医学免疫学溶血实验实验报告

溶血实验实验报告

一．实验原理

绵羊红细胞SRBC为抗原，与相应的特异性抗体反应形成免疫复合物，通

过经典途径激活补体，MAC在SRBC上打孔导致SRBC溶解

二．实验器械

无菌注射器酒精棉球碘酒无菌玻璃瓶止血带镊子手术剪无菌棉签

移液枪移液管锥形瓶量筒离心机试管无菌生理盐水甘油水浴锅

冰箱记号笔酒精灯

三．实验步骤

1．在绵羊颈静脉剪毛备皮，用止血带扎住颈部，用碘酒消毒，再用酒精棉球脱碘，无菌注射器抽血，去除止血带，用无菌棉签止血，把

抽出的血液放入无菌玻璃瓶注意要拔去针头。

2．在无菌实验室内，打开无菌玻璃瓶在酒精灯前晃动几下防止细菌感染，取5毫升绵羊血，配平离心，取出弃上清液，再加入生理盐水

洗涤，配平离心2至3次，弃上清得到绵羊红细胞。

3．制备20%绵羊红细胞悬液，用移液枪取两毫升绵羊红细胞到锥形瓶，在用移液管取八毫升无菌生理盐水至锥形瓶振荡混匀。制备2%绵

羊红细胞悬液，用移液枪取一毫升绵羊红细胞之锥形瓶，再往量筒

中倒入四十九毫升无菌生理盐水，倒入锥形瓶中振荡混匀。

4．免疫接种。第1天，家兔多点皮内注射绵羊全血0.5毫升。第3天，家兔多点皮内注射绵羊全血1毫升。第5天，家兔多点皮内注射绵

羊全血1.5毫升。第7天，家兔多点皮内注射绵羊全血2毫升。第

9天，家兔多点皮内注射绵羊全血2.5毫升。第12天，家兔耳缘

静脉注射20%SRBC1毫升。第15天，家兔耳缘静脉注射20%SRBC1

毫升。

5．18天后试血。家兔耳缘静脉处脱毛，用血管夹夹住，用注射器抽血观察效价是否合适。

6．心脏取血。手术剪剪毛备皮，胸骨左缘34肋间搏动最强处垂直进针取血20毫升分别放入两试管内。

7．溶血素制备与保存。配平离心，取上清放入另一个试管内水浴30分钟，加入等体积甘油灭活补体，记号笔写上标签。再放入零下二

十度冰箱冷藏。

8．