促血管生成素-2(Ang-2)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达与肿瘤血管生成的关系

促血管生成素－２（Ａｎｇ－２）在非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）中

的表达与肿瘤血管生成的关系

【摘要】目的检测促血管生成素-2(Ang-2)在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达,研究它与血管内皮生长因子（VEGF）表达及微血管密度(MVD)的关系,探讨其在非小细胞肺癌血管生成中的作用。方法用免疫组化法检测37例非小细胞肺癌组织及15例癌旁正常组织中Ang-2、VEGF及CD34相关抗原的蛋白表达情况,分析各个指标在各组表达的差异，研究各个指标的相互关系。结果非小细胞肺癌组织中Ang-2 表达阳性率、VEGF记分和微血管密度计数(MVD)均明显高于癌旁正常组织; Ang-2表达与VEGF和MVD表达有明显相关性(r分别0.509和0．615,P＜0．05) ; 非小细胞肺癌中Ang-2表达阳性者与Ang-2表达阴性者相比, VEGF记分和MVD显著不同(P＜0．05);Ang-2表达与非小细胞肺癌的淋巴结转移及肿瘤的分级有关(P＜0．05)。结论Ang-2与非小细胞肺癌的浸润、进展密切相关；其对非小细胞肺癌肿瘤血管生成有促进作用，这种作用具有明显的VEGF依赖性。

【关键词】非小细胞肺癌；促血管生成素；血管内皮生长因子；微血管密度

肿瘤的生长、侵袭和转移依赖于肿瘤性的血管生成。在体内,肿瘤性的血管生成受到多种血管生成因子的调控。促血管生成素-2是在血管生成过程中起重要作用的蛋白质[１],主要作用是维持血管内皮细胞稳定及促进血管重构，其在肿瘤血管新生过程中作用显著。近来研究发现，Ang-2的促进肿瘤血管生成作用可能与VEGF因子的表达密切相关。为此我们应用免疫组化的方法，检测Ang-2、VEGF在非小细胞肺癌(NSCLC)及相应癌旁正常组织表达情况，探讨Ang-2于肿瘤血管生成的关系。

1 材料与方法

1．1 标本及试剂采用郑州大学第二附属医院2006年10月至2007年6月非小细胞肺癌手术切除标本37例, 患者术前均未经放疗及化疗。本组男20例,女17例，年龄44～71岁,平均（57．76±7．01）岁，＜60岁24例, ≥60岁13例。经病理证实为鳞状细胞癌21例,腺癌16例。有肺门、纵膈淋巴结转移23例，无淋巴结转移14例；TNM分期：Ⅰ期14例、Ⅱ期16例、Ⅲa期7例。同时随机选取其中癌旁5 cm以远正常无明显炎症肺组织15例为正常对照。所有标本均经体积分数10%中性缓冲福尔马林固定,石蜡包埋,切片处理。主要试剂兔抗人Ang-2、兔抗人VEGF抗体、兔抗人CD34单抗、免疫组化SABC试剂盒DAB 显色试剂盒均购自武汉博士德公司。

1．2 方法采用免疫组织化学SABC法，常规脱蜡，水化；3％H2O2 -甲醇消化内源性过氧化物酶；煮沸修复抗原；10 %山羊血清封闭；一抗(均为1∶100)4℃冰箱培育过夜；二抗、SABC反应各20 min(1：100，20～37℃)；DAB