氮素供应水平对小粒型花生氮素代谢及相关酶活性的影响

收稿日期:2008-12-15

基金项目:国家农业科技成果转化资金项目(03EFN213710259);国家科技支撑计划(2006BAD21B04-2)作者简介:张智猛(1963-),男,河北衡水人,研究员,博士,主要从事植物栽培生理学研究。

通讯作者:万书波(1962-),男,山东栖霞人,研究员,硕士生导师,主要从事花生栽培生理生态研究。

氮素供应水平对小粒型花生氮素代谢

及相关酶活性的影响

张智猛1,万书波2,孙奎香1,戴良香1

(1.山东省花生研究所,山东青岛　266100;2.山东省农科院,山东济南　250100)

摘要:花生籽仁蛋白质含量较高,研究不同品种花生各器官中氮代谢酶活性的差异及与籽仁蛋白质含量间的关系,可为花生优质高产提供依据。在大田高产条件下研究了氮素水平对小粒型花生各器官中可溶性蛋白质、游离氨基酸含量及氮代谢相关酶活性的影响,结果表明,适当提高氮素水平既能增加花生各器官中可溶性蛋白质和游离氨基酸的含量,又能提高硝酸还原酶、谷氨酰胺合成酶和谷氨酸脱氢酶等氮素同化酶的活性,使其达到同步增加;氮素水平过高虽能提高硝酸还原酶和籽仁蛋白质含量,但谷氨酰胺合成酶和谷氨酸脱氢酶的活性下降;N 素施肥水平不改变花生植株各器官中硝酸还原酶(NR )、谷氨酰胺合成酶(G S )、谷氨酸脱氢酶(G DH )活性的变化趋势,但适量施N (B2、

B3处理)使花生各营养器官中NR 、G S 活性提高;氮素水平对花生各叶片和籽仁中G DH 活性的高低影响较大,但对茎

和根中活性大小的影响则较小。

关键词:花生;氮素水平;氮素代谢;硝酸还原酶;谷氨酰胺合成酶;谷氨酸脱氢酶中图分类号:S565.2 文献标识码:A 文章编号:1000-7091(2009)02-0170-06

E ffects of Nitrogen Level on Nitrogen Metabolism and Correlating E nzyme Activity of Peanut

ZHANG Zhi -meng 1,WAN Shu -bo 2,S UN K ui -xiang 1,DAI Liang -xiang 1

(1.Peanut Research Institute of Shandong Province ,Qingdao 266100,China ;

2.Shandong Academy of Agriculture Sciences ,Jinan 250100,China )

Abstract :The effects of nitrogen level on s oluble protein content ,free amino acid content and correlating enzyme ac 2tivity of nitrogen metabolism of peanut was studied in the field.The results showed that :with the increase of nitrogen ,the

s oluble protein content and free amino acid content increased ,and the activities of the nitrate reductase (NR ),glutamine synthetase (G S )and glutamate dehydrogenase (G DH )als o increased at the same time ;when the excessive nitrogen used ,the NR activity and kernel protein content were increased ,while the activities of G S and G DH were decreased ;the change trends of NR ,G S and G DH were not affected by the nitrogen level ,but with suitable nitrogen the activities of NR and G S in different organs could be increased ;and the nitrogen level effected the G DH activity in leaf and kernel m ore obviously ,with lower effects on its activity in stalk and root.

K ey w ords :Peanut (Arachis hypogaea L.);Nitrogen level ;Nitrogen metabolism ;Nitrate reductase ;G lutamine syn 2thetase ;G lutamate dehydrogenase

不同粒型花生品种品质的形成存在固有的差异,其不同之处由自身的遗传基础决定,同时也受基因所表达出的生理生化特性及环境因素的影响。中、小粒型花生是优质的食用型和出口型花生,与油用型大花生在诸多方面存在较大差异。蛋白质作为氮素代谢的终极产物,与花生品质呈正相关关系。

一般花生籽仁蛋白质含量为26%～30%,远高于淀粉类植物小麦、玉米等。蛋白质的生物合成主要在硝酸还原酶(NR )、谷氨酰胺合成酶(G S )、谷氨酸脱氢酶(G DH )等一系列酶催化下完成。近年来,

对小

华北农学报?2009,24(2):1702175

麦、玉米、水稻等禾本科作物受基因型、栽培措施及生态条件等因素的影响,体内NR 、G S 、G DH 等氮代谢酶活性、蛋白质含量及其相关关系的研究报道较多[1-9],有关大豆、黄瓜、甜菜、向日葵、菠菜等双子叶植物中氮代谢酶活性及受环境栽培措施的影响亦有报道[10-15]。前人对我国4000余份花生种质资源中的部分种质的营养品质及其环境因素的影响做过研究[16-20],也对干旱胁迫、氮肥用量及其种类、植物生长调节剂以及微量元素对花生叶片硝酸还原酶及根瘤固氮酶活性进行了研究[19-22],但有关氮素水平对花生生长期内氮代谢及关键酶活性影响的研究报道极少。因此,笔者于2005-2006年以小粒型花生品种为材料,在大田条件下,系统地研究了氮素水平对小粒型花生品种植株不同生育时期、不同器官中氮代谢关键酶活性、可溶性蛋白质和游离氨基酸含量的影响,旨在揭示小粒型花生品种在不同氮素水平下的生理代谢特点,为花生的优化栽培和合理的氮素运筹提供理论依据与技术支持。

1　材料和方法

1.1　供试材料

试验在山东省花生研究所莱西试验站进行,试验地土壤类型为褐土,表层土壤质地沙壤土,0～20cm 土壤肥力状况:有机质1217g/kg 、水解N 8913mg/kg 、速效P (P 2O 5)4916mg/kg 、速效K (K 2O )9316mg/kg 。供试花生品种为花育23号和白沙1016,两

品种生育期均为130d 左右。于5月8日播种,9月26日收获。

施肥处理设为N 0(B1),45(B2),90(B3),180

(B4)kg/hm 2,各处理同时施用磷钾肥(过磷酸钙450kg/hm 2

、硫酸钾300kg/hm 2

),于播种前基施于土壤。

小区面积为30m 2,随机排列,重复3次,穴播,行距40cm ,穴距18cm ,每穴2粒,密度12万穴/hm 2,其

他田间管理同大田。

自出苗开始,观察植株生长发育状况,于开花期挂牌标记同一天开花的植株,每小区标记80株,按生育期采样。采集时间在9:00-11:00进行。每小区分别采取有代表性的植株2株,共6株,用蒸馏水洗净并吸干,然后将各器官按要求分开,迅速放入液氮罐中带回室内,于-40℃低温冰箱内保存,备测定相关生理生化指标。每小区取10株,共计30株收获,考种并测定单株产量。

植株分器官样品的制备:叶片样品采集部位为主茎和分枝上倒数第3～4片复叶;茎样品为剪取倒数第2～4叶掖间的主茎与分枝;根系样品采自主根

顶端2～3cm 处;果实样品的采集制备依花生果实

发育状况,幼果时采取整果、当果壳与籽仁分离后则采取籽仁作为分析样本。

试验数据为两品种2年的平均数。1.2　测定项目及方法

硝酸还原酶(NR )活性测定参照上海植物生理学会[23]的方法;谷氨酰胺合成酶(G S )活性测定参照Cren 等[24]的方法;谷氨酸脱氢酶(G DH )活性测定参

照Cren 等[24]的方法;可溶性蛋白质含量(Pro )测定采用Lowry 法,用考马斯亮兰G 250显色,测定OD 595,并用凯氏定氮法校正;氨基酸含量的测定采

用茚三酮法[23]。

2　结果与分析

2.1　可溶性蛋白质含量

图1可见,各处理叶片中可溶性蛋白质含量以苗期较高,结荚期达最大值。氮肥用量不影响叶片中Pro 含量的变化态势,但各生育时期其含量的高低有差异。B1、B2两处理全生育期差异不显著,但与B4间差异显著,且B4显著低于其他3个处理。施用高量氮肥使花生叶片Pro 含量降低。茎中Pro 含量随生育期的推进呈逐渐降低的趋势,B1处理较高,B2最低,B4、B3相近。

地下部根中Pro 含量随生育期推进则呈上升态势,施肥量处理不影响其中Pro 含量的变化趋势。各处理各时期Pro 含量数值较为接近,差异不显著,但B4处理低于其他3个处理。可见,氮肥用量对小粒型花生根系Pro 含量的影响不甚明显,但过量施氮也不利于根中蛋白质的合成与运输。

籽仁中Pro 含量均随生育期的推进逐渐升高,不同处理间Pro 含量差异不明显,B3处理在籽仁充实期间始终维持较高水平。但B4处理的含量相对较低。

各器官中Pro 含量的变化态势表明,氮素水平不影响Pro 含量的变化趋势,但影响其绝对含量的高低。氮素不足或过量施氮对蛋白质运转均不利,适宜的氮素水平是花生体内氮代谢的生理基础。2.2　氨基酸含量的变化

游离氨基酸(以鲜质量计)是植物体内氮素同化物的主要运输形式。图2所示,各处理叶片中氨基酸含量的变化态势一致,均呈单峰曲线,峰值出现在结荚期,然后,随植株衰老而下降。花针期以前各处理叶片氨基酸含量差异不大,之后各处理差异明显,

B2、B3处理显著高于其他处理,至成熟期,各处理相近。

2期张智猛等:氮素供应水平对小粒型花生氮素代谢及相关酶活性的影响171　

图1　各生育期各器官中可溶性蛋白质含量

Fig.1　The soluble protein content in organs at growing

period

图2　各生育期各器官中游离氨基酸变化

Fig.2　The free amino content in organs at growing period

各处理茎和根中氨基酸含量的变化态势相同,均呈单峰曲线,峰值均出现在花针期。各时期各处

理茎中氨基酸含量差异不大,花针期和结荚期是花生的旺盛生长时期,此期茎中氨基酸含量以B2处理较高,而此时根中氨基酸含量以B3显著高于其他处理,其余时期各处理非常相近。

随生育期推进花生籽仁中氨基酸含量表现渐降趋势,除成熟期外,各处理籽仁中氨基酸含量差异较大,且以B3处理较高,B1处理较低。施肥量对生育过程中光合物质的合成运输的影响并未保持至成熟期。

2.3　NR 活性变化 硝酸还原酶(NR )是植物NO 3--N 同化体系中

的第一个酶,也是NO 3--N 吸收利用的一个限速酶,而氨的初始同化又发生在G S/G OG BT 循环中,它承担着氮代谢即无机氮转化为有机氮的中心作用。NR 活性及变化动态与作物生长发育特点及其对氮的需求相吻合,其活性大小反映着作物生长发育的

兴衰,对作物产量和品质影响较大。

由图3可知,施用氮肥不改变花生各器官中硝酸还原酶活性的变化趋势,各器官中NR 活性均随生育时期的推进逐渐降低,且受氮肥用量的影响程度相似,幼苗期各处理各器官中NR 活性相近,但随生长发育,各器官中NR 活性变化较大,叶片NR 活性受施肥影响较大,其余器官中NR 活性随施氮量呈规律性变化,表现为B3、B4处理NR 较高,表明氮肥用量影响花生各器官中NR 活性的高低,施氮量增加,各器官中NR 活性升高。2.4　G S 活性变化

谷氨酰胺合成酶(G S )是处于氮代谢中心的多功能酶,参与多种氮代谢的调节,其活性的高低可以反映氮素同化能力的强弱[18],它在高等植物的各个发育阶段氨的同化及氮素的利用中起着重要的作用,G S 和谷氨酸合酶(G OG BT )构成的循环反应是高等植物氨同化的主要途径,G S 催化无机氮转变成有机氮的第一步反应。

由图4可以看出,氮素水平对各器官中

G S 活性

172　华　北　农　学　报24卷

(以鲜质量计)的变化态势均无影响,随生育期的推进,均呈单峰曲线变化态势。叶片和根中G S活性的峰值出现在结荚期;茎中G S活性的峰值均出现在花针期;籽仁则出现在饱果期。

氮素水平对花生各器官中G S活性的高低影响较大,表现为营养器官叶和茎中B2处理的G S活性高于其他处理;根中则以B3处理较高,但籽仁中G S活性以B4最高,其次为B2处理,B1和B3

处理较低。

图3　各生育期各器官中NR活性

Fig.3　The NR activity in

organs at growing period

图4　各生育期各器官中G S活性变化

Fig.4　The

G S activity in organs at growing period

图5　各生育期各器官G D H活性变化

Fig.5　The G D H activity in organs at growing period

2

期张智猛等:氮素供应水平对小粒型花生氮素代谢及相关酶活性的影响173

　

2.5　G D H 活性变化

由图5可以看出,氮素水平对各器官中G DH 活

性(以鲜质量计)的变化态势均无影响,随生育期的推进,叶片中G DH 活性表现为先降后升的趋势,最大值出现在饱果期;茎、根和籽仁中G DH 活性的变化态势均表现为“V ”字型曲线,茎的峰谷出现在花针期,根和籽仁的峰谷则均出现在饱果期。

氮素水平对花生籽仁中G DH 活性的高低影响较大,表现为B2处理显著高于其他处理;但氮素水平对叶片、茎和根中活性大小的影响则较小。

3　讨论

不同形态N 素及N 素营养水平对小麦、玉米、水稻等禾本科作物籽粒氨基酸、蛋白质含量的影响已有很多研究[1-9],结果大致相同。由于不同N 素形态影响了植株的N 素利用率及N 收获指数,从而影响了不同作物的蛋白质含量。增加氮素营养可明显提高小麦、水稻、玉米等植株的吸氮能力和叶片及根系中可溶性蛋白质的含量[25],增加氨基酸含量[26];增施氮肥能提高地上各器官中游离氨基酸含量,进而促进蛋白质合成,提高籽粒蛋白质含量和蛋白质产量,但氮素营养水平过高导致新合成的碳流向氮代谢的多。

关于N 素营养对花生蛋白脂、氨基酸含量的影响的研究表明,施肥可不同程度地提高花生籽仁脂肪、粗蛋白和游离氨基酸含量,改善花生籽仁品质[27]。长期施用N 肥可以提高花生籽粒产量和籽粒中蛋白质含量[28]。本试验结果表明,适宜的N 素水平可提高花生营养器官中可溶性蛋白质和氨基酸的含量,但两者因N 素水平其含量不同,B2处理可溶性蛋白质含量较高,而花生叶片、茎和根等营养器官中游离氨基酸含量以B3处理较高,两者在果实中的含量均已B3处理为高。因此,要保持花生高效的氨同化作用和光合作用,必须配合适宜的施肥措施,以获得较高的品质和产量。

硝酸还原酶(NR )是植物氮素同化的关键酶,其活性的高低影响植物氮水平,也与植物的耐肥性有密切关系。研究表明,小麦灌浆初期旗叶NR 活性与作物籽粒产量、籽粒含氮量呈显著正相关[22]。增加施氮量可促进小麦根系的生长发育,提高小麦根系活力和硝酸还原酶活性[25],亦提高小麦旗叶NR 活性,使叶氮能维持较高水平且衰退缓慢;有利于小麦对氮素的吸收同化,促进氮素在植株体内的积累,进而提高小麦子粒蛋白质含量[25,29]。本试验条件下,施N 量的高低并未影响花生植株各器官中NR

活性的变化趋势,均随花生生长发育,各器官中NR

活性逐渐降低,但高量施N 提高了各器官中NR 活性,尤其在花生生育中后期,不施N 肥处理各器官中NR 活性最低,这可能是较高量施N 导致后期土壤中氮素含量仍较高,花生对N 仍有同化能力的缘故。亦表明合理施氮会提高花生成熟过程中各器官碳氮代谢的生理机能,延缓衰老时间,提高花生光合效率和产量。

处于氨同化中心作用的谷氨酰胺合成酶具有转化酶和合成酶2种酶功能活性,其活性的提高有利于植物铵同化和氮素转运[30]。G S 在不同发育阶段的时空表达对于植物生长发育起着重要的作用,而发育上的表达又受到许多因素诸如氮素类型、光质、碳代谢物以及某些逆境因素等的影响。G S 活性的提高可带动氮代谢运转增强,促进氨基酸的合成和转化。外源氮对高等植物氮素同化酶表达的影响因植物种类、组织器官、环境差异以及氮源的不同而有差别[10-15],关于单一氮素形态NH 4+-N 或NO 3--N 对植株氮代谢的影响的研究表明,NH 4+对植株

叶片G S 活性几乎无促进作用,而对根中的G S 活性

具有显著的促进作用;NO 3--N 可促进小麦、水稻叶片和根部G S 活性提高[10],增加小麦叶片NRB 的活性,而NH 4+-N 对其具有抑制作用。

G S 活性与G DH 活性在植物发育的初期阶段活

性较低,但是,随着生长发育,G DH 活性逐渐升高,这既反映了发育后期随植株衰老,光合能力下降,氮素在组织内积累,C/N 下降,植物碳素受限,使G DH 的重要性表现出来[15,31]。Rhodes 等[32,33]在对lemnB minor 的研究中,同样观察到G DH 与G S 活性

间的类似相反关系。这可能是由于谷氨酰胺作为G DH 的阻遏物,并同时作为G DH 诱导物。另一方

面,组织或器官在发育后期或者在逆境胁迫下,植株表现衰老,贮存的蛋白质降解,G S 活性降低,导致NH 4+水平升高,因而促进G DH 活性升高。但是,G DH 在植物氨同化中的作用一直是有争议的[34,35]。

本试验结果表明,适宜的氮素水平B2、B3使花生各营养器官中G S 活性显著提高,N 素施肥水平不改变花生植株各器官中G S 、G DH 活性的变化趋势,且两者的活性在花生生长发育过程中表现类似相反的关系,G S 表现为抛物线型,而G DH 则为倒抛物线型,这与前人的研究结果一致;同时施氮量多少对G S 活性有明显的影响,适宜的施氮量明显促进花生植株叶片、茎和根中G S 活性的提高,但高量施N 反而使其中的G S 活性降低。而果实中的G S 活性则以高量施N 较高。营养器官中G DH 活性受施N

量

174　华　北　农　学　报24卷

的影响不大,但高量施N 处理的花生籽仁中G DH 活

性反而最低。这可能是由于G DH 的双向调节作用所致,谷氨酰胺作为G DH 的阻遏物和诱导物,在花生生长发育后期,籽仁中贮存的蛋白质降解,G S 活性降低,导致NH 4+水平升高,因而促进G DH 活性升高。但高量供N ,氮素在组织内积累,C/N 下降,植物碳素受限,使G DH 的重要性表现出来。参考文献:

[1]　Alloush G A ,Bot J Le ,Sanders F E.M ineral nutrition of

chickpea plants supplied with NO 3or NH 4-N ionic balance in relation to irons tress[J ].Journal of Plant Nutrition ,1990,13(12):1575-1590.[2]　Beusichem M L ,K irkby E A ,Baas R.In fluence of nitrate and

amm onium nutrition on the uptake ,assimilation and distribu 2tion of nutrients in ricinus communis [J ].Plant Physiology ,1988,86(3):914-921.[3]　柴小清,印莉萍,刘祥林,等.不同浓度的NO 3-和NH 4+

对小麦根谷氨酰胺合成酶及其相关酶的影响[J ].植物学报,1996,38(10):803-808.[4]　黄勤妮,印莉萍,柴晓清,等.不同氮源对小麦幼苗谷氨

酰胺合成酶的影响[J ].植物学报,1995,37(11):856-868.[5]　王月福,于振文,李尚霞,等.氮素营养水平对冬小麦氮

代谢关键酶活性变化和籽粒蛋白质含量的影响[J ].作物学报,2002,28(6):743-748.[6]　王小纯,熊淑萍,马新明,等.不同形态氮素对专用型小

麦花后氮代谢关键酶活性及籽粒蛋白质含量的影响[J ].生态学报,2005,25(4):802-807.[7]　张智猛,戴良香,胡昌浩,等.氮素对不同类型玉米蛋白

质及其组分和相关酶活性的影响[J ].植物营养与肥料学报,2005,11(3):320-326.[8]　王宪泽,程炳嵩,张国珍.氮素形态与作物生育的关系

及其影响因子[J ].山东农业大学学报,1990,21(1):93-98.

[9]　Rhodes D ,Rendon G A ,S tewart D R.The regulation of am 2

m onia assimilating enzymesin lemna minor [J ].Planta ,1976,129:203-210.[10]　曹　云,范晓荣,贾莉君,等.不同水稻品种对NO 3-同

化差异的比较[J ].南京农业大学学报,2005,28(1):52-56.

[11]　陈　煜,朱保葛,张　敬,等.不同氮源对大豆硝酸还

原酶和谷氨酰胺合成酶活性及蛋白质含量的影响[J ].大豆科学,2004,23(4):143-146.

[12]　张宏纪,马凤鸣,李文华,等.不同形态氮素对甜菜谷

氨酰胺合成酶活性的影响[J ].黑龙江农业科学,2001(6):7-10.

[13]　朱长甫,苗以农,杨文杰,等.大豆种子蛋白质含量与

固氮酶活性和硝酸还原酶活性的关系[J ].中国油料作物学报,1992,14(2):29-32.[14]　李彩凤,马凤呜,赵　越,等.氮素形态对甜菜氮糖代

谢关键酶活性及相关产物的影响[J ].作物学报,2003,29(1):128-132.[15]　王云华,王志强,张楚富,等.硝态氮对黄瓜子叶谷氨

酰胺合成酶和谷氨酸脱氢酶活性的影响[J ].武汉植

物学研究,2004,22(6):534-538.[16]　肖昌珍,吴　渝,甘冬生,等.中国花生种质主要生化

品质分析[J ].花生科技,1999(增):161-167.[17]　王才斌,孙彦浩,牛振荣,等.高产花生叶片和荚果谈

碳氮化合物代谢规律的研究[J ].莱阳农学院学报,1996,13(2):99-104.

[18]　左元梅,刘永秀,张福锁.玉米、花生混作改善花生铁

营养对花生根瘤碳氮代谢及固氮的影响[J ].生态学报,2004,24(11):2584-2590.[19]　姜慧芳,任小平.干旱胁迫对花生叶片S OD 活性和蛋

白质的影响[J ].作物学报,2004,30(2):169-174.[20]　聂呈荣,不同氮肥和调节膦对花生氮代谢与产量的作

用[J ].中国油料,1996,18(2):31-33.[21]　聂呈荣,凌菱生.花生不同密度群体施用植物生长调

节剂对生长发育和氮素代谢的影响[J ].中国油料作物学报,1998,20(4):47-51.[22]　杜应琼,廖新荣,黄志尧,等.硼、钼对花生氮代谢的影

响[J ].作物学报,2001,27(5):612-616.[23]　上海植物生理学会,植物生理学实验手册[M].上海:

上海科学技术出版社,1999:115-150.[24]　Cren M ,Hirel B.G lutamine synthetase in higher plant :regu 2

lation of gene and protein expression from theorgan to the cell[J ].Plant cell Physiology ,1999,40:1187-1193.[25]　王月福,姜　东,余振文,等.氮素水平对小麦籽粒产

量和蛋白质含量的影响及其生理基础[J ].中国农业科学,2003,36(5):513-520.[26]　荆　奇,曹卫星,戴廷波.小麦籽粒品质形成及其调控

研究进展[J ].麦类作物学报,1999,19(4):46-50.[27]　张　翔,焦　有,孙春河,等.不同施肥结构对花生产

量和品质的影响[J ].土壤肥料,2003(2):30-32.[28]　甄志高,段　莹,王晓林,等.长期定位施肥对花生产

量和品质的影响[J ].土壤通报,2006,37(2):323-325.[29]　范雪梅,姜　东,戴廷波,等.不同水分条件下氮素供

应对小麦植株氮代谢及籽粒蛋白质积累的影响[J ].生态学杂志,2006(2):323-325.[30]　Thomas W Becker ,E lisa Carray ol ,Bertrand Hirel.G lutamine

synthetase and glutamatede hydrogenase is formsin maize leaves :localization ,relative roportion and the irrolein amm o 2nium assimilation ornitrogen transport [J ].Planta ,2000,(211):800-806.

[31]　M iflin B J ,Habash D Z.The role of glutamine synthetase and

glutamate dehydrogenase in nitrogen assimilation and possi 2bilities for im provement in the nitrogen utilization of crops [J ].J Exp Bot ,2002,53:979-987.

[32]　欧吉权,魏国威,张楚富,等.甜瓜子叶发育过程中蛋

白质水平和氨同化酶活性变化[J ].武汉大学学报:理学版,2003,49(4):538-542.[33]　Len Edela ,Haba P ,Maldonado J M.Changes in the Levels of

enzymes inv olved in amm onia assimilation during the dvelop 2ment of phaseolus vulgaris seedlings [J ].E ffects of Ex oge 2nous Amm onia Physiol Plant ,80:20-26.[34]　李常军,宫长荣,陈江华,等.烘烤湿度条件对烟叶氮

代谢的影响[J ].华北农学报,2001,16(2):141-144.[35]　韩锦峰,汪耀富,岳翠凌,等.干旱胁迫下烤烟光合特

性和氮代谢研究[J ].华北农学报,1994,9(2):39-45.

2期张智猛等:氮素供应水平对小粒型花生氮素代谢及相关酶活性的影响175