离体蟾蜍心脏灌流实验数据处理与分析

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实验四离体蟾蜍心脏灌流实验数据处理与分析

E ｆfects of adr ｅnali ｎe,ａc ｅytlcholin ｅ, potassiu ｍ and ｃa ｌｃium ions on iso ｌated toad heart Gr ｏups heart rate

振幅(g)

基线变化

control per ｆusio ｎ c ｏn ｔrol per ｆusio

ｎ control

p ｅrf ｕｓion 5%Na+

1１ 11 ３.55 ３．44 正常峰略降低２％Ca2＋ 1４ 15 3.7 4.０1 正常峰略增高 1%K+

2１ 19 3.52 3.31 正常峰较多降低 1：１00０00 Adr

１6 ３0 4.26 ５.3５正常峰急剧增高

1:1０0０0００Ａch

２5

３.５5

3．39

正常

频率急剧下降，峰急剧降低

/通用格式

5%Na+

2%Ca2+

1%K+

1:100000 Adr 1:1000000 Ach

control perfusion

步骤一：向插管中加入1mｌ任氏液,心搏曲线稳定后记录正常的心搏曲线45s。

16加入试剂无心率(次/

分)

4.２６

平均收缩

张力(g)

心脏表现正常跳动

现象分析

步骤二：在任氏液中加入1：100000肾上腺素溶液1-２滴,心搏曲线稳定后记录45s。

加入试剂肾上腺素心率（次/

分)

平均收缩

5．３5

张力（g）

心脏表现剧烈加速跳动,现象十分明显

现象分析加肾上腺素心肌收缩能力增强，是

因为肾上腺素与心肌细胞膜上的β1

受体结合，心肌细胞和肌浆网膜C

ａ通透性增强,肌浆中Ca浓度增加，

心肌收缩能力增强。

步骤三:用任氏液洗脱3次，加入1-２mｌ任氏液，待曲线稳定45s后，向灌流液中加5% NaCl 溶液２－６滴，心搏曲线稳定后记录４5s 。

加入试剂５% NaCl心率(次／

１1

分)

３．４４

平均收缩

张力（g)

心脏表现心脏跳动微弱缓慢

现象分析加入NaCl后心跳减弱是由于心肌收

缩活力是由Ca离子触发的,心肌收

缩的强弱与细胞外Ca离子的浓度成

正比,当Na＋明显增高时,膜内外钠

的浓度差梯度增大，因此,快反应细

胞Na＋内流加快，０期去极速度和

幅度均增加，导致传导性和自律性

增高。同时Ｎa＋内流的增多促进细

胞内Ca２+的外运使细胞内Cａ2＋

浓度降低,因此,心肌收缩能力减弱。

步骤四:用任氏液洗脱数次,曲线基本恢复后，加入1－2ｍｌ任氏液，待曲线稳定45s后，在任氏液中加1％KＣl溶液１-2滴，心搏曲线稳定后记录45ｓ。

19加入试剂1% KCｌ心率(次/

分）

3.３1

平均收缩

张力(g）

心脏表现心脏跳动微弱

现象分析加入ＫＣl后细胞外K升高，K与Ｃ

ａ在细胞膜上有竞争性抑制，Ｋ抑

制细胞膜对Ｃa转运所以进入细胞

内Cａ减少，所以心肌的兴奋收缩联

过程减弱，因此心肌收缩力降低。

步骤五：用任氏液洗脱数次,曲线基本恢复后,加入1-２ml任氏液，待曲线稳定４5s后,在任氏液中加2%CaCｌ21-2滴,心搏曲线稳定后记录45s。

加入试剂2%ＣaCl2心率（次/

分)

4.01

平均收缩

张力（ｇ)

心脏表现心脏跳动收缩力加强

现象分析加入ＣａＣl后，心肌收缩增强,因此

心肌的收缩活性与心肌肌浆中Cａ

离子浓度的高低有关,当Cａ离子浓

度升高至10-5Ｍ水平时，作为钙受

体的肌钙蛋白结合了足够的Ca离

子,引起肌钙蛋白分子构型的改变，

从而触发肌丝滑行，肌纤维收缩，

当肌浆中Cａ离子浓度降至10－７

Ｍ时,Ca离子与肌钙蛋白解离,心肌

随之舒张，用高Ｃa离子灌注心脏,

使肌浆中Ｃa离子浓度不断升高,Ca

离子与肌钙蛋白结合数量不断增加,

于是心肌持续收缩。

步骤六:将上述溶液吸出,用新鲜任氏液换洗数次，加入1-２ｍｌ任氏液,待曲线稳定后记录４5ｓ，在任氏液中加1:10000０0的ＡCh溶液1-2滴，心搏曲线稳定后记录45s 。

加入试剂ＡCh心率(次/

１８

分）

３.39

平均收缩

张力（g）

心脏表现心脏几乎停止跳动

现象分析加乙酰胆碱心脏收缩能力减弱,是因

为乙酰胆碱与心肌细胞膜上的M受

体结合使心肌细胞膜K通道的通透

性增强,促使K外流，最大复极电位

水平升高,自律性降低,并且乙酰胆

碱可直接抑制Ｃａ通道使Cａ内流

减弱,心肌收缩能力降低。