分子生物学考试题
1.核小体结构？
2.核糖体活性位点？
3.DNA二级结构？
4.维持DNA双螺旋稳定性因素？
5.原核生物中的DNA聚合酶(大肠杆菌）
6.真核生物的RNA聚合酶Ⅱ的启动子结构特点？
7.转座发生的机制、类型、遗传学效应
8.证明遗传物质是核酸的实验依据是什么？
9.设计实验证明DNA的半保留复制？
10有何机制确保DNA复制的忠实性？
11.原核生物（以大肠杆菌为例）DNA复制起始的步骤？
12.简述原核生物转录起始的过程？
13.大肠杆菌有两种类型的终止子（原核生物转录终止的两种机制）
14.比较原核真核转录的差异？
15.真核生物转录后加工？
16.原核生物翻译起始过程？
17.真核生物翻译后加工
18.细菌与真核生物RNA翻译的机理的异同
19.延伸因子的种类及作用机制？
20.蛋白质合成的延伸步骤有
21.蛋白质后加工
22.简述真核生物核基因mRNA剪接的机制？
23.真核生物基因表达调控的主要控制点有哪些？
24.原核生物的基因表达调控分为几个层次
25.真核生物基因表达调控的层次与方式
26.真核生物和原核生物在基因表达调控上有以下几点不同
27.什么是原核生物的正调控和负调控
28.正调控和负调控的主要不同
29.大肠杆菌链前导链和滞后链的协同合成
30.启动子的作用是什么，原核生物启动子的结构特征
31.TBP在三种真核RNA聚合酶的转录起始中的机制
32.为什么说RNA编辑是中心法则的例外
33.为什么说σ因子的更替可对转录进行调控？
34.Trapoxin是组蛋白去乙酰化酶的抑制剂。你认为该抑制剂对转录的影响是什么，为什么？
35.可变剪接调控机制？
36.反式作用因子与顺式作用元件的相互作用存在于基因表达的各个水平上。请分别举例说明：⑴DNA复制起始⑵转录起始和⑶翻译起始过程中二者的相互作用。
37.真核生物反式作用因子的功能域及其与DNA结合基序有哪些？
38.真核生物的顺式作用因子和反式作用因子如何相互作用来调控基因的转录
39.弱化子的作用机理？
40.以色氨酸操纵子为例，论述原核生物基因表达的阻抑作用
和弱化作用的机制（见上题）
41.以大肠杆菌为例，说明色氨酸操纵子的特点和机制及乳糖操纵子的机制
42.葡萄糖代谢是如何调控乳糖操纵子表达的？
43.DNA的复制过程
1.核小体的结构？
①由核心颗粒和连接区构成；
②核心颗粒包括由8个组蛋白分子（H2A，H2B
，H3，H4各两个）构成的组蛋白核心和包绕在核心表面的DNA分子；
③包绕在组蛋白核心表面的DNA长140bp，环绕1 ?圈；
④连接区由DNA分子和H1组蛋白分子构成，长度不定；
2.核糖体活性位点？
①mRNA结合位点：结合mRNA和IF因子
②P位点：结合fMet-tRNA和肽基-tRNA
③A位点：结合氨酰基-tRNA
④
E
位点：结
合脱酰
tRNA
⑤
肽酰基转移酶：将肽链转移到氨基酰
-tRNA
上
⑥
EF-Tu
结合位点：氨基酰
-tRNA
的进入
⑦
EF-G
结合位点：移位
3.DNA
的二级结构？
1953
年，
Watson
和
Crick
提出
DNA
的反向平行右手双螺旋结构模型。要点
:
①主链：脱氧核糖和磷酸通过
3
’
,5
’磷
酸二酯键交互连接，成为螺旋链的骨架。两条链方向以反向平行的方式组成右手双螺旋。②碱基对：只有
A
和
T
配对，
G
和
C
配对才能满
足正常螺旋（直径
20 ? ）的要求和
chargaff
的当量规律。③螺旋参数：每个螺距为
34? ，其中含有
10
个核苷酸。④大沟和小沟
:
对于
遗传上有重要功能的蛋白质识别
DNA
双螺旋结构上的特定信息是非常重要的。
⑤
氢键
配对碱基之间能够形成氢键，而同一条链中的相邻
碱基形成一种碱基堆积力。两种力量的协同作用维持了双螺旋结构的稳定性。
4.
维持
DNA
双螺旋稳定性的因素？
①
氢键
GC
之间有三条氢键，
AT
之间有两条氢键，这是
DNA
双螺旋结构的重要特征之一，
DNA
的许多物理性质如变性、复性以及
Tm
值等都与
此有关。②碱基堆积力
碱基堆积作用对维持
DNA
的二级结构起着主要作用，它是碱基对之间在垂直方向上的相互作用。它包括：疏水作
用、范德华力等。③带负电荷的磷酸基的静电斥力
DNA
溶液中的离子浓度降低时，阳离子在磷酸基周围形成的屏蔽作用减弱，使得磷酸基
地静电斥力增大，因而
Tm
值随之降低。所以纯蒸馏水中的
DNA
在室温下就会变性。④碱基分子内能
温度升高，碱基分子内能增加时，碱基
的定向排列遭受破坏，削弱了碱基的氢键结合力和碱基的堆集力，会使
DNA
的双螺旋结构受到破坏。
总之，氢键和碱基堆集力有利于
DNA
维持双螺旋结构，而静电斥力和碱基分子内能则不利于
DNA
维持双螺旋结构。
5.
原核生物中的
DNA
聚合酶
(
大肠杆菌）
⑴
DNA
聚合酶Ⅰ是一个多功能酶，
它可以催化以下的反应：
①
DNA
链沿
5
’
→
3
’
方向的延长
（
DNA
聚合酶活性）
。②从
3’端水解DNA链（3’→ 5’外切核酸酶活性）。③从5’端水解DNA链（ 5’→3’外切核酸酶活性）。功能：主要是对DNA损伤的修复；以及在DNA复制时切除RNA引物并填补其留下的空隙。⑵DNA聚合酶Ⅱ①活性很低，只有DNA 聚合酶Ⅰ的5％。②也以4种脱氧核糖核苷酸为底物，从5’-3’方向合成DNA ③具有3’-5’外切核酸酶活性，但无5’-3’外切酶活性。功能：修复紫外光引起的DNA损伤
⑶DNA聚合酶Ⅲ①真正负责大肠杆菌细胞内合成DNA的复制酶。②是多亚基组成的蛋白质。③至少含有3种重要的酶活性。即5’-3’ DNA 聚合酶活性、3’-5’外切核酸酶活性和依赖DNA的ATP酶活性。不具有5-’3’外切核酸酶活性。功能：DNA 复制的主要聚合酶，还具有3’-5’外切酶的校对功能，提高DNA复制的保真性。
6.
真核生物的RNA聚合酶Ⅱ的启动子结构特点？RNA
聚合酶Ⅱ的启动子位于转录起始点的上游，由多个短的序列元件组成，主要有三个保守序列：
①帽子位点，又称转录起始位点，其碱基大多数为A，这与原核生物相似。
②TATA框，位于－30处，又称Hogness框。一致序列TATAA（T）AA（T）。有些TATA框的突变不影响转录的起始，但可以改变转录起始位点。说明TATA 框具有定位转录起始点的功能。
③CAAT框，位于－75处，一致序列为GGC（T）CATCT。CAAT框内的突变对转录起始的影响很大，决定了启动子起始转录的效率及频率。另外还有GC框（GC box）、八聚核苷酸元件（octamer element）等元件。
7.转座发生的
（1）机制：在靶DNA上制造一个交错的切口，然后转座子与突出的单链末端相连接，并填充切口。
（2）类型：复制型转座、非复制型转座、保守型转座（3）遗传学效应：①转座
引起插入突变②转座产生新的基因③转座产生染色体畸变④转座引起生物进化。
8.证明遗传物质是核酸的实验依据是什么？
①1928年，英国细菌学家Frederick Griffith肺炎链球菌转化实验表明活的无毒R 型细菌从死去的有毒S型菌得到了一些什么东西从而使无毒的R型转化成有毒的S型肺炎球菌。②1944年，Avery等体外转化实验用有机溶剂去除蛋白、用胰蛋白酶（trypsin）和胰凝乳蛋白酶（chymo-trypsin）消化蛋白对转化没有影响，但DNA酶消化使转化作用不能发生。说明转化源是DNA。③1952年，美国冷泉港实验室Hershey和ChaseT2噬菌体侵染实验确证了DNA是遗传物质。他们用
32P和35S分别标记噬菌体的DNA和蛋白质，发现只有DNA进入宿主细菌内，而蛋白质则没有。④1956年A.Gierer和G.Schraman烟草花叶病毒TMV重建实验证明RNA也是遗传物质。酰甲硫氨酸的去除：成熟蛋白质的N末端大部分不是甲硫氨酸，故必须切去一个或几个AA
③信号肽的切除④肽链的折叠⑤前体中功能不必需肽段的切除：在蛋白质前体分子中有一些肽段是功能不需要的，这些肽段是在位点专一性的蛋白质水解酶的作用下切除的⑥二硫键的形成⑦多肽链N端和C端的修饰：真核生物细胞中有半数以上的蛋白质N端被乙酰化。乙酰化受N-乙酰转移酶催化，具有调节蛋白质稳定的作用，多数多肽的C端被酰胺化，特别是多肽激素。酰胺化能保护多肽免受外切酶的水解。
18.比较并指出细菌与真核生物RNA翻译的机理的异同？
相同点：①分为起始、延伸、终止三个阶段②需蛋白质因子的帮助③翻译在核糖体上进行④都存在翻译调控。
不同点：
①细菌翻译起始时，小亚基先与mRNA结合再与起始tRNA结合，真核生物小亚基先与tRNA结合再与mRNA结合
②细菌起始密码子为AUG、GUG等。真核生物起始密码子为AUG
③细菌起始tRNA为fMet-tRNAf-GTP,真核生物起始为Met-tRNAi-GTP
④细菌起始密码子AUG由起始tRNA识别，真核生物为小亚基中的eIF-2
⑤细菌中的mRNA与小亚基结合，需要mRNA与16srRNAS’的碱基配对，真核生物中mRNA与小亚基结合，需要5’端帽子结合蛋白的帮助⑥延伸：细菌中存在EF-T循环，完成tRNA替换，真核中存在eEF-1中α、β亚基的循环⑦终止：原核生物有两种终止因子，真核生物仅有一种。
19.原核生物蛋白质生物合成过程中，延伸因子的种类及作用机制？
原核的延伸因子EF-Tu、EF-Ts和EF-G。EF-Tu帮助氨酰-tRNA进入核糖体的A 位点；另一因子EF-Ts的功能是帮助无活性的EF-Tu?GDP再生为有活性的EF-Tu ?GDP；EF-G和GTP参与核糖体沿mRNA5’向mRNA3’方向的移位。
20.蛋白质合成的延伸步骤有：
①后续AA-tRNA与核糖体的结合（进位）：氨酰-tRNA与A位点的结合，延伸因子（EF-Tu和EF-Ts）参与结合反应的循环过程。
②肽键的生成——转肽：肽键的形成（23s rRNA催化）。
③移位：肽基-tRNA从A位转移到P位（转肽酶），无负载tRNA释放。mRNA 上下一个密码子进入A位，移位需要GTP供能和EF-G因子的参与。
21.蛋白质后加工包括哪些方面？
对于大多数蛋白质来说多肽链翻译后还要进行下列不同方式的加工修饰才具有生理功能。
①氨基端和羧基端的修饰：在原核生物中几乎所有蛋白质都是从N-甲酰蛋氨酸开始，真核生物从蛋氨酸开始。甲酰基经酶水介而除去，蛋氨酸或者氨基端的一些氨基酸残基常由氨肽酶催化而水介除去。包括除去信号肽序列。因此，成熟的蛋白质分子N-端没有甲酰基，或没有蛋氨酸。同时，某些蛋白质分子氨基端要进行乙酰化在羧基端也要进行修饰。
②共价修饰：许多的蛋白质可以进行不同的类型化学基团的共价修饰，修后可以表现为激活状态，也可以表现为失活状态。主要有磷酸化，糖基化，羟基化，二硫键的形成和亚基的聚合等等。
22.简述真核生物核基因mRNA剪接的机制？
①第一阶段，内含子的5’端切开，形成游离的左侧外显子和右侧的内含子和外显子分子。左侧的外显子呈线状，而右侧的内含子和外显子并不呈线状。与在距内含子的3’端约30个碱基处有一个高度保守的A，称为分支位点。内含子游离的5’端以5’-2’磷酸二酯键与A相连，形成一个套索结构。
②第二个阶段，内含子的3’剪接点被切断而内含子以套索状释放，与此同时右侧外显子与左侧外显子连接在一起。
③第三个阶段，内含子的套索被切断，形成线状并很快被降解。
23.真核生物基因表达调控的主要控制点有哪些？
①基因结构的激活（基因的活化）
②处于活化状态基因的转录由转录起始阶段控制。
③转录过程中的调控④转录产物的后加工：除了加帽、加尾、去除内含子和连接外显子以外，在核RNA水平上，真核生物还可以通过改变剪接类型实现调控蛋白质产物的类型。⑤胞浆中一个特定的mRNA 是否被翻译仍被调控。
24.原核生物的基因表达调控分为几个层次？
①转录水平的调控-操纵子为主要调控功能单位
②转录后加工的调控-经mRNA切割进行的调控和细菌rRNA前体切割形成
rRNA
③翻译水平的调控-翻译过程中的自体调控和mRNA二级结构对翻译的调控，基
因表达装置蛋白质合成的自体
25.真核生物基因表达调控的层次与方式？
⑴转录前基因表达调控①DNA分子的碱基修饰②基因的扩增、重排与缺失③可移动成分的转座
⑵转录水平基因的表达调控①染色体结构，包括组蛋白的修饰和染色体的节段性结构②顺式调控元件（启动子、增强子和抑制子）③RNAP④反式调控因子（各种转录因子和激素）⑤初级转录物的加工⑥差别剪接
⑶转录后水平基因表达调控①RNA沉默②新生肽的加工与转运③mRNA的选择性转运④mRNA的降解调控。
26.真核生物和原核生物在基因表达调控上有以下几点不同：
①真核生物的转录激活总是伴随着转录区染色质结构的变化。
②基因表达调控一般以正调控为主。
③真核生物的转录和翻译在时间和空间上是分离的，调控的环节更多，复杂性
更高。
④真核生物基本上是采取逐个基因调控表达的形式。
27.什么是原核生物的正调控和负调控，请举例说明。
①负调控在没有调节蛋白质存在时基因是表达的，加入某种调节蛋白质后基因活性就被关闭，这样的控制系统就叫做负控系统。其调节蛋白质叫做阻遏蛋白，加入后基因的表达活性关闭。两种类型：负控诱导和负控阻遏。②正调控在没有调节蛋白质存在时基因是关闭的，加入某种调节蛋白质后基因活性就被开启，这样的控制系统就叫做正控系统。其
调节蛋白质叫做无辅基诱导蛋白（激活蛋白)，加入后是基因的表达活性开启。两种类型:正控诱导和正控阻遏系统。
28.正调控和负调控的主要不同？
①原核生物以负调控为主，真核生物以正调控为主
②在负控系统中，调节因子的蛋白质产物是基因活性的一种阻遏物，若没有调节蛋白，则转录进行③正调控中，调节基因的产物是一种激活物，常在转录中进行。例子：
①负调控：乳糖操纵子调节产物是阻遏蛋白、色氨酸操纵子调解产物是阻遏蛋白。
②正调控：cAMP
29.大肠杆菌链前导链和滞后链的协同合成？
①当全酶随着复制叉沿前导链的合成方向移动时，滞后链的模板被甩出来，产生一个环。②随着复制叉的移动，这一环不断扩大，并向复制叉前进的方向回折。
③新合成的岗崎片段也向相同的方向（复制叉前进的方向）甩出，这相当于滞后链的核心酶相对滞后链向与复制叉前进相反的方向移动。④DNA聚合酶Ⅰ将岗
崎片段切断并填补缺口，在DNA连接酶的作用下。将冈崎片段连接成滞后链，在此过程中前导链也合成完成
30.启动子的作用是什么，原核生物启动子的结构特征？
启动子具有使得相应的聚合酶识别、结合及在合适的起始位点起始转录的作用，如果没有启动子的存在，聚合酶就无法正确的结合到合适的DNA序列上进行转录。原核生物启动子的结构特征为：
①－35区，又称为Sextama框盒（Sextama box）：在转录起始点上游－35 bp处，有另一个保守序列，称为－35序列。其保守序列为TTGACA， RNA聚合酶的σ因子可以识别该位点，称为识别位点， RNA聚合酶首先与识别位点结合，然后与结合位点相互作用。②-10区，在转录起始点的上游有一个6 bp的保守序列，保守序列的中心位于转录起始点上游约－10 bp处，这一保守序列又称为－10序列。其一致序列为TATAAT，又称Pribnow框、结合位点，在RNA聚合酶的作用下首先解链。③-10区与-35区间的距离：－35区和－10区之间的距离在绝大多数原核生物启动子为16到18 bp。该区域的碱基序列并不重要，但该距离的长短是至关重要的。适宜的距离可以为RNA聚合酶提供合适的空间结构，便于转录的起始。
31.TBP在三种真核RNA聚合酶的转录起始中的机制：
①在RNA聚合酶Ⅰ识别rRNA的启动子并起始转录的过程中，TBP是SL1的组分，起定位RNA聚合酶Ⅰ的作用。②在RNA聚合酶Ⅱ的转录起始过程中，TBP 可以识别TATA框，同样起定位RNA聚合酶的作用。③RNA聚合酶Ⅲ的转录起始（包括内部启动子）也需要TBP。RNA聚合酶Ⅲ对其TATA框的识别同样依赖于TBP，但必须有其他RNA聚合酶Ⅲ的辅助因子共同作用，使RNA聚合酶Ⅲ在启动子上正确定位。
32.为什么说RNA编辑是中心法则的例外？
RNA编辑（RNA editing）是在RNA分子上出现的一种修饰现象。主要指mRNA 在转录后因插入、缺失或核苷酸的替换，改变了DNA模板来源的遗传信息，从而翻译出氨基酸序列不同的多种蛋白质。RNA编辑的生物学意义：①校正作用：某些基因在突变过程中丢失的遗传信息可能通过RNA编辑得以恢复②调控翻译：通过编辑可以构建或去除起始密码子和终止密码在，是基因调控的一种方式③扩充遗传信息：能是基因产物获得新的结构和功能。因此，RNA编辑是中心法则的例外，扩大了遗传信息，也可能是生物适应的一种保护措施。
33.为什么说σ因子的更替可对转录进行调控？
①菌体细胞中，大部分的RNA聚合酶（核心酶）与DNA分子松弛结合，形成松弛型复合物，并且核心酶对启动子无特殊的亲和力。②σ因子与核心酶结合形成全酶以后，对启动子的亲和力大大提高，形成紧密型复合物。③原核生物RNA 聚合酶中的σ因子起着识别启动子的作用，当RNA链形成一个稳定的三元复合
物时，释放σ因子，进入延伸区。
34.Trapoxin是组蛋白去乙酰化酶的抑制剂。你认为该抑制剂对转录的影响是什么，为什么？
\
该Trapoxin是组蛋白去乙酰化酶的抑制剂，也就是该抑制剂促进了乙酰化酶对基因表达的影响。组蛋白N端“尾巴”上赖氨酸残基的乙酰化中和了组蛋白“尾巴”的正电荷，降低了它与DNA的亲和性，导致核小体构象发生有利于转录调节蛋白与染色体相结合的变化，从而提高了基因转录的活性。
35.可变剪接调控机制？
①SR蛋白家族的调控：剪接体的形成与多种蛋白质和RNA复合体密切相关。在可变剪接上保守的SR磷蛋白家族因子的参与起重要作用。SR蛋白家族以不同的质的组成与量的差异选择特定的mRNA前体剪接位点，不同的SR家族蛋白对适当的mRNA前体可以诱导出不同选择的剪接方式，在选择剪接上起决定作用。②RNP的调节：hnRNP-A1在不同组织中的含量变化很大，不参与组成性剪接。在选择5’和3’剪接点时具有可变剪接活性，成为参与可变剪接的调节因子，在体内与SR蛋白共同调节组织特异性的剪接。U5hnRNP在酵母中参与5’剪接点突变的可变剪接③外显子限定模型：真核细胞mRNA前体中内含子远远大于外显子，5’与3’剪接位点可以跨越数万个核苷酸准确地组合在剪接体中。有证据表明，在前速激肽原mRNA前体的可变剪接中，外显子下游的5’剪接位点可影响其上游内含子3’的剪接。
36.反式作用因子与顺式作用元件的相互作用存在于基因表达的各个水平上。请分别举例说明：
⑴DNA复制起始⑵转录起始和⑶翻译起始过程中二者的相互作用。基因活性的调控主要通过反式作用因子和顺式作用元件相互作用实现的。⑴在DNA复制起始过程中，反式作用因子
如DNA聚合酶、DNA螺旋霉、拓扑异构酶等与顺式作用元件DNA连接酶相互作用，共同完成DNA的复制起始。
⑵在转录起始过程中，启动子、增强子、沉默基因等顺式作用元件同时都受到反式作用因子RNA聚合酶的控制、识别。调节因子的产物是一种蛋白质，是反式作用元件，受到操纵基因顺式作用元件的调控。转录因子是一种反式作用因子，是转录起始过程中RNA聚合酶所需要的辅助因子，位于启动子上游附近的顺式作用元件在无转录因子时，RNA聚合酶不能起始转录。操纵基因是与启动子相邻的顺式作用位点，是阻抑蛋白的靶点。阻抑蛋白是调节基因的产物，与操纵基因的结合可以阻止受调节基因的表达。当阻遏蛋白与操纵基因结合时，就会阻止RNA聚合酶启动转录，基因的表达就被关闭，无阻遏蛋白时，RNA聚合酶可以识别受调节基因的启动子，使这种基因得到表达。
⑶在翻译起始过程，起始因子eIF-4是反式作用因子，5’帽子是顺式作用元件。
37.真核生物反式作用因子的功能域及其与DNA结合基序有哪些？
⑴反式作用因子的功能域：
①DNA结合域(DNA binding domain)，多由60－100个氨基酸残基组织的几个亚区组成；
②转录激活域(activating domain)，常由30－100氨基酸残基组成，这结构域有富含酸性氨基酸、富含谷氨酰胺、富含脯氨酸等不同种类，以酸性结构域最多见；
③连接区，即连接上两个结构域的部分。不与DNA直接结合的转录因子没有DNA结合域，但能通过转录激活域直接或间接作用于转录复合体而影响转录效率。
⑵DNA结合的功能域（又称基序motif）典型的有以下几种：与DNA结合的转录因子大多以二聚体形式起作用，与DNA结合的基序典型的有以下几种：①锌指结构基序:是由保守氨基酸的小基团与锌离子结合形成类似手指状的DNA结合结构域。是DNA结合蛋白的一个通用基序，锌指结构通常由相对独立的结构域串连重复排列在一起而形成。
②螺旋-环-螺旋（HLH）:此基序长40－50个氨基酸残基，其中含两个既亲水又亲脂的α- 螺旋，α-螺旋被不同长度的环（连接区）分开。③亮氨酸拉链:是一个富含亮氨酸残基的结构域，参与形成二聚体。在每个拉链蛋白中都有一个与重复的亮氨酸相邻的高碱性区，该区可能含一个DNA结合点。④螺旋-转角-螺旋(HTH)⑤同源异形框是一种编码由60个氨基酸组成的结构域序列。同源（异型）框存在于许多真核生物的DNA结合蛋白中，负责与DNA结合，其C端与原核生物阻抑蛋白的HTH基序同源，与发育调控有关。
38.真核生物的顺式作用因子和反式作用因子如何相互作用来调控基因的转录
真核生物启动子和增强子是由若干可以区分的DNA序列组成的，由于它们和特定的功能基因连锁在一起，因此称为顺式作用元件。真核生物转录调控大多是通过顺式作用元件和反式作用因子复杂的相互作用而实现的，下面介绍的是与顺式作用成分专一性结合的一些转录因子。一般认为，如果某个蛋白是体外转录系统中起始RNA合成所必需的，它就是转录复合体的一部分。根据各个蛋白质成分在转录中的作
用，能将整个复合体分为3部分：①参与所有或某些转录阶段的RNA聚合酶亚基，不具有基因特异性。②与转录的起始或终止有关的辅助因子，也不具有基因特异性。③与特异调控序列结合的转录因子。它们中有些被认为是转录复合体的一部分，因为所有或大部分基因的启动子区含有这一特异序列，如TATA区和TFIID，更多的则是基因或启动子特异性结合调控蛋白，它们是起始某个（类）基因转录所必需的
39.弱化子的作用机理？
①弱化子转录终止对色氨酸含量做出应答的机制可能和前导序列有关。
前导序列含有一个核糖体结合位点，其AUG密码子后有一短的编码序列，它含有两个连续的色氨酸密码子。②细胞中有色氨酸存在时，核糖体顺利地译出整个前导肽而在终止密码子UGA处停下来。终止子发夹结构能够形成，实现了转录的终止。③当细胞中的色氨酸用尽时，核糖体停顿在两个色氨酸密码子上，不能
形成带有发夹结构的终止子，于是转录继续进行下去。
40.以色氨酸操纵子为例，论述原核生物基因表达的阻抑作用和弱化作用的机制（见上题）。
⑴色氨酸操纵子包括一个启动子（P），操纵基因（O），还有五个连续的结构基因E、D、C、B、A。在操纵子上游有一调节基因-trpR基因，其表达产物为无活性的阻抑蛋白，结构基因表达正常。当有辅阻抑物色氨酸存在时，Trp与无活性的阻抑蛋白结合，产生了有活性的阻抑蛋白。结合到操纵子基因上，使基因表达活性关闭，结构基因不能转录不能产生合成Trp的酶。色氨酸操纵子的阻抑蛋白通过结合多个操纵基因，控制散在分布的、三套不相连的结构基因：①第一套基因是结构基因簇tryEDCBA，控制从分支酸合成色氨酸的酶的合成。②第二套是aroH基因，aroH基因编码在芳香族氨基酸生物合成共同通路中催化起始反应的三种酶中的一种。③第三套基因是trpR调节基因，trpR调节基因被自身产物阻抑蛋白阻抑，阻抑会降低自身的合成。
41.以大肠杆菌为例，说明色氨酸操纵子的特点和机制及乳糖操纵子的机制
⑴色氨酸合成代谢相关的5个结构基因组成一个结构基因簇，与操纵基因、启动子组成色氨酸操纵子。另外，在操纵基因与第一个结构基因的编码区之间有一前导区，为弱化子区。
①负阻遏系统：色氨酸操纵子是合成Trp的一个操纵子。操纵子通常是开放的，它的调控仅仅是根据培养基中有无Trp来实现。当无Trp时，操纵子被开启，有Trp时，它与游离的阻遏蛋白结合，该操纵子关闭，这种作用称为阻遏型的负调控。可阻遏型的负调控是某些氨基酸等生物合成酶类有关基因表达调控的基本形式。Trp操纵子的转录调控除了负阻遏系统外，还有衰减调控系统。
②Trp操纵子的衰减作用是独立于启动子-操纵基因的调控系统，是基因转录与翻译之间的一种联系。衰减调控作用涉及前导肽翻译、核糖体的运转以及RNA二级结构的转换；通过mRNA二级结构的转换形成转录的终止信号，使操纵子处于关闭状态。衰减作用的信号不只是Trp分子，而是负载Trp的tRNA，tRNA(Trp)的数量又取决于细胞中Trp的水平，tRNA(Trp)作为负调控的辅阻遏物，作用于mRNA的前导序列。衰减作用发生的必要条件是：
1）翻译产生前导肽
2）转录和翻译是偶联的。
⑵乳糖操纵子：
乳糖操纵子（lactose operon，lac ）的三个结构基因成簇排列，编码参与β-半乳糖苷（如乳糖）分解代谢所需的三种蛋白质：lacZ编码β-半乳糖苷酶，lacY编码β-半乳糖苷透性酶，lacA编码β半乳糖苷转乙酰基酶。
①阻遏蛋白的负性调控：没有乳糖存在时，调节基因I编码的阻遏蛋白结合于操纵序列O处，乳糖操纵子处于阻遏状态，不能合成分解乳糖的三种酶；有乳糖存在时，乳糖作为诱导物诱导阻遏蛋白别构，不能结合于操纵序列，操纵子被诱导开放合成分解乳糖的三种酶。所以乳糖操纵子的这种调控机制为可诱导的负调控。
②CAP的正性调节：在启动子上游有CAP结合位点，当大肠杆菌从以葡萄糖为
碳源的环境转变为以乳糖为碳源的环境时，cAMP浓度升高，与CAP结合，使CAP发生别构，cAMP-CAP结合于乳糖操纵子启动序列附近的CAP结合位点，激活RNA聚合酶活性，促进结构基因转录，调节蛋白结合于操纵子后促进结构基因的转录，对乳糖操纵子实行正调控，加速合成分解乳糖的三种酶。
42.
葡萄糖代谢是如何调控乳糖操纵子表达的？
在缺乏葡萄糖时，cAMP水平增高，cAMP与CRP结合成复合物结合在DNA的启动子区域（RNA聚合酶结合位点的上游），提高了RNA聚合酶与启动子结合的效率，使乳糖操纵子达到高水平的转录活性。如果有葡萄糖，cAMP水平下降，CRP因没有配体结合而不能形成复合物与启动子区结合，降低了转录效率。
43.DNA的复制过程
①双链的解开。复制有特定的起始位点，叫做复制原点。ori(或o）、富含A、T 的区段。从复制原点到终点，组成一个复制单位，叫复制子。复制时，解链酶等先将DNA的一段双链解开，形成复制点，这个复制点的形状象一个叉子，故称为复制叉。双链解开、复制起始，大约20个DnaA蛋白在ATP的作用下与oriC 处的4个9bp保守序列相结合，在HU蛋白和ATP的共同作用下,Dna复制起始复合物使3个13bp直接重复序列变性,形成开链；解链酶六体分别与单链DNA 相结合(需DnaC帮助),进一步解开DNA双链
②RNA引物的合成。DnaB蛋白活化引物合成酶，引发RNA引物的合成。引物长度约为几个至10个核苷酸，
③DNA链的延伸。DNA的半不连续复制（semi-discontinuous replication)：DNA 复制时其中一条子链的合成是连续的，而另一条子链的合成是不连续的，故称半不连续复制。在DNA复制时，合成方向与复制叉移动的方向一致并连续合成的链为前导链；合成方向与复制叉移动的方向相反，形成许多不连续的片段，最后再连成一条完整的DNA链为滞后链。在DNA复制过程中，前导链能连续合成，而滞后链只能是断续的合成5'→3 '的多个短片段，这些不连续的小片段称为冈崎片段。
④切除RNA引物，填补缺口，连接相邻的DNA片段（复制终止）。当复制叉遇到约22个碱基的重复性终止子序列（Ter）时，Ter-Tus蛋白复合物能使DnaB不再将DNA解链，阻挡复制叉继续前移。在DNA聚合酶Ⅰ催化下切除RNA引物；留下的空隙由DNA聚合酶Ⅰ催化合成一段DNA填补上；在DNA连接酶作用下，连接相邻的DNA链。
分子生物学复习题(有详细标准答案)
分子生物学复习题(有详细答案)
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绪论 思考题：（P9） 1.从广义和狭义上写出分子生物学的定义？ 广义上讲的分子生物学包括对蛋白质和核酸等生物大分子结构与功能的研究，以及从分子水平上阐明生命的现象和生物学规律。 狭义的概念，即将分子生物学的范畴偏重于核酸（基因）的分子生物学，主要研究基因或DNA结构与功能、复制、转录、表达和调节控制等过程。其中也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。 2、现代分子生物学研究的主要内容有哪几个方面？什么是反向生物学？什么是 后基因组时代？ 研究内容： DNA的复制、转录和翻译；基因表达调控的研究；DNA重组技术和结构分子生物学。 反向生物学：是指利用重组DNA技术和离体定向诱变的方法研究已知结构的基因相应的功能，在体外使基因突变，再导入体内，检测突变的遗传效应，即以表型来探索基因结构。 后基因组时代：研究细胞全部基因的表达图式和全部蛋白质图式，人类基因组研究由结构向功能转移。 3、写出三个分子生物写学展的主要大事件（年代、发明者、简要内容） 1953年Watson和Click发表了“脱氧核糖核苷酸的结构”的著名论文，提出了DNA的双螺旋结构模型。 1972~1973年，重组DNA时代的到来。H.Boyer和P.Berg等发展了重组DNA 技术，并完成了第一个细菌基因的克隆，开创了基因工程新纪元。 1990~2003年美、日、英、法、俄、中六国完成人类基因组计划。解读人类遗传密码。 4、21世纪分子生物学的发展趋势是怎样的？ 随着基因组计划的完成，人类已经掌握了模式生物的所有遗传密码。又迎来了后基因组时代，人类基因组的研究重点由结构向功能转移。相关学说理论相应诞生，如功能基因组学、蛋白质组学和生物信息学。生命科学又进入了一个全新的时代。 第四章 思考题：（P130） 1、基因的概念如何？基因的研究分为几个发展阶段？ 概念：基因是原核、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遗传效应的核苷酸序列，是遗传的基本单位和突变单位以及控制形状的功能单位。 发展阶段：○120世纪50年代以前，主要从细胞的染色体水平上进行研究，属于基因的染色体遗传学阶段。 ○220世纪50年代以后，主要从DNA大分子水平上进行研究，属于分
关于分子生物学期末考试题目及答案
分子生物学复习提纲 一．名词解释 （1）Ori ：原核生物基因质粒的复制起始位点，是四个高度保守的19bp组成的正向重复序列，只有ori能被宿主细胞复制蛋白质识别的质粒才能在该种细胞中复制。 ARS：自主复制序列，是真核生物DNA复制的起点，包括数个复制起始必须的保守区。不同的ARS序列的共同特征是一个被称为A区的11bp的保守序列。（2）Promoter：启动子，与基因表达启动有关的顺式作用元件，是结构基因的重要成分，它是位于转录起始位点5’端上游区大约100~200bp以内的具有独立功能的DNA序列，能活化RNA 聚合酶，使之与模板ＤＮＡ准确地相结合并具有转录起始的特异性。 （3）ρ-independent termination不依赖ρ因子的终止，指在不依赖ρ因子的终止反应中，没有任何其他因子的参与，核心酶也能在某些位点终止转录。（强终止子）（4）SD sequence：ＳＤ序列（核糖体小亚基识别位点），存在于原核生物起始密码ＡＵＧ上游７～１２个核苷酸处的一种４～７个核苷酸的保守片段，它与１６ＳｒＲＮＡ３’端反向互补，所以可以将mRNA的AUG起始密码子置于核糖体的适当位置以便起始翻译作用。 Kozak sequence：存在于真核生物mRNA的一段序列，核糖体能够识别mRNA 上的这段序列，并把它作为翻译起始位点。 （5）Operator：操纵基因，与一个或者一组结构基因相邻近，并且能够与一些特异的阻遏蛋白相互作用，从而控制邻近的结构基因表达的基因。 Operon：操纵子，是指原核生物中由一个或多个相关基因以及转录翻译调控元件组成的基因表达单元。包括操纵基因、结构基因、启动基因。 （6）Enhancer：增强子，能强化转录起始的序列的为增强子或强化子Silencer：沉默子，可降低基因启动子转录活性的一段DNA顺式元件。与增强子作用相反。 （7）cis-acting element ：顺式作用元件，存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列，包括启动子、增强子、调控序列和可诱导元件，本身不编码任何蛋白质，仅仅提供一个作用位点，与反式作用因子相互作用参与基因表达调控。 trans-acting factor：反式作用因子，是指直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质。具有三个功能结构域，即DNA结合域、转录结合域、结合其他结合蛋白的结构域。 （8）Open reading frame (ORF)：开放式阅读框架，是指一组连续的含有三联密码子的能够被翻译成为多肽链的DNA序列。它由起始密码子开始，到终止密码子结束。 （9）Gene：基因，产生一条多肽链或功能RNA所需的全部核苷酸序列。（能转录且具有生物学功能的DNA/RNA的序列。） （10）DNA denaturation：DNA变性，DNA双链的氢键断裂，最后完全变成单链
福建师范大学分子生物学期末考试试题1
福建师范大学分子生物学期末考试试题（第一套） 一、名词解释（15分，每小题3分） 1、中心法则：遗传信息沿着从DNA到RNA，RNA到蛋白质的方向进行传递。反转录的发现，是对中心法则的完善。 2、复性：变性的DNA在一定的条件下恢复成天然结构的现象。 3、卫星DNA：在高度重复的序列中，常有一些AT含量很高的简单高度重复序列，例如螃蟹DNA含有AT的简单重复序列，有时在30个左右的碱基对中，才插有一个GC对，因而AT含量高达97%。由于AT浮力密度较小，因而在将DNA切断成数百个碱基对的片段进行超速离心时，常会在主要的DNA带的上面有一个次要的带相伴随，这条次要的带称为卫星DNA。 4、聚合酶链反应：利用与DNA模板序列的两端互补的一对寡聚核苷酸引物来扩增一段DNA 序列。由一种热稳定的DNA聚合酶经过三步反应即变性、引物退火和聚合的循环从两个引物来相对延伸。 5、操纵子：一个或几个结构基因与一个调节基因和一个操纵基因，加上启动子构成一个操纵单元，这个单元称为操纵子。在操纵子中，结构基因产生mRNA并作为模板合成蛋白质；而调节基因则产生一种阻遏蛋白与操纵基因相互作用；阻遏蛋白与操纵基因结合从而阻碍了结构基因转录成为mRNA；在诱导过程中，诱导物通过与阻遏蛋白相结合而阻止阻遏蛋白与操纵基因结合。 二、填空（10分，每空1分） 1、Southern blotting用于鉴别----DNA -------。 2、原始转录物的一些序列被-----更改---------，叫做RNA编辑。 3、------颠换-----是由嘧啶变为嘌呤或由嘌呤转变为嘧啶。 4、大肠杆菌RNA聚合酶的-----核心酶-----为α2ββ’。 5、同一氨基酸具有多个密码子，编码同一氨基酸的密码子称为------- -同义密码子---------。 6、数个生化反应可由-------核酶---------催化，这种具有催化功能的RNA可以剪切自身或其它的RNA分子，或者完成连接或自身剪接反应。 7、在质粒DNA的制备中，用酚或酚-氯仿混合液抽提以除去碱裂解液中残余----蛋白质------。 8、--------开放的阅读框-------是指新测DNA序列中，由计算机辨认出的可能编码区域，它是从起始密码子起到终止密码子止的一段连续的密码子区域。 9、噬菌体φX174基因组只有-----5386----个核苷酸，却编码11种蛋白。 10、转录是以DNA一条链为模板的RNA的酶促合成。我们把模板链称为-----反义链-----。 三、选择题（共25分，每题1分） 1、在DNA组成中符合当量定律，即A=T,G=C,A+G=T+C;这就是----------定则。 A Chargaff B Watson-Crick C van de Waal D S-D 2、DNA的复制方向只能以----------方向复制。 A 2’—3’ B 5’—2’ C 3’—5’ D 5’—3’ 3、在原核生物mRNA起始密码子AUG上游的8-13个核苷酸有一段可受核糖体结合、保护和富含嘌呤的3-9个核苷酸的共同序列，一般为5’AGGAGGU3’,称为---------序列。 A S-D B Hogness D sextama D pribnow 4、细菌蛋白质合成的起始因子有------------------。
分子生物学试题及答案
分子生物学试题及答案
分子生物学试题及答案一、名词解释 1．cDNA与cccDNA：cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA；cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2．标准折叠单位：蛋白质二级结构单元α－螺旋与β－折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块，此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型，乃至他们的组合型来予以描述，因此又将其称为标准折叠单位。3．CAP：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMP activated protein ） 4．回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。 5．micRNA：互补干扰RNA或称反义RNA，与mRNA序列互补，可抑制mRNA的翻译。 6．核酶：具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7．模体：蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域 8．信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。
除了5’ 3’外切酶活性 19．锚定PCR：用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴，然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。 20．融合蛋白：真核蛋白的基因与外源基因连接，同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。 二、填空 1． DNA的物理图谱是DNA分子的（限制性内切酶酶解）片段的排列顺序。 2． RNA酶的剪切分为（自体催化）、（异体催化）两种类型。3．原核生物中有三种起始因子分别是（IF-1）、（ IF-2 ）和（IF-3 ）。4．蛋白质的跨膜需要（信号肽）的引导，蛋白伴侣的作用是（辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质）。 5．启动子中的元件通常可以分为两种：（核心启动子元件）和（上游启动子元件）。 6．分子生物学的研究内容主要包含（结构分子生物学）、（基因表达与调控）、（ DNA重组技术）三部分。 7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（肺炎球菌感染小鼠）、（ T2噬菌体感染大肠杆菌）这两个实验中主要的论点证据是：（生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（ hnRNA在转变为mRNA 的过程中经过剪接，）、
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一、名词解释 1、广义分子生物学：在分子水平上研究生命本质的科学，其研究对象是生物大分子的结构和功能。2 2、狭义分子生物学：即核酸（基因）的分子生物学，研究基因的结构和功能、复制、转录、翻译、表达调控、重组、修复等过程，以及其中涉及到与过程相关的蛋白质和酶的结构与功能 3、基因：遗传信息的基本单位。编码蛋白质或RNA等具有特定功能产物的遗传信息的基本单位，是染色体或基因组的一段DNA序列(对以RNA作为遗传信息载体的RNA病毒而言则是RNA序列)。 4、基因：基因是含有特定遗传信息的一段核苷酸序列，包含产生一条多肽链或功能RNA 所必需的全部核苷酸序列。 5、功能基因组学：是依附于对DNA序列的了解，应用基因组学的知识和工具去了解影响发育和整个生物体的特定序列表达谱。 6、蛋白质组学：是以蛋白质组为研究对象，研究细胞内所有蛋白质及其动态变化规律的科学。 7、生物信息学：对DNA和蛋白质序列资料中各种类型信息进行识别、存储、分析、模拟和转输 8、蛋白质组：指的是由一个基因组表达的全部蛋白质 9、功能蛋白质组学：是指研究在特定时间、特定环境和实验条件下细胞内表达的全部蛋白质。 10、单细胞蛋白：也叫微生物蛋白，它是用许多工农业废料及石油废料人工培养的微生物菌体。因而，单细胞蛋白不是一种纯蛋白质，而是由蛋白质、脂肪、碳水化合物、核酸及不是蛋白质的含氮化合物、维生素和无机化合物等混合物组成的细胞质团。 11、基因组：指生物体或细胞一套完整单倍体的遗传物质总和。 12、C值：指生物单倍体基因组的全部DNA的含量，单位以pg或Mb表示。 13、C值矛盾：C值和生物结构或组成的复杂性不一致的现象。 14、重叠基因：共有同一段DNA序列的两个或多个基因。 15、基因重叠：同一段核酸序列参与了不同基因编码的现象。 16、单拷贝序列：单拷贝顺序在单倍体基因组中只出现一次，因而复性速度很慢。单拷贝顺序中储存了巨大的遗传信息，编码各种不同功能的蛋白质。 17、低度重复序列：低度重复序列是指在基因组中含有2～10个拷贝的序列 18、中度重复序列：中度重复序列大致指在真核基因组中重复数十至数万（<105）次的重复顺序。其复性速度快于单拷贝顺序，但慢于高度重复顺序。 19、高度重复序列：基因组中有数千个到几百万个拷贝的DNA序列。这些重复序列的长度为6~200碱基对。 20、基因家族：真核生物基因组中来源相同、结构相似、功能相关的一组基因，可能由某一共同祖先基因经重复和突变产生。 21、基因簇：基因家族的各成员紧密成簇排列成大段的串联重复单位，定位于染色体的特殊区域。 22、超基因家族：由基因家族和单基因组成的大基因家族，各成员序列同源性低，但编码的产物功能相似。如免疫球蛋白家族。 23、假基因：一种类似于基因序列，其核苷酸序列同其相应的正常功能基因基本相同、但却不能合成功能蛋白的失活基因。 24、复制：是指以原来DNA（母链）为模板合成新DNA（子链）的过程。或生物体以DNA/RNA
现代分子生物学复习题
现代分子生物学复习题
现代分子生物学 一.填空题 1.DNA的物理图谱是DNA分子的限制性内切酶酶解片段的排列顺序。 2.核酶按底物可划分为自体催化、异体催化两种类型。 3.原核生物中有三种起始因子分别是IF-1、 IF-2 和IF-3 。 4.蛋白质的跨膜需要信号肽的引导，蛋白伴侣的作用是辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质。 5.真核生物启动子中的元件通常可以分为两种：核心启动子元件和上游启动子元件。 6.分子生物学的研究内容主要包含结构分子生物学、基因表达与调控、DNA重组技术三部分。 7.证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是肺炎球菌感染 小鼠、T2噬菌体感染大肠杆菌这两个实验中主要的论点证据是：生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能。 8.hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点： hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接、 mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子，在mRNA3′ 东隅已逝 2 桑榆非晚！
末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴。 9.蛋白质多亚基形式的优点是亚基对DNA的利用来说是一 种经济的方法、可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响、活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭。 10.质粒DNA具有三种不同的构型分别是： SC构型、 oc 构型、 L构型。在电泳中最前面的是SC构型。 11.哺乳类RNA聚合酶Ⅱ启动子中常见的元件TATA、GC、 CAAT所对应的反式作用蛋白因子分别是TFIID 、SP-1 和 CTF/NF1 。 12.与DNA结合的转录因子大多以二聚体形式起作用，转 录因子与DNA结合的功能域常见有以下几种螺旋-转角-螺旋、锌指模体、碱性-亮氨酸拉链模体。 13.转基因动物常用的方法有：逆转录病毒感染法、DNA 显微注射法、胚胎干细胞法。 14.RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子有、TFⅡ-A、TFⅡ-B、 TFII-D、TFⅡ-E他们的结合顺序是： D、A、B、E 。 其中TFII-D的功能是与TATA盒结合。 15.酵母DNA按摩尔计含有32.8%的T,则A为_32.8%_,G 为_17.2%_和C为_17.2%__。 16.操纵子包括_调控基因、调控蛋白结合位点和结构基因。 17.DNA合成仪合成DNA片段时，用的原料是模板DNA 东隅已逝 3 桑榆非晚！
临床分子生物学检验总
四个阶段： 一、以导致遗传病的基因突变位点为靶标，以DNA分子杂交为核心 二、以PCF技术为核心 三、以生物芯片为核心 四、以DN做H序技术为核心 广义：分子标志物包括基因组DNA各种RNA蛋白质和各种代谢物 临床分子生物学检验靶标主要以核酸（DNA和RNA为主 基因组DNA是临床分子生物学检验中最常用的分子靶标 病原生物基因1.菌种鉴定：PCR测寸序和PCR-DNA^针杂交；缩短检测时间 2. 确定病毒感染和病毒载量：明确感染源，判断病情，监测疗效 3. 病毒分析：基因型变异产生不同临床症状 4. 细菌耐药监测和分子流行病学调查：随机扩增多态性DNA指导选择 治疗方案，控制病原菌的感染传播 基因变异 1 .致病基因的分子缺陷 2. 线粒体基因突 3. 肿瘤相关基因 单基因病 1. 致病基因结构发生了改变，影响了编码产物量和质的改变，如血红蛋白 病、血友病、Duchenne 肌营养不良等。 2. 致病基因中核苷酸三联体重复序列发生高度扩展，如脆性X综合征、亨廷顿 病、强直性肌营养不良等。 基因多态性用于： 1.基因定位和疾病相关性分析 2.疾病诊断和遗传咨询 3.多基因病的研究 4. 器官移植配型和个体识别 循环游离核酸检测（包括游离DNA和游离RNA用于：产前诊断、恶性肿瘤早期诊断、病例检测 临床分子生物学检验技术以分子杂交技术、PCR技术和DNA测序技术、芯片技术、双向电泳技术、生物信息学技术为主要技术 分子生物学检验技术可用于微生物感染的确诊、感染性病原体的分型、耐药监测。分子生物学检验技术有利于临床上对遗传性疾病的早期预防、早期诊断、早期治疗。重要国际生物信息中心：1.美国国立生物技术信息中心（NCBI） 2.欧洲生物信息学研究所（EBI） 3.日本国立遗传研究所（DDBJ 一级核酸数据库有GenBank EMBI和DDBJ 蛋白质序列数据库有SWISS-PRO T PIR、UNIPRO等。蛋白质X射线晶体三维结构数据库有PDB等。 蛋白质数据库常用的有SWISS-PRO、T PIR 、PDB 数据库
分子生物学复习题
1、分子生物学的定义。 从分子水平研究生物大分子的结构与功能从而阐明生命现象本质的科学，主要指遗传信息的传递（复制）、保持（损伤和修复）、基因的表达（转录和翻译）与调控。 2、简述分子生物学的主要研究内容。 a.DNA重组技术（基因工程） （1）可被用于大量生产某些在正常细胞代谢中产量很低的多肽 ; （2）可用于定向改造某些生物的基因组结构 ; （3）可被用来进行基础研究 b.基因的表达调控 在个体生长发育过程中生物遗传信息的表达按一定时序发生变化（时序调节），并随着内外环境的变化而不断加以修正（环境调控）。 c.生物大分子的结构和功能研究(结构分子生物学） 一个生物大分子，无论是核酸、蛋白质或多糖，在发挥生物学功能时，必须具备两个前提： (1)拥有特定的空间结构（三维结构）； (2)发挥生物学功能的过程中必定存在着结构和构象的变化。 结构分子生物学就是研究生物大分子特定的空间结构及结构的运动变化与其生物学功能关系的科学。它包括3个主要研究方向： (1) 结构的测定 (2) 结构运动变化规律的探索 (3) 结构与功能相互关系 d.基因组、功能基因组与生物信息学研究 3、谈谈你对分子生物学未来发展的看法？ (1)分子生物学的发展揭示了生命本质的高度有序性和一致性，是人类认识论上的重大飞跃。生命活动的一致性，决定了二十一世纪的生物学将是真正的系统生物学，是生物学范围内所有学科在分子水平上的统一。 (2)分子生物学是目前自然学科中进展最迅速、最具活力和生气的领域，也是新世纪的带头学科。
(3)分子生物学是由生物化学、生物物理学、遗传学、微生物学、细胞学、以及信息科学等多学科相互渗透、综合融会而产生并发展起来的，同时也推动这些学科的发展。 (4)分子生物学涉及认识生命的本质，它也就自然广泛的渗透到医学、药学各学科领域中，成为现代医药学重要的基础。 1、DNA双螺旋模型是哪年、由谁提出的?简述其基本内容。 DNA双螺旋模型在1953年由Watson和Crick提出的。 基本内容： (1) 两条反向平行的多核苷酸链围绕同一中心轴相互缠绕，两条链均为右手双螺旋。 (2) 嘌呤与嘧啶碱位于双螺旋的内侧，3′,5′- 磷酸与核糖在外侧，彼此通过磷酸二酯键相连接，形成DNA分子的骨架。 (3) 双螺旋的平均直径为2nm,两个相邻碱基对之间相距的高度即碱基堆积距离 为0.34nm,两个核苷酸之间的夹角为36。。 (4) 两条核苷酸链依靠彼此碱基之间形成的氢键相连系而结合在一起，A与T相配对形成两个氢键，G与C相配对形成3个氢键。 (5) 碱基在一条链上的排列顺序不受任何限制，但根据碱基互补配对原则，当一条多核苷酸的序列被确定后，即可决定另一条互补链的序列。
武汉大学分子生物学试题
武汉大学 2001 年攻读硕士学位研究生入学考试试题 一、解释概念(20 分,每个4分) 1. Satellite DNA-卫星DNA,又称串联重复序列，由2~6个核苷酸组成的重复单位组成的串联重复。 2. Replisome-复制体,是指由多种复制相关蛋白组成的复合物。 3.逆转座子，指另一类能够通过逆转酶和整合酶共同作用介导转座的转座子 4. 反式激活因子，一类能结合到顺式作用元件上形式激活作用的蛋白质 5. 衰减子，原核生物操纵子上一段能够显著减弱或终止转录作用的核苷酸序列 衰减作用，指原核生物中根据底物浓度变化来调控基因转录进程的中断与否的一种调控机制。 三、问答题(50 分) 1.说出双链DNA 复制起始有关的五种重要的酶或蛋白并简述它们的功能。(15 分) 2.简述增强子的特点和性质及作用机制。(10 分) 3.简述真核RNA 聚合酶II的转录起始复合物装配过程和转录起始(15 分) 4.DNA限制性内切酶EcoRI是人们熟悉的常用内切酶,它是在大肠杆菌(E.coli)R株中发现的,它被广泛用于分子克隆操作和DNA分析。pUC质粒是常用克隆载体之一,它的多克隆位点上有EcoRI、BamHI、KpnI、HindIII 等酶切点。假如要你把一段由EcoRI切割产生的外源DNA段克隆到pUC 质粒中,并把重组质粒转化大肠杆菌R株来扩增,已知条件是所用的R
菌株中只有EcoRI一种限制性内切酶,你设计如何做才能确保成功?为什么?(10 分) 武汉大学 2002 年攻读硕士学位研究生入学考试试题 三、问答: 1、简述(或绘图说明)真核细胞RNA 聚合酶II 转录的起始需要哪些基本转录因子及其装配过程(15 分) 2、简述(或绘图说明)色氨酸操纵子弱化的机制(15分) 3、在讨论基因家庭时经常提到胚胎、胎儿和成体形成的蛋白质,这些述语是指什么现象?可用什么术语来描述这一类基因家族(5分) 4、你正在进行Southern blot 分析,并刚刚完成凝胶电泳部分,下一步是将胶浸泡在NaOH 溶液中使DNA 变性为单链,为了节约时间,你跳过这一步,直接把DNA 从胶上转到硝酸纤维
(完整版)分子生物学试题及答案(整理版)
分子生物学试题及答案 一、名词解释 1．cDNA与cccDNA：cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA；cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2．标准折叠单位：蛋白质二级结构单元α－螺旋与β－折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块，此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型，乃至他们的组合型来予以描述，因此又将其称为标准折叠单位。 3．CAP：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMP activated protein ） 4．回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。 5．micRNA：互补干扰RNA或称反义RNA，与mRNA序列互补，可抑制mRNA的翻译。 6．核酶：具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7．模体：蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域 8．信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36 个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。 9．弱化子：在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。10．魔斑：当细菌生长过程中，遇到氨基酸全面缺乏时，细菌将会产生一个应急反应，停止全部基因的表达。产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸（ppGpp）和鸟苷五磷酸（pppGpp）。PpGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子，而是影响一大批，所以称他们是超级调控子或称为魔斑。 11．上游启动子元件：是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列，-10 区的TATA、-35 区的TGACA 及增强子，弱化子等。 12．DNA探针：是带有标记的一段已知序列DNA，用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。13．SD序列：是核糖体与mRNA结合序列，对翻译起到调控作用。 14．单克隆抗体：只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。 15．考斯质粒：是经过人工构建的一种外源D NA载体，保留噬菌体两端的COS区，与质粒连接构成。16．蓝-白斑筛选：含LacZ基因（编码β半乳糖苷酶）该酶能分解生色底物X-gal（5- 溴-4-氯-3- 吲哚-β-D- 半乳糖苷）产生蓝色，从而使菌株变蓝。当外源DNA插入后，LacZ 基因不能表达，菌株呈白色，以此来筛 选重组细菌。称之为蓝- 白斑筛选。 17．顺式作用元件：在DNA中一段特殊的碱基序列，对基因的表达起到调控作用的基因元件。 18．Klenow 酶：DNA聚合酶I 大片段，只是从DNA聚合酶I 全酶中去除了5' → 3'外切酶活性 19．锚定PCR：用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴，然后分别用 多聚dC 和已知的序列作为引物进行PCR扩增。 20．融合蛋白：真核蛋白的基因与外源基因连接，同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。 二、填空 1．DNA 的物理图谱是DNA分子的（限制性内切酶酶解）片段的排列顺序。 2．RNA 酶的剪切分为（自体催化）、（异体催化）两种类型。 3．原核生物中有三种起始因子分别是（IF-1 ）、（IF-2 ）和（IF-3 ）。 4．蛋白质的跨膜需要（信号肽）的引导，蛋白伴侣的作用是（辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质）。5．启动子中的元件通常可以分为两种：（核心启动子元件）和（上游启动子元件）。 6．分子生物学的研究内容主要包含（结构分子生物学）、（基因表达与调控）、（DNA重组技术）三部分。7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（肺炎球菌感染小鼠）、（T2 噬菌体感染大肠杆菌）这两个实验中主要的论点证据是：（生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接，）、 （mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子，在mRNA′3 末端多了一个多聚腺苷酸（polyA）尾巴）。9．蛋白质多亚基形式的优点是（亚基对DNA的利用来说是一种经济的方法）、（可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响）、（活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭）。 10．蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括（成核）、（结构充实）、（最后重排）。 11．半乳糖对细菌有双重作用；一方面（可以作为碳源供细胞生长）；另一方面（它又是细胞壁的成分）。所以需要一个不依赖于cAMP—CRP 的启动子S2 进行本底水平的永久型合成；同时需要一个依赖于
期末考试分子生物学精彩试题
选择题 1．证明DNA 是遗传物质的两个关键性实验是：肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2 噬菌体感染大肠杆菌。这两个实验中主要的论点证据是（C ）。 A．从被感染的生物体内重新分离得到DNA 作为疾病的致病剂 B．DNA 突变导致毒性丧失 C．生物体吸收的外源DNA（而并非蛋白质）改变了其遗传潜能 D．DNA 是不能在生物体间转移的，因此它一定是一种非常保守的分子 E．真核心生物、原核生物、病毒的DNA 能相互混合并彼此替代 2.1953 年Watson 和Crick 提出（A ）。 A．多核苷酸DNA 链通过氢键连接成一个双螺旋 B．DNA 的复制是半保留的，常常形成亲本-子代双螺旋杂合链 C．三个连续的核苷酸代表一个遗传密码 D．遗传物质通常是DNA 而非RNA E．分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变 3．DNA 双螺旋的解链或变性打断了互补碱基间的氢键，并因此改变了它们的光吸收特性。以下哪些是对DNA 的解链温度的正确描述？（C,D ） A．哺乳动物DNA 约为45℃，因此发烧时体温高于42℃是十分危险的 B．依赖于A-T 含量，因为A-T 含量越高则双链分开所需要的能量越少 C．是双链DNA 中两条单链分开过程中温度变化范围的中间值 D．可通过碱基在260nm 的特征吸收峰的改变来确定 E．就是单链发生断裂（磷酸二酯键断裂）时的温度 4．Watson和Crick提出的经典DNA双螺旋结构属于(B) A．A型B．B型C．Z型 5．多种密码子编码一个氨基酸的现象，称为密码子的(B) A．连续性B．简并性C．通用性D．摆动性 6．真核基因经常被断开（B,D,E ）。 A．反映了真核生物的mRNA 是多顺反子 B．因为编码序列外显子被非编码序列内含子所分隔 C．因为真核生物的DNA 为线性而且被分开在各个染色体上，所以同一个基因的不同部分可能分布于不同的染色体上 D. 表明初始转录产物必须被加工后才可被翻译 E．表明真核基因可能有多种表达产物，因为它有可能在mRNA 加工的过程中采用不同的外显子重组方式 7．选出下列所有正确的叙述。（A,C ） A．外显子以相同顺序存在于基因组和cDNA 中 B．内含子经常可以被翻译 C．人体内所有的细胞具有相同的一套基因 D．人体内所有的细胞表达相同的一套基因 E．人体内所有的细胞以相同的方式剪接每个基因的mRNA 8．下列哪些基因以典型的串联形式存在于真核生物 基因组？（B,C ） A．珠蛋白基因B．组蛋白基因 C．rRNA 基因D．肌动蛋白基因 9．细胞器基因组（ A ）。
南昌大学分子生物学试题
南昌大学医学院分子生物学试题 姓名______________ 成绩__________ 一、单项选择题（每小题1分，共20分） 1．用于DNA鉴定的技术是（ C ） A. Northern blot B. Eastern blot C. Southern blot D. Western blot 2．影响酶促反应速度的因素不包括（ D ） A. 底物浓度 B. 酶的浓度 C. 反应温度 D. 酶原的浓度 3．下列氨基酸中含有羟基的是（ A ） A. 丝氨酸 B. 亮氨酸 C.甘氨酸 D. 色氨酸 4．治疗艾滋病的AZT是 A、DNA类似物 B、RNA类似物 C、核苷类似物 D、蛋白酶抑制剂5．四环素抗菌作用的原理是（ C ） A.抑制氨基酰-tRNA进位 B.抑制转肽酶 C.抑制转位酶 D.与核糖体小亚基结合 6．原核生物中参与转录起始的酶是（D） A. 解链酶 B.引物酶 C. RNA聚合酶全酶 D. RNA聚合酶核心酶7．核酸中核苷酸之间的连接方式是（ B ） A. 2’3’-磷酸二酯键 B. 3’5’-磷酸二酯键 C. 2’5’-磷酸二酯键 D. 肽键 8．目前认为基因表达调控的主要环节是（） A. 翻译起始 B. 转录起始 C. 转录后加工 D.基因活化 9．与DNA损伤修复过程缺陷有关的疾病是（） A.黄嘌呤尿症 B. 痛风 C. 卟啉病 D. 着色性干皮病 10．糖复合物不包括下列哪种物质（） A. 糖蛋白 B. 蛋白聚糖 C. 脂聚糖 D. 糖原 11．有关一个DNA分子的Tm值，下列哪种说法正确（） A. G+C比例越高，Tm值也越高 B. A+T比例越高, Tm值也越高 C. Tm值越高，DNA越易发生变性 D. Tm值越高，DNA越不稳定12．有机磷农药中毒时，下列哪一种酶受到抑制？（） A.已糖激酶 B. 碳酸酐酶 C. 胆碱酯酶 D.乳酸脱氢酶13．绝大部分膜受体的化学物质为（） A.糖脂 B. 糖蛋白 C. 脂蛋白 D. 类固醇 14． G蛋白是指（） A. 蛋白激酶C B.蛋白激酶G C.鸟苷酸环化酶 D.鸟苷酸结合蛋白15．依赖钙离子的蛋白激酶是( ) A. PKA B. PKC C. PKG D. TPK
《分子生物学检验技术》期末样卷标准答案
温州医学院医学检验专业《分子生物学检验技术》期末考试 卷样卷一标准答案 （卷面100分，占总成绩70%） 考试日期：2008年6月1日 考试时间：13：30-15：00 考试方式：闭卷 1.基因组 单倍体细胞中的全套染色体为一个基因组 2.蛋白质组 指由一个基因组，或一个细胞、组织表达的所有蛋白质 3.回文结构 一种旋转对称结构，在轴的两侧序列相同而反向。短的回文结构可能是一种特别的信号，如限制性内切酶的识别位点。较长的回文结构容易转化成发夹结构。 4.肽质量指纹图谱 蛋白质被识别特异酶切位点的蛋白酶水解后得到的肽片段的质量图谱。由于每种蛋白的氨基酸序列（一级结构）都不同，当蛋白被水解后，产生的肽片段序列也各不相同，因此其肽质量指纹图也具有特征性 5.生物芯片 指将大量探针分子固定于支持物上后与标记的样品分子进行杂交，通过检测每个探针分子的杂交信号强度进而获取样品分子的数量和序列信息。 6.分子生物学 从分子水平研究生物大分子的结构与功能从而阐明生命现象本质的科学。其主要研究领域包括蛋白质、蛋白质-核酸和蛋白质-脂质（即生物膜）。 7.PCR 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)，简称PCR，是一种分子生物学技术，用于放大特定的DNA片段。可看作生物体外的特殊DNA复制。 8.BLAST 是一个用来比对生物序列的一级结构的算法。 9.ddNTP
双脱氧核苷三磷酸，与dNTP 的区别在于脱氧核糖的C3 位置缺少-OH，ddNTP可以在聚合酶的作用下可与多核苷酸链的3’－OH之间形成磷酸二酯键，但不能与下一个核苷酸缩合，使多核苷酸链的延伸终止。 10.基因病 遗传物质（基因）发生改变导致的疾病 1.试述真核生物基因组特点； 答：（1）真核生物基因组DNA与蛋白质结合形成染色体，储存于细胞核内，除配子细胞外，体细胞内的基因的基因组是双份的，即有两份同源的基因组。 （2）真核细胞基因转录产物为单顺反子。一个结构基因经过转录和翻译生成一个mRNA 分子和一条多肽链。 （3）存在重复序列，重复次数可达百万次以上。 （4）基因组中不编码的区域多于编码区域。 （5）大部分基因含有内含子，因此，基因是不连续的。 （6）基因组远远大于原核生物的基因组，3*109 。 （错一点扣1.5分） 2.试述重组子结构特征的筛选的方法； 答：（1）重组子大小鉴别筛选：获得外源DNA后，分子量较原来载体大得多，可利用限制性核酸内切酶法鉴别。 （2）直接酶切鉴定：结合琼脂糖凝胶电泳 （3）PCR筛选法：提取重组子DNA，以外源基因两端的互补序列为引物，进行PCR扩增外源DNA. （4）核酸杂交技术筛选：将DNA的克隆片段转移至硝酸纤维素薄膜上，应用特异的核酸探针进行原位杂交检测。 （每点2分） 3.试述酵母双杂交技术原理； 答、酵母的细胞内检测蛋白间相互作用的遗传系统 真核生物的位点特异转录激活因子通常具有两个可分割开的结构域:DNA特异结合域（BD）与转录激活域（AD）。这两个结构域各具功能，互不影响。但一个完整的激活特定基因表达的激活因子必须同时含有这两个结构域,否则无法完成激活功能。不同来源激活因子的区BD与AD结合后则特异地激活被BD结合的基因表达。（4分） 将两个待测蛋白分别与这两个结构域建成融合蛋白，并共表达于同一个酵母细胞内。如果两个待测蛋白间能发生相互作用，就会通过待测蛋白的桥梁作用使AD与BD形成一个完整的转录激活因子并激活相应的报告基因表达。通过对报告基因表型的测定可以很容易地知道待测蛋白分子间是否发生了相互作用。（4分） 4.试述TaqMan技术原理； 答、（1）Taqman技术主要用于荧光定量PCR法，TaqMan 探针是一种寡核苷酸探针，它的荧光与目的序列的扩增相关。（2分） （2）探针设计为与目标序列上游引物和下游引物之间的序列配对，带有一个荧光发光分子 和一个荧光淬灭分子。荧光基团连接在探针的5’端，而淬灭剂则在3’末端。（2分）
分子生物学复习题(有详细答案)
绪论 思考题：（P9） 1.从广义和狭义上写出分子生物学的定义？ 广义上讲的分子生物学包括对蛋白质和核酸等生物大分子结构与功能的研究，以及从分子水平上阐明生命的现象和生物学规律。 狭义的概念，即将分子生物学的范畴偏重于核酸（基因）的分子生物学，主要研究基因或DNA结构与功能、复制、转录、表达和调节控制等过程。其中也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。 2、现代分子生物学研究的主要内容有哪几个方面？什么是反向生物学？什么是 后基因组时代？ 研究内容： DNA的复制、转录和翻译；基因表达调控的研究；DNA重组技术和结构分子生物学。 反向生物学：是指利用重组DNA技术和离体定向诱变的方法研究已知结构的基因相应的功能，在体外使基因突变，再导入体内，检测突变的遗传效应，即以表型来探索基因结构。 后基因组时代：研究细胞全部基因的表达图式和全部蛋白质图式，人类基因组研究由结构向功能转移。 3、写出三个分子生物写学展的主要大事件（年代、发明者、简要内容） 1953年Watson和Click发表了?脱氧核糖核苷酸的结构?的著名论文，提出了DNA的双螺旋结构模型。 1972~1973年，重组DNA时代的到来。H.Boyer和P.Berg等发展了重组DNA 技术，并完成了第一个细菌基因的克隆，开创了基因工程新纪元。 1990~2003年美、日、英、法、俄、中六国完成人类基因组计划。解读人类遗传密码。 4、21世纪分子生物学的发展趋势是怎样的？ 随着基因组计划的完成，人类已经掌握了模式生物的所有遗传密码。又迎来了后基因组时代，人类基因组的研究重点由结构向功能转移。相关学说理论相应诞生，如功能基因组学、蛋白质组学和生物信息学。生命科学又进入了一个全新的时代。 第四章 思考题：（P130） 1、基因的概念如何？基因的研究分为几个发展阶段？ 概念：基因是原核、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遗传效应的核苷酸序列，是遗传的基本单位和突变单位以及控制形状的功能单位。 发展阶段：○120世纪50年代以前，主要从细胞的染色体水平上进行研究，属于基因的染色体遗传学阶段。 ○220世纪50年代以后，主要从DNA大分子水平上进行研究，属于分
武汉大学分子生物学真题2001-2014
一.解释概念(20分,每个4分) 卫星DNA 复制体逆转座子反式激活因子衰减子与衰减作用 三、问答题(50分) 1. 说出双链DNA复制起始有关的五种重要的酶或蛋白并简述它们的功能。(15分) 2. 简述增强子的特点和性质及作用机制。(10分) 3. 简述真核RNA聚合酶II的转录起始复合物装配过程和转录起始(15分) 4. DNA限制性内切酶EcoRI是人们熟悉的常用内切酶,它是在大肠杆菌 (E.coli)R株中发现的,它被广泛用于分子克隆操作和DNA分析。pUC质粒是常用克隆载体之一,它的多克隆位点上有EcoRI、BamHI、KpnI、HindIII等酶切点。假如要你把一段由EcoRI切割产生的外源DN**段克隆到pUC质粒中,并把重组质粒转化大肠杆菌R株来扩增,已知条件是所用的R菌株中只有EcoRI一种限制性内切酶,你设计如何做才能确保成功?为什么?(10分) 武汉大学2002分子生物学 三.问答: 1.简述(或绘图说明)真核细胞RNA聚合酶II转录的起始需要哪些基本转录因子及其装配过程(15分) 2.简述(或绘图说明)色氨酸操纵子弱化的机制(15分) 3.在讨论基因家庭时经常提到胚胎、胎儿和成体形成的蛋白质,这些述语是指什么现象?可用什么术语来描述这一类基因家族(5分) 4. 你正在进行Southern blot分析,并刚刚完成凝胶电泳部分,下一步是将胶浸泡在NaOH溶液中使DNA变性为单链,为了节约时间,你跳过这一步,直接把DNA 从胶上转到硝酸纤维素膜上,你将标记好的探针与膜杂交,却发现放射自显影结果是一片空白,哪里错了呢?(5分)
一、下列名词翻译成中文，并简要解释 1、Domains and motifs 2、Alternative splicing 3、Reporter genes 4、The PCR cycle 5、Restriction mapping 6、Multiple cloning sites 7、DNA libraries 8、Proteomics 9、Replicon 10、Semi-conservative replication 二、简答题(共5题,每题8分,共40分) 1、请列举三种以上蛋白质纯化技术,并说明不同纯化技术的简单原理。 2、简述DNA损伤与DNA突变之间的区别与相互关系。 3、简述密码的简并性(degeneracy)和同义密码子(synonymous codon)及其在生物学上的重要性。 4、简述原核生物转录起始与转录终止过程中所涉及的主要蛋白质和核酸结构及其具体作用。 5、简述cDNA文库的构建过程。 三、论述题(共5题,1-4题每题15分,第5题10分,共70分) 1、人类基因组计划完成的社会意义和科学意义是什么？ 2、什么是操纵子(operon)？试说明色氨酸操纵子(Trp operon)在原核基因表达调控中的调控机制和重要作用。 3、请简要解释顺式作用元件与反式作用因子,并举二例加以说明它们的相互作用方式。 4、试说明真核细胞与原核细胞在基因转录、翻译及DNA的空间结构方面存在的主要差异,表现在哪些方面？ 5、限制性核酸内切酶有哪几种类型？哪一种类型的限制酶最适合于基因工程,为什么？请简要说明其理由。
医学检验本科班分子生物学检验技术试卷
医学检验本班《分子生物学检验技术》试卷 一. 选择题（在备选答案中选择一个最佳答案,每题2分,共20分）: 1. 在核酸提取时,常需要使用氯化钠,醋酸钠等盐溶液,真正的目的是（） A. 中和核酸的负离子,使其易于沉淀 B. 调节PH值 C. 保持核算的完整性 D. 提高核酸的浓度 E. 无特定目的 2. 在一个DNA分子中,如G所占摩尔比为17.2%,则A所占摩尔比为（） A. 82.8% B. 32.8% C. 17.2% D. 65.6% E. 无法计算 3.下列那项不是扩增反应所必需的?（） A. 引物和模板 B. dNTP C. Mg++ D .DNase E. 缓冲液 4. 下列那项是分子生物学技术形成的理论基础?（） A. 基因结构与功能的关系 B. 基因结构变异与疾病的关系 C. 病原微生物的基因结构特征 D. 基因的表达.调控与疾病的关系 E. 以上皆是 5. 分子生物学检验技术主要包括那些技术?（） A. 核酸分子杂交技术 B. DNA测序技术 C. PCR技术 D. DNA重组技术 E. 以上全是 6. 下列哪项检测需应用分子生物学检验技术?（） A. 肝功能检测 B.乙肝两对半检测 C. 乙肝病毒DNA(HBV-DNA)检测 D. 肿瘤细胞培养 E. 病原微生物培养 7. 在核酸的分离纯化过程中,为保证其一级结构的完整性,应采取（） A. 尽量简化分离步骤,缩短提取时间 B. 适当延长提取时间 C. 在37摄氏度条件下进行 D. 加入Mg++,Ca++等二价金属离子 E. 以上全是 8. 有一核酸样品,测得A260/A280=2.0,请问该样品属于哪类核酸样品?（） A. DNA B. RNA C. 是DNA,但有蛋白质污染 D. 是RNA,但有蛋白质污染 E. DNA和RNA 9. 在RNA提取和纯化过程中,为避免Rnase污染而导致RNA的降解,应采取（）