第35讲《细胞工程》 一轮复习

除应用植物 获得杂种 细胞杂交手 细胞、 段外，还有 制备 灭活病毒 单克隆抗 体
动物细 细胞膜的 胞融合 流动性
（四）单克隆抗体的制备 单克隆抗体：
单个B细胞克隆产生化学性质单一、特异性强的抗体
单克隆抗体的特点： 抗原 特异性强、灵敏度高， 可大量制备 反复注射动物 传统方法制备抗体的特点： 产量低、纯度低，且制备抗 体的特异性差。 从动物的血清中分离抗体
动物细胞培养、 2.动物细胞工程技术有：______________
单克隆抗体制备 动物细胞核移植 动物细胞融合 ___________ 、___________ 、____________ 。
动物细胞培养 ____________ 是动物细胞工程的基本技术
（一）植物组织培养
1、概念
植物组织培养就是在无菌 ____和人工控制 _______条件下，将 _______ 离体 的植物器官、组织、细胞，培养在人工配 培养基 制的______ 上，给予适宜的培养条件，诱导其产 生 ___________，最终形成完整的植株。 愈伤组织、丛芽 2．原理：______________________ 植物细胞的全能性 。
C.小鼠腺细胞的增殖
D.花药离体培养获取单倍体植株
D
起点：离体细胞
终点：完整个体
3．过程：
离体的植物器官、 脱分化 愈伤 组织或细胞 激素、一定的营养、 _____ 组织 避光 再分化 胚状体或丛芽→植物体 激素、 __ 光
注意：
(1)对外植体要进行消毒处理，而对各种器械要彻底灭菌。
(2)脱分化形成愈伤组织的过程不需要光，再分化过程需要
（三）植物细胞工程的实际应用
微型繁殖：保持优良品种的遗传特性
，高效 快速地实现大量繁殖 (1)植物繁殖 作物脱毒：利用 分生区 附近(如茎尖)组织培养 的新途径 获得脱毒苗 胚状体、不定芽、 顶芽和腋芽 人工种子：植物组织培养得到的 _______________ 等包上人工薄膜制成
(2)作物新品种的培育
细胞的全能性：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细 胞，都具有发育成完整个体的潜能。
细胞具有全能性的原因：
生物体的任何一个细胞都包含本物种的 _____________ 全部遗传信息
全能性表达的条件：处于________ 离体 状态，提供一定
的营养、________ 激素 和其他适宜外界条件。
在特定的时间和空间条件下，基因选择性的表达为各种 组织器官。
为保证培养过程中避免细菌污染，需要对培养 消毒 灭菌 基________ ，对外植体进行__________ ，进行 实验前，要用______________ 擦手消毒。 70%的酒精
（二）植物体细胞杂交
不同种的植物体细胞 在一定条件下融合 将 _______________________, 成 杂种细胞 ，并将其培养成 新的植物体
36.5 ± 0.5 ℃ 7.2～7.4 ③温度和pH 温度__________，pH___________ ④气体环境 95%空气+5%CO2 将培养瓶置于___________________ 混合气体的 细胞代谢所必需的， 培养箱中进行培养。O2是________ CO2的主要作用是_________________ 维持培养液的pH 。 3、细胞动物细胞培养的原理： 细胞增殖 4.应用：生产生物制品，如干扰素、疫苗、单克 隆抗体；检测并判断某毒性物质毒性的大小；临 床医学研究；基因工程。
原生质体
杂种 融合的原 细胞 生质体
脱 分 化
愈伤 组织
。
再 分 化
杂种 植株
原生质体
植物细胞的融合
植物组织培养
(1)去壁：酶解法，所用酶为_____________________ 纤维素酶和果胶酶 离心、振动、电激 (2)诱导原生质体融合：物理法—________________ 等 聚乙二醇 化学法——常用___________ (PEG)作诱导剂。 (3)植物体细胞杂交成功的标志： 杂种细胞再生出细胞壁 _____________________ 远缘杂交不亲和的障碍 (4)优点：克服_______________________________ 。 (5)原理：_____________________________________ 细胞膜的流动性、植物细胞的全能性
3、去除卵母细胞核的方法 显微操作法：用微型吸管可吸取细胞核和第一极体
（三）动物细胞融合
过程，又称
(1)概念：指两个或多个动物细胞结合成一个细胞的
细胞杂交 。
细胞膜的流动性 (2)原理：
(3)融合方法： 聚乙二醇
(4)意义
、灭活病毒 _________、电激等。
①打破种间关系，克服远缘杂交不亲和的障碍。
（二）动物细胞核移植 ---克隆
动物细胞核移植是将动物一个细胞的细胞核，移入一个 去核卵母细胞 新的胚胎 ，再 ___________，使其重组并发育成一个_________ 发育成动物个体。 动物细胞核具有全能性 (1)原理：__________________________ 。 (2)分类： 胚胎细胞核移植和体细胞核移植 电刺激诱导融合 (3)过程：
离体的器官、 组织或细胞 细胞排列疏松无规则，高度液泡化，无定形状 态的薄壁细胞
按物理性质划分，植物组织培养所用培养基为 固体培养基 _________。配制的培养基中要有植物生长发育 生长素、细胞分裂素 所需的全部营养，其中____________________ 激素的用量比例对器官发生起决定作用.
（一）动物细胞培养
2.培养条件 ①无菌无毒的环境②营养 ③温度和pH④气体环境 ①无菌无毒的环境 对培养液和培养用具进行无 一定量的抗生素 菌处理，还要在培养液中添加_____________ ，以 培养过程中的污染 防________________ ，此外，应定期跟换 培养液 ，以便__________________________ 清除代谢产物，防止细胞代谢 _________ 产物积累对细胞自身造成的危害 ______________________________。 ②营养 培养液中要加入糖、氨基酸、促生长因子、无机 人们对细胞所需的营养物 盐、微量元素等。由于____________________ 质还没完全搞清楚 _____________，因此，在使用合成培养基时， 血清、血浆等天然成分 。 通常需要加入_____________________
物理或化学方法激活受体细胞 （如电脉冲、钙离子载体、乙 醇、蛋白质合成抑制剂）
Ａ母绵羊 卵母细胞
Ｂ母绵羊 乳腺细胞
多 莉 羊 的 培 育 过 程
细胞质 细胞核移植 早期胚胎
细胞核 重组细胞
胚胎移植
C母绵羊子宫（代孕母体）
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
妊娠 分娩 多莉羊
1、通过动物体细胞核移植技术获得的克隆动物， 其遗传物质是否和供核细胞的遗传物质完全一样？ 不完全一样。细胞核遗传物质一样，但细胞质 遗传物质和提供去核卵母细胞的个体几乎完全一样 2、选择卵母细胞并将其培养到MⅡ中期注入细胞核 的原因： 卵母细胞体积大，易操作，含有促使细胞核全 能性表达的物质和营养条件
“白菜—甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种， 它具有生长期短、耐热性强和易于储藏等优点。如图是“白 菜—甘蓝”的杂交过程示意图。以下说法正确的是
C
A.除去细胞壁形成原生质体，可运用的酶是纤维素 酶、淀粉酶和果胶酶 B.通常可诱导上述原生质体相互融合的方法是PEG 和灭活的病毒诱导 C.杂种细胞形成的标志是诱导产生了新的细胞壁 D.愈伤组织形成“白菜—甘蓝”植物体必须经过脱 分化和再分化两个过程
(6)遗传物质的变化
杂种植株具备两种植物的遗传特性。 染色体组数＝两种植物体细胞内染色体组数之和 植物体细胞杂交形成的杂种植株，有几个染色体组就称 为几倍体。
若两个不同品种的植物细胞A、B进行融合，A含 有2X条染色体，2个染色体组，基因型为Aabb，B含有 2Y条染色体，2个染色体组，其基因型为ccDd，则新植 2X＋2Y ， 株应为_____ 四 倍体，其体细胞中染色体数为_________ AabbccDd 基因型为______________ 。 从中不难看出，两个细胞融合成一个细胞，不管是染色 体数、基因型还是染色体组都采用直接相加的方法。
为什么体内细胞未表现全能性？
细胞全能性大小的比较
①受精卵 > 生殖细胞（精、卵） > 体细胞 ②体细胞：植物细胞 动物细胞
>
③分化程度低的细胞
>分化程度高的细胞 ④ 分裂能力强的细胞 > 分裂能力弱的细胞
例：下列现象，能作为细胞具有全能性观点提 供证据的是（ ）
A.壁虎断尾后重新长出尾部 B.用体外培养的皮肤治疗烧伤病人
遗传物质 3．目的：按照人的意愿来改变细胞内的______
或获得___________ 细胞产品。 4．分类：根据操作对象的不同，分为 动物细胞工程 植物细胞工程和______________ ______________ 。
细胞工程的主要技术有哪些？
植物组织培养 1.植物细胞工程主要技术有：____________ 、 ________________ 植物体细胞杂交。 植物组织培养 ____________ 是植物细胞工程的基本技术
第34讲
细胞工程
细胞工程的概念 p31 细胞工程是指应用细胞生物学和 分子生物学的原理和方法，通过细胞 水平或细胞器水平上的操作，按照人 们的意愿来改变细胞内的遗传物质或 获得细胞产品的一门综合科学技术。
细胞工程的概念：
1．原理和方法：应用细胞生物学和分子生物学
的原理和方法。 细胞器 细胞 水平或______ 2．操作水平：________ 水平。
动物细胞工程
动物细胞工程
1.过程： 贴满瓶壁的细胞需要用________ 胰蛋白酶 等处理，然后分瓶继续培养，这样 的培养称为传代培养 ________。一般来说， 传代培养至10—50代左右时，增殖 细胞核型 会 会逐渐减慢，部分__________ 发生变化。当50代之后，少部分细 不死性 ，目前使用的或 胞获得________ 冷冻保存的通常为____________ ， 10代以内的细胞 原因： 以保持细胞正常的二倍体核型 细胞培养的特点： 细胞贴壁、细胞的接触抑制