。凝胶过滤层析柱的长与直径的比例应为50~100:1。装柱时柱体要垂直，先在柱内加入约 1/3柱床体积的水或缓冲液，然后沿柱一侧将缓冲液中的凝胶（凝胶：缓冲液=3：1）搅拌均匀，缓慢并连续地一次性注入柱内。装柱过程中，要避免柱内缓冲液流干，注意保持柱体凝胶均匀无气泡和裂缝。装完后，可用2 ml蓝色葡聚糖溶液检查柱体的均匀性。如柱体均匀，可见蓝色区带均匀平稳地通过凝胶，不留任何条纹。要保持凝胶和缓冲液温度一致，以减少气泡的产生。 ③上样凝胶过滤柱层析对于样品的体积有严格的要求。样品体积不应超过柱床体积的1~5 %，如超过5 %，则会导致分离效率降低，低于1 %则分离效率也不会提高，所以蛋白质样品应尽可能浓缩至10~20 mg/ml。样品本身对洗脱液的相对粘度不能超过2，样品粘度过高，会使层析区带不稳定，或流速不规律，区带变宽或扭曲。上样前样品应经μm孔径滤膜过滤或10， 000 g离心5 min，去除残渣，加样时避免破坏柱体表面，保持其表面均匀平整。 ④洗脱洗脱液应保持一定的离子强度以消除凝胶中含有的游离羧基和硫酸根等与蛋白质的结合作用。Sephadex和Sepharose CL凝胶层析所用的洗脱液的离子强度至少应为 mol/L；Sephacryl凝胶应为 mol/L。有时洗脱溶液的离子强度甚至可达 mol/L，以保证蛋白质不与凝胶介质结合。在凝胶过滤层析过程中，洗脱速度要恒定。流速不应过高，一般在 1ml/min左右，低流速可提高分辨率。可以用恒流泵控制流速。 ⑤分离蛋白的监测和收集凝胶过滤层析中，分离蛋白的监测和搜集与离子交换层析相同。

催眠地实用标准操作步骤

催眠的标准操作步骤 ---------摘录自廖阅鹏《每天用一点神奇催眠术》催眠是可以标准化操作的技术，只要你按部就班来进行，你会发现催眠其实就像骑自行车一样容易。只要你按照标准步骤来进行，不但能事半功倍，也能把因为操作不当引起的负面影响减少到最小最小。我们大致可将催眠分成五个步骤，分别是：一、询问解疑（Diagnosis）：与被催眠者建立良好的合作关系，了解他的动机与需求，询问他对催眠既有的看法，解答他有关催眠的疑惑，确定他知道催眠时哪些事情会发生而没有不合理的期待，进行测试敏感度，了解他能进入多深的催眠状态、适合哪种诱导手法。如果是催眠治疗的话，此阶段要开始广泛搜集资讯，找出个案的真正问题所在。注意：每一次的催眠都要有明确的目的。有的时候，个案会有意或无意地隐藏前来求助的真正原因。 Karen Horney曾说过一句名言：「个案接受心理治疗的目的，并非为了治愈他们的精神问题，而是为了让问题更臻完美，变得无懈可击。」

这段话极为辛辣，所以催眠师必须洞悉人性，有能力穿透个案的故布疑阵，然后朝正确方向前进，带领个案远离黑暗，走到光明的地方。二、诱导阶段（Induction）：催眠师运用语言引导，让对方进入催眠状态。一般而言，常用的诱导技巧有渐进放松法（progressive relaxation）、眼睛凝视法（eye fixation）、深呼吸法、数数法、手臂上浮法，及其它变形与伪装的方法。催眠诱导技巧有几种呢？答案是：无数种。你有多少想象力，就能创造出多少种催眠诱导技巧。三、深化阶段（Deepening）：引导被催眠者从轻度催眠状态，进入更深的催眠状态。常用的深化技巧有手臂下降法、数数法、甩手法、下楼梯法、搭电梯法、过隧道法等等，除了这些常用技巧，这个阶段常常随机应变，即席创制新招。催眠深化技巧有几种呢？答案是：一样有无数种。四、治疗阶段（Healing）：

专业催眠自学方式(无师自通法)

有人会问说，学习催眠一定要花钱去拜师吗？事实上也不一定。但如果你只是想要自己学学看，只有多下功夫喽，以下就教你如何【无师自通】。一、阅读相关书籍：有关催眠的书籍在书店可能不好找到，而网上有不少免费的电子书可以下载来看。二、不断练习：学习催眠的不二法门，就是不断地练习、再练习。不管是自我练习、亦或是有人愿意配合你做实际催眠练习，不断地充实自己应对不同的状况才是一位称职的催眠师所要做的课程。三、自言自语：哈，没错，就是自言自语！当你有了催眠步骤的底子时，可以以书上举例的【暗示用语】来自我练习。对着镜子练、对着墙练都随便你，最要紧的是先【独自】练习，不要一看完书就兴奋得抓个人来练习，结果可能是败兴而归、挫折感很重、放弃练习，那岂不可惜！刚开始先把所有的步骤牢记，不要想说自己要怎么变化方法，把每句暗示用语说的流畅，不急不徐，把整个流程跑过一遍，如此反复练习。接着，把相关的表达方式用不同说法来表达，慢慢的，脑袋中的【词汇】就多了起来，不会因为状况不一而【词穷】！四、小团体练习：一般人可能没有这样的机会做团体练习，但是【如果】可能的话，几个对催眠有兴趣的人凑在一个小团体做实际状况的练习，对催眠技巧的熟练有很大帮助。一方面，不会因为催眠不成功而被取笑丧失信心，二方面，可以互相交换意见，一举数得。五、时间由短变长“刚开始练习催眠时，先练习一些小技巧，例如只做初期诱导，接着做觉醒步骤。花催眠的时间不要太长，等到慢慢熟练后，再加入其它技巧，催眠时间也慢慢增长，以此方式渐进，比较可以从中得到微妙的变化，对状况处理也可以循序渐进的掌控。六、牢记过程：不管是自我练习亦或是实际催眠练习，事后都要牢记所使用的步骤及暗示用语，可以的话用笔记下来，在下回催眠练习中可以开始变换暗示用语或调整催眠程序，试着找出你最顺手的过程。尽量做到在催眠过程中很顺畅的指示暗示用语，不要犹豫，要很有自信！通常，在第一次做实战催眠时，如果成功了，保证你会是信心满满；失败，挫折感会特别强烈。在此，我要告诉初学者，在做第一次催眠时一定要抱着【我一定做的很好】的信念，因为，受试者会对催眠师的一举一动特别敏感，一旦你的没有自信被看透了，受试者的不信感相对增强，要想顺利进行催眠可能就难喽！七、排演：对！就是排演！歌星在演唱会前都要经过排演、排演走位、排演跟乐队的配合情况、排演自己要做多大动作观众才能看得到演出…..！初学催眠者在【排演】的功夫上更要加强，将平时自我练习的成果要在别人面前真的表现出来，不仅在心理上要做自信心的建设，更要对整个催眠过程做个事前的演练。排演时（当然是独自一个人排演啦），想象自己眼前有位受试者，将所有的暗示用语【大声】说出来，假想正很顺利的催眠，所有【必要动作】都要做出来，将所有的催眠步骤从头到尾【大声地】演练一遍。如此的排演有助于临场的反应，甚至会进行的更顺利、更有信心。八、语调配合情境：当你在看一部电影时，如果遇到紧张情节，通常此时的背景音乐都会很急促或是很高伉响亮，你的心情一方面是被情节带动、一方面也会被音乐的气氛感染得更紧张。催眠中的遇到应用亦是同样道理，当你暗示受试者很愉快、很喜悦时，你总不能低声下气的吧！所以，语调应配合着你所用的催眠用语情境，如此会加深催眠的效果。九、速度配合呼吸：每个人的身体节奏通常是跟随着呼吸的速度，所以催眠者说出暗示用语的速度最好是配合着受试者的呼吸速度。观察其呼吸时的肩膀或胸部起伏，当其呼

凝胶过滤层析gelfiltrationchromatography

凝胶过滤层析gel filtration chromatogra phy 定义凝胶过滤层析是生化分离常用色谱技术的一种。凝胶过滤层析是生化分离常用色谱技术的一种。利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用, 利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用,根据被分离物质的分子大小不同来进行分离，也被称为体积排阻物质的分子大小不同来进行分离，也被称为体积排阻层析（size 层析（size exclusion chromatography）、分子筛chromatography）、分子筛层析（Molecular 层析（Molecular Sieve Chromatography）、凝胶渗Chromatography）、凝胶渗透层析（Gel 透层析（Gel Permeation Chromatography）Chromatography）应用凝胶层析法适用于分离和提纯蛋白质、酶、多肽、激素、多糖、核酸类等物质。分子大小彼此相差25%的样品，只要通过单一分子大小彼此相差25%的样品，只要通过单一凝胶床就可以完全将它们分开。利用凝胶的分子筛特性，可对这些物质的溶液进行脱盐、去热源和脱色。进行脱盐、去热源和脱色。原理凝胶是一类多孔性高分子聚合物，每个颗粒犹如一个筛子。小分子进入当样品溶液通过凝胶柱时，相对分子当样品溶液通过凝胶柱时，相对分

子葡聚糖珠内质量较大的物质沿着凝胶颗粒间的孔质量较大的物质沿着凝胶颗粒间的孔隙，随着溶剂流动，首先流出层析柱；相对分子质量较小的物质可自由地进相对分子质量较小的物质可自由地进大分子不出凝胶颗粒的网孔，使流量增长，移能进入珠内，经珠动速率慢而最后流出层析柱。之间缝隙中等大小的分子在大分子物质与小分中等大小的分子在大分子物质与小分流出子物质之间被洗脱。这样，经过层析柱，混合物中的各物质按其分子大小不同而被分离。带网孔的葡聚糖珠固定相（凝胶）固定相（凝胶）三维空间网状结构小分子样品流动相大分子分子筛效应：分子筛效应：按分子大小不同, 按分子大小不同,在凝胶受到的阻滞作用有差异有差异, 阻滞作用有差异,从而造成各组分在凝胶柱中的迁移速度不同得到分离。胶柱中的迁移速度不同得到分离。小分子被延滯固定相较快流出基本概念外水体积(Vo)是指凝胶柱中凝胶颗粒周围空间的体积，外水体积(Vo)是指凝胶柱中凝胶颗粒周围空间的体积，也就是凝胶颗粒(Vo)是指凝胶柱中凝胶颗粒周围空间的体积间液体流动相的体积。间液体流动相的体积。内

催眠感受性测试方法

催眠感受性测试方法 1.手臂升降 1）手臂升降测试功能测试视觉想象能力和躯体感受能力。（2）手臂升降测试操作分解姿势：舒展一下身体，做个深呼吸，让身体放松下来，以舒适的方式站立，脚后跟并拢，脚掌微微八字分开，双手自然下垂；或者以舒适的方式坐在椅子上，双腿并拢，保持身体正值，双手自然地放在大腿上. 引导语：把双臂向前伸直，与肩同宽，左手掌心向上，右手握拳大拇指指向天花板。现在轻轻闭上你的眼睛做三次深呼吸…让全身跟着放松下来，想象你的眼睛凝视着鼻子尖，把你的注意力关注在鼻尖上，继续保持深呼吸…… 想象，我在你的左手手掌放了一本厚厚的大辞典，你的左手感觉越来越沉重，因此，你的左手慢慢往下降…… 同时，想象我在你右手大拇指上绑了一颗大气球，这颗气球逐渐向上飘浮，舒服地拉着你的右手大拇指，向上飘，你的左手越来越重，越来越往下沉；而你的右手越来越往上飘，越来越往上飘……左手下降，右手上升……左手下降，右手上升…… （经过一段引导，对方双手有明显的上下差距，就可以结束试。）好，测试结束，现在你的双手固定在这个位置，睁开你的眼睛，看看你双手的距离有多远……

2.双手紧握（1）双手紧握练习功能测试催眠感叐性，了解对方肌肉强度、爆収力及能量调动力。（2）双手紧握训练操作分解姿势：舒展一下身体，做个深呼吸，让身体放松下来，以舒适的方式站好，双手自然下垂。引导语：把双臂向前伸直，双手手心相对十指相扣，然后轻轻闭上你的眼睛，同时更加放松你的身体。做三次深呼吸…（语气由温柔式转为权威式）好，下面发挥你最大的想象力，想象你的手掌被强力胶紧紧黏在一起，紧紧地黏在一起，黏得越来越紧，越来越紧，你的十指就像老虎钳子一样紧紧地相扣在一起，越来越紧，越来越紧……（给十指紧紧相扣的手势），等一下，你的双臂发得越来越僵硬，越来越僵硬，硬得就像钢条一样强硬，任何向下的力量（给向下的力量，试探其接受暗示程度及肌肉强硬度），都使你的手臂向上弹… 任何向下的力量（给向下的力量，试探其接受暗示程度及肌肉强硬度），都使你的手臂向上弹，就像钢条一样……想象你的眼前有一堵墙，你的手臂吐前伸，僵硬地吐前延伸，手臂充满了力量，这一股力量可以轻松突破前面这堵墙，向前延伸……不断地吐前延伸，冲破这堵墙……（经过一段引导发现对方双手关节处发白发黑，发现手臂明显僵硬，就可以结束测试。）好，测试结束。请你做个深呼吸慢慢地放松你的双臂，手臂僵硬的指令已经取消，现在你的双手固定在这个位置，睁开你的眼睛，看看你双手的颜色……（测试结束）

催眠的标准操作步骤

催眠的标准操作步骤 --—－—-－—－摘录自廖阅鹏《每天用一点神奇催眠术》催眠是可以标准化操作的技术，只要你按部就班来进行，你会发现催眠其实就像骑自行车一样容易。只要你按照标准步骤来进行,不但能事半功倍,也能把因为操作不当引起的负面影响减少到最小最小。我们大致可将催眠分成五个步骤，分别是: 一、询问解疑（Ｄｉagnｏsis）：与被催眠者建立良好的合作关系,了解他的动机与需求，询问他对催眠既有的看法，解答他有关催眠的疑惑，确定他知道催眠时哪些事情会发生而没有不合理的期待，进行测试敏感度，了解他能进入多深的催眠状态、适合哪种诱导手法。...文档交流仅供参考... 如果是催眠治疗的话，此阶段要开始广泛搜集资讯，找出个案的真正问题所在。注意：每一次的催眠都要有明确的目的. 有的时候,个案会有意或无意地隐藏前来求助的真正原因.

Karｅn Hｏrney曾说过一句名言：「个案接受心理治疗的目的,并非为了治愈他们的精神问题,而是为了让问题更臻完美，变得无懈可击。」...文档交流仅供参考... 这段话极为辛辣,所以催眠师必须洞悉人性,有能力穿透个案的故布疑阵,然后朝正确方向前进，带领个案远离黑暗，走到光明的地方。...文档交流仅供参考... 二、诱导阶段（Ｉnｄuctｉon): 催眠师运用语言引导，让对方进入催眠状态.一般而言，常用的诱导技巧有渐进放松法（ｐｒogresｓive relaｘａtion）、眼睛凝视法（ｅyｅ fixation)、深呼吸法、数数法、手臂上浮法，及其它变形与伪装的方法。...文档交流仅供参考... 催眠诱导技巧有几种呢？答案是:无数种。你有多少想象力,就能创造出多少种催眠诱导技巧。三、深化阶段（Deepｅnｉng）：

详细催眠指导语

催眠指导语这个催眠指导语我是希望大家可以好好的仔细看，也是可以把他当作是自己催眠练习的具体模版，这个是我做催眠前世今生一年半时间，最后固定下来的一个催眠模式，可以说在一年半中我催眠前世今生已经做的很熟练了当初为了要选择做这个催眠原因有１，我本身对于一些催眠现象有兴趣，这个是我追求催眠本来目的２，刚开始学习催眠的时候找被试练习催眠实在是一个困难，但如果让来的人给他有一个好的回报呢，所以就急需去找出一个可行的催眠体验出来，所以就选择了这个催眠３，我之前带心理团体的时候，曾经用到过冥想技术，那时候找这个资料可是真的是辛苦啊，但我还是把年龄回溯的冥想给做出来，记得第一次做的时候，那种紧张呵呵，不过还好，最后做出来的效果都不错给予我很大的鼓励以上三点就是我为什么专门做催眠前世今生这个催眠了，我学习了催眠多久那我就做了多久了催眠前世今生哈哈，不清楚以后能否靠这个赚到钱来养活自己，３８００／一次不成功不收费，地点金华浙江师范大学心友ＱＱ１７９０１４４６９催眠交流群3 4710923 完全版的催眠步骤深呼吸的训练，要求被试坐着，尽可能的让自己的心宁静下来首先还是深呼吸，进行腹部呼吸，慢慢的把气吸进来，然后在腹部停留下然后在慢慢的把气呼出去（进行多次之后）想象着吸进来的是所有的氧气，所有的温暖和快乐呼出去的是所有的二氧化碳，所有的烦恼和所有的忧愁每一次的呼吸都会使你更加的放松，更加的舒适，更加的宁静每一次的呼吸都会使你更加的放松，更加的舒适，更加的宁静每一次的呼吸都会使你更加的放松，更加的舒适，更加的宁静现在我要从1数到20，每次我间隔5秒，我每数一个数字，你都会感觉到更加的放松，更加的放松，更加的舒适，更加的舒适与更加的宁静，更加的宁静现在我要从1数到20，每次我间隔5秒，我每数一个数字，你都会感觉

目前最好用的标准催眠引导词

目前最好用的标准催眠引导词一放松–-引导进入催眠状态（导入引导词） 1、（渐进式放松法）现在，把你的身体调整到最舒服的姿势…… 请将眼睛闭起来，眼睛一闭起来，你就开始放松了…… 注意你的感觉，让你的心灵像扫瞄器一样，慢慢地，从头到脚扫瞄一遍，你的心灵扫瞄到哪里，那里就放松下来…… 现在开始，你发现你的内心变得很平静，好像你已经进入另外一个奇妙的世界，远离了世俗，你只会听到我的声音和背景音乐的声音，其他外界的杂音都不会干扰你。甚至，如果你听到突然传来的噪音，你不但不会被干扰，反而会进入更深、更舒服的催眠状态……。现在，注意你的呼吸，你要很深、很深的呼吸，要用有规律的深呼吸，慢慢地把空气吸进来，再慢慢地把空气吐出去。深呼吸的时候，想像你把空气中的氧气吸进来，空气从鼻子进入你的身体，沿着气管流过鼻腔、喉咙，然后，进入你的肺部，再渗透到你的血液里，这些美妙的氧气经由血液循环，再输送到你全身每一个部位、每一颗细胞，使你的身体充满了新鲜的活力。吐气的时候，想像你把身体中的二氧化碳通通地吐出去，也把所有的疲劳、烦恼、紧张通通地送出去，让所有的不愉快、不舒服都离你远去…… 每一次的深呼吸，都会让你进入更深沉、更放松、更舒服的状况。注意你的呼吸，当你专注在呼吸的时候，觉察空气在你体内流通，感觉氧气进入全身每一颗细胞，你的身体就会自动展开补充能量的过程。你越能将注意力集中在你的呼吸上，你的身体就会更健康、更有活力。从现在起，继续深呼吸，你一边深呼吸，一边聆听我的引导，很自然地，你什么都不必想，也什么都不需要想了，只要跟着我的引导，很快你就会进入非常深、非常舒服的催眠状态…… 2、眼睛凝视法（让对方或躺或坐，安顿好之后，指示案主）现在看着正前方的墙壁，把眼光注视正中央那一点，并且固定在那一点，非常专心地凝视。一边凝视，一边感觉到你的身体越来越放松…… 任何时候，当你觉得自己进入催眠状态时，就可以把眼睛闭起来。

催眠销售话术大全

销售的十大成交法 1.请求成交法请求成交法又称之为直接成交法，这是销售人员向客户主动地提出成交的要求，直接要求客户购买销售的商品的一种方法。（1）使用请求成交法的时机①销售人员与老客户，销售人员了解顾户客的需要，而老客户也曾接受过推销的产品，因此老客户一般不会反感推销人员的直接请求。②若顾客对推销的产品有好感，也流露出购买的意向，发出购买信号，可又一时拿不定主意，或不愿主动提出成交的要求，推销人员就可以用请求成交法来促成客户购买。③有时候客户对推销的产品表示兴趣，但思想上还没有意识到成交的问题，这时销售人员在回答了客户的提问，或详细地介绍产品之后，就可以提出请求，让客户意识到该考虑购买的问题了。（2）使用请求成交法的优点①快速地促成交易。②充分地利用了各种的成交机会。③可以节省销售的时间，提高工作效率。④可以体现一个销售人员灵活、机动、主动进取的销售精神。（3）请求成交法的局限性请求成交法如果应用的时机不当，可能给客户造成压力，破坏成交的气氛，反而使客户产生一种抵触成交的情绪，还有可能使销售人员失去了成交的主动权。 2.假定成交法假定成交法也可以称之为假设成交法，是指销售人员在假定客户已经接受销售建议，同意购买的基础上，通过提出一些具体的成交问题，直接要求客户购买销售品的一种方法。例如，"张总您看，假设有了这样设备以后，你们是不是省了很多电，

而且成本也有所降低，效率也提高了，不是很好吗？"就是把好像拥有以后那种视觉现象描述出来。假定成交法的主要优点是假定成交法可以节省时间，提高销售效率，可以适当地减轻客户的成交压力。 3.选择成交法选择成交法，就是直接向客户提出若干购买的方案，并要求客户选择一种购买方法。就像前一讲讲到，"豆浆您是加两个蛋呢，还是加一个蛋？"还有"我们礼拜二见还是礼拜三见？"这都是选择成交法。从事销售的人员在销售过程中应该看准顾客的购买信号，先假定成交，后选择成交，并把选择的范围局限在成交的范围。选择成交法的要点就是使客户回避要还是不要的问题。（1）运用选择成交法的注意事项销售人员所提供的选择事项应让客户从中做出一种肯定的回答，而不要给客户一种有拒绝的机会。向客户提出选择时，尽量避免向客户提出太多的方案，最好的方案就是两项，最多不要超过三项，否则你不能够达到尽快成交的目的。（2）选择成交法的优点可以减轻客户的心理压力，制造良好的成交气氛。从表面上看来，选择成交法似乎把成交的主动权交给了客户，而事实上就是让客户在一定的范围内进行选择，可以有效地促成交易。 4.小点成交法小点成交法又叫做次要问题成交法，或者叫做避重就轻成交法。是销售人员在利用成交的小点来间接地促成交易的方法。【案例】某办公用品推销人员到某办公室去推销碎纸机。办公室主任在听完产品介绍后摆弄起样机，自言自语道："东西是倒挺合适，只是办公室这些小年轻的毛手毛脚，只怕没用两天就坏了。"

催眠

高级催眠术之气合催眠法时间:2012-12-3 18:38:16来源:网络整合作者:中国催眠网点击:7次标签：这种方法，是以施术者气合的喝声而使受术... 这种方法，是以施术者气合的喝声而使受术者进入催眠状态的方法。先让被催眠者凭坐椅上，施术者距离他约一米左右而直立，告诉他说：“等一会，我大喝一声，你听到后即刻闭目，并直接进入催眠状态。”谈话时，受术者须凝视施术者的脸，并作深呼吸，施术者直立不动，右手举在头上，左手垂在左侧，下腹凝气，熟视被术者的脸。一俟受术者露出精神沉迷的样子，伺其呼气时，施术者即引用丹田之力，大喝一声，同时降下右手，于是受术者闭目，施术者再走近他的身旁，反复暗示：“你睡着了。”并进行抚下法，则被术者便能感应

暗示而进入催眠状态了。施行这种方法，必须先练习喝声，如喝声无力，则不能发生显着感应。气合是催眠中有力的方法，是施术者的基本功。如果没有这种本事，便声称具有施术的能力，实是言过其实。用这种方法施于治病矫癖，也是收效。如能熟练地掌握这种方法，即于受术者觉醒时，施术者一喝能使其转入催眠状态，甚至能使他人呆立不动，如同木偶一样。进修达到这种程度的施术者，就是催眠大师了。日本有一位能掌握气合术的催眠学家，曾作过惊奇的实验，他能用气合大喝一声，将栖止在电线上的小鸟闻声坠地，一时传为神奇。有些施术者在施行此法时，有时大喝一声却不能使人催眠，也有连续喝至四五声才使人催眠的。气合术能催眠的原因，是因受术者听到突然的喝声，杂念停止，因而顺利进算计催眠状态。此法尤其对曾受过催眠的人，效力更快，只要施术者给以一喝的暗示，便立时能进入催眠状态。所谓气合催眠法，即指用气合的喝声，而将受术者导入催眠状态的一种方法。实施过程如下：催眠师站在离受术者两米远的地方。要求受术者集中注意力，并深呼吸。此时告诉受术者：“只要我大喝一声，你将立刻闭上眼睛，迅速进入催眠状态，肯定是这样，不会有错的。”然后催眠师而对受术者直立而不动。集中注意力于受术者，并精心观察。当发现受术者已经进入精神沉寂，高度专注的状态时，从腹部丹田用力，大吼一声“呔”。受术者将由此而进入至少中度催眠状态。然后再施予受术者进入深度催眠状态的暗示诱导，便可取得良

凝胶过滤层析分离纯化蛋白质

凝胶过滤层析法分离纯化蛋白质一、实验目的 1. 了解凝胶层析的原理及其应用。 2. 掌握利用凝胶层析法分离纯化蛋白质的实验技能二、实验原理凝胶层析又称凝胶过滤，是一种按分子量大小分离物质的层析方法。该方法是把样品加到充满着凝胶颗粒的层析柱中，然后用缓冲液洗脱。大分子不能进入凝胶颗粒中的静止相中，只留在凝胶颗粒之间的流动相中，因此以较快的速度首先流出层析柱，而小分子则能自由出入凝胶颗粒中，并很快在流动相和静止相之间形成动态平衡，因此就要花费较长的时间流经柱床，从而使不同大小的分子得以分离。凝胶过滤柱层析所用的基质是具有立体网状结构、筛孔直径一致，且呈珠状颗粒的物质。这种物质可以完全或部分排阻某些大分子化合物于筛孔之外，而对某些小分子化合物则不能排阻，但可让其在筛孔中自由扩散、渗透。任何一种被分离的化合物被凝胶筛孔排阻的程度可用分配系数Kav（被分离化合物在内水和外水体积中的比例关系）表示。Kav值的大小与凝胶床的总体积（Vt）、外水体积（Vo）及分离物本身的洗脱体积（Ve）有关，即：Kav= (Ve-Vo)/(Vt-Vo) 在限定的层析条件下，Vt和Vo都是恒定值，而Ve值却是随着分离物分子量的变化而变化的。分离物分子量大，Kav值小；反之，则Kav值增大。 Ve（洗脱体积）为某一成分从加入样品算起，到组分的最大浓度（峰）出现时所流出的体积。Ve随溶质的相对分子质量的大小和对凝胶的吸附等因素而不同。一般相对分子质量较小的溶质，它的Ve值比相对分子量较大的溶质要大。通常选用蓝色葡聚糖2000作为测定外水体积的物质。该物质分子量大（为200万），呈蓝色，它在各种型号的葡聚糖凝胶中都被完全排阻，并可借助其本身颜色，采用肉眼或分光光度仪检测（210nm或260nm或620nm）洗脱体积（即Vo）。但是，在测定激酶等蛋白质的分子量时，不宜用蓝色葡聚糖2000测定外水体积，因为它对激酶有吸附作用，所以有时用巨球蛋白代替。Vo为层析柱内凝胶颗粒之间隙的总容积，称外水体积。Vi为层析柱内凝胶内部微孔的总容积，称内水体积，Vi=Vt-Vo。测定内水体积（Vi）的物质，可选用硫酸铵、N-乙酰酪氨酸乙酯，或者其它与凝胶无吸附力的小分子物质。 K av是判断分离效果的一个重要参数。当某种成分的K av=0时，意味着这一成分完全被排阻于凝胶颗粒的微孔之外而最先被洗脱出来，即Ve=Vo。当某种成分的K av=1时，意味着这一成分完全不被排阻，它可以自由地扩散进入凝胶颗粒内部的微孔中，而最后被洗脱出来，即Ve=Vt。介于两者分子量之间的物质，其0﹤K av﹤1，在中间位置被洗脱。可见，K av 的大小顺序决定了被分离物质流出层析柱的顺序。本实验采用葡聚糖凝胶G－75作固相载体，可分离分子量范围在2000～70000之间的多肽与蛋白质。上样样品为牛血清蛋白（M.W.=67000）和溶菌酶(M.W.=14300)的混合溶液。当混合液流经层析柱时，两种物质因K av值不同而被分离。三、仪器与试剂 1.器材：层析柱、恒流泵、自动部分收集器、紫外检测器、记录仪、量筒、烧杯、试管、吸管、玻璃棒等。 2.试剂（1）标准蛋白 a.牛血清白蛋白：Mw=67,000（上海生化所） b.溶菌酶：Mw =14,300 （2）洗脱液：0.9% NaCl溶液

凝胶过滤层析常见问题解析

凝胶过滤层析常见问题解析 1. 色谱峰对称性差出峰上升时，上升缓慢是填料装填过紧，而拖尾是因为装填的太松，此时对称因子及柱效都很差，出现这种情况就要重现装柱。装柱前要了解填料的压缩系数（压缩因子）如Focurose FF系列的填料的压缩系数是1.15，且装完后要测柱效。 2. 柱床有裂缝或干涸等塌柱现象检测管路及柱床体系是否有泄露或气泡，必要时重现装柱。 3. 分离度差 (1) 样品和选择的填料不匹配待分离的样品中目标物质和其它杂质的分子量小于2倍且都在选择的填料的排阻极限之外或者之内。若样品中目标物质的分子量和其它杂质的分子量小于2倍时，建议尝试其它方法分离，反之选择凝胶过滤层析时，填料的选择应根据样品中目标分子的大小选择最接近（大或小都可以）目标分子排阻极限的填料进行分离。 (2) 柱床装填的效果差通过测柱效等方式确保柱床装填的满足凝胶过滤层析的过程。 (3) 上样量过大根据样品中目标物质和杂质的分子差异优化上样量，如脱盐等样品中目标分子和杂质的分子量大于50倍时，上样量可以达到柱床体积的25%，最高不超过30%，若样品中目标分子和杂质的分子量差异在2-5倍时，通常上样量控制在柱床体积的5%以内。 (4) 流速过快凝胶过滤的过程流速不宜过快，降低流速在一定程度上可以提高分离度。 (5) 层析填料被污染或老化随着填料的使用，一些杂质的积累会使层析填料的孔径发生变化（如堵塞，非特异性吸附积累，微生物污染，破碎等），导致其排阻能力发生偏差而影响分离度。此时可对填料进行CIP清洗，若清洗后还不能达到分离要求，就要更换新的填料。 (6) 样品自身的问题

催眠式销售的四大步骤

催眠式销售的四大步骤催眠式销售的四大步骤一. 建立亲和共识感（信赖） 1.模仿对方的语境、语调、肢体动作、服装。投其所好。（过一两分钟后模仿）视觉型：说话速度快，嗓门大，学习主要靠看、瞧。听觉型：主要用耳朵学习。触觉型：说话吞吞吐吐，反应慢。二. 找到对方的需求 0.我们公司有个活动，想了解一下吗 1.我可以问你一个简单又对你很有帮助的问题吗？ 2.当你想买一部手机的时候，你最看重手机的哪些功能？是可以听mp3，mp4 ，打电话，照相或是其他？ 3.这几个功能你最看重哪个功能啊？ 4.这个功能给你带来什么感觉/帮助？ 5.除了这个功能，你还看重什么功能？ 6.现在我们公司跟广东电视台正在搞一个特殊的活动，就是买电视手机送话费，你买了我们的电视手机，就可以获得联通公司赠给的2500元的话费，是不是很值得呢？ 7. 还有我们有个电视挑战赛课程，是与广东电视台《巅峰对决》一起举办的，这个价值2680元课程会把你带的团队所出现的问题暴露出来，而我们的讲师会徐嘉庆、徐鹤宁老师会指出你团队的缺点和不足 8. 你现在是刷卡还是付现金，是全款还是分期付款啊 9.恭喜你做了一个明智的决定。四面楚歌成交法： O---O---O---O 引导迫切感步步为营 10.起大礼成交法（6-7）三、做小小的成交四、做大的成交名言： 1.所有的老板都是开着宝马的业务员 2.学到别人学不到的东西 3.市场永远一结果为导向 4.每一分私下的努力都会在公众上得到表扬 5.人最喜欢的人是自己以及与自己相似的人 6.站在对方看问题 7.问对问题赚大钱 8.以心感人，人心归。用心待人，客心留。

凝胶过滤层析的基本操作

凝胶过滤层析的基本操作 ①凝胶介质的选择根据待分离蛋白质的分子量选择具有相应分离范围的凝胶。对于未知蛋白，应选用分离范围较宽的凝胶，如用Sephacryl S-300。对于分子量在3~5kDa的蛋白质，脱盐时应选用Sephadex G 50或G 25；而对于小分子量多肽物质（1~5kDa），脱盐则应选用Sephadex G 10或Sephadex G 15。 ②凝胶介质的处理和装柱商品凝胶一般是干粉，使用前应用水溶胀。一般情况下，1份凝胶加十份水，自然溶胀至少24小时。溶胀后，将上清中细小的凝胶碎块弃除，重新搅拌悬起，待凝胶沉淀后，再次弃去凝胶碎块，重复数次，直到液相澄清为止。为加速溶胀，可将凝胶煮沸一小时，该法同时具有灭菌的作用。凝胶过滤层析柱的长与直径的比例应为50~100:1。装柱时柱体要垂直，先在柱内加入约1/3柱床体积的水或缓冲液，然后沿柱一侧将缓冲液中的凝胶（凝胶：缓冲液=3：1）搅拌均匀，缓慢并连续地一次性注入柱内。装柱过程中，要避免柱内缓冲液流干，注意保持柱体凝胶均匀无气泡和裂缝。装完后，可用2 ml蓝色葡聚糖溶液检查柱体的均匀性。如柱体均匀，可见蓝色区带均匀平稳地通过凝胶，不留任何条纹。要保持凝胶和缓冲液温度一致，以减少气泡的产生。 ③上样凝胶过滤柱层析对于样品的体积有严格的要求。样品体积不应超过柱床体积的1~5 %，如超过5 %，则会导致分离效率降低，低于1 %则分离效率也不会提高，所以蛋白质样品应尽可能浓缩至10~20 mg/ml。样品本身对洗脱液的相对粘度不能超过2，样品粘度过高，会使层析区带不稳定，或流速不规律，区带变宽或扭曲。上样前样品应经0.2 μm 孔径滤膜过滤或10，000 g离心5 min，去除残渣，加样时避免破坏柱体表面，保持其表面均匀平整。 ④洗脱洗脱液应保持一定的离子强度以消除凝胶中含有的游离羧基和硫酸根等与蛋白质的结合作用。Sephadex和Sepharose CL凝胶层析所用的洗脱液的离子强度至少应为0.02 mol/L；Sephacryl凝胶应为0.05 mol/L。有时洗脱溶液的离子强度甚至可达0.2 mol/L，以保证蛋白质不与凝胶介质结合。在凝胶过滤层析过程中，洗脱速度要恒定。流速不应过高，一般在1ml/min左右，低流速可提高分辨率。可以用恒流泵控制流速。 ⑤分离蛋白的监测和收集凝胶过滤层析中，分离蛋白的监测和搜集与离子交换层析相同。 ⑥层析柱的再生与保存

操作考核操作流程及评分标准

内三科第四季度专科操作考核项目操作流程及评分标准保留灌肠操作流程将药液灌入到直肠或结肠内，通过肠黏膜吸收达到治疗疾病的目的。目的 1、镇静、催眠 2、治疗肠道感染操作前准备 1、评估患者并解释（1）评估患者：了解患者病情，意识状态，临床诊断，治疗目的，肠道病变部位，排便情况，肛周皮肤、理解配合能力。（2）向患者解释目的、操作程序和配合要点。 2、准备（1）工作人员准备：衣帽整洁，修剪指甲，洗手、戴口罩。（2）用物准备：量杯、灌肠袋、润滑剂、棉签、清洁手套、卫生纸、治疗巾、小垫枕。（3）溶液遵医嘱准备，灌肠液不超过200ml，溶液温度为38℃。（4）环境准备：酌情关闭门窗，屏风遮挡患者。保持合适的室温。 (4)实施（1）核对解释：物品备齐携至床旁，核对床号、姓名及灌肠液，解释目的，嘱患者排尿、排便。（2）环境、体位：关门窗，拉窗帘或用屏风遮挡。根据病情选择卧位（慢性细菌性痢疾病变多在直肠或乙状结肠，取左侧位；阿米巴痢疾病变多在回盲部，取右侧位）（3）抬高臀部：垫治疗巾于臀下，抬高臀部10cm。（4）排气、插管、注液：戴手套，润滑肛管前端，排气后轻轻插入肛门15—20cm，缓慢注入药液，使管内溶液全部注完。（5）拔管：反折肛管，拔出肛管，用卫生纸擦净肛门，取出治疗巾，脱手套。嘱患者尽可能忍耐，使药物保留1小时以上。 3、操作后处理（1）整理床单元、清理用物（2）洗手，记录（灌肠时间，灌肠液的种类、量，患者的反应）。 4、操作评价护患沟通有效，患者能配合操作。操作方法正确。达到保留灌肠的目的。注意事项： 1、保留灌肠前嘱患者排便，肠道排空有利于药液吸收。了解灌肠目的和病变部位，以确定患者的卧位和插入肛管的深度。 2、保留灌肠时，应选择稍细的肛管并且插入要深，液量不宜过多，压力要低，灌入速度宜慢，以减少刺激，使灌入的药液能保留较长时间，利于肠粘膜吸收。 3、肛门、直肠、结肠手术的患者及大便失禁的患者，不宜做保留灌肠。

(整理)催眠的标准操作步骤

催眠的标准操作步骤催眠是可以标准化操作的技术，只要你按部就班来进行，你会发现催眠其实就像骑自行车一样容易。只要你按照标准步骤来进行，不但能事半功倍，也能把因为操作不当引起的负面影响减少到最小最小。我们大致可将催眠分成五个步骤，分别是：一、询问解疑(Diagnosis)：与被催眠者建立良好的合作关系，了解他的动机与需求，询问他对催眠既有的看法，解答他有关催眠的疑惑，确定他知道催眠时哪些事情会发生而没有不合理的期待，进行测试敏感度，了解他能进入多深的催眠状态、适合哪种诱导手法。如果是催眠治疗的话，此阶段要开始广泛搜集资讯，找出个案的真正问题所在。注意：每一次的催眠都要有明确的目的。有的时候，个案会有意或无意地隐藏前来求助的真正原因。

Karen Horney曾说过一句名言：「个案接受心理治疗的目的，并非为了治愈他们的精神问题，而是为了让问题更臻完美，变得无懈可击。」这段话极为辛辣，所以催眠师必须洞悉人性，有能力穿透个案的故布疑阵，然后朝正确方向前进，带领个案远离黑暗，走到光明的地方。二、诱导阶段(Induction)：催眠师运用语言引导，让对方进入催眠状态。一般而言，常用的诱导技巧有渐进放松法(progressive relaxation)、眼睛凝视法(eye fixation)、深呼吸法、数数法、手臂上浮法，及其它变形与伪装的方法。催眠诱导技巧有几种呢?答案是：无数种。你有多少想象力，就能创造出多少种催眠诱导技巧。三、深化阶段(Deepening)：引导被催眠者从轻度催眠状态，进入更深的催眠状态。常用的深化技巧有手臂下降法、数数法、甩手法、下楼梯法、搭电梯法、过隧道法等等，除了这些常用技巧，这个阶段常常随机应变，即席创制新招。催眠深化技巧有几种呢?答案是：一样有无数种。四、治疗阶段(Healing)：视被催眠者的需求来治疗，催眠师需要相当好的心理治疗与精神病理学背景，最好在宗教、哲学层面也有所涉猎。同样的，催眠治疗技巧也有无数种，所有你学过的心理治疗技巧都可以融入催眠治疗。五、解除催眠(Ending)：让被催眠者从催眠状态回到平常的意识状

不同分子量蛋白质的分离—凝胶过滤层析法

不同分子量蛋白质的分离—凝胶过滤层析法一、实验目的 1. 了解凝胶柱层析的原理及应用。 2. 掌握凝胶柱层析的基本操作技术。二、实验原理凝胶层析又称凝胶过滤，是一种按分子量大小分离物质的层析方法。该方法是把样品加到充满着凝胶颗粒的层析柱中，然后用缓冲液洗脱。大分子不能进入凝胶颗粒中的静止相中，只留在凝胶颗粒之间的流动相中，因此以较快的速度首先流出层析柱，而小分子则能自由出入凝胶颗粒中，并很快在流动相和静止相之间形成动态平衡，因此就要花费较长的时间流经柱床，从而使不同大小的分子得以分离。凝胶过滤柱层析所用的基质是具有立体网状结构、筛孔直径一致，且呈珠状颗粒的物质。这种物质可以完全或部分排阻某些大分子化合物于筛孔之外，而对某些小分子化合物则不能排阻，但可让其在筛孔中自由扩散、渗透。任何一种被分离的化合物被凝胶筛孔排阻的程度可用分配系数Kav（被分离化合物在内水和外水体积中的比例关系）表示。Kav值的大小与凝胶床的总体积（Vt）、外水体积（Vo）及分离物本身的洗脱体积（Ve）有关，即： Kav= (Ve-Vo)/(Vt-Vo) 在限定的层析条件下，Vt和Vo都是恒定值，而Ve值却是随着分离物分子量的变化而变化的。分离物分子量大，Kav值小；反之，则Kav 值增大。通常选用蓝色葡聚糖2000作为测定外水体积的物质。该物质分子量大（为200万），呈蓝色，它在各种型号的葡聚糖凝胶中都被完全排阻，并可借助其本身颜色，采用肉眼或分光光度仪检测（210nm或

260nm或620nm）洗脱体积（即Vo）。但是，在测定激酶等蛋白质的分子量时，宜用蓝色葡聚糖2000测定外水体积，因为它对激酶有吸附作用，所以有时用巨球蛋白代替。测定内水体积（Vi）的物质，可选用硫酸铵、N-乙酰酪氨酸乙酯，或者其它与凝胶无吸附力的小分子物质。本实验使用血红蛋白（分子量64,500左右）和二硝基氟苯－鱼精蛋白（DNP－鱼精蛋白分子量12,000左右）的混合物，通过Sephadex G－25层析后达到分离。三、试剂和器材 1. 材料血红蛋白溶液（Hb）：取抗凝血（肝素）2mL，离心弃去上层血浆。用0.9％NaCl洗血细胞数次（颠倒混匀，离心，弃去上清液），使离心后上清液几乎无淡黄色为止。于洗净的红细胞中加入5倍体积的蒸馏水摇匀，离心去沉淀（破碎的细胞膜等）即为Hb稀释液备用。 DNP－鱼精蛋白溶液：取鱼精蛋白0.15g溶于10％NaHCO3溶液1.5mL中（此时该蛋白质溶液pH应在8.5～9.0左右）。另取二硝基氟苯0.15g，溶于微热的95％乙醇3mL中，待其充分溶解后立即倾入上述蛋白质溶液中。将此管置于沸水浴中煮沸5分钟，注意防止乙醇沸腾溢出。冷却后加2倍体积的95％乙醇，可见黄色的DNP－鱼精蛋白沉淀。离心（300r/m）5分钟，弃去上清液，沉淀用95％乙醇洗2次，所得沉淀用1mL蒸馏水溶解，即为DNP－鱼精蛋白溶液，备用。 2. 试剂 0.9％ NaCl；10％ NaHCO3）；95％乙醇。 pH 7.0凝酸缓冲液（20mM磷酸二氢钠：20mM磷酸氢二钠＝31mL：69mL） 3. 器材层析柱（1′15cm）；吸管1mL(′1)；滴管；搅棒试管

自我催眠简单的三步骤方法

自我催眠简单的三步骤方法欧阳建东整理第一步睡前法 1．从今天开始连续一星期，每天晚上当你躺上床，准备睡觉前，给自己以下的建议10次“每一天在各方面，我都愈来愈好…” 当你在讲或默念以上建议时，想像你自己变得愈来愈好的样子。 2. 为了避免睡着了或忘记数第几次了，每说一次，你就合一个手指，直到你数完了10次为止。 3. 当你开始学习如何让自我建议有效地改变自己，最重要的就是每天一定要做完10次的建议，才可以睡觉。 4. 你每天睡前开始建立一种由正面自我建议改变自己的习惯模式，每二天将会发现这些正面的建议中，会让你有正面的反应，你会一天比一天更好。

第二步诱导 1．继续你上个星期所学的睡前法。 2．再加上――每天二次――一次上午或下午，一次晚上6：00－8：00，你自我催眠，持续2－3分钟，然后唤醒自己。如下述：坐在舒适有靠背的椅子上。集中注意力在前方比眼睛位置略高的一点上做。做三次深呼吸－缓慢地，当你第三次吸入时，闭气3秒钟，同时数3、2、1…闭上眼睛，吐气，放松，让你自己进入很深的状态…… 3. 你持续在催眠状态中2－3分钟，同时慢慢地从25数到1…… （当你在数数字的时候，想像或在你脑中看见数字在黑板上或电脑荧幕上。） 3．要唤醒自己时，只要从1数到3，你便会完全清醒，精神振奋，头脑清晰，而精力充沛地继续你的工作。 4．做这功课一天两次，连续7天之后，你便可以开始自己有益的建议。第三步程式化建议

1．当你完成了一星期的第一步和第二步自我催眠后，开始第三步骤的自我催眠。你不用再做第二步的自我催眠。 2．在这步骤中，必须准备一张小卡面或空白的名片。这张卡必需能够让你很方便的随时随地带在身上。你要将你给自己的建议写在这张卡片上。你的建议必须是正面的、简单的、可信的、可测量的，而且必须是带有奖励的，还必须用现在式的语气述说人的建议。同样的，舒服的坐下，选择你前方比眼睛高度略高的任一点。拿着卡片摆在你选择的那点前，念三次你自己的建议。放下卡片，深呼吸。第二次吸气，呼气。第三次吸－闭气，闭上眼睛，从3数到1。吐气，完全放松，进入催眠状态。 4．让你的建议在潜意识中一直重复，同时想像你实现你的建议。你将会发现当你在重复你的建议时，常常整句会变得支离破碎，那表示你进入深的催眠状态，是很好的现象。建议还是会有效的进入你的潜意识。过了2－3分钟，你会觉得应该停止了，（这时间是在步骤2时养成的习惯）。这时数1，2，3，张开眼睛觉得放松，而精力充沛。

瑶浴操作流程及注意事项

瑶浴的标准操作流程特别说明：标准的泡药浴是泡舒筋活络型（将人体所有经络打开打通，才能使药效发挥最大的功效）也可针对自身身体使用其他功效型药浴。 1、煮药，用热水煮药包约5-10分钟，水开2-3分钟。 2、将已煮好的药水入浴桶里 A、打开泡澡间的排气通风口。 B、客人入浴前至少喝三杯（300ml）红糖水，浴中可补充淡盐水若干。 C、客人入浴前调节水温，经常泡浴的客人43°C-45°C。从未泡浴的、客人首次进桶43°C，可在浸浴中调节至45°C。 D、客人入浴前，先让客人以手试水温，感觉水温高而不烫手为宜，然后请客人慢慢浸入水中。 E、客人入浴中：开始请客人不要在水中晃动，先静坐2-3分钟，以免感觉水温不合适。 F、客人浴中第一次泡10分钟，提醒客人出桶休息3-5分钟，每次休息有助于药性的吸收在血液中流畅；第二次泡5分钟，休息5分钟；第三次泡5分钟，累计泡浴时间20分钟。【坚持三进三出原则】 G、客人浴中第一次下水时要给客人分享43°C水温的作用与感觉引导，并按摩膻中穴，腋下淋巴处，手腕处，手指尖，腿弯处及顺小腿往脚底推按，最后揉脚趾尖。使客人不至因首次泡澡出现胸闷、头晕及其他秘现反应而感觉难受。还可以将手脚露出水面，缓解头晕、胸闷现象。 H、客人浴中第二次下水时要给客人分享泡瑶浴的经典故事。 I、客人浴中第三次下水时要给客人分享泡哪款产品可以治疗调理哪些症状等。3、出浴后不必清洗，以免影响药效。4、泡浴后禁吹风或吹空调，以免受风、受寒。5、客人首次泡澡第三次出浴后必须面诊，6、面诊时，如有器质性亚健康症状严重的客人，建议到医院确诊，如有功能性亚健康症状严重的客人，建议使用产品调理并结合口服调理方等，使顾客真实受益。