HPLC-MS法测定人血浆中那格列奈浓度

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米格列奈钙片健康人体药动学研究

米格列奈钙片健康人体药动学研究恽芸蕾;高守红;樊成辉;缪海均【摘要】目的建立测定人血浆中米格列奈钙的LC-MS/MS法,并应用于健康人体药动学研究.方法 30名健康志愿者,随机分为3组(每组10人,男女各半),分别口服米格列奈钙片5、10、20 mg,采用非房室模型统计矩法计算药动学参数.结果健康受试者单次给药5、10、20 mg后,主要药代动力学参数分别为Cmax(799.5±189.8)、(1 689.8±348.4)和(3032.9±755.6)ng/ml;tmax(0.38±0.16)、(0.43±0.16)和(0.54±0.26)h;AUC0～10(1 051.3±276.4)、(2 324.5±481.8)和(5 028.8±1 283.6) ng·h/ml; AUC0～∞(1 059.4±278.2)、(2 342.8±488.6)、(5 073.9±1315.9)ng· h/ml;t1/2(1.80±0.42)、(1.68±0.37)和(1.56±0.19)h.结论本分析方法准确、灵敏,适用于米格列奈钙片的健康人体药动学研究.【期刊名称】《药学实践杂志》【年(卷),期】2014(032)001【总页数】4页(P45-48)【关键词】米格列奈钙;LC-MS/MS;药代动力学【作者】恽芸蕾;高守红;樊成辉;缪海均【作者单位】第二军医大学附属长征医院药学部,上海200003;第二军医大学附属长征医院药学部,上海200003;第二军医大学附属长征医院药学部,上海200003;第二军医大学附属长征医院药学部,上海200003【正文语种】中文【中图分类】R969.1米格列奈是继瑞格列奈、那格列奈后第3个格列奈类药物，是苯丙氨酸的衍生物。

四川大学华西药学院706药学综合考研试题

四川大学2009年攻读硕士学位研究生入学考试试题科目：药学综合代玛：706#专业：药理学、药物化学、药剂学、生药学、药物分析学微生物与生化药学、生物化学与分子生物学、生物医学工程；（试题共13页）(答案必须写在答题纸上,写在试题上不给分）物理化学部分（50分）一、选择题（第14题为多选题。

答案须全对才给分；其余为单选题每小题2.5分，共50分）（）1、H2(g)和N2(g)在密闭的绝热钢瓶中生成NH3(g)，则体系A. ΔU=0，ΔH<0B. ΔU=0，ΔH=0C. ΔU<0，ΔH=0D. ΔU>0，ΔH=0（）2.基尔霍夫定律(Kirchhoff’s Law)A.只适用于讨论化学反应的热效应随温度的变化B.只适用于讨论相变化时的相变热随温度的变化C.同时适用于讨论化学反应及相变化时热效应随温度的变化D.适用于讨论任何过程的ΔH随温度的变化（）3、在253k 和101325 Pa下，1 mol的过冷水结成冰，则体系、环境及总熵变应该是：A ΔS体系>0, ΔS环境>0，ΔS总>0B ΔS体系<0, ΔS环境>0，ΔS总>0C ΔS体系<0, ΔS环境<0，ΔS总<0D ΔS体系<0, ΔS环境>0，ΔS总<0（）4、2 mol理想气体经一等温可逆压缩过程，则A. ΔG>ΔAB. ΔG=ΔAC. ΔG<ΔAD.无法比较（）5、已知温度T时反应(1)H2O(g)H2(g) + 1/2 O2 (g) 的标准平衡常数K1θ及反应(2)CO2(g)CO(g)+1/2O2(g) 的标准平衡常数K2θ，则同温度下反应(3) CO(g)+H2O(g) CO2(g)+H2(g)的标准平衡常数K3θ为（假定气体均为理想气体）A K3θ=K1θ+K2θB K3θ=K1θ* K2θC K3θ=K2θ/ K1θD K3θ=K1θ/ K2θ（）6.在一个抽空的容器中，放入过量的NH 4I (s)发生下列反应并达平衡：NH 4I(s)NH 3(g)+ HI(g)2HI(g)H 2(g)+ l 2(g)则体系的相数φ、组分数K 和自由度fA. φ=2，K =2， f =2B. φ=2，K =1， f =1C. φ=2，K =2， f =1D. φ=2，K =1， f =0（）7.氯仿（A)和丙酮（B)生成恒沸混合物，最高恒沸温度为337.7K,恒沸组成中B 20%(w/w),现将组成含B 为40%(w/w)的混合液在精馏塔中分离，则：A. 可分离得纯A 和恒沸混合物B. 可分离得纯B 和恒沸混合物C. 可同时分离得纯A 和纯BD. 既不能分离得纯A,也不能分离得纯B（）8.若要使CO 2 在水中的溶解度为最大，应选择的条件是A.高温低压B.高温高压C.低温低压D.低溫高压（）9.电解质溶液在稀释过程中A.电导率增加B.电导率减少C.摩尔电导率增加D.摩尔电导率减少（）10.某电池在298 K 、101325 Pa 下的放电过程，若电池反应的可逆热Q 2=-100 J 则该反应的焓变Δt H mA. Δt H m = -100JB. Δt H m =0JC. Δt H m > -100JD. Δt H m < -100J（）11.下列电池中，反应不可逆的是A. Zn(s) | H 2S04(a) | Cu(s)B. (Pt) H 2 (p) | NaOH (a) | HgO (s) | Hg( I)C. Zn (s) | Zn 2+ (a1)|| H +(a2) | H 2(p) (Pt)D. Cu (s) | Cu 2+(a1) || Ag +(a2) | Ag (s)（）12.某化学反应其反应物消耗一半所需的时间是它消耗掉1/4所需时间的2倍，则反应级数为A. 一级B. 二级C.三级D.零级（）13. 一定温度下,在反应器中刚开始只有反应物A,结果发生如下对峙反应:下列说法中哪一项是不正确的？A 开始时A 的消耗速率最快B. 反应进行的净速率是正，逆反应速率之差C. k1/k2的值是恒定的D. 达到平衡时正、逆反应速率常数相等（）14. 一定体积的水，当聚成一个大水球，或者分散成许多小水滴，同溫度下，两种状态相比较，以下性质保持不变的有：A 表面张力 B.饱和蒸气压 C.液面下的附加压力 D.比表面E.对玻璃的润湿性（）15. 293 K 时，σ=27 X 10-3N·m-1，σ水=72 X 10-3N·m-1，σ正庚醇,水=8 x 10-3正庚醇N·m-1互相饱和后，σ’正庚醇=26 X 10-3N·m-1，σ’水=28X 10-3N·m-1，σ’正庚醇,水=σ正庚醇,水。

血浆中药物的浓度检测方法

血浆中药物的浓度检测方法一、引言血浆中药物的浓度检测是临床药学和药物研究的重要内容之一。

通过测定血浆中药物的浓度，可以评估药物的吸收、分布、代谢和排泄情况，从而指导药物的使用和剂量调整。

本文将介绍血浆中药物浓度检测的方法及其应用。

二、常用的血浆中药物浓度检测方法2.1 高效液相色谱法（HPLC）HPLC是目前应用最广泛的血浆中药物浓度检测方法之一。

它基于样品中药物与色谱柱固定相之间的相互作用，通过控制流动相的性质和流速，使药物在柱上以不同速度传输，从而实现药物的分离和定量测定。

2.2 气相色谱法（GC）GC是一种基于样品中药物在气相中的分配行为进行分离和测定的方法。

它适用于易于挥发的药物的检测，具有高分辨率和灵敏度高的优点。

然而，GC需要样品预处理的步骤较多，对仪器的要求也较高。

2.3 质谱法（MS）质谱法结合了质谱仪和色谱仪的优势，可以实现对样品中药物的高灵敏度和高选择性的检测。

质谱法广泛应用于药物代谢动力学研究和药物相互作用的研究中。

2.4 免疫测定法免疫测定法是利用抗体与药物结合的特异性来测定样品中药物浓度的方法。

常用的免疫测定法包括放射免疫测定法、酶联免疫测定法和荧光免疫测定法等。

免疫测定法具有操作简便、快速、灵敏度高的特点，但对抗体的选择和制备要求较高。

三、血浆中药物浓度检测方法的应用3.1 临床药学血浆中药物浓度检测在临床药学中起到了重要的作用。

通过监测患者血浆中药物的浓度，可以评估药物的疗效和安全性，指导药物的使用和剂量调整。

例如，对于某些具有副作用的药物，如抗癫痫药物，通过监测血浆中药物浓度，可以避免药物过量引起的不良反应。

3.2 药物研究血浆中药物浓度检测在药物研究中也有广泛的应用。

药物的吸收、分布、代谢和排泄过程可以通过检测血浆中药物浓度来研究。

这对于药物的药代动力学和药效学研究具有重要意义。

同时，血浆中药物浓度的检测也可以用于药物相互作用的研究，评估不同药物在体内的相互影响。

体内药物分析实验

1.HPLC法测定大鼠血浆中的山奈酚1.1目的要求1.掌握血浆样品的前处理方法。

2.熟悉方法回收率和萃取回收率实验操作和评价。

3.熟悉大鼠眼眶采血技术；熟悉方法学研究中其他评价内容。

1.2 主要实验材料与仪器山奈酚（Kaempferol）及其对照品，黄芩素（baicalein），抗坏血酸，肝素，β-葡萄糖醛酸苷酶（β-glucuronidase）和硫酸酯酶（sulfatase），分析纯甲醇，冰醋酸、无水乙醚，色谱纯乙腈；高效液相色谱仪，氮吹装置，恒温水浴，漩涡混合器，13000r/min台式离心机，不同规格移液枪（5, 20, 50, 100, 200, 1000μL）和容量瓶（10，25mL），5~10mL 具塞离心管若干；雄性SD大鼠（180~220g）。

1.3 实验原理山奈酚吸收进入体内后，多以二相代谢物葡萄糖醛酸苷和硫酸酯的形式存在。

由于山奈酚葡萄糖醛酸苷和硫酸酯的对照品难以获得，故采用加入硫酸酯和葡醛酸苷水解酶处理样品，使代谢物水解后测定苷元山奈酚的浓度。

实验以黄芩素为内标，HPLC法测定血浆XX奈酚浓度，对建立的方法进行方法学评价。

1.4 实验方法1.色谱条件：C18柱（250mm×4.6mm，5μm），配保护柱，柱温40℃；乙腈-0.5%冰醋酸（35:65）为流动相，流速1mL/min；检测波长370nm；进样量20μL。

2.溶液配制：取山奈酚对照品约2.5mg，精密称定，置25mL量瓶中，用甲醇溶解并定容。

精密吸取适量，分别用甲醇稀释成0.3、0.6、3、6、9、20和30μg/mL的标准系列溶液，置4℃冰箱保存。

另取黄芩素适量，精密称定，用甲醇溶解并定量稀释至0.1mg/mL的溶液，精密吸取1.5mL置10mL量瓶中，用甲醇定容，得内标溶液，置4℃冰箱保存。

3.血浆样品处理：取大鼠血浆样品120μL，加入甲醇20μL、1%冰醋酸（含2mg/mL抗坏血酸）32μL、β-葡萄糖醛酸苷酶（20U/mL）和硫酸酯酶（6U/mL）的混合水溶液50μL，37℃水浴温育30min后，加入内标溶液50μL，然后加无水乙醚2mL，漩涡混合5min，于12000r/min离心5min；取上清液在氮气流下挥干，残留物用100μL 甲醇复溶，12000r/min离心5min，取上清液进样分析。

超高效液相色谱-串联质谱在中西医药品检测与分析中的应用

2020年12月邓博等.超高效液相色谱-串联质谱在中西医药品检测与分析中的应用49超高效液相色谱-串联质谱在中西医药品检测与分析中的应用邓博，邓护军，杨飞，门靖西安万隆制药股份有限公司，西安710119摘要超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-M S/MS)是一种高效、迅速、稳定性和精密度高的综合性分析技术,其应用前景十分广阔。

本文着重介绍了近年来UPLC- MS/MS在人体化学药品、动物体内化学药品、以及中医药分析与检测三方面的最新应用研究，并展望了其发展前景，以期为医药产品检测与分析、临床药物应用提供参考。

关键词液相色谱串联质谱中西医检测分析应用超高效液相色谱-串联质谱（UPL C - M S/ M S)检测分析技术具有高效分离度和超高灵敏度的优势，可显著提高数据分析与检测的可靠性与耐用性，增强目标化合物的分析效率与准确度，是分析检测领域内的一种综合性的分析手段[3_4]。

近年来,UPLC - M S/M S分析技术在医药[5-6]、化工[7]、生物工程[84、保健食品[1°]、特种材料"1]等众多领域应用广泛，尤其是化工与医药产品的检测与残留分析凭借U P L C- M S/M S获得了大幅度的提升与改进。

本文将重点综述U P L C- M S/M S在中西医药品检测与分析中的应用研究现状，从人体化学药品、动物体内化学药品、以及中医药分析与检测三方面归纳U P L C -M S/M S最新应用研究进展。

1 UPLC-M S/M S应用于人体化学药品的检测1.1 UPLC- M S/M S检测抗菌药物泊沙康唑是一种三唑类广谱抗真菌药物，具有高效、广谱、低毒等特点[U]。

检测该药物在人体血浆中的浓度对监测药物吸收、指导临床用药安全尤为重要[1243]。

金鸿宾等[14]建立了一种特异性强、灵敏度高的U P L C - M S/M S法测定血浆中泊沙康唑浓度方法。

液相色谱串联质谱检测血液中43种药物的方法[发明专利]

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910769993.1(22)申请日 2019.08.20(66)本国优先权数据201910181323.8 2019.03.11 CN(71)申请人成都民用航空医学中心地址 610200 四川省成都市双流区双流国际机场东四路成都民用航空医学中心(72)发明人席彰　周亚兰　(74)专利代理机构成都虹桥专利事务所(普通合伙) 51124代理人张小丽(51)Int.Cl.G01N 30/88(2006.01)G01N 30/06(2006.01)(54)发明名称液相色谱串联质谱检测血液中43种药物的方法(57)摘要本发明属于药物检测技术领域，具体涉及一种液相色谱串联质谱检测血液中43种药物的方法。

针对现有技术中缺乏一种能够同时检测7种常见毒品、11种降压药物、11种降糖药物以及14种精神类药物的方法，本发明提供了一种方法，包括以下步骤：a、待测样品采用乙腈沉淀蛋白；b、采用高效液相色谱-串联质谱法的多反应监测MRM模式针对所选药物进行检测，以化合物保留时间、两对或三对母离子/子离子对分段进行质谱筛查分析。

本发明方法能在25min内一次性快速准确的完成常见降血压药物、降血糖药物、精神类药物及毒品等43种药物的筛查分析，检测效率高，方法灵敏度好，适宜推广使用。

权利要求书2页说明书31页附图5页CN 110531014 A 2019.12.03C N 110531014A1.液相色谱串联质谱检测血液中43种药物的方法，其特征在于，包括以下步骤：a、采集待测抗凝血液，第一次离心，取上清液采用乙腈沉淀蛋白，涡旋混合，第二次离心，转移有机层至另一离心管中，干燥后残渣用初始比例流动相溶解，涡旋混合，第三次离心，取上清液；b、采用高效液相色谱-串联质谱法的多反应监测MRM模式对步骤a得到的上清液针对所选药物进行检测，以化合物保留时间、两对或三对母离子/子离子对分段进行质谱筛查分析。

体内药物分析技术的研究进展

体内药物分析技术的研究进展摘要】本文通过查阅近年来国内外有关体内药物分析理论的文献，结合个人的实践经验和认识，对其测定前样品的处理以及测定的基本程序等方面进行了综述。

【关键词】体内药物分析样品处理样品测定体内药物分析是药物分析的重要分支，具有自身独特的理论体系。

该理论是研究生物机体中药物及其代谢物和内源性物质的质与量变化规律的分析方法学，从而获得药物代谢动力学的各种参数、及代谢的方式、途径等信息，有助于药物的研究和临床合理应用[1]。

1 体内药物分析中的样品预处理体内药物分析的样品成分复杂，被测组分含量低。

因此，测定前样品需经过分离、纯化、富集、改变属性等处理后，方可进行测定。

根据样品的种类、所用的测定手段、被测药物的种类及浓度等不同，预处理方法各异。

1.1 预处理的基本理论[2]1.1.1 预处理的一般原则体内药物分析中的样品预处理方法的选择，主要依据生物样品的类型、药物的结构及性质及测定方法的种类等。

例如，血浆或血清需除蛋白，使药物从蛋白结合物中释出；唾液样品主要采用离心去除粘蛋白沉淀等。

药物的酸碱性（PKa）与溶解性涉及到药物的萃取手段；药物在样品中的浓度相差悬殊，浓度大的样品对前处理要求稍低，浓度越低则样品前处理要求越高等。

放射免疫测定法由于具有较高的灵敏度和专属性，生物样品只需经初步处理去除主要干扰物质后即可直接用于测定；而高效液相色谱法，为防止蛋白质等物质在色谱柱上沉积，上柱前需对生物样品进行去蛋白或进行溶剂萃取或制备衍生处理等。

1.1.2 预处理的基本方法1.1.2.1 蛋白质的去除沉淀蛋白的方法有多种，依据沉淀试剂种类的不同，析出的蛋白质的形状亦不同，且所得上清液的pH值也稍有差别。

例如，加入与水混溶的有机溶剂可使蛋白质分子内及分子间的氢键放生变化而使蛋白质凝聚；加入中性盐，使溶液的离子强度发生变化，蛋白质脱水而沉淀；加入强酸及含锌盐及铜盐的沉淀剂，使溶液的pH值异于蛋白质的等电点，蛋白质以不溶性盐形式析出；此外，测定一些与蛋白结合牢固或形成缀合物的药物时，常采用有机破坏、酶解、酸水解或酶水解等方法，使被测药物得以释出。

人血浆中游离甲氧基去甲肾上腺素与甲氧基肾上腺素的高效液相色谱串联质谱检测方法

人血浆中游离甲氧基去甲肾上腺素与甲氧基肾上腺素的高效液相色谱串联质谱检测方法人血浆中游离甲氧基去甲肾上腺素（NMN）与甲氧基肾上腺素（NM）是两种重要的生物活性物质，它们在人体内具有重要的生理功能。

因此，准确、快速地检测人血浆中这两种物质的含量对于了解它们在生理过程中的作用具有重要意义。

本文将介绍一种高效液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）方法，用于人血浆中游离NMN与NM的检测。

首先，我们需要准备实验所需的试剂和设备。

试剂包括：纯化的NMN和NM标准品、甲醇、乙腈、乙酸、磷酸二氢钾、无水硫酸钠等。

设备包括：高效液相色谱仪、质谱仪等。

接下来，准备血浆样品。

首先，将血浆样品离心，并将上清转移至离心管中。

然后，在离心管中加入甲酸，使样品蛋白质沉淀。

接着，用乙腈沉淀样品中的蛋白质，并在甲酸中转移溶解。

最后，用乙酸醇和磷酸二氢钾溶液处理样品，以去除杂质。

然后，进行色谱条件的优化。

以甲酸-乙腈为流动相，在色谱柱上进行梯度洗脱，以实现NMN和NM的分离。

优化的条件包括流速、流动相组成、温度等。

接下来是检测。

将预处理的样品注入高效液相色谱仪进行分离，然后进入质谱仪进行检测。

质谱仪的条件需要进行优化，包括碰撞能量、离子源温度、离子种类等。

最后，使用外标法计算样品中NMN和NM的浓度。

通过建立标准曲线，根据样品中峰的面积与标准品峰面积的比值，计算出样品中两种物质的浓度。

总结起来，本文介绍了一种利用高效液相色谱串联质谱的方法，用于人血浆中游离NMN与NM的测定。

通过优化分离条件和质谱条件，可以快速、准确地检测样品中这两种生物活性物质的含量。

这种方法对于研究NMN和NM在人体内的生理功能具有重要意义。

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后，采用选择性离子检测（Ｉ方法测定其血药浓度。色谱柱：ｅｎｋｏａＣ５ｐ２１ｍＳＭ）Ｔｋｏｒｍ（，．ｍ×１０ｍ；ｍ，０ｍ）流动相：］－．％甲Ｌ／ｏ１￣酸（０４，／；６：０ｖｖ）流速ｏ２ｍ・ｉ～；温：５℃。结果．ｌｍｎ柱２标准曲线线性范围为００．５～１ｇ－～，准曲线线性关系良好，５ｍＬ标
０２ｍｌ・ｎ～、ｈｏｕｅｅａｕｅｉ２ ℃ 、ａｙｉｎｔｅｍａｓｓｅｔｏｔｒｗａｅｆｒｅｎｔｅｓｌｃｅ — ｎｍｏｉｒｇｍｏ — 、ｍｉＴｅｃｌｍｎｔｍｐｒｔｒｓ５Ａｎｌｓｓｉｈｓｐｃｒｍｅｅｓｐｒｏｍｄｉｅｅｔｄｉｎｔｉｄｈｏｏｎ
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安徽医药
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◇药物分析 ◇
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本方法操作简便，灵敏度高，品稳定性良好，用于那格列奈的临床血药样适
浓度检测及药动学研究。关键词：列奈；ＰＣＭＳ血药浓度那格ＨＬ— ；
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回归方程为：ｓ０７６Ｃ一．０４（＝．９）Ａ＝．１７００９，ｒ０９６８。高、低三种浓度的日内和Ｅ间变异均小于１．％，中、ｔ００绝对回在９．％～１５７。结论１１０．％
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