南方医科大学研究生细胞培养技术考试重点总结

南方医科大学研究生细胞培养技术考试重点总结
南方医科大学研究生细胞培养技术考试重点总结

一. 细胞培养技术的概念,简史在体外对细胞培养并进行研究的技术, 也叫细胞克隆技术. 细胞培养技术是生物技术中最核心、最基础的技术。细胞培养技术主要包括二大方面内容: 1.微生物细胞培养技术 2.动, 植物细胞培养技术:1) 器官培养技术 2) 组织培养技术 3) 细胞培养技术二. 细胞培养的优点 1.得到的是活细胞:能长时间、直接观察、研究活细胞的形态、结构、生命活动 2.可控制:(1)可控制-选择对象:类型:上皮?间质?性质:正常?肿瘤?(2)可控制-调节条件:各种因素:物理、化学、生物等因素(3)可控制-利用方法。采用各种研究技术、记录方法:研究:倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记-- 记录:摄影照片、缩时电影、电视-- 3. 应用广(1)学科多:(2)对象广:各种动物:低等动物--高等动物--人类;一种动物:不同年龄;不同组织: 正常或异常(肿瘤)4.较经济:花钱较少但可得到大量、同时、重复性好的生物学性状相似的实验对象 5. 不易污染环境三、细胞培养的缺点 1. 现人工无法完全模拟体内环境: a. 失去彼邻关系b.失去神经体液的调节和细胞相互间的影响 2. 细胞趋向单一化 3.失去原有组织结构和细胞形态 4.分化减弱或不显:要正确认识体外培养细胞是一种特定条件下生长的细胞群体。 5. 某些类型细胞还很难培养 6.大规模培养难度大四. 体外细胞培养的方式 1.粘附型培养: 附着在某一固相支持物表面才能生长的细胞。粘附是大

多数有机体细胞在体内外生存和生长发育的基本存在方式 2.悬浮型培养: 不必附着于固相支持物表面,而在悬浮状态下即可生长的细胞。来源:来自血,脾或骨髓,尤以血中白细胞.癌肿细胞也可以. 特点:在悬浮中生长良好,细胞圆形,单个或小细胞团优点: 生存空间大,提供数量大,传代方便(不需消化),易于收获可获得稳定状态. 缺点:观察不方便, 很多细胞不能悬浮生长(尤以正常细胞) 五.体外培养细胞的生长形态分类根据形态大致的不同,主要2类: 1.上皮样:来源:来源于外胚层,内胚层细胞如:皮肤及其衍生物, 消化道,乳腺,肺泡, 上皮性肿瘤形态:类似体内的上皮细胞,扁平,不规则多角形,中有圆形核易相连成片相靠—紧密相连—成薄层—铺石状 2.成纤维细胞样:培养中形态与成纤维细胞类似。来源:中胚层间充质组织起源的组织如:真正的成纤维细胞:心肌,平滑肌,成骨细胞,血管内皮形态:似体内成纤维细胞的形态,胞体梭形或不规则三角形,胞质向外伸出2—3个长短不等的突起,中有卵圆形核。 3.其它,不定型

六. 常用术语1.细胞系(cell line):原代培养物首次传代后,就可以称细胞系。不能或有限传代下去称有限细胞系。能连续传代的称连续细胞系。 2.细胞株:某类细胞经传代克隆并保持了该类细胞理化特征的细胞群体。 3.原代培养:直接取自生物体的组织细胞并进行培养 4.传代培养:将细胞从一个培养物内分散到另一个培养物的过程。 5.转染(transfection):将某个基

因转移到培养细胞核内。 6.lipofection:常用细胞转染剂(脂质体),它搭载基因(DNA)后形成复合物可转染到动物细胞。第二章细胞培养的条件及设备一、细胞培养室二、常用设备1. 超净工作台; 6. CO2培养箱(孵箱); 11. 显微镜 2. 纯水装置;

7. 液氮生物容器; 12. 过滤装置 3. 抽气泵; 8. 冰箱; 13. 空调4. 消毒装置; 9. 离心机 14. 酸度计 5. 干燥装置; 10. 天平 15. 干燥器三、常用消耗器材1.培养瓶及各种相关玻璃用品、塑料用品和棉制品 2.手术器材四、培养用液 1.天然培养基(液):血清、鸡胚浸出液、鼠尾胶 2.人工合成培养液:合成培养基、平衡盐溶液、缓冲液、蒸馏水、消化液和抗菌素等五、消耗性器皿的清洗、包装及消毒

第三章细胞培养基本技术一、原代培养基本技术:取材→漂洗→剪切→消化→计数→接种二、传代培养技术:去旧换新液→消化→分装三、细胞冻存及复苏技术

培养液高度:2.5~3.0mm 第四章每代细胞基本的生长过程一. 游离期:细胞接种后最初一段时间, 细胞在培养基中呈悬浮状, 胞体圆形二. 贴壁期:细胞附着于支持物上三. 潜伏期:四. 指数增长期影响因素 1. 细胞种类 (附着最强)巨噬细胞(30’)一成纤维细胞——上皮细胞——血细胞(最弱) 2. 生物因素血清、培养液中的促附着因子 3. 机械,物理等离心:促进附着流动:培养液流动可阻止细胞附着低温:可抑制附着增加细胞粘附的措施(因素) 1.增加支持物粘附性 a. 赖氨酸

类 b. 血清 c. 某些生物活性物质,纤维性物质 d. 减少接种时细胞悬液的量待细胞粘附和贴壁之后,再补充足够的培养液 e. 减少培养液中血清的含量使培养液黏度降低 f. 培养液中离子成分及其浓度如,培养液中的Ca含量过低时不利于细胞的粘附、贴壁和铺展g. 培养液的温度低温会减低细胞的活动,妨碍黏附和贴壁伸展过程细胞悬浮在培养液中时,近似球体形状当接触坚硬平面即铺展于底物上,扁平状与底物形成很多接触点

伸展分几个阶段 (1)开始阶段开始附着铺开细胞附着于底物球形的细胞,下方表面与底物接触成扁但尚未形成新的伪足(2)放射状铺展阶段在球形细胞体的周围形成很多伪足隆起伪足形状主要柱形丝状: 直径0.2-0.5um 长10-20 扁平片状: 厚0.1-0.5 宽2-5 尚有: 小泡状叶状: 直径1-2 开始时: 絲状多以后片状增加许多伪足形成薄的胞质小片牢固贴于底物胞体中央部分扁整亇细胞扁平 (3) 极化阶段细胞最后伸展附着的情况实验:用多种细胞,以显微操作及缩时电影定位细胞附着于玻璃和聚苯乙烯情况检测--显微针头—结果:附着规律附着点:附着规律几乎未见于细胞的中央区 (如不在核之下) 总在边缘,边缘”摆动”活动的部位凸的边缘在薄的边缘附着区:约为细胞下面表面的15-35%附着、伸展的条件底物细胞能在很多固体表面附着最终铺展的程度,取决于底物的性质

影响因素:活性物质(贴附、伸展因子):血清、培养液中,或细胞分泌的生物活性物质被底物吸附后可利于细胞的铺展细胞借助这些分子,可附着于各种”非特异性”的底物上如Fn,胶原,聚赖氨酸机械,物理因素三. 潜伏期

细胞活着但无分裂. 细胞株6—24h 原代24—四. 指数(对数)增长期细胞增殖旺盛, 数量成倍增多, 最适合实验研究. 3—5d以后来到判断方法细胞群体倍增时间细胞分裂指数五. 停止期(衰退期细胞长满瓶壁, 有活力, 不增殖, 能存活一段时间. 如传代进入下一循环. 传代培养到一定的代数时,细胞的生命活动明显减弱。即使及时传代也无效表明培养物已经进入衰退期,再向前发展,只有退化、死亡接触抑制和密度依赖性生长仰制增殖的密度抑制实验方法:3T3细胞,接种105于6cm培养皿,5d细胞计数于加入10%、20%、30%牛血清的培养液中,结果:

细胞培养复习题

名称解释 细胞培养(动物细胞培养):动物细胞培养是指将动物活体体内取出的组织用机械或消化的方法分散成单细胞悬液,然后放在类似于体内生存环境的体外环境中,进行孵育培养,使其生存、生长并维持其结构与功能的方法。 组织培养:从生物体内取出活的组织(多只组织块)在体外进行培养的方法。有时泛指所有的体外培养。 器官培养:是将活体内的器官(一般是胚胎器官)、器官的一部分或器官原基在体外进行培养的方法。 合成培养基:根据细胞生存所需物质的种类和数量,用人工方法模拟合成的、配方恒定的培养基。 无血清培养基:由基础培养基和替代血清的补充因子(生长因子和激素、结合蛋白等)组成。 完全培养基:在合成培养基里添加血清后的培养基。 接触抑制:体外培养的细胞在贴附底物上连接成片、相互接触后失去运动的现象。 无限细胞系:细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态,只有部分细胞由于遗传物质的改变,使其在培养条件下可以无限制传代,这种传代细胞为细胞系。 去分化(脱分化):细胞在体外不可逆地失去原有特性。注意:去分化不意味分化能力完全丧失!在适当调节信号刺激下仍能表现出分化特性。但分化能力会随培养时间延长而逐渐丧失。 不适应:各种分化细胞,在体外培养时逐渐失去各自的形态与功能特征,表现出某种趋同性。原因:培养条件变化使分化发生阻抑 细胞分裂指数(MI):是指细胞群中每1000个细胞中的分裂相数量 细胞群体倍增时间:是指培养物中细胞数量翻倍的时间。 原代培养:从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。 传代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,配制成细胞悬浮液,分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养,称为传代培养。

动物细胞培养技术思考题

《动物细胞培养技术》复习思考题 动物细胞培养的实验器皿清洗要求为何较高?你认为该如何保证器皿中无杂质?如果器皿中有杂质,会对细胞培养产生什么样的影响? 答:①离体细胞对各种毒物都很敏感,若所用器材清洗效果未达到要求,各种毒物会损坏细胞影响实验。②器皿使用高压灭菌锅,121.3℃,20~30分钟,在取拿的时候用经过高压灭菌后的镊子取拿,避免造成污染。③ 叙述超净工作台的工作原理? 答:超净工作台最主要的是空气循环过滤的过程,在这个过程中风机起到了心脏的作用。鼓风机驱动空气通过高效过滤器得以净化,净化的空气被徐徐吹过台面空间而将其中的尘埃、细菌甚至病毒颗粒带走,使工作区构成无菌环境。 正压过滤器为何会除菌? 答:正压式过滤器没有内置灭菌灯,正压式过滤器利用的是两层0.22um孔的过滤膜,这层膜可以将细菌阻挡在膜上,过滤的液体流下去就基本上完成了灭菌过程 各种细胞培养用液的配制需要很精确吗?如果不精确,会导致什么后果?请举例说明。你认为精确配制各种溶液? 答: 配制后平衡盐溶液呈黄色意味着液体的pH发生了什么变化? 答:配制后的液体应呈桃红色,PH值为7.4左右。苯酚红的变色域:1.2(橙)~3.0(黄),6.5(棕色)~8.0(紫色),若为黄色,则液体呈酸性,不利于细胞的生存。 用于分离细胞的消化液为什么宜用无Ca、Mg离子的D-Hanks液或PBS液配制 答:Ca+2、Mg+2是细胞膜的重要组分,具有使细胞凝聚的作用。因此,用于分离细胞的消化液宜用无Ca+2、Mg+2离子的D-Hanks液或PBS液。 L-谷氨酰胺在营养液中有何作用? 答:L-谷氨酰胺是细胞的能量来源;是一种必须氨基酸,是使物体合成核酸、蛋白质、嘌呤、嘧啶的重要前体,也是蛋白质合成分解的调节物;是细胞内氨的清除剂,氨对一些细胞有毒性。 HEPES溶液的作用机理? 答:它是一种氢离子缓冲剂。主要作用是防止培养基pH迅速变动 平衡盐溶液的组成与基本作用?小牛血清在细胞培养中有哪些作用? 答:①平衡盐溶液主要是由无机盐、葡萄糖组成,它的作用是维持细胞渗透压平衡,保持pH 稳定及提供简单的营养.主要用于取材时组织块的漂洗、细胞的漂洗、配制其他试剂等。②作用:a提供能促使细胞指数生长的激素、基础培养基中没有或含量微小的营养物,以及某些低分子营养物质; b提供结合蛋白,识别维生素、脂类、金属离子,并与有毒金属和热源物质结合,起解毒作用;c是细胞贴壁、铺展生长所需因子的来源; d起酸碱度缓冲液作用; e提供蛋白酶抑制剂,细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受损伤。 营养液制备后为什么要小剂量分装? 答:避免营养液被污染后,全部的营养液都被污染。 营养液一次用完过后,下一次的实验就不能用,会引起污染,影响实验,若冷冻营养液,则营养液的营养成分会有所损失,影响细胞的生长 10万U/mL单位青霉素、链霉素的配制方法? 答:用注射器吸10毫升双蒸水溶解100万单位的链霉素,弃去2ml,用剩余的8ml链霉素溶解80万单位的青霉素,配制成每毫升青霉素、链霉素各10万单位的母液。

实验总结细胞培养方法

实验总结细胞培养方法公司内部档案编码:[OPPTR-OPPT28-OPPTL98-OPPNN08]

一、培养细胞常用配置培养基的配置:基础培养基500ml+胎牛血清50ml+双抗5ml 冻存液的配置:10 % DMSO + 90%胎牛血清 依次比例酌量配置。 超净工作台常规配置 移液器1套(2.5μl、20μl、200μl、1ml),酒精灯1盏,液器1 台,斜架1台,酒精喷壶1个,酒精棉球缸1个,污缸1个, 常规耗材:培养瓶(50㎝2),定量移液管(5ml、10ml),枪头 (1ml、200μl、10μl),培养皿,6/24/48/96孔板,医用脱脂棉球,冻存管 所需试剂:培养基,胎牛血清,双抗,DMSO,胰酶,75%酒精…… 实验前准备:所需的各项高压后的耗材及污物缸放于超净工作台内,用酒精喷壶喷洒实验台面,并关闭工作台打开紫外灯照射30min后开始实验操作。培养基及胰酶恢复常温后使用,可37℃水浴5-10min 二、细胞复苏 步骤:

1. 紫外消毒30min后关闭紫外灯,开启超净台正常工作状态,用酒精消毒操作者的双手。 2. 培养液(DMEM),恒温水浴箱37℃预热20min,备用。超净台内准备一支15ml离心管备用。 3.将所需的培养基确保瓶身干净后酒精消毒放于工作台面内,点燃酒精灯,再将瓶口对准在酒精灯上消毒2-3次,旋开瓶盖后需再次分别消毒瓶口和瓶盖。 4. 从液氮保存罐中取出冻存管,立即放入37℃水浴中,快速摇晃,直至冻存液融化至黄豆粒大小后迅速取出。 5. 将细胞悬液移入15ml离心管,缓慢加入4ml培养液,离心 (1000r/min,5min)。 6. 取出2个培养皿并做好标记(复苏日期等),提前加入5-10ml培养液;离心结束后用1ml培养液悬液混悬沉淀细胞后分别加入培养皿内。 7. 将培养基瓶口和瓶盖消毒2-3次后拧紧,熄灭酒精灯,整理实验台面,取出实验试剂及污缸等,关闭超净工作台。 8. 将培养瓶放入培养箱内培养 注意事项:

林业生物技术复习资料

《林业生物技术》复习重点 一、概念与名词 1、植物离体快速繁殖 ——又称微快繁,简称微繁, 应用植物细胞的“全能性”理论,在无菌条件下,把离体的植物器官(如根、茎、叶、花、果实、种子等)、组织(如花药、胚珠、形成层、皮层、胚乳等),放在人工控制的环境中,使其分化、繁殖,在短时间内产生大量遗传性一致的完整新植株的技术。是利用植物组织培养技术进行的一种营养繁殖方法,是常规营养繁殖方法的一种扩展与延伸。 2、试管外生根技术 ——试管外生根技术是指将组织培养茎芽的生根诱导与驯化培养结合在一起,直接将茎芽扦插到试管外有菌环境中,边诱导生根边驯化培养。该方法舍弃了组织培养苗在试管内生根这一环节,不仅避开了瓶内生根难的问题,同时也大大缩短了育苗周期和节省了育苗成本。 3、林业生物技术 ——应用自然科学及工程学原理,依靠森林植物、动物、微生物作为反应器将物料加工转化,规模化生产和提供人们所需的生态环境、生物质产品和公益性服务的科学技术。(P8) 4、细胞全能性 ——是指植物细胞具有发育成一个完整植株的全部遗传信息,在适当条件下能够形成完整植株。(P26)5、组织培养 ——组织培养是指将植物的形成层组织、分生组织、表皮组织、薄壁组织和各种器官组织以及愈伤组织进行离体培养的技术。 6、胚珠培养 ——胚珠培养是将授粉的子房在无菌条件下解剖后,取胚珠置于培养基中培养的过程。有时也把胚珠连同胎座一起取下来培养。 7、离体叶的培养 ——在自然界,很多植物的叶具有强大的再生能力,能从叶片产生不定芽的植物,离体叶培养指包括叶原基、叶柄、叶鞘、叶片、子叶在内的叶组织的无菌培养。它大多经脱分化形成愈伤组织,再由愈伤组织分化出茎和根。其中叶片培养是一个典型的代表。 8、植物细胞工程 ——植物细胞工程是植物生物技术的一个重要组成部分,是在离体培养条件下,在细胞水平上对植物材料进行遗传操作的技术,即对植物体的任何一个部分(器官、组织、细胞、原生质体)进行离体诱导使其称为完整植株的技术。 9、外植体 ——外植体指植物组织培养中用来进行无菌培养的离体材料,可以是器官、组织、细胞和原生质体等。 10、细胞悬浮培养 ——细胞悬浮培养是将游离的植物细胞按一定的细胞密度,悬浮在液体培养基中进行培养增殖的技术。 11、花粉培养 ——花粉培养也叫小孢子培养,是从花药中分离出花粉粒,使之成为分散的或游离的状态,通过培养使花粉粒脱分化,进而发育成完整植株的过程。 12、原生质体 ——原生质体是指植物细胞中除去细胞壁具有细胞全能性的裸露部分。 13、转基因林木 ——转基因林木是指利用基因工程技术改变基因组构成,用于林业生产或者林产品加工的森林植物。

2018南方医科大学应用心理学考研招生简章

2018年南方医科大学心理学考研大纲,招生简章,专业目录,参考书目每年变动都很小,力比多学院小编建议招生简章关注报考条件、专业信息、时间流程、奖学金及联系方式,专业目录关注招生人数,推免人数及各方向注意事项。 力比多学院教研组为各位心理学考研人整理出2017南方医科大学心理学硕士研究生招生简章,希望能帮到准备考研的同学。 一、院校介绍 南方医科大学心理学系其前身为第一军医大学心理学教研室,2004年跟随第一军医大学整体转制,2005年发展为南方医科大学心理学系,2010年在学系的基础上整合校内各方资源成立南方医科大学心理学系。 心理学系现有专职教师15人,兼职教师14人,其中教授11人,研究员1人,主任医师2人,副高职称5人,博士生导师6人。所有人员均为硕士以上学历,博士13名。 在教学方面,经过多年来的建设,形成了全日制学历教育、双学位、轮训等多种培训形式,培养从本科到硕士、博士各个层次的高级心理学人才。自2004年起开设四年制应用心理学本科专业,授予理学学士学位;2008年起开设五年制临床医学(临床心理学)本科专业,授予医学学士学位;2017年起开设五年制精神医学本科专业,授予医学学士学位。2000年起开始招收应用心理学硕士研究生,2009年起开始招收心理卫生学博士研究生,2014年起开始招收博士后研究人员。 二、报名指导 2018年南方医科大学心理学考研招生简章限时占未公布,根据力比多学院小编多年混迹心理学考研圈的经验来看,2018年南方医科大学应用心理学考研大

纲,招生简章,专业目录,参考书目每年变动都很小,如需了解2018招生简章请参考历年南方医科大学心理学研招生简章。 力比多学院(https://www.360docs.net/doc/4b4079735.html,)教研组为各位心理学考研人整理出2017南方医科大学心理学硕士研究生招生简章,希望能帮到准备考研的同学。 心理学专业目录/研究方向 2017南方医科大学心理学研究生招生,研究方向,具体如下: (006)公共卫生与预防医学学位分委员会(040203)应用心理学 招生简章 一、研究生教育平台简介 南方医科大学前身为中国人民解放军第一军医大学,1951年10月创建,1978年被确定为全国首批重点大学。2004年8月,根据国务院、中央军委决定,学校整体移交广东省,更名为南方医科大学。学校座落在经济发达的历史文化名城广州,校园绿树成荫,花团锦簇,是广东省一级园林式院校。 学校下设基础医学、临床医学、生物医学工程、中医药学、公共卫生等16个二级学院和6所附属医院。学科涵盖医学、工学、理学、法学、管理学、文学、教育学、经济学八大领域,共拥有10个博士学位授权一级学科(基础医学、临床医学、生物学、中西医结合、中药学、公共卫生与预防医学、药学、特种医学、护理学、生物医学工程),专业学位博士学位授权学科1个(临床医学),博士学位授权交叉学科4个(传染病预防控制、卫生应急、生物信息学、临床遗传学);拥有3个国家重点学科(内科学(消化系病)、人体解剖与组织胚胎学、中西医结合临床)、2个国家重点培育学科(病理学与病理生理学、外科学(骨外))。共拥有19个硕士授权一级学科,3个硕士授权二级学科,其中专业学位硕士授权一级学科6个。 现有来自全国29个省、自治区、直辖市的全日制在校学生20000余人,留学生800余人,其中全日制博士、硕士研究生4000余人,在职博士、硕士研究生1500余人,港澳台研究生100余人。 学校师资力量雄厚,拥有一大批在国际国内有影响的著名学者、专家,现有中国科学院和中国工程院院士3名,国家“973”项目首席科学家3名,博士

高中生物细胞工程试题

阶段质量检测(二) 细胞工程 (时间:45分钟,满分:100分) 一、选择题(每小题3分,共45分) 1、下列生物工程技术中,不属于细胞工程得就是( ) A.通过试管动物大量繁殖优良动物 B.利用含有人胰岛素基因得大肠杆菌生产胰岛素 C.通过体细胞克隆技术培养出克隆羊 D、将某人得肝癌细胞在实验室中繁殖成一个细胞系 2。下列关于植物体细胞杂交技术得叙述,错误得就是( ) A.获得原生质体得过程需要用到纤维素酶与果胶酶 B.利用植物体细胞杂交可以获得某种多倍体植株 C.植物体细胞杂交过程就就是原生质体融合得过程 D。可根据细胞中染色体数目与形态得差异来鉴定杂种细胞 3.植物体细胞杂交制备原生质体与动物细胞培养配制一定浓度得细胞悬浮液,所需要得酶依次就是( ) A.淀粉酶与磷脂酶 B.纤维素酶与胰蛋白酶 C.脂肪酶与二肽酶 D。过氧化氢酶与半乳糖苷酶 4.下列有关单克隆抗体制备得叙述,正确得就是( ) A.先利用特定得抗原蛋白饲喂小鼠,再从小鼠脾脏中分离B淋巴细胞 B。为避免病毒感染,只能用聚乙二醇、电激等处理来诱导骨髓瘤细胞与已免疫得B淋巴细胞融合 C.体外培养杂交瘤细胞需要在培养液中添加动物血清与抗生素 D.经过选择培养基初次筛选得杂交瘤细胞即可进行体内或体外培养 5。(全国高考)关于动物细胞培养与植物组织培养得叙述,错误得就是( ) A.动物细胞培养与植物组织培养所用培养基不同 B.动物细胞培养与植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶 C、烟草叶片离体培养能产生新个体,小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖 D。动物细胞培养可用于检测有毒物质,茎尖培养可用于植物脱除病毒 6。细胞工程中,选择合适得生物材料就是成功得关键、下列选择不合理得就是( ) A、选择高度分化得动物体细胞进行培养有利于获得大量细胞 B。选择胚胎细胞作为核供体进行核移植可提高克隆动物得成功率 C、选择一定大小得植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗

生物技术概论试题

生技28、查找阅读有关生物技术的英文文献并翻译成中文一、名词解释 Plasmid 目的基因 单克隆抗体技术 细胞融合 基因库 问答题:

1.疾病基因治疗有哪四大策略,肿瘤的基因治疗主要有哪两种策略? 2.从cDNA文库和基因文库中获得目的基因有什么不同? 3.如何从一片嫩叶经组织培养培育出众多的完整植株? 4.开展干细胞研究对人类有何积极的意义? 5.为什么说干细胞的应用将具有广泛的前景? 6.人类基因组计划任务是什么?将解决什么问题?它对医学的发展有什么影响? 7.生物法处理污水或废水有哪几种常见方法?污水治理的意义何在? 8.空气污染治理与水污染治理有什么关系,常见的方法有哪几种 9.什么事生物修复技术,方法,举例说明其应用价值 10. 生物技术对经济社会发展的影响,试举例说明。

第二部分综合练习 一、单项选择题 4. 下面哪个不是生物技术包括的基本内容? 细胞工程基因工程遗传工程酶工程 1、现代生物技术是一项高新技术,它具有高新技术的“六高”特征,下面哪个不属于“六高”? A、高效益 B、高风险 C、高势能 D、高效率 2、生物技术是以下面哪个为核心? A、基因工程 B、细胞工程 C、酶工程 D、发酵工程 3、分子克隆主要是指 A、DNA的大量复制 B、DNA的大量转录 C、DNA的大量剪切 D、RNA的大量反转录 4、多数限制性核酸内切酶切割后的DNA末端为 A、平头末端 B、3突出末端 C、5突出末端 D、粘性末端 5、设计聚合酶链反应的引物时,应考虑引物与模板的 A、5…端特定序列互补 B、5?端任章序列互补 C、3…端特定序列互补 D、3?端任意序列互补 6、用于鉴定转化于细胞是否含重组DNA的最常用方法是 A、抗药性选择 B、分于杂交选择 C、RNA反转录 D、免疫学方法 7、下列哪些是发酵技术独有的特点 A、多个反应不能在发酵设备中一次完成 B、条件温和、能耗少、设备简单 C、不容易产生高分子化合物 D、发酵过程中不需要防止杂菌污染 8、不是工业生产上常用的微生物为 A、担子菌 B、细菌 C、酵母菌 D、霉菌 9、机械搅拌发酵罐与通风搅拌发酵罐相比,下列不属于前者特点的是 A、发酵罐内没有搅拌装置,结构简单 B、发酵罐内有搅拌装置,混合速度快 C、耗能少,利于生产 D、发酵罐内没有搅拌装置,结构复杂 10、从微生物细胞制备酶的流程一般包括破碎细胞、溶剂抽提、离心、过滤、干燥这几 个步骤。

细胞培养技术个人总结

总结---细胞培养 一.基本理论概论 原代培养: 也叫初代培养,指直接从体内取出的细胞、组织和器官进行的第一次的培养。 传代培养:将细胞从一个培养瓶转移到另外一个培养瓶即称为传代或传代培养。 细胞系:原代培养物成功传代后,则称之为细胞系。(如细胞系的生存期有限,则称之为有限细胞系;已获无限繁殖能力能持续生存的细胞系,称连续细胞系或无限细胞系。) 细胞株:通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物称为细胞株。 培养类型:细胞培养,组织培养,器官培养。 细胞生长的方式:贴附生长,悬浮生长 培养细胞的形态(形态不一定,环境改变形态可能改变):成纤维性型细胞,上皮型细胞(单层膜样生长),游走性细胞(游散生长,常有伪足跟突起) 二.培养过程及要点(切记无菌操作) (一)工作环境的处理 1. 实验进行前,无菌室及无菌操作台以紫外灯照射30-60 分钟灭菌,以70 % 酒精擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,且即使培养基相同亦不共享培养基,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70 % 酒精擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后,再进行下一个细胞株之操作。 2. 实验用品以70 %酒精擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在台面之中央无菌区域,勿在边缘之非无菌区域操作。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置,其它实验用品用完即应移出,以利于气流之流通。 3. 小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。吸管口切勿碰到容器瓶口 4. 工作人员应注意自身之安全,须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒 感染之细胞株应特别小心操作,并选择适当等级之无菌操作台(至少Class II)。操作过程中,应避免引起aerosol 之产生,小心毒性药品,例如DMSO 及TPA 等,并避免尖锐针头之伤害等。 5. 定期检测下列项目: CO2 钢瓶之CO2 压力。CO2 培养箱之CO2 浓度、温度、及水盘是否有污染(水盘的水用无菌水,每周更换)。无菌操作台内之airflow 压力,定期更换紫外线灯管及HEPA 过滤膜,预滤网(300 小时/预滤网,3000 小时/HEPA)。 6. 水槽可添加消毒剂(Zephrin 1:750),定期更换水槽的水。 (二)试验用玻璃塑料用品清洗及其消毒灭菌 清洗: (1)玻璃器皿的清洗(酸液由重铬酸钾,浓硫酸,蒸馏水配置) 浸泡—刷洗—浸酸—冲洗 (2)胶塞的清洗 刚买回的常含滑石粉等杂质,先用自来水冲洗后再按常规方法处理。2%NaoH或洗衣粉煮沸10-20分钟---1%稀Hcl浸泡30分钟或蒸馏水冲洗后再煮沸10-20分钟—晾干备用 (3)塑料制品的清洗 2%NaoH浸泡过夜—自来水冲洗--5%稀Hcl浸泡30分钟—自来水和蒸馏水冲干备用。

细胞工程复习重点

思考题 1.细胞工程实验室的基本组成与要求是什么? 一、实验室组成 1.基本实验室 ①准备室/化学实验室 功能:就是进行一切与实验有关的准备工作 要求:宽敞明亮,通风条件好,地面便于 清洁并应防滑处理。 ②接种室/无菌操作室 功能:是进行接种、继代、细胞融合等无 菌操作的场所。 要求:封闭性好,干燥清洁明亮,防止空 气对流。外应设缓冲室、更衣室。 防止微生物感染。 ③培养室 功能:是对接种到培养瓶的离体材料进行控制培养的场所。 要求:是要能控制光照和温度,应保持干燥和清洁,2.辅助实验室根据具体的实验需求而定。 细胞学实验室 生化分析室 摄影室及暗室 3. 移栽设施/温室 要求:配置人工光源并且能够控制室内温度,为 试管苗的正常生长提供适宜的环境。 2.外植体消毒的基本方法是什么?

3. 无菌操作在植物离体培养中的作用是什么? 4. 配制培养基时,加入一定量的植物生长调节物质, 它们在离体培养过程中有哪些作用? 激素调控的一般规律是什么? 植物激素或生长调节剂( growth regulators)包 括: 生长素类( auxin) 细胞分裂素类(cytokinin,CTK) 赤霉素类 (GA) 乙烯( Eth) 脱落酸(ABA) 其中前三者为正向激素,后两者则为负向激素。 常用的主要有生长素类和细胞分裂素类两大类。 ①生长素类( auxin):在作用或结构上 类似于吲哚乙酸的一类物质的统称。生长素 是最早发现的植物激素。 作用:诱导愈伤组织形成,促进细胞的分裂和伸长,诱导根原基的发生和根系的生成,有调运养分的效应。使用浓度0.1~10mg/L。常用的生长素有: 吲哚乙酸 (IAA)、2, 4,二氯苯氧乙酸 (2,4-D) 吲哚丁酸 (IBA) 。 奈乙酸 (NAA)、 ②细胞分裂素类(cytokinin,CTK) :是一类促进细 胞分裂的植物激素,细胞分裂素都为腺嘌呤的衍生物 作用:促进细胞分裂和分化,诱导不定芽的形成, 促进胚状体的发育,延缓组织的衰老,打破顶端 优势,有利于芽的增殖,常用于继代和增殖培养。 使用浓度0.1~10mg/L。 常用的细胞分裂素有: 激动素 (KT) 6-苄基腺嘌呤 (6-BA/BAP) 玉米素( ZT) 异戊烯氨基嘌呤 (2-ip) 噻重氮苯基脲( TDZ) 5. 常用的植物细胞培养基种类有哪些?各有什么特 点? MS培养基 无机盐含量较高,微量元素种类较全,浓度也高。其养分的数量和比例较合适,离子平衡性较好,具较强的缓冲能力,培养过程中较稳定,可满足植物的营养和生理需要。其中它的硝酸盐含量较其它培养基为高。 广泛地用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培养,效果良好。有些培养基是由它演变而来的。 N6 培养基 KNO3和(NH4) 2SO4 含量高,VB1含量高,不含钼。目前在国内已广泛应用于小麦、水稻及其它植物的花粉和花药培养和组织培养。 B5培养基 KNO3含量高,有机物含量较高,但含有较低的铵,这可能对不少培养物的

最新细胞工程练习题(附答案)

细胞工程练习题 一.选择题 1. 在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中,下列哪一项条件是不需 要的 A.消毒灭菌B.适宜的温度C.充足的光照D.适宜的养料和激素 2. 下列关于植物组织培养的叙述中,错误 ..的是 A.培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压 B.培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化 C.离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织 D.同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同 3.我国科学工作者曾成功地将分别属于两个科的植物----烟草和菠菜杂交成功,从而获得一种新型的烟草品种。在此过程中,下列操作不.是必需的是 A.杂交前要除去两种细胞的细胞壁 B.原生质体融合前要先脱分化 C.原生质体融合后,要选出烟草----菠菜融合细胞加以培养 D.要诱导愈伤组织进行再分化 4.下图是“白菜—甘蓝”杂种植株的培育过程。下列说法正确的是 A.所得到的“白菜—甘蓝”植株不能结籽 B.愈伤组织是已高度分化的细胞 C.上述过程中包含着有丝分裂、细胞分化和减数分裂等过程 D.诱导原生质体融合时可用聚乙二醇 5.下面是将四倍体兰花的叶片通过植物组织培养形成植株的示意图,相关叙述中正确的是 A.②阶段会发生减数分裂过程B.①阶段需生长素而③阶段需细胞分裂素C.此过程体现植物细胞具有全能性D.此兰花的花药离体培养所得植株为二倍体6.下图为将胡萝卜的离体组织在一定条件下培育形成试管苗的过程示意图。有关叙述正确的是 A. 利用此过程获得的试管苗可能为杂合子 B.①②过程中都会发生细胞的增殖和分化 C. 多倍体植株的培育需经过如图所示过程 D.此过程依据的生物学原理是细胞膜具有流动性 7. 各项培育植物新品种的过程中,不经过愈伤组织阶段的是 A.通过植物体细胞杂交培育白菜——甘蓝杂种植株 B.通过多倍体育种培育无子西瓜 C.通过单倍体育种培育优质小麦 D.通过基因工程培育转基因抗虫水稻 8. 作物新品种的过程中,常利用植物组织培养技术。下列叙述正确的是 A.培育转基因的外植体得到的新个体属于基因突变个体 ③ ② ① 四倍体兰花叶片愈伤组织胚状体植株

细胞培养总结

细胞培养学习总结 --贴壁细胞培养技术 一、细胞培养一般流程: ㈠、复苏: 1、实验前做好相关准备工作(水浴锅37℃;超净工作台的无菌环境;准备 好实验相关仪器和试剂)。 2、把冻存管从液氮灌中取出来,立即投入37℃(≦40℃)水浴锅中,晃动 冻存管,使液体在1min以内全部融解(关键步骤),用酒精棉擦拭其外壁,放到超净工作台里。 3、把上述细胞悬液吸到15ml的离心管中,加入适量培养基,(用培养基把 冻存管洗一遍,把粘在壁上的细胞都洗下来,转移时不要直接倒,以防污染),1000转离心1-3min(可根据所培养细胞调整)。 4、吸弃上清液,加适量培养基把细胞吹散成细胞悬液,转移到培养瓶中, 加适量完全培养基(常为覆盖培养瓶底面即可)。 5、标好细胞种类和日期、培养人名字等,放到CO2培养箱中培养,细胞贴 壁后再换培养基。 6、注意观察细胞生长状态,及时换液或传代。 ㈡、换液: 1、实验前做好相关准备工作(超净工作台的无菌环境;准备好实验相关仪 器和试剂)。 2、取出培养瓶,用75%酒精消毒后放入超净实验台。 3、吸弃旧培养液,用适量(如2ml)PBS(磷酸盐缓冲液)清洗细胞(可根 据细胞状态洗1-2遍,一般从没有细胞的那一侧倒掉)。 4、加入适量新鲜完全培养基,放回培养箱继续培养。 ㈢、传代:

1、实验前做好相关准备工作(超净工作台的无菌环境;准备好实验相关仪 器和试剂)。 2、取出培养瓶,用75%酒精消毒后放入超净实验台。 3、吸弃旧培养液,用适量(如2ml)PBS(磷酸盐缓冲液)清洗细胞(可根 据细胞状态洗1-2遍)。(前面步骤同换液) 4、加适当的胰蛋白酶(0.05%)(能覆盖细胞就行),放入细胞培养箱中消化 1-2min(根据不同类型细胞而定)。 5、细胞都变圆后加如入等体积的完全培养基终止消化。 6、用滴管缓慢吹打细胞,使细胞都悬浮起来成细胞悬液,吸到15ml的离心 管中,1000转离心1-3min。 7、倒掉上清液,加1-2ml完全培养基,将细胞吹散成单个细胞。 8、根据细胞浓度把细胞传到几个培养瓶中,加入适量完全培养基(一般癌 细胞一个培养瓶分2个),放回培养箱中继续培养。 ㈣、冻存: 1、实验前做好相关准备工作(预先配置好冻存液放入4℃保存,常为 10%DMSO+90%血清,配制过程中加入DMSO要缓慢,且边滴边摇;超净工作台的无菌环境;准备好实验相关仪器和试剂)。 2、取出培养瓶,用75%酒精消毒后放入超净实验台。 3、吸弃旧培养液,用适量(如2ml)PBS(磷酸盐缓冲液)清洗细胞(可根 据细胞状态洗1-2遍)。 4、加适当的胰蛋白酶(0.05%)(能覆盖细胞就行),放入细胞培养箱中消化 1-2min(根据不同类型细胞而定)。 5、细胞都变圆后加入等体积的完全培养基终止消化。 6、用滴管缓慢吹打细胞,把细胞都悬浮起来成细胞悬液,吸到15ml的离心 管中,1000转离心1-3min。(同细胞传代中步骤) 7、倒掉上清液,加入预制的冻存液制成细胞悬液,分装到灭菌的冻存管中, (注意不要加满,预留其结冰后的空间,一般1.8ml的冻存管加入≦1.5ml 的细胞悬液)。

安徽医科大学研究生细胞培养技术考试重点.doc

2014年细胞培养重点 名词解释: 1组织工程应用工程科学和生命科学的原理,开发用于恢复、维持及提高受损伤组织和器官功能的生物学替代物。从而使组织工程学研究的内容、应用范围和任务更加明确。组织工程的主要n的或内涵是对人体器官和组织修复。 2.接触抑制.指细胞相互接触后失去运动的现象。 3.肿瘤干细胞肿瘤中具有自我更新并能产生异质性肿瘤细胞的细胞。 4.平衡盐溶液简称盐溶液,集缓冲液的缓冲能力、生量盐水的等渗性以及培养液的营养供应特点于一体。在生理盐水的基础上,分别加入了无机盐、葡萄糖以及少量酚红,具有维持渗透压,调节溶液的PII值,同时能供给细胞生存所需的能量和无机离了成分的作用, 常用的BSS有PBS、Hanks液等。 5.密度抑制由于细胞密度过大,培养液营养耗尽,代谢产物过多,和生存空 间消失所引起细胞增殖抑制的现象。 6.去分化指己成熟的细胞和组织倒退分化,返回原始幼稚的状态,但是分化并不意味着完全返回胚胎时期的原始细胞状态,可重新表现出分化的特点。 7.iPS诱导多功能干细胞即诱导多能干细胞,是指体细胞经过基因“重新编排”, 回归到胚胎细胞的状态,从而具有类似胚胎干细胞的分化能力。这种方法可以不需要用人胚胎或卵母细胞,就能制造干细胞。 8.confluent汇合指细胞增殖生长相互连接成片占据所有底物面积现象。 9.细菌污染培养的细胞被细菌污染均会造成细胞受损和死亡,是细胞培养工作的大敌。 细胞发生污染时,常有培养液变浑浊和PH发生改变等现象,镜下观察细胞变形、生长缓慢或分裂相消失,以及细胞圆缩脱落等现象。常有抗生素预防该污染。 10.灭菌杀灭物体上所有微生物的方法,包括病原微生物和非病原微生物、繁殖体和芽胞。 11.单克隆抗体,指由一个B淋巴细胞克隆所产生的,只识别一种抗原决定簇的均质抗体。 问答题; 1 .试述“克隆”的基本概念并举例说明其在细胞培养工作中的实际意义。 克隆(Clone):指由从一个共同的祖先通过无性繁殖而来的、遗传上同一的细胞群或后裔;Clone也可作动词用,用于指细胞形成克隆细胞群的过程,即从群体中把单个细胞分离出来, 通过增殖形成细胞群或后裔的过程;

南方医科大学研究生导师遴选条件

附件2 南方医科大学研究生导师遴选条件(摘要) 一、博士研究生指导教师遴选条件 (一)基本条件 1、具有教授(或相当)专业技术职务。 2、原则上申报者年龄不得超过55周岁。 3、年龄在45周岁以下拟新增博士研究生指导教师者,必须具备博士学位。 4、现担任硕士研究生指导教师,至少已完整培养过一届硕士研究生。 5、我校科技创新建设需要,招聘来校的有特色专长的高级职称人员,如高级工程师。 (二)学术学位博士研究生指导教师业务条件 1、以第一负责人至少在研1项国家级课题(含国家自然科学基金重大项目、“973”、“863”项目分题负责人),可直接支配在研课题经费(含横向课题经费和单位配套经费)总额不少于30万元。 2、申请人近三年以第一作者或通讯作者发表单篇SCI影响因子在2.0(含)以上或累计影响因子不低于5.0的科研论文,或被EI收录科研论文(不含学术会议)不少于5篇;或获省(部)级科技成果一等奖或国家科技成果二等奖(含)以上奖励(前三作者)。 (三)专业学位博士研究生指导教师业务条件 1、以第一负责人至少在研一项省(部)级课题,且可直接支配科研课题经费(含横向课题经费和单位配套经费)总额不少于20万元。 2、近三年以第一作者或通讯作者在核心期刊上发表论文不少于5篇,或发表SCI科研论文累计影响因子不低于2.0。 3、具备鲜明的医疗技术专业特色,社会影响大,知名度高,担任本学科省(部)级专业学会副主委(含)以上职务,或获省(部)级以上医疗成果奖励或担任省级专业技术特色项目负责人。 (四)破格申报学术学位博士研究生指导教师业务条件

1、下列人员可破格申报学术学位博士研究生指导教师 (1)具有博士学位的副高职称人员。 (2)近两年因学科发展需要,学校引进的具有博士学位和副高以上职称的海外高层次人才或优秀留学回国人员。 2、副高职称人员须具备以下条件 (1)现任硕士研究生指导教师,至少已完整培养过一届硕士研究生。 (2)以第一负责人在研国家自然科学基金项目(含国家自然科学基金重大项目、“973”、“863”项目成员,且为分题负责人),可直接支配在研课题经费不少于50万元。 (3)近三年以第一作者或通讯作者发表单篇SCI影响因子在5.0以上或累积影响因子不少于10.0的科研论文,或EI收录科研论文(不含学术会议)不少于5篇。 3、海外高层次人才或优秀留学回国人员须具备以下条件 (1)近五年以第一作者或通讯作者发表单篇SCI影响因子在5.0以上或累积影响因子不少于10.0的科研论文,或EI收录科研论文(不含学术会议)不少于5篇。 (2)主持在研课题经费不少于50万元。 二、硕士研究生指导教师遴选条件 (一)基本条件 1、具有副教授(或相当)以上专业技术职务。 2、具有硕士(含)以上学位。近三年,取得下列成绩之一的人员,可以放宽硕士学位条件要求: (1)以第一负责人承担国家级科研项目者; (2)国家科技成果二等奖(前三作者)以上获得者; (3)以第一作者或通讯作者发表SCI收录的科技论文累计影响因子3.0以上者。 3、年龄不超过55周岁。 (二)学术学位硕士研究生指导教师业务条件

(完整word版)细胞工程 期末考试复习题目

细胞工程期末考试复习题目 细胞工程填空:20个ⅹ分=10分选择:10个ⅹ2分=20分名词:10个ⅹ6分=30分简答:5个ⅹ6分=30分论述: 1个ⅹ10分=10分第一章绪论1、细胞工程的定义及特点?细胞工程:是指主要以细胞为对象,应用生命科学的理论,借助工程学原理与技术,有目的地利用或改造生物遗传性状,以获得特定的细胞,组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。细胞工程的特点:前沿性:现代生物技术的热点争议性:新技术给伦理道德带来的冲击综合性:多学科交叉应用性:工程类课程,重在产品与技术第二章细胞培养的设施与基本条件:1、什么是细胞及组织培养?组织工程:习惯上繁殖所有的体外培养,即器官培养,组织培养和细胞培养的总称。其本

意是指从活的机体中去取出器官、组织或细胞,模拟机体内生理条件,在体外建立无菌、室温和一定营养条件等,使之生长和生存,并维持其结构和功能能的技术称为组织培养。细胞培养:将组织块用机械方法或酶解法分离成单个细胞,做成细胞悬液,再培养于固体基质上,成单层细胞生长,活在培养液中呈悬浮转肽培养的技术称为细胞培养。2、了解细胞培养实验室的基本规划及相关注意事项?实验室规划:⑴准备室:培养用具清洗、消毒和做实验准备的场所,一般建在通风和光线充足的地方。⑵缓冲间:保护操作室的无菌环境,避免空气对流。 ⑶操作间:要求无菌。最好设在阴面,防止室温过高;天花板高度不超过2米,保证紫外线有效杀菌效应;门用拉门,避免空气流动。室内天花板、地板和四周墙壁要光滑无死角,要镶瓷砖或涂油漆,便于清洗与消毒,不易在墙角推挤灰尘。3、细胞培养的设备有

哪些?有何基本作用⑴超净工作台①最好安装在无尘室内,最好在无菌间,避免过多灰尘使滤器阻塞,降低净化效果,缩短使用寿命。②新安装的或长期未使用的工作台,工作前必须对工作台和其周围环境用真空吸尘器或不产生纤维的工具进行清洁工作,在采用药物灭菌法或紫外线灭菌法进行灭菌处理。③每次使用时,应先用75%酒精擦洗台面,并进行30~50min紫外线灭菌灯处理净化工作区内累积的微生物,在关闭紫外灯后,应启动送风机使之转运2min后在进行培养操作。④净化工作区内不应存放不必要的物品,以保持洁净气流不受干扰⑤高效过滤器3年更换一次。请专业人员操作,以保持密封良好。定期将粗过滤器中的过布拆下清洗。⑥每次使用净化台要即使清楚工作台面上的物品,并用酒精擦洗台面使之始终保持洁净。⑵CO2培养箱:①一定浓度的CO2生长,尤其是原代培养和单

HUVEC细胞培养心得

HUVEC 培养交流讨论: 各位仁兄,我查了一下,关于HUVEC 的贴子有几千篇,不知有那位知道的多的能给总结一下?我想应该有以下几 1、讲清HUVEC 与ECV304区别 2、HUVEC 原代与细胞株的关系、区别问题 3、能否总结一下国内有哪些单位可以买到HUVEC ?是原代还是细胞株? 4、培养中到底添加ECGS 还是ECGF ? 5、有些推荐细胞的应该讲清自己的是原代还是细胞株,能养多少代。 希望能抛砖引玉。 票数+收藏2回帖16浏览2686我也要发帖 举报 ? 浙江医院招聘浙江省老年医学研究所(临床医学) ? 请教关于HUVEC 细胞的培养 ? 求购HUVEC ? 【互助小组】正在养或已经养过HUVEC 的请进。 docter_zhao ? 0 2004-08-03 15:14 消息 引用 分享 huvec 必需加ECGS 及肝素,否则很难生长增殖 举报 ? zjqlucky ? 15 ? 5 ? 7 2004-08-03 17:27 消息 引用 分享 docter_zhao wrote: huvec 必需加ECGS 及肝素,否则很难生长增殖 这个好像也未必吧,我养的原代的huvec 只用20%胎牛血清的RPMI1640也长的很好呀,只是传ecgs 能传这么多代吧 票数+收藏1 举报 ? 2004-09-08 00:20 消息 引用 分享 我们曾试过用m199或DMEM 加20%胎牛血清原代培养,感觉效果不佳,后来加了ECGS 及肝素,发现细胞长得能有改变 票数+收藏1 举报 引用 分享 huvec 是脐静脉内皮细胞,不是那么难养,细胞可以从脐带自己提取,卖现成的细胞株也不贵,用内皮细胞的配套培email-sinian19988@https://www.360docs.net/doc/4b4079735.html,

组织细胞培养技术课程教学大纲

《组织细胞培养技术》课程教学大纲 课程编码:26990214 课程名称:组织细胞培养技术 英文名称:Cell and tissue culture technology 开课学期:第二学期 授课对象:统招硕士 开课院系:基础医学院 开课教研室:病理学与法医学教研室 学时:40 (其中理论学时:20 实验学时:20 ) 学分:0.5 课程类型:公共选修课(公共必修课/选修课/专业课) 选用教材:自编教材《组织细胞培养技术》 主要参考书:⑴鄂征主编. 组织培养和分子细胞学技术.北京:北京出版社,1994。⑵施新猷主编.实验动物学. 北京:人民军医出版社,2000。 大纲编写人员:张宏颖副教授 一、课程目的与任务 组织细胞培养技术是研究组织和细胞的技术方法,被培养的组织和细胞也是实验研究的对象。本课程是医学临床与基础专业硕士研究生的公共选修课程之一,在医学各专业高级人才培养中具有重要地位。本课程系统介绍了组织和细胞培养技术有关的概念、基本原理、操作程序和关键技术,及其在医学研究和临床实践中的应用,该领域的研究历史和最新发展动态;转基因动物技术的概念、研究进展、技术方法、建立方法、应用及前景展望。旨在提升医学专业硕士研究生的知识结构,掌握现代生物技术中的基本实验技能,培养学生开拓创新的能力,适应未来学科发展对人才的需求。 二、教学基本要求 本课程系统地论述了组织细胞培养技术的理论和方法,简要介绍了转基因动物技术及应用。要求学生全面系统地掌握组织细胞培养的操作过程,了解各种操作的基本原理;有判定细胞生长好坏和是否发生污染的能力;熟悉体外培养细胞的生存条件、细胞的生物学性状和与此有关的基本理论知识,了解国内外细胞培养的最新动态和研究进展,了解转基因动物技术的概念、研究进展、技术方法、建立方法、应用,并能自行根据需要设计实验,运用所学技术解决科研中的实际问题,提高学生综合分析问题,系统利用专业知识的综合素质。 三、各章节内容及学时分配 第一章组织培养技术的基本理论知识(4.5学时) 目的与要求 1、掌握组织培养基本概念;了解对组织培养的评价;熟悉对组织培养工作者的要求和工作方法。 2、了解体内外细胞的差异与分化;掌握培养细胞形态分类及培养细胞的大体形态;熟悉组织培养 细胞的生长和增殖过程。 3、熟悉培养细胞生存环境和条件。

2015-2017南方医科大学心理学考研历年复试分数线

无论是准备报考心理学院校或者是已经战过心理学考研在等结果的同学,想必复试分数线都是大家非常关心的一个问题。今天,力比多学院的小编将2015年至2017年南方医科大学心理学考研的历年分数线整理出来,方便大家查看参考。 一、复试分数线 南方医科大学应用心理学考研分数线不属于34所自划线院校,复试分数线参照国家线即可,以下是历年国家线。 在此祝愿大家如其所愿顺利通过浙江理工大学心理学考研初试。 二、复试指导 力比多学院小编还为大家整理出,复试时所需要的材料,具体如下:

应届毕业生 1、身份证明:包括初试准考证、本人有效身份证原件及复印件、学生证原件及复印件。 2、政治审核表:档案单位一般应与报名时填报的学习单位一致,由考生所在院系填写并盖章,该表需要在院校网站下载。 3、本科成绩单及复印件:需加盖学校公章,在复试时单独交至各学院。 4、加分证书:四、六级等相关证书及操作技能证书等。 5、一寸彩色免冠照片:面试时进行体检可能需要。 6、撰写材料:面试简历、自我介绍以及给导师的信件等,不要只准备一份,每一位老师一份。 往届毕业生 1、身份证明:包括初试准考证、本人有效身份证原件及复印件、毕业证和学位证原件及复印件。 2、政治审核表:档案单位一般应与报名时填报的工作单位一致,由考生所在单位人事部门或人才交流中心填写并盖章,该表需要在院校网站下载。 3、本科成绩单及复印件:可以向档案所在单位申请,复印档案中的本科成绩单,也可以从本科学校教务处打印成绩单。 4、工作中的成果:可能会成为加分项哦。 5、一寸彩色免冠照片:面试时进行体检可能需要。 6、撰写材料:面试简历、自我介绍以及给导师的信件等,不要只准备一份,每一位老师一份。力比多学院libidos有相关的写作院校定向辅导 同等学力 1、学历证书:证书以及同等学力证明材料。 2、其他与应届毕业生相同,按照应届毕业生的标准准备。 文档来源:力比多学院网站(https://www.360docs.net/doc/4b4079735.html,)版主整理分享

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