EPO对缺血%2f再灌注损伤大鼠肾脏细胞凋亡及相关蛋白表达的影响
?３２４?安徽医科大学学报ＡｃｔａＵｎｉｖｅｒｓｉｔａｔｉｓＭｅｄｉｃｉｎａｌｉｓＡｎｈｕｉ２０１０Ｊｕｎ；４５（３）与对照组比较：。Ｐ＜Ｏ．０５；与ＩＲ组比较：▲Ｐ＜Ｏ．０５
ｍｉｎ消除内源性过氧化酶，微波进行抗原修复，加兔抗鼠ｂｃｌ－２抗体１：１００稀释、ｂａｘ抗体ｌ：１５０稀释，３７℃恒温ｌｈ，同时采用加ＰＢＳ的方法作为阴性对照，依次滴加羊抗兔ＩｇＧ二抗和ＳＡＢＣ３７℃２０ｍｉｎ，最后在显微镜下用ＤＡＢ显色。胞质中有棕色颗粒者为阳性细胞，每张切片于阳性表达区域选取５个低倍无重叠视野，应用图像分析系统计算吸光度（Ａ）值并以此作为半定量参数反映ｂｃｌ－２，ｂａｘ表达。Ａ值越小，表示阳性产物ｂｃｌ－２，ｂａｘ蛋白表达越多；ｂｃｌ－２／ｂａｘ的Ａ值越高，表示ｂｃｌ－２／ｂａｘ越低。１．２．５ＨＥ染色组织学检查沿肾脏长轴切取皮质薄组织，冷冻石蜡包埋，做成冰冻切片后行Ｈ／Ｅ染色，制备透射电镜切片，以观察各实验组肾小管电镜下结构。
１．２．６统计学处理计量资料用菇±ｓ表示，采用ＳＰＳＳ１３统计软件进行统计分析，多组比较用单因素方差分析，两两比较采用ＳＮＫ法，取Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。
２结果
２．１各组肾功能的变化与假手术对照组比较，Ｉ／Ｒ组血ＢＵＮ、Ｃｒ水平显著增高（Ｐ＜０．０５）；与Ｉ／Ｒ组比较，Ｉ／Ｒ＋Ｔ组血ＢＵＮ、Ｃｒ增高幅度下降（但仍然高于假手术对照组水平），有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；Ｉ／Ｒ＋Ｔ组血ＢＵＮ、Ｃｒ水平较假手术组也升高，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）（见表１）。
表１各组血清尿素氮及肌酐水平的比较（ｎ＝１０，；±ｓ）
与对照组比较：。Ｐ＜Ｏ．０５；与ＩＲ组比较：▲Ｐ＜Ｏ．０５
２．２肾小管上皮细胞ＡＩ及各组比较假手术对照组少见凋亡细胞；Ｉ／Ｒ组凋亡细胞明显增多，多数是远端小管细胞，少数在近曲小管，肾小球未见明显的凋亡细胞；Ｉ／Ｒ＋Ｔ组细胞ＡＩ较Ｉ／Ｒ组显著减少，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）（见表２）。２．３ｂｃｌ－２、ｂａｘ蛋白表达的比较各组ｂｃ｜－２表达，Ｉ／Ｒ＋Ｔ组高于Ｉ／Ｒ组和假手术对照组，Ｐ＜０．０５；ｂｃｌ－２／ｂａｘ值，假手术对照组＞Ｉ／Ｒ＋Ｔ组＞Ｉ／Ｒ组，Ｐ＜０．０５（见表２）。
２．４电镜下肾组织结构的变化假手术对照组肾小管结构未见明显异常（图１Ａ）；Ｉ／Ｒ组可见部分肾小管上皮细胞有凋亡形态特征改变，即核染色质浓缩致密，出现染色质边集，小管上皮细胞空泡变性（图１Ｂ）。Ｉ／Ｒ＋Ｔ组肾小管上皮细胞结构损伤程度较Ｉ／Ｒ组明显减轻：表现为肾小管上皮细胞大部分结构正常或基本正常，染色质分布较均，无明显空泡形成，肾小球结构无明显异常（图ｌＣ）。
图１肾组织电镜图像×２００
Ａ：假手术组；Ｂ：Ｉ／Ｒ组；Ｃ：Ｉ／Ｒ＋Ｔ组
３讨论
肾脏缺血再灌注损伤（ＩＲＩ）在休克、严重创伤及器官移植过程中是一种常见病理生理现象，尽管采取各种预防及治疗手段，但仍有一定的死亡率，ＩＲＩ成为临床上一棘手的课题。肾脏血供丰富，对缺血缺氧非常敏感，移植肾ＩＲＩ可导致肾功能丧失甚至受体生命危险。ＩＲＩ损伤以小管细胞为主，结局可
分为细胞坏死和细胞凋亡。细胞凋亡又称程序性细
EPO对缺血/再灌注损伤大鼠肾脏细胞凋亡及相关蛋白表达的
影响
作者：徐礼友， 诸禹平， 宣强， 项平
作者单位：安徽医科大学附属省立医院泌尿外科,合肥,230001
刊名：
安徽医科大学学报
英文刊名：ACTA UNIVERSITATIS MEDICINALIS ANHUI
年，卷(期)：2010,45(3)
被引用次数：1次
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