第二章 药物鉴别试验

第二章 药物的鉴别试验

基 本 要 求
l 掌握：1.一般与专属鉴别试验的概念和区别 2.常见一般鉴别试验的原理与方法 l 熟悉：1.鉴别试验的项目 2.UV、IR及色谱等鉴别方法 l 了解：鉴别试验的条件

一、概述
药物的鉴别试验 （identification test）
? 判断药物的真伪，质量检验的首项任务 ? 证实容器中的药物是否为其标签所标示 ? 虽有一定专属性，但不足以确证其结构

二、项目
性状 （description）
外观
包括聚集状态、晶型、色泽、臭味等
诺氟沙星 诺氟沙星 【性状】 本品为类白色 【性状】 本品为类白色 至淡黄色结晶性粉末； 至淡黄色结晶性粉末； 无臭，味微苦；在空气 无臭，味微苦；在空气 中能吸收水分，遇光色 中能吸收水分，遇光色 渐变深。 渐变深。 十一烯酸 十一烯酸 【性状】 【性状】 本品为淡 本品为淡 黄色至黄色的液体， 黄色至黄色的液体， 遇冷则成乳白色的结 遇冷则成乳白色的结 晶性团块；有特臭。 晶性团块；有特臭。

溶解度
磺胺嘧啶 磺胺嘧啶 【性状】 【性状】本品在乙醇或丙酮中微溶，在水中几乎不溶；在 本品在乙醇或丙酮中微溶，在水中几乎不溶；在 氢氧化钠试液或氨试液中易溶，在稀盐酸中溶解。 氢氧化钠试液或氨试液中易溶，在稀盐酸中溶解。 溶解度 极易溶解 易溶 溶解 略溶 微溶 极微溶解 几乎不溶或不溶 溶质1g(ml)能在溶剂 不到1ml中溶解 1～不到10ml中溶解 10～不到30ml中溶解 30～不到100ml中溶解 100～不到1000ml中溶解 1000～不到10000ml中溶解 10000ml中不能完全溶解

物理常数
包括相对密度、馏程、熔点、比旋度、吸收系数、 酸值、折光率等
n
熔点
? 一种物质按规定方法测定，由固体熔化成液体的 温度、熔融同时分解的温度或在熔化时自初熔至 全熔的一段温度
维生素 C 维生素 C 【性状】熔点 【性状】熔点 本品的 本品的 熔 熔点 点((附 附录 录Ⅵ Ⅵ C) C)为 为 190 ℃，熔融时 190～ ～192 192 ℃，熔融时 同时分解。 同时分解。

n
比旋度
? 在一定波长与温度下，偏振光透过长1dm且每1ml
中含有旋光性物质1g的溶液时测得的旋光度
维生素 C 维生素 C 【性状】比旋度 【性状】比旋度 取本品，精密称 取本品，精密称 定，加水溶解并定量稀释制成每 定，加水溶解并定量稀释制成每 1ml 0.10g 1ml中含 中含 0.10g的溶液，依法测定 的溶液，依法测定 （附录Ⅵ ），比旋度为＋ 20.5 ° （附录ⅥE E ），比旋度为＋ 20.5 ° 至＋ 21.5 °。 至＋ 21.5 °。

n
吸收系数
? 在给定波长、溶剂和温度等条件下，吸光物质在单位浓度、 单位液层厚度时的吸收度 ? 用于考查原料药质量以及制剂应用紫外法测定含量的依据 ? 摩尔吸收系数 ε = A / C· l C (mol/L) 1% ? 百分吸收系数 E1cm = A / C· l C (1%,W/V)
盐酸甲氧明 盐酸甲氧明 【性状】 吸收系数 【性状】 吸收系数取本品，精密称定，加水溶解并定 取本品，精密称定，加水溶解并定 量稀释制成每 1ml 30 μ g 量稀释制成每 1ml中约含 中约含 30 μ g的溶 的溶液，照分光光度 液，照分光光度 法（附录Ⅳ ），在 290nm 法（附录ⅣA A ），在 290nm的波长处测定吸收度，吸 的波长处测定吸收度，吸 1% E 收系数（ 133 141 收系数（ 1 cm ）为 ）为 133～ ～ 141。 。

一般鉴别试验（general identification test）
n
依据某一类药物的化学结构或理化性质特征，通过化 学反应鉴别药物的真伪 仅供确认单一化学药物
? ?
n
无机药物：阴、阳离子的特殊反应 有机药物：典型的官能团反应
n
Ch.P 附录Ⅲ：丙二酰脲类、托烷生物碱类、芳香第一 胺类、有机氟化物、无机金属盐类、有机酸盐类、无 机酸盐类

1. 有机氟化物
有机氟化物
氧瓶燃烧
茜素氟蓝
硝酸亚铈
无机氟离子 pH4.3
蓝紫色 络合物
2. 芳香第一胺类
Ar NH2 + NaNO2 + HCl Ar N 2 Cl
+ -
+
Ar OH
N N OH
NH2
NaOH
橙黄色~猩红色
COOC2H5 苯佐卡因

3. 托烷生物碱类
?
具有莨菪酸结构，可发生Vitali反应
固体KOH 水解产物 发烟硝酸 三硝基 KOH 醌型产物 莨菪酸 衍生物 (乙醇)
N CH3
p
H
OH
,H2SO4,H2O
取供试品约 10mg ，加发 烟硝酸 5滴，置水浴上蒸 干，得黄色残渣，放 冷，加乙醇 2~3滴，加固
O O 2
硫酸阿托品 (atropine sulfate)
体氢氧化钾一小粒，即 显深紫色。

4. 有机酸盐
u
水杨酸盐
COOH OH
+ FeCl3
中性
弱酸性
红色配位化合物 紫色配位化合物
u
酒石酸盐
COOH COOH
HO CH HO CH
+
Ag(NH3)2OH
D
Ag （银镜反应）

5. 无机金属盐
?
焰色反应（Na显鲜黄色；K显紫色；Ca显砖红色）
6. 铵盐
NH4++ NaOH
D
NH3 （氨臭）
使硝酸亚汞试液 湿润的滤纸变黑
使湿润的 红色石蕊 试纸变蓝
7. 无机酸根
?
氯化物
n n
?
硫酸盐
BaCl2 n PbAc2
n
?
硝酸盐
FeSO4+H2SO4 n Cu+H2SO4
n
AgNO3 MnO2+H2SO4

专属鉴别试验 （specific identification test）
n
根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学 特性不同，选用某些特有的灵敏的定性反应，鉴别药物 的真伪
n
在一般鉴别试验的基础上，利用各种药物的化学结构差 异，区别同类药物或具有相同化学结构部分的各个药物 单体
n
例如巴比妥类药物：苯巴比妥（含苯环）、司可巴比妥 （含双键）、硫喷妥钠（含硫原子）

苯巴比妥 苯巴比妥 【鉴别】 【鉴别】 (1) (1)本品显丙二酰脲类的鉴别反应（附录Ⅲ）。 本品显丙二酰脲类的鉴别反应（附录Ⅲ）。 (2) 10mg ，加硫酸 2 5mg (2)取本品约 取本品约 10mg ，加硫酸 2滴与亚硝酸钠约 滴与亚硝酸钠约 5mg，混 ，混 合，即显橙黄色，随即转橙红色。 合，即显橙黄色，随即转橙红色。 司可巴比妥钠 司可巴比妥钠 【鉴别】 【鉴别】(2) (2)本品显丙二酰脲类的鉴别反应（附录Ⅲ）。 本品显丙二酰脲类的鉴别反应（附录Ⅲ）。 (3) 0.1g 10ml 溶解后，加碘试液 2ml ，所 (3)取本品 取本品 0.1g，加水 ，加水 10ml 溶解后，加碘试液 2ml ，所 显棕黄色在 5 分钟内消失。 显棕黄色在 5 分钟内消失。 注射用硫喷妥钠 注射用硫喷妥钠 【鉴别】 0.1g ，加吡啶溶液 (1 → 10)10ml 【鉴别】(2) (2)取本品约 取本品约 0.1g ，加吡啶溶液 (1 → 10)10ml溶解 溶解 后，加铜吡啶试液 1ml ，振摇，放置 分钟，即生成绿色 后，加铜吡啶试液 1ml ，振摇，放置1 1 分钟，即生成绿色 沉淀。 沉淀。 (3) 0.2g ，加氢氧化钠试液 5ml (3)取本品约 取本品约 0.2g ，加氢氧化钠试液 5ml与醋酸铅试液 与醋酸铅试液 2ml 2ml，生成白色沉淀；加热后，沉淀变为黑色。 ，生成白色沉淀；加热后，沉淀变为黑色。

三、鉴别方法
n 化学鉴别法
特点：反应迅速，现象明显
ü ü ü ü
呈色反应 沉淀反应 荧光反应 气体发生反应

n 光谱鉴别法
1.紫外光谱（ultraviolet spectrophotometry, UV）
用于含有能吸收紫外可见光的基团而显示特征吸收光谱 的药物分子，但因其较为简单，曲线变化不大，用作鉴别的 专属性不如红外光谱。因此需要限定溶剂、波长以及吸收度 等测定条件以提高专属性。 常用方法 （1）测定最大吸收波长，或同时测定最小吸收波长 （2）规定一定浓度的供试液在最大吸收波长处的吸收度 （3）规定吸收波长和吸收系数 （4）规定吸收波长和吸收度比值 （5）经化学处理后，测定其反应产物的光谱特征

2.红外光谱（infrared spectrophotometry, IR）
专属性强、应用较广，主要用于组分单一、结构明确的原 料药。采用标准谱图对照法，试样制备方法主要有压片法、糊 法、膜法及溶液法。 注意事项 （1）晶型改变导致谱图不一致时，应按规定方法预处理 （2）供试片的制备条件可影响图谱形状及吸收强度 （3）注意大气干扰、分辨率差异及操作条件的不同 （4）制剂鉴别需提取分离后再压片绘制图谱

n 色谱鉴别法
利用不同物质在不同色谱条件下，产生各自的特征色谱 行为（Rf值或保留时间）进行，一般采用与对照品在相同 条件下操作并比较，以判断真伪。 ? 薄层色谱法（thin-layer chromatography, TLC）
①
②
③
④

?
高效液相色谱法
对照品比较法
u u
（high pressure liquid chromatography, HPLC）
供试品与对照品色谱峰的保留时间应一致 内标法时，药物与内标保留时间比值应一致 药物 内标
?
气相色谱法
（gas chromatography, GC）
n
生物学法