微生物实验复习资料
微生物实验复习资料
（填空、选择、判断、问答、实验结果分析）
选择：
1.革兰氏染色的关键操作步骤是: C。酒精脱色。
2.放线菌印片染色的关键操作是: A。印片时不能移动。
3.高氏培养基用来培养: C。放线菌。
4.肉汤培养基用来培养: C。细菌。
5.无氮培养基用来培养: A。自生固氮菌。B。硅酸盐细菌。
6.在使用显微镜油镜时，为了提高分辨力，通常在镜头和盖玻片之间滴加: C。香柏油。
7.常用的消毒酒精浓度为: A。75%。
8.用甲醛进行空气熏蒸消毒的用量是: B。6ml/M3。
9.高压蒸汽灭菌的工艺条件是: A。121℃/30min。。
10.巴氏消毒的工艺条件是: A。62-63℃/30min。B。71-72℃/15min。
11.半固体培养基的主要用途是: A。检查细菌的运动性。B。检查细菌的好氧性。
12.半固体培养基的琼脂加入量通常是: B。0。5%。
13.使用手提式灭菌锅灭菌的关键操作是: A。排冷气彻底。
14.目镜头上的K字母表示: C。补偿目镜。
15.目镜头上的P字母表示: A。平场目镜。
16.物镜头上的PL字母表示: A。正低相差物镜。
17.物镜头上的UVL字母表示： C。相差物镜。
18.镜头上标有“双 C”字母的镜头是: A。相差调整望远镜。
19.PA 表示: A。马铃薯培养基。
20.无菌室空气灭菌常用方法是: A。甲醛熏蒸。B。紫外灯照射。
21.干热灭菌的关键操作是: A。灭菌物不能有水。
22.霉菌水浸制片的关键操作是: A。菌丝要分散。
23.用来染芽胞的染料通常是: A。孔雀绿。
24.复红法染鞭毛的关键操作是: B。染料新鲜。
25.镀银法染鞭毛的关键操作是: A。玻片干净。
26.进行简单染色使用的染色液通常是: A。复红。
27.物镜头上的APO字母代表: B。复消色差物镜。
28.物镜头上的Ach字母表示: A。平场物镜。
29.物镜头上的NH字母表示: C。负高相差物镜。
30.物镜头上的0。17表示: A。要求的盖玻片厚度。
31.镜头上标有NK字母的镜头是: A。照相目镜。
32.目镜头上的PK字母表示: C。平场补偿目镜。
33.物镜头上的Splan字母表示: A。超平场物镜。
34.物镜头上的SplanApo表示: A。超平场复消色差物镜。
35.物镜头上的Planapo表示: C。平场复消色差物镜。
36.物镜头上的Plan字母表示: A。平场物镜。
37.目镜头上的W字母表示: C。广视野目镜。
38.目镜头上的SWK字母表示: A。超广视野目镜。
39.目镜头上的WHK字母表示: B。广视野高眼点目镜。
40.物镜头上的“错。L”字母表示: B。半消色差物镜。
判断：
正确——
1.无菌吸管上端塞入棉花是为了过滤口中的有菌空气。
2.稀释平板测数时，放线菌计数的标准是选择每皿中菌落数在30-300个之间的稀释度进行计数。
3.稀释平板测数时，细菌计数的标准是选择每皿中菌落数在30-300个之间的稀释度进行计数。
5.用混菌法测微生物活菌数时，每个平皿中的菌液加入量是1ml。
6.用涂抹法测微生物活菌数时，每个平皿中的菌液加入量是0。1ml。
7.用油镜镜检时应将聚光器升至最高。
8.为了满足微生物对微量元素的需要，配制培养基所用的水最好使用自来水。
9.稀释测数用的无菌水通常是由自来水灭菌而成。
10.使用油镜的正确操作步骤是:1。低倍镜观察。2。高倍镜观察。3。转出高倍镜头，滴加香柏油后用油镜观察。
11.在擦拭显微镜镜头时，应向一个方向擦拭。
12.显微镜镜头的放大倍数越大，它的数值孔径值越大，其镜口角也越大。
13.稀释平板测数通常是采用十倍稀释法。
14.做稀释平板测数时，每做一个稀释度都必须更换一支无菌吸管。
15.实验室做固体培养基时，常加1。8%的琼脂作凝固剂，做半固体培养基时，琼脂加入量通常是0。5%。
16.镜台测微尺每小格的实际长度是10微米。
17.血球计数板两边的平台比计数区高0。1mm。
18.棉花塞塞入试管的长度应为棉塞全长的2/3。
19.摆斜面的长度应不超过试管长度的1/2。
20.血球计数板计数区的面积是1mm2。
21.在使用细菌计数板计数时，为了防止计数偏大，计数区四周压线的菌只能数两边。
22.目镜测微尺每格的实际长度是未知的，需用长度已知的镜台测微尺校正。
23.测微生物细胞大小时，需要校正的是目镜测微尺每格的实际长度。
24.血球计数板计数区每小格的体积是1/4000mm3。
25.用分装器将培养基分装试管时，应谨防培养基沾染试管口。
26.琼脂的熔化温度是95℃以上，凝固温度是45℃以下。
27.玻璃器材洗净后在急需时可采用高压蒸汽灭菌，而不能用干热灭菌。
28.细菌计数板每小格的体积是1/20000mm3。
29.无菌室用甲醛熏蒸消毒后可喷氨水以减少甲醛的刺激。
错误——
1.无菌吸管上端塞入棉花的目的是为了防止菌液吸入口中。
2.稀释平板测数时，细菌，放线菌，真菌的计数标准是选择每皿中菌落数在30-300个的稀释度进行计数。
3.稀释平板测数时，细菌、放线菌、真菌的计数标准是选择每皿中菌落数在10-100个的稀释度进行计数。
4.使用高倍镜时，可将聚光器升至最高。
5.观察根霉，青霉只需用低倍镜观察即可。
6.实验室通常使用血球计数板测微生物的总菌数。
7.浸油的油镜头可用软的卫生纸擦净。
8.为了节省时间，可直接在染色涂片上滴加香柏油后，直接用油镜观察。
9.稀释平板测数通常采用的是二倍稀释法。
10.做稀释平板测数时，只需一支吸管从头稀释到尾即可。
11.稀释平板测数时，无论是用混菌法，还是用涂抹法，每个平皿中的菌液加入量都是1ml。
12.稀释平板测数时，无论是用混菌法，还是用涂抹法，每个平皿中的菌液加入量都是0。1ml。
13.实验室做固体培养基，常加2%的琼脂作凝固剂，做半固体培养基时，琼脂加入量通常是1%。
14.E。coli经革兰氏染色后，菌体呈红色，它是革兰氏正反应细菌。
15.在光学显微镜下，根霉的孢子囊是透明的。
16.使用手提灭菌锅灭菌后，为了尽快排除锅内蒸汽，可直接打开排气阀排气。
17.苏云金杆菌的芽胞在菌体的中央。
18.所有真菌菌落的表面干燥，呈绒毛状。
19.所有放线菌菌落表面干燥，呈粉粒状。
20.所有细菌菌落的表面都是光滑湿润状。(芽胞菌菌落表面粗糙。)。
21.目镜测微尺每小格的实际长度是10μm。
22.镜台测微尺每小格的实际长度是10nm(纳米)。
24.棉花塞塞入试管的长度应为棉塞全长的2/3。
25.摆斜面的长度应不超过试管长度的2/3。
26.用血球计数板计数时，任数5个大方格(80个小格)的菌数即可。
27.测微生物的细胞大小时，需要校正的是镜台测微尺每格的实际长度。
28.血球计数板计数区共有400个小格，每小格的面积是1/400cm2。
29.琼脂的熔化温度是90℃以上，凝固温度是45℃以下。
30.血球计数板计数区每小格的体积是1/4000cm3。
填空：
1.霉菌水浸片的制片程序是加一滴水于载玻片中央，用解剖针挑取菌丝少许，将菌丝用50%的酒精浸润，将菌丝用蒸
馏水水洗，将菌丝放入载玻片水滴中并小心分散，盖上盖玻片。
2.放线菌印片染色的操作程序是印片，干燥，固定，复红染色2-3分钟，水洗，晾干。
3.固体培养基常用洋菜(琼脂)作凝固剂，普通固体培养基的用量一般为 1。5-2。0% ，半固体培养基的用量一般 0。
5%_。
4.简单染色的操作程序是涂片，干燥，固定，复红染色1-2分钟，水洗，晾干。
5.使用手提式灭菌锅进行灭菌的操作程序是锅内加水，灭菌物体装锅，对称上紧密封螺帽将锅密封上，加热升温，
排尽锅内冷空气，升温至灭菌工艺条件(一般为98kpa)，在工艺条件下保压计时(一般为30分钟)，到时间后切断热源，降温，出锅。
6.实验室配制固体培养基的操作程序是照配方称取药品，将药品溶解在一定量的水中后加热煮沸，将琼脂按量称取
后用水浸湿，将浸湿的琼脂加入煮沸的营养液中，待琼脂全部融化后调节pH值，补充损失的水分，分装培养基入不同的容器中。
7.有荚膜的细菌用负染色法染色后，荚膜为无色，菌体为_红色。
8.细菌经革兰氏染色后，革兰氏正反应菌呈紫色，革兰氏负反应菌呈红色。
9.细菌经简单染色后呈_所染染料的颜色_。
10.显微镜的光学系统由_反光镜，聚光镜，物镜，_和目镜组成。
11.显微镜的机械部分包括_镜座，镜臂，载物台，转换器，镜筒，推动器，粗动螺旋，微动螺旋聚光镜升降螺旋等
九部分组成。
12.高氏培养基通常用来培养_放线菌，其pH值为_7。5-8。0_。
13.PA培养基通常用来培养真菌_，其pH值为 5-6_。
14.牛肉膏、蛋白胨培养基通常用来培养_细菌，其pH值为_7。0-7。2_。
15.无氮培养基通常用来培养自生固氮菌。其氮源来自_空气中的N2_。
16.干热灭菌的工艺条件是 160-170℃/2h_。
17.使用显微镜低倍镜观察时，聚光器应该降低，使用显微镜高倍镜观察时，聚光器应该适当升高。
18.革兰氏染色的关键操作是酒精脱色_。
19.显微镜的倍数越大，焦深越小，调焦应该越小心_。
20.按培养基的形态，可将培养基分为液体_，固体_，半固体_三种类型。
21.配制常规培养基时通常用_自来水。
22.热灭菌通常用来灭菌玻璃器材，培养基的灭菌通常用_高压蒸汽灭菌。
23.细菌稀释测数通常采用 10倍_稀释法，稀释用试管无菌水为 9_毫升。
24.配制培养基时常用_1molNaOH、和1molHCL 调节pH值。
25.按培养基的特殊用途，可将培养基分成__选择培养基，加富培养基，鉴别培养基等。
26.选择培养基可用来分离培养我们所需的特殊微生物类群，例如我们要从土壤中分离纤维分解菌，可以利用_纤维素
_作唯一碳源来筛选纤维分解菌；要分离产蛋白酶的微生物，可以利用酪蛋白，作唯一氮源分离_蛋白分解菌_。27.革兰氏染色的操作程序是涂片，干燥，固定，结晶紫染色1分钟，水洗，碘液媒染1分钟，水洗，95%的乙醇脱色
25秒，水洗，蕃红复染3-5分钟，水洗，晾干。
28.培养基是人工配制的适合不同微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。按营养物质的不同来源可分为_天然培
养基，合成培养基，半合成培养基_三大类。
29.高倍镜头的数值孔径通常为_0。65 ，放大倍数为_40x_。
30.油镜头的数值孔径通常为_1。25 ，放大倍数为_100x或90x_。
32.穿刺接种使用的接种工具为_接种针，斜面接种使用的接种工具为接种环_。
33.进行稀释测数使用的主要器材有_酒精灯，1ml无菌吸管，9ml试管装无菌水，9cm的无菌平板。
34.用孔雀绿和复红作细菌芽胞染色时，可使菌体呈红色，使芽胞呈_绿色。
35.用日光灯作光源时，通常用_平面反光镜，用自然光作光源时，通常用凹面_反光镜
36.无菌室杀菌通常采用紫外灯照射，和喷洒化学药剂(如酚)相结合的方法。
37.半固体培养基通常用来检查_细菌的运动性。
38.摆试管斜面的基本操作方法是将摆斜面用特制木条放在桌面上，将装有固体培养基的试管趁热放在特制木条上摆
成斜面，斜面长度不得超过试管长度的1/2，将试管棉塞部分用灭菌报纸盖上，以防空气中微生物落到棉塞上引起污染。
39.不能加热灭菌的液体培养基应采用滤法除菌，通常用的器皿有蔡氏细菌过滤器和滤膜。
40.蓝细菌的培养可用滤膜培养基。
41.分离酵母菌时为了抑制细菌的生长，通常用膜培养基。
42.从土壤中分离真菌时，通常在培养基中加入_孟加拉红和链霉素抑制细菌的生长。
43.测微生物的大小使用的主要工具是微镜，镜台测微尺和_目镜测微尺。
44.测微生物的数量使用的主要工具是_显微镜和血球计数板_。
45.进行细菌的显微计数时使用的主要工具是显微镜和细菌计数板_。
46.普通光学显微镜测酵母菌的大小的操作程序是将镜台测微尺置载物台上，调焦找到台尺，在低倍镜下校正目镜测
微尺每格的长，在高倍镜下校正目镜测微尺每格的长，去掉台尺换上待测样本片，在高倍镜下测出十个酵母菌宽和长的格数，将校正值乘入，算出十个酵母菌的平均宽和平均长，以平均宽X·平均长Y(μm)表示酵母菌的大小。
47.显微计数的操作程序是_将待测菌进行适当的稀释，将计数板置于载物台上，在低倍镜下找到计数区，将菌液加到
计数区上，调焦看到菌体，按五点取样法计数五个大方格的菌数，计算每小格的含菌数，计算出单位体积(如每ml)中的含菌数。
48.荚膜染色法的操作程序是_涂片，风干，加复红染色3-5分钟，水洗，晾干，加墨素涂抹，风干。
49.芽胞染色的操作程序是片，干燥，固定，孔雀绿加热染色15分钟，水洗，复红染色2-3分钟，水洗，晾干。
50.芽胞染色的关键操作是孔雀绿加热染色_。
51.放线菌印片染色的关键操作是_印片时不能移动_。
52.用负染色法染荚膜的关键操作是_涂抹墨素要薄。
53.摇床振荡培养通常用来培养_好氧微生物，享格特的厌氧操作方法通常用来培养专性厌氧菌
54.革兰氏染色反应与细菌细胞壁的_结构_和_组成_有关。在革兰氏染色过程中，当用95%酒精处理后，就放在显微镜
下观察，革兰氏阳性菌呈_紫_色，而革兰氏阴性菌呈_无色。
55.血球计数板与细菌计数板的主要差别是前者计数区的深度是后者的五倍
56.制霉菌水浸片时加棉兰染色液可使菌体呈_浅兰色。
57.Anabaenaazo对ica的异型胞通常是_间生在光学显微镜下它是_透明的，细胞两端有极节_。它能控制氧气的进
入，保持异型胞内_低氧分压，以利于固定分子氮_。
58.配制培养基时，应注意各种营养物质的配比，特别是C:N比(碳氮比)。一般而言，当C:N≥5:1时，有利于_菌体
生长；当C:N＜5:1时，有利于_积累代谢产物。
59.由于各种微生物对某种化合物如抗生素、染料的敏感性不同，可以利用这一特征来从土壤中分离出不同类群的微
生物。如在培养基中加入青霉素(链霉素)，会杀死或抑制细菌和放线菌的生长而分离出真菌_；在培养基中加入_结晶紫_，有利于分离到革兰氏阴性菌。
60.细菌在革兰氏染色过程中，最后用蕃红复染的原因是G-细菌经结晶紫染色、碘液媒染、酒精脱色后菌体紫色脱去，
故需用蕃红复染，这样在光镜下才能见到红色的菌体。
61.高倍镜下能看到的物象在油镜下看不到往往是由于_片反置和_菌体着色太浅引起。
62.微生物在培养基中生长时，由于其_新陈代谢而使培养基_pH值发生改变；所以在配制培养基时，为维持该条件
的相对恒定，常在培养基中加入缓冲物质如_碳酸盐(CaCO3)_或_磷酸盐。
63.一般而言，微生物在含糖基质上生长，会产_酸_，而使_pH下降_；微生物分解蛋白质或氨基酸会产_碱_，而使_pH
上升。
64.在微生物培养过程中使用的培养皿首先是被_Petri采用的，因此又称培养皿为_Petri_dish。Hesse在其妻子的启
发下，将固体培养基使用的凝固剂由明胶改为_琼脂。
65.显微镜的微动螺旋每转一圈升降距离为_0。1毫米
和__菌体培养时间太长引起。
67.检查乳品和饮料是否含有_大肠杆菌(E.Coli)_等肠道细菌，可采用_伊红--美兰_培养基，在这种培养基平板上_大
肠杆菌(E.Coli)_会形成具有_金属_光泽的紫黑色小菌落。
68.细菌鞭毛经镀银法染色后呈_褐_色。
69.细菌鞭毛经李夫森法染色后呈_红色。
70.由于升汞(HgCL2)有腐蚀作用，所以不能用于金属器皿消毒，特别是_铝制品。
思考题：
1.试述在普通光学显微镜下测定微生物细胞大小的基本方法。
测定微生物细胞的大小主要使用目镜测微尺。其方法如下:
1）先用长度已知的镜台测微尺校正目镜测微尺。校正的方法是让台尺与目尺重叠，看台尺的X格正好与目尺的Y
格重叠，然后用
y m
10μ
－
x
计算目尺每格的长.分别校正目镜测微尺在低倍镜，高倍镜及油镜下每格所代表的
实际长度。
2）将待测微生物制成水浸片或染色涂片置载物台上，调焦找到微生物后用目镜测微尺测量其宽几格，长几格，然后乘上相应放大倍数下的校正值。
3）一般测10个微生物，然后以平均值表示。
4）若是酵母、细菌等单细胞微生物，通常测其宽和长，然后以平均宽 平均长表示，单位为μm。
2.以测苏云金杆菌工业菌粉中的活菌数为例，试述稀释平板计数的基本方法。
1）测数前先准备好测数用的1ml无菌吸管，9cm无菌平板，9ml试管无菌水和牛肉膏蛋白胨琼脂培养基。
2）称取10克工业菌粉加入90ml无菌水中置摇床上或用手振荡20-30分钟，让菌体分散。
3）将上述振荡过的菌液按无菌操作法进行十倍稀释直到10-8。
4）取9cm无菌平板9套用记号笔在平板底编号，10-8编3套，10-7编3套，10-6编3套。
5）用1支1ml的无菌吸管，取1ml10-8的稀释菌液放入编号10-8的平板中，如此将三个重复做完.同法取10-7稀释菌液放入三个编号为10-7平板中.同法取10-6稀释菌液放入三个编号为10-6平板中.(均要按无菌操作法做)。
6）将牛肉膏蛋白胨琼脂培养基熔化冷至45-50℃后，在酒精灯火焰边按无菌操作法倒入上述9套平板中，每个加入量大约15-20ml，边加边摇动平板，使培养基与菌液充分混匀。
7）待培养基凝固后，将平板倒过来，置28-30℃下培养48小时后计数。
3.试述划线分离的操作方法。
1）取9ml无菌平板一套在火焰旁按无菌操作法倒人15-20ml营养琼脂，让其冷凝成平板。
2）左手拿上述平板，右手拿接种环在火焰上灭菌后沾取原始分离物在平板上平行划线三条
3）将接种环在火焰上灭菌，左手平板转动大约70度，用灭菌接种环通过第一次划线的地方作二次划线，亦划三条。
4）同上法再作第三次，第四次划线。
5）盖上平板盖，将平板倒过来置28-30℃下培养2-4天后观察结果.划的好应在第四次划线处出现单个菌落。
注:本答案也可画图说明。
4.试述检查细菌的运动性的操作方法。
检查细菌的运动性有两种方法:
1）镜检法
将待检样品制成菌悬液，滴一点菌液于一盖玻片上，取一凹窝载玻片，将凹窝对准菌悬液盖在盖玻片上，然后将盖玻片和载玻片一起翻转，让菌悬液在凹窝上的盖玻片下.然后在显微镜下观察，观察应找悬液的边缘.因细菌为了更多地接触空气，总向水滴的边缘运动，观察时要注意将细菌的运动与分子的布朗运动区别开。
2）半固体穿刺法
将待检细菌穿刺接种在半固体试管培养基中，若细菌仅沿穿刺线生长，说明细菌不运动。若细菌沿穿刺线向周围扩散生长，说明细菌有运动性。
5.简述配制培养基的基本原则:
培养基是人工配制的适合不同微生物生长繁殖，或用于积累代谢产物的营养基质。所以配制培养基时应注意以下原则:
1）根据微生物的不同选用不同的培养基，以满足微生物对营养物的需要。如自养型微生物所要求营养较简单，而异养型微生物营养要求较复杂。培养细菌，放线菌，真菌等各有不同的培养基。
2）注意各种营养物质的浓度与配比。微生物生长所需要的营养物质往往在适当时才生长良好。浓度大往往会抑制微生物的生长。如糖类，各种重金属盐类如果浓度太高，也会影响微生物的生长。同时各种营养物质的浓度比也应注意，特别是C/N比。
3）注意将培养基的pH值控制在一定范围内。为了防止因微生物生长繁殖或积累代谢产物后影响培养基pH值，常在其中加入磷酸盐，碳酸盐，以维持培养基pH值的相对恒定。
4）同时还应考虑培养基的氧化还原电位及原材料的经济、易购和来源广泛的原则。
6.试述配制培养基的基本过程及应该注意的问题。
配制培养基的基本过程是:
1）按培养基的配方称取各种药品，用量太少的药品应配制成溶液后再取一定量加入。
2）将各种药品加水溶解，通常是加所需水量的一半。
3）若配固体培养基，按2%的用量称取琼脂，用水将琼脂浸湿一下，用手挤去琼脂中过多的水分，加入2的溶液中。
4）加热至琼脂全部溶解，并补足所需的全部水量。
5）用1molNaOH和1molHCL调节pH至要求值。
6）用分装器将培养基分装入试管或三角瓶中，塞上棉塞并包扎，灭菌后备用。
注意事项:
1）配制过程中，在加热熔化琼脂时，要不断搅拌，以防糊底。
2）分装时不要让培养基沾染试管口或瓶口，以防培养过程中容易污染杂菌。
7.试述显微计数的基本方法。
显微计数通常用来测微生物单细胞的数量，大一点的细胞如酵母菌用血球计数板，小一点的细胞如细菌用细菌计数板。该测数方法不能区别死活细胞，测出的是微生物总的细胞数量。
血球计数板和细菌计数板构造相似，计数区的面积都是1mm2，两者的差别在于血球计数板的深度为0.1mm。
细菌计数板的深度为0.02mm。无论是血球计数板还是细菌计数板计数区都划为25个大方格，每个大方格又划为16个小格。所以每小格的体积为1/4000mm3或1/20000mm3。计数时，先在显微镜下找到计数区，然后将菌液稀释到适当浓度，取少量菌液滴在计数区上盖上特制盖玻片，亦可先盖盖玻片。然后用吸管将菌液从计数板上的沟里加入。靠菌液的表面张力充满计数区。计数时采取五点取样法数数，即四角各取一个大方格，再在中央取一个大方格。计数时大方格四周压线的细胞只数两边，以防增加数量。将5个大方格的菌数加起来除以80得出每个小格的菌数，再乘以4000即为1mm3的菌数，再乘上1000即为1ml的菌数，乘上稀释倍数即为样品含菌数。
8.标本片上的某一物象，第一次看到后如何再次找到它?
要做到这一点，首先取决于显微镜的好坏，若显微镜上的推动器带有纵横标尺，很容易做到这一点。首先记住标本片放到推动器上的方向，然后记下观察某一物体时推动器上的纵横标尺的数字。如纵3，横4。当标本片拿下来后，若要重复观察原来的物象，只要按原方向将标本片荚在推动器上，将推动器推动到第一次观察该物体的纵，横标尺数字纵3，横4，即可看到第一次观察过的物体。
9.试述在光学显微镜下所看到的Anabaenaazo对ica的主要特征。
Anabaenaazo对ica的主要特征是:
1）菌体为丝状体，营养细胞为绿色，藻丝不扭曲。
2）该菌有异型胞，异型胞间生，无色透明，两端有极点。
3）厚壁孢子无色、大、两端无极点。
10.革兰氏染色反应的成败关键是什么?为什么革兰氏染色有十分重要的理论与实践意义?
因通过革兰氏染色，可把几乎所有的细菌都分成G+和G-菌两大类细菌，在细胞结构、成分、形态、生理、生化、遗传、免疫、生态和药物敏感性等方面都呈现出明显的差异。因此，任何细菌只要通过革兰氏染色，即可提供不少重要的生物学特性方面的信息。
革兰氏染色反应的成败关键是：
1）菌龄:12-24小时的纯培养物。
2）革兰氏染色操作技术其中严格控制酒精脱色时间和菌液涂布时应均匀而薄是关键。
3）培养基的组成。
11.如何从土壤中分离得到一个微生物的纯培养体?
首先要根据分离对象选择适宜的培养基。若要分离真菌应选用马丁-孟加拉红选择培养基；若要分离细菌应选用牛肉膏蛋白胨培养基；若要分离放线菌应选用高氏培养基。土样采回来后，用常规的十倍稀释分离法进行稀释分离，若分离细菌，一般稀至10-8，若分离放线菌，一般稀至10-6；若分离真菌，一般稀至10-4。取最后三个稀释度倒平板获得单个菌落。将平板上出现的单菌落转接斜面培养，同时镜检菌体的纯度，若不纯，应将培养的单菌落斜面再次进行稀释分离。倒平板获得单菌落，转接斜面培养，同时镜检菌体的纯度。反复几次直到得到菌体单一的单菌落方可认为是某一微生物的纯培养体。
12.察氏培养基的组成为:蔗糖:30克，磷酸氢二钾:1.0克，硝酸钠:2克，硫酸镁0.5克，氯化钾:0.5克，硫酸亚铁:0.01
克，蒸馏水:1000ml.
试述:
①该培养基的C源，N源各是什么物质。
②除C源和N源外的其它物质起什么作用:
③该培养基为什么不加生长因子?
（1）该培养基的C源物质是蔗糖，N源物质是硝酸钠。
（2）磷酸氢二钾、硫酸镁、氯化钾、硫酸亚铁为该培养基提供矿质营养。蒸馏水提供水分。
（3）培养基培养的微生物在培养基上能合成自身所需的全部生长因子，故无需添加生长因素，该培养基所培养的微生物为野生型。
13.简述采用多管发酵法测定自来水大肠杆菌群的方法。
采用多管发酵法测定自来水大肠杆菌群培养基：乳糖蛋白胨发酵管（内有倒置小套管），三倍浓缩乳糖蛋白胨发酵管（瓶）（内有倒置小套管），伊红美蓝琼脂平板，灭菌水．
仪器或其他用具：载玻片，灭菌的带玻璃塞空瓶，灭菌培养皿，灭菌吸管，灭菌试管等。
（一）自来水水样的采集：先将自来水龙头用火焰烧灼3min灭菌，再开放水龙头使水流5min后，以灭菌三角烧瓶接取水样，以待分析。
（二）检查方法：
1、初(步)发酵试验在2个含有50ml三倍浓缩的乳糖蛋白胨发酵烧瓶中，各加入100m1水样。在10支含
有5m1三倍浓缩乳糖蛋白胨发酵管中，各加入10 m1水样。混匀后，37℃培养24h，24h未产气的继
续培养至48h。
2、平板分离经24h培养后，将产酸产气及48h产酸产气的发酵管(瓶)，分别划线接种于伊红美蓝琼脂平
板上，再于37℃下培养18—24h，将符合下列特征的菌落的一小部分，进行涂片，革兰氏染色，镜检。
①深紫黑色、有金属光泽；②紫黑色、不带或略带金属光泽；③淡紫红色、中心颜色较深。
3、复发酵试验经涂片、染色、镜检后，如为革兰氏阴性无芽胞杆菌，则挑取该菌落的另一部分，重新接
种于普通浓度的乳糖蛋白胨发酵管中，每管可接种来自同一初发酵管的同类型菌落1-3个，37℃培养
24h，结果若产酸又产气，即证实有大肠菌群存在。
微生物学实验教学大纲
课程编号： 《微生物学实验》教学大纲 学时数：108讲课：108 学制：四年制本科 适合专业：生物科学相关专业 一、本课程的性质和任务 （一）课程的性质： 微生物学实验主要任务是使学生掌握研究与应用微生物的主要方法与技术，包括经典的、常规的、以及现代的方法与技术，使学生具有适应于从事相关学科的基础理论研究与实际生产应用的微生物学实验技能。提高学生分析问题和解决问题的能力。根据本学科的特点，逐步使学生认识微生物的基本特性，比较它们与其它生物的相似和不同之处，知道如何研究微生物以及对研究中所出现的问题点样分析，并加以解决。 （二）课程的任务： 微生物学实验是生物学重要的基础课之一，要求学生熟悉微生物学方法与技术，掌握无菌操作技能和建立无菌概念是微生物学实验中最重要的内容，重点掌握最基本的无菌操作技能，如接种、纯培养、计数等。 二、本课程与其他课程的联系： 1. 通过教师示范、讲解与学生实际操作相结合方法，使学生牢固树立无菌概念，掌握显微镜的使用、生物染色技术、形态学观察的方法、微生物计数、培养基的配置和灭菌方法、微生物分离、纯化等基本操作技能，基本了解常用的仪器设备的基本原理、构造、使用方法及使用中的注意事项，树立严谨求实的科学态度，提高观察、分析问题和解决问题的能力，培养勤俭节约、爱护公物和相互协作的优良作风。 2. 本实验课内容包括验证性实验、综合性实验两个部分。验证性实验主要
通过光学显微镜镜检观察方法进行教学，综合实验在教师指导下学生根据所掌握的理论基础和实验技能，由学生自己动手完成。实验过程要求学生仔细观察实验现象，完整记录原始实验数据、结果，分析实验现象并认真填写实验报告。 三、教学内容 （一）实验一实验室安全教育与微生物学实验室常用的器皿 目的要求 掌握实验室安全规则，了解微生物学实验所用的器皿，因其大多要进行消毒、灭菌和用来培养微生物，因此了解其质量、洗涤和包装方法的要求。 实验内容 一、器皿的种类、要求与应用： 1、试管 大试管(约18mm×180mm) :可装倒平板用的培养基；可作制备斜面用；装液体培养基用于微生物的振荡培养 中试管[(13～15)mm×(100～150)mm]: 装液体培养基培养细菌或做斜面用；用于细菌、霉菌、病毒等的稀释和血清学试验。 小试管[(10～12)mm×100mm]:一般用于糖发酵或血清学试验，和其它需要节省材料的试验。 2、容量瓶 主要用于准确配制一定浓度的溶液，它是一种细长颈、梨形的平底玻璃瓶，配有磨口塞，瓶颈上刻有标线。 3、量筒 用来量取液体体积的一种玻璃仪器，外壁上有刻度。常用量筒的规格有5ml、10ml、25ml、50ml、100ml、250ml等。 4、三角瓶 用来装无菌水、培养基和振荡培养微生物等。 5、烧杯 呈圆柱形，顶部的一侧开有一个槽口，便于倾倒液体，有些烧杯外壁标有刻度，可以粗略地估计烧杯中液体的体积，这种烧杯叫印标烧杯，也叫刻度烧杯，其分度并不十分精确，允许误差一般在±5%。 6、烧瓶 通常具有圆肚细颈的外观，因瓶口很窄，不适用玻璃棒搅拌，若需要搅拌时，
微生物学实验试题
第十一章微生物学实验试题 一、选择题 111818.革兰氏染色的关键操作步骤是： A. 结晶紫染色 B. 碘液固定 C. 酒精脱色 D. 复染 答:( ) 111819.放线菌印片染色的关键操作是： A. 印片时不能移动 B. 染色 C. 染色后不能吸干 D. A和C 答:( ) 111820.高氏培养基用来培养： A. 细菌 B. 真菌 C. 放线菌 答:( ) 111821.肉汤培养基用来培养: A. 酵母菌 B. 霉菌 C. 细菌 答:( ) 111822.无氮培养基用来培养: A. 自生固氮菌。 B. 硅酸盐细菌 C. 根瘤菌 D. A、B 均可培养 E. A、B、C 均可培养 答:( ) 111823.在使用显微镜油镜时，为了提高分辨力，通常在镜头和盖玻片之间滴加: A. 二甲苯 B. 水 C. 香柏油 答:( ) 111824.常用的消毒酒精浓度为: A. 75% B. 50% C. 90% 答:( ) 111825.用甲醛进行空气熏蒸消毒的用量是: A. 20ml/M3 B. 6ml/M3 C. 1ml/M3 答:( ) 111826.实验室培养基高压蒸汽灭菌的工艺条件是: A. 121℃/30min B. 115℃/30min C. 130℃/30min 答:( ) 111827.巴氏消毒的工艺条件是:
A. 62-63℃/30min B. 71-72℃/15min C. A.B. 均可 答:( ) 111828.半固体培养基的主要用途是: A. 检查细菌的运动性 B. 检查细菌的好氧性 C. A.B. 两项 答：( ) 111829.半固体培养基的琼脂加入量通常是: A. 1% B. 0.5% C. 0.1% 答:( )。 111830.使用手提式灭菌锅灭菌的关键操作是: A. 排冷气彻底 B. 保温时间适当 C. 灭菌完后排气不能太快 D. A-C 答:( )。 111831.目镜头上的“K”字母表示: A. 广视野目镜 B. 惠更斯目镜 C. 补偿目镜 答:( ) 111832.目镜头上的“P”字母表示: A. 平场目镜 B. 广视野目镜 C. 平场补偿目镜 答:( ) 111833.物镜头上的“PL”字母表示: A.正低相差物镜 B.正高相差物镜 C.负高相差物镜 答: ( ) 111834.物镜头上的“UVFL”字母表示。 A. 无荧光物镜 B. 照相物镜 C. 相差物镜 答:( ) 111835.镜头上标有“TC”字母的镜头是: A. 相差调整望远镜 B. 摄影目镜 C. 相差目镜 答:( ) 111836.“PA”表示: A. 马铃薯培养基 B. 高氏培养基 C. 肉汤培养基 答: ( ) 111837.无菌室空气灭菌常用方法是: A. 甲醛熏蒸 B. 紫外灯照射 C. 喷石炭酸
微生物学实验指导
实验一光学显微镜的使用及微生物形态的观察、 大小的测定和计数 一、实验目的 １、掌握光学显微镜的结构、原理，学习显微镜的操作方法和保养 2、观察细菌、真菌、原生动物的标本装片,学会绘制生物图 3、掌握使用测微尺测量微生物大小的方法 ４、了解血球计数板的结构，掌握使用和计算方法 二、实验器材 １、显微镜 ２、微生物标本装片 ３、目、物镜测微尺 ４、血球计数板 ５、酵母菌液或霉菌孢子液 6、载波片、盖波片、烧杯、滴管、擦镜纸、香柏油、二甲苯等 三、显微镜的构造、原理及使用方法 1、构造 现代普通光学显微镜利用目镜和物镜两组透镜系统来放大成像，故又常被称为复式显微镜,由机械装置和光学系统两大部分组成。机械装置包括镜筒、转换器、载物台、镜臂、镜座、调节器;光学系统包括目镜、物镜、聚光器、电光源。显微镜的总放大倍数为目镜和物镜的放大倍数的乘积。 ２、操作 在目镜保持不变的情况下,使用不同放大倍数的物镜所能达到的分辨率及放大率都是不同的。一般情况下,特别是初学者，进行显微观察时应遵循从低倍镜到高倍镜再到油镜的观察程序,因为低倍数物镜视野相对大,易发现目标及确定检查的位置。 四、微生物大小的测量原理和方法 微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一，由于菌体很小,只能在显微镜下来测量。用于测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺和物镜测微尺。 1、目镜测微尺(图1-1）是一块圆形玻片,在玻片中央把5ｍｍ长度刻成5０等分，或把1０mm长度刻成100等分。测量时，将其放在接目镜中的隔板上（此处正好与物镜放大的中 --
-- 间像重叠)来测量经显微镜放大后的细胞物象。由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同,目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用物镜测微尺校正，以求出在一定放大倍数下,目镜测微尺每小格所代表的相对长度。 2、物镜测微尺(图１-２）是中央部分刻有精确等分线的载 玻片,一般将lmm 等分为100格,每格长ｌ０μm （即0.0ｌmm), 是专门用来校正目镜测微尺的。校正时，将物镜测微尺放在载 物台上,由于物镜测微尺与细胞标本是处于同一位置，都要经 过物镜和目镜的两次放大成象进入视野,即物镜测微尺随着显 微镜总放大倍数的放大而放大，因此从物镜测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小,所以用物镜测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表的长度,然后移去物镜测微尺，换上待测标本片，用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。 3、目镜测微尺的校正 把目镜的上透镜旋下，将目镜测微尺的刻度朝下轻轻地装入目镜的隔板上，把物镜测微尺置于载物台上，刻度朝上。先用低倍镜观察，对准焦距，视野中看清物镜测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与物镜测微尺的刻度平行，移动推动器,使两尺重叠,再使两尺的“０”刻度完全重合，定位后，仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度（图1－３)，计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数和物镜测微尺的格数。因为物镜测微尺的刻度每格长l0μｍ，所以由下列公式可以算出目镜测微尺每格所代表的长度。 例如目镜测微尺５小格正好与物镜测微尺5小格重叠，已知物镜测微尺每小格为ｌ0μm ，则目镜测微尺上每小格长度为=5×10μm/５=1０μm 用同法分别校正在高倍镜下和油镜下目镜测微尺每小格所代表的长度。 由于不同显微镜及附件的放大倍数不同,因此校正目镜测微尺必须针对特定的显微镜和附件(特定的物镜、目镜、镜筒长度）进行，而且只能在特定的情况下重复使用,当更换不同放大倍数的目镜或物镜时,必须重新校正目镜测微尺每一格所代表的长度。 4、细胞大小的测定 移去物镜测微尺,换上待测菌体的装片，先在低倍镜下找到目的物,然后在高倍镜下用目镜测微尺来测量菌体的长，宽各占几格（不足一格的部分估计到小数点后一位数）。测出的格数乘上目镜测微尺每格的校正值,即等于该菌的长和宽。 结果计算： 长μm=平均格数×校正值 宽μｍ＝平均格数×校正值 大小表示: 宽μm ×长μｍ 五、微生物细胞数量的测定原理和方法 1、血球计数板是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有4条槽而构成3个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各有一个计数区(图1-4），计数区 图1-1 目镜测微尺 图1-2 物镜测微尺 图1-3 目、物镜测微尺的校正 图1-4 血球计数板
微生物学实验报告
2012级制药专业 工业微生物学实验报告 姓名: 刘甜甜学号: 2012304090 班级: 制药12-2班指导老师：王健 日期：2014.6.11
一、实验目的 1、抑制或杀死微生物的一些物理、化学及生物的因素抑菌、杀菌的原理。 2、掌握物理、化学及生物的因素抑菌、杀菌的试验方法。 3、了解细菌的形态特征、染色特点。 4、了解细菌在普通培养基、选择培养基、血平板上的菌落特征。 5、掌握细菌分离划线培养的方法。 6、掌握细菌的初步生化反应。 7、掌握细菌密集划线法，掌握细菌K-B药敏纸片法。 二、实验内容 1 细菌Gram’s stain染色，镜检，观察记录细菌形态和特色特征 1.1 实验原理：染色原理：G+菌与Gˉ菌细胞壁不同，G+菌比Gˉ菌细胞内核糖核酸镁盐含量高，G+菌比Gˉ等电点低。 1.2 实验步骤： 1.2.1.制片：○1涂片：取半滴生理盐水置一洁净玻片上，以无菌操作技术自平板上去菌落少许，与生理盐水混匀，均匀涂布约1cm2大小，自然干燥； ②固定：取含菌膜的玻片与酒精灯火焰上来回三次，使菌膜牢固附于玻片表面； 1.2.2染色：①初染：取结晶紫一到两滴覆盖于菌膜表面，轻微摇动，维持30〃~40〃,细流水冲洗，切勿直接冲洗涂片区域； ②媒染：取卢氏碘液1~2滴覆盖菌膜表面，轻微摇动，维持30〃~40〃,用上法细流水冲洗； ③脱色：取95%酒精2~3滴于菌膜表面，轻微摇动，局部接近无色即可, 用上法细流水冲洗； ④复染：取1：10稀释石炭酸复红覆盖涂片区域，轻微摇动，用上法细流水冲洗； ⑤吸水纸初步吸干玻片水分，然后自然干燥； 1.2.3 镜检：于涂片区域加半滴香波油，油镜（100倍目镜）下。 图1：Gram’s stain（1000×）图2：染色试验 三、分离培养 1实验原理：四区划线法是把混杂着在一起的微生物或同一微生物群体的不同细胞用接种环在平板培养基表面通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养繁殖后生成个菌落。有时这些单菌落并非由单个细胞繁殖而来，故必须反复分离多次才能得到纯种。其原理是微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离的目的。
微生物学复习题-答案总结
微生物复习题 一、单选题 1．关于共生相关概念下列哪一个是错误的C A、互利共生是指两种生物在一起生活，相互依赖，双方互利 B、共生是指两种生物在一起生活的现象 C、共栖是指两种生物在一起生活，双方互不侵害互不受益 D、共栖、互利共生和寄生是根据两种共生生物之间的利害关系来分的 E、寄生指一种生物生活在另一种生物的体内或体表，获取营养并使对方受害2．用来测量细菌大小的单位是C A.厘米(cm) B.毫米(mm) C.微米(μm) D.纳米(nm) E.微微米(pm) 3．有完整细胞核的微生物是B A、细菌 B、真菌 C、放线菌 D、衣原体 E、支原体 4．正常微生物（菌）群是E A、无侵袭力的细菌 B、不产生毒素的细菌 C、健康人的致病菌 D、健康带菌者所携带的细菌 E、在人体内长期存在的有益或无害的细菌5．机体受病原菌侵入后不出现或仅出现不明显临床症状的感染过程称为C A、带菌者 B、局部感染 C、隐性感染 D、显性感染 E、潜在性感染6．下列哪种消毒灭菌方式不合适E A、空气—紫外线 B、牛奶—巴氏消毒法 C、接种环—烧灼法 D、皮肤—碘酒 E、血清—高压蒸气灭菌法 7．肉眼直接观察细菌有无动力常选用C A、液体培养基 B、固体斜面培养基 C、半固体培养基 D、固体平板培养基 E、选择培养基 8．革兰氏染色的步骤是C A、结晶紫-酒精-碘液-复红 B、复红-碘液-酒精-结晶紫 C、结晶紫-碘液-酒精-复红 D、复红-酒精-碘液-结晶紫 E、结晶紫-复红-酒精-碘液 9．哪一项不是细菌质粒的特点E A、化学性质是环状双链DNA B、可在细菌间转移 C、非细菌所必需的遗传物质 D、能自主复制 E、是细菌的特殊构造 10．在细菌生长曲线中菌数增加最快的是：B A、迟缓期 B、对数期 C、稳定期 D、衰亡期 E、全部生长过程 11．溶原性细菌是指A A、带有前噬菌体的细菌 B、带有R质粒的细菌 C、带有毒性噬菌体的细菌 D、带有F质粒的细菌 E、带有Col质粒的细菌 12. 关于原核细胞型病原生物的基因转移，下列陈述哪项正确D A、转化与转导具有相同的转移途径 B、接合是质粒转移的非自然方式 C、转化与接合的不同在于后者依靠F+菌，前者依靠温和噬菌体 D、转化是真核生物与原核生物共同拥有的基因转移方式 E、溶原性转换是由溶原性噬菌体引起的转化现象 13．细菌的遗传物质不包括C
微生物学实验
微生物学实验 实验一常用培养基的制备、灭菌与消毒 一、实验目的 了解培养基的配制原理；掌握配制培养基的一般方法和步骤；了解常见灭菌、清毒基本原理及方法；掌握干热天菌、高压蒸汽灭菌及过滤除菌的操作方法。 二、实验原理 培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物。培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素和水。根据微生物的种类和实验目的不同，培养基也有不同的种类和配制方法。 牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质，所以可供微生物生长繁殖之用。 干热天菌、高压蒸汽灭菌方法主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。 三、试剂与器材 1.器材试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、培养基、分装器、天 平、牛角匙、高压蒸汽灭菌锅、pH度纸、棉花、牛皮纸、记号笔、麻绳、纱布、吸管、培养皿、电烘箱、注射器、微孔滤膜过滤器、镊子等。 2.试剂牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂 四、实验内容 1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查 2.干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物 3.高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒 压→降压回零→排汽→取物→无菌检查 4.过滤除菌：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌 五、关键步骤及注意事项 1.要严格按配方配制。 2.调pH不要过头。
3.干热灭菌要注意物品不要堆放过紧，注意温度的时间控制，70oC 以下放物、取物。 4.高压灭菌要注意物品不要过多，加热后排除冷空气，到时降压回零 取物。 5.过滤除菌要注意各部件灭菌，压滤时，压力要适当，不可太猛太快， 滤膜要注意清洗保存。 六、思考题 1.培养基配好后，为什么必须立即灭菌?如何检查灭菌后的培养基是 无菌的? 2.在配制培养基的操作过程中应注意些什么问题?为什么? 3.培养微生物的培养基应具备哪些条件?为什么? 4.培养基的配制原则是什么? 实验二土壤中微生物分离纯化培养 一、实验目的 掌握倒平板的方法和几种常用的分离纯化微生物的基本操作技术；了解不同的微生物菌落在斜面上、半固体培养基和液体培养基中的生长特征；进一步熟练和掌握微生物无菌操作技术；掌握微生物培养方法。 二、实验原理 从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。常用的分离、纯化方法：单细胞挑取法，稀释涂布平板法，稀释混合平板法，平板划线法稀释涂布平板法步骤：倒平板－制备土壤污水稀释液－涂布－培养－挑菌落；平板划线法步骤：倒平板－标记培养基名称－划线。 三、试剂与器材 1.器材盛9m1无菌水的试管、盛90m1无菌水并带有玻璃珠的三角 烧瓶、无菌玻璃涂棒、无菌吸管、接种环、酒精灯、无菌培养皿、显微镜、血细胞计数板等。 2.试剂牛肉膏蛋白胨培养基，高氏1号培养基，查氏培养基 四、实验内容
微生物学经典复习题有答案
第一章绪论 一、填空题 1．世界上第一个看见并描述微生物的人是荷兰商人安东?列文虎克，他的最大贡献不在商界，而是利用自制的____显微镜___发现了微生物世界。 2．微生物学发展的奠基者是法国的巴斯德，他对微生物学的建立和发展作出卓越的贡献，主要集中体现__彻底否定了“自生说”学说___、__免疫学--预防接种__和__证实发酵是由微生物引起的___；而被称为细菌学奠基者是_德__国的_____柯赫____,他也对微生物学建立和发展作出卓越贡献，主要集中体现____建立了细菌纯培养技术___和__提出了柯赫法则____. 3．微生物学发展史可分为5期，其分别为史前期、初创期、___奠基期____、______发展期和成熟期；我国人民在史前期期曾有过重大贡献，其为制曲酿酒技术。 4．微生物学与___数___、___理____、___化___、信息科学和技术科学进一步交叉、渗透和融合，至今已分化出一系列基础性学科和应用性学科,如化学微生物学、分析微生物学、生物生物工程学、微生物化学分类学和微生物信息学等。 5．微生物的五大共性是指体积小，面积大、吸收多，转化快、生长旺，繁殖快、适应性强，易变异、分布广、种类多 . 二、问答题: 1．“微生物对人类的重要性，你怎么强调都不过分。”试用具体事例来说明这句话的深刻意义. （从四个方面具体的事例来说明人类与微生物的关系。) (1) 物质和能量循环（2）人体生理屏障（3）提供必需物质 (4)现代生物技术等方面。2．简述科赫原则.(如何判定某种微生物是病原菌?） 3．微生物有哪五大共性?其中最基本的是哪一个？为什么？ 4．什么是微生物，微生物学?学习微生物学的任务是什么? 5．简述微生物对生命科学基础理论研究有何重大贡献？ 答案要点：1）微生物是生命科学研究的理想材料; 2）利用酵母菌细胞制剂进行酒精发酵研究，不但阐明了生物体内糖的复杂转化过程，且为近代生物化学领域的酶学奠定了基础； 3)比德尔（Beadle）用脉胞菌进行突变试验，阐明了基因和酶的关系，提出了“一个基因 一个酶”的假说,开创了生化遗传学新学科； 4）遗传的物质基础是用微生物证实的； 5）遗传密码的被揭露、中心法则的确定、基因对酶的调节控制在分子生物学的基本原理都与微生物学有密切关系； 6）遗传工程的主角：①作为遗传工程中表达DNA所携带的遗传性状的载体,今天依然以大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和酵母菌等微生物为主,基因工程药物的生产几乎都是微生物；②在基因工程的操作中用于切割DNA取得所需基因的“手术刀”的限制性内切酶都来自微生物；③基因的载体是病毒、噬菌体、质粒；④动植物细胞培养和发酵技术； 7）微生物技术向微生物科学的整个领域扩散。 第二章微生物细胞的结构与功能 一、填空 1．微生物包括的主要类群有原核微生物、真核微生物和非细胞生物。 2．细菌的基本形态有球状、杆状和螺旋状。 3．根据分裂方式及排列情况,球菌分有单球菌、双球菌、链球菌、四联球菌、八叠球菌、和葡萄球菌等，螺旋菌又有螺旋体菌、螺旋状__和__弧状__，及其它形态的菌有星形、方形、柄杆状和异常形态. 4．细菌的一般构造有____细胞壁____、___细胞膜____、___细胞质____和___核区___等,特殊构造又有鞭毛、菌毛(或性菌毛）、荚膜和____芽孢___等。 5．引起细菌形成异常形态的主要原因是受环境条件的影响,比如培养时间、____培养温度和培养基的组成和浓度等。 6．细菌的染色方法有①__简单染色法____、②___鉴别染色法____、③___负染色法___，其中②又可分为革兰氏染色法、抗酸性染色法、芽孢染色法和姬姆萨染色法。
微生物学实验复习提纲教案资料
微生物学实验复习提纲 1.研究微生物学的基本技术有哪些（显微镜技术、无菌技术、纯种分离技术和纯种培养技术） 2.细菌培养基的配制过程？ 答：配制培养液→调节PH→分装→包扎→灭菌→搁置斜面 3.制造接种环、接种针的金属常用铂或镍,原因是软硬适度，能经受火焰反复灼烧，又易冷却. 4.灭菌吸管的包装的注意事项：（1）吸管必须干燥;(2)在距其粗头顶端约0.5cm处，塞一小段约1.5cm 长的棉花（不能用脱脂棉）。作用是避免外界及口中杂菌吸入管内，并防止菌液等吸入口中。 5.空的玻璃器皿一般用干热灭菌，若用湿热灭菌。则要多用几层报纸包扎，外面最好加一层牛皮纸或铝箔。 6.接种环在用前必须烧灼灭菌，用后也应立即烧灼。 7.酵母的死细胞和活细胞可通过哪些方式鉴别？ 答：1.、用美蓝液对酵母菌染色后，活细胞为无色，死细胞为蓝色2、平板菌落计数法 8.细菌、放线菌、酵母菌和霉菌四大类微生物的菌落各有何特点？ 答：细菌：湿润、光滑、透明、粘稠、易挑起、质地均匀、菌落各部位的颜色一致等。 放线菌：质地致密、丝绒状或有皱折、干燥，不透明，上覆盖有不同颜色的干粉（孢子），菌落正反面的颜色常不一致，基内菌丝与培养基结合较紧，难以挑起。 酵母菌：菌落与细菌的相仿，比细菌菌落大而且厚，菌落表面湿润、粘稠、易被挑起，其颜色多为乳白色，少数为红色。同时会散发出悦人的酒香味。 霉菌：菌落形态较大，质地疏松，外观干燥，不透明，呈现或紧或松的蛛网状、绒毛状或棉絮状；菌落与培养基的连接紧密，不易挑取，菌落正反面的颜色和边缘与中心的颜色常不一致等。 9.培养基按化学成分、物理状态、用途划分可分为哪几种类型？ 答：化学成分：天然培养基、合成培养基、半合成培养基物理状态：固体培养基、半固体培养基、液体培养基用途：基础培养基、鉴别培养基、选择培养基 10.实验常用的凝固剂是哪一种？固体培养基、半固体培养基及液体培养基加凝固剂琼脂的量为多少？琼脂在什么温度下溶化？什么温度下凝固？ 答：常用凝固剂是琼脂，分别为1—2%，0.5% 96°C下融化，40°C凝固 11.配制培养基时应遵循哪些原则？配制培养基的一般方法和步骤是什么？配制培养基时不可用铜锅或铁锅，原因是什么？调pH一般用什么试剂调？配制pH低的琼脂培养基时，应怎样配制？ 答：原则：目的明确、营养协调、理化适宜、经济节约方法：生态模拟、参阅文献、精心设计、试验比较 用磷酸缓冲液和碳酸钙做调节剂 12.培养基分装时，液体分装高度以试管的多少为宜，三角瓶的多少为宜？固体分装高度以试管的多少为宜，三角瓶的多少为宜？半固体分装高度以试管的多少为宜？ 答：液体：试管高度的1\4,三角瓶的试管高度的1\2,固体：试管高度的1\5，三角瓶的1\2，半固体：试管高度的1\3 13.培养基灭菌时外用牛皮纸包扎的目的是什么？ 答：防止灭菌时冷凝水润湿棉塞 14.摆斜面的正确方法是什么？ 答：试管口搁在玻璃棒或其他合适高度的器具上，搁置的斜面长度以不超过试管总长的一半为宜。 15.棉塞的作用是什么？正确的棉塞要求是什么？棉塞的长度多少在管口外，多少在管内为
医学微生物学考试试卷(附答案)
医学微生物学考试试卷（A） (临床医学本科、影像医学本科、中医药学本科、实验技术本科、预防医学本科) 班级学号姓名 注意事项： 1．在试卷上写上姓名、班级。在答题卡上填上学号，将相应的数字涂黑，并写上班级、姓名和试卷类型（A卷/B卷）。交卷时必须将答题卡与试卷一起上交，否则以零分计算！ 2．本份试卷由基础知识题和病例分析题组成，共150个选择题，请按题目要求，在备选答案中选择一个最佳答案，并在答题卡上将相应的字母涂黑，做在试卷上无效。 3．考试时请严格遵守考场纪律，原则上不允许上厕所。 第一部分、Ａ型选择题 （由一题干和５个备选答案组成，请选出一个最佳答案。共90个选择题） 1.哪种疾病的病原体属于非细胞型微生物： A.疯牛病 B.梅毒 C.结核病 D.沙眼 E.体癣 2.细菌属于原核细胞型微生物的主要依据是: A.单细胞 B.二分裂方式繁殖 C.对抗生素敏感 D.有由肽聚糖组成的细胞壁 E.仅有原始核结构，无核膜 3.革兰阳性菌细胞壁： A.肽聚糖含量少 B.缺乏五肽交联桥 C.对溶菌酶敏感 D.所含脂多糖与致病性有关 E.有蛋白糖脂外膜 4.青霉素杀菌机制是: A.干扰细胞壁的合成 B.与核糖体50S亚基结合，干扰蛋白质合成 C.影响核酸复制 D.与核糖体30S亚基结合，干扰蛋白质合成 E.损伤细胞膜 5.有关“细菌鞭毛”的叙述，哪一项是错误的: A.与细菌的运动能力有关 B.许多革兰阳性菌和阴性菌均有鞭毛 C.在普通光学显微镜下不能直接观察到 D.可用于细菌的鉴定 E.将细菌接种在固体培养中有助于鉴别细菌有无鞭毛(半固体) 6.有关“芽胞”的叙述，错误的是: A.革兰阳性菌和阴性菌均可产生（都是阳性） B.不直接引起疾病 C.对热有强大的抵抗力 D.代谢不活跃 E.通常在细菌处于不利环境下形成 7.用普通光学显微镜油镜观察细菌形态时，总放大倍数为: A.10倍 B.100倍 C.400倍 D.900～1000倍 E.10000倍 8.脑膜炎奈瑟菌和肺炎链球菌经结晶紫初染、碘液媒染、95%乙醇脱色后，菌体分别呈: A.红色和紫色 B.紫色和紫色
环境工程微生物学试题
《环境工程微生物学》课程综合复习资料 一、填空题 1、我国大耜提出的六界分类系统为：、、、、、。 2、病毒的分类依据有多种,按照核酸分类，病毒可分为、。 3、细菌的原生质体包括，和三大部分。 4、根据古菌的生活习性和生理特性，古菌可分为、、三大类型。 5、在《伯杰氏系统细菌学手册》中，将古菌分为五大类群：、、、、。 6、放线菌的革兰氏染色反应：除为外，其余均为。 7、在废水生物处理中起重要作用的三种原生动物包括，和。作为指示生物，指示处理效果差的是和。 8、真菌中的、和在有机废水和有机固体废物的生物处理中都起着积极作用。 9、从化学组成来看，酶可分为和两类。 10、、、、四种元素是所有生物体的有机元素。 11、微生物最好的碳源是，尤其是、，它们最易被微生物吸收和利用。 12、环境工程微生物学中,根据形态特点，细菌可分为四种形态,即、、、。 13、按培养基组成物的性质不同，可把培养基分为、、。 14、好氧活性污泥的组成中，微生物成分主要是。 15、菌种复壮法有、、三种。 16、污水生物处理法很多，根据微生物与氧的关系分为和两类。 17、原生动物可划分为四个纲，即、、和。 18、在污废水生物处理中，原生动物和微型后生动物的作用体现在：、和。 19、现在普遍接受的五界分类系统为：、、、、。 20、部分细菌有特殊结构：、、、、和。 21、20世纪70年代开始在水平上研究生物的研究生物的进化和系统发育。沃斯以的相关性，将一类有别于细菌的、在特殊环境的单独列出，与细菌和真核生物并列于系统发育树中。 22、细胞质膜的化学组成包括、、。 23、微生物学家根据rRNA序列的不同，将所有细胞生物分为三大域，即、、。 24、根据专性宿主分类，病毒可分为、、、、、。
微生物学实验指导(10.10)
实验一显微镜的使用及细菌的革兰氏染色 一、实验目的和内容 （一）实验目的 1. 复习显微镜低倍镜和高倍镜的使用技术，了解油浸系物镜的基本原理，掌握油镜的使用方法。 2. 初步掌握细菌涂片方法及革兰氏染色的步骤 （二）实验内容 1．学习油浸系物镜的使用方法。 2．制作细菌染色装片。 3．进行革兰氏染色法操作。 4．用油镜观察大肠杆菌和苏云金杆菌染色装片。 二、实验原理 （一）油镜的基本原理 普通光学显微镜包括低倍物镜、高倍物镜和油镜3种物镜。油镜是一种高倍放大的物镜，一般都刻有放大倍数，如95×、100×等。油镜头上常刻有OI（Oil，Immersion）或HI（Homogeneous immersion）字样，有的还刻有一圈红线或黑线标记，而且油镜的镜身较高倍镜和低倍镜为长。在低倍物镜、高倍物镜和油镜3种物镜中，油镜的放大倍数和数值孔径（numberal aperture）最大，而工作距离最短（图3-1）。 图1-1 显微镜物镜参数图 显微镜的分辨率是指显微镜能分辨出物体两点间最小距离（D）的能力。D值愈小表明分辨率愈高。D值与光线的波长（λ）成正比，与物镜的数值孔径（NA）成反比.
从上式可看出，缩短光波长和增大数值孔径都可提高分辨率。数值孔径指光线投射到物镜上的最大角度（称镜口角，α）的一半正弦与介质折射率（n）的乘积。影响数值孔径大小的因数，一是镜口角，二是介质的折射率。 当镜与装片之间的介质为空气时，由于空气（n＝1.0）与玻璃（n＝1.52）的折射率不同，光线会发生折射，不仅使进入物镜的光线减少，降低了视野的照明度，而且会减少镜口角。当以香柏油（n＝1.515）为介质时，由于它的折射率与玻璃相近，光线经过载玻片后可直接通过香柏油进入物镜而不发生折射，不仅增加了视野的照明废，更重要的是通过增加数值孔径提高分辨率，因而可以使物像明亮清晰。 （二）革兰氏染色 革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家Christain Gram创立的，是细菌学中最重要的鉴别染色法，其原理是利用细菌的细胞壁组成成分和结构的不同。
微生物学实验报告格式
微生物学实验报告格式 专业学号 姓名 实验一、···培养基的配制和高压蒸汽灭菌 一、实验目的 二、实验原理 三、实验材料（实际用到哪些试剂、材料、玻璃器皿等都要写出，包括数量） 四、实验步骤（按照实际步骤填写,切忌抄袭） 五、注意事项（自己总结实验过程中的注意点） 六、思考题 1、简述培养基的配制原则？ 2.为什么湿热灭菌比干热灭菌法更有效？ 3.高压蒸汽灭菌时，为什么要先将灭菌锅锅内的冷空气完全排尽？ 实验二自生固氮菌的分离纯化 （这是个综合实验，请大家回顾三周来的所有操作步骤，将其整理成连贯完整的一份报告，注意每次实验的衔接，不要把其他的实验项目写进来，但也不要漏写该实验的相关步骤。） 一、实验目的 二、实验原理 三、实验材料（整个综合实验有涉及到的材料都要列出）
四、实验步骤（详叙每周所做的相关步骤） 五、注意事项（自己总结实验过程中的注意点） 六、思考题 1、划线分离时，为什么每次都要将接种环上多余的菌体烧掉？划线为何不能重叠？ 2、如何从自然界中分离自己所需要的纯培养？ 实验三平板培养测数法 一、实验目的 二、实验原理 三、实验材料（实际操作有涉及到的材料都要列出） 四、实验步骤（详叙相关步骤） 五、实验结果 六、注意事项（自己总结实验过程中的注意点） 七、思考题 1、平板菌落计数法中，为什么溶化后的培养基再冷却至45℃左右才能倒平板？ 2、本次实验是否成功？如果失败，试分析原因。 实验四简单染色 一、实验目的 二、实验原理 三、实验材料（包括菌种、染料、玻璃器皿） 四、实验步骤 五、实验结果（黏贴染色结果图片并描述所观察到的细菌的显微形态）
六、思考题 1、简单染色要获得成功，有哪些问题需要注意，为什么？ 实验五革兰氏染色 一、实验目的 二、实验原理 三、实验材料（包括菌种、染料、玻璃器皿） 四、实验步骤 五、实验结果（黏贴染色结果图片并判断自己分离到的菌种是G还是G+-？） 六、思考题 1、革兰氏染色要获得成功，有哪些问题需要注意，为什么？ 2、什么情况下会导致结果出现假阳性或假阴性？ 实验六放线菌的印片染色法 一、实验目的 二、实验原理 三、实验材料（包括菌种、染料、玻璃器皿） 四、实验步骤 五、实验结果（黏贴染色结果图片并描述放线菌的显微形态特征） 六、注意事项 微生物学实验报告格式
微生物学实验复习题及其答案
微生物学实验复习题 一、选择题 1、革兰氏染色得关键操作步骤就是: Ａ、结晶紫染色 B、碘液固定 C、酒精脱色 Ｄ、复染 2、放线菌印片染色得关键操作就是： A、印片时不能移动 B、染色 C、染色后不能吸干 D、A与C 3、高氏培养基用来培养： Ａ、细菌 B、真菌 C、放线菌 ４、肉汤培养基用来培养: A、酵母菌 B、霉菌 Ｃ、细菌 ５、无氮培养基用来培养: Ａ、自生固氮菌。 B、硅酸盐细菌 Ｃ、根瘤菌 D、A、Ｂ均可培养 E、Ａ、B、C 均可培养 ６、在使用显微镜油镜时,为了提高分辨力，通常在镜头与盖玻片之间滴加： A、二甲苯 B、水 C、香柏油 7、常用得消毒酒精浓度为： A、 7５％ Ｂ、 5０% C、 90％ 8、用甲醛进行空气熏蒸消毒得用量就是： A、 20ml/M3 B、 6ｍl/M3 C、１ml/M3 9、实验室培养基高压蒸汽灭菌得工艺条件就是： A、 1２１℃／30miｎ B、 115℃／３0mｉn C、130℃／3０min
1０、巴氏消毒得工艺条件就是： Ａ、６2-6３℃／30ｍiｎ Ｂ、71-72℃／15min C、Ａ、Ｂ、均可 1１、半固体培养基得主要用途就是: A、检查细菌得运动性 B、检查细菌得好氧性 C、 A、Ｂ、两项 １2、半固体培养基得琼脂加入量通常就是: A、 1% B、0、5％ C、0、1% 13、使用手提式灭菌锅灭菌得关键操作就是: A、排冷气彻底 Ｂ、保温时间适当 Ｃ、灭菌完后排气不能太快 D、A-C 1４、目镜头上得“K”字母表示: A、广视野目镜 B、惠更斯目镜 Ｃ、补偿目镜 1５、目镜头上得“P”字母表示: A、平场目镜 B、广视野目镜 C、平场补偿目镜 16、物镜头上得“PL”字母表示: A、正低相差物镜 B、正高相差物镜 C、负高相差物镜 17、物镜头上得“UVＦL”字母表示。 Ａ、无荧光物镜 B、照相物镜 Ｃ、相差物镜 18、镜头上标有“TC”字母得镜头就是: Ａ、相差调整望远镜 B、摄影目镜 C、相差目镜 １９、“ＰA”表示: A、马铃薯培养基 B、高氏培养基 C、肉汤培养基 20、无菌室空气灭菌常用方法就是： A、甲醛熏蒸 B、紫外灯照射
微生物学实验报告
微生物学实验报告 (格式标准) (生命科学专业) 教师:黎勇 目录索引 实验一油镜的使用与细菌的简单染色法 3 实验二细菌的革氏染色与芽孢染色 5 实验三常用培养基的配制7 实验四酵母菌霉菌的形态结构观察及酵母死活细胞的鉴别8 实验五、微生物大小的测定与显微计数10 实验六环境中微生物的检测与分离纯化11 实验七细菌鉴定中常用的生理生化反应12 实验八(综合实验)化能异养微生物的分离与纯化13 课程名称: 微生物学实验班级:化生系生命科学本科 实验日期: 指导教师:黎勇 实验一油镜的使用与细菌的简单染色法 〔目的要求〕学习并熟练掌握油镜的使用技术;观察细菌的基本形态;学习观察细菌的运动性的基本方法。 〔基本原理〕 1、 N·A=n·sinα 2、 D=λ/2N、A 3、目镜可提高放大倍数,但有效放大率取决于镜口率。已经分辨的物体不放大瞧不清,未分辨物放得再大也瞧不清。 4、用悬滴法或凹玻片法观察细菌的运动性时,可以通过真运动能定向地由一处快速运动来区别于颗粒的布朗运动。 〔器材用具〕显微镜、载玻片、凹玻片、盖玻片、接种环、香柏油、二甲苯、凡士林、吸水纸、擦镜纸;细菌、放线菌等固定装片;培养18小时左右的B、subtilis、 S、arueus 菌斜面培养物;无菌水、生理盐水。 〔方法步骤〕: (一) 油镜的使用 镜检装片在中倍(或高倍镜)下找到目的物,并使位于视野正中聚光镜上升到最高位置,虹彩光圈开到最大,镜头转开成八字形在玻片的镜检部位(光斑处)滴一滴香柏油油镜转入正下方侧视小心上升载物台(缩短镜头与装片距离,镜头浸入油中,至油圈不扩大为止镜头几与装片接触) 粗调器徐徐下降载物台(密切注视视野,当捕捉到物像时,立即用细调器校正) 仔细观察并绘图 取出装片,清洗油镜:擦镜纸拭去镜头上的香柏油擦镜纸沾少许二甲苯擦去残留(用手指辅助,迅速拭擦一、二次) 用清洁擦镜纸仔细擦干二甲苯(2-3次)。 (二) 细菌的简单染色法:涂片干燥火焰固定染色水洗干燥油镜观察 (三) 细菌运动性的观察取洁净盖玻片,四周涂上凡士林滴加一小滴菌悬液凹玻片的凹窝向下盖于盖玻片上翻转观察 〔结果分析〕 1、画一圆圈表示视野,选取所观察的微生物绘图,注意特殊结构、形状与排列。(描绘时按视野实际大小5－10倍绘制)
微生物学实验10 放线菌、酵母菌和霉菌的形态观察
南京大学生物技术系实验报告 题目放线菌、酵母菌和霉菌的形态观察 【一、实验目的】 1、通过菌落及细胞形态的观察和比较，掌握区分细菌、放线菌、酵母菌和霉 菌的要点。 2、掌握观察放线菌孢子的方法。 3、掌握观察霉菌孢子及根霉假根的方法。 4、了解酵母菌子囊孢子形成的方法。 【二、实验原理】 1、三类微生物菌落形态特征： 霉菌形态比细菌、酵母菌复杂，个体比较大，具有分枝的菌丝体和分化的繁殖器官。霉菌营养体的基本形态单位是菌丝，包括有隔菌丝和无隔菌丝。营养菌丝分布在营养基质的内部，气生菌丝伸展到空气中。营养菌丝体除基本结构以外，有的霉菌还有一些特化形态，例如假根、匍匐菌丝、吸器等。霉菌的繁殖体不仅包括无性繁殖体，例如分生孢子，孢子囊等，包裹其内或附着其上的有各类无性孢子；还包括有性繁殖结构，例如子囊果，其内形成有性孢子。在观察时要注意细胞的大小，菌丝构造和繁殖方式。 放线菌一般由分枝状菌丝组成，它的菌丝可分为基内菌丝(营养菌丝)、气生菌丝或有孢子丝三种。放线菌生长到一定阶段，大部分气生菌丝分化成孢子丝，通过横割分列的方式产生成串的分生孢子。孢子丝形态多样，有直、波曲、钩状、螺旋状、轮生等多种形态。孢子也有球形、椭圆形、杆状和瓜子状等等。它们的形态构造都是放线菌分类鉴定的重要依据。 酵母菌是单细胞的真核微生物，细胞核和细胞质有明且分化，个体比细菌大得多。酵母菌的形态通常有球状、卵园状、椭圆状、柱状或香肠状等多种。酵母菌的无性繁殖有芽殖、裂殖和产生掷孢子；酵母菌的有性繁殖形成子囊和子囊孢子。酵母菌母细胞在一系列的芽殖后，如果长大的子细胞与母细胞并不分离，就会形成藕节状的假菌丝。 2、三点接种法与霉菌菌落形态的观察 霉菌的菌落形态是分类鉴定的重要依据。为便于观察，通常用接种针挑
微生物学实验试题集
微生物学实验试题 一、选择题 1.革兰氏染色的关键操作步骤是： A.结晶紫染色 B.碘液固定 C.酒精脱色 D.复染 答:(C) 2.放线菌印片染色的关键操作是： A.印片时不能移动 B.染色 C.染色后不能吸干 D.A和C 答:(D) 3.高氏培养基用来培养： A.细菌 B.真菌 C.放线菌 答:(C) 111821.肉汤培养基用来培养: A.酵母菌 B.霉菌 C.细菌 答:(C) 111822.无氮培养基用来培养: A.自生固氮菌。 B.硅酸盐细菌 C.根瘤菌 D.A、B均可培养 E.A、B、C均可培养 答:(D) 111823.在使用显微镜油镜时，为了提高分辨力，通常在镜头和盖玻片之间滴加: A.二甲苯 B.水 C.香柏油 答:(C) 111824.常用的消毒酒精浓度为: A.75% B.50% C.90% 答:(A) 111825.用甲醛进行空气熏蒸消毒的用量是: A.20ml/M3 B.6ml/M3
111826.实验室培养基高压蒸汽灭菌的工艺条件是: A.121℃/30min B.115℃/30min C.130℃/30min 答:(A) 111827.巴氏消毒的工艺条件是: A.62-63℃/30min B.71-72℃/15min C.A.B.均可 答:(C) 111828.半固体培养基的主要用途是: A.检查细菌的运动性 B.检查细菌的好氧性 C.A.B.两项 答：(C) 111829.半固体培养基的琼脂加入量通常是: A.1% B.0.5% C.0.1% 答:(B)。 111830.使用手提式灭菌锅灭菌的关键操作是: A.排冷气彻底 B.保温时间适当 C.灭菌完后排气不能太快 D.A-C 答:(A)。 111831.目镜头上的“K”字母表示: A.广视野目镜 B.惠更斯目镜 C.补偿目镜 答:() 111832.目镜头上的“P”字母表示: A.平场目镜 B.广视野目镜 C.平场补偿目镜 答:() 111833.物镜头上的“PL”字母表示: A.正低相差物镜 B.正高相差物镜 C.负高相差物镜 答:() 111834.物镜头上的“UVFL”字母表示。 A.无荧光物镜 B.照相物镜
水处理微生物学实验指导书
水处理微生物学实验指导书 班级 姓名 学号 市政与环境工程学院 年月
目录 实验一显微镜、测微尺的使用及生物相的观察实验二革兰氏染色技术 实验三培养基的配制和灭菌 实验四水中细菌总数的测定
实验一显微镜、测微尺的使用及生物相的观察 一、实验目的与要求 （1）了解普通光学显微镜的构造与功能，学习与掌握显微镜观察微生物的方法。 （2）观察细菌、放线菌和蓝细菌的个体形态，学会绘制微生物的形态结构图。 二、显微镜的基本结构和功能 普通光学显微镜是一种精密的光学仪器。以往最简单的显微镜仅由几块透镜组成，而当前使用的显微镜由一套透镜组成。普通光学显微镜通常能将物体放大1500—2000倍。 （一）显微镜的构造 普通光学显微镜的构造可分为两大部分：一为机械装置，一为光学系统，这两部分很好的配合，才能发挥显微镜的作用。 1、显微镜的机械装置 显微镜的机械装置包括镜座、镜筒、物镜转换器、载物台、推动器、粗动螺旋、微动螺旋等部件。 （1）镜座镜座是显微镜的基本支架，它由底座和镜臂两部分组成。在它上面连接有载物台和镜筒，它是用来安装光学放大系统部件的基础。 （2）镜筒镜筒上接接目镜，下接转换器，形成接目镜与接物镜（装在转换器下）间的暗室。 从物镜的后缘到镜筒尾端的距离称为机械筒长。因为物镜的放大率是对一定的镜筒长度而言的。镜筒长度的变化，不仅放大倍率随之变化，而且成像质量也受到影响。因此，使用显微镜时，不能任意改变镜筒长度。国际上将显微镜的标准筒长定为160mm，此数字标在物镜的外壳上。 （3）物镜转换器物镜转换器上可安装3—4个接物镜，一般是三个接物镜（低倍、高倍、油镜）。Nikon显微镜装有四个物镜。转动转换器，可以按需要将其中的任何一个接物镜和镜筒接通，与镜筒上面的接目镜构成一个放大系统。 （4）载物台载物台中央有一孔，为光线通路。在台上装有弹簧标本夹和推动器，其作用为固定或移动标本的位置，使得镜检对象恰好位于视野中心。 （5）推动器是移动标本的机械装置，它是由一横一纵两个推进齿轴的金属架构成的，好的显微镜在纵横架杆上刻有刻度标尺，构成很精密的平面座标系。如果我们须重复观察已检查标本的某一部分，在第一次检查时，可记下纵横标尺的数值，以后按数值移动推动器，就可以找到原来标本的位置。（6）粗动螺旋粗动螺旋是移动镜筒调节接物镜和标本间距离的机件，老式显微镜粗螺旋向前扭，