胰酶胶原酶的配制
胰酶-EDTA的配制
1、专用PBS缓冲液配方：
1000mlPBS: 7.000g NaCl
1.100g Glucose·H2O 或 1.000g Glucose
0.3700g KCl
0.2g Na2PO4H
3.000g Tris
0.2400g KH2PO4
0.4000g EDTA
超纯水1000ml
所有试剂全部为细胞培养专用sigma试剂。
0.0010g 酚红
5ml PS
2.5g 胰酶（HyClone 胰蛋白酶1:250 SH30848.018）
2、配制步骤：
1）所用容器先泡酸12小时，后用自来水洗至无色后用蒸馏水洗净，再用超纯水洗三遍，最后高压灭菌，烘干。
2）将缓冲液配好后高压灭菌，同时洗好的广口瓶灭一瓶超纯水备用。
3）加入5ml双抗（PS）。
4）以灭菌的超纯水补足高压过程中损失的水分定容至1000ml。
5）转移到1L的试剂瓶中，加入酚红（0.0010g）。
6）调PH至7.2-7.4。
7）低温冰浴中溶解Tryspin2.5g.混匀。此过程避免产生气泡，否则将损失酶活性。8）在细胞间里用0.22um的滤膜过滤，分装入灭菌的50ml或1.5ml离心管中。
此过程避免产生气泡，否则将损失酶活性。-20℃保存。
9）不可反复冻存。每次解冻后4℃保存，并在短期内用完。
3、注意事项：
1）整个分装过程在无菌条件下进行。
2）机械搅拌对酶是一种冲击，如果起沫酶就变性了。低温可防止酶失活。
3）加入的EDTA可以络合细胞外基质中的Ca2+ ，增加消化效力。
4）在调节PH时一定要注意保护探头，防止损伤电极。
5）分装时不要太满，防止冻存后体积增大而溢出。50ml离心管装45ml左右，1.5ml离心管装1.4ml左右。
6）分装后的胰酶尽快转移到-20℃冰箱中冻存。
0.25%胰酶（无EDTA）的配制
1、250ml胰酶配制方法
Tryspin 0.625g
PS 2.5ml
苯酚红0.1g
所有试剂全部为细胞培养专用sigma试剂。
2、实验步骤
1）实验之前将所用试剂瓶泡酸12小时自来水清洗至无色后再用超纯水冲洗并进行高压灭菌。
2）按前面要求准确称取所需试剂，在容量瓶中用0.01M PBS定容至250ml。3）调节PH至7.4。
4）将所配制的胰酶在细胞间用0.22um的过滤器过滤并分装。
3、注意事项
1）在溶解、分装和过滤过程中要轻轻混匀，避免产生气泡。否则酶的活性会受到影响。
2）为保持酶的活性，应尽量在低温下操作。
3）胰酶配好后应避免反复冻融。因此在过滤后将其分装到1.5ml离心管中。
胶原酶的配制方法
1、50ml体系配方组成
Collagenase（Sigma c5138）100mg
PS 500ul
Hank's平衡培养液49.5ml
2、配制步骤
1）向装有100mg Collagenase的试剂瓶中加入1-2ml配制好的Hank's +PS使胶原酶溶解。反复轻轻颠倒几下，但要注意观察管盖上的粉末是否也充分溶解。2）12000rpm,离心20s，轻轻将其转移到Hank's +PS中。
3）反复洗涤试剂管以保证完全转移。
3、注意事项
1）避免操作过程中产生气泡，防止酶失活。
2）低温操作。
3）避免反复冻融。
常用溶液配制方法
一.常用贮液与溶液 1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。 10mg/ml牛血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无DNA酶）于9.5ml水中（为减少变性， 须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存于-20℃。或转移100mg的二硫苏糖醇 至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。 8mol/L乙酸钾（potassium acetate）：溶解78.5g乙酸钾于足量的水中，加水定容到100ml。 1mol/L氯化钾（KCl）：溶解7.46g氯化钾于足量的水中，加水定容到100ml。 3mol/L乙酸钠（sodium acetate）：溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml 水中，用冰乙酸调溶液的pH至5.2，再加水定容到100ml。 0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三钠盐。或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。 1mol/L HEPES：将23.8gHEPES溶于约90ml的水中，用NaOH调pH （6.8-8.2），然后用水定容至100ml。 1mol/L HCl：加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。 25mg/ml IPGT：溶解250mg的IPGT（异丙基硫代-β-D-半乳糖苷）于10ml 水中，分成小份贮存于-20℃。 1mol/LMgCl2:溶解20.3g MgCl2·6H2O于足量的水中，定容到100ml。
溶液配制及浓度计算
化验分析数据处理及结果计算 本章教学目的： 1、了解分析化学常用计量单位。 2、掌握化学分析中常用的溶液浓度表示方法。 3、掌握分析化学计算基础。 4、掌握可疑值概念，分析数据的取舍方法4d、Q检验法、Grubbs法，它们的特点及相互关系。 5、理解平均值精密度的表示方法，平均值的置信区间。 教学重点与难点：溶液浓度表示方法；滴定分析结果计算；可疑数据的取舍。 教学内容： 第一节分析化学中的计量关系 一、法定计量单位 什么是法定计量单位？ 法定计量单位：由国家以法令形式规定使用或允许使用的计量单位。 我国的法定计量单位：以国际单位制单位为基础，结合我国的实际情况制定。 国际单位制SI—International System of Units 简单介绍SI基本单位。 二、分析化学中常用法定计量单位 1、物质的量：用符号n B表示，单位为摩尔（mol）。 规定：1mol是指系统中物质单元B的数目与0.012kg碳-12的原子数目(6.02×1023)相等。 物质基本单元：可以是原子、分子、离子、电子及其它粒子和这些粒子的特定组合。 例如：H2O为基本单元，则0.018kg水为1mol水。
H2SO4为基本单元，则0.098kg H2SO4为1mol。 1/2 H2SO4为基本单元，则0.098kg H2SO4为2mol 由此可见：相同质量的同一物质，由于所采用基本单元不同，其物质的量也不同。表示方法：1 mol H其质量为1.008g； 1 mol H2其质量为2.016g； 1 mol 1/2Na2CO3其质量为53.00g； 1 mol1/5 KMnO4其质量为31.60g。 2、质量（m）：单位为千克（kg）；克（g）；毫克（mg）；微克（μg）。 1kg = 1000g = 1×106mg = 1×109μg 3、体积（V）：单位为米3（m3） 分析化学中：升（L）；毫升（ml）；微升（μl）。 1m3 = 1000L = 1×106ml = 1×109μl 4、摩尔质量（M B）：单位为千克/摩（kg/mol），常用g/mol表示。 m M B= n B 介绍p185页表5-7，常用物质的摩尔质量。 5、摩尔体积（V m）：单位为m3/mol；常用L/mol。 理想气体：22.4L/mol 。 v V m= n B 6、密度（ρ）：kg/m3；g/cm3；g/ml。 7、元素的相对原子质量（Ar） 指元素的平均原子质量与12C原子质量的1/12之比。 8、物质的相对分子质量（Mr），即以前的分子量。 指物质的分子或特定单元平均质量与12C原子质量的1/12之比 三、分析化学计算基础 四、溶液浓度表示方法 1、物质的量浓度 物质的量浓度= 物质的量/混合物的体积
常用标准溶液配制方法
常用标准溶液配制方法
1
2一般规定 本标准中所用的水，在没有注明其他要求时，应符合GB6682中三级水的标准。 本标准中所用试剂的纯度应在分析纯以上。 工作中所用的分析天平的砝码、滴定管、容量瓶及移液管均需定期校正。 本标准中标定时所用的基准试剂为容量分析工作基准试剂；制备标准溶液是所用的试剂为分析纯以上试剂。 本标准中所制备的标准溶液的浓度均指20c 时的浓度。在标定和使用时，如温度有差异，应只能附录A（补充件）补正。 “标定”或“比较”标准溶液浓度时，平行试验不得少于8次，两人各作4平行，每人4平行测定结果的极差与平均值之比不得大于0.1%。两人测定结果的差值与平均值之比不得大于0.1%，最终取两人测定结果的平均值。浓度值取四位有效数字。 本标准中凡规定用“标定”和“比较”两种方法测定浓度时，不得略去其中的任何一种，且两种方法测得的浓度值之差值与平均值之比不得大于0.2%，最终以标定结果为准。
制备的标准溶液与规定浓度之差不得超出规定浓度的+—5%。。 配制浓度等于或低于0.02mol/L 标准溶液时乙二胺四乙酸二钠标准滴定溶液除外，应于临用前将浓度高的标准溶液用煮沸并冷却的水稀释，必要时重新标定。 碘量法反应时，溶液的温度不能过高，一般在15~20c之间进行滴定。 滴定分析（容量分析）用标准溶液在常温（15~25）下，保存时间一般不得超过两个月。 3标准溶液的制备和标定 4.1 氢氧化钠标准溶液（使用期：2个月） c(NaOH) = 1 mol/L c(NaOH) =0.5 mol/L c(NaOH) =0.1 mol/L 4.1.1 配制 称取110g氢氧化钠，溶于100ml无二氧化碳的水中，摇匀，注入聚乙烯容器中，密闭放置至溶液清亮。用塑料管吸下述规定体积的上层清夜，用无二氧化碳的水稀释至1000ml，摇匀。 c(NaOH) ，mol/L 氢氧化钠饱和溶
胰酶配制
胰酶配制 一、器材与试剂： 干粉型培养基、胰蛋白酶、青霉素、链霉素、纯净水系统、电子天平、PH计、磁力搅拌器。 具体步骤： (1)水的制备： 细胞培养用水必须非常纯净，不含有离子和其他的杂质。需要用新鲜的双蒸水、三蒸水或纯净水。 (2)PBS的制备与消毒（也可用于其它BSS，如：Hanks，D-Hanks液的配制）：1、溶解定容：将药品（NaCl 8.0g，KCl 0.2g，Na2 HPO4 ?H2 O 1.56g，KH2 PO4 0.2g ） 倒入盛有双蒸水的烧杯中，玻璃棒搅动，充分溶解，然后把溶液倒入容量瓶中准确定容至1000ml，摇匀即成新配制的PBS溶液。 2、移入溶液瓶内待消毒：将PBS倒入溶液瓶（大的吊针瓶）内，盖上胶帽，并插上针头放入高压锅内8磅消毒20分钟。注意高压消毒后要用灭菌蒸馏水补充蒸发掉的水份。 (3) 胰蛋白酶溶液的配制与消毒： 胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关，在pH为8.0、温度为37℃时，胰酶溶液的作用能力最强。使用胰酶时，应把握好浓度、温度和时间，以免消化过度造成细胞损伤。因Ca2+ 、Mg2+ 和血清、蛋白质可降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液时应选用不含Ca2+ 、Mg2+ 的BSS，如：D-Hanks液。终止消化时，可用含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶对细胞的作用。 1、称取胰蛋白酶：按胰蛋白酶液浓度为0.25％，用电子天平准确称取粉剂溶入小烧杯中的双蒸水（若用双蒸水需要调PH到7.2左右）或PBS（D-hanks）液中。搅拌混匀，置于4℃内过夜。 2、用注射滤器抽滤消毒：配好的胰酶溶液要在超净台内用注射滤器（0.22微米微孔滤膜）抽滤除菌。然后分装成小瓶于20℃保存以备使用。
试液配制方法
中国药典附录试液配制方法 乙醇制氢氧化钾试液可取用乙醇制氢氧化钾滴定液（0.5mol/L）。（见滴定液配制、标化、复标操作规程） 9～11g，即得。本液应置乙醇制氨试液取无水乙醇，加浓氨试液使100ml中含NH 3 橡皮塞瓶中保存。 二乙基二硫代氨基甲酸银试液取二乙基二硫代氨基甲酸银0.25g，加氯仿适量与三乙胺1.8ml，加氯仿至100ml，搅拌使溶解，放置过放，用脱脂棉滤过，即得。本液应置棕色玻璃瓶内，密塞，置阴晾处保存。 二硝基苯肼乙醇试液取2,4-二硝基苯肼1g，加乙醇1000ml使溶解，再缓缓加入盐酸10ml，摇匀，即得。 二硝基苯肼试液取2,4-二硝基苯肼1.5g，加硫酸溶液（1→2）20ml，溶解后，加水使成100ml，滤过，即得。 三氯化铁试液取三氯化铁9g，加水使溶解成100ml，即得。 三氯化铝试液取三氯化铝1g，加乙醇使溶解成100ml，即得。 三氯化锑试液本液为三氯化锑饱和的氯仿溶液。 水合氯醛试液取水合氯醛50g，加水15ml与甘油10ml使溶解，即得。 甘油醋酸试液取甘油、50%醋酸与水各等份，混合，即得。 甲醛试液取用“甲醛溶液”。 四苯硼钠试液取四苯硼钠0.1g，加水使溶解成100ml，即得。 对二甲氨基苯甲醛试液取对二甲氨基苯甲醛0.125g，加无氮硫酸65ml与水35ml 的冷混合液溶解后，加三氯化铁试液0.05ml，摇匀，即得。本液配制后7日即不适用。 亚铁氰化钾试液取亚铁氰化钾1g，加水10ml使溶解，即得。本液应临用新制。 亚硝酸酸钠乙醇试液取亚硝酸钠5g，加60%乙醇使溶解成1000ml，即得。 过氧化氢试液取浓过氧化氢溶液（30%）、加水稀释成3%的溶液，即得。 苏丹Ⅲ试液取苏丹Ⅲ0.01g，加90%乙醇5ml溶解后，加甘油5ml，摇匀，即得。本液应置棕色的玻璃瓶内保存，在2个月内应用。 吲哚醌试液取αβ吲哚醌0.1g，加丙酮10ml溶解后，加冰醋酸1ml，摇匀，即得。 钌红试液取10%醋酸钠溶液1～2ml，加钌红适量使呈酒红色，即得。本液应临用新制。 间苯三酚试液取间苯三酚0.5g，加乙醇使溶解成25ml，即得。本品应置玻璃塞瓶内，在暗处保存。 间苯三酚盐酸试液取间苯三酚0.1g，加乙醇1ml，再加盐酸9ml，混匀。临用时新制。 茚三酮试液取茚三酮2g，加乙醇使溶解成100ml，即得。 变色酸试液取变色酸钠50mg，加硫酸与水的冷混合液（9∶4）100ml使溶解，即得。本液应临用新制。 草酸铵试液取草酸铵3.5g，加水使溶解成100ml，即得。 茴香醛试液取茴香醛0.5ml，加醋酸50ml使溶解，加硫酸1ml，摇匀，即得。本液应临用新制。
实验室常用溶液的配制
实验室常用溶液的配制 1．30%丙烯酰胺溶液（100ml） 【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N,N'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的蒸馏水中。加热至37℃溶解之，补加水至终体积为100ml。用Nalgene滤器（0.45μm孔径）过滤除菌，查证该溶液的pH值应不大于7.0，置棕色瓶中保存于4℃温度。 【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收，其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为它还可能会含有少量未聚合材料。一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子，在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂（MB-1Mallinckrodt），搅拌过夜，然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之。在贮存期间，丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸，因此大于1年的溶液应该被丢弃。 2．40%丙烯酰胺（用于DNA测序，1L） 【配制方法】把380g丙烯酰胺（DNA测序级）和20g N,N'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml 的蒸馏水中。继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理，但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为1L。置棕色瓶中保存于室温。 【注意】见上述配制30%丙烯酰胺的说明，40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定。 3．0.1mol/L腺苷三磷酸（ATP）溶液（1ml） 【配制方法】在0.8ml蒸馏水中溶解60mg ATP，用0.1mol/L NaOH调至pH值至7.0，用蒸馏水稀释1ml 【注意】分装成小份保存于-70℃ 4．10mol/L乙酸铵溶液（1L） 【配制方法】把770g乙酸铵溶解于800ml蒸馏水中，加水稀释至1L后过滤除菌。在4°C 储存。 【注意】乙酸铵是热不稳定的。不要高压灭菌。 5．10%过硫酸铵溶液（10ml） 【配制方法】把1g过硫酸铵溶于8ml蒸馏水中，用蒸馏水补足体积至10ml。该溶液可在4℃保存数周。 6．1mol/L CaCl2溶液（200ml） 【配制方法】称取54g CaCl2·6H2O并溶解在170ml蒸馏水中，用蒸馏水补足体积至200 ml。用0.22μm滤器过滤除菌，分装成10ml小份贮存于-20℃。 【用法】制备感受态细胞时，将等分试样解冻，用蒸馏水稀释至100ml。通过Nalgene过滤器（0.45微米）过滤除菌，并在使用前冷却至0℃。 7．2.5mol/L CaCl2溶液（20ml） 【配制方法】称取13.5g CaCl2·6H2O并溶于15ml蒸馏水中，用蒸馏水补足体积至20ml。用0.22μm滤器过滤除菌，分装成1ml小份贮存于-20℃。 8．脱氧核苷三磷酸（dNTPs）溶液 【配制方法】把每一种dNTP溶解于水至浓度各为100mmol/L左右，用微量移液器吸取0.05mol/l Tris碱分别调节每一dNTP溶液的pH值7.0（用pH试纸检测），把中和后的每种 dNTP的实际浓度。
液体配制及实验方法
（一）液体配制 1.完全培养基 DMEM+10%FBS+1%双抗+（1%HAPS液） 若放置时间长于2周加1%谷氨酰胺 2.PBS 1000ml去离子水中溶解8.0gNaCl、0.2gKCl、2.89gNa2HPO4、0.26gNaH2PO4 3.胰酶 用之前调节PH值至7.6 4.CaCl2 将0.165gCaCl2粉末溶于10ml去离子水中配制成50X的溶液 每5ml胶原酶中加入100μl CaCl2溶液（终浓度3μmol/L）用于激活胶原酶的活性 5.双抗 终浓度：青霉素100万U/100ml 链霉素100万U/100ml 青霉素0.6μg为1个单位链霉素 1.2195μg为一个单位 称取青、链霉素粉末各0.6、1.2195g溶于10mlPBS中再定容至100ml 6.两性霉素B 100mg两性霉素B粉末溶于40mlPBS中，制成浓度为2.5mg/ml(1000X)的浓缩液 每100ml完全培养基中加入100μl 浓缩液，稀释为终浓度2.5μg/ml 7.细胞冻存液 20%DMSO+80%FBS(1mlDMSO+4mlFBS) 8STZ溶液 STZ溶于柠檬酸和柠檬酸三钠的盐溶液中 称取柠檬酸0.105g溶于5mlPBS 称取柠檬酸三钠0.145g溶于5mlPBS中混合两者制成10毫升的溶解液. 再将100mgSTZ粉末溶于该溶解液中制成浓度1%的STZ溶液，调节PH值至4.5，4°避光保存，由于STZ水溶性不稳定，溶液最好在半小时内使用完毕. 9油红O 原液：油红O 0.6g溶于异丙醇（99% ）100ml 。 稀释液：油红O 原液20ml ，蒸馏水20ml ，过滤后使用。 10茜素红 称取0.1g茜素红粉溶于100mlPBS，调节PH值到7.2，过滤后使用.
溶液配制步骤
一．用容量瓶配制溶液所用仪器： 1、烧杯、容量瓶、玻璃棒、胶头滴管、托盘天平、分析天平、药匙（固体溶质使用）、移液管（液体溶质使用） 2、容量瓶 1.构造： 磨口、细颈、梨形平底 2.特点： ① 容量瓶上注明温度和容积。② 容量瓶颈部有刻度线。 3.使用范围：专门用来配制一定体积、一定物质的量浓度的溶液。 4.注意事项：① 使用前先检漏。 ② 不可装热或冷的液体。③ 不能用来溶解固体物质或存放液体或进行化学反应。 3、使用容量瓶六忌：一忌用容量瓶进行溶解（体积不准确），二忌直接往容量瓶倒液（会洒到外面）；三忌加水超过刻度线（浓度偏低）；四忌读数仰视或俯视（仰视浓度偏低，俯视浓度偏高）；五忌不洗涤玻璃棒和烧杯（浓度偏低）；六忌标准溶液存放于容量瓶（容量瓶是量器，不是容器）。 二．用容量瓶配制溶液的步骤： 全过程有计算，称量，溶解，冷却，转移，洗涤，定容，摇匀/装瓶八个步骤 八字方针：计，量，溶，冷，转，洗，定，摇 以0.1mol/LNaCO 3溶液500ml 为例说明溶液的配制过程 1.计算：NaCO 3物质的量＝0.1mol/L ×0.5L ＝0.05mol ，由NaCO 3摩尔质量106g/mol, 则NaCO 3质量＝0.05mol ×106g/mol=5.3g 2.称量：用分析天平称量5.300g ，注意托盘天平、分析天平的使用。 3.溶解：在烧杯中用100ml 蒸馏水使之完全溶解，并用玻璃棒搅拌（注意：应冷却，不可在容量瓶中溶解） 4.转移，洗涤：把溶解好的溶液移入500ml 容量瓶，，由于容量瓶瓶口较细，为避免溶液洒出，同时不要让溶液在刻度线上面沿瓶壁流下，用玻璃棒引流。为保证溶质尽可能全部转移到容量瓶中，应该用蒸馏水洗涤烧杯和玻璃棒二、三次，并将每次洗涤后的溶液都注入到容量瓶中。轻轻振荡容量瓶，使溶液充分混合。（用玻璃棒引流） 5.定容：加水到接近刻度2-3厘米时，改用胶头滴管加蒸馏水到刻度，这个操作叫定容。。定容时要注意溶液凹液面的最低处和刻度线相切，眼睛视线与刻度线呈水平，不能俯视或仰视，否则都会造成误差 6.摇匀：定容后的溶液浓度不均匀，要把容量瓶瓶塞塞紧，用食指顶住瓶塞，用另一只手的手指托住瓶底，把容量瓶倒转和摇动多次，使溶液混合均匀。这个操作叫做摇匀。 7.贴上标签：把定容后的Na 2CO 3溶液摇匀。把配制好的溶液倒入试剂瓶中，盖上瓶塞，贴上标签。 问题：在配制溶液的过程中哪些操作可能引起溶液浓度的误差？ 三．过程分析： 根据 ，引起误差的原因就在“溶质n B ”和“溶液体积V ”是否准确，所以引起误差的可能有： 一. 固体药品的称量与液体药品的量取是否准确。 二. 溶于水放热或吸热的试剂，溶解后未冷却会引起溶液体积偏差，使所配溶液浓度出现误差。 c B == n B ￣ V
常用溶液的配制方法
常用溶剂的配制方法 1.磷酸缓冲液： 0.15M，pH=7.4磷酸缓冲液： KH2PO4：2.041g+100ml水K2HPO4·3H2O：10.3g+300mL水 两液混合即成400mL，0.15M，pH=7.4的磷酸缓冲液 0.2mol/L 不同pH的磷酸缓冲液：先配制0.2 mol/L的磷酸二氢钾溶液和0.2 mol/L的磷酸二氢钾溶液，然后按下表配制：
2.硼酸缓冲液 0.15M，pH=8.2硼酸缓冲液： 四硼酸钠溶液：2g+35 mL水硼酸溶液：3.246g硼酸+350 mL水 两液混合即成700 mL，0.15M，pH=8.2的硼酸缓冲液 0.2 mol/L（硼酸根），不同pH的硼酸缓冲液：先配制0.2 mol/L的硼酸溶液和0.05 mol/L的四硼酸钠溶液，然后按下表配制： 3.甘氨酸-盐酸缓冲液：0.2 mol/L 0.2 mol/L甘氨酸溶液（15.01g/L）
4.柠檬酸缓冲液：0.1mol/L C6H8O7·H2O:0.1mol/L 溶液为21.01g/L Na3C6H5O7·2H2O：0.1mol/L溶液为29.41g/L
5.Tris-HCl缓冲液：0.1mol/L 100mL0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与一定量的0.1mol/L盐酸混匀，可得0.1mol/L，不同pH的缓冲液。 200mL 0.1M Tris（2.42g）加入0.1M HCl 24mL→pH=9，0.1M Tris-HCl buffer 6.醋酸缓冲液：0.2mol/L 0.2mol/L醋酸钠：27.22g三水醋酸钠（无水的为16.4g）+1L水 0.2mol/L醋酸：11.55mL冰醋酸+1L水
胰酶得配制
查看文章 细胞消化胰酶的配制2008-12-10 12:46适用于，无师兄、师姐、非细心、单独开展细胞培养的实验者 对一般细胞0.25% 胰酶(胰蛋白酶，Trypsin) 配方：100ml PBS,0.25g胰酶 步骤：1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O /2.9gPO4HNa2 ,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸馏水) 2 称胰酶0.25g 3 加入PBS中，低速搅拌〈4h冰浴中,或者4℃过夜 低速搅拌0.5h冰浴中 4 调PH7.4 5 仍在冰浴中 6 过滤，分装，-20℃保存，4℃短期内用完 tip:低速很重要，机械搅拌对酶是一种冲击，如果起沫， 酶就变性了。低温，防止酶失活 对难消化的细胞：在上述配方中，加入0.02g的EDTA(0.02%) tip:因为EDTA可以络合Ca2 ，增加消化效力 问：请问哪位仁兄能告知一下EDTA-胰蛋白酶的配制。急用！多谢！ 答：1、胰酶是0.25%,这是质量体积比，就是说0.25g胰酶溶于100ml PBS,注意，尽量不要用水来溶，因为要保持渗透压。 2、EDTA的工作液溶度是0.02%－0.1%，根据细胞消化的难易程度自己调整。EDTA并不是必须的，容易消化的细胞可不加。EDTA对细胞贴壁性有影响，因此使用时要甚重。如果影响贴壁，但消化时必须要用，那么在用完全培养基终止消化后，可离心弃上清，再加完全培养基培养，可去除EDTA。如果对贴壁没影响，那么可不离心。 3、EDTA的浓度也是质量体积比。和胰酶一起溶于PBS。 4、注意，血清可终止胰酶的作用，但不能终止EDTA的作用，对有些细胞来说，终止消化后的离心是必要的。 5、胰酶和EDTA在pH 为8左右的时候最易溶解，在配制时可先滴几滴NaOH将pH调至8，注意，胰酶可使溶液变酸，所以要边溶边测pH，随时调整。注意，不可加过量NaOH，否则过碱，细胞会受不了。 6、胰酶EDTA相对比较难溶，可用磁力搅拌器，或放入4度冰箱过夜，待溶解后过滤除菌。 7、可配2－3乘的胰酶，这样比较节约时间和滤器，用的时候对上灭菌PBS即可。
常用溶液配制方法题库1-2-10
常用溶液配制方法题 库1-2-10
问题： [单选,A1型题]配制100ml的0.2molL盐酸（36.46molL），已知市售盐酸的浓度为37%，比重1.19，所需盐酸的体积为（） A.1.66L B.1.66ml C.1.98ml D.1.98L E.1.66×10ml
问题： [单选,A1型题]以下关于当量的概念错误的是（） A.当量浓度是指1L溶液中所含溶质的Eq数（1ml溶液中所含溶质的mEq数）表示的浓度，表示为μ B.已知NaOH的分子量为40，计算NaOH当量为40 C.当量浓度的单位可以用1ml溶液中所含溶质的Eq数表示 D.当量的计算方法为分子量与阳离子的价数的比值 当量浓度是指1L溶液中所含溶质的Eq数（1ml溶液中所含溶质的mEq数）表示的浓度。表示为μ，其中体积和Eq数一一对应。
问题： [单选,A1型题]缓冲溶液能够对抗外来少量强酸强碱的原因，错误的是（） A.多元酸的酸式盐及其对应的次级盐，弱碱及其对应的盐，弱酸极其对应的盐所组成的缓冲溶液的作用机制相似 B.以醋酸-醋酸钠缓冲系为例，NaAc是缓冲溶液的抗酸成分 C.以醋酸-醋酸钠缓冲系为例，HAc是缓冲溶液的抗碱成分 D.缓冲作用是有一定限度的，一旦强酸、强碱量过大，缓冲溶液将丧失原有缓冲能力 E.起到缓冲作用的两种以上的组成成分都可以组成缓冲溶液 缓冲溶液可由下列三种成对的组分组成，它们分别是弱酸及其对应的盐，多元酸的酸式盐及其对应的次级盐，弱碱及其对应的盐。 (免费小游戏 https://www.360docs.net/doc/3c16031325.html,/)
问题： [单选,A1型题]制备75%乙醇，即将75ml纯乙醇加入25ml蒸馏水，因此其百分浓度可计为（） A.重量-重量百分浓度 B.重量-体积百分浓度 C.体积-体积百分浓度 D.体积-重量百分浓度 E.以上均可 百分浓度的标准定义是每100份溶液中所含溶质的份数，用符号（%）表示，其包括重量-重量（gg）即每100g溶液中所含溶质的克数，重量-体积（gml）即100ml溶液中所含溶质的克数，体积-体积百分浓度（mlml）即每100ml溶液中所含溶质的毫升数。其用公式表示为百分浓度=（溶质的份数／溶液的份数）×100%。
胰酶的配制
胰酶的配制过程 姓名：李达专业：预防兽医学号：2013022060 导师：汤德元一．胰酶-EDTA的配制 1、专用PBS缓冲液配方： 1000mlPBS: 7.000g NaCl 1.100g Glucose·H2O 或 1.000g Glucose 0.3700g KCl 0.2g Na2PO4H 3.000g Tris 0.2400g KH2PO4 0.4000g EDTA 超纯水1000ml 所有试剂全部为细胞培养专用sigma试剂。 0.0010g 酚红 5ml PS 2.5g 胰酶（HyClone 胰蛋白酶1:250 SH30848.018）2、配制步骤： 1）所用容器先泡酸12小时，后用自来水洗至无色后用蒸馏水洗净，再用超纯水洗三遍，最后高压灭菌，烘干。 2）将缓冲液配好后高压灭菌，同时洗好的广口瓶灭一瓶超纯水备用。 3）加入5ml双抗（PS）。 4）以灭菌的超纯水补足高压过程中损失的水分定容至1000ml。 5）转移到1L的试剂瓶中，加入酚红（0.0010g）。 6）调PH至7.2-7.4。 7）低温冰浴中溶解Tryspin2.5g.混匀。此过程避免产生气泡，否则将损失酶活性。8）在细胞间里用0.22um的滤膜过滤，分装入灭菌的50ml或1.5ml离心管中。 此过程避免产生气泡，否则将损失酶活性。-20℃保存。 9）不可反复冻存。每次解冻后4℃保存，并在短期内用完。
3、注意事项： 1）整个分装过程在无菌条件下进行。 2）机械搅拌对酶是一种冲击，如果起沫酶就变性了。低温可防止酶失活。 3）加入的EDTA可以络合细胞外基质中的Ca2+ ，增加消化效力。 4）在调节PH时一定要注意保护探头，防止损伤电极。 5）分装时不要太满，防止冻存后体积增大而溢出。50ml离心管装45ml左右，1.5ml离心管装1.4ml左右。 6）分装后的胰酶尽快转移到-20℃冰箱中冻存。 二．0.25%胰酶（无EDTA）的配制 1、250ml胰酶配制方法 Tryspin 0.625g PS 2.5ml 苯酚红0.1g 所有试剂全部为细胞培养专用sigma试剂。 2、实验步骤 1）实验之前将所用试剂瓶泡酸12小时自来水清洗至无色后再用超纯水冲洗并进行高压灭菌。 2）按前面要求准确称取所需试剂，在容量瓶中用0.01M PBS定容至250ml。3）调节PH至7.4。 4）将所配制的胰酶在细胞间用0.22um的过滤器过滤并分装。 3、注意事项 1）在溶解、分装和过滤过程中要轻轻混匀，避免产生气泡。否则酶的活性会受到影响。 2）为保持酶的活性，应尽量在低温下操作。 3）胰酶配好后应避免反复冻融。因此在过滤后将其分装到1.5ml离心管中。 三．胶原酶的配制方法 1、50ml体系配方组成
常用缓冲溶液的配制
常用缓冲溶液的配制方法1 ?甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05mol/L ） 2.邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L ） 24 Na2HPO4 ? 2H2O 分子量=178.05, 0.2 mol/L 溶液含35.01 克/升。 C4H2O7 ? H2O 分子量=210.14, 0.1 mol/L 溶液为21.01 克/升。
4 ①溶 液或浓盐酸调节，冰箱保存。 687 2 柠檬酸钠Na3 C6H5O7 ? 2H2O:分子量294.12, 0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。 6. Na2Ac H2O 分子量=136.09, 0.2 mol/L 溶液为27.22 克/升。
7 ?磷酸盐缓冲液 （1 2 4 2 Na2HPO4 12H2O 分子量=358.22 , 0.2 mol/L 溶液为71.64 克/升。 Na2HPO4 2H2O 分子量=156.03, 0.2 mol/L 溶液为31.21 克/升。（2）磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液（1/15 mol/L ） Na2HPO4 2H2O 分子量=178.05, 1/15M 溶液为11.876 克/升。 KH 2PO4 分子量=136.09, 1/15M 溶液为9.078 克/升。 &磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液（0.05M） 2 4
9. 10. Tris -盐酸缓冲液（0.05M , 25C） 50毫升0.1M三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与X毫升0.1N盐酸混匀后，加水稀释至100 毫升。 C H0CH2 NH2 分子量=121.14; 0.1M溶液为12.114克/升。Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。 11 硼砂Na2B4O7H2O,分子量=381.43;0.05M溶液（=0.2M硼酸根）含19.07克/升。硼酸H2BO3，分子量 =61.84,0.2M溶液为12.37克/升。 硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。
胰酶胶原酶的配制
胰酶-EDTA的配制 1、专用PBS缓冲液配方： 1000mlPBS: 7.000g NaCl 1.100g Glucose·H2O 或 1.000g Glucose 0.3700g KCl 0.2g Na2PO4H 3.000g Tris 0.2400g KH2PO4 0.4000g EDTA 超纯水1000ml 所有试剂全部为细胞培养专用sigma试剂。 0.0010g 酚红 5ml PS 2.5g 胰酶（HyClone 胰蛋白酶1:250 SH30848.018） 2、配制步骤： 1）所用容器先泡酸12小时，后用自来水洗至无色后用蒸馏水洗净，再用超纯水洗三遍，最后高压灭菌，烘干。 2）将缓冲液配好后高压灭菌，同时洗好的广口瓶灭一瓶超纯水备用。 3）加入5ml双抗（PS）。 4）以灭菌的超纯水补足高压过程中损失的水分定容至1000ml。 5）转移到1L的试剂瓶中，加入酚红（0.0010g）。 6）调PH至7.2-7.4。 7）低温冰浴中溶解Tryspin2.5g.混匀。此过程避免产生气泡，否则将损失酶活性。8）在细胞间里用0.22um的滤膜过滤，分装入灭菌的50ml或1.5ml离心管中。 此过程避免产生气泡，否则将损失酶活性。-20℃保存。 9）不可反复冻存。每次解冻后4℃保存，并在短期内用完。
3、注意事项： 1）整个分装过程在无菌条件下进行。 2）机械搅拌对酶是一种冲击，如果起沫酶就变性了。低温可防止酶失活。 3）加入的EDTA可以络合细胞外基质中的Ca2+ ，增加消化效力。 4）在调节PH时一定要注意保护探头，防止损伤电极。 5）分装时不要太满，防止冻存后体积增大而溢出。50ml离心管装45ml左右，1.5ml离心管装1.4ml左右。 6）分装后的胰酶尽快转移到-20℃冰箱中冻存。 0.25%胰酶（无EDTA）的配制 1、250ml胰酶配制方法 Tryspin 0.625g PS 2.5ml 苯酚红0.1g 所有试剂全部为细胞培养专用sigma试剂。 2、实验步骤 1）实验之前将所用试剂瓶泡酸12小时自来水清洗至无色后再用超纯水冲洗并进行高压灭菌。 2）按前面要求准确称取所需试剂，在容量瓶中用0.01M PBS定容至250ml。3）调节PH至7.4。 4）将所配制的胰酶在细胞间用0.22um的过滤器过滤并分装。 3、注意事项 1）在溶解、分装和过滤过程中要轻轻混匀，避免产生气泡。否则酶的活性会受到影响。 2）为保持酶的活性，应尽量在低温下操作。
常用缓冲溶液的配制方法
常用缓冲溶液的配制方法 磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液 24Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = ， mol/L 溶液含35.01克/升。 C 4H 2O 7·H 2O 分子量 = ， mol/L 溶液为21.01克/升。 pH 20mL ：Na2HPO4 0.219g + C4H2O7·H2O 0.258g 柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（ mol/L ） 6872柠檬酸钠Na 3 C 6H 5O 7·2H 2O ：分子量， mol/L 溶液为29.41克/毫升。 pH 20mL ： C4H2O7·H2O 0.275g + Na3 C6H5O7·2H2O 0.203g
乙酸–乙酸钠缓冲液（ mol/L ） Na 2Ac·3H 2O 分子量 = ， mol/L 溶液为27.22克/升。 pH 20mL ： NaAc 0.098g + HAc 甘氨酸–氢氧化钠缓冲液（0.05M ） 甘氨酸分子量=; 0.2M 溶液含15.01克/升。 pH 20mL ：甘氨酸0.075g + NaOH 0.013g 碳酸钠 -碳酸氢钠缓冲液（0.1M ） 2+2+ 无水Na 2CO 2分子量=;0.1M 溶液为10.60克/升。 Na 2CO 2·10H 2O 分子量=;0.1M 溶液为28.62克/升。 Na 2HCO 3分子量=;0.1M 溶液为8.40克/升。 pH 20mL ：无水碳酸钠 0.127g +碳酸氢钠0.067g
补注：pH EDTA2-McIlvaine2O 0. 05 mol/L EDTA（）+ 0. 06 mol/L Na2HPO4·12HO（） + 0. 08 mol/L 柠檬酸（） 18. 61g/L EDTA + 21. 4884 g/L Na2HPO4·12HO + 16.8112 g/L 柠檬酸 20mL 0. 372g EDTA + 0. 430 g Na2HPO4 ·12HO + 0.336 g 柠檬酸
溶液各种配制
附录：常用试剂配制及应用 一、常用缓冲液、试剂的配制 碳酸盐缓冲液(Carbonate-BicarbonateBuffer) 由于碳酸盐pH值偏碱，因此，常用于pH>9的缓冲液配制（附表1）。 附表1. 0.2mol/L碳酸盐缓冲液（～） 磷酸缓冲液(PhosphateBuffers，PB) 磷酸盐是使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa值，所以 用它们配制的缓冲液，pH范围最宽。NaH 2PO4：pKa1＝，pKa2＝；Na 2 HPO4：pKa1 ＝，pKa2＝。 另外，磷酸盐还有钾盐分子形式，一般来说，低温时钠盐难溶，钾盐易溶，因此，配制细胞培养用试剂时常常添加钾盐试剂，但若配制十二烷基硫酸钠（SDS）-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用钠盐而不能用钾盐，因为SDS会与磷酸钾生成难溶的十二烷基硫酸钾。 磷酸缓冲液的优点为：①可配制成不同离子强度的缓冲液；②适用pH缓冲范围较宽；③受温度影响缓冲液pH值变化较小；④离子强度对缓冲液pH影响较小，如L缓冲液稀释10倍其pH变化小于。 磷酸缓冲液的缺点是：①磷酸盐易与钙离子（Ca2+）、镁离子（Mg2+）及重金属离子结合生成不溶的沉淀物；②可能干扰某些化学反应过程，如对某些酶的催
化活性具有一定程度的抑制作用。 NaH 2PO 4 的pH值偏酸性，可用作pH<4的缓冲液。 Na 2HPO 4 的pH值偏碱性，可用作pH>10的缓冲液。 而pH＝6～8的中性缓冲液是更常用的缓冲液，需要NaH 2PO 4 与Na 2 HPO 4 两种磷 酸盐混合配制（附表2）。 附表2. 0.2mol/L磷酸盐缓冲液（～） 磷酸盐缓冲溶液（Phosphate-bufferedsaline,PBS) 磷酸盐缓冲液是在磷酸缓冲液基础上添加NaCl以维持溶液的渗透压，因此，PBS适用于做细胞缓冲液，常用PBS配制如下。 NaCl8g KCl0.2g Na 2HPO 4 1.44g KH 2PO 4 0.24g 在800ml蒸馏水中溶解，用HCl调节溶液的pH值至～加水定容至1L，15psi （1.05kg/cm2）高压灭菌20min，室温保存备用。
常用试液和配制方法
硫代乙酰胺试液取硫代乙酰胺4g，加水使溶解成100ml,置冰箱中保存。临用前取混合液[由1mol/L氢氧化钠溶液15ml、水5.0ml及甘油20ml组成]5.0ml，加上述硫代乙酰胺溶液1.0ml，置水浴上加热20秒钟，冷却，立即使用。 硫代硫酸钠试液可取用硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)。 硫氰酸汞铵试液取硫氰酸铵5g与二氯化汞4.5g，加水使溶解成100ml，即得。 硫氰酸铵试液取硫氰酸铵8g，加水使溶解成100ml，即得。 硫酸汞试液取黄氧化汞5g，加水40ml后，缓缓加硫酸20ml，随加随搅拌，再加水40ml，搅拌使溶解，即得。 硫氰酸铬铵试液取硫氰酸铬铵0.5g，加水20ml，振摇1小时后，滤过，即得。本液应临用新制。配成后48小时即不适用。 硫酸亚铁试液取硫酸亚铁结晶8g，加新沸过的冷水100ml使溶解，即得。本液应临用新制。 硫酸苯肼试液取盐酸苯肼60mg，加硫酸溶液(1→2)100ml使溶解，即得。 硫酸钙试液本液为硫酸钙的饱和水溶液。硫酸钛试液取二氧化钛0.1g，加硫酸100ml，加热使溶解，放冷，即得。
硫酸钾试液取硫酸钾1g，加水使溶解成100ml，即得。 硫酸铜试液取硫酸铜12.5g，加水使溶解成100ml，即得。 硫酸铜铵试液取硫酸铜试液适量，缓缓滴加氨试液,至初生的沉淀将近完全溶解,静置，倾取上层的清液，即得。本液应临用新制。 硫酸镁试液取未风化的硫酸镁结晶12g，加水使溶解成100ml，即得。 稀硫酸镁试液取硫酸镁2.3g，加水使溶解成100ml，即得。 氰化钾试液取氰化钾10g，加水使溶解成100ml，即得。 氯试液本液为氯的饱和水溶液。本液应临用新制。 氯化三苯四氮唑试液取氯化三苯四氮唑1g，加无水乙醇使溶解成200ml，即得。 氯化亚锡试液取氯化亚锡1.5g，加水10ml与少量的盐酸使溶解，即得。本液应临用新制。 氯化金试液取氯化金1g，加水35ml使溶解，即得。
溶液配制
溶液配制
1.50×Tris-乙酸（TAE）缓冲液成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量 2.PBS(0.1M，pH 7.4)贮存液配方（10倍浓缩） A.152g NaCl 24g无水NaH2PO4 1600ml水 用NaOH调整pH约6.7 加水至2L 室温保存（至少稳定1个月） 1×溶液pH应当为7.3~7.5.终浓度为130mmol/L NaCl和 10mmol/L磷酸钠 B.NaCl 80g Na2HPO4.12H2O 32.3g NaH2PO4.2H2O 4.5g 加蒸馏水至1000ml C .NaCl 80g Na2HPO4.2H2O 11.5g KH2PO4 2g KCl 2g 加蒸馏水至1000ml 贮存液室温下保存一个月 3.3 M 醋酸钠组份浓度3 M 醋酸钠（pH5.2）,配制量100mL A.配置方法 a. 称取40.8gNaAc?3H2O 置于100～ 200mL 烧杯中，加入约40mL 的去离子 水搅拌溶解。 b. 加入冰乙酸调节pH 值至5.2。 c. 加入去离子水将溶液定容至100mL。 d. 高温高压灭菌后，室温保存。 B. 配置方法:取408g三水合乙酸钠（NaC2H3O2）溶于800ml 水，用3mol/乙酸调至Ph4.8、5.0或5.2（按要求），
加水至1L，高压灭菌。 4.乙酸钾（5mol/L） 5mol/L 乙酸钾60ml 冰乙酸（！）11.5 ml 水28.5 ml 所得溶液的钾的浓度为3 mol/L，乙酸浓度为5 mol/L。室温保存。 5. HEPES溶液 A.1mol/L HEPES：将23.8gHEPES溶于约90ml的水中，用NaOH 调pH（6.8-8.2），然后用水定容至100ml。 B.500ml 1 M HEPES, pH = 7.0 Stock solution的配制 119.15 g HEPES 溶解在400ml蒸馏水中，加0.5~1M 的NaOH水溶液调节至少所需pH（HEPES的有效pH 范围是6.8~8.2），然后用蒸馏水定容至500ml，于4摄氏度保存。 C.加少量盐的HEPES Buffer配方（500ml） HEPES 6.5g、NaCl 8.0g、Na2HPO4.7H2O 0.198g、用0.5M NaOH 水溶液调节pH值，最后定容。 D.2×HEPES缓冲盐溶液的配制 将1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucan or dextran)和1g HEPES溶解在90ml的蒸馏水，用0.5M NaOH调节至所需pH值，再用蒸馏水定容至100ml即可 E.HEPES缓冲液，不含（Ca,Mg）(HCMF),PH7.4的配置： 8g NaCl （终浓度0.137mmol/L） 0.4g NaCl （终浓度5.4mmol/L） 0.12g Na2HPO4 （终浓度0.347mmol/L） 1.0g葡萄糖 2.38g N-2羟乙基哌嗪-N’-2-乙磺酸（HEPES,；终浓度10mmol/L） 加水至1L 用孔径0.45μm的滤器过滤，去除所有杂质 4℃可储存数月 F.HEPES缓冲液 1L HCMF 1ml 1mol/L CaCl2
酸洗的方法及溶液的配制
酸洗的方法及溶液的配制 一：酸洗溶液的配制与调整 1．计算公式 W=(V×A)／1000×C 式中w——所需浓酸的质量(kg)； v——酸槽有效容积(L)； A——配制酸的浓度(g／L)； C——浓酸的含量(％)。 2．计算实例 为配制含硫酸170g／L的酸洗溶液800L，需加92％的浓硫酸多少千克需水多少千克 将已知道的数据代入计算公式可得出： W=(800×170×100)／1000×92=147．8kgH2SO4 800—=652．2kgH2O 3．配酸程序 向配酸槽中加约l/3体积的水，将浓硫酸分几次，在不断搅拌条件下，缓慢加入配酸槽中，待硫酸加完后，继续加水至总体积为800L，搅拌均匀，取样分析。 4．调整方法 酸溶液配好后，经分析符合工艺规范，加热升温至工艺温度，先试洗一两批，产品质量合格后，就可以连续生产。生产过程中硫酸将逐渐消耗，每生产一定数量的产品，可根据取样分析结果或实践经验，补加一定数量的浓酸。如果按分析结果补加，需经过计算。举例如下： 例1：有效容积为800I。的酸槽，分析硫酸浓度为120g／L，需加多少千克92％的浓硫酸，才能达到硫酸浓度为200g／L (200—120)×800÷1000÷92％=69．57kg H2SO4
例2：如上题，若分析结果硫酸含量为300g/L，需取出多少升溶液再加水冲稀到 800I．，使硫酸含量为250g／L。 (800-X)×300=250×800 则x=，即应从槽中取出溶液，再加水至800L。 二：盐酸酸洗 盐酸是氯化氢气体的水溶液，15℃时氯化氢在水中溶解度最大，可生成％的盐酸。市售盐酸浓度在30％～37％。盐酸除锈主要特点如下： 在常温下，盐酸对金属氧化物的浸蚀能力较强，溶解钢铁等基体金属的速度较慢。因此用盐酸除锈时，引起腐蚀和氢脆的危险较少。浸蚀后工件表面残渣少、质量高。 盐酸的去锈能力几乎与其浓度成正比。但浓盐酸易挥发，尤其高温下挥发快，容易腐蚀设备、污染环境，因此盐酸的浓度一般不超过15％。超此浓度时，酸雾较大，操作困难。多数情况下，室温操作最高使用温度不超过40℃。 盐酸对其他金属的腐蚀作用如下： (1)铝：易被盐酸腐蚀； (2)锌、镁：易被盐酸腐蚀； (3)铜：只有在氧化条件下才被盐酸腐蚀； (4)18～8CrNi不锈钢：被盐酸腐蚀。 三：硫酸酸洗 硫酸是三氧化硫的水合物，浓度可达100％，市售品浓度一般为98％，硫酸和盐酸一样价格便宜，其水溶液对热的稳定性好，在除锈中广泛应用，其特点如下： 室温下，硫酸溶液去除金属氧化物的能力较差。提高浓度也不能提高硫酸的浸蚀能力，当溶液中硫酸浓度超过40％时，对氧化铁的溶解能力降低很多；浓度超过60％时，几乎不能溶解氧化铁。因此，实际除锈应用中，硫酸的浓度应控制在100g／L～250g／L。