超高效液相色谱_电喷雾串联质谱法测定食品中胺苯磺隆农药残留

收稿日期:2008212208 修回日期:2009211230基金项目:山西省农业攻关项目(No.2007031075)

通讯作者:林勤保,男,博士,副教授,研究方向:食品化学与食品分析.

第26卷第3期Vol.26　No.3分析科学学报

J OU RNAL OF ANAL YTICAL SCIENCE 2010年6月J une 2010

DOI 编码:10.3969/j.issn.100626144.2010.03.008

超高效液相色谱2电喷雾串联质谱法测定

食品中胺苯磺隆农药残留

田　苗1,宋　欢2,薛园园3,林勤保33,李小梅3

(1.辽宁出入境检验检疫局,辽宁大连116001;2.山西出入境检验检疫局,山西太原030024;3.山西大学应用化学研究所,山西太原030006)

摘　要:采用超高效液相色谱2电喷雾串联四极杆质谱(U PL C 2ESI 2MS 2MS ),在多反应

监测(MRM )模式下建立了测定9种基质中胺苯磺隆农药残留的定性定量分析方法。选择苹果、菠菜、葱、小麦、黄豆、牛肉、鸡肝、脂肪、牛奶为空白样品基质,样品使用有机溶剂超声提取,凝胶渗透色谱(GPC )和固相萃取(SPE )净化。该方法简便、快速、灵敏,方法的线性范围、回收率、精密度和检出限均符合残留分析的要求。关键词:超高效液相色谱2电喷雾串联质谱;胺苯磺隆;农药残留

中图分类号:O657.63 文献标识码:A 文章编号:100626144(2010)0320284205

胺苯磺隆,又名菜王星、金星、油磺隆,属于磺酰脲类除草剂,是美国杜邦公司20世纪80年代开发的超高效除草剂,主要用于防治油菜菜田的阔叶杂草[1]。胺苯磺隆具有杀草谱广,对单、双子叶杂草都具有防效高,应用成本低等优点[2]。随着该除草剂的大量使用,其在农作物、环境中的残留及其对人类健康和环境造成的毒害越来越为人们所关注。所以建立食品中胺苯磺隆的检测方法,可以进一步完善国家食品安全管理体系,也为国家应对国际贸易中的残留限量要求提供技术支持,具有重大的意义。磺酰脲类除草剂残留的检测方法有高效液相色谱(HPL C )法[1,327]、高效液相色谱/质谱联用(H PL C 2MS )法[8213]和毛细管电泳法[14215]。文献中对胺苯磺隆的测定方法报道较少,仅限胺苯磺隆产品的高效液

相色谱分析方法。本文采用超高效液相色谱2电喷雾串联四极杆质谱(U PL C 2ESI 2MS 2MS )法,在多反应监测(MRM )模式下建立了测定9种基质中胺苯磺隆农药残留的定性定量分析方法。该方法简便、快速、净化效果好,灵敏度高。

1　实验部分

1.1　仪器与试剂

ACQU IT Y Ult ra Performance L C TM 超高效液相色谱仪,Quatt ro Premier 串联四极杆质谱仪(美国,Waters 公司);Heidolp h Laborata 40032cont rol 旋转蒸发仪(德国,Heidolp h 公司);凝胶渗透色谱仪(美

国,J 2Scientifig 公司);Reacti 2Therm TM Heating Module 氮吹仪(美国,Pierce 公司);KQ 2300E 超声波清洗器(中国,昆山超声仪器有限公司);Hypersep retain PEP 固相萃取小柱(美国,Thermo scientific 公司)。乙腈、甲醇(美国,Fisher 公司),甲酸、乙酸乙酯、环己烷(中国,天津市科密欧化学试剂有限公司)均为色谱纯;无水硫酸钠(天津市化学试剂厂)、无水硫酸镁(国药集团化学试剂有限公司)、氯化钠(天津市科密欧化学试剂有限公司)均为分析纯;胺苯磺隆标品(德国,Dr.Ehrenstorfer 公司)。实验用水均为超纯水。

第3期分析科学学报第26卷

1.2　样品提取方法

分别称取5g 的各种样品(脂肪2g ,牛奶5mL )于50mL 的离心管中,菠菜、苹果、葱加入25mL 乙腈和1.5g 氯化钠;黄豆、小麦、脂肪,加入25mL 乙睛+丙酮(9+1);鸡肝加入25mL 正乙烷+丙酮(2+1);牛肉加25mL 环乙烷+乙酸乙酯(1+1);牛奶加25mL 乙腈、4g 无水硫酸镁和1g 氧化钠,分别超声(功率为800W )提取20min ,离心,将各上清液在加入适量的无水硫酸钠的漏斗中过滤,其残渣按上面步骤重复提取一次,两次的滤液收集到旋蒸瓶中,在旋转蒸发仪上旋转蒸发至干。1.3　样品净化方法

首先用50μg/mL 的标准样品,在凝胶色谱净化系统上确定收集时间,小麦、黄豆、牛肉、鸡肝、脂肪和牛奶六种基质的净化效果很好,凝胶色谱图见图1。凝胶渗透色谱条件:凝胶柱:Bio 2Beads S 2X 3,Express TM Co 2lumn ;流动相:乙酸乙酯2环己烷(1+1);柱流速:4.7mL/min ;进样量:5mL ;收集时间:7.5～12.5min 。对于苹果、菠菜、葱三种水果蔬菜类的基质,在胺苯磺隆出峰的位置有一个大的干扰。固相萃取法是一种基于液相色谱分离机制的样品制备方法,已广泛应用于农药残留检测[16]。故本实验采用了Hyper 2sep retain PEP 固相萃取小柱净化,排除了干扰。洗脱曲线见图2。净化步骤为:将提取浓缩后的残渣加入10mL 水溶解,注入已经活化好的固相萃取小柱,弃去流出液。注入10mL 甲醇+水溶液(1+4)淋洗,再用18mL

甲醇洗脱,弃去前3mL 洗脱液,收集其余洗脱液。

图1　胺苯磺隆在凝胶渗透色谱上的流出曲线Fig.1　Stream curve of gel chrom atogram of ethametsulfuron 2methyl 图2　胺苯磺隆在PEP 柱上的洗脱曲线

Fig.2　E lution curve of ethametsulfuron 2methyl on PEP column

1.4　色谱与质谱条件

图3　胺苯磺隆多反应监测(MRM)色谱图Fig.3　Multiple reaction monitoring chrom ato 2gram of ethametsulfuron 2methyl

液相色谱系统:Waters ACQU IT Y U PL C 系统;色谱柱:ACQU IT Y U PL C B EH C 8(50×2.1mm ,1.7μm );柱温:35℃;进样体积:10μL ;流速:200μL/min ;流动相:A (含0.1%甲酸水溶液),B (甲醇);梯度洗脱:0～10min/90%～60%A ,10%～40%B ;10～10.5min/60%～90%A ,40%～10%B ;10.5～11.5min/90%A ,10%B 。

质谱系统:Waters Quatt ro Premier XE ;离子化模式:ESI +;毛细管电压:3.0kV ;锥孔电压:30V ;去溶剂气温度:氮气350℃;锥孔反吹气:氮气15L/h ;去溶剂气流速:氮气500L/h ;离子源温度:110℃;数据采集:多反应检测(MRM );碰撞气体:氩气3.0×105Pa ;定量离子:411.1>196.1碰撞能量25eV ;定性离子:411.1>170.1碰撞能量25eV 。该条件下,胺苯磺隆的MRM 图见图3。

2　结果与讨论

2.1　基质效应的考察

电喷雾电离离子源(ESI )容易受样品基质的影响,本实验考查了不同样品的基质效应,以及不同基质离子比的变化,发现不同基质对于离子化的抑制有所不同,不同基质离子比也略有变化,因此标准工作液

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要使用基质空白溶液配制,以确保定性和定量的准确性。

2.2　色谱条件的优化2.2.1　色谱条件的建立　在液质联用技术的应用中,流动相的选择除考虑色谱分离效果外,必须考虑组分进入质谱前离子化效率,以便获得最佳的分辨率和最高的灵敏度。对胺苯磺隆进行质谱全扫描发现,在电喷雾离子源ESI +方式下生成[M +H ]+离子。用水和乙腈作为流动相,离子化效率较差;用10mmol/L 乙酸铵和乙腈做流动相,峰形不太理想;改用0.1%甲酸和乙腈作为流动相,离子化效果较好,且峰形尖锐对称。2.2.2　进样前样品定容溶剂的选择　样品的定容溶液除考虑溶解能力外,对离子化的效果及色谱峰形都会有影响。分别选用乙腈、甲醇、乙腈/水和甲醇/0.1%甲酸水溶液作为定容溶液进行试验,发现甲醇/0.1%甲酸水溶液效果最好。2.3　质谱条件的优化

通过对胺苯磺隆结构的分析,可能在C —N 和C —O 处断裂(图4),产生196、170和142的子离子,胺苯磺隆子离子扫描图见图5。在ESI +模式下胺苯磺隆形成母离子分子离子峰[M +H ]+质荷比411.1,在确定母离子的基础上,经采用子离子的扫模式,确定(m/z )411.1>196.1和411.1>170.1作为定性和定量离子。结构分析结果和实验结果吻合。

图4　胺苯磺隆的结构Fig.4　Structure of ethametsulfuron 2methyl 图5　胺苯磺隆子离子扫描图

Fig.5　Product ion scan for ethametsulfuron 2methyl

2.4　线性范围与检出限

在本方法所确定的实验条件下,分别用苹果、菠菜、葱、小麦、黄豆、牛肉、鸡肝和牛奶的空白基质溶液配制成5、10、20、50、100ng/mL 的系列标准溶液进行测定。以峰面积(Y )对相应胺苯磺隆的浓度(X )作图,结果表明,对于每种基质,待测化合物浓度与对应的峰面积呈现良好的线性关系(表1)。以3倍信噪比(S/N =3)为检出限,10倍信噪比(S/N =10)为定量限,计算该方法中胺苯磺隆的检出限以及定量限,列于表1。

表1　线性范围、回归方程及检出限与定量限

T able 1　Linear range ,regression equ ation ,limits of detection and limits of qu antity

Substance Linear range

(μg/kg )Correlation

coefficient Linear equation Limit of detection (μg/kg )Limit of quantity

(μg/kg )

Wheat 5～1000.9986Y =561.035x -351.5450.060.21Apple 5～1000.9972Y =279.514x +442.8170.080.27Spinach 5～1000.9988Y =437.325x -562.890.130.43Shallot 5～1000.9987Y =324.783x -170.3910.010.03Bean 5～1000.9967Y =552.013x -616.1930.170.57Beef 5～1000.9982Y =573.884x +299.1780.020.07Chicken liver

5～1000.9961Y =591.641x -914.520.090.30Milk 5～1000.9917Y =633.974x -846.0560.160.53Fat

5～100

0.9963

Y =117.744x -210.28

0.22

0.73

2.5　方法的室内回收率和精密度

本方法的回收率和精密度实验,以不含胺苯磺隆残留的苹果、菠菜、葱、小麦、黄豆、牛肉、鸡肝、脂肪和

牛奶为空白样品基质,进行10μg/kg 、20μg/kg 和50μg/kg 三个浓度水平的添加回收试验,每个浓度水6

第3期分析科学学报第26卷平进行十次重复实验,测得胺苯磺隆的回收率和精密度列于表2。

表2　回收实验结果(n=10)

T able2　R ecovery for real samples(n=10)

Sample Spike(μg/kg)

Average

recovery(%)

RSD(%)Sample Spike(μg/kg)

Average

recovery(%)

RSD(%)

1086.24 4.561088.46 4.95 Spinach2093.67 4.26Chicken liver2085.36 4.36 5083.57 2.985088.15 4.79

1082.87 3.801087.50 4.65 Shallot2086.04 6.00Beef2085.75 5.25 5087.09 5.075086.23 4.35

1091.36 4.911085.02 4.27 Apple2086.36 3.43Fat2085.29 3.70 5085.78 5.565082.60 1.74

1086.40 4.041087.10 4.69 Wheat2083.76 6.31Milk2088.40 4.56 5086.02 5.465083.72 2.68

1084.51 5.10

Bean2087.99 5.03

5084.60 5.36

3　结论

本法用有机溶剂超声提取,凝胶渗透色谱(GPC)和固相萃取(SPE)净化,有效去除样品中干扰,方法简便、快速、灵敏,可同时用于测定9种基质中胺苯磺隆农药残留。

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YU Zhao2qi(余朝琦).Journal of Analytical Science(分析科学学报)[J],2007,23(6):723.

Determination of Ethametsulf uron2methyl in Food by

Ultra Performance Liquid Chromatography T andem

Mass Spectrometry

TIAN Miao1,SON G Huan2,XU E Yuan2yuan3,L IN Qin2bao33,L I Xiao2mei3

(1.L i aoni ng B or der I ns pections and Quaranti ne B ureau,D ali an116001;

2.S hanx i B or der I ns pections and Quaranti ne B ureau,T ai y uan030024;

3.I nstit ute of A p plied Chemist ry,S han x i U ni versit y,T ai y uan030006)

Abstract:A met hod has been developed for t he determination of Et hamet sulf uron2met hyl in9samples including apple,spinach,shallot,wheat,bean,beef,chicken liver,fat and milk by ultra performance liquid chromatograp hy combined wit h tandem mass spect romet ry(U PL C2MS2MS).Samples were extracted wit h organic reagent by ult rasonic and p urified t hrough an gel permeation chromatograp hy (GPC)and solid p hase ext raction.The result s indicated t hat t he developed met hod is easier,faster,more sensitive and has better p urification ability.The linear range,recovery,precision and detection limit can meet t he requirement of residue analysis.

K eyw ords:U PL C2MS2MS;Et hamet sulf uron2met hyl;Pesticide residue

仪器信息网喜迎第100万个人注册用户

2010年5月12日,仪器信息网(www.inst https://www.360docs.net/doc/9e11381787.html,)迎来了第100万个人注册用户: zhangyong0505。对于仪器信息网来说,100万不仅仅是个数字,它也是一个历史性的时刻,它代表着网站被更多业内人士所接受和喜爱。

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液相色谱-串联质谱法

消毒产品中丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星测定?液相色谱-串联质谱法 Determination of clobetasol propionate and levofloxacin hydrochloride in disinfection product - LC-MS-MS method 1 范围本方法规定了膏霜类消毒产品中丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星残留量液相色谱-串联质谱测定方法。本方法适用于膏霜类消毒产品中丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星残留量的测定。取样量为0.1g时，本方法对丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星的检出限见表1。表1 丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星的检出限、保留时间和特征离子中文名称英文名称检出限（μg/g）保留时间（min）特征离子(m/z) 丙酸氯倍他索Clobetasol propionate 0.009 7.83 467.0/355.2/373.4 盐酸左氧氟沙星Levofloxacin hydrochloride 0.06 1.11 362.0/260.9/318.2 2 规范性引用文件 3 原理试样中丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星用甲醇提取，提取液经0.45μm滤膜过滤，用C18柱分离后，用液相色谱-串联质谱仪测定，正离子扫描，离子对定性，峰面积定量。 4 试剂和材料除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为不含有机物的纯水，纯水中干扰物的浓度需低于方法中待测物的检出限。 4.1甲醇：农药残留级。 4.2乙腈：农药残留级。 4.3甲酸：分析纯。

4.4标准品：丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星均购自中国药品生物制品检定所，纯度≥99.8%。 4.5标准溶液：准确称取丙酸氯倍他索适量，用乙腈－水（1：1）配制成100μg/mL 的标准贮备液。准确称取盐酸左氧氟沙星适量，用纯水配制成100μg/mL的标准贮备液。准确量取上述标准贮备溶液适量，用乙腈稀释配制成浓度为10.0μg/mL 的混合标准中间溶液，将标准中间溶液转移到安瓿瓶中于4 C保存。临用前，再根据需要用甲醇配制成不同浓度的标准使用溶液。 4.6甲酸溶液(0.2%，v/v)：量取2mL甲酸，用纯水定容至1000mL。 4.7 0.45μm滤膜。 5 仪器 5.1 液相色谱-串联质谱联用仪：HP1100高效液相色谱仪(Agilent) - API 4000质谱仪(Applied Biosystems) ，电喷雾离子化源(ESIMS，NI/PI模式)。 5.2 分析天平：感量0.1mg和0.001g。 5.3实验室纯水机：Barnstead纯水机。 5.4涡旋振荡器：Scientific Industries 涡旋振荡器。 5.5 具塞试管：10mL。 6 试样的制备与保存 6.1 试样的制备取有代表性样品5g，搅拌均匀，制成实验室样品。 6.2 试样保存制备好的试样置于室温保存。 7 测定步骤 7.1样品前处理称取0.1g~0.2g样品(精确到0.001 g) ，置于10mL试管中，加入3.00mL甲醇溶液，涡旋振摇使样品分散后，超声振荡10min。静置，吸取上清液经滤膜（4.7）过滤后，供液相色谱-串联质谱测定。

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浅析电喷雾质谱仪中的电喷雾系统王化斌刘钟栋郑隆钰卢奎 (郑州工程学院,郑州 450052) 曹书霞 (郑州大学,郑州 450052) 刘艳 (清华大学,北京 100084) 摘要:本文主要介绍了电喷雾质谱仪中的电喷雾部分的基本组成及基本原理。主要包括电喷雾的过程、喷雾源、气相离子的选择以及在电喷雾系统中发生的相关气相化学反应。最后介绍了电喷雾质谱的优缺点。关键词:电喷雾,电喷雾质谱仪 The Basic Construction and Principles of the Electro_spray System in Electro_spray Mass Spectrometry Wang Huabin,Liu Zhongdong,Zheng Longyu,Lu Kui (Zhengzhou Institute of Technology,Zhengzhou 450052) Cao Shuxia (Zhengzhou University,Zhengzhou 450052) Liu Yan (Tsinghua University,Beijing 100084) Abstract:This article mainly introduced the basic construction and principles of the electro_spray sys tem of electro_spray mass spectrometry including the processes of electro_spraying,sampling gas phase ions and the accompanying chemical reactions and last the authors gave a roughly summary of the electro_spray mass spectrometry s advantages and disadvantages. Key words:Electro_spray,Electro_spray mass spectrometry 前言电喷雾作为一种产生气相离子的方法是由Dole和他的合作者们于1968年提出的,在1973年,Dole等人提出将电喷雾与传统质谱仪联用,而 95

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2015年版药典高效液相色谱法、质谱法.doc

2015 年版药典高效液相色谱法、质谱法

2015 版药典 --- 高效液相色谱法、质谱法 0512 高效液相色谱法高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱，对供试品进行分离测定的色谱方法。注入的供试品，由流动相带入色谱柱内，各组分在柱内被分离，并进入检测器检测，由积分仪或数据处理系统记录和处理色谱信号。 1.对仪器的一般要求和色谱条件高效液相色谱仪由高压输液泵、进样器、色谱柱、检测器、积分仪或数据处理系统组成。色谱柱内径一般为 3.9 ～ 4.6mm，填充剂粒径为 3～lOμm。超高效液相色谱仪是适应小粒径（约 2μm）填充剂的耐超高压、小进样量、低死体积、高灵敏度检测的高效液相色谱仪。（1）色谱柱反相色谱柱：以键合非极性基团的载体为填充剂填充而成的色谱柱。常见的载体有硅胶、聚合物复合硅胶和聚合物等；常用的填充剂有十八烷基硅烷键合硅胶、辛基硅烷键合硅胶和苯基键合硅胶等。正相色谱柱：用硅胶填充剂，或键合极性基团的硅胶填充而成的色谱柱。常见的填充剂有硅胶、氨基键合硅胶和氰基键合硅胶等。氨基键合硅胶和氰基键合硅胶也可用作反相色谱。离子交换色谱柱：用离子交换填充剂填充而成的色谱柱。有阳离子交换色谱柱和阴离子交换色谱柱。手性分离色谱柱：用手性填充剂填充而成的色谱柱。色谱柱的内径与长度，填充剂的形状、粒径与粒径分布、孔径、表面积、键合基团的表面覆盖度、载体表面基团残留量，填充的致密与均匀程度等均影响色谱柱的性能，应根据被分离物质的性质来选择合适的色谱柱。温度会影响分离效果，品种正文中未指明色谱柱温度时系指室温，应注意室温变化的影响。为改善分离效果可适当提高色谱柱的温度，但一般不宜超过 60℃。残余硅羟基未封闭的硅胶色谱柱，流动相 pH 值一般应在 2～8 之间。残余硅羟基已封闭的硅胶、聚合物复合硅胶或聚合物色谱柱可耐受更广泛 pH值的流动相，适合于 pH 值小于 2 或大于 8 的流动相。（2）检测器最常用的检测器为紫外 - 可见分光检测器，包括二极管阵列检测器，其他常见的检测器有荧光检测器、蒸发光散射检测器、示差折光检测器、电化学检测器和质谱检测器等。紫外- 可见分光检测器、荧光检测器、电化学检测器为选择性检测器，其响应值不仅与被测物质的量有关，还与其结构有关；蒸发光散射检测器和示差折光检测器为通用检测器，对所有物质均有响应，结构相似的物质在蒸发光散射检测器的响应值几乎仅与被测物质的量有关。紫外 - 可见分光检测器、荧光检测器、电化学检测器和示差折光检测器的响应值与被测物质的量在一定范围内呈线性关系，但蒸发光散射检测器的响应值与被测物质的量通常呈指数关系，一般需经对数转换。不同的检测器，对流动相的要求不同。紫外 - 可见分光检测器所用流动相应符合紫外 - 可见分光光度法（通则 0401）项下对溶剂的要求；采用低波长检测时，还应考虑有机溶剂的截止使用波长，并选用色谱级有机溶剂。蒸发光散射检测器和质谱检测器不得使用含不挥发性盐的流动相。（3）流动相反相色谱系统的流动相常用甲醇 - 水系统和乙腈 - 水系统，用紫外末端波长检测时，宜选用乙腈 - 水系统。流动相中应尽可能不用缓冲盐，如需用时，应尽可能使用低浓度缓冲盐。用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱时，流动相中有机溶剂一般不低于 5%，否则易导致柱效下降、色谱系统不稳定。

液相色谱串联质谱的小知识

一、开机 water 2695/micromass zq4000: 开机步骤 1. 分别打开质谱、液相色谱和计算机电源，此时质谱主机内置的CPU会通过网线与计算机主机建立通讯联系，这个时间大约需要1至2分钟。 2. 等液相色谱通过自检后，进入Idle状态，依照液相色谱操作程序，依次进行操作。（具体根据液相色谱不同型号来执行，下面以2695为例）。 a.打开脱气机 (Degasser On)。 b.湿灌注(Wet Prime)。 c.Purge Injector。 d.平衡色谱柱。 3.双击桌面上的 MassLynx 4.0图标进入质谱软件。 4.检查机械泵的油的状态（每星期），如果发现浑浊、缺油等状况，或者已经累积运行超过3000小时，请及时更换机械泵油。 5.点击质谱调谐图标（MS Tune）进入质谱调谐窗口。 6.选择菜单“Options –Pump”，这时机械泵将开始工作，同时分子涡轮泵会开始抽真空。几分钟后，ZQ就会达到真空要求，ZQ前面板右上角的状态灯“Vacuum”将变绿。 7.点击真空状态图标，检查真空规的状态，以确认真空达到要求。 8. 确认氮气气源输出已经打开，气体输出压力为90 psi。 9.设置源温度（Source Temp）到目标温度。关机 1．点击质谱调谐图标进入调谐窗口。 2.点击Standby 让MS 进入待机状态时，这时状态灯会由绿变红，这一过程是关质谱高电压的过程。 3．停止液相色谱流速，如果还需要冲洗色谱柱，可以将液相色谱管路从质谱移开到废液瓶。4．等脱溶剂气温度（ESI）或APCI探头温度降到常温，点击气体图标关闭氮气。 5．逆时针方向拧开机械泵上的Gas Ballast 阀，运行20分钟后关闭（镇气）。 a) 对于ESI源，至少每星期做一次。 b) 对于APCI源，每天做一次。 6．再次确认机械泵的Ballast阀是否已经关闭。 7．选择Option / Vent，这时质谱开始泄真空，ZQ 前面板的状态灯“Vacuum”开始闪烁，几分钟后机械泵会停止运行，这时可以关闭质谱电源。 FINNIGEN DECA 开关机及校正流程—— 1开机前准备事项（1）确保质谱总电源开关（白色开关）及主板电源开关（黑色开关）处于关闭状态（O）；（2）检查真空泵油液面，确保泵内油页面处于标定的上下两线之间；（3）查看离子源洁净程度，ESI源查看喷口是否有固体析出，毛细管口是否完好；APCI喷口是否有积液；（4）气体压力，打开高纯氮气钢瓶总阀，调节出口压力调至0.65MPa，打开高纯氦气钢瓶总阀,调节出口压力调至0.25Mpa; （5）检查壳气及辅助气接口连接紧固，松开液相管路与离子源的接口；（6）开启动力电源，电压稳定，正常；

液相色谱-质谱联用(LC-MS)

液相色谱-质谱联用(LC-MS) LCMS分别的含义是：L液相C色谱M质谱S分离（友情赠送：G是气相^_^） LC-MS/MS就是液相色谱质谱/质谱联用 MS/MS是质谱-质谱联用（通常我们称为串联质谱，二维质谱法，序贯质谱等） LC-MS/MS与LC-MS比较，M（质谱）分离的步骤是串联的，不是单一的。色谱法也叫层析法，它是一种高效能的物理分离技术，将它用于分析化学并配合适当的检测手段，就成为色谱分析法。色谱法的最早应用是用于分离植物色素，其方法是这样的：在一玻璃管中放入碳酸钙，将含有植物色素（植物叶的提取液）的石油醚倒入管中。此时，玻璃管的上端立即出现几种颜色的混合谱带。然后用纯石油醚冲洗，随着石油醚的加入，谱带不断地向下移动，并逐渐分开成几个不同颜色的谱带，继续冲洗就可分别接得各种颜色的色素，并可分别进行鉴定。色谱法也由此而得名。现在的色谱法早已不局限于色素的分离，其方法也早已得到了极大的发展，但其分离的原理仍然是一样的。我们仍然叫它色谱分析。一、色谱分离基本原理：由以上方法可知，在色谱法中存在两相，一相是固定不动的，我们把它叫做固定相；另一相则不断流过固定相，我们把它叫做流动相。色谱法的分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的。使用外力使含有样品的流动相（气体、液体）通过一固定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。当流动相中携带的混合物流经固定相时，混合物中的各组分与固定相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中先后流出。与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。二、色谱分类方法：色谱分析法有很多种类，从不同的角度出发可以有不同的分类方法。从两相的状态分类：

生物质谱技术

生命科学被誉为２１世纪的最前沿科学之一，随着人类第一张基因序列草图的完成和发展，生命科学的研究也将进入一个崭新的后基因组学，即蛋白质组学时代。正如基因草图的提前绘制得益于大规模全自动毛细管测序技术一样，后基因组研究也将会借助于现代生物质谱技术等得到迅猛发展。本文拟简述生物质谱技术及其在生命科学领域研究中的应用。１．质谱技术质谱（ＭａｓｓＳＰｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ）是带电原子、分子或分子碎片按质荷比（或质量）的大小顺序排列的图谱。质谱仪是一类能使物质粒子高化成离子并通过适当的电场、磁场将它们按空间位置、时间先后或者轨道稳定与否实现质荷比分离，并检测强度后进行物质分析的仪器。质谱仪主要由分析系统、电学系统和真空系统组成。质谱分析的基本原理用于分析的样品分子（或原子）在离子源中离化成具有不同质量的单电行分子离子和碎片离子，这些单电荷离子在加速电场中获得相同的动能并形成一束离子，进入由电场和磁场组成的分析器，离子束中速度较慢的离子通过电场后偏转大，速度快的偏转小；在磁场中离子发生角速度矢量相反的偏转，即速度慢的离子依然偏转大，速度快的偏转小；当两个场的偏转作用彼此补偿时，它们的轨道便相交于一点。与此同时，在磁场中还能发生质量的分离，这样就使具有同一质荷比而速度不同的离子聚焦在同一点上，不同质荷比的离子聚焦在不同的点上，其焦面接近于平面，在此处用检测系统进行检测即可得到不同质荷比的谱线，即质谱。通过质谱分析，我们可以获得分析样品的分子量、分子式、分子中同位素构成和分子结构等多方面的信息。质谱技术的发展质谱的开发历史要追溯到２０世纪初Ｊ．Ｊ．Ｔｈｏｍｓｏｎ创制的抛物线质谱装置，１９１９年Ａｓｔｏｎ制成了第一台速度聚焦型质谱仪，成为了质谱发展史上的里程碑。

高效液相色谱-串联质谱法

附件面膜类化妆品中氟轻松检测方法（高效液相色谱-串联质谱法） 1范围本方法规定了面膜类化妆品中氟轻松的高效液相色谱-串联质谱测定方法。本方法适用于面膜类化妆品中氟轻松的定性定量测定。 2方法提要面膜类化妆品用饱和氯化钠溶液分散，用乙腈从分散液中提取氟轻松，用亚铁氰化钾和乙酸锌沉淀提取液中大分子基质，经固相萃取小柱净化，用高效液相色谱仪分离，质谱检测器检测，采用保留时间和特征离子对丰度比定性，以待测物质相对应离子峰面积定量，以标准曲线法计算含量。本方法的检出限为0.03 μg/g，定量限为0.05 μg/g。 3试剂和材料除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯或以上规格，水为纯化水。 3.1甲醇：色谱纯。 3.2乙腈：色谱纯。 3.3冰醋酸：优级纯。 3.4饱和氯化钠溶液。 3.5 10%亚铁氰化钾溶液：称取115 g亚铁氰化钾K4Fe(CN)6·3H2O固体，

用水溶解定容至1000 mL。 3.6 20%乙酸锌溶液：称取239 g乙酸锌C4H6O4Zn·2H2O固体，用水溶解定容至1000 mL。 3.7Oasis HLB固相萃取小柱或相当者：60 mg，3 mL。 3.8 标准物质：氟轻松，纯度不小于99.0%；标准物质的分子式、相对分子质量、CAS登录号、化学结构图参见附录A。 3.9 标准储备液（ρ=1g/L）：准确称取氟轻松标准物质（3.8）10mg，精确到0.01 mg，置于10 mL量瓶中，用甲醇溶解并定容，于－18℃下冷冻保存。 3.10 标准工作溶液：临用时，取标准储备液（3.9）适量，用乙腈稀释成0.05μg/mL、0.10μg/mL、0.20μg/mL、0.40μg/mL、0.80μg/mL系列浓度的标准工作溶液。 4仪器和设备 4.1 高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪（ESI源）。 4.2 分析天平：感量0.0001g；0.00001g。 4.3 涡旋混合器。 4.4离心机：转速5000r/min，容量10mL；50mL。 4.5 固相萃取装置。 5分析步骤 5.1样品处理 5.1.1提取称取样品（带有载体的面膜，去除载体后取样）0.2 g，精确至0.0001 g，置15 mL具塞离心管中，加入3 mL饱和氯化钠溶液（3.4），于涡旋混合器上混合使样品分散，准确加入2 mL乙腈，充分涡旋提取2 min，以

高效液相色谱质谱联用技术的应用

高效液相色谱质谱联用技术的应用高效液相色谱(HPLC或LC)是以液体溶剂作为流动相的色谱技术，一般在室温下操作，可以直接分析不挥发性化合物、极性化合物和大分子化合物（包括蛋白、多肽、多糖、多聚物等)，分析范围广，而且不需衍生化步骤。质谱是强有力的结构解析工具，能为结构定性提供较多的信息，是理想的色谱检测器，不仅特异，而且具有极高的检测灵敏度。串联质谱（MS/MS）是将一个质量选择的操作接到另一个质量选择的后面，在单极质谱给出化合物相对分子量的信息后，对准分子离子进行多极裂解，进而获得丰富的化合物碎片信息，确认目标化合物，对目标化合物定量等。［1］高效液相色谱一质谱(HPLC—MS)联用技术是近几年来发展起来的一项新的分离分析技术，将HPLC 对复杂样品的高分离能力，与MS具有高选择性、高灵敏度及能够提供相对分子质量与结构信息的优点结合起来，在药物分析、环境分析等许多领域得到了广泛的应用。［2］本文着重讲述液相色谱质谱联用仪在药物分析、环境分析上的应用。 1液相色谱质谱联用在药学分析上的应用 1.1LC/MS在药物代谢中的应用 Lee等［3］总结了利用LC／MS鉴定药物代谢产物的方法，主要包括以下几个步骤：测定原形药物的质谱；选择准分子离子、加合离子和主要的碎片离子进行多级质谱分析；选择原形药物的主要中性丢失，测定生物样品的中性丢失谱，图谱中的离子即为原形药物和可能的代谢物的分子离子；选择主要的子离子测定生物样品的母离子谱，所得母离子即为各个代谢物；测定生物样品中所有可能代谢物的子离子谱，解谱得到代谢物的结构。王宁生等［4］以LC／MS联用技术及标准品对照法，分离检测健康志愿者口服复方丹参滴丸后，血清中水溶性成分及代谢产物，从一级质谱的分子离子峰推测，丹参素及原儿茶醛在体内分别与硫酸及葡萄糖醛酸结合，产生丹参素硫酸结合物及原儿茶醛的葡糖醛酸结合物。 Hsiu SL等［5］研究芍药苷在小鼠体内药代动力学，用LC／MS方法检测体内药物浓度，未检测到芍药苷原形药物；但在血浆及各种排泄物中，均可检测其代谢物，经液相色谱一质谱分析，结合核磁共振(NMR)，确定其为芍药苷的脱糖基代谢物，提示芍药苷给药后，在肠道经细菌转化为PG后，被吸收进入血液循环中发挥作用。 Chen SJ等［6］用LC／DAD／MS／MS联用技术，对山豆根碱在小鼠体内的代谢进行了研究，用ESI ／MSn技术检测山豆根碱的代谢物，并鉴定其主要代谢物为N一去甲基山豆根碱。 1.2LC/MS在药学浓度上的应用 M．Brolis等［7］采用I-IPLC—DAD—MS法从贯叶金丝桃Hyoericum performm中分离鉴定出槲皮素、异槲皮素、金丝桃苷等成分。 Gerthard Brillgma等［8］采用HPLC—NMR和HPLC—ESI—MS—MS法对Habropetalum dawei进行分析，分离鉴定出dioneopeltine、N-methyldioncophylline、N-methyl-7-epi-dioncophylline、tetralone、(1R，3R)和(1S，3R)-N-formyl-8-hydroxy-6-methoxy-l,3-dimthyltetra-hydroisoquinoline等7个已知化合物，以及5’-O-methydioncopeltine、isoquinoline phylline 2个新化合物。徐智秀等［9］以反相高效液相色谱法分离了9种人参皂苷（I）, 利用三级四级杆质谱研究了9种I的一级质谱（主要给出相对分子质量信息）和二级质谱（提供碎片结构信息），通过它们的质谱图差异对其进行了鉴别, 并将方法用于实际样品中的9种I的定性。郭继芬等［10］选用Discovery C18柱，以甲醇-水-甲酸(40:60:0.025)为流动相，经紫外检测后，在ESI- 扫描方式下，对HPLC—UV图谱中各色谱峰进行一级和二级质谱分析，与对照品比较鉴定了提取物中4个已知的黄酮类化合物，推断出3个未知黄酮苷类化合物可能的结构。 2液相色谱质谱联用在环境分析上的应用 1

电喷雾质谱法快速分析三种农药的残留

Journal of Organic Chemistry Research 有机化学研究, 2015, 3(3), 115-121 Published Online September 2015 in Hans. https://www.360docs.net/doc/9e11381787.html,/journal/jocr https://www.360docs.net/doc/9e11381787.html,/10.12677/jocr.2015.33016 Rapid Analysis of Three Kinds of Pesticide Residues Using Electrospray Ionization Mass Spectrometry Jing Li1*, Jun Yan2, Wenxiang Hu3* 1School of Chemistry and Chemical Engineering, Shanxi University, Taiyuan Shanxi 2Central Research Institute of China Chemical Science and Technology, Beijing 3Beijing Excalibur Space Military Academy of Medical Sciences, Beijing Email: *lxf7777@https://www.360docs.net/doc/9e11381787.html,, *huwx66@https://www.360docs.net/doc/9e11381787.html, Received: Jul. 13th, 2015; accepted: Aug. 4th, 2015; published: Aug. 10th, 2015 Copyright ? 2015 by authors and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). https://www.360docs.net/doc/9e11381787.html,/licenses/by/4.0/ Abstract Electrospray ionization mass spectrometry (ESI-MS) combined with electrospray ionization tan-dem mass spectrometry technology was used for rapid analysis of three kinds of pesticide resi-dues. In this manuscript, the rapid analytical method for Hexaconazo, Iimidacloprid residues, as well as the rule of tandem mass spectrometry for Difenconazole, was established. The method is simple and rapid. It is applicable to determine the pesticide and pesticide residues. Keywords Electrospray Ionization Mass Spectrmetry (ESI-MS), In-Source Collision Induced Dissociation (CID), Pesticide Residues, Rapid Analysis 电喷雾质谱法快速分析三种农药的残留李竞1*，闫峻2，胡文祥3* 1山西大学化学化工学院，山西太原 2中化化工科学技术研究总院，北京 3北京神剑天军医学科学院，北京 *通讯作者。

液相色谱串联质谱联用技术-实验指导(许煊炜)

液相色谱串联质谱联用仪检测技术实验指导（2014、2015级）课程内容（一个实验8学时）：（1）AB Sciex Qtrap 4500 三重四级杆/离子阱液相色谱串联质谱联用仪的结构原理、操作及定性定量应用。（2）利用液相色谱串联质谱联用仪快速测定水果中7种农药的残留量。吉林农业大学农业部参茸质检中心 2017.03

实验一AB Sciex Qtrap 4500 三重四级杆/离子阱液相色谱串联质谱联用仪的结构原理、操作及定性定量应用一.实验目的和意义通过学习液质联用仪的构成和使用方法，及其在定性、定量分析中的应用，培养学生使用液质联用仪进行仪器分析的能力，并培养学生严谨的科学态度、细致的工作作风、实事求是的数据报告和良好的实验习惯（准备充分、操作规范，记录简明，台面整洁、实验有序，良好的环保和公德意识）。培养培养学生的动手能力、理论联系实际的能力、统筹思维能力、创新能力、独立分析解决实际问题的能力、查阅手册资料并运用其数据资料的能力以及归纳总结的能力等。（一）检测仪器 1、仪器名称高效液相色谱串联质谱联用仪（简称LC-MS-MS）。型号：4500 QTRAP（美国Applied Biosystems公司）。 2、仪器组成液相色谱部分：岛津LC-30A，配有在线脱气机、超高压二元泵、自动进样器；串联质谱部分：QTRAP4500，配有ESI离子源、串联四级杆/线性离子阱。 3、主要性能指标离子化方式：ESI电离质量范围：（5 ~ 1700）amu 分辨率：> 6900 质量稳定性：0.1 amu/12h 灵敏度：1pg reserpine, ESI+, MRM扫描（m/z : 609/195），信噪比S/N > 120:1 扫描速度：4000 amu/sec 质量准确度：< 0.01%（全质量数范围） 4、方法原理高效液相色谱二元泵将流动相泵人系统并混合，自动进样器将待测样品注入流动相中，随流动相进入色谱柱，由于样品不同组分在色谱柱中保留时间不同，各组分被分开，依次进入离子源。在离子源中，各组分以ESI或APCI方式电离，被加速后进入质量分析器。4500QTRAP 的质量分析器主要由Q1、Q2、Q3三组四级杆串联组成。Q1可将分子离子按质荷比（m/z）大小分开；Q2是碰撞室，可将母离子进一步破碎为碎片离子；Q3具有四级杆和线性离子阱两种功能，作为四级杆时可将分子离子或碎片离子按质荷比大小分开，作为离子阱还可富集离子从而提高检测灵敏度。各组分的不同离子在质量分析器中被破碎、分离，并按质荷比大小依次抵达监测器，经记录即得到按不同质荷比排列的离子质谱图。4500QTRAP通过串联四级杆/线性离子阱两种不同质谱技术的结合，可以在单次分析中对复杂样本中的单个成分同时进行定性和定量，也可以对多个化合物进行定量分析。整台仪器的控制、数据采集、数据处理、结果输出均由PC计算机Windows操作系统支持下的Analyst软件控制完成。

电喷雾质谱

电喷雾电离质谱（电喷雾部分）的简介 ESI-MS的大概结构电喷雾质谱主要有两部分组成, 电喷雾部分和质谱仪部分。电喷雾部分可以提供一种相对简单的方式, 使非挥发性溶液相的离子转入到气相; 而质谱仪部分则可以提供一种灵敏的、直接的检验。 ESI的基本原理 ESI 是一种离子化技术, 它将溶液中的离子转变为气相离子而进行MS分析。电喷雾过程可简单描述为: ：样品溶液在电场及辅助气流的作用下喷成雾状带电液滴，挥发性溶液在高温下逐渐蒸发，液滴表面的电荷体密度随半径减少而增加，当达到雷利极限时，液滴发生库伦爆破现象，产生更小的带电微滴。上述过程不断反复，最终实现样品的离子化。由于这一过程即没有直接的外界能量作用于分子，因此对分子结构破坏较少，是一种典型的“软电离”方式。

ESI过程 ESI过程中大致可以分为液滴的形成、去溶剂化、气相离子的形成3 个阶段。液滴的形成和雾化样品溶液通过雾化器进入喷雾室, 这时雾化气体通过围绕喷雾针的同轴套管进入喷雾室, 由于雾化气体强的剪切力及喷雾室上筛网电极与端板上的强电压( 2~6 kV) ,将样品溶液拉出, 并将其碎裂成小液滴。随着小液滴的分散, 由于静电引力的作用, 一种极性的离子倾向于移到液滴表面, 结果样品被载运并分散成带电荷的更微小液滴。液滴的形成及电喷雾过程如图2 所示。去溶剂化和离子的形成进入喷雾室内的液滴, 由于加热的干燥气-氮气的逆流使溶剂不断蒸发, 液滴的直径随之变小,并形成一个“突出”使表面电荷密度增加。当达到Rayleigh( 雷利) 极限时, 电荷间的库仑排斥力足以抵消液滴表面张力时, 液滴发生爆裂, 即库仑爆炸, 产生了更细小的带电液滴, 离子的形成如图 3所示。

高效液相色谱质谱联用-HPLC-MS-实验-含思考题

液相色谱-质谱联用技术（LC-MS）的各种模式探索一、实验目的 1、了解LC-MS的主要构造和基本原理； 2、学习LC-MS的基本操作方法； 3、掌握LC-MS的六种操作模式的特点及应用。二、实验原理 1、液质基本原理及模式介绍液相色谱-质谱法（Liquid Chromatography/Mass Spectrometry，LC-MS）将应用范围极广的分离方法——液相色谱法与灵敏、专属、能提供分子量和结构信息的质谱法结合起来，必然成为一种重要的现代分离分析技术。但是，LC是液相分离技术，而MS是在真空条件下工作的方法，因而难以相互匹配。LC-MS经过了约30年的发展，直至采用了大气压离子化技术（Atmospheric pressure ionization，API）之后，才发展成为可常规应用的重要分离分析方法。现在，在生物、医药、化工、农业和环境等各个领域中均得到了广泛的应用，在组合化学、蛋白质组学和代谢组学的研究工作中，LC-MS 已经成为最重要研究方法之一。质谱仪作为整套仪器中最重要的部分，其常规分析模式有全扫描模式（Scan）、选择离子监测模式（SIM）。（一）全扫描模式方式（Scan）：最常用的扫描方式之一，扫描的质量范围覆盖被测化合物的分子离子和碎片离子的质量，得到的是化合物的全谱，可以用来进行谱库检索，一般用于未知化合物的定性分析。实例：（Q1 = 100-259m/z）（二）选择离子监测模式（Selective Ion Monitoring，SIM）：不是连续扫描某一质量范围，而是跳跃式地扫描某几个选定的质量，得到的不是化合物的全谱。主要用于目标化合物检测和复杂混合物中杂质的定量分析。实例：（Q1 = 259m/z）本实验采用三重四极杆质谱仪（Q1：质量分析器；Q2：碰撞活化室；Q3：

电喷雾电离质谱的简介与改进

电喷雾电离质谱

电喷雾电离质谱（电喷雾部分）的简介与改进摘要：本文主要围绕电喷雾电离质谱的电喷雾部分的结构，原理，电喷雾的过程，以及其优缺点和应用对其做了简要的介绍，并在最后提出了一些改进的建议。希望通过本文的介绍大家可以进一步了解电喷雾电离质谱，并引起大家对电喷雾电离质谱的重视，在以后的实际运用中使其发挥更大的作用。关键字：电喷雾电离质谱质谱分析 Abstract: This paper mainly introduces the structure, principle, electrospray ionization process of ESI in ESI-MS（electrospray ionization mass spectrometry）, as well as its advantages、disadvantages and application, and concludes with some suggestions for improvement。 Through this paper I hope all of you can learn more about ESI-MS, draw your attention on ESI-MS, and let ESI-MS play a greater role in the practical application。Keywords: ESI-MS Mass Spectrometry 引言：电喷雾作为一种产生气相离子的方法是由Dole 和他的合作者们于1968 年提出的, 在1973年, Dole 等人提出将电喷雾与传统质谱仪联用, 而到1984 年才被用于实验中。电喷雾质谱作为一种较新的分析手段, 它正越来越广泛地被人们所利用。自从90 年代以来, 关于电喷雾质谱发展、应用和功能方面的出版物呈指数上升。但是在日常学习生活中电喷雾质谱却鲜为人知，对于质谱部分的介绍有很多书籍可以参考, 但对于电喷雾部分,国内关于此方面系统介绍的书籍、文章却极少。因此在此做一些介绍，并针对在实际分析工作中存在的一些问题提出一些改进的意见。 ESI-MS的大概结构电喷雾质谱主要有两部分组成, 电喷雾部分和质谱仪部分。电喷雾部分可以提供一种相对简单的方式, 使非挥发性溶液相的离子转入到气相; 而质谱仪部分则可以提供一种灵敏的、直接的检测方式。图 1电喷雾质谱示意图

液相色谱-串联质谱(LCMSMS)方法 - 岛津中国

液相色谱-串联质谱（LC/MS/MS）法测定癫痫患者血清中卡马西平的浓度谢华ì，王荣，贾正平?，徐丽婷（兰州军区兰州总医院临床药理基地，兰州 730050）摘要目的：本文建立了液相色谱-串联质谱（LC/MS/MS）法测定患者血清中的卡马西平浓度的方法。方法：色谱柱：Zorbax Extend-C18柱（150×4.6 mm I.D，5μm）；流动相：甲醇-0.01mmol·L-1乙酸胺溶液（80:20，v/v）；流速：0.3 mL·min-1。结果：卡马西平浓度在2～40 ng·mL-1范围内，峰面积与浓度线性关系良好，平均回收率为101.1%，日内精密度、日间精密度的RSD分别为3.39%和4.11%。并测定了10名患者血清中卡马西平的浓度。结论：本方法具有良好的灵敏度、准确度、精确度及专属性，结果准确，重现性好，易于操作，可用于患者血清中卡马西平浓度的测定。关键词卡马西平；LC/MS/MS；血清 Content Determination of Carbamazepine in epileptic patient serum by Liquid Chromatographic Tandem Mass Spectrometry XIE Hua, JIA Zheng-ping*, WANG Rong, XU Li-ting (Base of Clinic Pharmacology, Lanzhou General Hospital, Lanzhou Command, Lanzhou 730050, China) ABSTRACT OBJECTIVE:An analytical method based on Liquid Chromatography with tandem Mass Spectrometry (LC-MS/MS) detection was developed for the content determination of carbamazepine in epileptic patient serum. METHODS: The method included that the column was Zorbax Extend-C18(150×4.6 mm I.D.，5μm ); mobile phase was methanol-0.01mmol·L-1amine acetic acid (80:20，v/v) at a flow rate of 0.3 mL·min-1. RESULTS: The method was proved to be linear in the range of 2~40ng·mL-1 with a regression confficient of 0.9976. The average recovery rate was 101.1%(n=5). The RSD of average contents of intra-day and inter-day was 3.39% and 4.11% respectively. The carbamazepine concentrations of ten epileptic patient’s serums were detected. CONCLUSION: This method is accurate, precise, sensitive and specific to be used in the content determination of carbamazepine serum. KEY WORDS Carbamazepine; LC/MS/MS; Serum ?基金项目：国家科技部重大项目（2008ZXJ09014-010） ì主管药师。研究方向：临床治疗药物监测。电话：(0931)8994675; E-mial: xiehua-72@https://www.360docs.net/doc/9e11381787.html, ?通讯作者：教授，主任药师，博士。研究方向：临床药学。电话：(0931)8994652。

液相色谱—质谱联用

液相色谱—质谱联用来进行物质分离的实验一、实验目的 1.了解液相色谱—质谱联用的基本原理； 2.掌握液相色谱—质谱联用时的操作步骤及实验方法； 3.学习分析色谱图和质谱图。二、实验原理利用不同的物质在固定相和流动相中具有不同的分配系数，当两相作相对位移时，使这些物质在两相间进行反复多次分配，使得原来微小的分配差异产生明显的分离效果，从而依先后次序流出色谱柱，以此来达到分离多种物质的目的。然后依次流出的物质进入质谱中被打碎成为各种离子而被检测到。以此达到分离的目的。三、实验仪器和材料高效液相色谱仪及质谱仪（见下图）、甲醇、水、TADB（相对分子量516）、TAIW（相对分子量336）、色谱柱

四、实验步骤 1.将待分离的两种物质的混合物配成溶液加入到2号样瓶中去； 2.启动联机软件，在四元泵模块的空白处右键单击，在弹出的 “方法”选项中编辑好流动相和流速，点击确定，以使体系过渡到目标状态，直到压力稳定为止； 3.进入“方法”菜单，“编辑完整方法菜单”，按照“方法参考”进行编辑（“方法参考”中的参数编辑完成后继续进行编辑，编辑质谱的相关参数：选择正负极及电压等），编辑完成后再次进入“方法菜单”，选择“方法另存为”命名后点击“确定”进入“序列” 菜单，“序列表菜单”，然后编辑样品瓶位置为1号、样品名称、使用方法、进样次数、数据文件、进样量，确定后再次进入 “序列菜单”的“序列参数”菜单，再选择文件夹，确定； 4.方法编辑完成且压力稳定后，点击进样器左上方的“序列/开始序列”按钮，进行测试，等待测试完毕，点击停止按钮。然后进入“脱机”软件，查看积分测试报告。五、实验结果及分析实验时的液相色谱条件统一为：70%的甲醇，流速0.4ml/min，进样量1ul，波长230nm，测试时间15min。在正极性条件下：

固相萃取-高效液相色谱串联质谱法

固相萃取-高效液相色谱串联质谱法测定原料奶中5种环境雌激素残留量的研究李雪1,2，牟光庆1，陈历俊1,2,*，姜铁民2 （1.大连工业大学食品学院，辽宁大连116034； 2.北京三元食品股份有限公司，北京100076）摘要：建立固相萃取-高效液相色谱串联质谱法测定原料乳中环境雌激素（雌酮、雌二醇、雌三醇、己烯雌酚、双酚A）的方法。原料乳用NH2-SPE固相萃取小柱进行富集，旋转蒸发浓缩后，采用高效液相色谱串联质谱法测定。实验结果表明：各待测物在0.01 ~0.5μg/mL 范围内具有良好的线性关系，相关系数均大于0.9978，加标回收率为68.5%~105.6%，RSD 为2.56%~7.59%，最低检出限为0.22 ~0.56μg/L（S/N=3）。本方法操作简便，快速灵敏，适合于牛奶中痕量环境雌激素的残留分析检测。关键词：高效液相色谱串联质谱，固相萃取，环境雌激素，原料奶，残留检测Research of the determination of 5 kinds of environmental estrogens residues in raw milk by solid phase extraction-high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry LI Xue1,2,MU Guang-qing1,CHEN Li-jun1,2,*,JIANG Tie-min2 （1.College of Food Science and Technology,Dalian Polytechnic University , Dalian 116034,China; 2.Beijing Sanyuan Foods Co., Ltd, Beijing 100076,China） Abstract: A solid phase extraction-high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry method for simultaneous determination of environmental estrogens including estrone,estradiol,estriol,diethylstilbestrol and bisphenol A in raw milk was established. 5 kinds of environmental estrogens were extracted from the raw milk sample by a NH2-SPE column, and concentrated with a rotary evaporator. The extract was analyzed by high performance liquid chromatography tandem mass spectrometric.Results showed that:a good linear range from 0.01~0.5μg/mL with correlation coefficient of above 0.9978 was obtained.The extraction recovery were 68.5%~105.6% and the relative standard deviation were 2.56%~7.59%.The limit of detection was 0.22~0.56μg/L(S/N=3).The descri bed method was simple,sensitive and accurate. *通讯作者：陈历俊，chlj@https://www.360docs.net/doc/9e11381787.html,。作者简介：李雪(1986-)，女，硕士研究生，研究方向：食品安全。基金资助：奶牛产业技术体系北京市创新团队建设项目；国家科技部“863”计划(2011AA100903) 。