CC趋化因子

CC趋化因子

趋化因子CC亚家族英文名称：chemokine CC subfamily其他名称：β亚家族定义：分子N端含2个相邻的Cys残基，有20余个成员，主要趋化和激活单核细胞和某些T细胞亚群，也可趋化活化B细胞、嗜酸性粒细胞、DC和NK细胞，对中性粒细胞无作用。

DC树突状细胞（Dendritic Cells,DC）是近年来倍受人们关注的专职抗原呈递细胞（Antigen presenting DC作用机制

Cells,APC），能摄取、加工及呈递抗原，启动T细胞介导的免疫反应。DC于1973年首次由Steinman和Cohn发现。其后的好长时间里，由于受当时生物学技术的限制，人们没办法在体外培育更多的树突状细胞，且价格昂贵，结果造成对它研究没能进一步深入下去。进入九十年代，人类在生物学技术方面取了长足进步，能够在体外培养树突状细胞了，对DC的研究也就有了突破性的进展。二十世纪末美国率先开始在人体上进行树突状细胞免疫治疗肿瘤的试验。其结果令人倍受鼓舞。接着而来的是：树突状细胞成了肿瘤生物治疗的明星，也成了全世界与癌症奋斗的科学家们研究的热点。进入21世纪，国内外科

学家发现DC在治疗哮喘等疾病中起到了很重要的作用。树突状细胞就是人体免疫系统的哨兵，它能敏锐的捕捉肿瘤细胞与正常细胞那微小的差异，并把这种差异传递给人体免疫系统中的武警——T淋巴细胞，让T淋巴细胞接受到识别叛乱分子的办法和作战命令，迅速由静息状态转化为战斗状态，将人体内残存的、转移的癌细胞全部、彻底地消灭干净。并且T细胞免疫还有记忆能力，也就是说人的一生中再有同样的癌细胞产生，人体的免疫系统就会马上把癌细胞给干掉。所以树突状细胞免疫治疗又被称为治疗性疫苗（和我们日常用的预防性疫苗相对而言）。

一、NK细胞的来源

NK细胞确切的来源还不十分清楚，一般认为直接从骨髓中衍生，其发育成熟依赖于骨髓的微环境。小鼠和人的体外实验表明，胸腺细胞在体外IL-2等细胞因子存在条件下培养也可诱导出NK细胞。小鼠脾脏在体内IL-3诱导下可促进NK细胞的分化。NK细胞主要分布于外周血中，占PBMC5～10%，淋巴结和骨髓中也有NK活性，但水平较外周血低。由于NK细胞具有部分T细胞分化抗原，如80～90%NK细胞CD2+，20～30%NK细胞CD3+(表达CD3ζ链)，30%NK细胞CD8+(α/α)和75～90%NK细胞CD38+,而且NK细胞具有IL-2中亲

和性受体，在IL-2刺激下可发生增殖反应,活化NK细胞可产生IFN-γ，因此一般认为NK细胞与T细胞在发育上关系更为密切。

编辑本段二、NK细胞的表型

与T细胞、B细胞相比，NK细胞表面标志的特异性是相对的。人NK细胞mIg-,部分NK细胞CD2、CD3和CD8阳性，表达IL-2

受体β链(P75,CD122)，CD11b/CD18阳性。目前常用检测NK细胞的标记有CD16、CD56、CD57、CD59、CD11b、CD94和LAK-1(见表7-10)。最近发现的一种稳定表达在NK和LAK 细胞表面的LAK-1分子，120kDa，NK细胞在IL-2条件下培养20天LAK-1仍为阳性，而HNK-1(CD57)和CD16部分消失。LAK的杀伤活性可被抗LAK-1McAb所抑制。表7-10检测人NK细胞常用的标志表7-11NK细胞和其它细胞毒效应细胞的表面标志(%)

编辑本段三、NK细胞的活化

NK细胞可通过多种途径被活化，包括膜表面的CD2、CD3分子和多种细胞因子。 1.通过CD3分子的ζ链NK细胞不表达TCR/CD3复合物，但部分NK细胞表达CD3ζ链，当用CD16抗体刺激NK细胞活化时，ζ链发生酪氨酸磷酸化，引起胞浆内Ca??2+?浓度升高，IP3水平增加，促进细胞因子合成和ADCC作用。 2.通过CD2分子CD2与CD58相互作用或用CD2McAb刺激可活化NK细胞，

CD3ζ链发生酪氨酸磷酸化。 3.自然杀伤细胞刺激因子自然杀伤细胞刺激因子(natural killer cell stimulatory factor,NKSF)对NK细胞有刺激作用。IL-2、IL-12、IFN-α、TNF-α以及白细胞调节素(leukoregulin,LR)对NK细胞的活化和分化有正调节作用，体外培养时加入上述细胞因子可明显提高NK的杀伤活性。前列腺素(PG)E1、E2、D2和肾上腺皮质激素等对NK细胞的活性有抑制作用。NK 细胞表面具有IL-2中亲和性受体，IL-2诱导NK的杀伤活性约需18～24小时。此外，IL-2还可诱导NK细胞的增殖，一般在刺激后3～4天开始发生增殖，其机理为IL-2可诱导NK细胞表达IL-2Rα链，新表达的α链与原先细胞表面的β链和γ链结合形成高亲和性受体,在IL-2存在下刺激NK细胞发生增殖。IL-2诱导NK细胞的活性机理尚不清楚，可能与增加细胞粘附分子的表达，提高对NK抵抗靶细胞的杀伤活性有关，还可能增加NK细胞胞浆中的颗粒以及丝氨酸酯酶mRNA 的表达，活化和促进杀伤介质的杀伤作用。

编辑本段四、NK细胞的功能

(一)自然杀伤活性

由于NK细胞的杀伤活性无MHC限制，不依赖抗体，因此称为自然杀伤活性。NK细胞胞浆丰富，含有较大的嗜天青颗粒，颗粒的含量与NK细胞的杀伤活性呈正相关。NK细胞作用于靶细胞后杀伤作用出现早，在体外1小时、体内4小时即可见到杀伤效应。NK细胞的靶细胞主要有某些肿瘤细胞(包括部分细胞系)、病毒感染细胞、某些自身组织细胞(如血细胞)、寄生虫等，因此NK细胞是机体抗肿瘤、

抗感染的重要免疫因素，也参与第Ⅱ型超敏反应和移植物抗宿主反应。

1.识别靶细胞NK细胞识别靶细胞是非特异性的，这与CTL识别靶细胞机理不同，但确切的机理尚未明了。现已知淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)与靶细胞表面

的细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的作用参与NK 细胞的识别过程，抗LFA-1或抗ICAM-1McAb可抑制NK细胞的杀伤活性。此外CD2与LFA-3(CD58)结合以及CD56也可能介导NK细胞与靶细胞的结合。有关白细胞分化抗原和粘附分子分别参见第一章和第二章。 2.杀伤介质主要有穿孔素、NK细胞毒因子和TNF等。

(1)穿孔素:穿孔素是一种由NK、CTL、LAK等杀伤细胞胞浆颗粒释放的杀伤靶细胞的介质，有关穿孔素的结构和功能参见本章第二节。从胞浆颗粒中纯化的穿孔素在体外能溶解多种肿瘤细胞，抗穿孔素抗体可抑制杀伤活性。IL-2可提高穿孔素基因的转录。IL-6可以促进IL-2对穿孔素基因转录的诱导作用。丝氨酸酯酶可能有活化穿孔素的作用。

(2)NK细胞毒因子:NK细胞可释放可溶性NK细胞毒因子(NK cytotoxic factor,NKCF),靶细胞表面有NKCF受体，NKCF与靶细胞结合后可选择性杀伤和裂解靶细胞。(3)TNF:活化的NK细胞可释放TNF-α和TNF-β(LT)，TNF通过①改变靶细胞溶酶体的稳定性，导致多种水解酶外漏；②影响细胞膜磷脂代谢；③改变靶细胞糖代谢使组织中pH

降低；④以及活化靶细胞核酸内切酶，降解基因组DNA从而引起程序性细胞死亡等机理杀伤靶细胞。TNF引起细胞死亡过程要明显慢于穿孔素溶解细胞的作用过程。表7-12人和小鼠NK敏感和不敏感靶细胞

(二)ADCC

(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity)表7-13NK细胞产生的细胞因子NK细胞表面具有FcγRⅢA,主要结合人IgG1和IgG3的Fc段(Cγ2、Cγ3功能区),在针对靶细胞特异性IgG抗体的介导下可杀伤相应靶细胞。IL-2和IFN-γ明显增强NK细胞介导的ADCC作用。以前认为在淋巴细胞中由K细胞介导ADCC,但至今仍未发现K细胞特异的表面标记,也不能证实K细胞是否属于一个独立的细胞群，很可能NK是介导ADCC的一个主要淋巴细胞群。具有ADCC 功能的细胞群除NK外，还有单核细胞、巨噬细胞、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞。

(三)分泌细胞因子

活化的NK细胞可合成和分泌多种细胞因子，发挥调节免疫和造血作用以及直接杀伤靶细胞的作用。此外，NK细胞可抑制PWM 体外诱导B细胞的分化及抗体应答，其机理可能通过直接抑制B细胞或抑制辅佐细胞的抗原提呈作用。NK细胞通过自然杀伤和ADCC 发挥的细胞毒作用，在机体抗病毒感染、免疫监视中起重要作用。(1)抗病毒感染:NK可选择性地杀伤病毒感染的靶细胞。由辅佐细胞或NK细胞所产生的IFN可协同NK的抗病毒作用，而对正常细胞有

保护作用。另一方面，病毒感染细胞表面的病毒抗原和其它表面分子使得其对NK的杀伤细胞作用变得更加敏感。在体外，NK可溶解疱疹病毒、牛痘病毒、麻疹病

毒、腮腺炎病毒、巨细胞病毒和流感病毒感染的靶细胞。体内试验表明，NK低活性小鼠品系对某些病毒感染更加敏感；注射抑制NK细胞的抗Asialo GM1抗体可加重小鼠流感病毒性肺炎。此外，NK细胞在体外还可杀伤某些细菌、真菌、原虫等，可能与NK细胞释放某些杀伤介质有关。(2)NK细胞在免疫监视、杀伤突变的肿瘤细胞可能比T细胞具有更重要的作用。某些疾病如Chediak-Higashi或X性联淋巴增殖综合征患者，由于NK功能缺陷对恶性淋巴细胞增殖疾病特别易感。(3)参与骨髓移植后移植物抗白血病效应(graft-versus-leukemia effect,GVL):在体外NK细胞可杀伤某些淋巴样和髓样白血病细胞。骨髓移植后数周内，来自供体的NK细胞在PBL中占相当高的比例。此外，在体内NK细胞还可杀伤某些不成熟细胞如骨髓干细胞、胸腺细胞亚群等。