猪肉中瘦肉精的检测

猪肉中瘦肉精的检测
猪肉中瘦肉精的检测

猪肉中瘦肉精的检测

摘要

鉴于盐酸克伦特罗(瘦肉精)在动物性食品中的残留对人体和国民经济造成了巨大的危害,本文介绍了动物肌肉组织中残留盐酸克伦特罗(瘦肉精) 的几种分析检测方法,并对未来的发展方向作了展望。

关键词:瘦肉精GC-MS HPLC ELISA

1 引言

瘦肉精是一类药物,而不是某一种特定的药物,任何能够促进瘦肉生长、抑制肥肉生长的物质都可以叫做“瘦肉精”。在中国,通常所说的瘦肉精是指克伦特罗(Clenbuterol,CLB)【1】,而普通消费者则把此类药物统称为瘦肉精。当它们以超过治疗剂量5—10倍的用量用于家畜饲养时,即有显著的营养“再分配效应”——促进动物体蛋白质沉积、促进脂肪分解抑制脂肪沉积,能显著提高胴体的瘦肉率、增重和提高饲料转化率,因此,β—受体激动剂被大量非法用于畜牧生产,其中最常用的有克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇等。长期食用含有β—受体激动剂残留的食品将对人体健康产生极大的危害,可诱发和加重心率失常病人的病情,引起心室早搏,四肢、脸、颈部骨骼肌震颤;另外还能引起代谢紊乱,对糖尿病人可发生酸中毒或酮中毒【2】。

盐酸克伦特罗(Clenbuteerol,CLB) ,又名克喘素、氨哮素、双氯醇胺,俗名瘦肉精,化学名为α—[ (叔丁氨基) 甲基]—4—氨基—3,5—二氯苯甲醇盐酸盐,分子式为C12 H18Cl12N2O?HCl ,相对分子质量为313.65。

目前,检测瘦肉精残留常用的色谱技术有高效液相色谱(HPLC)、气相色谱—质谱联用法(GC—MS)、高效液相色谱—质谱联用法(HPLC—MS) 、毛细管电泳法(CE)等。中国已将高效液相色谱法(HPLC)作为检测饲料中盐酸克伦特罗残留的半确证法,将GC—MS 法定为确证性方法,主要用于最后确认和仲裁。对于动物性食品,GB/T 5009.192—2003 “动物性食品中克伦特罗残留量的测定”规定的第一法为气相色谱—质谱法,第二法为高效液相色谱法,第三法为酶联免疫法。下面将会对这三种方法逐一进行说明,并简单介绍毛细管电泳法(CE)【3】。

2 动物性食品(猪肉)中盐酸克伦特罗的检测方法

2.1 气相色谱—质谱法(GC—MS)

GC—MS法优点是把色谱高效快速的分离效果和质谱高灵敏度的定性分析有机结合起来,能在多种残留物同时存在的情况下对某种特定的残留物进行定性、定量分析,而且具更高的检测极限。GC—MS法与HPLC法相比,检测灵敏度更高,假阳性率更低【4】。下面将以岛津公司采用的GC—MS法检测瘦肉精为例,对仪器与试剂的选择、样品的处理方法等方面进行介绍。

2.1.1仪器与试剂

仪器:岛津GCMS—QP2010 Plus;

试剂:盐酸克伦特罗(Clenbuterol,CLB)标准品,内标(Clenbuterol—D9,CLB—D9),N ,O—双三甲基硅基三氟乙酰胺(BSTFA),C18固相萃取小柱(100 mg,3 mL)标准溶液的配制:准确称取盐酸克伦特罗和内标的标准品,用甲醇配成浓度为1 mg/mL的标准储备液,放置于4℃冰箱中避光保存,使用时用甲醇稀释成1μg/mL的标准使用液和内标使用液。

2.1.2 分析条件

色谱柱:Rtx—5MS (30 m×0.25 mm×0.25 μm)

进样口温度:220℃

柱温程序:70℃(0.6 min)—25℃/min—220℃(6 min)—25℃/min—280℃(5 min) 恒线速度方式,柱流量0.9 mL/min

不分流进样,进样时间1 min

接口温度:280 ℃

离子源温度:200 ℃

溶剂切割时间:8 min

检测离子:

CLB:检测m/z 86,187,243,262,

CLB—D9:检测m/z 95,187,262

以克伦特罗(m/z86) 与内标峰(m/z 95) 的峰面积比校准定量。

2.1.3 样品制备

精密称取(2 ± 0.01) g 己绞碎的猪肉于具塞离心管中,加入4 mL 0.1 mol/L 盐酸溶液,旋涡振荡5 min,超声10 min,12000 r/min 离心5 min后,倾出上清液,沉淀再分别用0.1 mol/L 盐酸4 mL,2 mL 两次提取,提取方法同上,合并上清液。

将上清液全部上样至C18柱,用5 mL 水清洗小柱后,使用0.8 mL 甲醇:20 mmol/L 磷酸溶液=1:1(v/v)的酸化甲醇解析,加磷酸缓冲液调至pH=7,定容至2 mL。将该溶液以0.1 mL/min的流速推过聚(甲基丙烯酸-乙二醇二甲基丙烯酸酯)毛细管整体柱萃取后,用0.2 mL 的甲醇解析,加50 μL 的内标使用液后以氮吹仪浓缩至干。加入100 μL 甲苯和100 μLBSTFA,涡旋混匀30 s,置于微波炉中小火衍生5 min。衍生反应完成后取出冷却至室温后再加入300 μL 甲苯,充分混匀,待气质联用仪进样。

2.1.4 结论

该法在样品提取后,用C18小柱和聚(甲基丙烯酸-乙二醇二甲基丙烯酸酯)

整体柱进一步富集净化,经N ,O—双三甲基硅烷三氟乙酰胺(BSTFA) 衍生,选择离子监测方式进行气相色谱质谱测定。

该方法具有检测限低、重现性好、回收率高、样品用量少等特点,适合于猪肉样品中盐酸克伦特罗的定性、定量测定。但GC—MS的缺点是检测过程烦琐、检测时间长、需贵重仪器、难于操作、价格昂贵。

2.2 高效液相色谱法(HPLC) 【5】

HPLC适合测定热不稳定和强极性的β—激动剂及其代谢产物,而且HPLC 可以与柱前提取、纯化及柱后荧光衍生化反应和质谱(MS)等系统联用,容易实现分析过程的自动化。

HPLC 法【6】中常用的检测器有电化学检测器、紫外检测器。

2.2.1 材料与仪器

甲醇:色谱纯;

试验用水:均为超纯水;

其余试剂:均为分析纯;

盐酸克伦特罗标准品:中国药品生物制品检定所;

盐酸克伦特罗标准溶液:取盐酸克伦特罗标准品24. 98 mg置于25 mL容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,配成含盐酸克伦特罗1 mg/mL的标准贮备液,贮于冰箱中,不同浓度的系列标准溶液由标准储备液稀释而得;

Dionex AT330 (美国)高效液相色谱仪:由P680四元泵、UVD170U紫外检测器和AT330恒温箱组成;

超声波提取器( SB25200BTD) ;

离心机(6 000 r/min) ;

DSY22型电热恒温水浴锅。

2.2.2 色谱条件

色谱柱采用Diamonsil ODS2C18 柱( 5 μm,150 mm ×4. 6 mm I. D) ;检测波长为244 nm;流动相甲醇∶水=26 ∶74;流速1. 0 mL /min;柱温30 ℃;进样量20μL。

2.2.3 样品制备

取10 g绞碎肉试样,加0. 1 mol/L高氯酸20 mL 匀浆,超声提取20 min,80℃加热30 min,冷却后离心(4 000 r/min) 15 min。沉淀加0. 1 mol/L高氯酸5 mL洗涤、离心,将上清液合并,用1 mol/L氢氧化钠调pH至11,加入25 mL 乙醚,振荡提取20 min,回收有机相,再用20 mL乙醚重复萃取2次,合并有机相,蒸发至干。用0. 1 mol/L HC1溶解,纯水定容至10 mL。

2.2.4 结论

目前,中国已将HPLC法作为检测CLB残留的半确证性方法,最低检测限范围为1~15ng/g,其优点是专属性好、选择性强、检测精确度较高,而且假阳性率低,与GC—MS 法相比样品不必衍生【7】;缺点是样品处理时间长,检测过程烦琐、难于操作,需贵重仪器,在实际应用中受到一定的限制【8】。

2.3 酶联免疫吸附法(ELISA)

目前,检测CLB较高效的免疫分析技术是ELISA技术。早在1992年,Oriundi 就通过ELISA法对尿液和血清中的β—兴奋剂残留进行直接分析,该方法既适于实验室大量样品的检测,也适于屠宰场地少量样品的迅速检测【9】。目前,英国的Randox Laborato—ries Ltd和德国的r—biopharm公司均开发出了检测肉品、饲料中CLB残留的ELISA试剂盒。中国在应用EIA检测CLB方面的研究起步晚,但近几年取得了明显的进展,目前已有几种试剂盒研制开发成功【10】。

2.3.1 测定原理

“瘦肉精”(克仑特罗)竞争酶标免疫检测的基础是抗原抗体反应。酶联板的微孔包被有针对兔抗克仑特罗特异性抗体的羊抗体【11】(第2抗体)。加入兔抗克仑特罗特异性抗体(第1抗体)与第2抗体结合而被固定,洗涤后加入标准液或样品溶液与酶结合物(酶标记抗原),标准液或样品中的游离抗原与酶标抗原竞争兔抗克仑特罗特异性抗体上有限的结合位点【12】。通过洗涤除去没有与特异性抗体结合的酶标抗原,加入酶基质(过氧化脲)和发色剂(四甲基联苯胺)并孵育,结合到板上的酶标记物将无色的发色剂转化为蓝色的底物。加酸终止反应后,颜色由蓝色转变为黄色。【13】在单波长450纳米处测吸光度,吸收光强度与样品中的克仑特罗浓度成反比。

2.3.2 样品制备

取粉碎的肉样5克,与25毫升50 mmol/L HCl混合,振荡1.5小时。称6

克均质物,加入离心管中。10~15℃条件下4 000转/分钟或更高的转速离心15

分钟。转移上清液到另1个离心管中,加300微升1摩尔/升氢氧化钠混合15分钟。加入4毫升500毫摩尔/升磷酸二氢钾缓冲液(pH值3.0),简单混合,并在4℃保存至少1.5小时或过夜。10~15℃条件下4 000转/分钟或更高的转速离心15分钟。分离全部上清液,使其升至室温,然后用C18柱纯化【14】。

C18柱纯化样品必须在室温条件下,并严格控制过柱时流速。用3毫升甲醇洗涤柱子,控制流速为1滴/秒。用2毫升洗涤液(50毫摩尔/升磷酸二氢钾缓冲液pH值3.0)洗涤柱子。将肉样的全部上清液进柱,控制流速为每4秒1滴。用2毫升洗涤液,洗涤柱子,流速为1滴/秒。用正压除去残留的流体并用空气或氮气吹2分钟,干燥柱子。用1毫升甲醇洗脱样品,控制流速为每4秒1滴。在50~60℃并在弱空气或氮气流下完全蒸发甲醇溶剂【15】。用1毫升蒸馏水溶解干燥的残留物,取20微升进行分析。取10克饲料样品,用10毫摩尔/升盐酸溶解,连续震荡10分钟,用滤纸过滤,在滤液中加入120微升1毫摩尔/升氢氧化钠进行中和,检查pH值,用氢氧化钠控制pH值在6.5~7.5之间,取上清液20微升进行分析,稀释倍数为25。

2.3.3 测定步骤

所有试剂及样品在开始检测前必须回升至室温,测定操作在20~24℃下进行。用盒中缓冲液以体积1∶10的比例稀释实际用量的克仑特罗抗体浓缩液,稀释前混匀抗体,不要猛烈振荡。取出试验需要数量的微孔板条,足够标准品和样品,标准品和样品做2个平行试验,记录标准品和样品的位置。剩余的微孔板条放进原锡箔袋中并且与提供的干燥剂一起重新密封,2~8℃冷藏。

每个微孔底部加100微升稀释后的抗体溶液,室温孵育微孔板15分钟,避

免光线照射。孵育的同时进行酶标记物的稀释,洗板,甩出孔中液体,将微孔架倒置在吸水纸上拍打,直到纸上无明显水迹(拍打3次),以保证完全除去孔中的液体。

用250微升蒸馏水充入孔中,再次甩掉微孔中液体,并在吸水纸上拍打,重复操作2次。加洗涤水的移液器管尖必须置于微孔上方约0.5厘米处打出洗涤水,避免将板孔中的游离抗体带入洗涤水中。洗板后立即进行下步操作,不要让板孔干燥【16】。加入20微升标准品和处理好的样品到各自的微孔底部,标准品和样品做2个平行实验。加入100微升稀释的酶标记物至微孔底部,轻轻震荡微孔,并在桌面上作圆周运动以混匀。移液器管尖不要接触到孔中的混合物,避免交叉污染。室温孵育微孔板30分钟,避免放置,尽可能每隔10分钟轻轻振荡1次,准备好酶基质,并注意避光放置。

在洗板过程中加洗涤水的移液器置于微孔板上方0.5厘米处打出洗涤水,避免将板孔中的游离酶标记物带入洗涤水中。不要让板孔干燥,迅速加入100微升酶基质到每个孔中,操作步骤要迅速,避免反应时间相差过长。移液器管尖不要接触微孔中的混合物,避免交叉污染。室温暗处孵育微孔板15分钟,暗处避光放置,同时,准备好反应停止液。每孔加入100微升反应停止液,混匀,60分钟内用酶标仪测量450纳米处波长吸光度值【17】。

2.3.4 结论

ELISA的优点是灵敏度高、操作简便、检测迅速、价格便宜;缺点是仍不能实现现场检测,而且假阳性率高。

故而,ELISA方法只是一种大范围的筛选方法,它不能起到定性和定量的作用,检测结果出现可疑,可以用其他检测方法进行定性和定量分析。

2.4 毛细管电泳法(CE)【18】

毛细管电泳法(CE)非常适用于难以用传统的液相色谱法分离的离子化样品的分离与分析。优点是有很大的灵活性许多分离参数如缓冲液的组成和pH 值毛细管的类型以及所使用的电场的波形都可以调节,操作简便,所需样品量极少,一般只需几纳升。缺点是检测时间仍很长,不能满足在线检测,仪器复杂、缺乏配套的检测器

3 CLB检测技术的未来趋势和发展方向

当前,造成盐酸克伦特罗屡禁不止的原因之一就是国内外检测CLB 的方法、手段还不完善,还没有建立准确、迅速、方便、精确的检测方法。鉴于目前国内外检测CLB 各种方法的进展情况以及CLB 滥用及残留的严峻性,建立一种克服上述各种检测方法缺点的简便、快速、精确、可实现在线检测的CLB 技术势在必行。

生物传感器技术(Biosensor,BS) 【19】和滴金免疫技术(DIGFA)【20】是两种快速、高效的残留物分析技术,如能研究、开发运用到检测生物样品中CLB 的残留可能会产生理想的效果。

纳米材料是非常敏感的化学和生物传感器,固定有能选择性结合靶分子的生物探针的纳米传感器称为纳米生物传感器。它们能和生物芯片、免疫技术、标记技术等技术手段结合,从而使检测更加高效、简便。与液质联用分析克伦特罗的方法相比,基于碳纳米管的无标记电化学免疫传感器免除了样品分析前的固

相萃取及纯化步骤,使得操作方法更简便。与ELISA 法相比,该传感器同样具有样品处理简单及高能量的优点。此外,该传感器的方法很少受到基质效应的影响,或者至少比在ELISA 方法中的影响小【21】。

纳米金免疫标记技术,是蛋白质等高分子被吸附到纳米金颗粒表面的包被过程,由于金颗粒具有高电子密度的特性,在金标蛋白结合处,在显微镜下可见黑褐色颗粒,当标记物在相应的配体处大量聚集时,肉眼可见红色或粉红色斑点,用于定性或半定量的快速免疫检测方法中【22】。

可以预见的是,在未来一定会有更加灵敏、快捷、方便的检测方法问世,从而使猪肉中瘦肉精的检测问题得到彻底解决。

参考文献

【1】路平,肖肖,张衍海,王玉东,曲志娜,王娟,赵思俊,徐天刚,郑增忍,我国“瘦肉精”监管现状分析及对策建议,中国动物检疫,2011年第28卷第4期

[【2】丁芳林,张朝辉,谭胜国,廖三赛,高效液相色谱法测定猪肉中的盐酸克伦特罗的研究,食品与机械,2007年10月,第23卷第5

【3】张清安范学辉,动物性食品中盐酸克伦特罗( 瘦肉精) 残留危害及其检测方法研究进展,食品与发酵工业,2004 Vol. 30 No. 9 ( Total 201)

【4】柳显文,韩学颖,瘦肉精”检测原理及操作步骤,养殖技术顾问,2012年1月

【5】蒋剑,盛毅,方智,罗薇,瘦肉精检测方法研究进展,草食家畜(季刊),2012 年3 月第1 期(总第154 期)

【6】蒋珊;毛慧玲;;GC-MS法测定猪肝、猪尿中盐酸克伦特罗残留量

研究[J];安徽农业科学;2007年33期

【7】管月清,楚清脆,叶建农;肉制品中β-兴奋剂的毛细管电泳-电化学检测方法[J];华东师范大学学报(自然科学版);2005年02期

【8】裴艳涛,孙继国,林密,苏小庚;动物性产品中“瘦肉精”残留的检测方法研究进展[J];动物科学与动物医学;2004年01期

【9】刘维红;;动物产品中盐酸克伦特罗残留危害及检测方法[J];安徽农学通报(上半月刊);2009年23期

【10】李娜;祁克宗;;免疫分析法在兽药残留分析中的应用[J];动物医学进展;2006年02期

【11】董美玲;;畜牧兽医科技创新与“三农”问题[J];广东农业科学;2011年23期

【12】孙凌志,陈庆勋;“瘦肉精”猪肉的简易检验法[J];河南畜牧兽医;2002年02期

【13】刘国艳,柴春彦;如何全面认识“瘦肉精”[J];动物科学与动物医学;2002年06期

【14】秦永平,邹远高,梁茂植,王建新,黄英,余勤,李芚;反相高效液相色谱紫外检测法测定血浆中沙丁胺醇浓度[J];中国药学杂志;2000年07期

【15】宋广林;“瘦肉精”害人[J];中国食物与营养;2001年03期【16】张志刚;邹忠爱;;无公害猪肉安全控制模式探讨[A];福建省科协第六届学术年会卫星会议“增强科技创新能力,促进优质畜牧业发展”

研讨会论文集[C];2006年

【17】汪伟;食品安全之忧成就沈阳“天价猪肉”[N];粮油市场报;2011年

【18】杨正慧;气相色谱—质谱法检测β-受体激动剂残留量的方法研究[D];吉林大学;2012年

【19】陈瑞清;;液相色谱质谱联用技术及其在食品中兽药残留检测的应用[A];首届中国兽药大会动物药品学暨中国畜牧兽医学会动物药品学分会2008学术年会论文集[C];2008年

【20】谢静;;肉类食品中激素残留检测技术的研究[J];肉类研究;2009年11期

【21】李英;;我国动物源性食品安全保障战略[A];中国畜牧兽医学会2009学术年会论文集(下册)[C];2009年

【22】徐江涛;王志亮;鲍恩东;;新城疫检测技术研究进展[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会论文集[C];2005年

食品安全快速检测箱瘦肉精快速检测卡作业指导书

食品安全快速检测箱 瘦肉精快速检测卡作业指导书 1 目的 本作业指导书规定了瘦肉精快速检测卡的使用操作与维护程序,确保检测结果准确可靠。 2 适用范围 瘦肉精快速检测卡的使用。 3 依据 瘦肉精快速检测卡使用说明书。 4 职责 4.1操作人员按照本规程使用仪器,对仪器进行日常维护,作使用记录。 4.2保管人员负责监督仪器使用是否符合规程,对仪器进行定期维护、保养。 4.3科室负责人监督上述人员履行有关职责。 5 试剂组成 “瘦肉精”快速检测卡;展开液;一次性塑料吸管;一次

性塑料手套;对照液。 6 标本收集 肉及内脏样本(包括精肉、肝脏、肺脏和肾脏)立即检测或收集在塑料袋中送检。若不能及时检测,样本在2-8℃冷藏可保存24小时,-20℃冷冻保存1周,冷冻时忌反复冻融。 7 操作步骤以及结果判读 ⑴测试前将未开封的检测卡恢复至室温。 ⑵将瘦肉或内脏样本剪碎,装入1.5ml离心管中,盖紧管盖。放入沸水浴中加热5分钟以上使有液汁浸出,取出离心管放至室温。 ⑶从铝箔袋中取出检测卡(在一小时内使用)。 ⑷将检测卡平放于台面,用塑料吸管垂直滴加1滴无气泡的样本渗出液(约20-30ul)于加样孔,30秒后再加入展开液2-3滴(约60-80ul)。 ⑸反应10min后,展开区出现紫色条带为阴性结果,无条带者为阳性结果。

注意事项: ⑴检测卡在室温下一次性使用。 ⑵脂肪会导致假阳性结果,取样时请弃去肉眼可见的脂肪部分。 ⑶检测时避免阳光直射。 ⑷出现阳性结果,应用本卡复查并作阳性对照实验。必要时送实验室进一步定量。 ⑸附带的瘦肉精阳性对照液为5ng/ml。 8 仪器维护 8.1 仪器使用人员应做好仪器的日常维护并认真填写使用记录。 8.2 仪器出现故障应联系相关部门,不可擅自拆

瘦肉精介绍

精 细 化 工 作 业 学号:100506208 姓名:郭孟飞 班级:生化二班 日期:2012年6月1日

瘦肉精——盐酸克伦特罗的相关研究 郭孟飞 (焦作大学化工与环境工程学院,焦作454000) 摘要:应用盐酸克伦特罗作饲料添加剂来提高瘦肉率和减少脂肪沉积,曾经是一种有效的方法,但近年来研究证明它对动物和人体有残留危害。欧美已禁用此药,我国政府也明令禁止生产、销售、使用盐酸克伦特罗药物,但仍有少数生产厂家在进行违法操作。本文就盐酸克伦特罗的结构、残留危害、检测方法等相关内容的介绍,让人们对盐酸克伦特罗有一个更清晰的认识。 关键词:克伦特罗;残留危害;相关内容 1.克伦特罗的相关内容介绍 瘦肉精是一类药物,而不是某一种特定的药物,任何能够促进瘦肉生长、抑制肥肉生长的物质都可以叫做“瘦肉精”。在中国,通常所说的瘦肉精是指克伦特罗(Clenbuterol)。盐酸克伦特罗,是一种平喘药。该药物既不是兽药,也不是饲料添加剂,而是肾上腺类神经兴奋剂。盐酸双氯醇胺;克喘素;氨哮素;氨必妥;氨双氯喘通;氨双氯醇胺。克伦特罗在家畜和人体内吸收好,而且与其它β-兴奋剂相比,它的生物利用度高,以至食用了含有克伦特罗的猪肉出现中毒。自2002年9月10起在中国境内禁止在饲料和动物饮用水中使用盐酸克伦特罗。 1.1理化性质 物理性质 外观与性状:白色或类白色的结晶粉末,无臭、味苦。熔点:174~175.5°C分子式:C12-H18-Cl3-N2-O分子量:313.7溶解性:溶于水、乙醇,微溶于丙酮,不溶于乙醚。 化学性质 分子式:C12-H18-Cl2-N2-O 盐酸克伦特罗结构简式 盐酸克伦特罗属于中度蓄积性药物,在动物组织内的蓄积与其剂量和给药持续时间有关,其残留量随停药期的延长逐渐下降。大量试验已证明盐酸克伦特罗在动物体内的残留主要集中在眼睛、毛发、肺、肝、肾及肌肉和脂肪组织。其中眼睛的视网膜和脉络膜、毛发中残留最高,是因为其消除最慢;其次是肺、肝和肾;肌肉组织和脂肪组织中的残留情况大致相当,约为肝脏中的1/5。克伦特罗在肺、肝脏中的残留高于肾脏,且残留时间较长。 1.2毒理简介

瘦肉精检测方法

目前,检测瘦肉精的方法主要有四种,即高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱一质谱法(GC -MS)、毛细管区带电泳法(CE)和免疫分析技术(IA)。而我国结合自己的实际情况,2001年农业部首先组织制定了饲料中盐酸克伦特罗的测定标淮。该标准选择确定了两种:即高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱一质谱法(GC-MS)。其中将HPLC法作为检测瘦肉精的半确证性方法,其最低检测限为0.05μg/kg,优点是检测精确度高,而且假阳性率低;缺点是检测过程烦琐、检测时间长,需贵重仪器、难于操作、价格昂贵。而GC一MS法优点是能在多种残留物同时存在的情况下对某种特定的残留物进行定性、定量分析。GC-MS 法与HPLC法相比,检测灵敏度更高,假阳性率更低,已将GC-MS法定为检测瘦肉精的确证性方法。GC-MS法的缺点同HPLC相似。 (1)试剂和材料以下所有试剂,除特别注明外,均为分析纯试剂;水为符合GB/T6682规定的二级水。 ①盐酸克伦特罗对照品:含盐酸克伦特罗不得少于98.5% ②盐酸 ③无水甲醇 ④氢氧化钠 ⑤磷酸二氢钾 ⑥磷酸 ⑦盐酸溶液取盐酸4.2ml,加水至1000ml,即得。 ⑧o.5mol/L磷酸二氢钾溶液取磷酸二氢钾68g,加水800ml溶解并用磷酸调pH值至3.O,用水稀释至1000ml,即得。 ⑨0.05mol几磷酸二氢钾溶液取磷酸二氢钾6.88,加水800ml溶解并用磷酸调pH 值至3.0,用水稀释至1000mi,即得。 a.氢氧化钠溶液取氢氧化钠48,加水使溶解成100mi,即得。 b.盐酸克伦特罗对照品储备液(1mg/mi) 准确称取28.3mg盐酸克伦特罗对照晶至25ml量瓶中,用甲醇溶解并稀释至25ml,一20~C以下保存,有效期1年。 ⑩盐酸克伦特罗对照品工作液(10ttg/mi) 取lmg/mi储备液o.5ml到50mi量瓶中,加水至50mi,2~8~C保存,有效期1个月。 ⑾盐酸克伦特罗对照溶液(100ng/m1) 取1(ug/m1工作液o.5ml到:50mi量瓶中水至50mi,2~8~C保存,有效期1个月。 ⑿盐酸克伦特罗检测试剂盒(2~8~C冰箱中保存) ⒀固相萃取柱C,s:100mglml含碳量≥17% (2)仪器和设备 ①酶联免疫反应读数仪 ②分析天平精度0.00001g ③天平精度0.01g ④冷冻离心机 ⑤50mi具塞离心管 ⑥匀浆机 ⑦微型振荡器 ⑧回旋振荡器 ⑨微量移液器单道20uL,50ul,100uL;多道50~250uL, ⑩干热浓缩器

瘦肉精快速检测

瘦肉精快速检测

瘦肉精快速检测 2011年04月20日11:00 阅读次数:13 来源:食品安全快速检测网 [字号:大中小] 瘦肉精是一类药物,而不是一种特定的物质,是指能够促进瘦肉生长的饲料添加剂。任何能够促进瘦肉生长、抑制肥肉生长的物质都可以叫做“瘦肉精”。 目前,能够实现这种功能的物质是一类叫做β-兴奋剂(β-agonist)的药物,比如在中国造成中毒的克仑特罗(clenbuterol)和美国允许使用的莱克多巴胺/又译雷托巴胺(Ractopamine)。 瘦肉精在上海曾经引发了几百人的中毒事件。而在台湾,由于从美国进口的猪肉里含有瘦肉精,几乎挑起一场政治争端。由于西方国家一般不消费动物内脏(猪肉一般不含瘦肉精,但内脏特别是肝脏则会残留瘦肉精),因而在美国、加拿大、新西兰等国,瘦肉精这类物质的使用是合法的。其它这样类似药物还有沙丁胺醇(Salbutamol)和特布他林(erbutaline)等,同样能起到“瘦肉”作用、却对人体健康危害过大,因而造成安全隐患。它们也因而在全球遭到禁用。 早在2002年,农业部、卫生部、国家食品药品监督管理局就公告,明令禁止在饲料和动物饮用水中添加盐酸克伦特罗和莱克多巴胺等7种瘦肉精。而据有关专业人士透露,各地在进行瘦肉精检测中基本都只检测盐酸克伦特罗,莱克多巴胺只有个别地方有检测。而正因为如此,一些不法养殖户就选择回避盐酸克伦特罗,改用莱克多巴胺等其他品种的瘦肉精。 为了较彻底排查检测“瘦肉精”,最好检测盐酸克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇三种“瘦肉精”。 排查常用的方法是胶体金快速检测卡法,该方法操作方便、快捷,整个检测过程只需几分钟;检测灵敏度高;结果直观;胶体金本身为红色,不需加入发色剂,对人体无害;标记物稳定,携带、储存方便;成本低,无需仪器设备。非常适合于基层执法部门对“瘦肉精”的快速筛查。 胶体金速测卡原理: 胶体金速测卡的检测原理是竞争性免疫层析。将着色标记物与待测抗原的特异性抗体(Ab1)相偶联,沉积在结合区。而检测区处固相化的是待测抗原或待测抗原的类似物。若样品中含有待测抗原,则样品中的抗原和带有标记物的Ab1形成Ag-Ab1复合物。随后在通过固相化有待测抗原或其类似物的检测区时,由于竞争抑制,不再发生反应,检测线处不显色;样品继续前移, Ag- Ab1 复合物被固相化在质控线处的抗Ab1 抗体(Ab2)所结合,形成Ab1- Ag- Ab2 复合物,使质控线显色。 食品安全快速检测技术研究中心根据此原理成功研发出盐酸克伦特罗速测卡、莱克多巴胺速测卡和沙丁胺醇速测卡,为基层执法部门对“瘦肉精”的快速筛查提供了简便、快捷、经济、适用的快速检测手段。 瘦肉精快速检测法-盐酸克仑特罗快速检测卡 2011年04月11日16:44 阅读次数:6 [字号:大中小] 盐酸克仑特罗(瘦肉精)速测卡使用说明书

食品添加剂之“瘦肉精” 阅读附答案

食品添加剂之“瘦肉精”阅读附答案 食品添加剂之瘦肉精 瘦肉精是个什么东西?学名叫一肾上腺能受体激动剂类化合物,包括盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇等十几种物质。很多这类化合物都是人用药,治哮喘病的,临床上广泛使用。 上世纪80年代初,美国学者发现动物喂盐酸克伦特罗,可提高瘦肉率和饲料转化率,经济效益好。后来,美国又研究出毒性小、代谢快的替代品莱克多巴胺,只要严格掌握剂量、执行停药期规定,几乎不会在动物体内残留。美国、加拿大、墨西哥等20多个国家先后批准将莱克多巴胺用于猪、牛、羊等动物养殖。不过,各国也制定了严格的残留限量。 上世纪90年代初,瘦肉精引入我国。但后来发现,不当使用瘦肉精,残留超标,危害人体健康,特别是盐酸克伦特罗容易引起中毒,会产生头晕、心悸、肌肉震颤、呼吸急促。我国随即对瘦肉精说不。2002年,农业部会同卫生部、国家药监局联合发布瘦肉精禁用目录,包括盐酸克伦特罗、莱克多巴胺等7种物质。最高人民法院和最高人民检察院明确了非法生产、销售、使用瘦肉精的量刑依据。 饲喂瘦肉精的猪,瘦肉多,颜色红,卖相好。一些屠宰场和猪贩子高价收购,养殖户使用很简便,抓把药面搅进饲料里就得。而且,还有深厚的背景原因:一是生产经营高度分散,目前全国有生猪养殖场户6000多万个,其中年出栏500头以上的只占约30%,大部分是小猪场、散户养,监管难度大,违法成本低。二是长期以来我国农业的首要任务是保障农产品数量安全,农业基础设施、产业体系和技术体系大多围绕增产建立,而质量安全保障体系建设明显滞后。 瘦肉精的引入、应用到禁止,本身就折射出我国农业发展转型升级的轨迹。再比如农药兽药残留问题、植物生长调节剂问题,这都是温饱有余之后遇到的新矛盾。 (摘自《人民日报》2011年5月26日,有改动) 1.本文的说明对象是什么?试用简洁的语言概括本文的说明内容。(3分)2.任意列举文中所运用的一种说明方法,并指出其在文中的作用。(2分)答案: 1.瘦肉精。示例:本文先说明什么是瘦肉精,再说明瘦肉精的发现、引入、使用与禁止。(意思相近即可) 2.示例1:列数据。如:目前全国有生猪养殖场户6000多万个,其中年出栏500头以上的只占约30%,大部分是小猪场、散户养,监管难度大,违法成本低。具体准确地说明了生产经营高度分散。 示例2:作诠释。如:瘦肉精是个什么东西?学名叫肾上腺能受体激动剂类化合物,包括盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇等十几种物质。具体准确地解释了瘦肉精所包含的物质。(能说明一种说明方法及作用即可)

瘦肉精宣传材料

瘦肉精宣传材料 一、问:什么是“瘦肉精”? 答:“瘦肉精”一般指盐酸克伦特罗,化学名称叫“羟甲基叔丁肾上腺素”,临床上可治疗支气管哮喘、阻塞性肺炎、平滑肌痉挛等病。该药物既不是兽药,也不是饲料添加剂,而是肾上腺类神经兴奋剂。目前出现一种新型瘦肉精,指莱克多巴胺。 国内某些养猪户不顾国家的禁令,在饲料中掺入瘦肉精。猪食用后在代谢过程中促进蛋白质合成,加速脂肪的转化和分解,提高了猪肉的瘦肉率,因此称为瘦肉精。 二、问:“瘦肉精”对人体有什么危害? 答:为提高瘦肉率而非法在饲料中加入瘦肉精,导致瘦肉精在猪体内的残留量很大。人食用含瘦肉精的猪肉,就使人体渐渐地积蓄而中毒。如果人体一次摄入量过大,就会导致急性中毒。 三、问:食用含“瘦肉精”的猪肉中毒后有什么症状和危害? 答:急性中毒出现肌肉震颤、头晕、呕吐、腹泻、心跳过速和神经紊乱等症状,严重的会危及生命。对于患有高血压、心脏病的人来说危险性极大。 四、问:哪个部位含“瘦肉精”最多? 答:“瘦肉精”残留最高的部位是猪的眼睛和毛发,其次是猪的肝、肺、肾和骨髓等器官。 五、问:食用含“瘦肉精”的猪肉中毒后怎办? 答:立即到医院就诊,向医生说明情况;同时向卫生监督部门报告。 六、问:通过炒、煮等烹调方法能除去猪肉中的瘦肉精吗? 答:“瘦肉精”在172℃以 上的高温才会分解,而普通的烹调方法根本达不到这么高的温度,即不能通过炒、煮等方法除去猪肉中的“瘦肉精”。 七、问:如何鉴别含“瘦肉精”猪肉? 答:一般来说,含瘦肉精的猪肉颜色会更加鲜艳,后臀肌肉饱满突出,而且肥肉的厚度比较薄(正常猪肉肥肉的厚度在1到2厘米)。但肉眼是不容易鉴别猪肉中是否含有瘦肉精的。 八、问:如何避免采购含有瘦肉精的猪肉? 答:1、通过正规途径采购。即从依法取得生产、销售行政许可的组织或个人处采购。同时可与供应商签订供货合同,规定双方的责任与义务等。 2、采购时向供货商索取“双证”,即“产品检疫合格证明”及“肉品品质检验合格证”。 3、采购时索取交易凭证,如发票、收据、送货单等凭证,凭证上应有供货

瘦肉精快速检测方法

????????????????????????????????????????????????????????????????????????既快速又精确 目前检测瘦肉精的方法有以下几种,胶体金快检卡是最快速简单的一种方法,适用于多种流通领域和各种实验室 ??一."瘦肉精"快速检测新方法初获成功盐酸克伦特罗(俗称瘦肉精),是一种饲料添加剂,能改进脂肪性动物肉和脂肪的比例,加速动物生长,但是它能够长期残留在动物体内,一般的烹饪加热不能将其消除。人们一旦食用了含有瘦肉精残留的动物性食品,便会对人们的健康造成严重危害。目前已有的快速检测方法(试剂条等),均不能定量,而定量的检测手段,大都依赖于酶联免疫(ELLSA)和高效液相色谱(HPLC)等技术,这些方法有些步骤繁琐,非常耗时,有些则需要昂贵的仪器和熟练的操作人员,并且都不能实时地监视动态反应过程等。 研制的HPSPR-6000表面等离子共振生物分析仪用于盐酸克伦特罗快速检测,有效地克服了现有方法的缺点,其优点有:(1)盐酸克伦特罗的最低检出限约为1.0ppb,接近和达到了高效液相色谱和酶联免疫等现行的方法的检出限(0.05~1.0ppb);(2)

每个样品检测时间为?10min,与目前常规方法最低需要2~3h相比,检测时间缩短10倍以上;(?3)样品前处理简单、免标记;(?4)能够实时监控相互作用分子的结合、解离等动力学信息。 二.快检卡:猪肉方面,目前使用胶体金试纸,只需要取一些猪肉样品,放在离心管中,在水浴中煮10分钟,将煮出的汁液加同样体积的配套缓冲液,混匀,用于检测即可,几个ppb(μg/Kg,ng/g)的瘦肉精就能被测出。北京华安麦科生物技术有限公司自主研发生产的瘦肉精类快检卡可的检出限可达到1ppb,全程只需十几分钟。 ?盐酸克伦特罗(瘦肉精)快速检测试剂盒采用间接竞争酶联免疫吸附法,在微孔条上预包被克仑特罗的单抗,克仑特罗的标准品(或样本中的残留物克仑特罗胺药物)与酶标记克仑特罗抗原竞争结合包被的莱克多巴胺抗体,酶标记物放大信号后,加入底物显色,终止液终止反应,酶标仪450nm测定其吸光值。样本的吸光值与其所含残留物克仑特罗药物的含量成负相关,与标准曲线比较即可得出相应克仑特罗药物的含量。 ?“瘦肉精” 1ng/ml,检测

《食品添加剂之“瘦肉精”》阅读理解及答案

2013年中考说明文阅读题精选:食品添加剂之“瘦肉精” 阅读下面选段,完成后面题目。(5分) 食品添加剂之“瘦肉精” “瘦肉精”是个什么东西?学名叫β一肾上腺能受体激动剂类化合物,包括盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇等十几种物质。很多这类化合物都是人用药,治哮喘病的,临床上广泛使用。 上世纪80年代初,美国学者发现动物喂盐酸克伦特罗,可提高瘦肉率和饲料转化率,经济效益好。后来,美国又研究出毒性小、代谢快的替代品——莱克多巴胺,只要严格掌握剂量、执行停药期规定,几乎不会在动物体内残留。美国、加拿大、墨西哥等20多个国家先后批准将莱克多巴胺用于猪、牛、羊等动物养殖。不过,各国也制定了严格的残留限量。 上世纪90年代初,“瘦肉精”引入我国。但后来发现,不当使用“瘦肉精”,残留超标,危害人体健康,特别是盐酸克伦特罗容易引起中毒,会产生头晕、心悸、肌肉震颤、呼吸急促。我国随即对“瘦肉精”说“不”。2002年,农业部会同卫生部、国家药监局联合发布瘦肉精禁用目录,包括盐酸克伦特罗、莱克多巴胺等7种物质。最高人民法院和最高人民检察院明确了非法生产、销售、使用瘦肉精的量刑依据。 饲喂瘦肉精的猪,瘦肉多,颜色红,卖相好。一些屠宰场和猪贩子高价收购,养殖户使用很简便,抓把药面搅进饲料里就得。而且,还有深厚的背景原因:一是生产经营高度分散,目前全国有生猪养殖场户6000多万个,其中年出栏500头以上的只占约30%,大部分是小猪场、散户养,监管难度大,违法成本低。二是长期以来我国农业的首要任务是保障农产品数量安全,农业基础设施、产业体系和技术体系大多围绕增产建立,而质量安全保障体系建设明显滞后。 瘦肉精的引入、应用到禁止,本身就折射出我国农业发展转型升级的轨迹。再比如农药兽药残留问题、植物生长调节剂问题,这都是温饱有余之后遇到的新矛盾。 (摘自《人民日报》2011年5月26日,有改动) 18.本文的说明对象是什么?试用简洁的语言概括本文的说明内容。(3分) ______________________________________________________________________________ _ 19.任意列举文中所运用的一种说明方法,并指出其在文中的作用。(2分) _______________________________________________________________________________ 18. “瘦肉精”。示例:本文先说明什么是“瘦肉精”,再说明“瘦肉精”的发现、引入、使用与禁止。(意思相近即可) 19. 示例1:列数据。如:“目前全国有生猪养殖场户6000多万个,其中年出栏500头以上的只占约30%,大部分是小猪场、散户养,监管难度大,违法成本低。”具体准确地说明了生产经营高度分散。 示例2:作诠释。如:“‘瘦肉精’是个什么东西?学名叫β—肾上腺能受体激动剂类化合物,包括盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇等十几种物质。”具体准确地解释了“瘦肉精”所包含的物质。(能说明一种说明方法及作用即可)

瘦肉精相关检测标准汇总

瘦肉精相关检测标准汇总 央视曝光双汇济源分公司收购含“瘦肉精”猪肉,瘦肉精再次引起人们的关注,因此汇总整理出瘦肉精相关检测标准,供大家参考。 GB/T5009.192-2003动物性食品中克伦特罗残留量的测定 本标准规定了动物性食品中克伦特罗的测定方法。本标准适用于新鲜或冷冻的畜、禽肉与内脏及其制品中克伦特罗残留的测定。本标准也适用于生物材料(人或动物血液、尿液)中克伦特罗的测定。本方法检出限:第一法气相色谱—质谱法为0.5μg/kg;第二法高效液相色谱法为0.5μg/kg;第三法酶联免疫法为0.5μg/kg。线性范围:第一法气相色谱—质谱法为0.025ng~2.5ng;第二法高效液相色谱法为0.5ng~4ng;第三法酶联免疫法为0.004ng~0.054ng。 GB/T20189-2006饲料中莱克多巴胺的测定高效液相色谱法 本标准规定了检测动物饲料中莱克多巴胺含量的高效液相色谱(HPLC)方法。本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和添加剂预混合饲料中莱克多巴胺含量的测定。 GB/T21036-2007饲料中盐酸多巴胺的测定高效液相色谱法 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和预混合饲料中盐酸多巴胺含量的测定。 GB/T22147-2008饲料中沙丁胺醇、莱克多巴胺和盐酸克仑特罗的测定液相色谱质谱联用法 本标准规定了同步测定饲料中β-激动剂沙丁胺醇、莱克多巴胺和盐酸克仑特罗的液相色谱质谱联用法。 GB/T21313-2007动物源性食品中β-受体激动剂残留检测方法 液相色谱-质谱/质谱法 本标准规定了β-受体激动剂类兽药残留检测的制样方法和高效液相色谱/质谱确证方法。本标准适用于猪肉、猪肝、猪肾等动物源性食品以猪屎中克伦特罗、沙丁胺醇、妥布特罗、特布它林、非诺特罗、福莫特罗、莱克多巴胺、异丙喘宁等8种β-受体激动剂类残留量的高效液相色谱-质谱/质谱测定。

瘦肉精检测原理及操作步骤37条必备知识

瘦肉精检测原理及操作步骤37条必备知识 ?瘦肉精检测原理及操作步骤? 0 个回复 - 71 次查看 一、测定原理 “瘦肉精”克仑特罗竞争酶标免疫检测方法快速测 定的基础是抗原抗体反应。酶联板的微孔包被有针对兔抗克仑特罗特异性抗体的羊抗体(第二抗体)。加入兔抗克仑特罗特异性抗体(第一抗体)与第二抗体 ... 2011-6-3 18:10 - 畜牧联盟010 - 兽药应用 ?广元市加强禽流感、瘦肉精等监测工作 0 个回复 - 75 次查看 全市畜牧系统按照食品质量安全执法年活动要求,在加强日常畜产品质量安全监管的同时,进一步加强了在节假日、庆典活动等重点时段畜产品的质量安全检测工作。近日,我市开展了禽流感、口蹄疫等重大动物疫病、瘦肉精、 ... 2011-6-3 18:03 - 畜牧联盟003 - 兽药应用 ?辽宁猪牛“瘦肉精”抽检全部合格 0 个回复 - 108 次查看 为切实加强元旦、春节期间畜产品质量安全监管,保障广大人民群众消费安全,辽宁省动物卫生监督管理局组织省、市畜产品质量检测机构,于2008年12月19日~29日在全省14个市开展了猪肉、牛肉中“瘦肉精”及其替代 ... 2011-6-3 18:00 - 畜牧联盟004 - 兽药应用 ?瘦肉精超标同批生猪要“连坐” 0 个回复 - 51 次查看 《广州市生猪屠宰检疫和违禁药物检测实施办法》下月20日正式施行本报讯(记者严慧芳)同批检验的生猪,经酶联免疫吸附测定法检测发现有不合格样品的,将判定此检验批的生猪不合格。昨日,记者从广 ...

2011-6-3 17:52 - 畜牧联盟004 - 兽药应用 ?瘦肉精 0 个回复 - 28 次查看 克伦特罗是一种β-兴奋剂,添加于饲料中能提高几种家畜包括猪的瘦肉率。克伦特罗在家畜和人体内吸收好,而且与其它β-兴奋剂相比,它的生物利用度高,以至食用了含有克伦特罗的猪肉出现中毒。zimmer(19 ... 2011-6-3 17:45 - 畜牧联盟006 - 兽药应用 ?山东肉羊在河北被检出瘦肉精 198只羊被封存 0 个回复 - 182 次查看 198只羊被封存两名嫌疑人被控制 4日晚,山东省庆云县召开新闻通报会表示,在输冀肉羊发现“瘦肉精”以后,庆云县迅速侦破案件,将两名违法嫌疑人控制,同时对全县畜产品质量安全进行拉网检查。河北 ... 2011-6-3 12:56 - 畜牧联盟007 - 行业动态 ?瘦肉精使用向牛羊养殖扩散防范形势严峻 0 个回复 - 140 次查看 据中国之声《央广新闻》13时19分报道,元旦和春节将至,肉类食品需求旺盛,违法使用瘦肉精问题又有所抬头。为此,农业部要求以瘦肉精等违禁药物为重点,加大对生猪、肉牛养殖的监管力度,确保畜产品质量安全。据 ... 2011-6-3 12:35 - 畜牧联盟002 - 行业动态 ?山东流入河北省青县的“瘦肉精”肉羊已销毁 0 个回复 - 8 次查看 从河北省畜牧兽医局获悉,由山东流入我省的192只“瘦肉精”肉羊,目前已被全部扑杀并无害化处理。 3月31日晚,从山东省庆云县流入我省青县戴庄子村肉羊192只。根据群众举报,这批羊可能存在问题。4月1日凌 ... 2011-6-3 09:28 - 畜牧联盟004 - 饲养管理

瘦肉精

瘦肉精 【新闻背景】 3·15主题是“消费与民生”。央视《每周质量报告》的3·15 特别节目《“健美猪”真相》曝光:河南孟州等地养猪场采用 违禁动物药品“瘦肉精”饲养,有毒猪肉有部分流向河南双汇 集团下属分公司济源双汇食品有限公司。央视节目播出后, 在A股上市的双汇发展股价跌停宣布停牌。事件曝光后, 农业部昨日已派督查组赴河南督导查处。 早在2002年,国家食品药品监督管理局等部门就发布 公告,明令禁止在饲料和动物中添加瘦肉精。瘦肉精是肉制 品业的“三聚氰胺”,通常指盐酸克伦特罗,是一种肾上腺类 神经兴奋剂。此类物质添加于饲料中,可以增加动物的瘦肉量,减少饲料使用,使肉品提早上市,从而降低成本。目前全球136个国家和地区都规定肉品不得检出瘦肉精。 【中考猜题】 1.央视《每周质量报告》的3·15特别节目曝光:河南生猪主产区采用违禁药品瘦肉精,有毒猪肉流向双汇分公司。“瘦肉精“的化学式C12H19Cl3N2O,则下列有关瘦肉精的说法中不正确的是() A、瘦肉精分子中含有氮分子 B、瘦肉精由碳、氢、氧、氯、氮五种元素组成 C、每个瘦肉精分子由37个原子构成 D、瘦肉精中质量分数最大的是碳元素 2. 猪吃了“瘦肉精”后,可加快生长速度、增加瘦肉率,但残留的“瘦肉精”对人体有害,已知“瘦肉精”的化学式为C12H19Cl3N2O,则关于“瘦肉精”的说法错误的是() A.该物质是由5种元素组成的纯净物 B.该物质可能是一种有机物 C.每个分子由37个原子构成 D.质量分数最大的是氯元素 3. 央视《每周质量报告》的3·15特别节目《“健美猪”真相》曝光:河南孟州等地养猪场采用违禁动物药品“瘦肉精”饲养,有毒猪肉有部分流向河南双汇集团下属分公司济源双汇食品有限公司。“瘦肉精”(化学式为C12H19C l3N2O)能提高猪的瘦肉率,但对人体有危害,国家多年前已经禁止使用。请回答: (1)“瘦肉精”由______种元素组成,其分子中碳元素与氢元素的质量比为________。 (2)“瘦肉精”的相对分子质量为____________。 (3)“瘦肉精”中________元素的质量分数最大。 4. 瘦肉精被认为是肉制品业的“三聚氰胺”,可加快猪的生长速度用于提高猪的瘦肉率10%以上,但对人体有一定的危害,国家早在多年前已经明文禁止使用。实验中学化学探究小组对“瘦肉精食品问题”进行探究:

瘦肉精的检测步骤(精)

瘦肉精快速检测卡操作步骤 一、【检测原理】 本试纸采用竞争抑制免疫层析技术的原理来测定动物尿液、组织和饲料中的盐酸克仑特罗。试剂含有被预先固定于膜上检测带(T )的盐酸克仑特罗偶联物和被胶体金标记的抗盐酸克仑特罗单克隆抗体。检测时样品和标记抗体竞争结合偶联物。检测限为3ng/ml(3ppb )。 二、【样品制备】 肉:装入大约4克碎的肉样本(肉泥)于离心管中(酱猪牛肉加2ml 水或PBS ),盖紧管盖,在80℃左右的水浴锅中水浴10 分钟;吸取煮出的溶液到 1.5ml 的离心管中。如有明显黄色浑浊请离心(3000rpm,5min ),取上清检测。如果检测牛肉请吸出肉汤离心(3000rpm,5min,取上清检测。 三、【操作步骤】 1. 在进行测试前先仔细阅读使用说明书,使用前将本品和待检样本溶液恢复至室温。 2. 从原包装中取出试剂,打开后平放在桌面上,请在1小时内尽快使用。 3. 吸取待检样品溶液,缓慢滴加80~100μl(约2~3滴)于加样孔中,加样后开始计时。 4. 在5分钟内读取结果,超过5分钟的结果判读无效。 四、【结果判定】 阳性:位置C 显示出红色条带,位置T 无条带或颜色非常模糊时判为阳性。阴性:位置C 显示出红色条带,位置T 同时出现红色条带时,判为阴性。无效:

位置C 不显示出红色条带,则无论位置T 显示出红色条带与否,该试纸卡均判为无效。 【贮存及有效期】 冷藏,忌冷冻,有效期12个月。 【注意事项】 1. 请按照操作步骤进行测试,操作时请勿触摸试纸显示区。 2. 如购买时发现过期,破损,污染,无效的产品,请到购买处更换。 3. 本品为一次性产品,请勿重复使用。 4. 出现阳性结果,建议用本卡复查一次。 5. 自来水、蒸馏水或去离子水不能作为阴性对照。 6. 由于样品(尿和饲料)的差异,有的检测线可能偏淡或偏暗,但只要出现条带,就可判定为阴性结果。 7. 若需直接检测标准品,请用PBS 或阴性样品配制。

瘦肉精的简介

什么是瘦肉精瘦肉精有什么危害 瘦肉精是一类药物,而不是一种特定的物质,是指能够促进瘦肉生长的饲料添加剂。任何能够促进瘦肉生长、抑制肥肉生长的物质都可以叫做“瘦肉精”。 目前,能够实现这种功能的物质是一类叫做β-兴奋剂(β-agonist)的药物,比如在中国造成中毒的克伦特罗(clenbuterol)和美国允许使用的莱克多巴胺/又译雷托巴胺(Ractopamine)。 瘦肉精在上海曾经引发了几百人的中毒事件。而在台湾,由于从美国进口的猪肉里含有 健康的肉 瘦肉精,几乎挑起一场政治争端。奇怪的是,在美国、加拿大、新西兰等国,瘦肉精这类物质的使用却是合法的。 在中国,通常所说的“瘦肉精”则是指克伦特罗。它曾经作为药物用于治疗支气管哮喘,后由于其副作用太大而遭禁用。 其它这样类似药物还有沙丁胺醇(Salbutamol)和特布他林(Terbutaline)等,同样能起到“瘦肉”作用、却对人体健康危害过大,因而造成安全隐患。它们也因而在全球遭到禁用。 中文名:瘦肉精;克伦特罗;学名盐酸克伦特罗;是一种平喘药。该药物既不是兽药,也不是饲料添加剂,而是肾上腺类神经兴奋剂。盐酸双氯醇胺;克喘素;氨哮素;氨必妥;氨双氯喘通;氨双氯醇胺。 英文名Clenbuterol; Spiropent; Planipart; NAB365;4-Amino-3,5-dichloro-alpha-(((1,1-dimethylethyl)amino)methyl)benzenemethanol CAS号:37148-27-9 分子式:C12-H18-Cl2-N2-O 理化特性 白色或类白色的结晶粉末,无臭、味苦,熔点161℃,溶于水、乙醇,微溶于丙酮,不溶于乙醚。 检测方法 GB/T 5009.192-2003 动物性食品中克伦特罗残留量的 瘦肉精测定

肉类食品中瘦肉精的检测-液相色谱法

液相色谱法测定肉类食品中瘦肉精残留量 摘要瘦肉精是一种动物用药,将瘦肉精添加于饲料中,可以增加动物的瘦肉 量、减少饲料使用、使肉品提早上市、降低成本。近期,国内双汇火腿肠出现食品安全问题所引发的“瘦肉精”事件令国人对食品安全颇为堪忧,因此 ,对动物肉类或内脏中盐酸克伦特罗的监督检测显得十分必要。为此南京科捷应用LC-600液相色谱仪,探讨肉类样品中瘦肉精(盐酸克伦特罗)的前处理方法 ,了解本市肉品中盐酸克伦特罗的残留情况。用水提取肉品中盐酸克伦特罗残留量 ,我们用固相萃取法对肉类样品提取液进行净化和浓缩 ,可以有效去除干扰 ,简便 ,灵敏度高 ,适于在日常检测工作中推广使用。残留监测作为食品安全的重要课题。使之越来越广泛地应用于不同类型兽药、农药及毒素类有毒有害物质的检测分析之中。 关键词瘦肉精盐酸克伦特罗兽药农药残留高效液相色谱法 1.本方法的应用范围 本方法的检测思路可供食品中农药、兽药残留检测的借鉴。如兽药残留动物源食品中硝基呋喃类残留(呋喃唑酮、呋喃西林、呋喃妥因、呋马唑酮)磺胺类药物残留(磺胺对甲氧嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺喹嚼啉)喹诺酮类(嚼喹酸、萘啶酸)氯羟吡啶、莫能菌素和盐霉素、乙氧酰胺苯甲酯、氯霉素、伊维菌素、克伦特罗、尼卡巴嗪、土霉素、四环素、金霉素(国标GBT14931.1)阿莫西林、盘尼西林及喹乙醇等。农药残留氨基甲酸酯农药、有机磷农药、百草枯、杀草快、草甘膦及氨基膦酸、苯并眯唑类杀菌剂、利谷隆、灭草隆及敌草隆、三嗪类多种农药的检测。 2.实验步骤 (1)仪器和设备 ①LC-600高效液相色谱仪整套配置如下 P600宝石恒流泵 1台 UV600紫外检测器1台 7725i六通进样阀 1只 WS600色谱工作站1套 ②匀浆机③旋转蒸发仪④电子天平:0.01mg ⑤紫外分光光度计 ⑥离心机⑦固相萃取仪 HGC-8 ⑧固相小柱 (2)试剂 ①盐酸克伦特罗标准品②乙醚;分析纯③正己烷:分析纯④甲醇:色谱纯 ⑤盐酸克伦特罗标准液⑥lmol/I。盐酸溶液⑦0.05mol/L乙酸缓冲液 ⑧0.3mol/L乙酸缓冲液⑨lmol/LNaOH溶液’ ⑩甲醇液:甲醇—重蒸水(75+25) (2)仪器和设备 ②匀浆机③旋转蒸发仪④电子天平:0.01mg ⑤紫外分光光度计

瘦肉精作用机理(精)

瘦肉精是一类动物用药,有数种药物被称为瘦肉精,例如莱克多巴胺(Ractopamine 及克伦特罗(Clenbuterol 等。将瘦肉精添加于饲料中,可以增加动物的瘦肉量、减少饲料使用、使肉品提早上市、降低成本。但因为考虑对人体会产生副作用,各国开放使用的标准不一。 中文名:瘦肉精;克伦特罗;学名盐酸克伦特罗;是一种平喘药。该药物既不是兽药,也不是饲料添加剂,而是肾上腺类神经兴奋剂。盐酸双氯醇胺;克喘素;氨哮素;氨必妥;氨双氯喘通;氨双氯醇胺。英文名: Clenbuterol; Spiropent; Planipart; NAB365; 4-Amino-3,5-dichloro-alpha-(((1,1-dimethylethylaminomethylbenzenemethanol 作用机理: 1、瘦肉精 (Clenbuterol , 一类动物用药的统称。任何能够促进瘦肉生长、抑制动物脂肪生长的物质都可以叫做“ 瘦肉精” ,是一种非常廉价的药品,对于减少脂肪增加瘦肉 (Lean Mass 作用非常好。瘦肉精让猪的单位经济价值提升不少,但它有很危险的副作用,轻则导致心律不整,严重一点就会导致心脏病。 2、瘦肉精属于乙类促效剂(β-agonist ,它可以促进蛋白质合成,会让猪只多长精肉 (瘦肉、少长脂肪 ,可加在猪饲料里供猪只长期食用;饲养成的猪只,体形健美, 利润比较高。养殖户可以将瘦肉精拌入猪饲料中喂猪后,能使猪肉快速生长精肉。猪在吃了瘦肉精之后, 瘦肉精主要积蓄在猪肝、猪肺等处。如果不依照规定使用使得残余量过高, 食用大量的猪肝、猪肺后—就算是熟食也一样, 可能会立即出现恶心、头晕、肌肉颤抖、心悸、血压上升等中毒症状。 3、作用机理是通过激动β2-受体,对心脏有兴奋作用,对支气管平滑肌有较强而持久的扩张作用,口服后较易经胃肠道吸收。 4、瘦肉精的原理主要是:抑制脂肪的生长快速增加瘦肉率{有的猪用过瘦肉精后后腿肌肉过于丰满致使猪都无法站立}

“瘦肉精”事件

案例:“瘦肉精”事件 背景: 盐酸克伦特罗是一种β-兴奋剂,20世纪80年代初,美国Cyanamid公司农业研究部的科学家Ronald Dalrymple和Catherine Ricks意外发现β-兴奋剂能够增加禽类和肉畜的瘦肉产量,同时降低脂肪量。美国这家公司开始将其添加到饲料中,增加瘦肉率。随后1987年、1988年,国内科研界首次接触“瘦肉精”,国内学者开始翻译国外盐酸克伦特罗的论文。但没有一篇论文详细提及瘦肉精的副作用,瘦肉精逐渐开始在中国流行,并向饲料加工厂、养殖专业户推广这种新型饲料添加剂。根据专家介绍,一般来说,饲料中添加适量盐酸克伦特罗后,可使猪等禽兽生长速率、饲料转化率、瘦肉率提高10%以上,所以有人干脆就称它为“瘦肉率”。 虽然一直为国家主管部门所禁止,但受经济利益的驱使,在我国部分地区的饲料加工企业和养猪专业户中,这种饲料添加剂已成为“秘密武器”。 问题: 1、克伦特罗为什么能使猪多长瘦肉? 2、克伦特罗为什么能较大量的蓄积在猪肉中? 3、为什么含猪肉精的猪肉会引起使用者中毒?中毒的症状是什么? 4、当运动员采用克伦特罗以增加肌肉的力量,这会对他们的身体有什么危害?案例讨论结果请撰写在下方(注:宋体、小四、1.5倍行间距) 案例讨论: 1、克伦特罗为什么能使猪多长瘦肉? 它能与动物体内大多数组织细胞膜上的β—肾上腺素受体结合,激活β—肾上腺激导性受体,使体内脂肪分解加强,血中游离脂肪酸增加,摄入的能量不再形成脂肪贮存于体内,而是立即为蛋白质的合成所利用,并抑制蛋白质分解和促使胰岛素释放和糖原分解加强,它具有营养重分配的作用,使动物胴体的肌肉(主要是骨骼肌)比例增加,脂肪含量降低,从而提高动物的瘦肉率和瘦肉产量。 2、克伦特罗为什么能较大量的蓄积在猪肉中? 动物食用盐酸克伦特罗后,会在内脏和组织中形成严重的蓄积性残留,对于

猪肉中“瘦肉精”盐酸克伦特罗残留危害及检测方法

龙源期刊网 https://www.360docs.net/doc/bb4218216.html, 猪肉中“瘦肉精”盐酸克伦特罗残留危害及检测方法 作者:宋瑞张彩云何立宁张蕾 来源:《科技资讯》2011年第15期 摘要:本文介绍了盐酸克伦特罗(瘦肉精)的性质、危害性以及主要的检测方法。 关键词:盐酸克伦特罗残留检测方法 中图分类号:S859.84 文献标识码:A 文章编号:1672-3791(2011)05(c)-0104-01 1 盐酸克伦特罗的性质 盐酸克伦特罗(Clenbuterol,CLB)俗称瘦肉精,又名氨哮素、克喘素,化学名为“4-氨基-α-[(叔 丁基氨基)甲基]-3,5-二氯苄醇盐酸盐”,常温下为白色或微黄粉末状固体,熔点为170℃~176℃,极易溶于水、甲醇和乙醇,微溶于氯仿,不溶于苯,是一种β2一肾上腺素能激动剂。20世纪70年代末,美国等发达国家进行了盐酸克伦特罗实用性开发研究工作。80年代,由于盐酸克伦特罗能促进猪生长,提高瘦肉率,而被作为饲料添加剂广泛应用到猪的生产中。但是近年来,因食用被盐酸克伦特罗污染的猪肉导致中毒事件屡有发生,且后果极其严重,引起了世界各国的高度重视,为了保证猪肉产品质量安全,保护人类健康,许多国家都禁止在食用动物源性的生产中使用盐酸克伦特罗[1]。 2 危害性 2.1 对猪的影响 在饲用初期会在短期内出现血压升高、血管扩张、呼吸加剧、体温上升等症状,并出现采 食下降、行为动作失调、神经紧张不安甚至全身震颤等症状。后期会使猪体内糖降解作用不足,导致猪肉品质下降,同时容易发生蹄损伤和跛行,大运动量或高温条件会造成死亡。 2.2 对人的影响 人食用含残留盐酸克伦特罗猪肉后对肝、肾等内脏器官会产生毒害作用,出现心悸、头 痛、目眩、恶心、呕吐、心率加快、肌肉振颤等症状,特别是对高血压、心脏病、甲亢和前列 腺肥大等疾病患者危害更大,严重的可导致死亡。

瘦肉精检测方法有哪些【养生小知识】

瘦肉精检测方法有哪些 文章导读 瘦肉精最早原用于治疗支气管哮喘,但是它对人体产生的副作用太大,所以 在全球范围内早就被禁用了。但很多肉品商家将其用于饲料中以降低成本,若人类长期食 用有该残留物质的肉品,对心血管造成不良影响,从而诱发恶性肿瘤。 所以检测肉品中瘦肉精得从源头把控,目前检测方法有如下几种:气相色 谱-质谱法(GC-MS) GC-MS法优点是把色谱高效快速的分离效果和质谱高灵敏度的 定性分析有机合起来,能在多种残留物同时存在的情况下对某种特定的残留物进行定性、 定量分析,而且具更高的检测极限。Fente C. A等用GC-MS法检测牛毛中CLB的残留,最 低检测限为5ng/g;Pteer Batioens应用气相色谱-串联质谱法(GC-MS-MS)对牛、羊、猪组织 中的CLB含量进行检测,最低检测限为2ng/g;刘琪等用GC-MS法(EI离子源)检测猪尿中 的CLB,检测限为0.5ng/mL;VanRhijin等用三甲基硅基或2-二甲基硅基吗啉衍生物检测 尿提取物中的CLB,衍生物用电脉冲方式或化学离子化方式扫描,会产生更高的灵敏度。 另外,GC-MS法与HPLC法相比,检测灵敏度更高,假阳性率更低。因此,我国将GC-MS 法定为检测CLB的确证性方法(NY/T468~2001)。高效液相色谱法(HPLC) HPLC适合测定热不稳定和强极性的β-激动剂及其代谢产物,而且, HPLC可以与柱前提取、纯化及柱后荧光衍生化反应和质谱(MS)等系统联用,容易实现分 析过程的自动化。黄士新等(1995)应用紫外检测器,在λ=243nm,色谱柱:shimpackCLC-ODS150×6.0mn,流速:1mL/min,柱温:室温30℃的条件下检测猪肝脏和猪肉中的CLB 残留,最低检测限可达2ng/g。国外有人应用HPLC (二极管阵列检测器)测定动物性食品 中CLB残留,测得最低检测限为1.26ng/g,回收率达98.9%。目前,我国已将HPLC法 作为检测CLB残留的半确证性方法,最低检测限范围为1~15ng/g,其优点是专属性好、 选择性强、检测精确度较高,而且假阳性率低;缺点是样品处理时间长,检测过程烦琐、难 于操作,需贵重仪器,在实际应用中受到一定的限制。酶联免疫吸 附法(ELISA ) 利用免疫学抗原抗体特异性结合和酶的高效催化作用,通过化学方 法将植物辣根过氧化物酶(HRP)与克伦特罗(CL)结合,形成酶偶联克伦特罗。将固相载体 上已包被的抗体(羊抗兔IgG抗体)与特异性的抗克伦特罗抗体结合,然后加入待测克伦特 罗和酶偶联克伦特罗,它们竞争性与克伦特罗抗体结合,洗涤后加底物,根据有色物的变 化计量待测克伦特罗量。若待测克伦特罗多,则被结合的酶偶联克伦特罗少,有色物量就 少。用目测法或比色法测定样品中的克伦特罗含量,比色的最佳波长为450 nm,参比波 长应大于600 nm。胶体金免疫层析法(Colloidal gold immunochromatography) 利用竞争法胶体金免疫层析技术,检测液中的Clen与金标垫上的金标抗体结合形成复合 物,若Clen在检测液中浓度低于灵敏度值,未结合的金标抗体流到T区时,被固定在膜 上的Clen-BSA偶联物结合,逐渐凝集成一条可见的T线;若Clen浓度高于灵敏度值,金 标抗体全部形成复合物,不会再与T线处Clen-BSA偶联物结合形成可见T线。未固定的

瘦肉精快速检测方法[参考提供]

既快速又精确 目前检测瘦肉精的方法有以下几种,胶体金快检卡是最快速简单的一种方法,适用于多种流通领域和各种实验室

一般企业会采用自己检测与外部有资质的机构测试相结合,因为样品数量巨大,如果均外部测试一是费用非常高,二是送样、检测、获得结果的周期长,效率低,无法满足实际应用的需求,所以自检也是顺应企业高效节约的宗旨的,对自己用检测出值得怀疑的样本再送检测机构检测。 一."瘦肉精"快速检测新方法初获成功盐酸克伦特罗(俗称瘦肉精),是一种饲料添加剂,能改进脂肪性动物肉和脂肪的比例,加速动物生长,但是它能够长期残留在动物体内,一般的烹饪加热不能将其消除。人们一旦食用了含有瘦肉精残留的动物性食品,便会对人们的健康造成严重危害。目前已有的快速检测方法(试剂条等),均不能定量,而定量的检测手段,大都依赖于酶联免疫(ELLSA)和高效液相色谱(HPLC)等技术,这些方法有些步骤繁琐,非常耗时,有些则需要昂贵的仪器和熟练的操作人员,并且都不能实时地监视动态反应过程等。 研制的HPSPR-6000 表面等离子共振生物分析仪用于盐酸克伦特罗快速检测,有效地克服了现有方法的缺点,其优点有:(1)盐酸克伦特罗的最低检出限约为1.0ppb,接近和达到了高效液相色谱和酶联免疫等现行的方法的检出限(0.05~1.0ppb);(2)每个样品检测时间为10min,与目前常规方法最低需要2~3h 相比,检测时间缩短10 倍以上;(3)样品前处理简单、免标记;(4)能够实时监控相互作用分子的结合、解离等动力学信息。 二.快检卡:猪肉方面,目前使用胶体金试纸,只需要取一些猪肉样品,放在离心管中,在水浴中煮10分钟,将煮出的汁液加同样体积的配套缓冲液,混匀,用于检测即可,几个ppb(μg/Kg,ng/g)的瘦肉精就能被测出。北京华安麦科生物技术有限公司自主研发生产的瘦肉精类快检卡可的检出限可达到1ppb,全程只需十几分钟。 盐酸克伦特罗(瘦肉精)快速检测试剂盒采用间接竞争酶联免疫吸附法,在微孔条上预包被克仑特罗的单抗,克仑特罗的标准品(或样本中的残留物克仑特罗胺药物)与酶标记克仑特罗抗原竞争结合包被的莱克多巴胺抗体,酶标记物放大信号后,加入底物显色,终止液终止反应,酶标仪450 nm测定其吸光值。样

相关文档
最新文档