生化各章节重点及复习题

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生化各章节重点及复习题

蛋白质结构与功能

单选题

1细胞内含量最多的有机成分为

A 蛋白质

B 核酸

C 糖

D 脂类

E 酶

2以下属于营养必需氨基酸的是

A 天冬酰胺

B 谷氨酰胺

C 酪氨酸

D 赖氨酸

E 丝氨酸

3镰刀型红细胞性贫血是哪种蛋白质结构的改变与异常

A 乳酸脱氢酶

B 淀粉酶

C 胰岛素

D 肌红蛋白

E 血红蛋白

4组成蛋白质的氨基酸之间分子结构的不同在于其

A Cα

B Cα-H

C Cα-COOH

D Cα-R

E Cα-NH2

5氨基酸排列顺序属于蛋白质的几级结构

A 一级

B 二级

C 三级

D 四级

E 五级

6维持蛋白质α-螺旋的化学键主要是

A 肽键

B 二硫键

C 盐键

D 氢键

E 疏水键

7一般蛋白质分子中二硫键断裂,生物活性发生的变化是

A 升高

B 降低

C 不变

D 丧失

E 略有改变

8肌红蛋白分子中比较多的二级结构是

A α-螺旋

B β-折叠

C β-转角

D 无规卷曲

E 以上均不是

9蛋白质的紫外吸收峰OD280测定的基础主要是由于含有以下什么氨基酸?

A 色氨酸

B 谷氨酸

C 苯丙氨酸

D 天冬氨酸

E 组氨酸

10蛋白质的变构效应常发生在具有几级结构的蛋白质分子上?

A 一级

B 二级

C 三级

D 超二级

E四级

名词解释

1酸性氨基酸

2中性氨基酸

3肽键

4寡肽

5二硫键

6构象

7亚基

8α-螺旋

9β-折叠

10变性

问答题

1大分子蛋白质的分子组成,分子结构特点是什么?

2试描述蛋白质分子各种空间结构的定义与特点。

3蛋白质分子中二硫键的存在与作用是什么?

4试小结蛋白质分子中α-螺旋的结构要点。

5β-折叠与β-转角有何不同?

6概述二硫键在蛋白质分子中的分布与重要性

7蛋白质一级结构与功能的关系是什么?

8蛋白质空间结构与功能的关系是什么?

9什么是蛋白质的变性和复性?试叙述其分子机制。

10蛋白质变构效应有什么生理意义?

核酸结构与功能

单选题

1.核酸分子中储存,传递遗传信息的关键部分是:

A.磷酸戊糖B.核苷

C.碱基顺序D.戊糖磷酸骨架

E.磷酸

2.关于核苷酸生理功能的错误叙述是:

A.作为生物体的直接供能物质B.作为辅酶(基)的成分C.作为生理、生化调节剂D.作为核酸的基本结构成分E.以上都不对

3.关于ChargaffDNA组成规律不包括:

A.同种生物的DNA碱基组成相同

B.异种生物的DNA碱基组成不同

C.碱基成分随年龄的不同而不同

D.嘌呤含量等于嘧啶含量

E.碱基有互补对应关系

4.-DNA分子,A的含量为15%,则C的含量应为:

A.15%B.20%

C.25%D.30%

E.35%

5.溶液中DNA分子最稳定的构象是:

A.A型B.B型

C.C型D.D型

E.Z型

6.RNA是:

A.核糖核苷酸B.脱氧核糖核酸

C.脱氧核糖核苷酸D.核糖核酸

E.核糖核蛋白体

7.tRNA结构的特征是:

A.5'-末端的几个碱基总与近3'-末端的几个碱基配对B.3'-末端总由3个不配对碱基组成

C.TψC环含有二氢尿嘧啶

D.反密码环的反密码子第一个碱基都是I

E.额外环的碱基数目均由10个NMP组成

8.关于tRNA分子的下述各项,哪项是错误的?

A.在RNA中它是最小的单链分子

B.tRNA的二级结构通常为三叶草形

C.在RNA中tRNA含稀有碱基最多

D.它可在二级结构基础上进一步盘曲为倒“L”形的三级结构E.以上都不对

9.DNA大小的表示单位不包括:

A.沉降系数B.分子量

C.分子长度D.分子体积

E.碱基对数目

10.关于DNA复性的描述,哪点不对?

A.复性反应速度常数K与复杂性成反比

B.Cot1/2的值与碱基对数目成正比

C.复性时DNA分子较大则所需时间较长

D.复性时第一阶段较为容易,而第二阶段所需时间较长

E.温度缓慢下降时,复性效果较好

名词解释

1核酸

2脱氧核酸

3DNA双螺旋

4Chargaff规则

5碱基配对

6超螺旋

7核小体

8变性

9增色效应

10分子杂交

问答题

1试比较DNA与RNA结构组成上的不同点。

2举例说明体内有哪些核苷酸具有参加物质代谢调控和多种蛋白质活性的调节?3试描述DNA双螺旋的结构特点。

4DNA双螺旋结构模型的提出有何重大的生理意义?

5什么是DNA双螺旋的多样性?

6mRNA的结构有什么特点?它的功能是什么?

7试讨论tRNA各级结构特点及其功能。

8什么是RNA组学,它讨论的对象是什么?

9核酸测定的分子基础什么,常用测定核酸的方法是什么?

10什么是减色效应?试讨论其机制。

第四章酶

选择题

1.以下是影响酶促反应初速度的因素,例外的是:

A [S]

B [E]

C [pH]

D 时间

E 温度

2.下列有关LDH同工酶的叙述哪个是正确的?

A 由不同亚基组成的寡聚体

B 对同一底物具有不同专一性

C 对同一底物具有相同的Km值

D 电泳迁移率往往相同

E 结构相同来源不同

3.酶分子在催化反应时,具有下列哪一种能量效应?

A 增高反应活化能

B 降低反应活化能

C 产物能量水平

D 产物能量水平

E 反应自由能

4.下列哪一项不是辅酶的功能?

A 转移基团

B 传递氢

C 传递电子

D 某些物质分解代谢时的载体

E 决定酶的专一性

5.酶共价修饰调节的主要方式是

A甲基化与去甲基B乙酰化与去乙酰基

C磷酸化与去磷酸D聚合与解聚

E酶蛋白的合成与降解

6.丙二酸对琥珀酸脱氢酶的影响是属于:

A 产物反馈抑制

B 产物阻遏抑制

C 非竞争性抑制

D 竞争性抑制

E不可逆抑制

7.酶的活性中心是指:

A 酶分子上的几个必需基团

B 酶分子与底物结合的部位

C 酶分子结合底物并发挥催化作用的关键性三维结构区

D 酶分子中心部位的一种特殊结构

E酶分子催化底物变成产物的部位

8.酶原激活的生理意义是:

A 加速代谢

B 恢复酶活性

C 促进生长

D 避免自身损伤

E保护酶的活性

9.测定酶活性时要测定酶促反应的初速度,其目的是为了:

A 为了节约底物

B 为了使酶促反应速度与酶浓度成正比

C 为了尽快完成测定工作

D 为了防止出现底物抑制

E为了使反应不受温度的影响

10.米氏方程的意义是能很好地解释:

A 多酶体系反应过程的动力学过程

B 多底物酶促反应过程的动力学过程

C 单底物单产物酶促反应的动力学过程

D 非酶促简单化学反应的动力学过程

E别构酶的酶促反应的动力学过程

名词解释:

1全酶

2辅酶

3底物

4酶的活性中心

5必需基团

6酶原激活

7活化能

8Km

9竞争性抑制作用

10关键酶

问答题

1什么是酶?酶的化学本质是什么?

2试述酶促反应的特点。

3试述影响酶促反应速度的因素?

4当一酶促反应的速度为Vmax的80%时,Km=1.5mmol/L, 求[S]?

5二异丙基氟磷酸(DIFP)能使酶失活,它作用于酶活性中心的什么基团?为什么解磷定可以恢复酶的活力?

6酶在的三种可逆性抑制剂作用下V、Km分别有什么变化?

7什么是酶的变构调节,试述酶变构调节的特点。

8什么是酶的共价修饰调节,试述酶共价修饰调节的特点。

9试比较酶的变构调节与共价修饰调节的异同点。

10何谓同工酶?举例说明同工酶的生理意义。

第五章脂类代谢

单选题

1 下列哪种代谢所形成的乙酰CoA为酮体生成的主要原料来源?

A 来源于葡萄糖氧化分解

B 甘油转变而成

C 脂肪酸β-氧化生成

D 丙氨酸转变而成

E 甘氨酸转变而成

2 乙酰CoA羧化酶和丙酮酸羧化酶的共同点是:

A 受柠檬酸的调节

B 受乙酰CoA的调节

C 以NAD+为辅酶

D 以HSCoA为辅酶

E 以生物素为辅酶

3 对于下列各种血浆脂蛋白的作用,哪种描述是正确的?

A CM主要转运内源性TG

B VLDL主要转运外源性TG

C HDL主要将Ch从肝内转运至肝外组织

D 中间密度脂蛋白(IDL)主要转运TG

E LDL是运输Ch的主要形式

4 控制长链脂肪酰辅酶A进入线粒体氧化速度的因素是:

A 脂酰辅酶A(CoA)合成酶活性

B ADP含量

C 脂酰CoA脱氢酶的活性

D 肉毒碱脂酰转移酶的活性

E HSCoA的含量

5 某饱和脂肪酸1摩尔在体内完全氧化为CO2、H2O同时形成147摩尔A TP,此饱和脂肪

酸为:

A 硬脂酸

B 十四碳脂肪酸

C 软脂酸

D 二十碳脂肪酸

E 十二碳脂肪酸

6 下列哪种物质可作为卵磷脂和脑磷脂合成中的共同重要原料?

A 甘氨酸

B S-腺苷蛋氨酸

C 丝氨酸

D 苏氨酸

E 三磷酸胞苷(CTP)

7 生物合成胆固醇的限速步骤是

A 焦磷酸牛儿酯→焦磷酸法呢酯

B 鲨烯→羊毛固醇

C 羊毛固醇→胆固醇

D 3-羟基-3-甲基戊二酰CoA→甲基二羟戊酸(MVA)

E 二乙酰CoA→3-羟基-3-甲基戊二酰CoA

8 当6-磷酸葡萄糖脱氢受抑制时,其影响脂肪酸生物合成是因为:

A 乙酰CoA生成减少

B 柠檬酸减少

C ATP形成减少

D NADPH+H+生成减少

E 丙二酸单酰CoA减少

9 高脂饮食时,血浆胆固醇浓度增加是因为:

A 乙酰CoA增加

B 乙酰CoA羧化酶活性增强

C 肝内HMGCoA合成酶活性升高

D 肝内脂酰CoA合成酶活性降低

E 肝内HMGCoA还原酶活性升高

10 血浆中催化脂肪酰转移到胆固醇生成胆固醇酯的酶是

A LCAT

B ACAT

C 磷脂酶

D 肉毒碱脂肪酰转移酶

E 脂肪酰转移酶

名词解释:

1酮体

2激素敏感性脂肪酶

3载脂蛋白

4脂肪动员

5β-氧化

6血浆脂蛋白

7VLDL

8LCAT

9LDL受体

10抗脂解激素

问答题:

1按电泳法分类,血浆脂蛋白可分成哪几类?当血总胆固醇浓度升高时,哪一类血浆脂蛋白量会有变化?

2严重糖尿病时,体内乙酰CoA的主要来源是什么?比较此时乙酰CoA的去路与正常人有何明显区别?

3体内合成脂肪酸和胆固醇的原料和主要的供氢体、关键酶.是什么?试述它们的来源。

4简述软脂酸β-氧化分解的代谢步骤(不要求结构式)、关键酶。它和葡萄糖有氧氧化有何异同点?

5何谓脂肪动员?说明脂肪动员过程中限速酶及其调节因素。

6什么是酮体?试简述其生成和氧化的过程及其生理意义?

7试讨论脂肪酸进入肝脏后有哪几条代谢去路?

8血浆脂蛋白分为哪几类?各类脂蛋白在组成上和功能上各有何特点?

9写出糖、脂类分解代谢的共同途径,并指出体内糖、脂类是否可互变,为什么?

10试小结细胞内乙酰CoA的来源与去路。

第四章糖代谢

单选题

16-磷酸果糖激酶I的最强别构激活剂是:

A 1,6-双磷酸果糖

B AMP

C ADP

D 2,6-二磷酸果糖

E 3-磷酸甘油

2糖酵解过程中脱氢反应所生成NADH + H+的代谢去路:

A 使丙酮酸还原为乳酸

B 经 -磷酸甘油穿梭系统进入线粒体氧化

C 经苹果酸穿梭系统进人线粒体氧化

D 使2-磷酸甘油酸还原为3-磷酸甘油醛

E 以上都对

3由己糖激酶催化的反应的逆反应所需的酶是

A 果糖二磷酸酶

B 葡萄糖6—磷酸酶

C 磷酸果糖激酶I

D 磷酸果糖激酶Ⅱ

E 磷酸化酶

4乳酸脱氢酶在骨骼肌中主要是催化生成:

A 丙酮酸

B 乳酸

C 3-磷酸甘油醛

D 3-磷酸甘油酸

E 磷酸烯醇式丙酮酸

5丙酮酸不参与下列哪种代谢过程

A 转变为丙氨酸

B 经异构酶催化生成丙酮

C 进入线粒体氧化供能

D 还原成乳酸

E 异生为葡萄糖

6糖原合成的关键酶是:

A 磷酸葡萄糖变位酶

B UDPG焦磷酸化酶

C 糖原合成酶

D 磷酸化酶

E 分支酶

71分子葡萄糖经磷酸戊糖途径代谢时可生成

A 1分于NADH+H+

B 2分子NADH+H+

C 1分子NDPH+H+

D 2分子NADPH+H+

E 2分子CO2

8肌糖原不能直接补充血糖的原因是:

A 缺乏葡萄糖-6-磷酸酶

B 缺乏磷酸化酶

C 缺乏脱支酶

D 缺乏己糖激酶

E 肌糖原含量低

91分子葡萄糖有氧氧化时共有几次底物水平磷酸化

A 3

B 4

C 5

D 6

E 8

10下列哪个是各糖代谢途径的共同中间代谢产物?

A 6-磷酸葡萄糖

B 6-磷酸果糖

C 1,6-二磷酸果糖

D 3-磷酸甘油醛

E 2,6-二磷酸果糖

名词解释

1 糖酵解

2 糖有氧氧化

3 肝糖原分解

4 糖异生

5 乳酸循环

6 磷酸戊糖途径

7 糖异生途径

8 糖原合成

9 糖原引物

10 底物水平磷酸化

问答题

1糖异生与糖酵解代谢途径有哪些差异?

2为什么说三羧酸循环是糖、脂和蛋白质三大物质代谢的共同通路?

3为什么说肌糖原不能直接补充血糖? 试讨论肌糖原可能经过什么途径转变为葡萄糖的。4试讨论三羧酸循环的生理意义。

5磷酸戊糖途径的主要生理意义是什么?

6为什么说6-磷酸葡萄糖是各个糖代谢途径的交叉点?

7试述糖原合成过程,必要条件和耗能部位。

8试述胰岛素调节血糖的机理。

9试述血糖的代谢来源和去路。

10试述糖异生的生理意义和特点。

第六章生物氧化

单选题

1下列关于生物氧化呼吸链的叙述哪项是不正确的?

A 组成呼吸链的各成份按E0'值从小到大的顺序排列

B 呼吸链中的递氢体同时也都是递电子体

C 呼吸链中的递电子体同时也都是递氢体

D 电子传递过程中伴有ADP磷酸化

E 抑制呼吸链中细胞色素氧化酶,则整个呼吸链的功能丧失

2以下物质分子都含有高能磷酸键,例外的是:

A 磷酸烯醇式丙酮酸

B 磷酸肌酸

C ADP

D 葡萄糖-6-磷酸

E 1,3-二磷酸甘油酸

3NADH脱氢酶可以以下列哪个物质作为受氢体:

A NAD+

B FAD

C CoQ

D FMN

E 以上都不是

4能直接以氧作为电子接受体的是:

A 细胞色素b

B 细胞色素C

C 细胞色素b1

D 细胞色素aa3

E 细胞色素C1

5氰化物能与下列哪种物质结合从而阻断呼吸链的生物氧化?

A 细胞色素C

B 细胞色素b

C 细胞色素aa3

D 细胞色素b1

E 细胞色素b5

6胞浆中形成NADH+H+,经苹果酸穿梭后每摩尔产生ATP的摩尔数是:

A 1

B 2

C 3

D 4

E 5

7下列物质氧化中哪个不需经NADH氧化呼吸链?

A 琥珀酸

B 苹果酸

C β-羟丁酸

D 谷氨酸

E 异柠檬酸

8各种细胞色素在呼吸链中的排列顺序是:

A c-b l-c l-aa3-O2

B c-c l-b-aa3-O2

C c l-c-b-aa3-O2

D b-c l-c-aa3-O2

E b-c-c l-aa3-O2

92,4-二硝基酚抑制细胞代谢的功能,可能由于阻断下列哪一种生化作用所引起

A 糖酵解作用

B 肝糖原的异生作用

C 氧化磷酸化

D 柠檬酸循环

E 以上都不是

10肌肉细胞贮存高能磷酸键的主要形式是:

A ATP

B GTP

C UTP

D ADP

E 磷酸肌酸

名词解释

1生物氧化

2细胞色素氧化酶

3ATP合酶

4氧化磷酸化

5底物水平磷酸化

6苹果酸穿梭作用

7呼吸链

8解偶联剂

9α-磷酸甘油穿梭作用

10P/O比值

问答题

1 什么是生物氧化?试比较生物氧化与非生物氧化的异同点。

2 试简述呼吸链中各种酶复合物的排列顺序及ATP的生成部位。

3 什么是氧化磷酸化作用? NADH呼吸链中有几个氧化磷酸化偶联部位?

4 煤气(CO)中毒时,机体的耗氧量降低,为什么?

5 何谓P/O值,其生物学意义如何?

6 试列出呼吸链抑制剂与解偶联剂抑制作用的部位。

7 氰化物中毒时,组成呼吸链的物质的氧化还原状态会发生哪些改变?

8 试讨论影响氧化磷酸化的主要因素。

9 试简述生物氧化中水和CO2的生成方式。

10 试比较底物水平磷酸化和氧化磷酸化的异同点。

第七章氨基酸代谢

单选题

1氮平衡是反映体内蛋白质代谢情况的一种表示方法,实际上是指

A 摄入的氮与尿中排出氮的对比关系

B 消化吸收的氮与排出氮的对比关系

C 消化吸收的氮与未吸收的氮的对比关系

D 摄入的氮与排出氮的对比关系

E 体内总的含氮量与每日排出氮量的对比关系

2下列哪组氨基酸均是必需氨基酸?

A Lys、Phe、Trp、Tyr

B Met、Phe、Val、Tyr

C Val、Lys、His、Trp

D Cys、Met、Ala、Ser

E Leu、Ile、Thr、Lys

3肌肉中氨基酸脱氨的主要方式是

A 联合脱氨作用

B L-谷氨酸氧化脱氨作用

C 转氨作用

D 鸟氨酸循环

E 嘌呤核苷酸循环

4有关S-腺苷蛋氨酸的代谢

A S腺苷同型半胱氨酸甲基化而成

B 蛋氨酸和AMP的缩合而成

C 是合成亚精胺的甲基供给体

D 是合成胆碱的甲基供给体

E 以上都不是

5下列哪一种氨基酸是生酮兼生糖氨基酸?

A 丙氨酸

B 苯丙氨酸

C 苏氨酸

D 羟脯氨酸

E 以上都不是

6体内转运一碳单位的载体是

A 叶酸

B 维生素B12

C 四氢叶酸

D S-腺苷蛋氨酸

E 生物素

7下列哪一种物质是体内氨的储存及运输形式?

A 谷氨酸

B 酪氨酸

C 谷氨酰胺

D 谷胱甘肽

E 天冬酰胺

8尿素中两个氨基来源于

A 氨基甲酰磷酸和谷氨酸

B 氨基甲酰磷酸和谷氨酰胺

C 氨基甲酰磷酸和天冬氨酸

D 氨基甲酰磷酸和天冬酰胺

E 谷氨酰胺和天冬酰胺

9人体细胞可将某种氨基酸转变为另一种氨基酸,如:

A 半胱氨酸转变为蛋氨酸

B 苯丙氨酸转变为酪氨酸

C 天冬氨酸转变为亮氨酸

D 谷氨酸转变为赖氨酸

E 丝氨酸转变为缬氨酸

10下列哪种物质是氨基甲酰磷酸合成酶I的变构激活剂?

A 谷氨酰胺

B 乙酰CoA

C GTP

D N-乙酰谷氨酸

E NAD+

名词解释

1必需氨基酸

2鸟氨酸循环

3一碳单位

4联合脱氨基作用

5转氨基作用

6生糖氨基酸

7生酮氨基酸

8SAM

9氮平衡

10 嘌呤核苷酸循环

问答题

1氨基酸脱氨基作用有哪几种方式?

2简述血氨代谢来源和去路

3简述一碳单位的定义、来源和生理意义

4简述体内氨基酸代谢库的来源和去路

5何谓必需氨基酸?列出成人所需的8种必需氨基酸

6直接生成游离氨的氨基酸脱氨基方式有哪些?各有何特点?

7鸟氨酸循环的主要过程及生理意义是什么?

8运用生物化学知识解释肝昏迷发生的机制及临床上采用的降血氨措施机理9简述肝昏迷氨中毒的机理

10维生素B12缺乏与巨幼红细胞贫血的关系是什么?

第八章核苷酸代谢

单选题

1最直接联系核苷酸合成与糖代谢的物质是

A 葡萄糖

B 6-磷酸葡萄糖

C 1-磷酸葡萄糖

D 1,6-二磷酸葡萄糖

E 5-磷酸核糖

2下列哪种物质不是嘌呤核苷酸从头合成的直接原料

A 甘氨酸

B 天冬氨酸

C 谷氨酸

D CO2

E 一碳单位

3用15N 标记谷氨酰胺的酰胺氮喂养鸽子后, 在鸽子体内下列主要哪种化合物中含15N?

A 嘧啶环的N1

B GSH

C 嘌呤环的N1和N7

D 嘌呤环的N3和N9

E 肌酸

4在嘌呤核苷酸的合成中,第4位及5位的碳原子和第7位氮原子主要来源于:

A 天冬氨酸

B 谷氨酸

C 谷氨酰胺

D 丙氨酸

E 甘氨酸

5下列对嘌呤核苷酸合成的描述哪种是正确的?

A 利用氨基酸、一碳单位和CO2合成嘌呤环,再与5'-磷酸核糖结合而成

B 利用天冬氨酸、一碳单位、CO2和5'-磷酸核糖为原料直接合成

C 嘌呤核苷酸是在5-磷酸核糖-1-焦磷酸(PRPP)提供磷酸核糖分子的

基础上与氨基酸、CO2及一碳单位作用逐步形成

D 在氨基甲酰磷酸的基础上逐步合成

E 嘌呤核苷酸是先合成黄嘌呤核苷酸(XMP),再转变为AMP、GMP

4 AMP分子中第六位碳原子上的氨基来源于:

A 谷氨酰胺的酰胺基

B 谷氨酸

C 天冬酰胺的酰胺基

D 甘氨酸

E 天冬氨酸

5 人体嘌呤核苷酸分解代谢的特征性终产物是:

A NH3

B CO2

C 黄嘌呤

D 次黄嘌呤

E 尿酸

6体内脱氧核苷酸是由下列哪类物质直接还原生成的:

A 核糖

B 核糖核苷

C 一磷酸核苷

D 二磷酸核苷

E 三磷酸核苷

7下列对嘧啶核苷酸从头合成途径的描述哪种是正确的?

A 先合成嘧啶环,再与PRPP中的磷酸核糖相连

B 在PRPP的基础上,与氨基酸及CO2作用逐步合成

C UMP的合成需要有一碳单位的参加

D 主要是在线粒体内合成

E 需要有氨基甲酰磷酸合成酶I参加

8嘧啶环中的第一位N原子来源于:

A 游离的氨

B 谷氨酸

C 谷氨酰胺的酰胺基

D 天冬氨酸

E 天冬酰胺的酰胺基

9dTMP的嘧啶环中第五位碳原子上的甲基来源于:

A S-腺苷蛋氨酸

B N5N10-CH2-FH4

C N5-CH3FH4

D N10-CHOFH4

E N5N10=CH-FH4

10下列关于嘌呤核苷酸从头合戒的叙述哪项是正确的

A.嘌呤环的氮原于均来自氨基酸的α氨基

B.合成过程中不会产生自由嘌呤碱

C.氨基甲酰磷酸为嘌呤环提供氨甲酰基

D.由IMP合成AMP和GMP均由A TP供能,

E. 次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶催化IMP转变成GMP

名词解释

1 嘌呤核苷酸的从头合成

2 嘧啶核苷酸的补救合成

3 嘧啶核苷酸的从头合成

4 嘌呤核苷酸的补救合成

5 氨基甲酰磷酸合成酶II

6 次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶

7 胸腺嘧啶核苷酸合成酶

8 尿酸

9 PRPP

10 IMP

问答题

1UMP如何转变为dTMP? 有哪些酶参加此过程,各起什么作用?

2核苷酸中嘌呤环与嘧啶环在体内的合成原料是哪些?

3试述糖、蛋白质代谢与核苷酸、核酸代谢的密切关系.

4PRPP可参加哪些物质的合成代谢?为什么PRPP合成酶活性强时,尿酸排泄会增加? 5UMP能转变为哪些嘧啶核苷酸?胸苷酸又是怎样生成的?

6试述嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸生物合成过程的特点。

7在核苷酸合成代谢中有哪些反馈调节作用?

8试讨论β-丙氨酸和β-氨基异丁酸的代谢来源与去向.

9别嘌呤醇被用于降低尿酸,其作用的分子机理何在?

10列举影响核苷酸合成的抗代谢物及其抗癌作用原理.

第九章物质代谢的联系与调节

单选题

1调节物质代谢体内最基础的层次是

A 细胞水平

B 激素水平

C 神经调节

D 整体水平

E 器官水平

2激素必需与靶细胞的什么物质结合才能发挥调节作用

A 受体

B 配体

C 核小体

D 质膜

E 线粒体

3通过第二信使进行调节是那种物质进行调节的主要方式

A 细胞水平

B 脂溶性激素

C 水溶性激素

D 神经递质

E 整体水平

4饥饿时机体胰岛素的分泌是

A 骤然增加

B 缓慢增加

C 骤然减少

D 缓慢减少

E 分泌量基本不变

5肝脏平时与饥饿时的主要供能物质是

A 血糖

B 脂肪酸

C 酮体

D 氨基酸

E 核苷酸

6应急时需要调动的是机体哪一水平的调节

A 细胞水平

B 激素水平

C 神经水平

D 整体水平

E 局部水平

7代谢调节的基础是通过什么发挥作用

A 神经

B 内分泌腺

C 激素

D 核酸

E 酶

8神经系统通过那一部分联系激素进行机体的整体调节

A 大脑皮层

B 延髓

C 下丘脑

D 交感神经

E 迷走神经

9限速酶的米氏常数在多酶体系的众多酶中

A 最大

B 较大

C 适中

D 最小

E 较小

10快速调节是指酶的

A 变构

B 化学修饰

C 酶合成

D 酶降解

E 酶分布

名词解释

1细胞水平调节

2激素水平调节

3整体水平调节

4关键酶

5限速酶

6整体水平调节

7第二信使

8别构酶

9别构激活剂

10蛋白激酶

问答题

1为什么说细胞水平的调节是机体代谢调节的基础?2机体代谢调节方式有多种,相互之间如何联系?3试描述机体细胞水平的主要调节方式。

4化学修饰调节的主要方式和生理意义是什么?

5试比较酶别构和化学修饰调节的异同点。

6酶含量如何进行细胞水平的调节?

7试分析饥饿时机体进行整体水平调节的情况。

8平时与饥饿时机体内能量主要来源有何不同?

9酶在细胞内的隔离分布有什么重要意义?

10糖尿病时代谢调节紊乱表现在哪里?

2015高级生物化学及实验技术试题答案

高级动物生化试题 问答题: 1. 简述非编码RNA(non-coding RNA)的种类、结构特点及其主要功能。 非编码RNA的种类结构和功能 1tRNA转运RNA(transfer RNA,tRNA) 结构特征之一是含有较多的修饰成分,核酸中大部分修饰成分是在tRNA中发现的。修饰成分在tRNA分子中的分布是有规律的,但其功能不清楚。5’末端具有G(大部分)或C。3’末端都以ACC的顺序终结。有一个富有鸟嘌呤的环。有一个反密码子环,在这一环的顶端有三个暴露的碱基,称为反密码子(anticodon).反密码子可以与mRNA链上互补的密码子配对。有一个胸腺嘧啶环。tRNA具有三叶草型二级结构以及“L”型三级结构,tRNA 的不同种类及数量可对蛋白质合成效率进行调节。tRNA负责特异性读取mRNA中包含的遗传信息,并将信息转化成相应氨基酸后连接到多肽链中。 tRNA为每个密码子翻译成氨基酸提供了结合体,同时还准确地将所需氨基酸运送到核糖体上。鉴于tRNA在蛋白质合成中的关键作用,又把tRNA称作第二遗传密码。tRNA还具有其他一些特异功能,例如,在没有核糖体或其他核酸分子参与下,携带氨基酸转移至专一的受体分子,以合成细胞膜或细胞壁组分;作为反转录酶引物参与DNA合成;作为某些酶的抑制剂等。有的氨酰-tRNA还能调节氨基酸的生物合成。 2rRNA核糖体RNA(ribosomal RNA, rRNA) 核糖体RNA是细胞中最为丰富的RNA,在活跃分裂的细菌细胞中占80%以上。

他们是核糖体的组分,并直接参与核糖体中蛋白质的合成。核糖体是rRNA 提供了一个核糖体内部的“脚手架”,蛋白质可附着在上面。这种解释很直接很形象,但是低估了rRNA在蛋白质合成中的主动作用。较后续的研究表明,rRNA并非仅仅起到物理支架作用,多种多样的rRNA可起到识别、选择tRNA以及催化肽键形成等多种主动作用。例如:核糖体的功能就是,按照mRNA的指令将氨基酸合成多肽链。而这主要依靠核糖体识别tRNA 并催化肽键形成而实现。可以说核糖体是一个大的核酶( ribozyme)。而核糖体的催化功能主要是由rRNA来完成的,蛋白质并没有直接参与。 3 tmRNA tmRNA主要包括12个螺旋结构和4个“假结”结构,同时还包括一 个可译框架序列的单链RNA结构。tmRNA中H1由5’端和3’端两个末端形成,与tRNA的氨基酸受体臂相似。H1和H2的5’部分之间有一个由10-13nt 形成的环,类似tRNA中的二氢尿嘧啶环,称为“D”环。H3和H4,H6和H7,H8和H9,H10和H11之间分别形成Pk1,pK2,pK3,pK4。H4和H5之间则由一段包含编码标记肽ORF的单链RNA连接。H12由5个碱基对和7nt 形成的环组成,类似tRNA中的TΨC臂和TΨC环,称为“T”环。tmRNA 结构按照功能进行划分可分为tRNA类似域(TLD)和mRNA类似域(MLD),TLD主要包括H1,H2,H12,“D”环和“T”环,MDL则包括ORF和H5,这两部分分别具有类似tRNA和mRNA的功能。tmRNA是一类普遍存在于各种细菌及细胞器(如叶绿体,线粒体)中的稳定小分子RNA。它具有mRNA分子和tRNA分子的双重功能,它在一种特殊的翻译模式——反式翻译模式中发挥重要作用。同时,它与基因的表达调控以及细胞周期的调控等生命过程密切相关,是细菌体内蛋白质合成中起“质量控制”的重要分子之一。识别翻译或读码有误的核糖体,也识别那些延迟停转的核糖体,介导这些有问

护理生物化学基础重点测试题及答案教学文案

生物化学第一章蛋白质化学测试题 一、单项选择题 1.测得某一蛋白质样品的氮含量为0.40g,此样品约含蛋白质多少?B(每克样品*6.25) A.2.00g B.2.50g C.6.40g D.3.0 0g E.6.25g 2.下列含有两个羧基的氨基酸是:E A.精氨酸B.赖氨酸C.甘氨酸 D.色氨酸E.谷氨酸 3.维持蛋白质二级结构的主要化学键是:D A.盐键 B.疏水键 C.肽键D.氢键 E.二硫键(三级结构) 4.关于蛋白质分子三级结构的描述,其中错误的是:B A.天然蛋白质分子均有的这种结构 B.具有三级结构的多肽链都具有生物学活性 C.三级结构的稳定性主要是次级键维系 D.亲水基团聚集在三级结构的表面 E.决定盘曲折叠的因素是氨基酸残基 5.具有四级结构的蛋白质特征是:E

A.分子中必定含有辅基 B.在两条或两条以上具有三级结构多肽链的基础上,肽链进一步折叠,盘曲形成 C.每条多肽链都具有独立的生物学活性 D.依赖肽键维系四级结构的稳定性 E.由两条或两条以上具在三级结构的多肽链组成6.蛋白质所形成的胶体颗粒,在下列哪种条件下不稳定:C A.溶液pH值大于pI B.溶液pH值小于pI C.溶液pH值等于pI D.溶液pH值等于7.4 E.在水溶液中 7.蛋白质变性是由于:D A.氨基酸排列顺序的改变B.氨基酸组成的改变C.肽键的断裂D.蛋白质空间构象的破坏E.蛋白质的水解 8.变性蛋白质的主要特点是:D A.粘度下降B.溶解度增加C.不易被蛋白酶水解

D.生物学活性丧失 E.容易被盐析出现沉淀9.若用重金属沉淀pI为8的蛋白质时,该溶液的pH 值应为:B A.8 B.>8 C.<8 D.≤8 E.≥8 10.蛋白质分子组成中不含有下列哪种氨基酸?E A.半胱氨酸 B.蛋氨酸 C.胱氨酸 D.丝氨酸E.瓜氨酸 二、多项选择题 1.含硫氨基酸包括:AD A.蛋氨酸 B.苏氨酸 C.组氨酸D.半胖氨酸 2.下列哪些是碱性氨基酸:ACD A.组氨酸B.蛋氨酸C.精氨酸D.赖氨酸 3.芳香族氨基酸是:ABD A.苯丙氨酸B.酪氨酸 C.色氨酸D.脯氨酸4.关于α-螺旋正确的是:ABD A.螺旋中每3.6个氨基酸残基为一周 B.为右手螺旋结构

(完整word版)生物化学实验知识点整理,推荐文档

生物化学实验知识点整理 实验一 还原糖的测定、实验二 粮食中总糖含量的测定 1.还原糖测定的原理 3,5-二硝基水杨酸与还原糖溶液共热后被还原成棕色的氨基化合物,在550nm 处测定光的吸收增加量,得出该溶液的浓度,从而计算得到还原糖的含量 2.总糖测定原理 多糖为非还原糖,可用酸将多糖和寡糖水解成具有还原性的单糖,在利用还原糖的性质进行测定,这样就可以分别求出总糖和还原糖的含量 3.电子天平使用 4.冷凝回流的作用: 使HCl 冷凝回流至锥形瓶中,防止HCl 挥发,从而降低HCl 的浓度。 5.多糖水解方法: 加酸进行水解 6.怎样检验淀粉都已经水解: 加入1-2滴碘液,如果立即变蓝则说明没有完全水解,反之,则说明已经完全水解。 7.各支试管中溶液的浓度计算 8.NaOH 用量:HCl NaOH n n = 9.不能中途换分光光度计,因为不同的分光光度计的光源发光强度不同 10.分光光度计的原理:在通常情况下,原子处于基态,当通过基态原子的某辐射线所具有的能量(或频率)恰好符合该原子从基态跃迁到激发态所需的能量(或频率)时,该基态原子就会从入射辐射中吸收能量,产生原子吸收光谱。原子的能级是量子化的,所以原子对不同频率辐射的吸收也是有选择的。这种选择吸收的定量关系服从式/E h hc νλ?==。 实验证明,在一定浓度范围内,物质的吸光度A 与吸光样品的浓度c 及厚度L 的乘积成正比,这就是光的吸收定律,也称为郎伯-比尔定律 分光光度计就是以郎伯比尔定律为原理,来测定浓度 11.为什么要水解多糖才能用DNS 因为DNS 只能与还原糖溶液在加热的条件下反应生成棕红色的氨基化合物,不能与没有还原性的多糖反应。 12.为什么要乘以0.9 以0.9才能得到多糖的含量。 13.为什么要中和后再测? 因为DNS 要在中性或微碱性的环境下与葡萄糖反应 实验三 蛋白质的水解和纸色谱法分离氨基酸、实验四 考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度 1.纸色谱分离氨基酸分离原理 由于各氨基酸在固定相(水)和流动相(有机溶剂)中的分配系数不同,从而移动速度不同,经过一段时间后,不同的氨基酸将存在于不同的部位,达到分离的目的。 2.天然氨基酸为L 型 3.酸式水解的优点是:是保持氨基酸的旋光性不变,原来是L 型,水解后还是L 型,由于甘氨酸所有的R 基团是氢原子,所以它不是L 型

生物化学实验理论考试题答案

生物化学实验理论考试题答案 1.醋酸纤维薄膜电泳时点样端应靠近电极的哪一端,为什么? 答;电泳时点样端应靠近负极,因为血清中各种蛋白质在PH为8.6的环境中均带负电,根据同性相吸,异性相斥原理,点样端在负极时蛋白质向正极泳动从而实现蛋白质分离。 2.用分光光度计测定物质含量时,设置空白对照管的作用,为什么? 答;空白对照是为了排除溶剂对吸光度的影响。溶液的吸光度表示物质对光的吸收程度,但是作为溶剂也能吸收,反射和透射一部分的光,因此必须以相同的溶剂设置对照,排除溶剂对吸光度的影响。 3.简述血清蛋白的醋酸纤维薄膜的电泳原理? 答;血清蛋白中各种蛋白质离子在电场力的作用下向着与自身电荷相反的方向涌动,而各种蛋白质等电点不同,且在PH为8.6时所带电荷不同,分子大小不等,形状各有差异,所以在同一电泳下永动速度不同从而实现分离。 4.何谓Rf值?影响Rf值的因素? 答;Rf是原点到层析中心的距离与原点到溶剂前沿的距离之比。Rf的大小与物质的结构,性质,溶剂系统,层析滤纸的质量和层析温度有关,对同一种物质来讲Rf是一个常量。 5.什么是盐析?盐析会引起蛋白质的变性吗?一般用什么试剂? 答;盐析是指当溶液中的中性盐持续增加时,蛋白质的溶解度下降,当中性盐的浓度达到一定程度的时候,蛋白质从溶液中析出的现象。盐析不会引起蛋白质的变性,因为蛋白质的结构并未发生改变,去掉引起盐析的因素蛋白质仍能溶解;一般用饱和硫酸铵溶液进行盐析 6.简述DNS法测定还原糖浓度的实验原理? 答;还原糖与DNS在碱性条件下加热被氧化成糖酸,而DNS被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内还原糖的量与3-氨基-5硝基水杨酸颜色的深浅成正比,用分光光度计测出溶液的吸光度,通过查对标准曲线可计算出3-氨基-5硝基水杨酸的浓度,从而得出还原糖的浓度。 7.影响蛋白质沉淀的因素是什么?沉淀和变性有什么联系? 答;水溶液中的蛋白质分子由于表面形成水化层和双电层从而形成稳定的亲水胶

华中农业大学《生物化学实验》试卷

华中农业大学本科生课程考试试卷 考试课程与试卷类型:植物生理学实验原理与技术(A)姓名: 学年学期:2008-2009-1 学号: 考试时间:2009--班级: 一、名词解释 ( 每题 4 分 , 共 12分 ) 1. 聚丙烯酰胺凝胶 2. 离心技术 3.可见光分光光度法/反相纸层析 二、填空题 ( 每空 2 分 , 共 42分 ) 1. 反相纸层析法分离油菜不饱和脂肪酸的实验中 ,分离后的不饱和脂肪酸经红氨酸溶液显色后 , 其最终产物颜色是(1),从点样端起层析谱带所对应的脂肪酸依次是 (2) 、(3)、(4)、(5)、(6)。 2. 圆盘聚丙烯酰胺凝胶电泳分离过氧化物酶同工酶的实验中 , 电泳时上槽接电源(7)极 ,下槽接电源 (8) 极 , 电泳开始电流应调节至每管(9)mA, 十分钟后电流调节至每管 (10) mA; 在上槽或样品中加入溴酚蓝是起(11)的作用。 3. 核酸提取过程中 , 将含有 DNA 的溶液置72℃处理 3 分钟,其目的是(12);在淀粉酶活性测定过程中将淀粉酶液置于 70℃下处理 15 分钟的目的是(13)。 4.在微量凯氏定氮法测定植物组织中的总氮和蛋白氮,有三个主要的实验阶段,它们分别是(14)、(15)和(16)。在第二阶段,若收集三角瓶中的溶液颜色由_(17)变为(18),表明反应完全。第三阶段所用的标准浓度的滴定溶液名称是(19)。 5. DNA 提取研磨时加入的研磨缓冲液的NaCl浓度是(20),研磨时加入SDS的作用是(21)

三、是非判断题 (判断对错,对的标T,错的标F,每题 2 分,共 10 分 ) 1.萌发的小麦种子中含有很高活性的淀粉酶,其中α-淀粉酶不耐热,在70℃迅速钝化。() 2.本学期测定还原性糖和可溶性蛋白含量时都用到了斐林试剂,这两个实验中所用的斐林试剂的配方是相同的。() 3.DNA提取中,加入冷乙醇是为了使DNA分子复性变粗。() 4.离心机使用中,要求同一台离心机所用的离心管都有相同的重量。()5.油菜种子硫甙葡萄糖苷的快速分析法中,反应的实质是测定水解硫苷产生的葡萄糖的数量。() 四、问答题(共36分) 1.试述维生素C测定的基本原理及其实验过程中的注意事项(12分) 2.简述凯氏定氮法测定蛋白质含量的基本原理。为什么一些不法商人要在蛋白质制品中加入三聚氰胺?(12分) 3.凝胶电泳法测定同工酶的原理是什么?为什么本学期所作的胶条染色后显示的谱带就是过氧化物同工酶带?(12分)

生化实验操作考核要点(新)

【实验操作考核要点】 一、目的要求 1.掌握组织样品的制备方法,了解其注意事项。 2.了解肝糖原提取、糖原和葡萄糖鉴定与蒽酮比色测定糖原含量的原理和注意事项,掌握其操作方法。 3.正确操作使用刻度吸管和可调微量移液器。 4.熟练运用溶液混匀的各种方法(视具体情况,采用合适的混匀方法)。 5.正确掌握溶液转移的操作。 6.正确操作使用分光光度计。 二、操作考核内容 按百分制计。 1.吸量管操作(20分); 2.可调式微量移液器操作(20分); 3.溶液混匀操作(视具体情况,采用合适的混匀方法)(15分); 4.溶液转移操作(10分); 5.分光光度计比色操作(25分)。 6.整体表现(10分)。 三、操作考核标准 (一)吸量管操作(20分,每项操作5分) 1.执管 要求右手拿吸量管,左手拿橡皮球,只能用食指而不能用拇指按压吸量管上口来调节吸取液量的刻度;吸液、排液整个操作过程吸量管应始终保持垂直。 2.坐姿 要求腰、背保持竖直,看刻度时眼睛保持平视。 3.吸取溶液 吸量管插入液面深度约0.5cm,不能一插到底,也不能插入过浅而吸进空气致使溶液进入橡皮球内;调控吸量管吸取液量的刻度时,吸量管尖应离开液面靠在容器内壁上。 4.排出液体

吸量管尖应靠上受纳容器内壁,让管内溶液自然流出。不能用橡皮球吹压,而且在流净后吸量管尖停靠受纳容器内壁至少3秒。 (二)可调式微量移液器操作(20分,每项操作5分) 1.设定容量值 转动加样器的调节旋钮,反时针方向转动旋钮,可提高设定取液量。顺时针方向转动旋钮,可降低设定取液量。在调整设定移液量的旋钮时,不要用力过猛,并应注意使取液器显示的数值不超过其可调范围。 2.吸液 (1)选择合适的吸头安放在取液套筒上,稍加扭转压紧吸嘴使之与套筒之间无空气间隙; (2)把按钮压至第一停点,垂直握持加样器,使吸头浸入液面下2~3毫米处,然后缓慢平稳地松开按钮,吸入液体,等一秒钟,然后将吸头提离液面,贴壁停留2-3秒,使管尖外侧的液滴滑落。 3.放液 (1)将吸头口贴到容器内壁底部并保持100°~40°倾斜; (2)平稳地把按钮压到第一停点,等一秒钟后再把按钮压到第二停点以排出剩余液体; (3)压住按钮,同时提起加样器,使吸头贴容器壁擦过,再松开按钮。按吸头弹射器除去吸头。 4.压放按钮时保持平稳;加样器不得倒转;吸头中有液体时不可将加样器平放。取液器吸嘴为一次性使用。实验完毕,将取液器读数调至最大量程值,竖立放于支架上。 (三)溶液的混匀(操作流程中下划实线的三处,每项操作5分,共15分)1.肝糖原的提取与鉴定操作中,肝匀浆上清液中加5ml 95%乙醇后的混匀最好用倾倒混匀,也可用滴管或吸量管吸、吹混匀,或用玻璃棒搅拌混匀。 2.肝糖原定量测定中,肝组织消化液沸水浴后全部转入100 ml容量瓶,加水至刻线后的混匀应采用倒转混匀。 3.肝糖原定量测定中,加蒽酮溶液后的混匀,可将试管倾斜约45o再作旋转混匀。因蒽酮溶液(浓硫酸配制)比重大于样品水溶液很多,一加入便沉于管

生物化学实验题目

实验一胆固醇的提取2012-11-15 16:20:00 生物师范班题目 1.比色法测定样品的理论基础是什么? 被测样品必须要有颜色。 2. 胆固醇含量在多少范围时,与值呈良好的线性关系? 在400mg/ml范围内。 3.在提取胆固醇的过程中,为什么要加无水乙醇? 促使蛋白质沉淀。 4.在试管中加入1ml磷硫铁试剂,会产生什么现象?(至少写2点) 产生紫红色化合物。产生热量。 5.在无水乙醇中加磷硫铁试剂时,正确的加法是什么?将产生什么现象?请准确描述 该现象。 沿管壁慢慢加入。溶液分层。上层是无水乙醇,下层是磷硫铁试剂。 1. 胆固醇提取过程中,无水乙醇为什么要分两次加入? 目的是使蛋白质以分散很细的沉淀颗粒析出。 2.我们用比色法测定胆固醇含量的仪器名称是什么? 分光光度计 3. P-S-Fe试剂配置时,能用稀硫酸吗?为什么? 不能。因为FeCl3本身是亲水性物质,稀硫酸中含有水,会降低P-S-Fe试剂的浓度,从而导致反应不能发生。 4.请简述移液枪的使用步骤。 根据所要吸取的溶液的体积选定合适量程的移液枪。 调好量程。 插枪头。 吸取液体。 将移液枪的量程调至最大。 5. 请简述0.08mg/ml胆固醇标准溶液的配置方法。 准确称取胆固醇80mg,溶于无水乙醇,定容至100ml 将贮液用无水乙醇准确稀释10倍既得。

实验二总糖和还原糖测定2012-11-15 16:20:00 生物师范班 1. 请写出还愿糖与非还原糖结构的不同之处 拥有自由的醛基和酮基 2. 对没有还原性的糖,用什么方法进行糖含量的测定? 酸水解的方法将非还原性的糖降解呈还原糖。 3. DNS之所以能和还原糖反应,是因为其结构中含有__________? 硝基 4. 如果将DNS和其与还原糖反应的产物同时进行比色,谁的A值更大?为什么? 产物的更大,因为产物生成棕红色,颜色越深,吸光度越高。 5. 还原糖提取过程中,为什么要离心两次? 因为这样可以更好地将还原糖全部提取出来。第二次洗涤沉淀。 海洋技术班 1.单糖都是还原糖吗?为什么? 是的,因为有自由醛基和酮基 2.为什么能用比色法测定还原糖的量? 因为还原糖的量与光吸收值呈线性关系。 3.DNS的全称是? 3,5-二硝基水杨酸 4.总糖提取过程中,碘液的作用是什么? 确认淀粉水解完全。 5.请简述标准曲线的作用。 通过标准曲线来算出未知样品的浓度。

生物化学实验重点试题

一、解词 1、总氮量水中各种形态无机和有机氮的总量 2、酶的抑制作用是指在某个酶促反应系统中,某种低相对分子质量的物质加入后,导致酶活力降低的过程。 3、酶的最适温度酶催化活性最高时的温度 4、蛋白质的等电点每个蛋白都存在一个pH使它的表面净电荷为零即等电点 5、盐析增加中性盐浓度使蛋白质、气体、未带电分子溶解度降低的现象 6、蛋白质变性蛋白质在某些物理和化学因素作用下其特定的空间构象被改变,从而导致其理化性质的改变和生物活性的丧失6、酶的专一性酶对底物及其催化反应的严格选择性通常酶只能催化一种化学反应或一类相似的反应 7、激活剂能提高酶活性的物质大部分是离子或简单的有机化合物 8、抑制剂凡能使酶催化活性下降而不引起酶蛋白变性的物质 9、酶催化特定化学反应的蛋白质、RNA或其复合体 二、填空 1、球蛋白可在半饱和中性硫酸铵溶液中析出,清蛋白可在高盐浓度溶液中析出。 2、在PH3.0、和9.5时的电场中,卵清蛋白(PI4.6)移动方向分别为负移 动,正移动。 3、唾液淀粉酶的最适温度是37 4、还原糖与本乃狄试剂共热现象生成生成砖红色沉淀。 5、维生素C也称抗坏血酸,它具有很强还原性 6、用苔黑酚浓盐酸溶液可以鉴定核糖核酸 7、当溶液的PH低于蛋白质等电点时,蛋白质分子带正电荷;当溶液的 PH大于蛋白质等电点时,蛋白质分子带负电荷; 10.凯氏定氮法测定蛋白质含量消化终点颜色为清澈的蓝紫色色。 11.蛋白质变性的实质是空间结构被破坏。 12.常用的RNA提取方法有苯酚法、、高盐法等。 13、维持蛋白质亲水胶体稳定的因素是蛋白质颗粒表面的电荷层 和水化膜、 14、蛋白质在等电点时,主要以两性离子离子形式存在;当溶液的P H>PI 时,蛋白质分子以负离子形式存在;当溶液的P H<PI时,蛋白质分子带正离子形式存在。 15、蛋白质分子中氮的平均含量为 5.16% ,样品中的蛋白质含量常以测 氮量乘以 6.25 、即 6 。 三、选择 1、盐析法沉淀蛋白质的原理( ) A 与蛋白质结合成不溶性蛋白盐 B 次级键断裂蛋白质的构象改变 C 中和电荷,破坏水化膜 D 调节蛋白质溶液的等电点 2、以下哪项不是酶的特性() A 酶是生物催化剂,催化效率极高 B 易受Ph,温度等外界因素的影响 C 能加速化学反应但不改变反应平衡点 D 有高度特异性 3、RNA和DNA的最大紫外吸收值是在() A 280nm B 260nm C 510nm D 620nm 4、.凯氏定氮法使用的混合催化剂硫酸钾-硫酸铜配比为() A 1:3 B 5:1 C 3:1 D 1:1

生物化学实验的答案

生物化学实验的答案 一、理论考试部分 1.醋酸纤维薄膜电泳时,点样的一端应靠近电极的哪一端?为什么? 答:负极。因为血清中各种蛋白质在PH 为的环境中均带负电,根据同性相吸,异性相斥原理,点样端在负极时蛋白质向正极泳动从而实现蛋白质分离。 2.用分光光度计测定物质含量时,设置空白对照管的意义是什么? 答:空白对照是为了排除溶剂对吸光度的影响。溶液的吸光度表示物质对光的吸收程度,但是作为溶剂也能吸收,反射和透射一部分的光,因此必须以相同的溶剂设置对照,排除溶剂对吸光度的影响。 3.简述血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳的原理? 答:血清蛋白中各种蛋白质离子在电场力的作用下向着与自身电荷相反的方向涌动,而各种蛋白质等电点不同,且在PH为时所带电荷不同,分子大小不等,形状各有差异,所以在同一电泳下永动速度不同从而实现分离。 4.xxR f 值?影响R f 值的主要因素是什么? 答:Rf是原点到层析中心的距离与原点到溶剂前沿的距离之比。Rf的大小与物质的结构,性质,溶剂系统,层析滤纸的质量和层析温度有关, 5.什么是盐析?盐析会引起蛋白质变性吗?一般我们用什么试剂做盐析的实验? 答:盐析是指当溶液中的中性盐持续增加时,蛋白质的溶解度下降,当中性盐的浓度达到一定程度的时候,蛋白质从溶液中析出的现象。盐析不会引起蛋白质的变性。一般用饱和硫酸铵溶液进行盐析。 6?简述DNS法测定还原糖浓度的实验原理? 答:还原糖与DNS在碱性条件下加热被氧化成糖酸,而DNS被还原为棕红色的

3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内还原糖的量与3-氨基-5 硝基水杨酸颜色的深浅成正比,用分光光度计测出溶液的吸光度,通过查对标准曲线可计算出3-氨基-5 硝基水杨酸的浓度,从而得出还原糖的浓度。 7.依据我们所做的实验,说明影响蛋白质沉淀的因素是什么?影响蛋白质变 性的因素是什么?沉 xx 变性有何联系? 答:水溶液中的蛋白质分子由于表面形成水化层和双电层从而形成稳定的亲水胶体颗粒,在一定的理化因素影响下蛋白质颗粒因失去电荷和脱水而沉淀。这些因素包括溶液的酸碱度、盐溶液的浓度、温度、重金属离子以及有机溶剂等。变性蛋白质不一定沉淀,沉淀的蛋白质不一定变性。 8.什么是碘值?脂肪的不饱和程度越大,碘值越大吗?在测定碘值的实验中,氯仿的作用是什么? 答:每100g 脂肪所吸收的碘的克数,即脂肪的碘值。脂肪的不饱和度越大,碘值就越大。氯仿作为溶剂,去溶解脂肪。 9.简述薄层层析法分离糖类的原理?答:薄层层析的实质就是吸附层析,也就 是在铺有吸附剂的薄层上,经过反 复地被吸附剂吸附以及被扩展剂扩展的过程。而吸附剂对不同的物质的吸附力不同,从而使糖在薄层上的泳动速度不同达到分离的目的。 10.等电点的定义?蛋白质在等电点时有哪些特点? 答:当溶液的PH为一定数值时,其中的蛋白质正负电荷相等,即净电荷为 零,此时的PH值就是该蛋白质等电点。蛋白质在等电点时的溶解度最小。 11.在蛋白质显色实验的黄色反应中,反应原理是什么?实验结果为什么会出现深浅不一的黄色?

基础生物化学实验.

生物化学实验 实验基本原理 1 有效数字计算(结合电子天平的应用等) 加减法: 进行数字加减时,最后结果所保留的小数点后的位数应与参与运算的各数中小数点后位数最少者相同,其尾数“四舍五入”。如:0.124+1.2345+12.34=13.6979,应取13.70。 乘除法: 进行数字乘除时,最后结果的有效数字应与参与运算的各数中有效数字位数最少者为准,而与小数点的位数无关,其尾数“四舍五入”。如:1.23×0.12=0.1476,应取0.15。 2 误差分析 误差为实验分析的测定值与真实值之间的差值。误差越小,测定值越准确,即准确度越高。误差可用绝对误差和相对误差表示。 绝对误差= 测定值- 真实值 相对误差= 绝对误差÷真实值×100% 一般用相对误差表示结果的准确度,但因真实值是并不知道的,因此实际工作中无法求出分析的准确度,只得用精确度来评价分析的结果。 3 偏差分析(结合“可溶性蛋白或赖氨酸实验”要求掌握) 精确度表示在相同条件下,进行多次实验的测定值相近的程度。一般用偏差来衡量分析结果的精确度。偏差也有绝对偏差和相对偏差两种表示方法。 绝对偏差= 单次测定值- 算术平均值(不计正负号) 相对偏差= 绝对偏差÷算术平均值×100%

例如:分析某一材料糖含量,共重复测定5次,其结果分别为:16.1%,15.8%,16.3%,16.2%,15.6%,用来表示精确度的偏差可计算如下: 分析结果算术平均值个别测定的绝对偏差(不计正负) 16.1% 0.1% 15.8% 0.2% 16.3% 16.0% 0.3% 16.2% 0.2% 15.6% 0.4% 平均绝对偏差=(0.1%+0.2%+0.3%+0.2%+0.4%)÷5 = 0.2% 平均相对偏差= 0.2÷16.0×100% = 1.25% 在实验中,有时只做两次平行测定,这时就应用下式表达结果的精确度: 两次分析结果的差值÷平均值×100% 4 实验结果的表述:实验结果可用列表法(“影响酶作用的因素”常用)和作图法(综合实验用)表示。 第1章分光光度技术 分光光度技术是光学(光谱)分析技术的一种,它是利用物质的特征吸收光谱来对不同物质进行定性和定量分析的一项技术。我们将重点介绍紫外光-可见光分光光度法。 一、紫外光-可见光分光光度法的基本原理 1、讨论的波长范围:200~400nm的紫外光区和400~760nm的可见光区。 人肉眼可见的光线称可见光,波长范围在400~760nm;

生物化学实验练习题及参考答案[1]

生物化学实验 一、名词解释: 分配层析法电泳同工酶酶活性分光光度法层析技术比活力 二、填空题: 1. 测定蛋白质含量的方法有,,和。 2. CAT能把H2O2分解为H2O和O2,其活性大小以来表示,当CAT与H2O2反应结束,再用测定未分解的H2O2。 3. 聚丙烯酰胺凝胶电泳是以作为载体的一种区带电泳,这种凝胶是由和交联剂在催化剂作用下聚合而成。化学聚合法一般用来制备_____________胶,其自由基的引发剂是,催化剂是______________;光聚合法适于制备大孔径的_________________胶,催化剂是______________。 4.层析技术按分离过程所主要依据的物理化学性质进行分类,可分成以下几种:_______________,_______________,_______________,_______________和________________。 5. 使用离心机离心样品前,必须使离心管__________且对称放入离心机。 6. 米氏常数可近似表示酶和底物亲合力,Km愈小,表示E对S的亲合力愈,Km愈大,表示E对S 的亲合力愈。 7. 分光光度计在使用之前必须预热,注意预热及样品槽空时必须_________(打开、合上)样品池翻盖。 8. CAT是植物体内重要的酶促防御系统之一,其活性高低与植物的密切相关。 9. 纸层析实验中,____________形成固定相,____________流动相。 10. 聚丙烯酰胺凝胶是是由和交联剂在催化剂作用下聚合而成的,在具有自由基团体系时,两者就聚合。引发产生自由基的方法有两种:和。11. 层析技术按按固定相的使用形式进行分类,可分成以下几种:_______________,_______________,_______________和________________。 三、问答题: 1、简述4种测定蛋白质含量的方法及其原理。 2、简述不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳中的三个不连续及三种物理效应。 3、试分析影响电泳的主要因素有哪些? 参考答案: 生物化学实验 一、名词解释: 1、电泳:指带电粒子在电场中向与其自身所带电荷相反的电极方向移动的现象。 2、同工酶:指催化同一种化学反应,但其酶蛋白本身的分子结构组成却有所不同的一组酶。 3、分配层析法:用物质在两种或两种以上不同的混合溶剂中的分配系数不同,而达到分离目的的一种实验方法。

生物化学实验习题及参考答案完整版

生物化学实验习题及参 考答案 HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】

生物化学实验习题及解答 一、名词解释 1、pI; 2、层析; 3、透析; 4、SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳; 5、蛋白质变性; 6、复性; 7、Tm 值; 8、同工酶; 9、Km值; 10、DNA变性;11、退火;12、增色效应 二、基础理论单项选择题 1、用下列方法测定蛋白质含量,哪一种方法需要完整的肽键( ) A、双缩脲反应 B、凯氏定氮 C、紫外吸收 D、羧肽酶法 2、下列哪组反应是错误的() A、葡萄糖——Molish反应 B、胆固醇——Libermann-Burchard反应 C、色氨酸——坂口(Sakaguchi)反应 D、氨基酸——茚三酮反应 3、Sanger试剂是() A、苯异硫氰酸 B、2,4-二硝基氟苯 C、丹磺酰氯 D、-巯基乙醇 4、肽键在下列哪个波长具有最大光吸收() A、215nm B、260nm C、280nm D、340nm 5、下列蛋白质组分中,哪一种在280nm具有最大的光吸收() A、色氨酸的吲哚基 B、酪氨酸的酚环 C、苯丙氨酸的苯环 D、半胱氨酸的硫原子 6、SDS凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量是根据各种蛋白质() A、在一定pH值条件下所带的净电荷的不同 B、分子大小不同 C、分子极性不同 D、溶解度不同 7、蛋白质用硫酸铵沉淀后,可选用透析法除去硫酸铵。硫酸铵是否从透析袋中除净,你选用下列哪一种试剂检查() A、茚三酮试剂 B、奈氏试剂 C、双缩脲试剂 D、Folin-酚试剂 8、蛋白质变性是由于() A、一级结构改变 B、亚基解聚 C、空间构象破坏 D、辅基脱落 9、用生牛奶或生蛋清解救重金属盐中毒是依据蛋白质具有() A、胶体性 B、粘性 C、变性作用 D、沉淀作用 10、有关变性的错误描述为()

12级生物化学实验2期末复习题-考试

12级生物化学实验2期末复习题-考试

生物化学实验(2)理论习题 一、名词解释题 1、聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE):在样品介质和聚丙烯酰胺凝胶中加入离子去污剂和强还原剂后,蛋白质亚基的点泳迁移率主要取决于亚基分子量的大小,而电荷因素可以被忽略。当蛋白质的分子量在15KD到200KD之间时,电泳迁移率与分子量的对数呈线性关系,可以用来测定蛋白质亚基的分子量。 2、电泳:带电颗粒在电场作用下,向着与其电性相反的电极移动,称为电泳 3、层析分离技术:是一种物理的分离方法,利用多组分混合物中各组分物理化学性质的差别,使各组分以不同的程度分布在两个相中。 4、吸附色谱法:利用同一吸附剂对混合物中不同成分吸附能力的差异,从而使各成分达到分离目的的色谱法。 5、离子交换层析:以离子交换剂为固定相,依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。 6、分配层析:根据一种或多种化合物,在两种不相

融合的溶剂间的分配来分离物质的方法。 7、亲和层析:是利用生物活性物质之间的专一亲和吸附作用而进行的层析方法。是近年来发展的纯化酶和其他高分子的一种特殊的层析技术。 8、凝胶层析(凝胶色谱):混合物随流动相经过凝胶层析柱时,由于各组分流经体积的差异,使不同分子量的组分得以分离的层析方法。 9、电渗作用:指在电场作用下液体(通常是水)相对于和它接触的固定的固体相作相对运动的现象。 10、担体:担体是一种化学惰性的,多孔性的固体微粒,能提供较大的惰性表面,使固定液以液膜状态均匀地分布在其表面。 11、死时间:从进样到惰性气体峰出现极大值的时间称为死时间.。 12、保留时间:被分离样品组分从进样开始到柱后出现该组分浓度极大值时的时间,也即从进样开始到出现某组分色谱峰的顶点时为止所经历的时间,称为此组分的保留时间。 13、高效液相色谱法:,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,

生物化学实验复习题

生物化学实验复习题 生物化学实验复习题 一、生物化学的基本操作 1、判断玻璃仪器洗涤干净的标准时什么? 2、若容器内附有油污,应该怎样洗涤? 3、玻璃仪器的一般洗涤方法 4、玻璃仪器干燥时,若不急用应怎样干燥,若急用应怎么办?容量玻璃仪器(如容量瓶、吸量管、滴定管)以及烧结、结构复杂的玻璃仪器,能否烧烤?若不能,该怎么干燥? 5、请准确量取一定量液体从一个器皿转移至另一器皿中(操作) a刻度吸管b奥氏吸管c微量加样器 6、使用奥氏吸管的原则是什么? 7、电动离心机的使用方法(配平、离心机使用的检查、调试) 8、分光光度计的使用方法及注意事项(比色皿选择、洗涤、保护) 二、血清r-球蛋白的提纯 1、盐析、分段盐析法德基本原理 2、凝胶过滤法德基本原理 3、沉淀r-球蛋白所需硫酸铵的最小浓度时多少? 4、不同型号交联葡聚糖凝胶“G”表示,请问G后面的数字表示什

么含义? 5、影响凝胶层析分离效果的因素有哪些? 6、如何检测蛋白质或铵根离子是否流出? 7、透析法脱盐的原理 三、酚试剂发测定蛋白质 1、酚试剂测定的原理 2、为什么设计空白对照管? 3、在本实验条件下对蛋白溶液进行比色,选择的波长是多少? 4、本实验蛋白质浓度在什么浓度范围内呈正相关线形关系? 5、比色反应最好在什么时间内比色? 6、制作标准曲线时,有哪些基本要求? 四、血浆脂蛋白蛋白琼脂糖凝胶电泳 1、血脂的组成 2、脂蛋白的组成及分类 3、电泳的一般原理 4、影响带电颗粒泳动速度的因素主要有哪些? 5、电泳图谱出现形状不规则的原因是什么? 6、超速离心法和电泳法分离血浆脂蛋白的主要原理是什么? 7、有A.B.C.D四种不同的蛋白质,pI分别为4.0、5.0、6.0、7.0.,请设计3中实验方法将它们彼此分开。(电泳、凝胶过滤。盐析) 8、采用不损伤蛋白质结构和功能的物理方法分离纯化蛋白质时,常用技术有哪些?(有:非变性电泳、层析、超速离心、盐析)

生物化学实验内容

《生物化学实验》内容 课程类型:制药工程专业必修 实验总学时:32课时 开设实验项目数:8个 适用对象:2017制药工程1、2班 实验教师:段志芳 一、实验目标及基本要求 生物化学实验是一门独立的实验课程,培养学生生物化学实验基本操作技能、实验数据处理能力、分析问题解决问题的能力和实事求是的科学态度。 二、实验内容

三、成绩 包括实验时的表现(实验出勤、安全卫生、操作对错、损坏器皿情况等,占50%)及实验报告的完成情况和完成质量(占50%),每个实验按总分为100分为满分进行打分,共8个实验,总评取平均值。 四、要求 (1)实验过程中同组人可以配合进行; (2)实验报告独立完成,同组人数据相同,不得抄袭他组数据;(3)实验过程若出现失误应向老师汇报后再进行重做; (4)对实验结果进行简单的分析. 实验一植物组织中可溶性总糖的提取 一、实验目的 1. 掌握可溶性总糖的概念和性质。 2. 掌握可溶性总糖提取的基本原理。

3.掌握溶解、过滤、洗涤、定容等基本操作技术。 二、实验原理 可溶性糖是指易溶于水的糖,包括绝大部分的单糖、寡糖,常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖等。它们在植物体内可以充当能量的储存、转移的介质、结构物质和功能分子如糖蛋白的配基。总糖主要指具有还原性的葡萄糖、果糖、戊糖、乳糖和在测定条件下能水解为还原性的单糖的蔗糖、麦芽糖以及可能部分水解的淀粉。可溶性总糖提取方法包括:热水提取法、酶提取法、超声波提取法等。其溶于热水,不溶于60%以上乙醇,所以用热水提取、乙醇沉淀除去部分醇溶性杂质。本实验利用可溶性糖溶于水的特性,将植物磨碎,用热水将组织中的可溶性糖提取出来,结合实验二得到总糖浓度,已知溶液体积和原料重量,可以求出总糖含量。 三、实验用品 1.仪器设备:电子天平(精确到0.0g,配称量纸若干);可控温电 加热板或电炉或电热套或水浴锅均可。可共用。 2.玻璃器皿:研钵1套;100mL锥形瓶1个;25mL量筒1个;玻 璃棒1根;100mL烧杯2个;胶头滴管1支;过滤装置1套(铁架台1台+铁圈1个+玻璃漏斗1个+100mL容量瓶1个+洗瓶1个); 不锈钢刮勺1个;剪刀1把。此部分为每组所用,集中到小框里,放置各实验台上。 3.药品试剂:新鲜植物叶片;蒸馏水。 4.其他:9cm滤纸若干(与玻璃漏斗配套);纸巾若干;标签纸若

生物化学实验习题及参考答案

生物化学实验习题及参考答案

生物化学实验习题及解答 一、名词解释 1、pI:指氨基酸的正离子浓度和负离子浓度相等时的pH值,用符号pI表示。 2、层析:按照在移动相和固定相(可以是气体或液体)之间的分配比例将混合成分分开的技术。 3、透析:通过小分子经过半透膜扩散到水(或缓冲 液)的原理,将小分子与生物大分子分开的一种分离纯化技术。 4、SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳:在去污剂十二烷基硫 酸钠存在下的聚丙烯酰氨凝胶电泳。SDS-PAGE 只是按照分子的大小,而不是根据分子所带的电荷大小分离的。 5、蛋白质变性:生物大分子的天然构象遭到破坏导 致其生物活性丧失的现象。蛋白质在受到光照,热,有机溶济以及一些变性济的作用时,次级键受到破坏,导致天然构象的破坏,使蛋白质的生物活性丧失。 6、复性:在一定的条件下,变性的生物大分子恢复成具有生物活性的天然构象的现象。

7、Tm 值:核酸分子变性过程中,紫外吸收达到最大增量一半时的溶解温度。 8、同工酶:能催发相同的反应类型但其理化性质及免疫学性质不同的酶。 9、Km值:反应速度为最大反应速度一半时的底物 浓度。是酶的特征物理学常数之一。近似表示酶与底物的亲和力。 10、DNA变性:DNA双链解链,分离成两条单链的现象。 11、退火:既DNA由单链复性、变成双链结构的过 程。来源相同的DNA单链经退火后完全恢复双 链结构的过程,同源DNA之间`DNA和RNA之 间,退火后形成杂交分子。 12、增色效应:当双螺旋DNA熔解(解链)时,260nm 处紫外吸收增加的现象。 二、基础理论单项选择题 1、A; 2、C; 3、B; 4、A; 5、A; 6、B; 7、B; 8、C; 9、D;10、A;11、A;12、D;13、A; 1、用下列方法测定蛋白质含量,哪一种方法需要完整的肽键?()

《生物化学》实验指导(8个实验)

生物化学实验指导 吕杰编著 新疆大学资源与环境科学学院生态学教研室

内容介绍 《生物化学实验指导》是新疆大学资源与环境科学学院《生物化学》课程组的教师在参考国内重点院校、科研院所的生物化学实验与实习教材的基础上,结合教师的教学经验汇编而成。该实习指导围绕教学大纲设计了8个实验内容。

目录 实验一氨基酸纸层析 (4) 实验二DNS-CL法测定N末端氨基酸 (5) 实验三考马斯亮蓝法测定蛋白质的浓度 (7) 实验四酪蛋白的制备 (8) 实验五葡萄糖标准曲线的绘制 (10) 实验六酵母蔗糖酶的提取及活力测定 (12) 实验七酵母RNA的分离及组分鉴定 (14) 实验八维生素C的定量测定 (16)

实验一氨基酸纸层析 一、实验目的 1、通过氨基酸的纸层析分离,学习纸层析的基本原理和操作方法。 二、实验原理 纸层析:是以滤纸作为支持物的分配层析法,是20世纪40年代发展起来的一种生化分离技术。由于设备简单,操作方便,所需样品量少,分辨力较高等优点而广泛的用于物质的分离,并可进行定性和定量的分析。缺点是展开时间较长。 分配层析法:是利用物质在两种或两种以上不同的混合溶剂中的分配系数不同,而达到分离的目的的一种实验方法。 在一定条件下,一种物质在某种溶剂系统中的分配系数是一个常数即α=溶质在固定相的浓度/溶质在流动相的浓度。溶剂系统:由有机溶剂和水组成,水和滤纸纤维素有较强的亲和力,因而其扩散作用降低形成固定相,有机溶剂和滤纸亲和力弱,所以在滤纸毛细管中自由流动,形成流动相,由于混合液中各种氨基酸的分配系数值不同,其在两相中的分配数量及移动速率(即迁移率Rf值)就不同,从而达到分离的目的。 三、实验材料、仪器和试剂: 1、实验材料:标准氨基酸溶液 2、仪器: 层析缸,层析纸,毛细管,天平,吹风机等。 3、试剂: (1)氨基酸标准溶液:0.1M丙氨酸和0.1M谷氨酸标准溶液。 (2)溶剂系统:正丁醇:甲酸:水=15:3:2(体积比)摇匀; (3)0. 1%的茚三酮丙酮溶液;茚三酮1—5克,丙酮100毫升 四、实验步骤: 纸层析 (1) 取一长方形滤纸,在滤纸纵向对应的两边距边沿2cm 处,用铅笔轻轻的各画两条平行线,一条作前沿标志,一条作点样线,在点线上每隔2cm 画一个“+”作为点样位置,共5个点。 (2) 点样:用毛细管点样,其中2个点用毛细管点上氨基酸的标准溶液;中间间隔一点,另2点点上未知氨基酸的溶液。每个点样点重复点5次,每点一次用电吹风吹干后再点下次,点样点的直径应控制在2mm左右,点样完毕用大头针将滤纸做成筒形,点样面向外,注意纸的两边不要接触。 (3) 展层:向层析缸中加入层析溶剂,液层不要超过点样线(高约1.5cm,约50-60ml 溶剂),将滤纸点样点朝下放入层析溶剂中,将层析缸密闭,待溶剂到达标志线后取出,吹干。 (4)显色:用喷雾器将茚三酮显色剂均匀喷在滤纸上,吹风机热风吹干显色。 五.结果分析: (1)用铅笔将层析色谱轮廓和中心点描出来; (2) 测量原点至色谱中心和至溶剂前沿的距离,计算各种氨基酸色谱的Rf 值。 Rf=组分移动的距离/溶剂前沿移动的距离 =原点至组分斑点中心的距离/原点致溶剂前沿的距离 六、思考题: 1、何谓分配层析法和分配系数?

生物化学实验复习题库

生物化学实验复习题库 1、卵磷脂的提取原理: 卵磷脂在脑、神经组织、肝、肾上腺和红细胞中含量较多,蛋黄中含量特别丰富。卵磷脂易溶于醇、乙醚等脂溶剂,可利用这些脂溶剂提取。本实验用95%乙醇提取卵磷脂,用蒸汽浴分离乙醇和卵磷脂 2、卵磷脂的提取原理鉴定新提取得到的卵磷脂为白色蜡状物,与空气接触后因所含不饱和脂肪酸被氧化而呈褐色。卵磷脂中胆碱基在碱性条件中分解成三甲胺,三甲胺有特异的鱼腥臭味,可鉴别。 3、糖的颜色反应莫氏试验: 糖经无机酸(浓硫酸、浓盐酸)脱水产生糠醛或糠醛衍生物,后者在浓无机酸作用下,能与а-萘酚生成紫红色缩合物。因为糠醛或糠醛衍生物对此均呈阳性反应,故不是糖类的特异性反应,但可用来鉴定糖的存在。 4、糖的颜色反应塞氏试验: 酮糖在浓酸的作用下,脱水生成5-羟甲基糠醛,后者与间苯二酚作用,呈红色反应;有时亦同时产生棕红色沉淀,此沉淀溶于乙醇,成鲜红色溶液。此反应是酮糖的特异性反应,醛糖在同样条件下成色反应缓慢,只有在糖浓度高或煮沸时间长时,才微弱的阳性反应。在实验条条件下蔗糖有可能水解而呈阳性反应。塞氏试验可鉴别酮糖的存在。 5、何谓纸层析法? 纸层析是最简单的液一液相分配层析。滤纸是纸层析的支持物。当支持物被水饱和时,大部分水分子被滤纸的纤维素牢牢吸附,因此,纸及其饱和水为层析的固定相,与固定相不相混溶的有机溶剂为层析的流动相。 因为不同的氨基酸在相同的溶剂中溶解度不同,所以利用在滤纸上迁移速度不同分离氨基酸 6.何谓Rf值?影响Rf值的主要因素是什么

Rf为氨基酸的比移值。Rf=原点到层析点中心的距离/原点到溶液前沿的距离 影响纸层析迁移率Rf值的主要因素:1、样品本身的性质和结构;2、溶剂的性质;3、PH 值;4、温度;5、滤纸性质。 7.怎样制备扩展剂? 8.层析缸中平衡溶剂的作用是什么? 9.牛乳中制备酪蛋白的原理和方法。 牛奶含有半乳糖、蛋白质、脂肪成分。蛋白质中的酪蛋白通过等电点沉淀,再通过离心而获得,糖类小分子由于处于清液中而分离,沉淀物中所含有的脂肪通过有机溶剂抽提而去除,最终得到纯白色、晶状酪蛋白。 方法:取新鲜牛乳,加入PH4.7的醋酸缓冲液,40度下沉淀析出酪蛋白,然后洗涤,醇醚吸水至干燥得粉末称重,计算提取率。步骤:保温→调PH→沉淀→离心→洗涤→干燥→称量 10.何谓蛋白质的等电点?有何实用意义? 蛋白质的等电点:指氨基酸的正离子浓度和负离子浓度相等时的pH值,用符号pI表示。 蛋白质同氨基酸一样为两性电解质,调节蛋白质的PH可使蛋白质带正电或带负电;在pI 时溶解度最低,在外加电场中蛋白质分子既不向正极移动也不向负极移动。 11、蛋白质变性与沉淀的关系。 沉淀可以是由蛋白质变性从而产生沉淀,也可以是由于盐析。蛋白质变性是指光照,热,有机溶济以及一些变性剂(如重金属盐)的作用时蛋白质的空间结构被破坏,使得蛋白质丧失活性,该过程不可逆。盐析是指向蛋白质的溶液中加入轻金属盐,使得蛋白质沉淀析出,这是由于加入盐降低了蛋白质得溶解度而析出,该过程可逆,加水蛋白质又会溶解。二者本质上是不同的。

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