实验病料的采集
实验二病料的采集、保存及送检
一、目的掌握被检病料的采取、保存、送检的方法。
二、材料实验动物（鸡）、瓷盘、剪子、镊子、酒精灯、酒精、接种环、载玻片、火柴棒等。
三、病料的采取
1.采取病料的基本原则
(1)采集最适病料理想的病料，应是无菌采取的含病原微生物量高的血液、器官组织或分泌物和排泄物。因此要根据疾病的病性采取合适的病料，如无法估计是何种疾病时，应根据临床症状和病理变化采集病料或全面采取病料。取材时应注意病原微生物感染所致疾病的类型(如呼吸道感染疾病、胃肠道感染疾病、皮肤和粘膜性疾病、败血性疾病等)、病原微生物的侵入部位、病原微生物感染的靶器官等。细菌检验病料应当是采自未经抗菌药物治疗的患病动物，并且应多做几张涂片。
(2)适时采集采集病料的时间一般在疾病流行早期、典型病急性期，此时病原微生物的检出率高；后期由于体内免疫力的产生，病原微生物减少，检测病原微生物比较困难，同时可能出现交叉感染，增加判断的困难性。在采集供抗体测定用的血清时，可适时地采集急性期和恢复期的两份血清样品，一般两份血清的间隔时间为14～2ld。内脏病料的采取，须于动物死后立即进行；夏季最迟不超过4～6h，冬天不超过24h，否则时间过长，由肠内侵入其他细菌，致使尸体腐败，有碍于病原菌的检出。供做切片的样品采取后必须立即投入固定液，否则时间过长，会使细菌和组织细胞死亡、溶解，影响检验结果。有条件做现场培养时，剖开尸体后应进行接种培养，然后采样，最后剖检。
(3)无菌操作采集病料所用的器械及容器要进行严格的消毒：刀、剪、镊子等金属用具可煮沸消毒30min，使用前最好用酒精擦拭，并在火焰上烧一下；器皿（玻制、陶制及珐琅制等）在高压灭菌器或干烤箱内灭菌；软木塞和橡皮塞应高压灭菌；载玻片用2%～5%碳酸钠煮沸消毒5～10min，煮沸后用清水冲洗干净，拭干保存或浸泡于95%酒精中以备使用；注射器和针头放于清洁水中煮沸30min即可，或用一次性注射器。病料采取过程都应该无菌操作，尽量避免杂菌污染。采取一种病料，使用一套器械，或器械酒精擦拭火焰灭菌后再采取另一种病料；一种病料放入一种容器，不可混放。
(4)剖前检查若有突然死亡或病因不明的尸体，须先采取末梢血液制成涂片，镜检，观察是否有炭疽杆菌存在。若疑似炭疽时，不得进行解剖；如需要剖检并获取病料时，应经上级有关部门同意，选择合适的场地，做好严格的防范工作，剖后要进行严格的消毒处理。只有在确定不是炭疽后，方可进行剖检。
2.病料采集的方法
（1）液体材料一般用灭菌棉拭子采取破溃的脓汁、鼻液、阴道分泌物与排泄物。未破的脓肿、胸水、腹水在皮肤表面消毒后，用无菌注射器抽取。
（2）血液无菌采取血液，供病原培养、抗体检测和血液检查之用。体型较大的单蹄和偶蹄类动物少量血样可以从耳背静脉采血；毛皮动物少量采血可通过耳壳外侧静脉采取；鼠类可以通过尾尖、耳背静脉、眼窝内血管采血；兔可从耳背静脉、颈静脉、心脏等处采血；鸟类可以从肘关节内侧的翅静脉、跖部内静脉或心脏采血。
（3）乳汁乳房先用消毒药水洗净（取乳者的手也应事先消毒），并把乳房附近的毛刷湿，最初所挤的3～4股乳汁弃去，然后再采集10ml左右乳汁于灭菌试管中。若仅供显微镜直接染色检查，则可于其中加入0.5%的福尔马林液。
（4）淋巴结及内脏组织应在尸体解剖后立即采取。将淋巴结、肺、肝、脾及肾等有病变的部位各采取1～2cm3的小方块，分别置于灭菌容器中，并尽可能采取有病变及病变交界处的部位。
（5）胃肠及内容物可将胃肠剪下，两端扎好，送往实验室。或用烧红的器具烧烙表面后穿一小孔，用灭菌棉拭子取其内容物，放入无菌的器皿内或放入装有生理盐水或PBS的试管内。
（6）脑、脊髓按病理解剖方法取出脑、脊髓。取一部分放入10%福尔马林溶液的瓶中，供组织学检查；一部分放入50%甘油生理盐水瓶中，供微生物学检查。或者将头部取下，用塑料口袋包好直接送检。
（7）胆汁先用烧红刀片或铁片烧烙胆囊表面，再用灭菌细管或注射器刺入胆囊内吸取胆汁，置于灭菌试管中。
（8）皮肤去大小约10×10cm2的皮肤一块，保存于30%甘油缓冲溶液中，或10%饱和盐水溶液中，或10%福尔马林液中。
（9）骨头需要完整的骨头时，应将附着的肌肉和韧带等全部除去，表面撒上食盐，然后包于浸过5%石炭酸水或0.1%升汞液的纱布或麻布中，装于木箱内送到实验室。
(10)流产胎儿及小动物尸体将流产胎儿及小动物尸体包入不透水塑料薄膜、油纸或油布中，装于木箱内送到实验室。
二、病料的保存
1.常用保存剂的配制
（1）30%甘油缓冲溶液
纯中性甘油 30ml
NaCl 0.5g
碱性磷酸钠 1.0g
0.02%酚红 1.5ml
中性蒸流水加至 100ml 混合分装后，0.105Mpa高压灭菌30min
（2）50%甘油缓冲盐水溶液
NaCl 2.5g
酸性磷酸钠 0.46g
碱性磷酸钠 10.74g
纯中性甘油 150ml
中性蒸流水 150ml 混合分装后，0.105Mpa高压灭菌30min
（3）10%福尔马林溶液取福尔马林10ml加入蒸馏水90ml即成。
（4）饱和盐水溶液取一定的蒸馏水加入纯NaCl，不断搅拌至不能溶解为止（一般为38%～39%左右），然后用滤纸过滤。
（5）鸡蛋生理盐水溶液先将新鲜鸡蛋的表面用碘酒消毒，然后打开内容物倾入灭菌的三角瓶中，加入灭菌盐水（占总量的10%），摇匀后，用无菌纱布过滤，然后加热至56～58℃30min，第2d及第3d按上法再加热一次，即可应用。
2.常用保存方法
（1）液体病料检查抗体用的血液，不加抗凝剂，待凝血后，分离血清放入青霉素小瓶中。供病原分离培养用的液体病料，同容器一起放入有冰的保温瓶或4℃冰箱内。
（2）供细菌学检验的实质脏器若1～2d内能送到实验室，可放在有冰的保温瓶或冰箱内，也可放入灭菌液体石蜡或30%甘油缓冲盐水内。如无冰，也可在保温瓶内放氯化铵500g加水1500ml，使保温瓶内保持O℃左右达24h。
（3）供病毒学检验的实质脏器应尽快送检，如不能即刻送检而需要保存时，必须保持在冷的环境中，48h内送到实验室。一般放在50%甘油缓冲盐水溶液或鸡蛋生理盐水溶液中，4℃保存最好，原因是冻化过程能使病毒破坏。如需保存较长时间才能进行检查，最好放在一20℃以下或干冰中保存。
（4）病理组织病料采取的病料立即放入10倍体积的10%福尔马林溶液或95%～100%酒精中，如用10%福尔马林溶液固定组织时，经24h应重换新鲜液一次。神经系统组织（脑、脊髓等），需固定于10%中性福尔马林溶液内（福尔马林溶液的总容积中加入5%～10%碳酸镁）。在寒冷季节，为了避免病料冻结，在运送前，可将预先固定的病料置于含有30%～50%甘油的10%福尔马林溶液中。
三、病料的送检供细菌检验用的病料，要防止腐败，必须及时送检。一般可用有冰块的保温瓶或其他低温条件，以使病料不腐败。最好由专人送检，并带好送检的有关病情、病例、剖检等记录，以供检验人员的参考。
为避免散播病原，盛有病料的容器，瓶口要盖紧，用胶布封好或石蜡封固，并用消毒液充分擦拭容器的表面。瓶上加贴标签，注明样品来源、种类、保存方法、采集时间等。为避免病料外漏，应立放于金属筒内，填塞防震填充料(木屑、纸渣、稻草、塑料泡沫的渣屑等)。
水样采集与保存
水样的采集与保存 1 、范围 本标准规定了生活饮用水及其水源水样的采集，样品保存和采样质量控制的基本原则、措施和要求。 本标准适用于生活饮用水及其水源水样的采集和样品保存。 2、规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本规范的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB5749 生活饮用水卫生标准 GB/T12998 水质采样技术指导 GB/T12999 水质采样样品的保存和管理技术规定 GB17051 二次供水设施卫生规范 3、采样计划 采样前应根据水质检验目的和任务制定采样计划，内容包括：采样目的、检验指标、采样时间、采样地点、采样方法、采样频率、采样数量、采样容器与清洗、采样体积、样品保存方法、样品标签、现场测定项目、采样质量控制、运输工具和条件等。 4、采样容器 4.1 应根据待测组分的特征选择合适的采样容器。 4.2 容器的材质应化学稳定性强，且不应与水样中组分发生反应，容器壁能够吸收或吸附待测组分。 4.3 采样容器应可适应环境温度的变化，抗震性能强。 4.4 采样容器的大小、形状和重量相适宜，能严密封口，并容易打开且易清洗。 4.5 应尽量细口容器，容器的盖和塞得材料应与容器材料统一。在特殊情况下需用软木塞或橡胶塞时应用稳定的金属箔或聚乙稀薄膜包裹，最好有蜡封。有机物和某些微生物检测用的样品容器不能用橡胶塞，碱性的液体样品不能用玻璃塞。 4.6 对无机物、金属和放射性元素测定水样应使用有机材质得采样容器，如聚乙烯塑料容器等。 4.7 对有机物和微生物指标测定水样应使用玻璃材质的采样容器。 4.8 特殊项目测定的水样可选用其他化学惰性材料材质的容器。如热敏物质应该选用热吸收玻璃容器；温度高、压力大的样品或含痕量有机物的样品应选用不锈钢容器；生物（含藻类）样品应选用不透明的非活性玻璃容器，并存放阴暗处；光敏性物质应选用棕色或深色的容器。 5、采样容器的洗涤 5.1 测定一般理化指标采样容器的洗涤
病(死)禽病理剖检的准备、注意事项、程序、病料采集和送检2
病（死）禽病理剖检的准备、注意事项、程序、病料采集和送检
家禽的病理剖检在禽病诊治中具有重要的指导意义，这一点已为广大禽病技术服务人员所重视。因此对禽场中出现的病、残或死禽进行尸体剖检，以便及时发现禽群中存在的潜在问题，防止疾病的爆发和蔓延。 （1）病理剖检的准备 剖检地点的选择：应在远离生产区的下风处，尽量远离生产区，避免病原的传播。剖检器械的准备：对于家禽剖检，一般有剪刀和镊子即可工作。另外可根据需要准备骨剪、肠剪、手术刀、搪瓷盆、标本缸、广口瓶、消毒注射器、针头、培养皿等，以便收集各种组织标本。 剖检防护用具的准备：工作服、胶靴、一次性医用手套或橡胶手套、脸盆或塑料小水桶、消毒剂、肥皂、毛巾等。 尸体处理设施的准备：对剖检后的尸体应进行焚烧或深埋。 （2）病理剖检的注意事项 在进行病理剖检时，如果怀疑待检的家禽已感染的疾病可能对人有接触传染时（如鸟疫、丹毒、禽流感等），必须采取严格的卫生预防措施。剖检人员在剖检前换上工作服、胶靴、配戴优质的橡胶手套、帽子、口罩等，在条件许可的条件下最好戴上细粒面具，以防吸入病禽的组织或粪便形成的尘埃等。 在进行剖检时应注意所剖检的病（死）禽应在禽群中具有代表性。如果病禽已死亡则应立即剖检（一般应在死后24小时内剖检，夏天在死后8小时内剖检），应尽可能对所有死亡禽进行剖检。 剖检前应当用消毒药液将病禽的尸体和剖检的台面完全浸湿。 剖检过程应遵循从无菌到有菌的程序，对未经仔细检查且粘连的组织，不可随意切断，更不可在腹腔内的管状器官（如肠道）切断，造成其它器官的污染，给病
原分离带来困难。 剖检人员应认真地检查病变，切忌草率行事。如需进一步检查病原和病理变化，应取病料送检。 在剖检中，如剖检人员不慎割破自己的皮肤，应立即停止工作，先用清水洗净，挤出污血，涂上药物，用纱布包扎或贴上创口帖；如剖检的液体溅入眼中时，应先用清水洗净，再用20%的硼酸冲洗。 剖检后，所用的工作服、剖检的用具要清洗干净，消毒后保存。剖检人员应用肥皂或洗衣粉洗手，洗脸，并用75%的酒精消毒手部，再用清水洗净。 （3）病理剖检的程序 活禽的宰杀：常用的方法有断颈法（即一手提起双翅，另一手掐住头部，将头部急剧向垂直位置的同时，快速用力向前拉扯）；颈动脉放血；静脉注射安乐死的药液、二氧化碳（CO2）等。 将其尸体表面及羽毛完全浸湿，然后将其移入搪瓷盆或其它用具中进行剖检。将禽的尸体背位仰卧，在腿腹之间切开皮肤，然后紧握大腿股骨，用手将两条腿掰开，直至股骨头和髋臼分离，这样两腿将整个家禽的尸体支撑在搪瓷盆上。沿中线先把胸骨嵴和肛门间的皮肤纵行切开，然后向前，剪开胸、颈的皮肤，剥离皮肤暴露颈、胸、腹部和腿部的肌肉，观察皮下脂肪、皮下血管、龙骨、胸腺、甲状腺、甲状旁腺、肌肉、嗉囊等的变化。 沿下颌骨从剪开一侧口角，再剪开喉头、气管、食道和嗉囊，观察鼻孔、腭裂、喉头、气管、食道和嗉囊等的异常病理变化。此外在鼻孔的上方横向剪开鼻裂腔，观察鼻腔和鼻甲骨的异常病理变化。 在脊柱的两侧，仔细将肾脏剔除，可露出腰荐神经丛；在大腿的内侧，剥离内收
采集病料的原则和技术要点
采集病料的原则和技术要点 病料采集是进行实验室诊断的重要环节，直接影响着检验结果的准确性和速度。为了提高诊断的时效性和准确性，采集病料时须把握以下原则和技术要点。 1 时间性和新鲜性 病料采集力求新鲜，能进行活体采集的病料尽量进行活体采集，如血液、乳汁、尿液以及禽类气管拭子和泄殖腔拭子等。由于畜禽死亡后，随着时间的延长，尸体会发生腐败，组织器官的病理变化也会发生一定程度的改变，病原体种类也可能增加，阻碍实验室对病原的检查。 为了保证病料的新鲜性，采集内脏病料须于濒死期动物或死亡后立即进行（一般不超过6h，夏季最好不要超过4h，冬季北方可适当延长至24h）。 所采集到的病料要分类装入特定容器中进行冷冻或冷藏暂存。 2 针对性和适量性 针对不同的疾病，病料的采集部位也有很大区别。在实际生产中我们应结合流行病学特点、临诊症状和剖检变化，大致怀疑是某种或多种疫病，然后根据该种疫病的特点和主要病变部位来决定采集哪些部位的病料。如怀疑是口蹄疫时可取水疱皮和水疱液检查；怀疑是鸭病毒性肝炎时可取肝脏、脾脏、肾脏组织检查；如要用血清学试验检查血清中的抗体，可采集血液分离血清。 若提不出怀疑对象时，则应全面采集病料，通常采取心血、体液、分泌物、胃肠内容物和各主要器官组织及各种病变组织，运用多种方法进行检查。 采集病料的数量（视群体多少可按千分之一到五）和大小既要满足检查的需要，又要防止盛装和送检时的累赘。实质器官一般摘取1～2cm3的小方块；肠道取7～10cm长度，经双结扎后剪取；淋巴结和禽类脾脏可直接摘取，分别置无菌容器中保存。 3 无菌性和安全性 为防止污染病料而干扰检查，采集病料时必须坚持无菌操作。操作人员使用的解剖器械要灭菌或消毒，每采集一种病料，用酒精棉球将器械擦拭消毒一次；盛装病料的试管、平皿、小瓶等需要事先高压灭菌；不同畜禽的病料、同种动物不同个体的病料和同一动物不同脏器病料均应分别盛放，不可混放于一起，以防
地热勘察水样采集及运输保存方法
地热勘察水样采集及运输保存方法 B2不同分析项目的采样要求 B2.1 原样水样 原样指水样采集后不添加任何保护剂。这类水样可采集在硬质细口磨口玻璃瓶(下称玻璃瓶)或没有添加剂的本色聚乙烯塑料瓶或桶(下称塑料桶)中，采样体积1 500—2 000mL。可以将瓶置于水面以下灌装或用塑料或橡胶管引流接至瓶中。瓶口要留出10mL左右的空间，然后将瓶盖密封。测定水中二氧化硅和硼的原样水样必须用塑料瓶采集，体积200mL。 原样水样供测定水中的所有阴离子、绝大部分阳离子、硬度、碱度、固形物、消耗氧、pH值及物理性质。 B2.2 酸化水样 B2.2.1 盐酸酸化水样 a.以两个容积分别为1 500mL和500mL的塑料桶采集水样后，在采样现场分别往水样中加入5mL和3mL(1＋1)盐酸，摇匀、密封。分别供测定水中铀镭及微量元素。 b.总α、总β测定：用2000－5000mL塑料桶采样(视矿化度高低决定取样量)，每升水样中加入(1＋1)盐酸4mL。 B2.2.2 硝酸酸化水样 用塑料瓶采样500ml，加(1＋1)硝酸，使含酸0.2％－O.5％，pH≤2为宜，供测定金属离子及微量元素。对温度较高的热水，作钙、镁的样品，以此酸化处理样品为佳。 B2.3 碱化水样 用500mL玻璃瓶，在水样中加入2g固体氢氧化钠，摇匀，使pH＞11并尽量在低温条件下保存，于24h内送检，供测定酚、氰。 B2.4 稀释水样 中、高温地热井或显示点测定二氧化硅的水样为防止高浓度二氧化硅的聚合或沉淀，宜在野外现场将水样用无硅蒸馏水作1：10稀释处理，采样体积50－100mL，塑料瓶口密封。 B2.5 浓缩萃取水样（不采集）
实验样品采集运输保存方法
1.R N A实验样品采集、保存方法 使用范围及样品量 类别：Microarray Service；Sequencing Service; PCR Array& PCR Service 样本量： 样本样本量 哺乳动物培养细胞样品（悬浮细胞）1*107个 哺乳动物培养细胞样品（贴壁细胞）15cm2 植物组织样品100mg-1g，根据植物不同部位的组织决定组 织需要量，尽可能多些，但不必超过1g 动物组织样品 新鲜组织样品 A. 使用RNAlater试剂 取新鲜组织（注：动物死亡后尽快在10min内取材），组织块以PBS或生理盐水清洗干净，所用组织必须切至厚度在一下，然后放入装有5倍体积RNAlater的离心管（或冻存管）中。 4度孵育过夜，此时样品管需要横置以便组织块充分接触到RNAlater，然后转入-20中保存，样品在-20不会冻结，但溶液中可能会有一些晶体出现，这并不影响后续的RNA抽提。 B. 使用Trizol试剂 取新鲜组织（1min以内），组织块以PBS或生理盐水清洗干净，每50-100mg组织加入1ml Trizol溶液匀浆裂解组织样品，最好冰上进行操作。
匀浆的裂解液4度短期保存（1month），-20或者-70度长期保存。 冻存组织 生物体死亡后尽快（10min以内）切取新鲜组织，并以PBS或生理盐水清洗干净切成小块；培养液倒入离心管中，离心沉淀细胞，弃去上清液。 细胞沉淀（1*107个）中加入1ml Trizol裂解液 反复吸打几次后，目视可见细胞层溶液完全 -70保存 贴壁细胞 从培养容器中吸出并弃去培养液 培养瓶直接加入Trizol试剂，Trizol用量与细胞贴壁面积有关，15cm2细胞贴壁面积加入1mlTrizol。 反复吸打几次后，目视可见细胞层溶解完全。 -70度保存。 植物组织样品 准确取得所需新鲜组织后，如有必要可用PBS清洗干净，将所用组织切碎，装入冻存管中或者用锡箔包裹好。 立即投入液氮中保存。 2.血液类样品采集、保存方法 适用范围及样品量 全血/血细胞：Microarray Service；Sequencing Service; PCR Array& PCR Service 血清/血浆：Microarray Service；PCR Array& PCR Service
病理材料的采集与送检
病理材料的采集与送检 作者：胡全福 １病料的采集 １．１供检验用的病料必须是新鲜畜尸的各脏器或血液等。已腐败变质的畜尸不能采取病料。作细菌学培养的则应采用未使用过治疗药物的病畜。所用器械容器事先要消毒。 １．２采取病料的部位应根据疫病情况而定。一般应采肝，脾、肾、淋巴结、脑、脊髓等组织，如怀疑为口蹄疫则应采蹄部水疱皮或水疱液，分别装在灭菌容器内；需作病原检查的放在５０％甘油生理盐水中保存；作病理组织学检查的则放在福尔马林中保存。血液如要作血清学检查，则应让其自然凝固后分离出血清；如作病原学检查需全血，应预先加入抗凝剂。小家畜则可送全尸到实验室，依具体情况采取病料。 １．３对人畜共患病，在采病料时应戴手套、口罩等。如疑似炭疽则不能剖检，而应采取局部皮肤或耳尖送检，如确实需要剖检，一定要严格做好消毒和防护，防止病原扩散。 ２病料的保存及寄送 ２．１病料保存方法依据病料用途和病原特性选择保存方法。一般需冷藏保存作病原检查的材料，应将病料分别装在小口瓶或青霉素瓶内加５０％甘油生理盐水，如作病
毒分离还应加一定量的青霉素、链霉素。如作细菌检验则不能加“双抗”，而且病料保存时间不宜过长，应尽快密封送检。 ２．２作病理组织切片的病料，应选择好被检脏器的３ｃｍ３的组织块放在１０％的福尔马林溶液或９５％酒精中，保存液的量应为病料的８～１０倍。 ２．３供细菌或病毒学检查的血液应加抗凝剂，以防凝固，但不可加防腐剂。常用的抗凝剂为５％枸椽酸钠溶液，按１ｍＬ防凝剂加１０ｍＬ血液摇匀即可。 ２．４送检的病料都应注明所采家畜的品种、年龄、发病情况、流行病学特点、采集时间、采集地点、畜主、送检目的、病料名称、保存液等细资料。 ３几种主要传染病病理材料的采取方法 ３．１口蹄疫无菌采取新鲜、成熟、未破裂、无污染溃烂的水疱皮或水疱液。水疱皮可保存在５０％甘油生理盐水中，供作反血凝及动物试验。 ３．２猪瘟采死猪的整个脾、肾、淋巴结及有病变的消化道，分别装在容器中供病理检查，酶标试验及分离、培养动物接种，如需抗体检查则采血清。 ３．３猪丹毒采死猪的脾、肾、淋巴结或有疹块的皮肤保存在３０％甘油生理盐水中，作细菌学检查，也可采未破溃的淋巴结或病猪耳静脉全血送检。 ３．４破伤风从疑似细菌侵入的创伤深处吸取伤口中的血液、脓汁或挖取局部深处的坏死组织送检。 ３．５伪狂犬病小家畜可送全尸、完整的头部、整个大
病料的采集、保存及运输制度
病料的采集、保存及运输制度 l、病料的采集‘ (1) 血样的采集 A．根据动物种类确定采血部位。选用真空管、无菌注射器、无菌采血瓶、毛细管等采血，采血量满足试验需要。 B．若需抗凝血，则视实验要求选择抗凝剂。如需血清，则待血凝固后无菌分离血清并分装于灭菌瓶(管)中。 (2)粪样的采集 将消毒拭子插入动物肛门或泄殖腔中，采取直肠粘液或粪便，放入装有缓冲液的试管或瓶中，尽快送到实验室；若检查消化系统寄生虫，则需采取5—10g 新鲜粪便。 (3)子宫阴道内分泌物或外生殖器包皮内分泌物的采集 将消毒好的特制吸管插入子宫颈口或阴道内，向内注射少量营养液或生理盐水，用吸球反复抽吸几次后吸出液体，注入培养液中。用软胶管插入公畜的包皮内，向内注射少量的营养液或生理盐水，多次揉搓，使液体充分冲洗包皮内壁，收集冲洗液注入无菌容器内。 (4)实质脏器的采集 无菌采集脏器组织块，放入无菌容器内。每块组织应单独放在无菌容器内，注明日期、组织和动物名称。注意防止组织间相互污染。供组织病理学检查的组织块的厚度不能超过0、5cm，切成1—2cm的方块，置于至少10倍于组织样品体积的中性缓冲10％福尔马林溶液中，作组织学检查的样品不能冷冻。 (5)皮肤样品的采集 产生水泡或皮肤病变的疾病，应直接从病变部位采样。病变皮肤的碎屑以及末破裂水泡液也可作为样品。 (6)奶样的采集 清洗乳头后采样。弃去头把奶液后采集奶液装满无菌试管。 (7)胚胎的采集
选取力整、无腐蚀的胚胎置于冰桶中尽快送抵实验室。如果在24小时内不能将样品送达实验室，只能冷冻运送。 2、病料的保存 检查抗体用的血液，不加抗凝剂，待凝血后，分离血清放入小青霉素瓶中。供细菌培养用的液体病料，同容器一起放入有冰的保温瓶或4℃冰箱内。 3、病料的运送 供细菌检验用的病料，要防止腐败，必须及时送检。一般可用有冰块的保温瓶或其他低温条件，以使病料不腐败。最好由专人送检，并带好送检的有关病情、病例、剖检等记录，以供检验人员的参考。
水样的采集与保存
水样采集和保存的具体方法 一、水样的类型 (一)瞬时水样 瞬时水样是指在某一时间和地点从水体中随机采集的 分散水样。当水体水质稳定,或其组分在相当长的时间或相当大的空间范围内变化不大时,瞬时水样具有很好的代表性;当水体组分及含量随时间和空间变化时,就应隔时、多点采集瞬时样,分别进行分析,摸清水质的变化规律。 (二)混合水样 混合水样是指在同一采样点于不同时间所采集的瞬时 水样的混合水样,有时称“时间混合水样”,以与其他混合水样相区别。这种水样在观察平均浓度时非常有用,但不适用于被测组分在贮存过程中发生明显变化的水样。 如果水的流量随时间变化,必须采集流量比例混合样,即在不同时间依照流量大小按比例采集的混合样。可使用专用流量比例采样器采集这种水样。 (三)综合水样 把不同采样点同时采集的各个瞬时水样混合后所得到 的样品称综合水样。这种水样在某些情况下更具有实际意义。例如,当为几条排污河、渠建立综合处理厂时,以综合水样取
得的水质参数作为设计的依据更为合理。 27 / 1 二、地表水样的采集 (一) 采样前的准备 采样前,要根据监测项目的性质和采样方法的要求,选择适宜材质的盛水容器和采样器,并清洗干净。此外,还需准备好交通工具。交通工具常使用船只。对采样器具的材质要求化学性能稳定,大小和形状适宜,不吸附欲测组分,容易清洗并可反复使用。 (二) 采样方法和采样器(或采水器) 在河流、湖泊、水库、海洋中采样,常乘监测船或采样船、手划船等交通工具到采样点采集,也可涉水和在桥上采集。 采集表层水水样时,可用适当的容器如塑料筒等直接采取。 采集深层水水样时,可用简易采水器、深层采水器、采水泵、自动采水器等。 三、地下水样的采集 (一) 井水 从监测井中采集水样常利用抽水机设备。启动后,先放水数分钟,将积留在管道内的陈旧水排出,然后用采样容器(已预先洗净)接取水样。对于无抽水设备的水井,可选择适合的采水器采集水样,如深层采水器、自动采水器等。
病料采集.
病料米集 、采集原则 1、适时米集 供检疫用的材料因检测目的和项目不同，应尽可能采集到新鲜样品。用于分离病原体的，须在动物病初发热期或出现典型临诊症状时采集；若需制备血清, 在动物空腹时采血。从动物尸体采样，无论什么检测项目，都应在动物死后立即 采集。若无条件，夏季最好不超过动物死后2h;冬季不超过20h。 2、典型采样 首先要选择典型动物，即未经药物治疗、病状典型的动物，这对细菌性传染 病的检查尤其重要。二是选择典型材料，通常采集病原体含量最高的材料。不同疫病的病原体在动物体内及其分泌物、排泄物中的分布、含量不同，即使同一种疫病，在病的不同时期和不同病型中，病原体在体内分布也不同。在采取病料前, 对动物可能患某种疫病作出初步诊断，侧重采集该病原体常侵害的部位。 从动物尸体采样，通常采集有病变的组织、器官或病变最明显、最典型的部位。供病理组织切片的样品，应连带部分健康组织。淋巴结、心、肝、脾、肺、肾，不论有无病变，一般均应采取。 3、合理采样 指取样动物的数量和样品的数量要合理。动物群体发病，至少采取5头（只）份动物的病料。每一种样品应有足够的数量，除确保本次实验用量外，以备必要的复检用。对于畜产品，按规定采取足量样品。皮张炭疽检疫时，在每张皮的腿部或腋下边缘部位取样，初检取1g，复检时在同部位取2g。 4、无菌采样 样品采集全过程无菌操作，尤其是供微生物学检查和血清学实验的样品。采 样部位、采样用具、盛放样品的容器均需灭菌处理。有些样品，如皮肤上的水泡, 采集部位用清水清洗即可，忌用消毒剂消毒。 5、安全采样 在采样过程中，采样人员要注意安全，防止感染；同时防止病原扩散而造成环境污染。
水质采样-样品的保存和管理技术规定
中华人民共和国国家环境保护标准 HJ 493—2009 代替GB 12999—91 水质采样样品的保存和管理技术规定 Water quality sampling — technical regulation of the preservation and handling of samples (发布稿) 2009-09-27 发布；2009-11-01 实施 前言 为了贯彻《中华人民共和国环境保护法》和《中华人民共和国水污染防治法》,保护环境,保障人体健康,规范水质样品的保存和管理,制定本标准. 本标准规定了水样从容器的准备到添加保护剂等各环节的保存措施以及样品的标签设计,运输, 接收和保证样品保存质量的条款. 本标准对《水质采样样品的保存和管理技术规定》(GB 12999-91)进行了修订,原标准起草单位:中国环境监测总站,首次发布于:1991 年,本次是第一次修订. 主要修订内容: ——增加单项样品的最少采样量及量化部分保存剂的加入量. ——增加分析项目的容器洗涤方法.删除"分析地点"和"建议"合并为"备注" . ——增加待测项目,其中理化和化学指标33 项,如高锰酸盐指数,凯氏氮,总氮,甲醛,挥发性有机物,农药类,除草剂类,邻苯二甲酸酯类等:增加生物指标 4 项:增加放射学指标10 项. 自本标准实施之日起,原国家环境保护局1991 年 1 月25 日批准,发布的国家环境保护标准《水质采样样品的保存和管理技术规定》(GB 12999-91)废止. 本标准由环境保护部科技标准司组织制订. 本标准主要起草单位:中国环境监测总站,辽宁省环境监测中心站. 本标准环境保护部2009年9月27日批准. 本标准自2009年11月1日起实施. 本标准由环境保护部解释. I 水质采样 1 适用范围 样品的保存和管理技术规定
水样采集方法及注意事项
水样保存方法 一、水样保存的基本要求 1．减缓生物作用 2．减缓化合物或者络合物的水解及氧化还原作用 3．减少组分的挥发和吸附 二、一般的保存措施 1．冷藏或冷冻样品在4℃冷藏或将水样迅速冷冻，贮存于暗处，可以抑制生物活动，减缓物理挥发作用和化学反应速度。冷藏是短期内保存样品的一种较好方法，对测定基本无影响。但需要注意冷藏保存也不能超过规定的保存期限，冷藏温度必须控制在4℃左右。温度太低(例如≤0℃)，因水样结冰体积膨胀，使玻璃容器破裂，或样品瓶盖被顶开失去密封，样品受沾污。温度太高则达不到冷藏目的。 2．加入化学保存剂 （1）控制溶液pH 值：测定金属离子的水样常用硝酸酸化至pHl~2，既可以防止重金属的水解沉淀，又可以防止金属在器壁表面上的吸附，同时在pHl~2 的酸性介质中还能抑制生物的活动。用此法保存，大多数金属可稳定数周或数月。测定氰化物的水样需加氢氧化钠调至pHl2。测定六价铬的水样应加氢氧化钠调至pH8，因在酸性介质中，六价铬的氧化电位高，易被还原。保存总铬的水样，则应加硝酸或硫酸至pHl~2。（2）加入抑制剂：为了抑制生物作用，可在样品中加入抑制剂。如在测氨氮、硝酸盐氮和COD 的水样中，加氯化汞或加入三氯甲烷、甲苯作防护剂以抑制生物对亚硝酸盐、硝酸盐、铵盐的氧化还原作用。考试&大&在
测酚水样中用磷酸调溶液的pH 值，加入硫酸铜以控制苯酚分解菌的活动。 （3）加入氧化剂：水样中痕量汞易被还原，引起汞的挥发性损失，加入硝酸-重铬酸钾溶液可使汞维持在高氧化态，汞的稳定性大为改善。（4）加入还原剂：测定硫化物的水样，加入抗坏血酸对保存有利。含余氯水样，能氧化氰离子，可使酚类、烃类、苯系物氯化生成相应的衍生物，为此在采样时加入适量的硫代硫酸钠予以还原，除去余氯干扰。样品保存剂如酸、碱或其它试剂在采样前应进行空白试验，其纯度和等级必须 达到分析的要求。 水样的采集、保存和预处理 水样的采集和保存是水质分析的重要环节。要想获得准确、全面的水质分析资料，首先必须使用正确的采样方法和水样保存方法并及时送样分析化验。如果这个环节没有做好，那么，即使分析化验操作严格细致、准确无误，其结果也是毫无意义的。甚至得出错误的结论，耽误了工作。 水样采集和保存的主要原则是：(1)水样必须具有足够的代表性，(2)水样必须不受任何意外的污染。 水样的代表性是指样品中各种组分的含量都应符合被测水体的真实情况。为了得到具有真实代表性的水样就必须选择恰当的采样位置，合理的采样时间和先进的采样技术。 一、采样布点 在采集水样之前，必须做好有关的调查和了解。例如对于水体的采样，应事先了解流域范围内城市和工业的布局及废水排放情况，农业区化肥和农药的使用及污水灌溉情况以及河流的流量、河床宽度和深度等水文情况。对于工业废水的采样，则应事先了解
病料的采集与运输.
病料的采集与运输 一、病料的采集 1，新鲜，代表性，一定的数量，死尸上采集：夏天少于6h，冬天12-24h. 2，减少污染，在做尸体剖检时，应将尸体浸泡在消毒剂溶液中，防止羽毛及皮屑飞扬对病料造成的污染。 3，尸体剖开腹腔时，第一时间采取病料，减少病料因暴露于空气中而造成的污染。 4，无菌操作（尽量）：病料采集时，对采集病料的器械及容器必须提前消毒，减少因器械或盛放病料的容器对病料的污染。 5，病料采集后，应先存放于冰箱中1-2小时后，再做微生物检验 二、病料的采集方法 1，组织和实质器官的采集 病料的采集必须采用无菌操作。剖开腹腔后，必须注意肠管的完整。如需进行细菌的分离培养，要以烧红的手术刀片烫烙脏器表面，使用经火焰灭菌的接种针插入烫烙的部位，提取少量的组织或液体，作涂片镜检或接种于培养基上，进行培养。 2，液体病料的采集 血液、胆汁、脓肿液、渗出物等液体病料，使用灭菌吸管或注射器，经烫烙部位吸取病变组织的液体，将病料注入灭菌的试管中，塞好棉塞送检。 3，全血的采集方法 用灭菌注射器自鸡的心脏或翅静脉采血2-5毫升，注入灭菌试管中。（一般在血液中加入少量的抗凝剂3.8%枸橼酸钠0.1-0.5毫升或柠檬酸钠液） 红细胞保存液的配制：葡萄糖2.05g、柠檬酸钠0.8g、柠檬酸0.055g、氯化钠0.42g，加蒸馏水至100ml.高压灭菌10磅、10分钟。 4，血清的采集方法 用灭菌注射器自鸡的心脏或翅静脉采血2毫升，注入灭菌试管中（青霉素瓶）摆成斜面，待血液凝固血清析出后，将血清吸出注入另一个灭菌试管中，备用。 5，肠道及肠内容的采集方法 肠道：选择病变明显部位的肠道，将内容物弃掉，用灭菌生理盐水冲洗干净，然后将病料放入盛有灭菌的30%甘油盐水缓冲液中送检。亦可将肠管切开，用灭菌生理盐水冲洗干净，然后用烧红的手术刀片烫烙粘膜表面，将接种针插入粘膜层，取少量病料接种于培养基上。 30%甘油盐水缓冲液的配制： 甘油：300ml、Nacl 4.2g、Na2HPO4 3.1g、NaH2PO4 1.0g、0.02%酚红溶液1.5ml，加蒸馏水至1000ml.混匀。加热溶化，矫正PH 7.6，15磅高压灭菌15分钟，保存。 肠内容：用烧红的手术刀片烫烙肠道浆膜层，将接种针插入肠道内，吸取少量肠内容，放入试管中或将带有肠内容的肠道两端扎紧，去掉其它部分送检。 6，皮肤及羽毛的采集 皮肤要选病变明显部分的边缘，采取少许放入灭菌的试管中送检；羽毛也要选病变明显部分，用灭菌的刀片刮取羽毛及根部的皮屑少许，放入灭菌的试管中送检；孵化室的绒毛：用灭菌镊子采取出雏机出风口的绒毛3-5克，放入灭菌的试管中送检。 三、病料的运送
病料采集和保存制度
病料采集和保存制度 采集病料是微生物学诊断、血清学诊断和病理组织学诊断等实验室诊断方法的重要环节,直接影响着检验结果的准确性和速度。为了提高诊断的时效性和准确性,以便及时制定和落实防制措施,减少经济损失,我站所特制订了制度。其内容如下： 一、采集前应准备好经消毒的器械和容器。 二、供实验室检验用的病料采集时要尽可能齐全，主要为内脏、淋巴结和局部病变组织等。 三、病料采集的全过程都要注意无菌操作，器械都要经过消毒，做到一畜一套器械。 四、一般情况下，采集病料的病例应选取临床表现较明显且典型的病例。 五、采集病料最好选择濒死期或刚死的畜禽。 六、病料的采取，须于动物死后6小时以内进行。 七、死因不明的动物尸体，在解剖前，必须做血液涂片，染色镜检，排除炭疽后方能解剖取样。 八、盛装病料的容器在装病料后应加盖并用胶布或蜡密封，在容器外壁贴上标签，注明病料的名称、采取日期。 九、天气炎热或不能马上送检的用作细菌检验的材料，可用30%甘油缓冲盐水保存；作病毒检验的材料，可用50%甘油缓冲盐水保存，并做到低温保存传递。 十、认真填写好病料送检单。送检单上应详细记录痌料的来源、时间、地点、畜主、送检单位、发病动物的流行病学、症状、病理变化等情况。 十一、在解剖采样过程中必须穿戴工作服和手套，注意个人卫生防护。 十二、病料采集后要及时对尸体进行无害化处理，被污染的场地
要进行彻底消毒。 十三、运输病料时，外包装应印上生物危险标示，样品运送需要专人护送。 十四、病料采集必须严格按照《样品采集和处理规定》进行。 附：样品采集和处理规定 样品的采集和处理规定 1、样品的采集 （1）血样的采集 A、根据动物种类确定采血部位。选用真空管、无菌注射器、 无菌采血瓶、毛细管等采血，采血量须满足试验需要。 B、若需抗凝血，则视实验要求选择抗凝剂。如需血清，则待 血凝固后无菌分离血清并分装于灭菌瓶（管）中。 （2）粪样的采集 将消毒拭子插入动物肛门或泄殖腔中，采取直肠粘液或粪便，放入装有缓冲液的试管或瓶中，尽快送到实验室；若检查消化系统寄生虫，则需采取5-19g新鲜粪便。 （3）子宫阴道内分泌物或外生殖器包皮内分泌物的采集 将消毒好的特制吸管插入子宫颈口或阴道内，向内注射少量营养液或生理盐水，多次揉搓，使液体充分冲洗包皮内壁，收集冲洗液注入无菌容器内。 ⑷实质脏器的采集
实验病料的采集
实验二病料的采集、保存及送检 一、目的掌握被检病料的采取、保存、送检的方法。 二、材料实验动物（鸡）、瓷盘、剪子、镊子、酒精灯、酒精、接种环、载玻片、火柴棒等。 三、病料的采取 1.采取病料的基本原则 (1)采集最适病料理想的病料，应是无菌采取的含病原微生物量高的血液、器官组织或分泌物和排泄物。因此要根据疾病的病性采取合适的病料，如无法估计是何种疾病时，应根据临床症状和病理变化采集病料或全面采取病料。取材时应注意病原微生物感染所致疾病的类型(如呼吸道感染疾病、胃肠道感染疾病、皮肤和粘膜性疾病、败血性疾病等)、病原微生物的侵入部位、病原微生物感染的靶器官等。细菌检验病料应当是采自未经抗菌药物治疗的患病动物，并且应多做几张涂片。 (2)适时采集采集病料的时间一般在疾病流行早期、典型病急性期，此时病原微生物的检出率高；后期由于体内免疫力的产生，病原微生物减少，检测病原微生物比较困难，同时可能出现交叉感染，增加判断的困难性。在采集供抗体测定用的血清时，可适时地采集急性期和恢复期的两份血清样品，一般两份血清的间隔时间为14～2ld。内脏病料的采取，须于动物死后立即进行；夏季最迟不超过4～6h，冬天不超过24h，否则时间过长，由肠内侵入其他细菌，致使尸体腐败，有碍于病原菌的检出。供做切片的样品采取后必须立即投入固定液，否则时间过长，会使细菌和组织细胞死亡、溶解，影响检验结果。有条件做现场培养时，剖开尸体后应进行接种培养，然后采样，最后剖检。 (3)无菌操作采集病料所用的器械及容器要进行严格的消毒：刀、剪、镊子等金属用具可煮沸消毒30min，使用前最好用酒精擦拭，并在火焰上烧一下；器皿（玻制、陶制及珐琅制等）在高压灭菌器或干烤箱内灭菌；软木塞和橡皮塞应高压灭菌；载玻片用2%～5%碳酸钠煮沸消毒5～10min，煮沸后用清水冲洗干净，拭干保存或浸泡于95%酒精中以备使用；注射器和针头放于清洁水中煮沸30min即可，或用一次性注射器。病料采取过程都应该无菌操作，尽量避免杂菌污染。采取一种病料，使用一套器械，或器械酒精擦拭火焰灭菌后再采取另一种病料；一种病料放入一种容器，不可混放。 (4)剖前检查若有突然死亡或病因不明的尸体，须先采取末梢血液制成涂片，镜检，观察是否有炭疽杆菌存在。若疑似炭疽时，不得进行解剖；如需要剖检并获取病料时，应经上级有关部门同意，选择合适的场地，做好严格的防范工作，剖后要进行严格的消毒处理。只有在确定不是炭疽后，方可进行剖检。 2.病料采集的方法 （1）液体材料一般用灭菌棉拭子采取破溃的脓汁、鼻液、阴道分泌物与排泄物。未破的脓肿、胸水、腹水在皮肤表面消毒后，用无菌注射器抽取。 （2）血液无菌采取血液，供病原培养、抗体检测和血液检查之用。体型较大的单蹄和偶蹄类动物少量血样可以从耳背静脉采血；毛皮动物少量采血可通过耳壳外侧静脉采取；鼠类可以通过尾尖、耳背静脉、眼窝内血管采血；兔可从耳背静脉、颈静脉、心脏等处采血；鸟类可以从肘关节内侧的翅静脉、跖部内静脉或心脏采血。 （3）乳汁乳房先用消毒药水洗净（取乳者的手也应事先消毒），并把乳房附近的毛刷湿，最初所挤的3～4股乳汁弃去，然后再采集10ml左右乳汁于灭菌试管中。若仅供显微镜直接染色检查，则可于其中加入0.5%的福尔马林液。
水质采样及样品保存资料
水质采样及样品保存
水质采样作业指导 容器清洗 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ表示四种洗涤方法。如下： Ⅰ：洗涤剂洗一次，自来水洗三次，蒸馏水洗一次。对于采集微生物和生物的采样容器，须经160℃干热灭菌2 h。经灭菌的微生物和生物采样容器必须在两周内使用，否则应重新灭菌。经121℃高压蒸汽灭菌15 min的采样容器，如不立即使用，应于60℃将瓶内冷凝水烘干，两周内使用。细菌检测项目采样时不能用水样冲洗采样容器，不能采混合水样，应单独采样2 h后送实验室分析。Ⅱ：洗涤剂洗一次，自来水洗二次，（1+3）HNO3荡洗一次，自来水洗三次，蒸馏水洗一次。 Ⅲ：洗涤剂洗一次，自来水洗二次，（1+3）HNO3荡洗一次，自来水洗三次，去离子水洗一次。 Ⅳ：铬酸洗液洗一次，自来水洗三次，蒸馏水洗一次。如果采集污水样品可省去用蒸馏水、去离子水清洗的步骤。 水质采样 水质 pH 采集容器：聚乙烯瓶或硬质玻璃瓶。洗涤方法Ⅰ。 采样保存：最好现场测定。最少采集250mL，0～4℃冷藏，可保存6h。 水质色度、浊度、电导率 采集容器：聚乙烯瓶或硬质玻璃瓶。洗涤方法Ⅰ。 采样保存：最少采集250mL，可保存12h。尽量现场测定。
水质悬浮物（SS） 采集容器：聚乙烯瓶或硬质玻璃瓶。洗涤方法Ⅰ。 采样保存：最少采集500mL，4℃暗处冷藏，最长不得超过7d。 注：漂浮或浸没的不均匀固体物质不属于悬浮物质，应从水中除去。不能加入任何保护剂，以防破坏物质在固、液间的分配平衡。 水质酸度、碱度 采集容器：聚乙烯瓶或硬质玻璃瓶。洗涤方法Ⅰ。 采样保存：最少采集500mL，1～5℃暗处冷藏，酸度样品可保存30d，碱度样品可保存12h。 水质化学需氧量（COD Cr） 采集容器：硬质玻璃瓶。洗涤方法Ⅰ。 采样保存：最少采集500mL，用H2SO4酸化，pH≤2。可保存2d。聚乙烯瓶-20℃冷冻可保存1个月，最长六个月。 水质高锰酸盐指数（COD Mn） 采集容器：硬质玻璃瓶。洗涤方法Ⅰ。 采样保存：最少采集500mL，1～5℃暗处冷藏，可保存2d。聚乙烯瓶-20℃冷冻可保存1个月。尽快分析。 水质五日生化需氧量（BOD5） 采集容器：溶解氧瓶。洗涤方法Ⅰ。 采样保存：最少采集250mL， 1～5℃暗处冷藏，可保存12h。聚乙烯瓶-20℃冷冻可保存1个月。 水质溶解氧
病料采集.
病料采集 一、采集原则 1、适时采集 供检疫用的材料因检测目的和项目不同，应尽可能采集到新鲜样品。用于分离病原体的，须在动物病初发热期或出现典型临诊症状时采集；若需制备血清，在动物空腹时采血。从动物尸体采样，无论什么检测项目，都应在动物死后立即采集。若无条件，夏季最好不超过动物死后2h；冬季不超过20h。 2、典型采样 首先要选择典型动物，即未经药物治疗、病状典型的动物，这对细菌性传染病的检查尤其重要。二是选择典型材料，通常采集病原体含量最高的材料。不同疫病的病原体在动物体内及其分泌物、排泄物中的分布、含量不同，即使同一种疫病，在病的不同时期和不同病型中，病原体在体内分布也不同。在采取病料前，对动物可能患某种疫病作出初步诊断，侧重采集该病原体常侵害的部位。 从动物尸体采样，通常采集有病变的组织、器官或病变最明显、最典型的部位。供病理组织切片的样品，应连带部分健康组织。淋巴结、心、肝、脾、肺、肾，不论有无病变，一般均应采取。 3、合理采样 指取样动物的数量和样品的数量要合理。动物群体发病，至少采取5头（只）份动物的病料。每一种样品应有足够的数量，除确保本次实验用量外，以备必要的复检用。对于畜产品，按规定采取足量样品。皮张炭疽检疫时，在每张皮的腿部或腋下边缘部位取样，初检取1g，复检时在同部位取2g。 4、无菌采样 样品采集全过程无菌操作，尤其是供微生物学检查和血清学实验的样品。采样部位、采样用具、盛放样品的容器均需灭菌处理。有些样品，如皮肤上的水泡，采集部位用清水清洗即可，忌用消毒剂消毒。 5、安全采样
在采样过程中，采样人员要注意安全，防止感染；同时防止病原扩散而造成环境污染。 二、供病原学检查材料的采集、处理 1、供微生物学检查材料的采集、处理 ⑴血液大、中动物从颈静脉，需要量少可从尾静脉或耳静脉，一般每头每次10ml；家禽从翅静脉或心脏，每只每次3～5ml。死亡动物从右心房采血。 全血必须加抗凝剂以防凝固。抗凝剂可选用乙二胺四乙酸二钠（EDTA—Na2）、枸橼酸钠、肝素。枸橼酸钠不宜用于病毒血样。采血前，按10ml血液加入5%枸橼酸钠溶液1ml或0.1%肝素1ml或乙二胺四乙酸二钠15～20㎎的比例，把抗凝剂直接加入真空采血管或试管中，让采集的血液立即与抗凝剂混合，密封后外贴标签，送检或冷藏。但冷藏时间不宜太久，以免溶血。 病毒样品，在1ml血样中可加入青霉素和链霉素各500～1000IU，以抑制血源性或在采血过程中污染的细菌。供细菌学检查的血样不可加抗生素。 ⑵分泌物和渗出液采集口腔、鼻腔、喉气管、泄殖腔及阴道分泌物时，将棉棒插入天然孔反复旋转蘸取分泌物，然后将样品端剪下。采集咽、食道分泌物前被检动物禁食12h，大中动物用食道探子从已扩张的口腔伸入咽喉部、食道，反复刮取。乳汁采集前，先清洗乳房并消毒，弃去最初挤出的几把乳汁，然后收集10～20ml做检材。尿液可在动物排尿时采集，亦可利用导尿管采取。取样量据检验目的而定，通常取30～50ml。水泡液、水肿液、关节囊液，胸腹腔渗出液可用注射器抽取，至少采取1ml。脓汁的采集，用棉球蘸取，或用注射器吸取。 ⑶淋巴结、内脏器官、肌肉淋巴结连带周围脂肪整体采集；内脏器官和肌肉，通常取病变最明显的部位，取样大小可酌情而定。采集的淋巴结、内脏器官、肌肉分别置于灭菌容器。 ⑷水泡皮先将病变部清水清洗，剪取新鲜水泡皮3～5g放入灭菌小瓶。 ⑸肠管选取至少6cm肠管，两端结扎，从结扎线外端稍远处剪断，置灭菌玻璃容器或塑料袋中。 ⑹长骨及肋骨整根采集，不要损伤其两端，用5%石炭酸水容液浸透的纱布
畜禽血液样品的采集、制备与保存方法
畜禽血液样品的采集、制备与保存方法 血液不断地在全身流动，参与机体的各种功能活动，对动物的新陈代谢以及维持内环境和保持与外界环境间的平衡起着重要的作用。当血液发生病理变化时，常常会影响全身的组织和器官，而组织和器官的病变又可以引起血液成分的变化，因此，血液的检验在疾病的诊断中起到十分重要的作用；临床检验采用的血液样品分为全血、血清和血浆。全血主要用于血细胞成分的检验，血清和血浆主要用于大部分临床化学检查和免疫学检验。血液样品的采集、制备与保存是重要的前期工作，是保证正确诊断的基本条件。 1.采集部位与方法 畜禽血液样品的采集部位和方法，与种类、检测项目、试验方法及用血量有关，视实际情况而定。 1.1鸡的采血技术 1.1.1翅静脉采血：是常用的采血部位，翅静脉在肘关节腹侧的表面，清晰地暴露于皮肤之下，肉眼可见。采血时先拔去该部位的羽毛，抽血时，动作轻柔缓慢，防止血管塌陷不回流，采血后略移动皮肤轻压即可止血；由于鸡的皮肤游离性大，采血后容易形成血肿。 1.1.2心脏采血：此方法多用于进行尸体剖检前的血液采集检验。将鸡仰卧保定，针头从V型锁骨前端刺入，或者在靠近心脏的胸侧壁刺入；心脏采血过程中，如果操作不慎，易损伤肺脏，更有慎者，引起大出血死亡。 1.1.3颈静脉采血：鸡的左侧颈静脉很细，通常右侧颈静脉采血。在皮肤上的一个无毛的沟正好是右侧颈静脉所处的位置。颈静脉游离性大，皮肤松弛，采血后易于形成血肿。 1.2猪采血技术 1.2.1前腔静脉采血：猪前腔静脉是由左右两侧的颈静脉与腋静脉至第一对肋骨间的胸骨柄汇合形成。采血时，针头刺入部位在与耳根和对侧肩胛骨上缘连线垂直线的胸骨端处，大猪采用站立保定，小猪可以采用仰卧保定法。左侧靠近膈神经，故以右侧采血为宜。 1.2.2耳静脉采血：一般用于体格较大的猪。保定后，耳部消毒灭菌，以手指压迫近心端耳部静脉，使血管努张，针头刺入血管后，动作要轻柔，采血要缓慢，否则血液不回流使静脉瘪陷。 1.3牛的采血技术 1.3.1颈静脉采血：将头向一侧保定，用手指压迫颈静脉沟处，待血管怒张后，于采血部位消毒进针采血。 1.3.2尾静脉采血：采血人员站立牛正后方，将牛尾向上抬起180度，在第一尾锥与第二尾锥之间的尾中线上进针采血。此方法需要人员少，采血速度快，可以****操作。 1.4马、羊的采血技术 马、羊均采用颈静脉采血。方法同牛的颈静脉采血。 1.5犬、猫的采血技术 一般在后肢外侧小隐静脉或前肢内侧皮下静脉采血，采血前由助手保定，在采血部位的近心端扎止血带，待血管怒张后，迅速刺入采血器，松开止血带左手固定针头，采血力度要适当。 2.血液样品的处理 2.1血浆的制备：在采血器内加入适量的抗凝剂，采血后，反复颠倒采血器，使
生活饮用水标准检验方法水样的采集与保存
生活饮用水标准检验方法水样的采集与保存GB/T 5750.2-2006 1范围 本标准规定了生活饮用水及其水源水样的采集、样品保存和采样质量控制的基本原则、措施和要求。 本标准适用于生活饮用水及其水源水样的采集和样品保存。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本规范的条款.，凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准.然而鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注明日期的引用文件.其最新版本适用于本标准。 GB 5749生活饮用水卫生标准 GB/T 12998水质采样技术指导 GB/T 12999水质采样样品的保存和管理技术规定 GB 17051 二次供水设施卫生规范 3采样计划 采样前应根据水质检验目的和任务制定采样计划，内容包括：采样目的、检验指标、采样时间、采样地点、采样方法、采样频率、采样数量、采样容器与清洗、采样体积、样品保存方法、样品标签、现场测定项目、采样质量控制、运输工具和条件等。 4采样容器 4.1应根据待测组分的特性选择合适的采样容器。 4.2容器的材质应化学稳定性强.且不应与水样中组分发生反应，容器壁不应吸收或吸附待测组分。 4.3采样容器应可适应环境温度的变化，抗震性能强。 4.4采样容器的大小、形状和重量应适宜，能严密封口，并容易打开，且易清洗。 4.5应尽量选用细口容器，容器的盖和塞的材料应与容器材料统一。在特殊情况下需用软木塞或橡胶塞时应用稳定的金属箔或聚乙烯薄膜包裹，最好有蜡封。有机物和某呰微生物检测用的样品容器不能用橡胶塞，碱性的液体样品不能用玻璃塞。
病料的采集和运送(严选优质)
病料的采集和运送 （一）、病料采集的注意事项 1．解剖前检查凡发现患畜急性死亡时，绝不能随便解剖。未解剖前，必须由末梢血管采血（或局部解剖）作涂片，检查是否患有炭疽杆菌。操作时应特别注意，勿使血液污染他处，以防止传播和对人体的伤害。当确定不是炭疽时，方可解剖。剖检时，采取有病变的脏器或组织送往实验室，以便证明其病因。 2．采集病料的时间内脏病料的采取，须于患畜禽死后立即进行，最好不超过6h，夏季不超过4h，否则时间过长，由肠内侵入其它细菌，致使尸体腐败，有碍于病原菌的检验。 3．采集器械的消毒刀、剪、镊子等用具可煮沸30min，最好用酒精擦拭，并在火焰上烧一下。器皿在高压灭菌器内或干烤箱内灭菌，或放于0.5％--1％的碳酸氢钠水中煮沸；软木塞或橡皮塞置于0.5％石炭酸溶液中煮沸10min。载玻片应在1％—2％的碳酸氢钠溶液中煮沸10—15min，水洗后，再用清洁纱布擦干，将其保存于酒精、乙醚等分液中。注射器和针头放于清洁水中煮沸30min即可。 4．采集病料的所有手续必须是无菌操作采取一种病料，使用一套器械。并将取下的材料分别置于灭菌的容器中，绝不可将多种病料或多头畜禽的病料混放在一个容器内。病变的检查应在病料采集后进行，以防所采的病料被污染，影响检查结果。 5．需要采取的病料，应按疾病的种类适当选择当难以估计是那种传染病时，应采取有病变的脏器、组织。但心血、肺、脾、肝、肾、淋巴结等，不论有无肉眼可见病变，一般均应采取。 6．病料采集后，如不能立即进行检验，应立即保存于冰箱中。 （二）、病料的采集方法
1．脓汁、渗出液用灭菌注射器无菌抽取未破溃的脓肿深部的脓汁，置于灭菌的细玻璃管中，然后将两端熔封，用棉花包好放于试管中，亦可直接用注射器采取后，放试管中，如系开放的化脓灶或鼻腔时，可用无菌的棉签浸蘸后，放在灭菌试管中。也可直接用接种环经消毒的部位插入，提取病料直接接种在培养基上。 2．淋巴结及内脏将淋巴结、肺、肝、脾、肾等有病变的部位各采取1—2cm2的小方块，分别置于灭菌试管或平皿中。若为供病理组织切片的材料，应将典型病变部分及相连的健康组织一并切取，组织块的大小每边约2cm左右，同时要避免使用金属容器，尤其是当病料供色素检查时，更应注意。此外，若有细菌分离条件，也可首先以烧红的铁片烫烙脏器的表面，用接种环（火焰灭菌后）自烫烙的部位插入组织中缓慢转动接种环，取少量组织或液体，作涂片镜检或接种在培养基上。培养基可根据不同情况而进行选择。一般常用鲜血琼脂平板，普通琼脂平板或营养琼脂平板培养等。 3．血液 （1）血清以血清作为检验材料时，以无菌操作抽取被检病畜禽血液（鸡从心脏或前腔静脉等）约10—20ml或适量，置于灭菌试管中，待血液凝固（约1—2d）析出血清。为了防腐，可于每毫升血液中加入3％--5％的石炭酸溶液1—2滴。 （2）全血采取10ml全血，立即注入盛有3.8％枸橼酸钠溶液1ml的灭菌试管中，搓转混合片刻后即可。 （3）心血对死亡动物采取心血时，通常在右心室采血，先用烧红的膏药筚或铁片烫烙心肌表面，再用灭菌注射器在烫烙处插入，吸取血液，置于无菌试管中。