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本项目经费合计***万元，其中直接费用：***万元，间接费用***万元。具体预算说明如下：
（一）直接费用
1．设备费：3.8万元。
（1）恒温摇床：1.8万元
***蛋白表达、纯化系统的优化和获得大量的***蛋白是进行***药效学，临床药代动力学和临床前安全性评价的重要前提，也是本项目实施过程中的重要环节。而在蛋白表达和纯化过程中，首先需要利用恒温摇床进行摇菌，进而在***中获得重组蛋白。因目前本课题组内较小，同时使用较频繁，为了保证本项目的顺利实施，计划添置水浴恒温摇床一台供***纯化表达专用，品牌为***，单价约18000元。
(2) -40℃低温冰柜：1.6万元。
本项目计划获得大量的***蛋白用于***药效学，临床药代动力学和临床前安全性的评价。为了保证本项目实施过程中纯化获得的***蛋白的存储，本项目计划添置*** LW-50L262 -40℃低温冰柜一台，存储不同批次的***蛋白，单价约1.6万
（2）冰箱：0.4万元。
在进行***药效学、临床前药代动力学和临床前安全性评价过程中涉及大量的动物实验，需要储存大量的动物组织样本，本项目计划添置*** BED-578WEPF冰箱一台，专门储存动物实验的组织样本，单价约0.4万元。
2. 材料费：68.6万元。
(1)蛋白纯化填料：合计24万元.
利用带有***标签蛋白纯化填料和样品纯化填料***对带***标签的重组表达蛋白进行纯化，同时利用内毒素检测试剂盒去除内毒素，获得不含内毒素的纯化蛋白。
（2）凝血酶：4.50万元。
用于将已纯化的带***标签的***进行酶解，以除去***标签，获得纯化蛋白。
（3）内切酶和连接酶：2.16万元。
用于***纯化工艺的优化，对***的关键基因进行修饰，基因克隆及表达。包括***Ⅰ、***Ⅰ、***Ⅲ、***Ⅰ、***Ⅰ等5种常用内切酶及***连接酶，用于构建重组表达质粒进行双酶切，***公司产品，500U/支，各约需6000U。
（4）实验动物费：合计15.85万元
A．清洁级BALB/c小鼠或C57BL/6小鼠：共5.56万元。
清洁级C57BL/6小鼠90只(9大组，每组10只)，用于构建***模型（EAE）实验，观察***蛋白及******对自身免疫***模型（EAE）的治疗效果，小鼠单价25元/只，饲养费1.2元/天，需要饲养30天，共25元/只×90只+1.2元/天×30天×90只=0.55万元。
清洁级BALB/c小鼠1080只(9大组，每小组分12小组，每小组10只)，观察*** 及******给药后在小鼠体内的吸收、分布、代谢和排泄情况，小鼠单价25元/只，饲养费1.2元/天，需要饲养3天，共25元/只×1080只+1.2元/天×2天×1080只=2.96万元。
清洁级******小鼠40只(4大组，每组10只)，观察*** 及******给药后在小鼠体内的急性毒性实验，小鼠单价25元/只，饲养费1.2元/天，需要饲养7天，共25元/只×40只+1.2元/天×7天×40只=0.14万元。
清洁级BALB/c小鼠40只(4大组，每组10只)，观察***纯化蛋白及******蛋白刺激对BALB/c小鼠的长期毒性反应，小鼠单价25元/只，饲养费1.2元/天，需要饲养180天（6个月），共25元/只×40只+1.2元/天×180天×40只=0.86万元。
清洁级BALB/c小鼠290只，观察***纯化蛋白及******蛋白刺激对BALB/c小鼠神经系统的影响，小鼠单价25元/只，饲养费1.2元/天，需要饲养3天，共25元/只×290只+1.2元/天×3天×290只=0.82万元。
清洁级BALB/c小鼠80只，观察***纯化蛋白及******蛋白刺激对BALB/c小鼠免疫原性和免疫毒性实验，小鼠单价25元/只，饲养费1.2元/天，需要饲养3天，共25元/只×80只+1.2元/天×3天×80只=0.23万元。
B. 清洁级SD大鼠，用于构建******大鼠模型：共0.58万元
清洁级SD大鼠90只（9大组，每组10只），观察***蛋白及******对自身免疫性关节炎模型大鼠的治疗作用，大鼠单价28元/只，饲养费1.5元/天，需要饲养30天，共28元/只×90只+1.2元/天×30天×90只=0.58万元。
C. Beagle犬24只，用于安全性药理实验，beagle犬单价3000元/条，饲养费30元/天，需要饲养30天，共3000元/条×24只+30元/天×30天×24条=9.36万元。
D. 中国仓鼠80只（8大组，每组10只），评价重组Sj16及******蛋白在哺乳类体外培养细胞中引起的染色体损伤。中国仓鼠单价25元/只，饲养费2.0元/天，需要饲养30天，共25元/只×80只+2.0元/天×30天×25只=0.35万元
（5）细胞因子检测试剂盒：合计3.3万元。
主要用于***和S******药效学研究中关于治疗自身免疫性肠炎模型和自身免疫性脑脊髓炎模型实验中血清中相关细胞因子的检测，主要包括IL-1β、TGF-β、IL-6、IL-4、IL-5、IFN-γ、IL-12和TGF-β检测试剂盒。
（6）常用生化试剂：合计7.09万元.
主要用于配置培养基、琼脂糖凝胶电泳缓冲液、SDS-PAGE蛋白电泳液以及其他常规生化试剂等。
（7）常规耗材：合计11.71万元.
主要用于常规分子克隆、表达纯化以及动物实验中使用的耗材。
3、测试化验加工费：19.5万元
（1）HPLC检测费用：4.0万元
用于***及******药代动力学研究过程中利用HPLC观察*** 及******给药后在小鼠体内的吸收和分布状况。在******学院进行，200元/h，大约需要使用200h，合计4.0万元。（2）免疫病理切片制作：3.0 万元。
主要用于观察***及******对于治疗******肠炎模型和自身******模型实验中，通过免疫病理切片观察实验动物心、脑、肝、肾等主要脏器的病理变化。其中自身免疫性肠炎模型共9组，每组取5只小鼠，脊髓颈、胸、腰骶段HE染色和******髓鞘染色，每只小鼠每个部分切5张片子，共675片；自身免疫性肠炎大鼠模型共9组，每组取5只小鼠，HE染色镜下观察结肠粘膜损害程度，每只小鼠切5张片子，共225片；急性毒性实验和长期毒性实
验中HE染色观察***及******处理后对小鼠主要脏器的影响，每个实验共4组，每组取5只小鼠，每只小鼠每个部分（心、脑、肝、肾、脾等）切5张片子，共200片；免疫毒性实验及免疫原性实验中，HE染色观察***及******处理后对小鼠胸腺和脾脏的影响。共8组，每组取5只小鼠，每只小鼠切5张片子，共200片。共1200片。委托中山大学******教研室完成，25元/片，合计25元/片×1200片=3.0万元。
（3）测序及引物设计费：2.05万元。
用于在***蛋白纯化技术优化过程中对***关键氨基酸进行优化设计引物，进行PCR测序，主要委托英潍捷基（上海）贸易有限公司完成.
普通引物约50对，主要委托******贸易有限公司完成，1.2 元/碱基，每对引物平均38-45 碱基，约50 元每对/OD，大约每对引物需要5 OD，大约需要合成50对，总共50 元/对/OD×50对×5 OD=1.25万元。
平均40元/样本(含PCR产物测序前纯化)，大约需检测200个样本，40元/样本×200样本=0.8万元。
（4）多肽合成费用：4.0万元
用于合成标准化的******，委托上海******公司合成，400元/碱基/g，为了满足本实验的需要，本项目在******的药效学，药代学和临床前安全性评价中，大约需要合成5g多肽，400元/碱基/g×20碱基×5g=4.0万元。
（5）电镜超微结构处理和观察费：0.8万元
此部分内容计划在***的工艺优化时将原始制作菌种进行电镜超微结构观察，计划观察10例样本。计算依据为；超薄切片￥80/例，染色￥30/例，电镜观察￥350/小时，每例样本设计观察2 小时，350 元/小时×2 小时+30 元/例+80 元/例=810 元/例，10例样本共计0.8万元。执行部门为中山医学院电镜室。
（6）多道生理记录仪使用费用：2.0万元
主要用于***及******一般药理学实验中，记录家犬心血管系统和呼吸系统给药前及给药后的血压、心电图以及呼吸等各项参数。在中山大学药理学实验室完成，200元/h，约需要使用100h，共2.0万元。
（7）MALDI-TOF-MS检测：2.0万元
主要用于鉴定纯化的***的纯度。委托******大学******学院完成，1000元/样本，约20样本，共2.0万元。
（8）实验相关其他测试费用：1.65万元。主要用于与课题相关的紫外可见分光光度计检
测，基因测序，ELISA检测，蛋白纯度检测等，在中山大学******学院公共实验平台完成。
4. 燃料动力费：无
5. 差旅费：合计
6.7万元
主要用于本项目完成过程中在广州市内和外埠进行实验，去国家食品药品监督管理局递送审批材料以及参加每年国内******学年会或******防治学术交流研讨会等过程中发生的交通费、住宿费、伙食补助费、公杂费。
1)外埠交通费：去国家食品药品监督管理局递送审批材料或者去广东省外其他学校实验发
生的外埠交通费、住宿费以及伙食补助等，每年2次（学生），每次1人，每人往返交通费（火车）1000元，住宿费200元/人，伙食补贴80元/天，市内交通费50元/天，每次3天左右。合计[1000+（200+80+50）×3天] ×1人×2次×3年=1.2万元。
2）参加中国******学会全国******学学术大会、国内中华预防医学会******学年会、中国动物学会******学研讨会或中华医学会******学学术年会（一般在北京/上海）：每年2次，每次参加2人，会期3天，交通费平均往返机票约2000元，会议注册或会务费1000元/人，住宿费平均每天250元/人，伙食补贴100元/天，市内交通费80元/天。合计2次×2人×[2000+1000+（250+100+80）×3天]×3年=5.14万元。
3）市内交通费：用于本项目在完成过程中小规模研讨会，在中山大学其他校区或其他学校实验室或平台实验、送样、取动实验动物或递送文字材料等的交通费等：0.12万/年×3次=0.36万元。
合计1.2万元+5.14万元+0.36万元=6.7万元。
6.会议费：5.0万元。
本项目进行期间，用于承办项目成果专家指导会议和项目成果鉴定会，包括会议场地费、会务费，资料费等。
1）项目成果鉴定会会议场地，资料费：用于本项目完成前对本项目中***作为生物制品进行申报的专家指导会议和最后项目成果鉴定会。每年举行1次，会期2天，每次预计参加人员10名（包括项目组成员5人，学生3人，以及2名专家）。会议室租用费用：7000元/天，会议资料费500元/次，合计（7000元/天+500元）×3次=2.25万元。
2）会议/会务费：
①每次邀请2名专家对本项目进行指导，会期2天，交通费平均每人往返机票2500元，
住宿费每天300元/人，市内交通补贴100元/次。(2500+300×2+100)×2×3年=1.92万元。
②与会人员餐费：20元/人/餐×4餐×10人=800元。合计800元×3次=0.24万元。
3）其它：0.59万元
承办会议时布置会场费用等。
7. 国际合作与交流费：4.0万元。
用于在项目研究开发过程中，项目组研究人员参加美国******学术研讨会，拟派2人，费用包括飞机票、签证费、住宿费和注册费等。
费用包括：[机票（12000 元）+签证保险费（2000元）+食宿（1000元×3天）+会议注册费3000元/人]×2 人=4.0 万元。
8.出版/文献/信息传播/知识产权事务费11.9万元
用于SCI论文发表，书籍购买、文献检索、资料费，新药申请、专利申请与维持费以及知识产权顾问费等。
（1）学术论文发表费用：合计4.0万元。
国际期刊平均8000元/篇，三年共计4篇，计3.2万元；国内期刊平均2000元/篇，三年共计4篇，计0.8万元。
（2）论文、文献印刷费、上网费、文献资料费：合计3.6万元。
①文献、资料印刷费：文献打印、印刷0.5万元×3年=1.5万元。
②上网费：5台×50元/月/台×12月/年×3年=0.9万元。
③文献资料费：其他用于购买相关中外专业书籍等费用，计0.4万×3年=1.2万元（3）专利费用：合计2.0万元。
①专利申请费：申报2项国家发明专利，包括申请费1000元/项，审查费2500元/项，
专利申请代理费5000元/项，（1000+5000+2500）元/项×2项=1.7万元。
②专利维持费：500元/项×2项×3年=0.3万元
（4）新药申请费用：合计1.5万元。
包括申请费5000元/项，审查费5000元/项，申请代理费5000元/项，即5000+5000+5000 =计1.7万元。
（5）查新费用：合计0.26万元。