固相萃取-气相色谱法检测草莓中农药残留量

固相萃取-气相色谱法检测草莓中农药残留量
固相萃取-气相色谱法检测草莓中农药残留量

固相萃取-气相色谱法检测草莓中农药残留量

翟硕莉1,张秀丰2

(1.河北省衡水市衡水学院生命科学系,河北衡水 053000)(2.河北省衡水出入境检验检疫局,河北衡水 053000)摘要:建立用气相色谱同时检测草莓中13种有机磷农药残留方法。用乙腈提取,Carbon∕P SA复合固相萃取小柱净化提取液,采用Agilent-1701毛细管柱和GC-FPD检测器进行定量检测。结果表明,13种农药残留的色谱图分离效果较好,线性相关系数均大于0.995,最低检出限在0.0012 mg/kg~0.0082 mg/kg之间,多次试验平均回收率在90.6~105.3 % 之间,RSD 1.28~6.30% 之间。该方法适合草莓中多种农药残留的检测。

关键词:草莓;固相萃取;气相色谱;农药残留

文章篇号:1673-9078(2013)6-1434-1436

Determination of Rganophosphorus Pesticides in Strawberry by GC-SPE

ZHAI Shuo-li1, ZHANG Xiu-feng 2

(1.Department of Biology Hengshui University, Hengshui, Hebei 053000, China)

(2.Hengshui entry-exit inspection and quarantine bureau, Hebei 053000, China)

Abstract: A gas chromatography method was established for determination of 13 organophosphorus pesticides in strawberry. The organophosphorus pesticides were homogenated, extracted by acetonitrile and purified by solid phase extraction. The sample solution was analyzed by gas chromatography with Agilent-1701. Good separation for 13 organophosphorus pesticides was achieved using the established method, with correlation coefficients above 0.995. The detection limit was 0.0012~0.0082 mg/kg. The average recoveries of the 13 organophosphorus pesticides were 90.6~105.3% with RS Ds of 1.28~6.30%. This method could meet the requirements for the organophosphorus pesticides in strawberry.

Key words: strawberry; solid phase extraction; gas chromatography; organophosphorus pesticide

随着社会的发展,科学技术的进步,人们生活水平的提高,食品安全问题也越来越受到社会各界的关注,尤其是现在各种农药的广泛使用,在农作物产量提高等方面确实起到了很大的作用,但同时也给食品安全、环境污染等方面带来了极大地负作用[1~3]。在水果和蔬菜中的农残检出率相对较高,尤其是草莓、黄瓜等新鲜蔬菜水果。目前,在检测方面,尤其是在农药残留、兽药残留、除草剂等方面多残留检测技术越来越受关注和检测人员的青睐[4],薛丽[5]等采用固相萃取-在线凝胶渗透色谱-气相色谱质谱联用测定蔬菜干制品中的18种有机磷和拟除虫菊酯残留、陈健航[6]等采用Carb/PSA固相萃取净化-气相色谱质谱法测定茶叶中的34种农药成分,均是采用一次前处理进行多种残留检测,在满足检测的情况下,采用一次前处理能够进行多种残留的检测方法是分析方法的发展趋势;本研究建立的方法采用一次前处理,利用GC-FPD 收稿日期:2012-12-30

基金项目:衡水学院科研项目(2011055)

作者简介:翟硕莉(1982-),女,硕士,讲师,研究方向:食品分析及食品微生物进行多种农残检测的方法适用于草莓中多种有机磷农残的检测,在实际应用中具有检测灵敏度高、检测周期短等特点。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

GC600气相色谱仪,美国PerkinElmer;高速匀浆机,德国IKA;半自动固相萃取仪;500 mg∕500 mg,6 mL Carbon∕PSA复合固相萃取小柱,德国CNW;农药标准溶液:敌百虫、敌敌畏、甲胺磷等13种农药标准品均为液体,100 μg∕mL,购自国家农业部;乙腈、正己烷均为色谱纯,其余试剂均为分析纯。

1.2 仪器条件

毛细管柱:Agilent-1701(30 m×0.25 mm×0.25 μm);进样口温度:270 ℃;检测器温度:280 ℃;程序升温:60 ℃(2 min)20℃/min→160℃(3min)10 ℃/min→200℃5 ℃/min→260℃(3 min);进样方式:不分流进样;进样量:1 μL;载气:氮气,恒流模式;流量:1.2 mL∕min;氢气:空气=70:105。

1.3 方法

1434

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提取:称取20 g (精确至0.01 g )样品于100 mL 玻璃离心管中,加入5 g 无水硫酸钠、20 mL 乙腈,重复提取一次,高速均质2 min ,4000 r/min 离心5 min ,转移有机相至鸡心瓶,旋转蒸发至约1 mL ,待净化。 净化:取Carbon/PSA 复合固相萃取小柱,置固相萃取装置上,加入5 mL 乙腈活化小柱,将上述提取液移入小柱,再用10 mL 乙腈洗脱,保持流速为1 mL∕min ,收集全部滤液于试管中,40 ℃氮吹至近干,

(μ收率、稳定性较好。

图1 13种农残色谱图

Fig.1 GC chromatograms of the 13 pesticides

2.4 柱箱温度

在其他条件不变的情况下,控制温度在色谱柱要求范围内,采用等温模式,不能较好的得到上述13种农残的有效分离。

当升温模式为:60 ℃(2 min )20℃

/min →160 ℃(3 min )10℃/min →200 ℃5℃/min →260 ℃(3 min )时,13种农药的色谱图峰型及分离情况较好,13种农药色谱图见图1,保留时间表见表1。

7 乙拌磷 Y=206788.67X-18151.61 0.999302 8 久效磷 Y=81426.72X-3721.16 0.999771 9 乐果 Y=90066.72X-1774.72 0.999933 10

毒死蜱 Y=91923.98X-2804.60 0.999298 11 甲基对硫磷 Y=100780.86X-5607.73 0.999646 12 马拉硫磷 Y=69377.68X-2523.02 0.999988 13

对硫磷

Y=100206.93X-131760

0.999930

1436

实验结果表明:上述13种农药在一定范围内,不同浓度的农残和仪器响应值的峰面积有较好的线性,相关系数R 2均大于0.999,符合相关规定和要求。 2.6 检出限

在仪器稳定的情况下,以三倍信噪比对应的质量浓度进行方法检出限计算,12种农残检出限见表3。

表3 13种农药的检出限

Table 3 Detection limits of the 13 pesticides

法,采用GC-FPD 法进行检测常用的13种有机磷农药残留的分析方法,该方法操作简便、检测成本和检

出限低,对仪器要求相对不高,适合在实验室推广,尤其是基层检测实验室,为草莓及其他水果中农药残留的检测提供了检测方法依据。

表4 13种农药的回收实验结果(n=6)

Table 4 Results of test for recovery of the 13 pesticides 序号 农药名称 回收率/% 相对标准偏差/%

1 敌百虫 91.3 1.65

2 敌敌畏 96.0 2.85 , 2012,28(8):1068,1080-1083

草莓无毒苗繁育技术

草莓无毒苗繁育技术 1草莓脱毒技术 1.1热处理与茎尖培养脱毒 1.1.1热处理将盆栽小苗2个月后或未经脱毒的试管苗置于恒温箱中,在35~40 ℃条件下变温处理4~5周。白天保持40 ℃处理5h,夜间在35 ℃下处理6h。处理过程中空气湿度不宜过高,一般维持在50%~70%,盆栽苗土壤水分保持在草莓苗生长不萎蔫为宜。 1.1.2茎尖培养(1)材料消毒:将热处理后的匍匐茎剥去外层大叶,用自来水冲洗3~6h后,对材料进行表面消毒。消毒的药品及其使用方法有多种,常用的有两种:①用70%酒精漂洗3~5s,再用0.10%~0.20%次升汞或6%~8%次氯酸钠浸泡2~3min,然后把材料移到超净工作台上;②用70%酒精漂洗3~5s,再用0.10%新洁尔灭浸泡5~10min,然后用1%过氯乙酸浸泡2~5min,然后把材料移到超净工作台上。 (2)接种:材料消毒后,在超净工作台上冲冼3~5次,然后置于双筒解剖镜下,一层层地剥去幼叶和鳞片后,切取0.40~0.50mm,带有2~4个叶原基。将这个生长点用细长的解剖针挑出,转接到培养基中。(3)培养基成分:草莓分化培养基为MS+BA 0.50mg/L+GA 30.10mg/L+IBA 0.50mg/L。(4)培养条件:温度25~30℃,光照强度1500~2000LX,每天光照10h左右。培养20~35d后,即开始分化新芽,新芽不断生长增殖,形成小的芽丛。 1.2花药培养脱毒苗 花药培养的目的,是培育源于花药内部花粉粒的单倍体植株,并使单倍体加培,作为育种材料的来源。但经大量实验表明,草莓花药培养所得的植株有95%以上是能开花结果的多倍体,而且生长发育优于母株。同时,经愈伤组织培养出来的花药植株不带病毒。花药培养不仅可快速获得草莓无毒植株,而且可以省去病毒鉴定工作,对基层生产应用实为一举两得的事情。 1.2.1花药培养方法取花药发育期处在单核靠边期、未开放的小花蕾,用与茎尖消毒同样的方法消毒后,在超净工作台上用镊子取下所有花药(不带花丝),接种到装有培养基的三角瓶中。 1.2.2培养基成分花药培养的第一阶段是诱导愈伤组织,培养中加2.4-D或萘乙酸(NAA);第二阶段是愈伤组织形成后转入茎叶分化培养基中,诱导出再生植株。茎、叶分化培养基通常除去生长素,保留细胞分裂素。(1)诱导愈伤组织培养基:GD培养基+2.4-D 1 mg/L。 (2)诱导再生植株培养基:MS培养基+BA 0.50~1 mg/L。有些品种可以用一种

实验一气相色谱法测定混合醇

实验一 气相色谱法测定混合醇 一、实验目的 1.掌握气相色谱法的基本原理和定性、定量方法。 2.学习归一化法定量方法。 3.了解气相色谱仪的基本结构、性能和操作方法。 二、实验原理 色谱法具有极强的分离效能。一个混合物样品定量引入合适的色谱系统后,样品在流动相携带下进入色谱柱,样品中各组分由于各自的性质不同,在柱内与固定相的作用力大小不同,导致在柱内的迁移速度不同,使混合物中的各组分先后离开色谱柱得到分离。分离后的组分进入检测器,检测器将物质的浓度或质量信号转换为电信号输给记录仪或显示器,得到色谱图。利用保留值可定性,利用峰高或峰面积可定量。 常用的定量方法有好多种,本实验采用归一法。 归一法就是分别求出样品中所有组分的峰面积和校正因子,然后依次求各组分的百分含量。10000?'?=∑ f A f Ai Wi i 归一法优点:简洁;进样量无需准确;条件变化时对结果影响不大。 缺点:混合物中所有组分必须全出峰;必须测出所有峰面积。 [仪器试剂] 三、实验仪器与试剂 气相色谱仪;微量注射器1μL 乙醇、正丙醇、正丁醇,均为色谱纯 四、实验步骤 1. 色谱条件 色谱柱 OV-101弹性石英毛细管柱 25m×0.32mm

柱温150℃;检测器200℃;汽化室200℃ 载气氮气,流速1.0cm/s。 2. 实验内容 开启气源(高压钢瓶或气体发生器),接通载气、燃气、助燃气。打开气相色谱仪主机电源,打开色谱工作站、计算机电源开关,联机。按上述色谱条件进行条件设置。温度升至一定数值后,进行自动或手动点火。待基线稳定后,用1μL 微量注射器取0.5μL含有混合醇的水样注入色谱仪,同时按下数据采集键。 五、数据处理 1. 面积归一化法定量 组分乙醇正丙醇正丁醇 峰高(mm) 半峰宽 (mm) 峰面积 (mm2) 含量(%) 将计算结果与计算机打印结果比较。 【思考题】 1. 本实验中是否需要准确进样?为什么? 2. FID检测器是否对任何物质都有响应?

草莓的花药培养

草莓的花药培养 摘要草莓传统繁殖易受病毒感染,使产量大幅度下降。而利用组织培养中的花药培养技术使其脱毒率可达100%。概述了草莓花药培养的一般方法,影响草莓花药培养的各种因素,如基因型、培养基成分、培养方式和环境、预处理等;还探讨了各种因素的最佳应用。 关键词草莓花药培养;发病症状;影响因素 草莓(Fragari aananassa Duch)是蔷薇科草莓属多年生草本植物,果实鲜艳美丽、芳香浓郁、柔软多汁,且富含糖、蛋白质、磷、钙、铁及大量维生素和有机酸。除鲜食外,还可加工成果浆、果汁、果酒、糖水罐头及各种冷饮和速冻食品,深受广大消费者欢迎。 由于传统繁殖方法病毒感染严重,产量低下,而且繁殖系数低、速度慢,不能满足大规模生产的需求。而采用组织培养方法,既可快速繁殖,满足大规模生产的需求,又可以减少病毒、恢复种性、提高产量等。培育草莓无病毒苗的主要方法有热处理法、茎尖培养法和花药培养法等。其中花药培养法脱毒率可达100%。 利用花药组培再生植株,主要基于植株在形成性器官、性细胞时,部分或全部病毒被脱离。其优点是从愈伤组织形成到分化出茎叶过程中,可以脱除病毒,并且脱毒率比较高。国内外研究表明,草莓花药培养所获植株不带病毒,其生长发育表现优于母株,可省去病毒鉴定程序,可以在病毒种类不清和缺乏指示植物鉴定条件下使用[1]。 1草莓病毒病的症状及发病条件 1.1症状及为害情况 草莓感染病毒后,特别是感染单种病毒,大多症状不显著或者难以看出症状,称为隐症。主要表现为长势衰弱、退化,如新叶展开不充分,叶片小型化、无光泽,失绿变黄,叶缘部位失绿更严重,叶片皱缩、扭曲、群体矮化、坐果少、果型小、产量低。草莓病毒种类繁多,现约有28种,我国产区普遍存在有4种,即草莓斑驳病毒(SMoV)、草莓皱缩病毒(SCrV)、草莓轻型黄边病毒(SMYEV)和草莓镶脉病毒(SVBV)。我国草莓产区这4种病毒单一品种带毒率在80%以上,2种病毒复合感染率在20%~30%,3种病毒复合感染率也有3%左右,单一

气相色谱法测定环氧乙烷.doc

气相色谱法测定 明胶空心胶囊中环氧乙烷 摘要: 目的:对生产的明胶空心胶囊中环氧乙烷测定气相色谱法进行方法验证;方法:定性除了采用传统的对照品保留时间定性又采用了供试品加标定性和双柱定性,定量采用加标回收率验证方法准确性,方法精密度采用RSD%验证;结论:定性采用保留时间定性、DB-624色谱柱和PLOT/Q色谱柱双柱定性和加标定性,方法定性互相验证正确。定量加标回收率为98.44~99.98%,方法准确。方法精密度RSD%为3.6~4.1,方精密度好可靠。 引言: 依据《中国药典》(2010版)正文第二部分1204页明胶空心胶囊中环氧乙烷的测定气相色谱法,实验人员照残留溶剂测定法(附录ⅧP第二法附录61页)实验。采用了HP-5、DB-W AX、DB-624和PLOT/Q色谱柱实验(都是方法规定的色谱柱)。其中HP-5和DB-W AX均难以有效分离广生生产的供试品中的干扰峰,改用固定液为(6%)氰丙基苯基(94%)二甲基聚硅氧烷DB-624毛细管柱实现了基线分离,试验了供试品加标定性,加标回收率,加标RSD%。之后,依照残留溶剂测定法“附注(3)干扰峰的排除”又在另一根截然不同的气-固色谱柱做了实验。PLOT/Q色谱柱固定相为聚苯乙烯—二乙烯基苯型的高分子多孔小球。两者检验结果一致,排除了测定中有共出峰的干扰。 1 实验部分 1.1仪器与试剂 Agilent 7890A GC/FID ; GC Chemstation (B.04.01) 工作站;Agilent 7694E顶空进样 器。对照品:环氧乙烷(浓度5mg/ml,美国Accustandard);溶剂:水(实验室超纯水);供试品:明胶空心胶囊(广生胶囊提供)。 1.2色谱条件 ①色谱条件 色谱柱:DB-624毛细管柱(30m*0.53mm*3.0um),固定相:(6%)氰丙基苯基(94%)二甲基聚硅氧烷;柱温:40℃保持5min,升温速率25℃/min,上升到150℃终止程序升温,后运行温度230℃,后运行时间3 min;载气流速:5mL/min。 汽化室:汽化室110℃,分流比1:1。 检测器:260℃,氢气40mL/min,空气400mL/min,尾吹33 mL/min。

植物组织培养之草莓的脱毒与快速繁殖

一、草莓简介 草莓是对蔷薇科草莓属植物的通称,属多年生草本植物。草莓的外观呈心形,鲜美红嫩,果肉多汁,含有特殊的浓郁水果芳香。 草莓具有极其丰富的营养价值。 1、(丰富的胡萝卜素)草莓中所含的胡萝卜素是合成维生素A的重要物质,具有明目养肝作用; 2、(滋补调理)草莓对胃肠道和贫血均有一定的滋补调理作用; 3、(治病)草莓除可以预防坏血病外,对防治动脉硬化,冠心病也有较好的疗效; 4、(防癌)草莓是鞣酸含量丰富的植物,在体内可吸附和阻止致癌化学物质的吸收,具有防癌作用; (回主页) 草莓营养价值高,口味好,深受消费者喜爱,特别是近几年种植面积大幅提高。但由于病毒病的传播感染,导致草莓品种种性退化,产量、品质下降,商品率降低,严重影响了草莓的发展。 下面就简单介绍几种草莓易得的病: 二、草莓易得的病 1、叶斑病:又称蛇眼病,主要为害叶片、叶柄、果梗、嫩茎和种子。在叶片上形成暗紫色小斑点,扩大后形成近圆形或椭圆形病斑,边缘紫红褐色,中央灰白色,略有细轮,使整个病斑呈蛇眼状,病斑上不形成小黑粒。 2、白粉病:主要为害叶片,也侵害花、果、果梗和叶柄。叶片上卷呈汤匙状。花蕾、花瓣受害呈紫红色,不能开花或开完全花,果实不膨大,呈瘦长形;幼果失去光泽、硬化。近熟期草莓受到为害会失去商品价值。 3、灰霉病:是开花后的主要病害,在花朵、花瓣、果实、叶上均可发病。在膨大时期的果实上,生成褐色斑点,并逐渐扩大,密生灰霉使果实软化、腐败,严重影响产量。 4、根腐病:从下部叶开始,叶缘变成红褐色,逐渐向上凋萎,以至枯死。支柱在中间开始变成黑褐色而腐败,根的中心柱呈红色。 5、黄萎病:该病是土壤病害,主要症状是幼叶畸形,叶变黄、叶表面粗糙无比。随后叶缘变褐色向内凋萎,直到枯死。 6、除此之外,草莓还容易有一些病虫危害,例如: 线虫危害:寄生在草莓组织中,危害叶柄、芽、根等,使被害器官变成红色,严重时植株枯死。 蛴螬危害:在草莓收获期和八九月份咬食根、茎,使植株枯死。 (回主页) 根据报道,侵染草莓的病毒多达二十多种。长期大田分株繁殖容易使草莓植株中病毒积累,导致草莓品种退化,,严重影响经济收益。所以利用先进的技术使草莓脱毒,以及后期的快速繁殖已成为草莓业发展的必要环节。 下面就来详细介绍草莓的脱毒与快繁。

气相色谱法检测时色谱柱的选择

气相色谱法检测时色谱柱的选择 气相色谱柱是样品中残留溶剂测定的理论与物质基础,所以对色谱柱的选择也是最关键的步骤。气相色谱柱可分为填充柱和毛细管柱两大类,其中填充柱又分玻璃柱和不锈钢柱;毛细管柱按柱__口直径一般又有0153mm和0132mm两种规格,前者又叫大口径毛细管柱,柱容量大,在残留溶剂测定中应用较多。由于毛细管柱造价高,中国药典2000年版结合中国国情,用填充柱测定,美国药典24版(USPXXIV)和英国药典2000年版(BP2000)要求用毛细管柱。从填料来分,填充柱一般选用高分子多孔小球系列(GDX101,GDX102,GDX103,GDX301,GDX401)直接测定。GDX的表面积大(1~500m2/g),有一定的机械强度,可在250℃以下应用。无论极性还是非极性物质,在这种固定相上的拖尾现象都降到最低限度;它和羟基的化合物亲和力极小,可使水、醇类物质大大提前流出柱子;氧化氮、HCN、NH3、SO2、COS等活泼气体可以很快流出,不干扰测定,这些优点对残留溶剂测定来说是比较理想的。 这类填料的应用约占填充柱测定残留溶剂的文献的90%。GDX既是性能优良的吸附剂,能直接作为气相色谱的固定相,直接用于气固分析,也能作为担体涂布 PEG系(PEG20M,PEG2M,PEG10000,PGE5000),DEGS(丁二酸二乙二醇酯),DG (缩二甘油),丙二醇乙二酸聚酯,OV- 225,SE52(苯基甲基硅酮)等固定液,用于残留溶剂测定,当然担体的选择也有多种,如6201、硅藻土、PoraparkQ等。在柱子的选择上,一般选用GDX系列就能解决问题,但对于某些样品,就需要用某些固定液来进行分离才能满足要求,如二甲基甲酰胺26。选择原则是相似相溶,对于醇、胺等能形成氢键的物质,除上面介绍的GDX外,也可选择极性固定液。另外也可将不同极性的固定液混合涂布在担体上进行分离27。 毛细管柱的种类也很多,如 OV-101,SE-54,CP-Sil-5CB28,AC-20,SE-30,HP-5,HP-20M,100%二甲基硅氧 烷,AT- 624,TFAP等,一般长10~30m不等。填充柱价格便宜,易得,一直占据溶剂残留量检测的主导地位,只是柱效较低,只有500~1000左右,分离复杂样品的能力差。杨绍英、陈志华在测定心痛定中两种残留溶剂时就分别用两种色谱条件,比较麻烦29。但填充柱仍然是我们的首要选择。张咏梅、洪铮在紫杉醇原料药中有机溶剂残留量的气相色谱分析中,应用GDX401填充柱同时检测甲醇、乙酸乙酯、二氯甲烷,方法准确可靠30。王卫、高立勤在测定盐酸莫索尼定有机溶剂残留量时以正丙醇为内标,用GDX-401填充柱测定乙醚和异丙醇的残留量,方法灵敏、准确、可信31。 邓湘昱也用GDX-401填充柱测定盐酸土霉素中残留甲醇,结果证明方法简单可靠32。黄剑英、顾以振用GDX-401填充柱、用恒温条件建立同时测定中国药典规定的7种溶剂的测定方法,方法分离度较好,准确可靠33。这些均说明填充柱在测定残留溶剂中的重要作用。近年来,毛细管柱应用越来越多,有取而代之的趋势。特别是近两年,文献报道关于残留溶剂测定的文章中,用毛细管柱测定的约占总数的90%,填充柱只占10%,由此可见其趋势。毛细管柱的理论塔板数约为10万左右,与填充柱相比柱效和灵敏度均要高的多,对复杂和微量残留溶剂的分析能力有极大的提高,所以选择毛细管柱一般都能解决分离问题。其中柱口直径为0153mm的大口径毛细管柱因其柱容量大尤其应用广泛。姚倩、李章万、张

毛细管柱气相色谱法

第六章毛细管柱气相色谱法 第一节毛细管气相色谱仪 现代的实验室用的气相色谱仪大都既可用作填充柱气相色谱又可用作毛细管色谱仪。毛细管色谱仪应用范围广,可用于分析复杂有机物,如石油成分,天然产物,环境污染,农药残留等。图6-1是毛细管气相色谱仪示意图,与填充柱色谱仪比,毛细管色谱仪在柱前多一个分流-不分流进样器,柱后加一个尾吹气路。由于毛细管柱体积很小,柱容量很小,出峰快,所以死体积一定要小,要求瞬间注入极小量样品,因此柱前要分流。对进样技术要求高,对操作条件要求严。尾吹的目的是减小死体积和柱末端效应。毛细管柱对固定液的要求不苛刻,一般2-3根不同极性的柱子可解决大部分的分析问题。毛细管柱一般配有响应快,灵敏度高的质量型检测器。 高分辨率毛细管气相色谱仪的三要素是:要选择好的毛细管柱及最佳分析条件;按样品选择合适的毛细管进样系统;选择高性能的毛细管气相色谱仪。 图6-1 毛细管气相色谱仪示意图 第二节毛细管色谱柱 1957年,美国科学家Golay提出毛细管柱的气相色谱法。Golay称毛细管色谱柱为开管柱。因这种色谱柱中心是空的。毛细管柱是内径为Φ0.1-0.5mm左右、长度为10-300m的毛细柱,虽然每米理论板数约为2000-5000,与填充柱相当,但由于柱子很长,总柱效可高达106。 一、毛细管色谱柱组成 通常来说,一根毛细管色谱柱由管身和固定相两部分组成。管身采用熔融二氧化硅(熔融石英),通常在其表面涂上一层聚酰亚胺保护层。涂层后的熔融石英毛细管呈褐色:但是涂层后的毛细管之间

的颜色却不尽相同。色谱柱的颜色对于其色谱性能没有什么影响。经过持续的较高温度处理后.聚酰亚胺涂层管的的温度会变得比以前更深:标准的聚酰亚胺涂层管熔融石英管的温度上限为360℃,高温聚酰亚胺涂层管的温度上限为400℃。固定相种类很多,大部分的固定相是热稳定性好的聚合物,常用的有聚硅氧烷和聚乙二醇。另外还有一类是小的多孔粒子组成的聚合物或沸石(例如氧化铝、分子筛等)。 熔融石英管的内表面会用一些化学方法进行处理,尽量的减小样品和管壁之间可能存在的相互作用。所用的试剂和处理方法一般是依据将要涂在内壁上的固定相种类来确定的。硅烷化处理则是最为常用的处理方式,使用硅烷类的试剂和管壁内表面上的硅基醇基团进行反应,使其变为甲基硅烷基或苯甲基甲基硅烷基。 当实验要求更高的使用温度时,我们可以来用不锈钢毛细柱来代替熔融石英毛细柱。不锈钢毛细柱在使用温度(耐高温)及日常维护(不易折断等)的性能和指标上都优于熔融石英毛细柱。但是不锈钢材质的惰性没有熔融石英好,它可以和许多的化合物相互作用,产生反应。所以通常可以用化学方法对其进行处理,或者是在它的内壁再涂上薄薄的一层熔融石英,以增加不锈钢管的隋性:经过适当处理后,不锈钢毛细柱的惰性与熔融石英毛细柱的不相上下。 二、毛细管色谱柱固定相 (一)气-液色谱固定相 1.聚硅氧烷 聚硅氧烷有优良的稳定性, 用途广,是目前最为常用的固定相。标准的聚硅氧烷是由许多单个的硅氧烷重复联接构成,每个硅原子与两个功能基团相连,功能基团的类型和数量决定了固定相总体类型和性质,常见的四种功能基团为甲基、氰丙基、三氟丙基和苯基。最基本的聚硅氧烷是由100%甲基取代的。当有其他种类的取代基出现时,该基团的数量将由一个百分数来表示。例如:5%二苯基—95%二甲基聚硅氧烷表示其包含有5%的苯基基团和95%的甲基基团。“二”是表示每个硅原子包含有两个特定基团,但当两个特定基团完全相同时,我们有时也会省略这种叫法。如果甲基的百分数没有表征,则表示它的含量可能是100%(如50%苯基—甲基聚硅氧烷表示甲基的含量为50%)。有时我们可能对氰丙基苯基的百分含量产生错误的理解,如14%氰丙基苯基—二甲基聚硅氧烷表示的是其含有7%氰丙基和7%苯基(另有86%的甲基),因为一个氰丙基和一个苯基连接于同一个硅原子上,所以14%是一种加和的表征方式。 我们有时会用低流失来表征一类固定相。这一类固定相是在硅氧烷聚合物中链接一定数量的苯基或苯基类的基团,通常我们称之为“亚芳基”。由于它们的加入,聚合物的链接变得更加坚固稳定,保证了在较高温度时,固定相不会产生降解。也就是说,进一步降低了色谱柱的柱流失,提高了色谱柱的使用温度。与原始的非亚芳基类型的固定相相比,亚芳基固定相不仅拥有相同的分离指数,而且在色谱柱的维护等方面也有许多的调整(例如SE-52和SE-54)。尽管同类普通型和低流失型固定相的分离性能相同或极为相似,但是在某些方面还有微小的区别。另外,我们也使用一些独特低流失固定相。 2.聚乙二醇 聚乙二醇是另外一类广泛应用的固定相。有时我们称之为“WAX”或“FFAP”。聚乙二醇不像聚硅氧烷那样有多种取代基团,它是100%固定基质的聚合物。相对于聚硅氧烷,聚乙二醇固定相色谱柱的寿命较短,而且容易受温度和环境(有氧环境等)的影响。另外,聚乙二醇固定相在相应的GC实验条件下需保持液态。但由于其独特的分离性能,聚乙二醇仍是我们常用的固定相之一。

草莓育苗技术详解.doc

草莓育苗技术详解 通常来说,草莓种苗的繁殖方法有匍匐茎繁殖法、分株繁殖法、组织培养法 和种子繁殖法等。 一、种子繁殖法 种子繁殖法是播种草莓的种子,通过一定的栽培管理获得草莓种苗的方法。 主要特点:成苗率低,生长速度慢,形状容易产生变异和分离,因此在生产上一般不采用,若家庭盆栽式生长可尝试。

二、组织培养法 通过培养草莓匍匐茎顶端的分生组织即茎尖,诱导出幼芽,然后通过幼芽的快速繁殖繁殖出幼苗的方法。 主要特点:比常规育苗生长旺盛,成活率高,品质良好。组培育苗繁殖快,一年内,一个分生组织可获得几万至几十万株幼苗,且不占用土地,不受环境的影响,但成本较高,适宜工厂化生产。 三、分株繁殖法 分株繁殖法,又称根茎繁殖法,俗称分墩法。用于某些不易发生匍匐茎的草莓品种,或更新换地的草莓园。

主要特点:不需要设立专门的育苗圃,不需要进行摘除多余的匍匐茎和在匍匐茎节上压土等工作。分株繁殖的系数低,质量较差,多带有分离伤口,容易受土传病菌侵染而感病。目前生产上除了急需用苗时,一般不采用此法繁殖苗木。 四、匍匐茎繁殖法 匍匐茎是草莓的主要繁殖器官,利用匍匐茎繁殖种苗是草莓最重要的繁殖方法。

主要特点:方法简单,能保持品种的遗传特性,伤口较小,繁殖系数高,管理便捷,既可以利用生产田直接采苗,又可以建立专门的育苗圃,是目前草莓主要采用的育苗方式。 值得注意的是,生产田育苗虽然省力省钱,但是技术要求比较高,育出的苗木常生长细 弱,花芽分化不良,定植后产量和果品均会受到影响,所以通常育苗与生产分开。想详 细了解生产田育苗的朋友可查看下面的视频。 草莓育苗技术要点 天气逐渐回暖,进入草莓育苗的适期,需提早确定地块备耕,选择优质种苗,起垄栽植,做好田间管理,为培育出优质的草莓种苗做好准备。 1、母株选择 选择品种纯正、生长健壮、无病虫害、有4片叶以上、根系发达的草莓植株作为生产用 母株。此外,繁殖用母株应取自繁殖圃内当年繁殖的健壮匍匐茎苗或假植苗,最好是脱 毒苗。如果是脱毒苗最好用原种苗,或用1代苗。

气相色谱法

气相色谱法测定丁醇中少量甲醇含量 一、实验目的 1. 掌握用外标法进行色谱定量分析的原理和方法。 2. 了解气相色谱仪氢火焰离子检测器FID的性能和操作方法。 3. 了解气相色谱法在产品质量控制中的应用。 4. 学习气相色谱法测定甲醇含量的分析方法。 二、实验原理 在丁醇生产的过程中,不可避免地有甲醇产生。甲醇是无色透明的具有高度挥发性的液体,是一种对人体有害的物质。甲醇在人体内氧化为甲醛、甲酸,具有很强的毒性,对神经系统尤其是视神经损害严重,人食入 5 g 就会出现严重中毒,超过 12. 5 g 就可能导致死亡,在白酒的发酵过程中,难以将甲醇和乙醇完全分离,因此国家对白酒中甲醇含量做出严格规定。根据国家标准(GB10343-89),食用酒精中甲醇含量应低于0.1g?L-1(优级)或0.6 g?L-1(普通级)。 气相色谱法是一种高效、快速而灵敏的分离分析技术,具有极强的分离效能。一个混合物样品定量引入合适的色谱系统后,样品被气化后,在流动相携带下进入色谱柱,样品中各组分由于各自的性质不同,在柱内与固定相的作用力大小不同,导致在柱内的迁移速度不同,使混合物中的各组分先后离开色谱柱得到分离。分离后的组分进入检测器,检测器将物质的浓度或质量信号转换为电信号输给记录仪或显示器,得到色谱图。利用保留值可定性,利用峰高或峰面积可定量。 外标法是在一定的操作条件下,用纯组分或已知浓度的标准溶液配制一系列不同含量的标准溶液,准确进样,根据色谱图中组分的峰面积(或峰高)对组分含量作标准曲线。在相同操作条件下,依据样品的峰面积(或峰高),从标准曲线上查出其相应含量。利用气相色谱可分离、检测丁醇中的甲醇含量,在相同的操作条件下,

草莓脱毒方法

草莓脱毒方法 以药剂处理加茎尖培养可增加脱毒效果,如盐酸四环素对草莓的四种病毒都有一定的抑制作用。 覃兰英等(1988)将草莓在35℃下热处理7 d后,逐步升温至38℃,在湿度40%~68%、光照度4 000~5 000 Lx条件下热处理35 d后,将长出的新茎茎尖再行组培,可获得100%的脱毒苗。 大泽胜次(1982)在进行单倍体育种时发现花培植株的脱毒率达100%。此法不仅可快速繁殖出大量无毒植株,还可省去病毒鉴定工作,在育种与生产应用上可谓一举两得。利用花药培养脱毒苗,其成功与否与花蕾大小的选择有关,应选取处于密封状态的小花蕾,此时的花粉发育期为单核靠边期。花蕾的大小与不同的品种有一定的差异。高庄玉等(1993)用草莓花药组培,其脱毒率达100%,用幼叶和茎尖产生的愈伤组织其再生植株脱毒率只有20%。 艾勇、赵佐敏等(2000)用1/2MS+0.1 mg/L IBA+琼脂4.5~7 g/L+白糖20 g/L诱导丰香草莓试管苗生根,生根率可达100%。移栽时不用任何基质处理,采取试管苗一次性入土移栽(适温20~25℃,1周内保持空气湿度在95%以上),幼苗成活率可达85%, 花药培养 草莓花药培养是获得无毒苗的途径之一,其优点是操作简单,并能大量繁殖。薜光荣等经花药愈伤组织直接分化出花药植株的途径培育出沙尔普斯等5个品种的脱毒苗,脱毒苗在生长、结果、可溶性固形物含量等方面均超过对照株,果实总产和平均果重均大幅度提高。这表明,实现草莓的无病毒栽培,将会给草莓生产带来很大的经济效益。 花药愈伤组织的诱导和再分化培养过程,以添加2 mg/L的6-BA和0.2~1.0 mg/L的NAA 为宜;茎尖分化培养过程中添加6-BA的浓度为0.5~1.0 mg/L;继代分化快繁过程中,6-BA 浓度一定要掌控好,要求6-BA的浓度在0.5~1.0 mg/L范围内不断变换调节,3周左右继代快繁一次,这样苗子在整个继代快繁过程中才能保持生长健壮、分化系数高(达到8~10倍)、无褐化现象发生等。反之,如果6-BA浓度过高(>2 mg/L)时,苗子会出现脆化、黄化、过密、矮化等现象;过低(<0·25 mg/L)时,苗子会出现细弱、弯曲、过高、生根过多等现象,均不利于苗子的分化快繁。生根培养中添加6-BA浓度以0·25 mg/L为最好,苗子生长粗壮、根系发达,发根率为100%。 将花药接种到1号培养基(MS+6-BA 2mg/L+NAA 0.1 mg/L+3%蔗糖)上,1周后花药陆续形成愈伤组织,达78.6%;1个月左右转接愈伤组织到2号培养基(MS+6BA 1 mg/L+NAA 0.l mg/L+3%蔗糖)上。注意观察,当芽长到lmm左右时转接到3号培养基(MS十6-BA 1mg/L+3%蔗塘)上,逐渐形成芽丛,1个月后,把芽丛分开成单芽再分别转接到新的3号培养荃上,让花继续分化生长;以后根据情况每隔10~30天转接一次.这样,年内每个分化组

草莓无病毒苗的培育方法

草莓无病毒苗的培育方法 草莓植株非常容易受病毒的感染,在生产实践中经常发现植株逐渐矮化,产量降低,果实变小,品质变劣等现象,这些都是由于病毒的侵染造成的。据调查,我国草莓产区主要品种已受到草莓斑驳病毒、草莓轻型黄边病毒、草莓镶脉病毒、草莓皱缩病毒等病毒感染。目前,草莓病毒病还没有药剂可以防治。国内外的实践均表明,通过组织培养获得无病毒苗是防治草莓病毒病的主要措施。 一、草莓无病毒苗培育技术 1、取材。每年的6-8月,选择植株生长健壮,匍匐茎充实,尖端生长良好,无病虫害的优良植株取其茎尖或花药,作为组织培养的外植体。 2、消毒。材料取来修整后用纱布包好放在自来水龙头下冲洗2-4小时(以茎尖为例),然后进行表面消毒。先用70%酒精漂洗半分钟,然后用0.1%的新洁尔灭浸泡15-20分钟,再用0.1%的升汞(氯化汞)消毒5-8分钟,最后用1-2%的过氧乙酸消毒1分钟。每次都要用无菌水冲洗3-4次后再进行下一次消毒。整个消毒过程都应在超净工作台内完成。 3、接种。接种在超净工作台内进行,接种前要先用酒精灯对接种用具(镊子、接种针、接种架等)消毒自然放凉。先用镊子一层层的剥去茎尖外的幼叶和鳞片,然后在解剖镜下找到生长点(可带1-2个叶原基)用接种针挑出生长点(小于0.5毫米),放入事先准备好的盛有培养基的培养瓶内,封好瓶口,置于培养室内培养成小植株。 4、室内培养。培养室要求干净清洁,室内装有紫外线杀菌灯,每天要对室内进行消毒,以防污染。培养温度20-28℃,最适温度25℃,相对湿度70%,光照强度1000-2000勒克斯,每日光照10小时左右。 5、继代培养。每培养25-30天,培养瓶内的小植株就会分出3-5个小植株,把这些小植株分出放于继代培养基内培养;过20-30天后又会长出小植株,如此反复进行继代培养,增加繁殖系数。 6、诱导生根。根据生产需要可在1-2月份集中一批苗子生根。草莓试管苗生根很容易,有的在继代培养基上便可生根。或者在培养基中加入0.5毫克/升的LBA,经30天左右便可长出6-10条长约2-3厘米的小根。 7、温室驯化。把生好根的小苗经光照锻炼7-10天,从试管内取出,洗净根部培养基,移栽入事先准备好的营养土内,使其逐渐长大发出5-6片新叶的过程称为驯化。驯化用的营养土要求土质以疏松的沙土掺入少量有机质。移栽后要浇

毛细管气相色谱法

毛细管气相色谱法条件及定量分析 指导老师:李建国 实验人:王壮 同组实验:陆潇、戈畅 实验时间:2016.4.18 一、实验目的 1.熟悉色谱分析的原理及色谱工作站的使用方法; 2、掌握气相色谱仪操作方法与氢火焰离子化检测器的原理; 3.用保留时间定性;用归一化法定量;用分离度对实验数据进行评价。 二、实验原理 不同组分在同一分离色谱柱上,在相同实验条件下有不同的保留行为,其保留时间的差异可以用来定性分析,每一组分的质量与相应色谱峰的积分面积成正比,因此可以公式计算,用归一化方法测定每一组分的质量百分含量。 1122100A is i i A A A s s ns n f A w f A f A f A =?++???+% 本实验是用气相色谱测定乙酸乙酯、乙酸丁酯及其混合试样,检测器用FID 。用色谱软件进行谱图处理和定量计算,让学生掌握用已知物对照定性、用归一化法测定混合物组分定量的实验。 混和试样的成功分离是气相色谱法定量分析的前提和基础,衡量一对色谱峰分 离的程度可用分离度:12121()2 R R t t R W W -=?+,式中1R t 、2R t 和1W 、2W 分别指两组分的保留时间和峰底宽度,R=1.5时两组分完全分离,实际中R=1.0(分离度98%)即可满足要求。 三、仪器与试剂 仪器:GC7890F 型气相色谱仪、氢火焰离子化检测器(FID )、氮气钢瓶、空气钢瓶、氢气发生器,微量注射器、3mm x 200cm 的10% SE-54不锈钢分离柱。GC5400型气相色谱仪、空气发生器、氮气发生器、氢气发生器,微量注射器、15m 毛细管分离柱。 试剂:乙酸乙酯、乙酸丁酯标准试样及其未知混合试样。 四、实验内容 1.按操作说明书使色谱仪正常运行,并调节至如下条件: 柱温:110C ? 检测器温度:120C ? 气化温度:120C ? 载气、氢气和空气流量分别为30、50和200mL/min 。 2.分别改变柱温至80、90、100、110、120C ?。每改变一次柱温,注入0.5L μ混合

草莓穴盘基质育苗技术

For pers onal use only in study and research; not f o r c o m m e r c i a l u s e 草莓穴盘基质育苗技术 作 者: admin时间:2017-08-22 10:14人气:26 C 一、匍匐茎子苗准备 选用优良可靠的、脱毒组培苗作为子苗繁育的母苗。 在春季建立草莓母苗繁殖圃,苗圃起高床,稀植,覆盖黑色塑料薄膜,当气温超过10 c时栽植母苗,苗床宽60cm,单行,株距30cm。 二、子苗采集 子苗标准:带1-2片叶,基部有小根,小根的长度短于1cm。 每隔10-14d从草莓繁殖圃采集一次子苗,选无病健壮匍匐茎上的子苗,留1-2cm的匍匐 茎。子苗采集后及时栽植,若不能及时栽植,需储藏,其方法是把一根长匍匐茎剪下,装在 塑料袋中,储存在温度0-0.5 C和相对湿度90%左右冷库中,存放时间不超过15天。 三、扦插穴盘和育苗基质 扌千插穴盘采用50孔穴盘,孔穴直径5cm,高度8cm。 育苗基质选用无毒无病原,透气性好的基质,基质材料不要用含发酵料的基质,避免扦插伤 口被菌类感染。 四、子苗扦插 草莓苗适宜苗龄为50天,根据栽植时间确定扦插时间。 扦插前清水先湿润基质,将匍匐茎子苗按大小分级扦插,将子苗置于穴盘孔中间,扦插宜浅 不宜深,基质不能盖过心叶,将匍匐茎固定好。

五、扦插后管理 1、水分、湿度管理:扦插后用细雾浇一次透水,然后基质表层保持,空气湿度90%以上;弥雾状态保持7 —10天,使叶片保持湿润,扦插3 —5天后可适当缩短弥雾时间,两周后根系逐渐发育形成,可停止弥雾状态。 2、光照管理:扦插后大棚顶上要覆盖遮阳网,进行避光管理。7 —10天早晚见一次光,10 —15天期间上午10点半至下午4点遮阴,以后逐渐全天见光。 3、营养管理:扦插苗两周后到成苗前,根据子苗生长情况,酌情追施1—2次全营养肥料,补充肥料选取水溶肥,冲施肥,要求磷钾含量高。 4、病虫害防治:苗期易发生蚜虫、红蜘蛛、白粉病、炭疽病等病虫害,及时防治。 草莓穴盘苗 草莓穴盘基质育苗技术 作者:admin 时间:2017-08-22 10:14 人气:26 °C 、匍匐茎子苗准备选用优良可靠的、脱毒组培苗作为子苗繁育的母苗。

气相色谱法测定苯系物..

093858 张亚辉 气相色谱法测定苯系物 一. 实验目的 1、掌握气相色谱保留值定性及归一化法定量的方法和特点; 2、熟悉气相色谱仪的使用,掌握微量注射器进样技术。 二. 实验仪器与试剂 1. GC-2000型气相色谱仪,4台 2. 医用注射器,1支 3. 苯、甲苯、二甲苯混合物 三.实验原理 气相色谱法是以气体(载气)作为流动相的柱色谱分离技术,它主要是利用物质的极性或吸附性质的差异来实现混合物的分离,它分析的对象是气体和可挥发的物质。 顶空气相色谱法是通过测定样品上方气体成分来测定该组分在样品中的含量,常用于分析聚合物中的残留溶剂或单体、废水中的挥发性有机物、食品的气味性物质等等,其理论依据是在一定条件下气相和液相(固相)之间存在着分配平衡。顶空气相色谱分析过程包括三个过程:取样,进样,分析。根据取样方式的不同,可以把顶空气相色谱分为静态顶空气相色谱和动态顶空气相色谱。本实验采用静态顶空气相色谱法。 色谱定量分析,常用的方法有峰面积(峰高)百分比法、归一化法、内标法、外标法和标准加入法。本实验采用归一化法。归一化法要求所有组分均出峰,同时还要有所有组分的标准样品才能定量,公式如下: (1) 式中x i 代表待测样品中组分i 的含量,Ai 代表组分i 的峰面积,fi 代表组分i 的校正因子。 因为所测样品为同系物,我们可以简单地认为各组分校正因子相同,则(1)式可化简为 %100??= ∑i i i i i A f A f x % 100?=∑i i i A A x

载气携带被分析的气态混合物通过色谱柱时,各组分在气液两相间反复分配,由于各组分的K值不同,先后流出色谱柱得到分离。 气相色谱的结构如下所述: (1)气路系统(Carrier gas supply) 气路系统:获得纯净、流速稳定的载气。包括压力计、流量计及气体净化装置。 载气:要求化学惰性,不与有关物质反应。载气的选择除了要求考虑对柱效的影响外,还要与分析对象和所用的检测器相配。 净化器:多为分子筛和活性碳管的串联,可除去水、氧气以及其它杂质。(2)进样系统:进样器+气化室 液体进样器:不同规格的专用注射器,填充柱色谱常用10μL;毛细管色谱常用1μL;新型仪器带有全自动液体进样器,清洗、润冲、取样、进样、换样等过程自动完成,一次可放置数十个试样。 气体进样器:推拉式、旋转式(六通阀)。 气化室:将液体试样瞬间气化的装置。无催化作用。 (3)柱分离系统 填充柱:内径2~4 mm,长1~3m,内填固定相; 毛细管柱:内径0.1~0.5mm,长达几十至100m,涂壁固定液毛细管柱因渗透性好、传质快,因而分离效率高(n可106)、分析速度快、样品用量小。 柱温:是影响分离的最重要的因素。(选择柱温主要是考虑样品待测物沸点和对分离的要求。)柱温通常要等于或略低于样品的平均沸点(分析时间20-30min);对宽沸程的样品,应使用程序升温方法。 (4)检测系统 检测器是气相色谱仪的关键部件。实际应用中,通常采用热导检测器(TCD)、氢火焰离子化检测器(FID)、电子捕获检测器(ECD)等,本实验选用热导检测器的结构,主要根据不同的气体有不同的热导系数,对待侧物进行检测。热导检测器包括:池体(一般用不锈钢制成);热敏元件:电阻率高、电阻温度系数大、且价廉易加工的钨丝制成;参考臂:仅允许纯载气通过,通常连接在进样装置之前;测量臂:需要携带被分离组分的载气流过,则连接在紧靠近分离柱出口处。四、实验条件 色谱柱:长2m,102白色担体60~80目,涂渍角鲨烷或PEG为固定液,液担比为5﹕100 柱温:80,气化室温度:100,检测器温度120,载气:氢气 五、实验内容 (1)配制苯、甲苯、二甲苯标准混合液(各取1,5,5)取1μL,测谱图,归一

草莓品种为何会退化育苗中怎样防止品种退化

草莓品种为何会退化育苗中怎样防止品种退化? 我国草莓栽培起步较晚。现代栽培品种大果凤梨在20世纪初传入我国,虽有近100年的栽培历史,但我们在优良品种选育、草莓种质资源评价与鉴定、及优质种苗繁育技术方面相对滞后,由此造成我们栽培的品种质量良莠不齐。 随着近来草莓种植面积的迅速扩大,由长期无性繁殖造成品种种性退化问题也日益显露出来,严重地影响了我们莓友的经济效益。那么今天我们就来看看怎样从育苗入手防止品种种性退化。 果实变小 一、草莓为何会发生品种种性退化? 常年种草莓的莓友,会有这样一个体会,如果常年种植同一个品种或是更换品种频率较少,草莓产量会逐年下降或者不稳定。这些其实都种性退化的表现。它主要由以下两个原因引起。

一是受病毒病侵染是引起品种种性退化。随着繁殖代数的增多病毒也在累积。很多情况下我们所种草莓苗已经不知道繁衍了多少代,从老的母株上带来的病毒也一直在不停的繁衍着。草莓病毒多达数十种,其中我国草莓病毒病主要有四种,即草莓镶脉病毒、草莓斑驳病毒、草莓轻型黄边病毒、草莓皱叶病毒。 病毒病 二是突变,草莓栽培过程中植株会发生各种各样的变异,符合我们需要的突变称为良变,不符合我们需要的叫做劣变。对劣变如果不注意及时淘汰,长期混杂在原来品种当中,数量由少到多,原来的品种纯度就不能保持,会使产量下降,果实品质变劣,植株抗逆性减弱。

畸形果 二、怎样防止品种种性退化? 虽然个人育苗确实可以降低成本,但品种退化问题严重影响我们自育苗的莓友。毕竟好种出好苗,好苗一半收,种苗质量的好坏直接关系到草莓产量高低

和品质优劣,优质壮苗是草莓栽培获取最大经济效益的关键。因此在弄清引起品种种性退化的原因后,我们应采取以下措施防止草莓品种种性退化。 一是有条件的可建立脱毒苗繁殖基地。这是防止由病毒病侵染而引起品种退化的有效措施,无病毒苗栽培过程中还会受病毒的再侵染,故使用3-4年后需再更换脱毒苗。 脱毒苗 二是普通种植户育苗时,种苗可到相关农业科研机构和院所,选购脱毒种苗,进行二代子苗的繁育。但脱毒苗引进不是一劳永逸的,脱毒种苗一般3-4年后品种的优秀性状就会逐渐消失。因此种苗要做到每3-4年更新一次。同时注意虫害的防治,特别是芽虫是传播病毒病的载体,一定要注意防范。

草莓脱毒苗

1、意义与范围 丹东市是全国最大的草莓生产基地,草莓生产技术总体水平在国内处于领先地位,但总体单位生产效益还远不如发达国家高,最突出的瓶颈问题是种苗普遍感染病毒,与全国一样属带毒生产。感染病毒的草莓比未感染病毒的草莓长势弱、抗性差、产量明显下降,果品品质与商品性状变劣,严重影响了这一名特优种植业的稳步发展。 草莓脱毒组培技术是目前国际上仍普遍应用的高新实用技术,即通过花药组织培养、微茎尖组织培养等技术脱去病毒病原,使草莓种苗恢复品种原种优良种性,以达到优质、高产之目的。本技术报告以项目单位正在实施应用的微茎尖组织培养技术规定了草莓茎尖脱毒组培种苗繁育技术规范的选择优良品种、生产脱毒组培瓶苗、培育原原种苗、培育原种苗、繁育良种苗规程。应用范围适用于丹东地区。 2、草莓茎尖脱毒组培种苗繁育技术工艺过程 品种定向→选取田间健壮株匍匐茎尖或单株→清洗杀菌消毒→超净工作台解剖镜下剥离茎尖→接入接种培养基培养→继代增殖培养→瓶内生根→营养钵培育原原种苗→田间扩繁原种苗→田间扩繁良种苗→生产利用。 3、选择优良品种生产脱毒组培瓶苗 3.1选择优良品种 3.1.1日光温室:目前适宜品种为杜克拉、图德拉、章姬、枥乙女、丰香、幸香、鬼怒甘、宝交早生、安娜等。 3.1.2早春大棚:目前适宜品种为卡尔特一号、艾尔桑塔等。 3.1.3露地生产(加工型):目前适宜品种为哈尼、森嘎那、达善卡等。 3.2生产脱毒组培瓶苗 3.2.1试验室要求 3.2.1.1无菌室 无菌室应设有隔离室,面积不小于10m2,墙壁光滑平整,地面平坦无缝,室内安装紫外线灯和超净工作台。 3.2.1.2试验室 试验室面积应不小于30m2,并应具备各种生产用化学药品、玻璃器皿、冰箱、恒温箱、普通天平、分析天平及实验平台等设施。 3.2.1.3培养室 培养室面积应不小于20m2,放置多层钢制培养架,采用日光灯补充光照,室内常年保持20-27℃,相对湿度保持在50-60%,每天光照12-14h。 3.2.1.4洗涤灭菌室 洗涤灭菌室面积应不小于10m2,有充足自来水,并配有高压灭菌锅、制作培养基平台及放置培养瓶的瓶架。 3.2.2设备要求 应具备高压灭菌锅、冰箱、培养皿、镊子、剪刀、普通天平、分析天平、双目解剖镜、显微镜、超净工作台、接种刀、恒温培养箱等设备。 3.2.3培养基制作 基本培养基为MS培养基。其中附加吲哚乙酸(IAA)4PPM,6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)2PPM,激动素(KT)2PPM。蔗糖30g/L,琼脂6g/L,PH值6.5。在1个大气压下,高压灭菌20分钟。 3.2.4外植体接入瓶内增殖培养完成的瓶内苗 采草莓匍匐茎尖或单株心茎,用自来水(符合饮用水标准)冲洗后在超净工作台上用消毒剂进行杀菌消毒,然后放在双目解剖镜下切0.2-0.6mm的生长点放入盛有培养基的瓶

EPA8082气相色谱法测定多氯联苯(中文版)

方法8082 气相色谱法测定多氯联苯 1.0适用范围 方法8082用于检测多氯联苯浓度如固-液萃取物中的亚老格尔或单独的多氯联苯化合物。开口毛细管柱用于电子捕获器或电解传导检测器。对比于填充柱,熔融石英开口毛细管柱提高了检测性能,即更好的选择性、更好的灵敏度及更快的检测速度。下表所列的目标化合物都可由单柱或者双柱分析系统来检测。这些PCB化合物都有此法试验过,且此法还适用于其它的化合物。

International Union of Pure and Applied Chemistry 国际理论和应用化学联合会 1.2亚老格尔是种多组分的混合物。当样品中含有多于一种的亚老格尔,就需要更好的分析技术人员来进行定性及定量分析。对于环境降解中的亚老格尔或者人为降解中的亚老格尔分析也需要专门分析技术人员,因为降解后的多组分混合物对比于亚老格尔标准峰参数将有显著不同。 1.3作为亚老格尔的PCBs定量分析与很多常规仪器检测类似,但当亚老格尔在环境中暴露而降解后则有很大的不同。因此,本方法提供了从检测结果中挑选单个PCB化合物的程序。上面所列的19种PCB化合物均用此法进行了检测。 1.4当知道PCB存在的情况下,PCB化合物的检测可以得到更高的精确度。因此这种方法依据需求的计划需要,可以用于检测亚老格尔、单个PCB化合物或者PCBs总合。此化合物的方法对降解的亚老格尔检测具有特殊意义。然而,分析者在使用这个化合物分析方法时应当谨慎,即在调整条件时应基于亚老格尔的浓度。 1.5基于单柱分析的化合物确定应当由另一根柱子来验证,或者有至少一种定性方法来支持。第二根气相色谱柱的分析条件能够确认第一根柱子的检测法。在灵敏度允许的情况下气相色谱质谱(GC/MS)8270方法可以作为一个确认方法。 1.6此方法同样描述了一个双柱方法选择。这个方法需要配置一个硬件是两根分析柱相连成为单一进样口。此法需要在双柱分析时使用一个进样口。分析者应当注意的是在仪器受机械压力影响一些样品进样周期短,或者分析高污染的样品时,双柱方法可能并不合适。 1.7分析者必须针对所研究的目标分析物选择柱子、检测器、校准方法。必须建立特殊基质操作步骤、针对每个分析基质的稳定的分析系统及仪器校准系统。提供色谱实例和气相色谱条件。 1.8亚老格尔的方法检出限变化范围在水中为0.054到0.90μg/kg ,在土壤中为57到70μg/kg。可以利用表一来估计定量限。 1.9这个方法在使用时受到限制,或者在监督之下才能使用。分析者要在使用气相色谱方面有丰富的经验,又或者能熟练的阐述气相色谱原理。每个分析人员都必须能够证明具有使用这个方法得到合理的数据的能力。 2.0方法概述 2.1用适当的样品基质萃取技术对一定量体积或一定质量的样品(液体1升,固体2到30克)进行萃取。 2.2液体样品在中性条件下用二氯甲烷依据方法3510(分液漏斗)、方法3520(连续液液萃取),或其他适合的方法进行萃取。 2.3固体样品以正己烷-丙酮(1∶1)或者二氯甲烷-丙酮(1∶1),用方法3540(索氏法),

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