分子生物学复习提纲

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第1~2章

1、分子生物学的定义、发展简史和研究内容

定义:从分子水平研究生物大分子的结构与功能从而阐明生命现象本质的科学,主要指遗传信息的传递(复制)、保持(损伤和修复)、基因的表达(转录和翻译)与调控。

发展简史:

研究内容:

(1)基因与基因组的结构与功能

(2)DNA的复制、转录与翻译

(3)基因表达与调控

(4)DNA重组技术(基因工程)

(5)生物大分子的结构和功能研究(结构分子生物学)

2、什么是DNA的变性?引起变性的主要因素?什么是DNA复性?复性对

浓度的依赖关系是怎样的?

DNA变性:DNA的双螺旋结构被破坏,解链,原来隐藏在双螺旋内部的发色基团暴露出来的现象

引起变性的因素:加热、极端PH值、有机溶剂、尿素与酰胺

DNA复性:变性的DNA链在适当条件下重新缔合成为双螺旋结构的过程

复性对浓度的依赖关系:C/C0=1/(1+KC0t)

3、名词解释:DNA熔解温度、分子杂交

4、DNA熔解温度:双螺旋解开一半的温度

分子杂交:不同来源的互补序列退火,形成双链的过程

第3章

1、怎样通过实验证实DNA复制是半保留复制?

2、名词解释:复制子、复制叉、复制起点、复制终点、θ复制、滚环复制、D环复制、岗崎片段、端粒

复制子:每个DNA复制的独立单元

复制叉:复制开始时在复制起始点形成一个特殊的叉形结构,是复制有关的酶和蛋白质组装成复合物和新链合成的部位

复制起点:DNA复制开始的点

复制终点:DNA复制停止的点

θ复制:一种双向复制的方式

滚环复制:单向复制的特殊方式

D环复制:双链环在固定点解开复制时,一条先复制,另一条链保持单链而被取代。待一条链复制到一定程度时,露出另一条链的复制起点时,另一条链才开始复制的复制方式

岗崎片段:在DNA复制中首先合成的较短片段

端粒:

3、DNA聚合酶具有怎样的性质?

4、大肠杆菌中有哪几种DNA复制酶?分别起什么作用?

有5种。分别是DNA聚合酶I(polI)、DNA聚合酶II、DNA聚合酶III、DNA 聚合酶IV、DNA聚合酶V

DNA聚合酶I:5'—3'外切核酸酶、3'—5'外切核酸酶、聚合酶

DNA聚合酶II:修复

DNA聚合酶III:复制

DNA聚合酶IV与V:DNA错误倾向的修复

5、参与DNA复制过程的重要酶或蛋白有哪些?

DNA聚合酶I(polI)

DNA聚合酶II

DNA聚合酶III

DNA聚合酶IV

DNA聚合酶V

DNA连接酶

DnaA

Dna B

Dna C

HU

引物酶(Dna G)

单链DNA结合蛋白(SSB)

RNA聚合酶

DNA旋转酶(拓扑异构酶II)

Dam甲基化酶

6、细菌DNA复制的三个过程:起始、延伸和终止。

起始:双链---DnaA---结合在OriC位点的4个9bp序列---DnaA+ATP---结合在OriC位点上---ATP水解---开链形成解链区---DnaC---DnaB结合到解链区复合物上---RNA聚合酶+DnaG---形成引物---HU蛋白---解旋并形成开放起始复合物

延伸:前导链:在引物RNA合成基础上沿着复制叉方向合成DNA 后续链:模板链绕聚合酶形成回环→引物以5’-3’方向进行合成→沿着引物合成DNA片段→模板链解环并将冈崎片段移动到到与复制叉行进方向相反的方向→复制体寻找下一个引发点

终止:当子链延伸达到终止位点时,DNA复制就终止了。若出现一个复制叉前进受阻,另一复制叉复制过半,通过Ter-Tus复合物阻碍复制过半的复制叉前移,最终使两个复制叉汇合

7、为什么真核生物DNA的复制比大肠杆菌的更为复杂?

(1)真核生物每一条染色质上可以有多处复制起点,而原核生物只有一个(2)真核生物的染色体在全部完成复制之前,各起始点上DNA的复制不能再开始,而在快速生长的原核生物中,复制起点上可以连续开始新的DNA 复制

8、生物怎样解决DNA复制时出现的末端问题?

原核生物:原核生物的染色体是环状的,其5’端冈崎片段的RNA引物被切

除后可以借助DNA模板链的另半圈向前延伸得以填补

真核生物:通过形成端粒结构以及具有逆转录酶活性的端粒酶来防止DNA 复制时的后随链缩短

第4章

1、名词解释:突变、突变体、突变剂、突变基因、染色体畸变、基因突变、碱基转换和颠换、同义突变、错义突变、无义突变、Weigle效应

突变:可以通过复制而遗传的DNA结构的任何永久性改变

突变体:携带突变的生物个体、群体或株系

突变剂:引起突变的物理化学因素

突变基因:发生突变的基因

染色体畸变:染色体结构和数目的改变

基因突变:发生在基因水平的突变

碱基转换:在两种嘧啶或两种嘌呤之间的互换

碱基颠换:发生在嘧啶与嘌呤或嘌呤与嘧啶之间的互换

同义突变:突变后不引起蛋白质表达的突变

错义突变:

无义突变:

Weigle效应:

2、诱发突变产生的机制。

物理诱变剂:通过高能离子化辐射,引起DNA发生广泛的化学变异,包括断链、碱基及糖环损伤。非离子化辐射引起分子内的分子振动或促进电子进入较高能级状态,形成新化学键

化学诱变剂:通过对碱基的修饰或插入其中从而改变其配对特性而诱发的突变

3、DNA修复的类型、错配修复系统中如何识别模板链和新生链?切除修复包括哪两种,有什么区别?

5种修复类型,分别是切除修复、错配修复、直接修复、重组修复、易错修复

DNA的半甲基化可区别新生链与模板链

切除修复包括碱基切除修复与核苷酸片段切除修复。碱基切除修复主要修复单个碱基缺陷的损伤,核苷酸片段切除修复主要修复DNA中的长片段修复。

4、SOS反应产生的诱导的倾向差错的修复系统是怎样工作的?

在有单链DNA和ATP存在时,RecA蛋白被激活,从而促进LexAz自体的蛋白质水解酶活性。LexA蛋白的自体水解使很多与修复有关的基因被激活而得以表达,其中产生DNA聚合酶IV和V,它们不具备3’外切核酸酶校正功能,但在DNA链的损伤部位即使出现不配对的碱基,仍然能催化核苷酸的聚合,使复制继续进行

第5章

1、名词解释:遗传重组、同源性重组、位点特异性重组、转座、Holliday

结构模型、异源双链、基因转换

遗传重组:遗传物质的重新组合,其共有的特征是DNA双螺旋之间的遗传物质发生交换

同源性重组:发生在两个DNA分子同源区之间的重组

位点特异性重组:重组发生在特异位点的重组

Holliday结构模型:两个同源染色体DNA排列后,两个DNA分子的同一部位两个单链发生断裂而重组,断裂的单链游离末端彼此交换,每一条链与另一DNA对应的链连接所形成的连接分子

转座:一个转座子由基因组的一个位置移动到另一个位置上

异源双链:在重组部位,每条双链中均有一段DNA链来自另一个双链中的相对链的部分

基因转换:通过对异源双链区内不配对碱基的修复而进行的基因矫正的过程

2、同源重组的酶学机制是怎样的?

RecBCD结合到DNA末端→RecBCD前进并解链→RecBCD在Chi位点旁边切断单链→RecA蛋白在单链DNA上缓慢聚合→单链DNA与其在双螺旋中相互补的序列快速配对,产生一个杂合双螺旋连接点→发生一个缓慢的对双螺旋的一条链的置换反应,产生一个长的杂合DNA双螺旋→RuvA结合到Holliday 联结体的交叉点上,使分支点易于移动→RuvA协助RuvB结合到交叉点上游→RuvB水解ATP推动分支移动→RuvC将Holliday联结体切开→DNA聚合酶与DNA连接酶进行修复合成

3、λ噬菌体的两种存在形式是怎样通过位点特异性重组实现转换的?

两种存在模式:溶源和裂解。通过噬菌体的DNA与宿主细胞染色体的整合与切除进行转换。

整合:整合酶(Int)在整合宿主因子(IHF)协助下,作用于POP’(噬菌体attP位点序列)和BOB’(细菌attB位点序列)序列,分别交错7bp将两DNA 分子切开,然后相互连接,噬菌体DNA被整合,其两侧形成新的重组附着位点BOP’(attR)POB’(attL)

切除:整合酶(Int)、整合宿主因子(IHF)、噬菌体编码的Xis蛋白作用于噬菌体两侧附着位点(attL与attR),将其联结起来

4、原核转座子的类型有哪些?

插入序列、复合型转座子

5、转座的机制是怎样的?转座的一般过程是怎样的?

复制型转座:转座酶识别转座子的末端反向重复序列并在其3’端切开,同时在靶部位交错切开单链,它的5’突出末端与转座子的3’端相连。在转座过程中,在形成靶部位与转座子连接中间体后即刻进行复制,通过复制使原来位置与心的靶部位各有一个转座子。

非复制型转座:转座酶识别转座子的末端反向重复序列并在其3’端切开,同时在靶部位交错切开单链,它的5’突出末端与转座子的3’端相连。在转座过程中,转座元件直接由一个部位转移到另一个部位,在原来的部位没有保留。

一般过程:转座酶识别转座子的末端反向重复序列并在其3’端切开,同时在靶部位交错切开单链,它的5’突出末端与转座子的3’端相连。

第6章

1、RNA聚合酶的性质?原核RNA聚合酶由哪些亚基组成?σ亚基的重要作用是什么?真核RNA聚合酶有哪几类,有什么区别?

RNA聚合酶性质:能从头开始合成RNA、没有3-5外切核酸酶活性、不具有校正与修复的功能

由:α亚基、β亚基、β’亚基、σ亚基组成

σ亚基的作用:识别并引导RNA聚合酶稳定结合到启动子上,促进转录的起始

2、原核生物的启动子、真核生物的各类启动子及转录因子

原核生物的启动子:-10序列、-35序列。

真核生物的启动子:类型I、II、III基因的启动子。转录因子:TFIIX(A-H,缺C)

3、TBP怎样参与三种RNA聚合酶的转录起始的?

TBP与DNA小沟结合并形成一个马鞍形结构,使DNA弯曲约80°。使转录因子与RNA聚合酶II更紧密地与DNA位点结合,有助于DNA形成开放型起始复合物

4、名词解释:启动子、增强子、转录因子

启动子:基因转录起始所必需的一段DNA序列,是基因表达调控的上游顺式作用元件

增加子:DNA上能促进启动子转录效率的顺式作用序列

转录因子:专为构建转录起始复合物的基本转录因子以及在转录过程中调节RNA聚合酶活性的转录调控因子统称为转录因子

5、原核生物转录的起始、延伸和终止过程。

起始:RNA聚合酶全酶搜索并结合DNA特异位点,特异位点为-35序列→RNA聚合酶与启动子形成封闭型起始复合物,在-10序列区域→封闭性复合物转变为开放性复合物,在-10序列解链→DNA-酶-底物NTP三元起始复合物形成

延伸:核苷酸不断加到RNA链的3’-OH上。RNA合成起始不久,RNA聚合酶核心酶变构,σ因子脱落。

终止:

内在终止子:在新生RNA中出现发卡式结构,导致RNA聚合酶的暂停,破坏RNA-DNA杂合链5’端的正常结构。寡聚U的存在使杂合链的3’端部分出现不稳定的rU?dA区域。两者共同作用使RNA从三元复合物中解离出来依赖于依赖ρ因子的终止子:RNA合成起始以后,ρ因子即附着在新生的RNA链上,靠ATP水解产生的能量,沿着5’→3’方向朝RNA聚合酶移动,到达RNA的3’-OH端后取代了暂停在终止位点上的RNA聚合酶,解开DNA/RNA杂合链,使之从DNA模板上释放

6、原核生物三种RNA是怎样进行转录后加工的?

mRNA:原核生物中,mRNA转录之后立即翻译,一般没有转录后加工过程tRNA:RNase 内切酶将tRNA 多顺反子前体切割为单体。在RNase P的作用下生成5’成熟末端。该酶识别加工部位的空间结构,含有蛋白质和RNA 两部分。所含的RNA(M1 RNA)可单独完成切割功能。核酸外切酶从3’端切去附加序列,进行修剪。在tRNA3’末端添加上-CCA,这是一个酶促反应,在不同的组织中存在不同的反应模式,最后进行核苷酸的修饰

rRNA:在RNaseIII作用下形成16S rRNA和23S rRNA前体P16和P23,在RNase E作用下产生5S rRNA前体P5。核酸酶进一步切除附加序列产生成熟rRNA分子

7、真核生物怎样进行转录后加工?

mRNA:5’端形成特殊的帽子结构;在3’端切断并添加poly A尾巴;通过拼接除去由内含子转录而来的序列;链内部核苷酸的甲基化

tRNA:tRNA内切核酸酶切割前体分子中的内含子→RNA连接酶讲两个半分子连接起来→3’端添加-CCA→核苷酸修饰

rRNA:

8、真核生物中剪接体怎样催化内含子的剪接的?

9、两种类型的rRNA内含子的自我剪接,比较第二种和剪接体介导的剪接

过程。

10、什么是RNA编辑?

改变RNA分子序列的一种转录后修饰现象,包括碱基的插入、缺失、核苷酸的替换

第7章

1、遗传密码是怎样被破译的?遗传密码有怎样的性质?

1954年Gamov G首先对遗传密码进行探讨,指出遗传密码子应该是三联体,并且是不重叠的。1961年,Crick F H C及其同事观察了噬菌体特定位点插入或缺失核苷酸,对噬菌体感染能力的影响,证明三联体密码子是非重叠的,并且没有标点。三个著名实验:多聚同一核苷酸的翻译、核糖体结合技术、

多聚重复核苷酸的翻译

性质:简并性、变耦性、通用性、变异性

2、tRNA的二级结构和三级结构是怎样的?

二级结构:受体臂、TψC臂、反密码子臂、D臂、可变臂

受体臂:3' 端的最后3个碱基序列永远是CCA,最后一个碱基的3' 或2' 自由羟基(-OH)可以被氨酰化。

TψC臂:根据3个核苷酸命名的,其中ψ表示拟尿嘧啶

反密码子臂:含有三联反密码子。

D臂:中含有二氢尿嘧啶

可变臂:tRNA大小变化最大的区域

三级结构:由在二级结构中未配对碱基间形成氢键而引发的。在三叶草结构中的氢键被称为次级氢键,在三级结构中的就称为三级氢键

3、氨酰tRNA合成酶有哪些重要的结构域?它催化怎样的反应?

结合域:ATP和aa结合位点、tRNA接受臂结合域、tRNA反密码子结合域、寡聚体形成域,合成酶可以是单体、二聚体或四聚体

催化反应:氨酰化反应。AA+tRNA+ATP →AA-tRNA+AMP+PPi

4、怎样体现AA-tRNA合成酶的专一性?

AA-tRNA合成酶既要能识别tRNA,又要能识别氨基酸,它对两者都具有高度的专一性

每个细胞中包含20种氨酰-tRNA合成酶,一组同功tRNA由一种AA-tRNA 合成酶催化而携带氨基酸

5、核糖体的组成和功能?原核和真核核糖体的组成有什么不同?

组成:

由蛋白质和rRNA组成,是存在于细胞质内的微小颗粒。

功能:

结合mRNA,在mRNA上选择适当的区域开始翻译

密码子(mRNA)和反密码子(tRNA)的正确配对

肽键的形成

6、核糖体上具有哪些活性位点?其功能怎样?

A位点(氨酰基tRNA 位点,amino acyl-tRNA site)在延伸过程中与进入的负载tRNA结合

P位点(肽酰tRNA 位点,peptidyl-tRNA site)与携带新生多肽链的tRNA结合。E-位点(退出位点,Exit site),空载的tRNAs从此位点被排出。

肽基转移酶位点,在50S亚基上,提供肽键形成的催化活性

EF-G结合位点,其活性是核糖体在mRNA移位所必需的

多肽出口位点,核糖体通过这个区域附着在膜上

7、原核、真核生物蛋白质的合成过程是怎样的?

原核生物

起始:70S核糖体在IF-1作用下解离成30S与50S两个亚基→IF-3与30S结合,防止在与mRNA结合前30S亚基与大亚基结合→IF-1和IF-2结合到30S 亚基上,30S亚基利用mRNA分子上的核糖体结合位点附着到mRNA上→tRNA met f通过反密码子与mRNA上的AUG密码子配对,与上述复合体结合,同时释放IF-3→50S亚基与30S起始复合物结合,置换出IF-1与IF-2,形成70S起始复合物

真核生物

起始:mRNA 5’端帽子结合复合物→43S复合物形成→43S复合物结合到mRNA 5’端→在eIF 1 和eIF1A 的作用下,小亚基利用水解GTP的能量移动到起始密码子AUG,形成48S复合物→起始tRNA和AUG互补配对,在eIF5 的作用下, eIF2水解GTP使eIF2和eIF3 释放, 60S亚基与40S亚基结合

延伸:

终止:

8、原核蛋白质合成起始时有哪些重要的翻译起始因子参与?

IF-3是30S亚基与mRNA起始位点的特异结合所必须的

IF-2特异地和起始tRNA结合,并把它带到起始复合体中

IF-1结合于A位点,阻止氨酰-tRNA的进入

9、名词解释:多核糖体、SD序列、同义密码子

多核糖体:在一个mRNA分子上可以结合多个不同时间开始翻译的核糖体SD序列:细菌mRNA通常含有一段富有嘌呤碱基的序列,勇于结合原核生

物核糖体

同义密码子:编码同一氨基酸的密码子

第8章

阐述乳糖操纵子的正负调控模型。

(1)、乳糖操纵子的组成:大肠杆菌乳糖操纵子含Z、Y、A 三个结构基因,分别编码半乳糖苷酶、透酶和半乳糖苷乙酰转移酶,此外还有一个操纵序列O,一个启动子P 和一个调节基因I。

(2)、阻遏蛋白的负性调节:没有乳糖存在时,I 基因编码的阻遏蛋白结合于操纵序列O 处,乳糖操纵子处于阻遏状态,不能合成分解乳糖的三种酶;有乳糖存在时,乳糖作为诱导物诱导阻遏蛋白变构,不能

结合于操纵序列,乳糖操纵子被诱导开放合成分解乳糖的三种酶。所以,乳糖操纵子的这种调控机制为可诱导的负调控。

(3)、CAP 的正性调节:在启动子上游有CAP 结合位点,当大肠杆菌从以葡萄糖为碳源的环境转变为以乳糖为碳源的环境时,cAMP 浓度升高,与CAP 结合,使CAP 发生变构,CAP 结合于乳糖操纵子启动序列附近的CAP 结合位点,激活RNA 聚合酶活性,促进结构基因转录,调节蛋白结合于操纵子后促进结构基因的转录,对乳糖操纵子实行正调控,加速合成分解乳糖的三种酶。

(4)、协调调节:乳糖操纵子中的I 基因编码的阻遏蛋白的负调控与CAP的正调控两种机制,互相协调、互相制约。

医学分子生物学讲义复习重点

分子生物学 1.ORF 答:ORF是open reading frame的缩写,即开放阅读框架。在DNA链上,由蛋白质合成的起始密码开始,到终止密码为止的一个连续编码列,叫做一个开放阅读框架。 2.结构基因 答:结构基因(structural genes)可被转录形成mRNA,并翻译成多肽链,构成各种结构蛋白质或催化各种生化反应的酶和激素等。 3.断裂基因 答:基因是核酸分子中贮存遗传信息的遗传单位,一个基因不仅仅包括编码蛋白质或 RNA 的核酸序列,还包括保证转录所必需的调控序列、位于编码区 5 ' 端与 3 ' 端的非编码序列和内含子。真核生物的结构基因,由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成,去除非编码区再连接后,可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质,这些基因称为断裂基因(split gene)。 4.选择性剪接 答:选择性剪接(也叫可变剪接)是指从一个mRNA前体中通过不同的剪接方式(选择不同的剪接位点组合)产生不同的mRNA剪接异构体的过程,而最终的蛋白产物会表现出不同或者是相互拮抗的功能和结构特性,或者,在相同的细胞中由于表达水平的不同而导致不同的表型。 5.C值 答:基因组的大小通常以其DNA的含量来表示,我们把一种生物体单倍体基因组DNA的总量成为C值(C value)。 6.生物大分子 答:生物大分子指的是作为生物体内主要活性成分的各种分子量达到上万或更多的有机分子。常见的生物大分子包括蛋白质、核酸、脂类、糖类。 7.酚抽提法 答:酚抽提法最初于1976年由Stafford及其同事提出,通过改良,以含EDTA、SDS及无DNA酶的RNA酶裂解缓冲液破碎细胞,经蛋白酶K处理后,用pH8.0的Tris饱和酚抽提DNA,重复抽提至一定纯度后,根据不同需要进行透析或沉淀处理获得所需的DNA样品。 8.凝胶过滤层析 答:凝胶过滤层析也称分子排阻层析或分子筛层析,利用凝胶分子筛对大小、形状不同的分子进行层析分离,是根据分子大小分离蛋白质混合物最有效的方法之一。 9.多重PCR 答:多重PCR技术是在一个反应体系中加入多对引物,同时扩增出多个核酸片段,由于每对引物扩增的片段长度不同,可用琼脂糖凝胶电泳或毛细管电泳等技术加以鉴别。 10.荧光域值 答:荧光阈值是在荧光扩增曲线上人为设定的一个值,它可以设定在荧光信号指数扩增阶段任意位置上,一般荧光阈值的设置是基线荧光信号的标准偏差的10倍。 11.退火 答:温度突然降至37-58℃时,变性的DNA单链在碱基互补的基础上重新形成氢

(精选)分子生物学期末考试题目及答案

分子生物学复习提纲 一.名词解释 (1)Ori :原核生物基因质粒的复制起始位点,是四个高度保守的19bp组成的正向重复序列,只有ori能被宿主细胞复制蛋白质识别的质粒才能在该种细胞中复制。 ARS:自主复制序列,是真核生物DNA复制的起点,包括数个复制起始必须的保守区。不同的ARS序列的共同特征是一个被称为A区的11bp的保守序列。(2)Promoter:启动子,与基因表达启动有关的顺式作用元件,是结构基因的重要成分,它是位于转录起始位点5’端上游区大约100~200bp以内的具有独立功能的DNA序列,能活化RNA 聚合酶,使之与模板DNA准确地相结合并具有转录起始的特异性。 (3)r-independent termination不依赖r因子的终止,指在不依赖r因子的终止反应中,没有任何其他因子的参与,核心酶也能在某些位点终止转录。(强终止子) (4)SD sequence:SD序列(核糖体小亚基识别位点),存在于原核生物起始密码AUG上游7~12个核苷酸处的一种4~7个核苷酸的保守片段,它与16SrRNA3’端反向互补,所以可以将mRNA的AUG起始密码子置于核糖体的适当位置以便起始翻译作用。 Kozak sequence:存在于真核生物mRNA的一段序列,核糖体能够识别mRNA 上的这段序列,并把它作为翻译起始位点。 (5)Operator:操纵基因,与一个或者一组结构基因相邻近,并且能够与一些特异的阻遏蛋白相互作用,从而控制邻近的结构基因表达的基因。 Operon:操纵子,是指原核生物中由一个或多个相关基因以及转录翻译调控元件组成的基因表达单元。包括操纵基因、结构基因、启动基因。 (6)Enhancer:增强子,能强化转录起始的序列的为增强子或强化子Silencer:沉默子,可降低基因启动子转录活性的一段DNA顺式元件。与增强子作用相反。 (7)cis-acting element :顺式作用元件,存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列,包括启动子、增强子、调控序列和可诱导元件,本身不编码任何蛋白质,仅仅提供一个作用位点,与反式作用因子相互作用参与基因表达调控。 trans-acting factor:反式作用因子,是指直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质。具有三个功能结构域,即DNA结合域、转录结合域、结合其他结合蛋白的结构域。 (8)Open reading frame (ORF):开放式阅读框架,是指一组连续的含有三联密码子的能够被翻译成为多肽链的DNA序列。它由起始密码子开始,到终止密码子结束。 (9)Gene:基因,产生一条多肽链或功能RNA所需的全部核苷酸序列。(能转录且具有生物学功能的DNA/RNA的序列。)

分子生物学总结(朱玉贤版)(2020年10月整理).pdf

结合着下载的资料复习吧~~~~ 绪论 分子生物学的发展简史 Schleiden和Schwann提出“细胞学说” 孟德尔提出了“遗传因子”的概念、分离定律、独立分配规律 Miescher首次从莱茵河鲑鱼精子中分离出DNA Morgan基因存在于染色体上、连锁遗传规律 Avery证明基因就是DNA分子,提出DNA是遗传信息的载体 McClintock首次提出转座子或跳跃基因概念 Watson和Crick提出DNA双螺旋模型 Crick提出了“中心法则” Meselson与Stah用N重同位素证明了DNA复制是一种半保留复制 Jacob和Monod提出了著名的乳糖操纵子模型 Arber首次发现DNA限制性内切酶的存在 Temin和Baltimore发现在病毒中存在以RNA为模板,逆转录成DNA的逆转录酶 哪几种经典实验证明了DNA是遗传物质? (Avery等进行的肺炎双球菌转化实验、Hershey 利用放射性同位素35S和32P分别标记T2噬菌体的蛋白质外壳和DNA) 第二章染色体与DNA 第一节染色体 一、真核细胞染色体的组成 DNA:组蛋白:非组蛋白:RNA = 1:1:(1-1.5):0.05 (一)蛋白质(组蛋白、非组蛋白) (1)组蛋白:H1、H2A、H2B、H3、H4 功能:①核小体组蛋白(H2A、H2B、H3、H4)作用是将DNA分子盘绕成核小体

②不参加核小体组建的组蛋白H1,在构成核小体时起连接作用 (2)非组蛋白:包括以DNA为底物的酶、作用于组蛋白的酶、RNA聚合酶等。常见的有(HMG蛋白、DNA结合蛋白) 二、染色质 染色体:分裂期由染色质聚缩形成。 染色质:线性复合结构,间期遗传物质存在形式。 常染色质(着色浅) 具间期染色质形态特征和着色特征染色质 异染色质(着色深) 结构性异染色质兼性异染色质 (在整个细胞周期内都处于凝集状态)(特定时期处于凝集状态)三、核小体 由H2A、H2B、H3、H4各2 分子组成的八聚体和绕在八聚体外的DNA、一分 子H1组成。八聚体在中央,DNA分子盘绕在外,由此形成核心颗粒。,H1结合在核心颗粒外侧DNA双链的进出口端,如搭扣将绕在八聚体外DNA链固定,核心颗粒之间的连接部分为连接DNA。 核小体的定位对转录有促进作用

医学微生物学考试试卷(附答案)

医学微生物学考试试卷(A) (临床医学本科、影像医学本科、中医药学本科、实验技术本科、预防医学本科) 班级学号姓名 注意事项: 1.在试卷上写上姓名、班级。在答题卡上填上学号,将相应的数字涂黑,并写上班级、姓名和试卷类型(A卷/B卷)。交卷时必须将答题卡与试卷一起上交,否则以零分计算! 2.本份试卷由基础知识题和病例分析题组成,共150个选择题,请按题目要求,在备选答案中选择一个最佳答案,并在答题卡上将相应的字母涂黑,做在试卷上无效。 3.考试时请严格遵守考场纪律,原则上不允许上厕所。 第一部分、A型选择题 (由一题干和5个备选答案组成,请选出一个最佳答案。共90个选择题) 1.哪种疾病的病原体属于非细胞型微生物: A.疯牛病 B.梅毒 C.结核病 D.沙眼 E.体癣 2.细菌属于原核细胞型微生物的主要依据是: A.单细胞 B.二分裂方式繁殖 C.对抗生素敏感 D.有由肽聚糖组成的细胞壁 E.仅有原始核结构,无核膜 3.革兰阳性菌细胞壁: A.肽聚糖含量少 B.缺乏五肽交联桥 C.对溶菌酶敏感 D.所含脂多糖与致病性有关 E.有蛋白糖脂外膜 4.青霉素杀菌机制是: A.干扰细胞壁的合成 B.与核糖体50S亚基结合,干扰蛋白质合成 C.影响核酸复制 D.与核糖体30S亚基结合,干扰蛋白质合成 E.损伤细胞膜 5.有关“细菌鞭毛”的叙述,哪一项是错误的: A.与细菌的运动能力有关 B.许多革兰阳性菌和阴性菌均有鞭毛 C.在普通光学显微镜下不能直接观察到 D.可用于细菌的鉴定 E.将细菌接种在固体培养中有助于鉴别细菌有无鞭毛(半固体) 6.有关“芽胞”的叙述,错误的是: A.革兰阳性菌和阴性菌均可产生(都是阳性) B.不直接引起疾病 C.对热有强大的抵抗力 D.代谢不活跃 E.通常在细菌处于不利环境下形成 7.用普通光学显微镜油镜观察细菌形态时,总放大倍数为: A.10倍 B.100倍 C.400倍 D.900~1000倍 E.10000倍 8.脑膜炎奈瑟菌和肺炎链球菌经结晶紫初染、碘液媒染、95%乙醇脱色后,菌体分别呈: A.红色和紫色 B.紫色和紫色

分子生物学考试复习资料 山东大学

1.复制和转录的异同:共同点:反应都是核苷酸的聚合过程,模版是DNA,酶依赖DNA的聚合酶,化学键3,5磷酸二酯键,方向5-3延伸,配对是碱基配对规律。不同点:底物不同分别是dNTP和NTP ;酶不同分别是DNA聚合酶和RNA 聚合酶;模版不同,分别是整个染色体双链DNA和部分基因模板链转录;产物不同,分别是子代双链DNA和mtrRNA ;引物分别是需要和不需要;碱基配对分别是A=T,GC和A=UT=AGC 2.转录的过程:模板DNA原料:NTP(ATP,GTP,CTP,UTP)酶:RNA聚合酶(RNA-pol)其它蛋白质因子:如ρ因子,转录因子(TF)等. A转录起始过程,RNA聚合酶全酶结合,DNA双链解开,在RNA聚合酶作用下发生第一次聚合反应,形成转录起始复合物b转录延长,伽马o亚基脱落,核心酶变构,与,模版结合松弛,沿着DNA模板前移在核心酶作用下,NTP不断聚合,RNA链不断延长,合成方向沿5-3进行c终止转录RNA聚合酶在DNA模板上停止前进,转录产物RNA链在转录复合物上脱落下来。 3.基因克隆的步骤:目的基因的获取;目的基因与载体的拼接,将重组体导入受体细胞,重组体筛选和鉴定,扩增和表达a获取,从基因组文库中制备,从CDNA 文库中制备,PCR扩增目的基因,人工合成目的基因b目的基因片段与适当的载体经限制性内切酶剪切后,再在DNA连接酶的催化下即可相互连接形成人工重组体,粘性末端连接,平端连接,同聚物加尾连接,人工头连接c氯化钙法,电穿孔法,脂质体转染法,显微注射法d遗传学法,分子杂交法,免疫化学筛选法,PCR筛选法e重组体的扩增与表达。 4.寡核苷酸定点诱变技术所依据的原理是:首先制备单链核酸,即按体外DNA重组技术,将待诱变的目的基因插入到M13噬菌体上,制备此种含有目的基因的M13单链DNA,即正链DNA。再使用化学合成的含有突变碱基的寡核苷酸短片段作引物,启动M13单链DNA分子进行复制,随后这段寡核苷酸引物便成为新合成的DNA子链的一个组成部分。因此所产生的新链便具有已发生突变的碱基序列,将其转入细胞后,经过不断复制,即可获得突变的DNA分子,再经表达即可获得改造后蛋白质.为了使目的基因的特定位点发生突变,所设计的寡核苷酸引物的序列除了所需的突变碱基外,其余的则与目的基因编码链的特定区段完全互补。B 诱变过程1)合成含有目的基因的正链DNA;2)合成含有特殊突变碱基的引物;3)

分子生物学问题汇总

Section A 细胞与大分子 简述复杂大分子的生物学功能及与人类健康的关系。 Section C 核酸的性质 1.DNA的超螺旋结构的特点有哪些? A 发生在闭环双链DNA分子上 B DNA双链轴线高卷曲,与简单的环状相比,连接数发生变化 C 当DNA扭曲方向与双螺旋方向相同时,DNA变得紧绷,为正超螺旋,反之变得松弛为负超螺旋。自然界几乎所有DNA分子超螺旋都为负的,因为能量最低。 2.简述核酸的性质。 A 核酸的稳定性:由于核酸中碱基对的疏水效应以及电荷偶极作用而趋于稳定 B 酸效应:在强酸和高温条件下,核酸完全水解,而在稀酸条件下,DNA的核苷键被选择性地断裂生成脱嘌呤核酸 C 碱效应:当PH超出生理范围时(7-8),碱基的互变异构态发生变化 D 化学变性:一些化学物质如尿素,甲酰胺能破坏DNA和RNA二级结构中的 而使核酸变性。 E 粘性:DNA的粘性是由其形态决定的,DNA分子细长,称为高轴比,可被机械力和超声波剪切而粘性下降。 F 浮力密度:1.7g/cm^3,因此可利用高浓度分子质量的盐溶液进行纯化和分析 G 紫外线吸收:核酸中的芳香族碱基在269nm 处有最大光吸收 H 减色性,热变性,复性。 思考题:提取细菌的质粒依据是核酸的哪些性质? 质粒是抗性基因,,在基因组或者质粒DNA中用碱提取法。 Sectio C 课前提问 1.在1.5mL的离心管中有500μL,取出10 μL稀释至1000 μL后进行检测,测得A260=0.15。 问(1):试管中的DNA浓度是多少? 问(2):如果测得A280=0.078, .A260/A280=?说明什么问题? (1)稀释前的浓度:0.15/20=0.0075 稀释后的浓度:0.0075/100=0.75ug/ml (2)0.15/0.078=1.92〉1.8,说明DNA中混有RNA样品。 2.解释以下两幅图

分子生物学复习题

1、分子生物学的定义。 从分子水平研究生物大分子的结构与功能从而阐明生命现象本质的科学,主要指遗传信息的传递(复制)、保持(损伤和修复)、基因的表达(转录和翻译)与调控。 2、简述分子生物学的主要研究容。 a.DNA重组技术(基因工程) (1)可被用于大量生产某些在正常细胞代中产量很低的多肽 ; (2)可用于定向改造某些生物的基因组结构 ; (3)可被用来进行基础研究 b.基因的表达调控 在个体生长发育过程中生物遗传信息的表达按一定时序发生变化(时序调节),并随着外环境的变化而不断加以修正(环境调控)。 c.生物大分子的结构和功能研究(结构分子生物学) 一个生物大分子,无论是核酸、蛋白质或多糖,在发挥生物学功能时,必须具备两个前提: (1)拥有特定的空间结构(三维结构); (2)发挥生物学功能的过程中必定存在着结构和构象的变化。 结构分子生物学就是研究生物大分子特定的空间结构及结构的运动变化与其生物学功能关系的科学。它包括3个主要研究方向: (1) 结构的测定 (2) 结构运动变化规律的探索 (3) 结构与功能相互关系 d.基因组、功能基因组与生物信息学研究

3、谈谈你对分子生物学未来发展的看法? (1)分子生物学的发展揭示了生命本质的高度有序性和一致性,是人类认识论上的重大飞跃。生命活动的一致性,决定了二十一世纪的生物学将是真正的系统生物学,是生物学围所有学科在分子水平上的统一。 (2)分子生物学是目前自然学科中进展最迅速、最具活力和生气的领域,也是新世纪的带头学科。 (3)分子生物学是由生物化学、生物物理学、遗传学、微生物学、细胞学、以及信息科学等多学科相互渗透、综合融会而产生并发展起来的,同时也推动这些学科的发展。 (4)分子生物学涉及认识生命的本质,它也就自然广泛的渗透到医学、药学各学科领域中,成为现代医药学重要的基础。 1、DNA双螺旋模型是哪年、由谁提出的?简述其基本容。 DNA双螺旋模型在1953年由Watson和Crick提出的。 基本容: (1) 两条反向平行的多核苷酸链围绕同一中心轴相互缠绕,两条链均为右手双螺旋。 (2) 嘌呤与嘧啶碱位于双螺旋的侧,3′,5′- 磷酸与核糖在外侧,彼此通过磷

分子生物学期末复习试题及答案(可编辑修改word版)

一、名词解释 分子生物学:包括对蛋白质和核酸等生物大分子的结构与功能,以及从分子水平研究生命活动 RNA 组学:RNA 组学研究细胞中 snmRNAs 的种类、结构和 功能。同一生物体内不同种类的细胞、同一细胞在不同时间、不同状态下 snmRNAs 的表达具有时间和空间特异性。增色 效应: DNA 变性时其溶液 OD260增高的现象。 减色效应: DNA 复性时其溶液 OD260降低的现象。 T m:变性是在一个相当窄的温度范围内完成,在这一范围内,紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度称为 DNA 的 解链温度,又称融解温度(melting temperature, Tm)。其 大小与 G+C 含量成正比。 解链曲线:如果在连续加热 DNA 的过程中以温度对 A260 (absorbance,A,A260代表溶液在260nm 处的吸光率) 值作图,所得的曲线称为解链曲线。 DNA 复性:在适当条件下,变性 DNA 的两条互补链可恢复天然的双螺旋构象,这一现象称为复性。 核酸分子杂交:在 DNA 变性后的复性过程中,如果将不同 种类的 DNA 单链分子或 RNA 分子放在同一溶液中,只要两 种单链分子之间存在着一定程度的碱基配对关系,在适宜 的条件(温度及离子强度)下,就可以在不同的分子间形 成杂化双链,这种现象称为核酸分子杂交。 基因:广义是指原核生物、真核生物以及病毒的 DNA 和RNA 分子中具有遗传效应的核苷酸序列,是遗传的基本单位。狭义指能产生一个特定蛋白质的 DNA 序列。 断裂基因:不连续的基因称为断裂基因,指基因的编码序列在 DNA 上不连续排列而被不编码的序列所隔开。 重叠基因:核苷酸序列彼此重叠的2个基因为重叠基因, 或称嵌套基因。 致死基因:删除后可导致机体死亡的基因。 基因冗余:由于一基因在个体中有若干份拷贝,当删除其中一个时,个体的表型不发生明显变化。 DNA 重组:DNA 分子内或分子间发生遗传信息的重新组合,又称为遗传重组或基因重排。 同源重组:发生在同源序列间的重组称为同源重组,又称基本重组。 接合作用:当细胞与细胞、或细菌通过菌毛相互接触时,质粒 DNA 从一个细胞(细菌)转移至另一细胞(细菌) 的DNA 转移称为接合作用(conjugation)。 转化作用:通过自动获取或人为地供给外源 DNA,使细胞或培养的受体细胞获得新的遗传表型,称为转化作用(transformation)。 转导作用:当病毒从被感染的(供体)细胞释放出来、再次感染另一(供体)细胞时,发生在供体细胞与受体细胞之间的 DNA 转移及基因重组即为转导作用 位点特异重组:位点特异重组(site-specific recombination) 是由整合酶催化,在两个 DNA 序列的特异位点间发生的整合。 12-23规则:重组发生在间隔为12bp 到23bp 的不同信号序列之间,称为12-23规则。 转座子:(transposon)在基因中可以移动的一段 DNA 序列。 转座:由插入序列和转座子介导的基因移位或重排称为转座(transposition)。 克隆:来自同一始祖的相同副本或拷贝的集合。 DNA 克隆:应用酶学的方法,在体外将各种来源的遗传物质(同源的或异源的、原核的或真核的、天然的或人工的DNA)与载体DNA 接合成一具有自我复制能力的DNA 分子——复制子(replicon),继而通过转化或转染宿主细胞,筛选出含有目的基因的转化子细胞,再进行扩增提取获得大量同一 DNA 分子,也称基因克隆或重组 DNA (recombinant DNA)。 基因工程:(genetic engineering)实现基因克隆所用的方法及相关的工作称基因工程,又称重组DNA 工艺学。限制性核酸内切酶:(restriction endonuclease, RE) 是识别DNA 的特异序列, 并在识别位点或其周围切割双链 DNA 的一类内切酶。 同功异源酶:来源不同的限制酶,但能识别和切割同一位点,这些酶称同功异源酶。 同尾酶:有些限制性内切酶虽然识别序列不完全相同,但切割 DNA 后,产生相同的粘性末端,称为同尾酶。 载体:为携带目的基因,实现其无性繁殖或表达有意义的蛋白质所采用的一些 DNA 分子。 复制:(replication)是指遗传物质的传代,以母链 DNA 为模板合成子链 DNA 的过程。 半保留复制:(semi-conservative replication)DNA 生物合成时,母链 DNA 解开为两股单链,各自作为模板(template)按碱基配对规律,合成与模板互补的子链。子代细胞的 DNA,一股单链从亲代完整地接受过来,另一股单链则完全从新合成。两个子细胞的 DNA 都和亲代 DNA 碱基序列一致。这种复制方式称为半保留复制。 复制子:(replicon)DNA 分子中能独立进行复制的单位称为复制子。习惯上把两个相邻起始点之间的距离定为一个复制子。 复制眼:(replication eye)DAN 正在复制的部分在电镜下观察起来犹如一只眼睛,称为复制眼。 复制叉:(replication fork)复制一开始,复制起始点要形成一个特殊的叉型结构,是复制有关的酶和蛋白质组

现代分子生物学总结(朱玉贤、最新版)

现代分子生物学总结(朱玉贤、最新版)

一、绪论 两个经典实验 1、肺炎球菌在老鼠体内的毒性实验:先将光滑型致病菌(S型)烧煮杀活性以后、以及活的粗糙型细菌(R型)分别侵染小鼠发现这些细菌自然丧失了治病能力;当他们将经烧煮杀死的S型细菌和活的R型细菌混合再感染小鼠时,实验小鼠每次都死亡。解剖死鼠,发现有大量活的S型细菌。实验表明,死细菌DNA 进行了可遗传的转化,从而导致小鼠死亡。 2、T2噬菌体感染大肠杆菌:当细菌培养基中分别带有35S或32P标记的氨基酸或核苷酸,子代噬菌体就相应含有35S标记的蛋白质或32P标记的核酸。分别用这些噬菌体感染没有放射性标记的细菌,经过1~2个噬菌体DNA 复制周期后进行检测,子代噬菌体中几乎不含带35S标记的蛋白质,但含30%以上的32P 标记。说明在噬菌体传代过程中发挥作用的可能是DNA而不是蛋白质。 基因的概念:基因是产生一条多肽链或功能RNA分子所必需的全部核苷酸序列。

二、染色体与DNA 嘌呤嘧啶 腺嘌呤鸟嘌呤胞嘧啶尿嘧啶胸腺嘧啶 染色体 性质:1、分子结构相对稳定;2、能够自我复制,使亲、子代之间保持连续性;3、能指导蛋白质的合成,从而控制生命过程;4、能产生可遗传的变异。 组蛋白一般特性:1、进化上极端保守,特别是H3、H4;2、无组织特异性;3、肽链上氨基酸分布的不对称性;4、存在较普遍的修饰作用;5、富含赖氨酸的组蛋白H5 非组蛋白:HMG蛋白;DNA结合蛋白;A24非组蛋白

真核生物基因组DNA 真核细胞基因组最大特点是它含有大量的重复序列,而且功能DNA序列大多被不编码蛋白质的非功能蛋白质所隔开。人们把一种生物单倍体基因组DNA的总量称为C值,在真核生物中C 值一般是随着生物进化而增加的,高等生物的C 值一般大于低等动物,但某些两栖类的C值甚至比哺乳动物还大,这就是著名的C值反常现象。真核细胞DNA序列可被分为3类:不重复序列、中度重复序列、高度重复序列。 真核生物基因组的特点:1、真核生物基因组庞大,一般都远大于原核生物的基因组;2、真核基因组存在大量的的重复序列;3、真核基因组的大部分为非编码序列,占整个基因组序列的90%以上,这是真核生物与细菌和病毒之间的最主要的区别;4、真核基因组的转录产物为单顺反之;5、真核基因组是断裂基因,有内含子结构;6、真核基因组存在大量的顺式元件,包括启动子、增强子、沉默子等;7、真核基因组中存在大量的DNA多态性;8、真核基因组具有端粒结构。

医学分子生物学复习题(精)

分子生物学复习题 一、名词解释 1、 Northern Blot P40第九 2、 motif P12第七 3、 open reading frame,ORF P25第八 4、 secondary massager 5、 receptor P73第一 6、 probe 7、 vector P39第三 8、 Gene therapy P44第五 9、癌基因 P94第二 10、 Transgenic animal 11、不对称 PCR 12、多重 PCR 13、蛋白质变性 14、 Enhancer P32第三 15、 cis-acting elements 16、 molecular chaperone 17、 G protein P69第八

18、基因文库 P40第六 19、α-互补 P40第七 20、融合蛋白 21、 DNA 芯片(DNA chips P6第 14 22、 Anti-oncogene P94第三 23、 RFLP P5第四 24、 gene superfamily P5第二 25、 insertion sequence 26、 trans-acting factor P31第六 27、 housekeeping gene P31第四 28、转座子(transposon 29、 Klenow 片断 30、 Structural domain P12第 13 31、 S-D 序列 P25第 10 32、 cDNA 文库 P40第五 33、 Gene targeting 34、 Gene diagnosis P44第一 35、自杀基因 36、不对称转录

现代分子生物学复习题

一名词解释 1缺口(gap):DNA分子中,一条链上失去一段单链,称为gap。 切口(nick):DNA分子中,一条链上失去一个磷酸二酯键称为nick。 DNA hellicase (DNA解链酶):也叫DNA解螺旋酶,其通过水解ATP获得能量来解开双链DNA,每解开一对碱基,需水解2分子A TP→ADP+Pi(磷酸盐) 拓扑异构酶:细胞内一类催化DNA拓扑异构体(topoisomerase)相互转化的酶,其为topoisomerase,其与DNA双条链形成共价结合的Pr-DNA中间体,在DNA 双链骨架的3’,5’-磷酸二酯键处造成暂时的切口,使DNA的多聚核苷酸 链得以穿越,通过改变DNA的连接数,而改变的分子拓扑结构。 3 无义突变(nonsense mutation):DNA序列三联体密码子发生突变,导致AA密码子变为终 止密码子,称为无义突变,其导致翻译提前结束而常使产物失活 错义突变(missense mutation):DNA序列三联体密码子发生突变导致pr中原来的AA被另一种AA取代。 4 转座子:是存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。 DNA的转座:或称移位,是由可移位因子介导的遗传物质重排现象。 5转录单位:RNA链的转录起始于DNA模板的一个特定起点(启动子),并在一终点处(终止子)终止,此转录区域称为转录单位。一个转录单位可是一个基因,也可是多个基因。转录因子:RNA聚合酶起始转录需要的辅助因子称为转录因子。其作用或是认别DNA的顺式作用位点,或是识别其他因子,或是识别RNA聚合酶。 6 复制子:DNA的复制单位。 终止子(Terminator):模板DNA上提供转录停止信号得DNA序列。 7. 单顺反子mRNA:编码1条多肽链的mRNA RNA编辑:是某些RNA,特别是mRNA的一种加工方式,其改变RNA的序列,而导致DNA所编辑的遗传信息改变。 8 起始tRNA:有一类能特异的识别MRNA摸板上起始密码子的tRNA 多顺反子mRNA:编码多条多肽链的mRNA。 9 RNA的再编码(RNA recoding):mRNA在某些情况下不是以固定的方式被翻译,而可以 改变原来的编码信息,以不同的方式进行翻译,科学上把RNA编码和读码 方式的改变称为…… 同工tRNA:几种搬运相同AA的tRNA成为同工tRNA。 10通读(readthrough):有些纵止子的作用被特异的因子所阻止,使酶得以越过终止子继续转录,这种现象称为通读 10 翻译跳跃(translation jumping):翻译中读码框架发生位移,核糖体跳过一个碱基或一大段 mRNA(如50nt)后读继翻译。这一过程称tranlational jumping 1基因家族:真核生物基因中许多来源相同、结构相近、功能相关的基因按功能成套组合,这样的一组基因称为基因家族,其编码另一个蛋白质家族。 2拓扑异构酶:细胞内一类催化DNA拓扑异构体(topoisomerase)相互转化的酶,其为topoisomerase,其与DNA双条链形成共价结合的Pr-DNA中间体,在DNA双链 骨架的3’,5’-磷酸二酯键处造成暂时的切口,使DNA的多聚核苷酸链得以 穿越,通过改变DNA的连接数,而改变的分子拓扑结构。 3基因突变:指DNA的碱基顺序发生突然而永久性地变化,从而影响DNA的复制,并使DNA 的转录和翻译也跟着改变,因而表现出异常地遗传特征。 4 DNA的转座:或称移位,是由可移位因子介导的遗传物质重排现象。 5信号肽:在多肽链合成过程中,先合成的一段多肽序列,该序列引导后合成的多肽链进入

(完整版)分子生物学总结完整版

分子生物学 第一章绪论 分子生物学研究内容有哪些方面? 1、结构分子生物学; 2、基因表达的调节与控制; 3、DNA重组技术及其应用; 4、结构基因组学、功能基因组学、生物信息学、系统生物学 第二章DNA and Chromosome 1、DNA的变性:在某些理化因素作用下,DNA双链解开成两条单链的过程。 2、DNA复性:变性DNA在适当条件下,分开的两条单链分子按照碱基互补原则重新恢复天然的双螺旋构象的现象。 3、Tm(熔链温度):DNA加热变性时,紫外吸收达到最大值的一半时的温度,即DNA分子内50%的双链结构被解开成单链分子时的温度) 4、退火:热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性,称为退火 5、假基因:基因组中存在的一段与正常基因非常相似但不能表达的DNA序列。以Ψ来表示。 6、C值矛盾或C值悖论:C值的大小与生物的复杂度和进化的地位并不一致,称为C值矛盾或C值悖论(C-Value Paradox)。 7、转座:可移动因子介导的遗传物质的重排现象。 8、转座子:染色体、质粒或噬菌体上可以转移位置的遗传成分 9、DNA二级结构的特点:1)DNA分子是由两条相互平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成;2)DNA分子中的脱氧核苷酸和磷酸交替连接,排在外侧,构成基本骨架,碱基排列在外侧;3)DNA分子表面有大沟和小沟;4)两条链间存在碱基互补,通过氢键连系,且A=T、G ≡ C(碱基互补原则);5)螺旋的螺距为3.4nm,直径为2nm,相邻两个碱基对之间的垂直距离为0.34nm,每圈螺旋包含10个碱基对;6)碱基平面与螺旋纵轴接近垂直,糖环平面接近平行 10、真核生物基因组结构:编码蛋白质或RNA的编码序列和非编码序列,包括编码区两侧的调控序列和编码序列间的间隔序列。 特点:1)真核基因组结构庞大哺乳类生物大于2X109bp;2)单顺反子(单顺反子:一个基因单独转录,一个基因一条mRNA,翻译成一条多肽链;)3)基因不连续性断裂基因(interrupted gene)、内含子(intron)、外显子(exon);4)非编码区较多,多于编码序列(9:1) 5)含有大量重复序列 11、Histon(组蛋白)特点:极端保守性、无组织特异性、氨基酸分布的不对称性、可修饰作用、富含Lys的H5 12、核小体组成:由组蛋白和200bp DNA组成 13、转座的机制:转座时发生的插入作用有一个普遍的特征,那就是受体分子中有一段很短的被称为靶序列的DNA会被复制,使插入的转座子位于两个重复的靶序列之间。 复制型转座:整个转座子被复制,所移动和转位的仅为原转座子的拷贝。 非复制型转座:原始转座子作为一个可移动的实体直接被移位。 第三章DNA Replication and repair 1、半保留复制:DNA生物合成时,母链DNA解开为两股单链,各自作为模板(template)按碱

武汉大学分子生物学试卷

2002年 三、问答: 1、简述(或绘图说明)真核细胞RNA聚合酶II转录的起始需要哪些基本转录因子及其装配过程(15分) 2、简述(或绘图说明)色氨酸操纵子弱化的机制(15分) 3、在讨论基因家庭时经常提到胚胎、胎儿和成体形成的蛋白质,这些述语是指什么现象?可用什么术语来描述这一类基因家族(5分) 4、你正在进行Southern blot分析,并刚刚完成凝胶电泳部分,下一步是将胶浸泡在NaOH溶液中使DNA变性为单链,为了节约时间,你跳过这一步,直接把DNA从胶上转到硝酸纤维素膜上,你将标记好的探针与膜杂交,却发现放射自显影结果是一片空白,哪里错了呢?(5分) 2001年 三、问答题(50分) 1.说出双链DNA复制起始有关的五种重要的酶或蛋白并简述它们的功能。(15分) 2.简述增强子的特点和性质及作用机制。(10分) 3.简述真核RNA聚合酶II的转录起始复合物装配过程和转录起始(15分) 4. DNA限制性内切酶EcoRI是人们熟悉的常用内切酶,它是在大肠杆菌(E.coli)R株中发现的,它被广泛用于分子克隆操作和DNA分析。pUC质粒是常用克隆载体之一,它的多克隆位点上有EcoRI、BamHI、KpnI、HindIII等酶切点。假如要你把一段由EcoRI切割产生的外源DNA片段克隆到pUC质粒中,并把重组质粒转化大肠杆菌R株来扩增,已知条件是所用的R菌株中只有EcoRI一种限制性内切酶,你设计如何做才能确保成功?为什么?(10分)

2003年分子生物学 一。下列名词翻译成中文,并简要解释4*10 1.Domains and motifs 2. Alternative splicing 3.Reporter genes 4. The PCR cycle 5.Restriction mapping 6.Multiple cloning sites 7.DNA libraries 8.Proteomics 9.Replicon 10. semi-conservative replication 二。简答题8*5 总计40分 1. 请列举三种以上的蛋白质纯化技术,并说明不同技术的简单原理。 2. 说说DNA损伤与DNA突变之间的区别和相互关系。 3. 简述密码的简并性(degeneracy)和同义密码子(synonymous codon)及其在生物上的重要性。 4. 简述原核生物转录起始与转录终止过程中涉及到的主要蛋白质和核酸结构及其具体作用。 5. 简述cDNA文库的构建过程。 三。问答题(1-4每题15,5题10,总计70) 1. 人类基因组计划完成的社会意义和科学意义是什么? 2. 什么是操纵子(operon)?试说明色氨酸操纵子(Trp operon)在原核基因表达调控中的调控机制和重要作用。 3. 简要解释顺式作用元件与反式作用因子,并举二例说明他们的相互作用方式。 4. 试说明真核细胞与原核细胞在基因转录,翻译及DNA的空间结构方面存在的主要差异,表现在哪些方面? 5. 限制性核酸内切酶有哪几种类型?哪一种类型的限制酶最适合于基因工程,为什么?请简要说明理由。 2004年武汉大学硕士研究生入学考试分子生物学试卷 一名词翻译与解释 1synonymous codons 2RNA editing 3Spliceosome 4Microarray 5Plaque hybridization 6Open reading frame 7Ribozyme 8RFLP

分子生物学考研参考习题讲课教案

分子生物学考研参考 习题

分子生物学考研习题 一、名词解释 1.中心法则(Central Dogma) 2.反向重复序列(IR) 3.DNA链的呼吸作用 4.Cot曲线(Cot1/2) 5.DNA变性,复性 6.DNA的熔解温度(Tm) 7.基因组 8.C-值矛盾 9.基因家族 10.基因簇 11.割裂基因,Intron 内元,Exon 外元 12.卫星DNA 13.半保留复制 14.岗崎片段 15.复制单位replicon 16.复制体replisome 17.先导链,后随链 18.突变(mutation) 19.移码突变(frame-shift mutation) 20.无义突变(nonsense mutation),错义突变(missense mutation),同义突变(samesense mutation) 21.组成型突变(constitutive mutation) 22.突变热点(Mutation Hotpoint) 23.增变基因(mutator gene ) 24.限制-修饰系统(restriction and modificaion) 25.光裂合酶修复(photo reactivation Repair) 26.切除修复(Excision Repair) 27.重组修复(Recombinative—Repair) 28.SOS修复(SOS Repair) 29.转录(transcription) 30.有义链(sense strand) ,反义链(antisense strand) 31.启动子(promoter) 32.终止子(terminator) 33.核酶(ribozyme); 34.核内不均一RNA(hnRNA) 35.反式拼接(trans-splicing)

分子生物学总结完整版

分子生物学总结完整版 1、结构分子生物学; 2、基因表达的调节与控制; 3、DNA重组技术及其应用; 4、结构基因组学、功能基因组学、生物信息学、系统生物学 第二章DNA and Chromosome 1、DNA的变性:在某些理化因素作用下,DNA双链解开成两条单链的过程。 2、 DNA复性:变性DNA在适当条件下,分开的两条单链分子按照碱基互补原则重新恢复天然的双螺旋构象的现象。 3、 Tm(熔链温度): DNA加热变性时,紫外吸收达到最大值的一半时的温度,即DNA分子内50%的双链结构被解开成单链分子时的温度) 4、退火:热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性,称为退火 5、假基因:基因组中存在的一段与正常基因非常相似但不能表达的DNA序列。以Ψ来表示。 6、 C值矛盾或C值悖论:C值的大小与生物的复杂度和进化的地位并不一致,称为C值矛盾或C值悖论(C-Value Paradox)。 7、转座:可移动因子介导的遗传物质的重排现象。 8、转座子:染色体、质粒或噬菌体上可以转移位置的遗传成分

9、 DNA二级结构的特点:1)DNA分子是由两条相互平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成;2)DNA分子中的脱氧核苷酸和磷酸交替连接,排在外侧,构成基本骨架,碱基排列在外侧;3)DNA分子表面有大沟和小沟;4)两条链间存在碱基互补,通过氢键连系,且A=T、G ≡ C(碱基互补原则);5)螺旋的螺距为 3、4nm,直径为2nm,相邻两个碱基对之间的垂直距离为0、34nm,每圈螺旋包含10个碱基对;6)碱基平面与螺旋纵轴接近垂直,糖环平面接近平行 10、真核生物基因组结构:编码蛋白质或RNA的编码序列和非编码序列,包括编码区两侧的调控序列和编码序列间的间隔序列。特点:1)真核基因组结构庞大哺乳类生物大于2X109bp;2)单顺反子(单顺反子:一个基因单独转录,一个基因一条mRNA,翻译成一条多肽链;)3)基因不连续性断裂基因(interrupted gene)、内含子(intron)、外显子(exon);4)非编码区较多,多于编码序列(9:1) 5)含有大量重复序列1 1、Histon(组蛋白)特点:极端保守性、无组织特异性、氨基酸分布的不对称性、可修饰作用、富含Lys的H5 12、核小体组成: 由组蛋白和200bp DNA组成 13、转座的机制:转座时发生的插入作用有一个普遍的特征,那就是受体分子中有一段很短的被称为靶序列的DNA会被复

分子生物学复习题及其答案

一、名词解释 1、广义分子生物学:在分子水平上研究生命本质的科学,其研究对象是生物大分子的结构和功能。2 2、狭义分子生物学:即核酸(基因)的分子生物学,研究基因的结构和功能、复制、转录、翻译、表达调控、重组、修复等过程,以及其中涉及到与过程相关的蛋白质和酶的结构与功能 3、基因:遗传信息的基本单位。编码蛋白质或RNA等具有特定功能产物的遗传信息的基本单位,是染色体或基因组的一段DNA序列(对以RNA作为遗传信息载体的RNA病毒而言则是RNA序列)。 4、基因:基因是含有特定遗传信息的一段核苷酸序列,包含产生一条多肽链或功能RNA 所必需的全部核苷酸序列。 5、功能基因组学:是依附于对DNA序列的了解,应用基因组学的知识和工具去了解影响发育和整个生物体的特定序列表达谱。 6、蛋白质组学:是以蛋白质组为研究对象,研究细胞内所有蛋白质及其动态变化规律的科学。 7、生物信息学:对DNA和蛋白质序列资料中各种类型信息进行识别、存储、分析、模拟和转输 8、蛋白质组:指的是由一个基因组表达的全部蛋白质 9、功能蛋白质组学:是指研究在特定时间、特定环境和实验条件下细胞内表达的全部蛋白质。 10、单细胞蛋白:也叫微生物蛋白,它是用许多工农业废料及石油废料人工培养的微生物菌体。因而,单细胞蛋白不是一种纯蛋白质,而是由蛋白质、脂肪、碳水化合物、核酸及不是蛋白质的含氮化合物、维生素和无机化合物等混合物组成的细胞质团。 11、基因组:指生物体或细胞一套完整单倍体的遗传物质总和。 12、C值:指生物单倍体基因组的全部DNA的含量,单位以pg或Mb表示。 13、C值矛盾:C值和生物结构或组成的复杂性不一致的现象。 14、重叠基因:共有同一段DNA序列的两个或多个基因。 15、基因重叠:同一段核酸序列参与了不同基因编码的现象。 16、单拷贝序列:单拷贝顺序在单倍体基因组中只出现一次,因而复性速度很慢。单拷贝顺序中储存了巨大的遗传信息,编码各种不同功能的蛋白质。 17、低度重复序列:低度重复序列是指在基因组中含有2~10个拷贝的序列 18、中度重复序列:中度重复序列大致指在真核基因组中重复数十至数万(<105)次的重复顺序。其复性速度快于单拷贝顺序,但慢于高度重复顺序。 19、高度重复序列:基因组中有数千个到几百万个拷贝的DNA序列。这些重复序列的长度为6~200碱基对。 20、基因家族:真核生物基因组中来源相同、结构相似、功能相关的一组基因,可能由某一共同祖先基因经重复和突变产生。 21、基因簇:基因家族的各成员紧密成簇排列成大段的串联重复单位,定位于染色体的特殊区域。 22、超基因家族:由基因家族和单基因组成的大基因家族,各成员序列同源性低,但编码的产物功能相似。如免疫球蛋白家族。 23、假基因:一种类似于基因序列,其核苷酸序列同其相应的正常功能基因基本相同、但却不能合成功能蛋白的失活基因。 24、复制:是指以原来DNA(母链)为模板合成新DNA(子链)的过程。或生物体以DNA/RNA

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