高三生物一轮复习课时跟踪检测(三十八)生物技术实践第二讲微生物的培养与利用(选修)讲义

课时跟踪检测（三十八）微生物的培养与利用

一、基础小题针对练

1．（2016·张家口检测）下列有关微生物培养与应用的说法，正确的是( )

A．天然培养基是指直接取自自然界不需加工的培养基

B．接种前需对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理C．大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段

D．分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的氮源和碳源

解析：选C 天然培养基是指用天然物质制成的培养基，但也需要加工；实验操作者的双手应消毒，不能灭菌；分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的氮源，不是碳源，需加入不含氮元素的有机物(如葡萄糖)作为碳源。

2．(2016·南阳月考)平板划线法和稀释涂布平板法是接种微生物的两种常用方法，下列描述正确的是( )

A．都要将菌液进行一系列的梯度稀释

B．平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环连续划在固体培养基表面

C．稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基中进行培养

D．都会在培养基表面形成单个的菌落

解析：选D 平板划线法不需要进行梯度稀释，稀释涂布平板法需要将不同稀释度的菌液涂布到固体培养基的表面。平板划线法和稀释涂布平板法都能在培养基表面形成单个的菌落。

3．欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，下列实验操作中不．正确的是( )

A．将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释

B．同一浓度的土壤稀释液应至少涂布3个平板

C．可将未接种的培养基在相同条件下作为对照进行培养

D．用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌

解析：选D 为了获得单个菌落，应将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释；为了使实验效果更好，同一浓度的土壤稀释液至少要涂布3个平板进行重复实验；加入刚果红的培养基可用来筛选纤维素分解菌，筛选分解尿素的细菌一般需在培养基中加入酚红指示剂。

4．(2016·郑州测试)下面是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1、2、3、4、5。下列叙述正确的是( )

A．在五个区域中划线前后都要对接种环和培养基进行灭菌

B．划线操作时完全打开皿盖，划完立即盖上

C．接种时不能划破培养基，否则难以达到分离单菌落的目的

D．第1区和第5区的划线最终要连接起来，以便比较前后的菌落数

解析：选C 在每次划线前后都要对接种环进行灭菌；进行划线操作时，左手将培养皿的皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖；注意接种时不能划破培养基，否则难以达到分离单菌落的目的；第1区和第5区的划线不能相连。

二、高考题型仿真练

5．(2016·济南模拟)下表为某微生物培养基的配方，请回答：

(1)__________培养基。

(2)根据培养基原料，所培养微生物的同化作用类型是________________。

(3)该培养基中的碳源是__________。不论何种培养基，在各成分都溶化后分装前，要进行的是__________。

(4)若用该培养基培养纤维素分解菌，应除去的物质是________________，应加入的物质是__________。

(5)细菌种群进化过程中，起主要作用的变异是______。(填编号)

A．环境条件B．基因重组

C．基因突变D．染色体变异

解析：(1)该培养基中含有凝固剂琼脂，属于固体培养基。该培养基含有抗生素(青霉素)，属于选择培养基。(2)该培养基含有有机碳源——(CH2O)，可见所培养的微生物是异养型生物。(3)不论何种培养基，在各成分都溶化后分装前，要先进行pH调整。(4)若用该培养基培养纤维素分解菌，应除去青霉素和(CH2O)，加入纤维素粉。(5)细菌是原核生物，没有染色体，不会发生染色体变异；细菌不能进行有性生殖，不会发生基因重组，所以细菌可遗传的变异只有基因突变。

答案：(1)固体选择(2)异养型(3)(CH2O) 调整pH (4)青霉素和(CH2O) 纤维素粉(5)C

6．请回答下列有关微生物培养基的问题：

(1)微生物的培养都需要培养基，一般培养基都含有的成分有___________________；

配制固体培养基还需要加入凝固剂______________________________________。

(2)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般流程包括：

计算―→称量―→溶化―→A―→B

上述流程中A代表__________，实验室中这个步骤常用的方法有_________________；流程中B代表________________，该步骤进行的适宜温度是__________°C左右。

(3)鉴定分解尿素的细菌的方法是向以__________________________________

为唯一氮源的培养基中加入________________指示剂，培养某种细菌，如果pH升高，指示剂将变红，说明该种细菌能分解尿素。

(4)与全营养培养基中的菌落相比，选择培养基中菌落数( )

A．多B．少

C．相等D．几乎为零

解析：(1)一般培养基中都应含有水、无机盐、碳源和氮源四种成分。(2)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的流程包括：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板；灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌是实验室中常用的灭菌方法。(4)选择培养基上只能生长特定的微生物，因此该培养基上长出的菌落数目比全营养培养基上长出的菌落数少。

答案：(1)水、碳源、氮源和无机盐琼脂

(2)灭菌灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌倒平板50 (3)尿素酚红(4)B

7．大肠杆菌是与我们日常生活联系非常密切的细菌，请回答有关检测饮用水中大肠杆菌的问题：

(1)检测饮用水中大肠杆菌的含量时，通常将样品进行一系列的梯度稀释，将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，然后记录菌落数量，这种方法称为_________________________________________________________________。

判断下图所示的4个菌落分布图中，不可能是用该方法得到的是__________________。

(2)用上述方法统计样本中菌落数时是否需要设置对照组？________________，其原因是需要判断培养基________________________________，对于固体培养基应采用的检测方法是将________________________的培养基在适宜的温度下放置一段时间，观察培养基上是否有菌落产生。

(3)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行________(填“消毒”或“灭菌”)处理；操作者的双手需要进行清洗和______________；

静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使其内蛋白质变性，还能损伤它的__________的结构。

(4)检测大肠杆菌实验结束后，使用过的培养基及其培养物必须经过______________处理才能丢弃，以防止培养物的扩散。

解析：D中菌落分布情况为利用平板划线法所得。为判断培养基灭菌是否合格，本实验需要设置对照。要判断固体培养基是否被污染，可将未接种的培养基在适宜的温度下培养一段时间，若发现有菌落说明培养基已被污染。消毒是指使用较温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。对人的手不能进行灭菌处理。对培养基和培养器皿要进行灭菌处理，对操作者的双手需要进行清洗和用酒精消毒。

答案：(1)稀释涂布平板法 D (2)需要是否被杂菌污染(灭菌是否合格) 未接种(3)灭菌消毒DNA (4)灭菌

8．(2016·邯郸一模)某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如下图所示。请分析回答下列问题：

(1)培养基中加入化合物A的目的是________________________________________，

这种培养基属于______培养基。

(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的________。实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是________。

(3)在上述实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是______________________。

(4)转为固体培养基时，常采用平板划线的方法进行接种，此过程中所用的接种工具是__________，操作时采用________灭菌的方法。

解析：(1)在选择培养基中加入特定物质，可以筛选出特定的细菌。(2)根据题目所给的培养基配方，“目的菌”生长所需的氮源和碳源只能来自培养基中的化合物A。异养需氧型细菌在培养时需要振荡。(3)获得纯净特定“目的菌”的关键是防止外来杂菌入侵。(4)用平板划线的方法进行接种，接种工具是接种环，操作时一般采用灼烧灭菌。

答案：(1)筛选目的菌选择(2)化合物A 异养需氧型(3)防止外来杂菌入侵(4)接种环灼烧

9．金黄色葡萄球菌是一种具有高度耐盐性的微生物，可引起人类肺炎、肠炎等疾病。金黄色葡萄球菌在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。下图为定性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程，请回答相关问题：

(1)按细胞结构分类，金黄色葡萄球菌属于______生物，从培养过程分析，金黄色葡萄球菌可进行______呼吸。

(2)7.5% NaCl肉汤培养基为微生物提供的营养成分包括________________________，用7.5% NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是________________________。

(3)操作中在血平板上的接种方法是________，接种操作前后需要对接种工具进行______灭菌。

(4)在制备血平板时需将pH调节至________(填“微酸性”或“微碱性”)后灭菌，待培养基______后，再加入适量血液。按培养基功能分类，血平板属于________培养基。

(5)经多次规范操作、重复实验，血平板上均出现______的菌落，初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌，但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带，因此，要对本操作进行完善，完善的方案是_____________________________________________________。

解析：(1)金黄色葡萄球菌是一种细菌，属于原核生物。培养过程无密闭处理，故它进行有氧呼吸。(2)7.5% NaCl肉汤培养基可为微生物提供生长所需要的碳源、氮源、水和无机盐。用7.5% NaCl肉汤培养基进行选择培养是为了增加高度耐盐性的金黄色葡萄球菌的数量。(3)图示用的接种工具是接种环，说明在血平板上接种的方法是平板划线法。接种工具在接种前后都要进行灭菌处理。(4)金黄色葡萄球菌的生长环境为弱碱性，培养基在灭菌前要先调节pH，因金黄色葡萄球菌能破坏红细胞，使其褪色，血平板上出现周围存在透明圈的菌落，说明有金黄色葡萄球菌，故血平板是鉴别培养基。(5)为增强实验结论的严谨性，应增加空白对照组。

答案：(1)原核有氧

(2)碳源、氮源、水和无机盐增加金黄色葡萄球菌的数量

(3)平板划线法灼烧

(4)微碱性冷却鉴别

(5)周围存在透明圈设置不加鲜牛奶其他操作均相同的对照组

10．(2016·云南名校统考)下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列相关问题：

(1)大肠杆菌的同化类型为________，从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于________。

(2)在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是____________________，因此需对培养基和培养皿进行________(填“消毒”或“灭菌”)，操作者的双手需要进行清洗和________。空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使____________，还能破坏DNA的结构。

(3)根据用途划分，该培养基属于________(填“选择”或“鉴别”)培养基，若要分离能分解尿素的细菌需将培养基中________换成________，若要鉴定分解尿素的细菌还需将伊红美蓝换成____________。

(4)培养大肠杆菌时，常用的接种方法是________和__________。通过上述方法可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，称为________。

(5)使用以下微生物发酵生产特定产物时，所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是________(多选)。

A．制作果酒B．由果酒制作果醋

C．制作泡菜D．制作腐乳

解析：该培养基含有显色剂(伊红美蓝)，可使大肠杆菌菌落呈现金属光泽，因此属于鉴别培养基。若要分离能分解尿素的细菌，应以尿素为唯一氮源，因此应将蛋白胨换成尿素。若要鉴别尿素分解菌，应在培养基中加入酚红指示剂。制作果酒、果醋、泡菜和腐乳利用的微生物分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌和毛霉，其中醋酸菌、乳酸菌与大肠杆菌都属于原核生物，酵母菌和毛霉都属于真核生物。

答案：(1)异养型分解者(2)防止外来杂菌的入侵灭菌消毒蛋白质变性(3)鉴别蛋白胨尿素酚红指示剂(4)平板划线法稀释涂布平板法菌落(5)BC