分子生物学复习资料
第一章
1、分子生物学定义：从分子水平研究生物大分子的结构与功能从而阐明生命现象本质的科学，主要指遗传信息的传递（复制）、保持（损伤和修复）、基因的表达（转录和翻译）与调控。
2、Crick提出中心法则（P463）
第二章
1、染色体的结构和组成
原核生物：
●一般只有一条大染色体且大都带有单拷贝基因，除少数基因外（如rRNA基因）是以多拷贝形式存在。
●整个染色体DNA几乎全部由功能基因和调控序列所组成。
●几乎每个基因序列都与它所编码蛋白质序列呈线性对应关系。
真核生物：
真核生物染色体中DNA相对分子质量一般大大超过原核生物，并结合有大量的蛋白质，结构非常复杂。其具体组成成分为：组蛋白、非组蛋白、DNA。
2、组蛋白一般特性：进化上的保守性（不同种生物组蛋白的氨基酸组成是十分相似的。对稳定真核生物的染色体结构起着重要的作用）；无组织特异性；肽链氨基酸分布的不对称性（碱性氨基酸集中分布在N端的半条链上。例如，N端的半条链上净电荷为+16，C端只有+3，大部分疏水基团都分布在C端）；H5组蛋白的特殊性：富含赖氨酸（24%）；组蛋白的可修饰性（包括甲基化、乙基化、磷酸化）。
3、变性：DNA双链的氢键断裂，最后完全变成单链的过程称为变性。
增色效应：在变性过程中，260nm紫外线吸收值先缓慢上升，当达到某一温度时骤然上升，称为增色效应。
4、复性：热变性的DNA缓慢冷却，单链恢复成双链。
减色效应：随着DNA的复性， 260nm紫外线吸收值降低的现象。
5、融解温度（Tm )：变性过程紫外线吸收值增加的中点称为融解温度。生理条件下为85-95℃
6、C值反常现象：C值是一种生物的单倍体基因组DNA的总量，一般情况，真核生物C值是随着生物进化而增加，高等生物的C值一般大于低等生物，但是某些两栖类C值大于哺乳动物，这种现象叫C值反常现象。
7、核小体是由H2A、H2B、H3、H4各两个分子生成的八聚体和由大约200bpDNA组成的。
8、原核生物基因组结构特点：
●基因组很小，大多只有一条染色体●结构简炼●存在转录单元，多顺反子●有重叠基因
真核生物基因组结构特点：
●真核基因组结构庞大●单顺反子
●非编码区较多●含有大量重复序列
●基因不连续性,是断裂基因
9、内含子：是一个基因中非编码DNA片段，它分开相邻的外显子。DNA上的内含子会被转录到前体RNA中，但RNA上的内含子会在RNA离开细胞核进行转译前被剪除。
外显子 (Exon) 是真核生物基因的一部分，它在成熟mRNA剪接 (Splicing)后仍会被保存下来，。所有的外显子一同组成了遗传信息，并可在蛋白质生物合成过程中被表达为蛋白质。
10、重叠基因——同一段DNA含有两种不同蛋白质的信息。
11、断裂基因：真核生物结构基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成，去除非编码区再连接后，可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质，这些基因称为断裂基因。
12、多顺反子：在原核细胞中，通常是几种不同的mRNA连在一起，相互之间由一段短的不编码蛋白质的间隔序列所隔开，这种mRNA叫做多顺反子mRNA。这样的一条mRNA链含有指导合成几种蛋白质的信息。
13、DNA的一级结构：指4种脱氧核苷酸的连接及其排列顺序， DNA序列是这一概念的简称。
DNA 的二级结构：指两条多核苷酸链反向平行盘绕所产生的双螺旋结构。
14、DNA空间结构特点：
● DNA分子由两条互相平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成。
●脱氧核糖和磷酸交替连接，排在外侧，构成DNA骨架，碱基排在内侧
●内侧碱基通过氢键互补形成碱基对（A：T，C：G）。由于碱基可以任何顺序排列，构成了DNA分子的多样性。
15、DNA的半保留复制：由亲代DNA生成子代DNA时，每个新形成的子代DNA中，一条链来自亲代DNA，而另一条链则是新合成的，这种复制方式称半保留复制。
16、复制原点：DNA的复制有特定的起始位点，叫做复制原点。
17、复制子：从复制原点到终点，组成一个复制单位，叫复制子。
18、复制叉：复制时，解链酶等先将DNA的一段双链解开，形成复制点，这个复制点的形状象一个叉子，故称为复制叉。
19、冈崎片段：DNA复制时，复制方向由5’向3’复制，前导链连续合成，后随链合成不连续，形成冈崎片段。
20、前导链：在DNA复制时，合成方向与复制叉移动的方向一致并连续合成的链为前导链。
滞后链：合成方向与复制叉移动的方向相反，形成许多不连续的片段，最后再连成一条完整的DNA链为滞后链。
21、半不连续复制：DNA复制时其中一条子链的合成是连续的，而另一条子链的合成是不连续的，故称半不连续复制。
22、原核基因复制酶相关作用：
●拓扑异构酶I：解开负超螺旋，并由DNA解链酶(DNA helicase) DnaB解开双链
●SSB蛋白(单链结合蛋白）：来稳定解开的单链，以保证该局部结构不会恢复为双链
●引发酶DnaG（一种RNA聚合酶）：在DNA模板上合成一段RNA引物
●Ter-Tus复合物：复制的终止，需要Tus蛋白的参与，当复制叉前移，遇到约22个碱基的重复性终止序列（Ter）时，Ter-Tus复合物能阻止DNA的解链，阻挡复制叉的前移。
23、原核生物DNA聚合酶作用：
●DNA聚合酶I 非主要聚合酶，可确保DNA合成的准确性，去除冈崎片段5‘端RNA引物，使冈崎片段缺口消失。
●DNA聚合酶II 主要生理功能为修复DNA。
●DNA聚合酶III 为主导聚合酶。
●DNA聚合酶IV和V主要在SOS修复中起作用。
24、真核生物DNA复制的特点：
●真核生物每条染色体上可以有多个复制起点。
●真核生物DNA在完成复制前不能开始新的复制，而原核生物则可以连续开始新的DNA复制，一个复制单元多个复制叉。
●复制起点为自主复制序列（ARS）。
●复制叉移动速度慢，仅50bp/s，不到大肠杆菌的1/20。
●真核生物DNA聚合酶有15种以上，其中●DNA聚合酶α功能主要是引物合成。
●DNA聚合酶δ主要负责DNA的复制。
●还存在其它一些酶，有修复损伤功能
26、SOS反应：细胞DNA受到损伤或复制系统受到抑制的紧急状况下，细胞为求生存而产生的一种应急措施。
27、DNA的转座(移位）：由可移位因子介导的遗传物质重排现象。分为复制型转座和非复制型转座。
转座子：是存在于染色体DNA上可自主复制和移位的基本单位。
复制型转座：作为自身移动的一个部分，转座子被复制，一个拷贝仍然保留在原来的位置上，而另一个则插入到一个新的部位。
非复制型转座：转座元件作为一个物理实体直接由一个部位转移到另一个部位。
第三章
1、转录：生物体以DNA为模板合成RNA的过程。
2、RNA分为：mRNA、rRNA和tRNA
3、参与转录的物质：
原料: 4种核糖核苷三磷酸NTPs (ATP, UTP, GTP, CTP)
模板:DNA
酶: RNA聚合酶
其他蛋白质因子
4、无论在原核还是真核细胞中，RNA链的合成都具有以下几个特点：
RNA按5’→3’方向合成
以DNA双链中的反义链为模板
不需要引物参与
合成的RNA有与DNA编码链相同的序列（T-U）
5、转录的不对称性：在RNA的合成中，DNA的二条链中仅有一条链可作为转录的模板，称为转录的不对称性。
6、编码链：与合成的mRNA序列相同的那条DNA链称为编码链
7、模板链：将另一条根据碱基互补原则指导mRNA合成的DNA链称为模板链
8、
9、不均一核RNA：在真核生物中，最初转录生成的RNA称为不均一核RNA(hnRNA)。一般认为hnRNA 多是信使RNA（mRNA）的前体。
10、转录复合物：在转录的不同阶段，RNA聚合酶将同DNA结合，形成不同的复合物。
●在识别阶段，聚合酶与启动子可逆性结合形成封闭二元复合物。
●接着，结合处DNA双链解开，封闭复合物变为开放二元复合物。
11、全酶=核心酶+σ因子
12、核心酶功能：RNA链的延伸
13、σ因子功能：帮助转录起始，一旦转录开始，它就脱离起始复合物，由核心酶负责RNA链的延伸。
14、启动子：一段位于结构基因5’端上游区的DNA序列，能活化RNA聚合酶，使之与模板DNA准确
地结合，并具有转录起始的特异性。
15、结构基因：DNA分子上转录出RNA的区段，称为结构基因。
16、终止子: DNA分子中终止转录的核苷酸序列
17、转录单元：一段从启动子开始至终止子结束的DNA序列。
18、转录起始位点：与新生RNA链第一个核甘酸相对应DNA链上的碱基。通常为一个嘌呤。
17、Pribnow盒：原核生物中经对启动子的比较，它们有共有序列：
–在上游10bp处为TATAAT，又称为Pribnow盒
–在上游35bp处为TTGACA。
18、RNA聚合酶与启动子的结合位点：10bp的Pribnow区和-35bp的TTGACA区是RNA聚合酶与启动子的结合位点，能与σ因子相互识别二具有很高的亲和力。
19、核心启动子定义：指保证RNA聚合酶Ⅱ转录正常起始所必需的、最少的DNA序列，包括转录起始位点及转录起始位点上游TATA区
作用：选择正确的转录起始位点，保证精确起始
20、上游启动子元件定义：将TATA区上游的保守序列称为UPE。包括CAAT盒（CCAAT）和GC盒（GGGCGG）等
作用：控制转录起始频率。
21、增强子：能提高转录起始效率的序列被称为增强子or强化子。
22、增强子的特点：
●远距离效应。一般位于上游-200bp处。
●无方向性。可位于靶基因的上游、下游或内部。
●顺式调节。只调节位于同一染色体上的靶基因。
●无物种和基因特异性。可连接到异源基因上发挥作用。
●有组织特异性。需要特定的蛋白因子参与。
●有相位性。其作用与DNA的构想有关。
●有的增强子可以对外部信号产生反应。
23、转录的基本过程包括：模板的识别，转录起始，转录延伸，转录终止
模板的识别阶段：主要指RNA聚合酶与启动子DNA双链相互作用并与之相结合的过程。
转录起始阶段：RNA聚合酶结合到启动子上以后，使启动子附近的DNA解旋并解链，形成转录泡以促使核糖核苷酸与模板DNA配对。
转录延伸：RNA聚合酶释放σ因子离开启动子后，核心酶沿着模板DNA移动并使新生RNA链不断伸长的过程。
转录终止：当RNA链延伸到终止位点时，RNA将停止合成，转录泡瓦解，DNA链复原，新生RNA链和RNA聚合酶将被释放下来。这即是转录终止。
24、转录起始无需引物
25、转录终止：
不依赖Rho (ρ)因子的转录终止：此类终止反应中，无任何其它因子参与。模板DNA中存在终止转录的特殊信号——终止子，又称内在终止子。
依赖Rho (ρ)因子的转录终止：终止位点上游一般存在一个富含GC碱基的二重对称区，RNA形成发夹结构；终止位点前面有一段由4-8个A组成的序列，RNA的3’端为寡聚U.
26、 因子：六聚体蛋白、水解各种核甘三磷酸，通过催化NTP的水解，促使新生RNA链从三元转录复合物中解离出来，从而终止转录。
27、转录后加工：
◆在5’端加帽——5’端终端总是一个在mRNA转录后加上去的7-甲基鸟苷。这个反应非常快，mRNA几乎一诞生就戴上了帽子
◆3’端加尾——多聚尾巴是在转录后，由内切酶切开mRNA3’端的特定部位，然后由poly A 聚合酶催化多聚腺苷酸反应。
◆RNA的剪接——真核生物的基因往往是断裂的基因，其转录所形成的RNA前体要经过剪切，将内含子切除后，将外显子拼接起来才能形成成熟的mRNA。
◆RNA的编辑——某些RNA，特别是mRNA前体的一种加工方式，如插入、删除或取代一些核苷酸残基，导致DNA编码的遗传信息的改变。
28、帽子结构功能：
①能被核糖体小亚基识别，促使mRNA和核糖体的结合；
②m7Gppp结构能有效地封闭mRNA 5’末端，以保护mRNA免受5’核酸外切酶的降解，增强mRNA 的稳定。
29、Poly A尾巴的功能：Poly A是mRNA进入胞质必需的形式，提高了mRNA在细胞质中的稳定性。
30、GU-AG法则定义：mRNA前体中内含子的5‘边界序列为GU，3’边界序列为AG，这种保守序列模式称为GU-AG法则。
意义：保守序列是前体mRNA剪接过程中各种剪接调节因子的结合位点，对于准确剪接非常重要。
31、指导RNA要求：
1）可以部分与RNA前体互补
2）指导RNA上存在一些未能配对的腺嘌呤A，从而形成缺口，为插入尿嘧啶U提供了模板。
32、原核生物与真核生物mRNA的特征比较：
原核生物——
●半衰期短
●多以多顺反子的形式存在
●起始密码子常为AUG，有时也为GUG，甚至UUG
● 5’端无“帽子”结构， 3’端没有或只有较短的poly（A ）结构。
真核生物——
● 5’端存在“帽子”结构
●多数mRNA 3’端具有poly（A ）尾巴（组蛋白除外）
●以单顺反子的形式存在
●起始密码子仅为AUG
33、单顺反子mRNA：只编码一个蛋白质的mRNA。
多顺反子mRNA：编码多个蛋白质的mRNA。
34、RNA合成与DNA合成异同点——
相同点：
●都以DNA链作为模板
●合成的方向均为5’→3’
●聚合反应均是通过核苷酸之间形成的3’,5’-磷酸二酯键，使核苷酸链延长。
不同点：
第四章
1、翻译：指将mRNA链上的核甘酸从一个特定的起始位点开始，按每三个核甘酸代表一个氨基酸的原则，依次合成一条多肽链的过程。
2、
蛋白质合成的场所是核糖体蛋白质合成的模板是mRNA 模板与氨基酸之间的接合体是tRNA 蛋白质合成的原料是20种氨基酸
3、密码子的摆动性：转运氨基酸的tRNA上的反密码子需要通过碱基互补与mRNA上的遗传密码子反向配对结合，在密码子与反密码子的配对中，前两对严格遵守碱基配对原则，A与U配对，G与C配对，第三对碱基有一定的自由度，Crick将这种变通性称之“摆动”，提出了“摆动假说”。这种现象称为密码子的摆动性。
4、次黄嘌呤核苷酸（I）常出现在tRNA的5ˊ（摆动）位，I可以与U，C，A形成氢键
5、tRNA的结构：（二级结构）由于小片段碱基互补配对，形成三叶草形的二级结构。三叶草形tRNA 分子上有4条根据它们的结构或已知功能命名的手臂：
受体臂：接受氨基酸，形成氨酰-tRNA
TψC臂：其中ψ表示拟尿嘧啶，是tRNA分子所拥有的不常见核苷酸。
反密码子臂：位于套索中央有三联反密码子。
D臂：在D臂中存在多至3个可变核苷酸位点。
（三级结构）“L”形折叠式，靠氢键维持
6、tRNA的功能
●通过其反密码子和mRNA的密码子配对，解读mRNA的遗传信息
●运输的工具，通过氨酰－tRNA合成酶运载氨基酸，将氨基酸插入到正在合成的多肽链的适当位置上。
7、tRNA有两个关键部位：
● 3’端CCA：接受氨基酸，形成氨酰-tRNA。
●与mRNA结合部位—反密码子部位
8、tRNA的种类：起始tRNA和延伸tRNA
——能特异地识别mRNA模板上起始密码子的tRNA称起始tRNA，其他tRNA统称为延伸tRNA。
9、真核生物：起始密码子AUG 所编码的氨基酸是甲硫氨酸（Met），起始AA-tRNA为Met-tRNAMet。
原核生物：起始密码子AUG 所编码的氨基酸并不是甲硫氨酸本身, 而是甲酰甲硫氨酸，起始AA-tRNA 为fMet-tRNAfMet
10、同工tRNA：代表同一种氨基酸的tRNA称为同工tRNA。
11、无义突变：在蛋白质的结构基因中，一个核苷酸的改变可能使代表某个氨基酸的密码子变成终止密码子（UAG、UGA、UAA），使蛋白质合成提前终止，合成无功能的或无意义的多肽，这种突变就称为无义突变。
12、错义突变：由于结构基因中某个核甘酸的变化使一种氨基酸的密码子变为另一种氨基酸的密码子，这种基因突变叫错义突变。
13、校正tRNA：能够改变自身反密码子从而校正无义突变和错义突变的tRNA。
14、核糖体有三个tRNA结合位点（A、P、E），位于大小亚基交界面，tRNA的移动顺序是从A位到P 位再到E位。
15、翻译起始三步：
●30S小亚基与翻译起始因子IF-l，IF-3结合,核糖体大小亚基分离
●30S小亚基通过SD序列与mRNA模板相结合
●在IF-2和GTP的帮助下， fMet-tRNAfMet进入小亚基的P位，tRNA上的反密码子与mRNA上的起始密码子配对。
16、SD序列：mRNA中用于结合原核生物核糖体的序列。
17、真核生物翻译起始的特点：
●核糖体较大,为８０Ｓ；
●起始因子比较多；
● mRNA 5′端具有m7Gppp帽子结构
● Met-tRNAMet
● mRNA的5′端帽子结构和3′端polyA都参与形成翻译起始复合物
18、真核生物翻译起始复合物形成(区别原核生物)
原核生物中30S小亚基首先与mRNA模板相结合，再与fMet-tRNAf Met结合，最后与50S大亚基结合。
而在真核生物中，40S 小亚基首先与Met-tRNA Met
相结合，再与模板mRNA 结合，最后与60S 大亚基结
合生成80S ·mRNA ·Met-tRNA Met 起始复合物。
19、肽链延伸每个循环包括：AA-tRNA 与核糖体结合、肽键的生成和移位。
20、肽键形成：是由转肽酶/肽基转移酶催化
21、肽链的终止：释放因子（RF ）能识别终止密码子UAA ，UAG ，UGA ，并与之结合，水解P 位上多肽链与tRNA 之间的二酯键。
22、特定氨基酸的修饰p137：磷酸化、糖基化、甲基化、乙基化、羟基化和羧基化
23、分子伴侣：能在细胞内辅助新生肽链正确折叠的一类蛋白质。它是一类在序列上没有相关性但有共同功能的保守性蛋白质。分为两类：
– 伴侣素
– 热休克蛋白
24、蛋白质的运转机制
26、信号肽机制过程：
●信号肽开始从核糖体的大亚基露出，SRP 与信号肽结合，被内质网膜上的受体识别并与之结合，产生通道；
●信号肽过膜后被内质网腔的信号肽酶水解，新生肽随之通过蛋白孔道穿越疏水的双层磷脂；
●当核糖体移到mRNA 的“终止”密码子，蛋白质合成即告完成，翻译体系解散，膜上的蛋白孔道消失，核糖体重新处于自由状态。
信号肽假说运输过程：
27、信号肽识别颗粒（SRP ）识别信号肽，使肽链合成暂时停止。
第五章
1、重组DNA的核心：限制性核酸内切酶 & DNA连接酶
限制性核酸内切酶：基本克隆中最重要的工具酶,主要从原核细胞中提取.能从双链DNA内部特异位点识别并且裂解磷酸二酯键而将双链DNA分子断开并形成3/—OH和5/—P末端.
DNA连接酶：通过磷酸二酯键把两个或多个DNA片段连接成一个DNA分子
2、载体：仅仅能在体外利用限制性核酸内切酶和DNA连接酶进行DNA的切割和重组，还不能满足基因工程的要求，只有将它们连接到具备自主复制能力的DNA分子上，才能在寄主细胞中进行繁殖。这就是基因克隆，或分子克隆。
具备自主复制能力的DNA分子就是分子克隆的载体。
病毒、噬菌体和质粒等小分子量复制子都可以作为基因导入的载体。
3、凝胶电泳技术原理：在生理条件下，核酸分子之糖-磷酸骨架中的磷酸基团，是呈离子化状态的，所以，DNA和RNA多核苷酸链又被称为多聚阴离子（polyanions），把这些核酸分子放置在电场当中，它们就会向正电极的方向迁移。由于糖-磷酸骨架在结构上的重复性质，相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷，因此它们能以同样的速度向正电极方向迁移。在一定的电场强度下，DNA分子的这种迁移速度，亦即电泳的迁移率，取决于核酸分子本身的大小和构型。这即是应用凝胶电泳技术分离DNA片段的基本原理。分子量大的核酸分子移动的慢，分子量小的移动的快。
4、EB原理：溴化乙锭染料的化学结构及其对DNA分子的插入作用。由于插入了溴化乙锭分子，在紫外光照射下，琼脂糖凝胶电泳中DNA的条带便呈现出橘黄色荧光，易于鉴定。
5、细菌转化：是指一种细菌菌株由于捕获了来自另一种细菌菌株的DNA而导致性状特征发生遗传改变的生命过程。
感受态细胞：处于能够接受外源DNA的细胞称为感受态细胞。
6、提供转化DNA的菌株叫作供体菌株，接受转化DNA的细菌菌株则被称为受体菌株。
7、重组噬菌体DNA分子经体外包装组成带有外源DNA的λ噬菌体。
8、溶菌阶段：是指在感染过程中产生出子代噬菌体颗粒
溶源阶段:噬菌体的DNA是整合到寄主细胞染色体DNA上，成为它的一个组成部分。
9、PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：
①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；
②模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；
③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板互补的DNA 链。
10、常规PCR技术：
对PCR扩增反应的终点产物进行定量和定性分析，无法对起始模板准确定量，无法对扩增反应实时检测
实时定量PCR技术：
利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化，通过Ct值和标准曲线的分析对起始模板进行定量分析
11、TaqMan法：
●5′端标记有报告基团(Reporter, R) ，即短波长荧光基团
●3′端标记有荧光淬灭基团 (Quencher, Q)，即长波长荧光基团
●探针上的特异碱基序列被设计成能与目的DNA中部结合
●探针完整，RQ相距较近，R所发射的荧光能量被Q吸收，不能产生荧光
●Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探针
●R与Q分开，R被激发光激发，产生绿色荧光
12、基因组DNA文库：从生物组织细胞提取出全部DNA将其切成预期大小的片段，分别与载体连接，转入受体细菌或细胞，形成克隆。汇集包含基因组中所有DNA序列的克隆片段的总汇，称为基因组DNA文库。
13、异硫氰酸胍-苯酚法（TriZol）原理：
●TRIZOL试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚，其中异硫氰酸胍可裂解细胞，促使核糖体蛋白和RNA分离，将RNA释放到溶液中；
●加入氯仿，离心后可形成水相层和有机层，收集上层水相；
●加入异丙醇沉淀，可获得比较纯的总RNA，用于下一步的RNA纯化。
14、cDNA （complementary DNA）的定义：为具有与某RNA链呈互补的碱基序列的单链DNA；或此DNA 链与具有与之互补的碱基序列的DNA链所形成的DNA双链。
15、cDNA文库：是指某生物某发育时期所转录的全部 mRNA 经反转录形成的 cDNA 片段与某种载体连接而形成的克隆的集合。
16、SNP定义：SNP即单核苷酸多态性，指基因组DNA序列中由于单个核苷酸（A T C G)的突变而引起的多态性。
17、克隆（在分子生物学）：人们把将外源DNA插入具有复制能力的载体DNA中，使之得以永久保存和复制这种过程称为克隆。
18、RACE技术原理：采用PCR 技术由已知的部分cDNA 序列的基础上克隆5‘端或3’端缺失序列的技术，是一种简便而有效的方法, 又被称为锚定 PCR (anchored PCR)和单边PCR(one side PCR)。
19、蛋白质组学定义：就是从整体的角度,分析细胞内动态变化的蛋白质组成成份、表达水平与修饰状态,了解蛋白质之间的相互作用与联系,揭示蛋白质功能与细胞生命活动规律的一个新的研究领域。
20、二维凝胶电泳技术：第一向：等电聚焦电泳；第二向：SDS-PAGE
双向电泳后的凝胶经染色后蛋白呈现二维分布图：水平方向反映出蛋白在pI上的差异，垂直方向反映出它们在分子量上的差别。
21、免疫印迹法程序可分为五个部分：
22、在实验中，可能存在总蛋白浓度测定不准确；或者蛋白质样品在电泳前上样时产生的样品间的操作误差；这些误差需要通过测定每个样品中实际转到膜上的GAPDH 的含量来进行校正，所以需要内参。
第六章
1、荧光原位杂交原理：用荧光染料标记的DNA或RNA探针与细胞中的DNA或RNA杂交，洗脱未结合的探针后，在荧光显微镜下对杂交信号的大小、数目、定位和分布等进行分析。
2、FRET荧光能量转移有三个基本条件：
–给体与受体在合适的距离（1～10 nm）；
–给体的发射光谱与受体的吸收光谱有一定的重叠（这是能量匹配的条件）；
–给体与受体的偶极具有一定的空间取向（这是偶极-偶极耦合作用的条件）。
3、基因芯片的工作流程：
●分别从不同器官或组织中分离mRNA，反转录生成cDNA；
●用不同的荧光染料标记不同器官或组织的cDNA；
●将标记后的cDNA与基因芯片进行杂交；
●激光扫描芯片杂交结果，计算机处理；
●分析杂交数据。
第七章
1、基因表达和基因表达调控：从DNA到蛋白质的过程称为基因表达，对这个过程的调节就称为基因表达调控。
2、正转录调控：如果在没有调节蛋白质存在时基因是关闭的，加入这种调节蛋白质后基因活性就被开启，这样的调控为正转录调控。
负转录调控：在没有调节蛋白质存在时基因是表达的，加入这种调节蛋白质后基因表达活性便被关闭，这样的调控为负转录调控。
3、葡萄糖效应：有葡萄糖存在的情况下，即使在细菌培养基中加入乳糖、半乳糖、阿拉伯糖或麦芽糖等诱导物，与其相对应的操纵子也不会启动，不会产生出代谢这些糖的酶来，这种现象称为葡萄糖效应或称为降解物抑制作用。
4、典型的操纵子包括:
●结构基因，编码那些在某一特定的生物合成途径中起作用的、其表达被协同调控的酶。
●调控元件，如操纵序列，是调节结构基因转录的一段DNA序列。
●调节基因，其产物能够识别调控元件，例如阻遏子，可以结合并调控操纵基因序列。
5、乳糖操纵子包括3个结构基因：Z、Y和A，以及启动子、控制子和阻遏子等。转录的调控是在启动区和操纵区进行的。
6、trp操纵子中产生阻遏物的基因是trpR，该基因距trp基因簇很远。
高Trp时：
辅阻遏蛋白+Trp 结合操纵基因
低Trp时：
辅阻遏蛋白不结合操纵基因;
Trp操纵子去阻遏，转录被打开。
7、操纵子的弱化机制：弱化子和前导肽
弱化子：DNA中可导致转录过早终止的一段核甘酸序列（123-150区）。
前导序列：在trp mRNA5'端trpE基因的起始密码前一个长162bp的mRNA片段。
弱化理论认为：mRNA转录的终止是通过前导肽基因的翻译来调节的；
前导肽基因中有两个相邻的色氨酸密码子，因此该前导肽的翻译对tRNATrp的浓度敏感。
8、半乳糖操纵子特点：
●它有两个启动子，其mRNA可从两个不同的起始点开始转录；
●它有两个O区，一个在P区上游，另一个在结构基因galE内部。
作用：催化半乳糖变成葡糖-1-磷酸
第八章
1、真核基因的表达调控的特点：
–原核细胞——环境因素对调控起决定性的作用。群体中每一个细胞对环境变化的反应是直接的和一致的。
–真核细胞——基因表达调控最明显的特征是能在特定时间，特定的细胞中激活特定的基因，实现“预定”的、有序的、不可逆转的分化、发育，并使生物的组织和器官保持
正常功能。
2、真核细胞与原核细胞在基因转录、翻译及DNA的空间结构方面存在以下几个方面的差异：
●在真核细胞中，一条成熟的mRNA,只能翻译出一条多肽链，类似原核生物中常见的多基因操纵子形式不多。
●真核细胞DNA与组蛋白和大量非组蛋白结合，只有一小部分DNA是裸露的。
●高等真核DNA中很大一部分是不转录的，此外大部分真核细胞的基因中间还存在不被翻译的内含子。
●真核生物能有序地根据生长发育阶段的需要进行DNA片段重排，还能在需要时增加某些基因的拷贝数，这在原核中罕见。
●原核生物转录的调节区很小，而在真核生物中要大得多。
●真核生物的RNA在细胞核中合成，只有转运过核膜入细胞质才能翻译，原核不存在严格空间间隔。
●许多真核生物基因经过成熟和剪接过程才能顺利翻译。
3、基因家族：真核生物的基因组中有很多来源相同、结构相似、功能相关的基因按功能成套组合，这些基因被称为基因家族。
4、基因簇：同一家族中的成员有时紧密地排列在一起，成为一个基因簇。
5、外显子-内含子连接区指外显子和内含子的交界或称边界序列，它有两个重要特征：
●内含子的两端序列之间没有广泛的同源性
●连接区序列很短，高度保守，每个内含子5‘端起始的两个碱基都是GT，而3’端最后两个碱基总是AG，称为GT-AG法则，是RNA剪接的信号序列。
6、基因扩增：指某些基因的拷贝数专一性增大的现象，它使得细胞在短期内产生大量的基因产物以满足生长发育的需要，是基因活性调控的一种方式。
7、基因重排：将一个基因从远离启动子的地方移到较近的位点从而启动转录，被称为基因重排。
8、DNA甲基化主要形成5-甲基胞嘧啶（5-mC）和少量的N6-甲基腺嘌呤（N6-mA）及7-甲基鸟嘌呤（7-mG）。
9、CpG岛：CpG二核苷酸通常成串出现在DNA上，这段序列被称为CpG岛。
10、DNA甲基化抑制基因转录的机制：DNA甲基化导致某些区域DNA构象变化，从而影响了蛋白质与DNA的相互作用，抑制了转录因子与启动区DNA的结合效率。
11、顺式作用元件
定义：影响自身基因表达活性的非编码DNA序列。
例：启动子、增强子等
12、反式作用因子定义：能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上，参与调控靶基因转录效率的蛋白质，也称转录因子。
13、“基因”的分子生物学定义是：产生一条多肽链或功能RNA所必需的全部核苷酸序列。
14、核心启动子：是指保证RNA聚合酶II转录正常起始所必需的、最少的DNA序列，包括转录起始位点及转录起始位点上游-25～-30bp处的TATA盒。
15、上游启动子：包括通常位于-70bp附近的CAAT盒（CCAAT）和GC盒（GGGCGG）等。
16、真核基因结构图：
17、增强子：指能使与它连锁的基因转录频率明显增加的DNA序列。
特点：
●增强效应十分明显，一般能使基因转录频率增加10-200倍
●增强效应与其位置和取向无关，不论增强子以什么方向排列（5‘→3’或3‘→5’），甚至和靶基因相距3kb，或在靶基因下游，均表现出增强效应
●大多为重复序列，一般长约50bp，适合与某些蛋白因子结合。其内部常含有一个核心序列：（G）TGGA/TA/TA/T（G），该序列是产生增强效应时所必需的
●增强效应有严密的组织和细胞特异性，说明增强子只有与特定的蛋白质（转录因子）相互作用才能发挥其功能
●没有基因专一性，可以在不同的基因组合上表现增强效应
●许多增强子还受外部信号的调控，
如金属硫蛋白的基因启动区上游所带的增强子，就可以对环境中的锌、镉浓度做出反应
18、转录因子活性：首先它们特异地与DNA结合位点相结合；然后激活转录。这些活性可以独立分配给特定的蛋白结构域，分别称作DNA结合结构域和激活结构域。
19、DNA识别或结合域：
●螺旋-转折-螺旋结构
●锌指结构
●碱性-亮氨酸拉链（bZIP结构）
●碱性-螺旋-环-螺旋（bHLH结构）
20、受体的定义：细胞膜上或细胞内能特别识别生物活性分子并与之结合的成分。它能把识别和接受的信号正确无误地放大并传递到细胞内部，进而引起生物学效应的特殊蛋白质。
配体的定义：能与受体呈特异性结合的生物活性分子则称配体(ligand)。
21、受体的分类：
●按部位分类：细胞膜受体和细胞内受体。
●按结构分类：单体蛋白受体、跨膜复合蛋白受体。
●按效应分类：离子通道偶联受体、G蛋白偶联受体、蛋白激酶偶联受体。
●按功能分类：神经递质类受体、激素类受体、自体活性物质类受体。
22、A激酶定义：依赖于cAMP的蛋白激酶称为A激酶（PKA），它能把ATP分子上的末端磷酸基团加到
某个特定蛋白质的丝氨酸或苏氨酸残基上。
A激酶结构：非活性状态的PKA全酶由4个亚基R2C2所组成，分子量约为150-170，调节亚基与cAMP 相结合，引起构象变化并释放催化亚基，后者随即成为有催化活性的单体。
23、cAMP应答元件：在某些分泌细胞中，需要几个小时，激活的PKA 进入细胞核，将CRE结合蛋白磷酸化，调节相关基因的表达。许多转录因子都可以通过cAMP介导的蛋白质磷酸化过程而被激活，因为这类基因的5’端大都拥有一个或数个cAMP应答元件（CRE）。
CRE（cAMP response element， cAMP应答元件）是DNA上的调节区域。
24、cAMP信号与基因表达：激素→G蛋白耦联受体→激活G蛋白→激活腺苷酸环化酶→cAMP →活化依赖cAMP的蛋白激酶A→释放催化亚基进入核内→底物（CREB）磷酸化→激活基因转录激素→G蛋白耦联受体→激活G蛋白→激活腺苷酸环化酶→cAMP →活化依赖cAMP的蛋白激酶A→释放催化亚基进入核内→底物（CREB）磷酸化→激活基因转录
25、组蛋白的乙酰化及去乙酰化对基因表达的影响：
组蛋白乙酰化的状态与基因表达有关。组蛋白N端“尾巴”上赖氨酸残基的乙酰化中和了组蛋白尾巴的正电荷，降低了它与DNA的亲和性，导致核小体构象发生有利于转录调节蛋白与染色质相结合的变化，从和提高了基因转录的活性。
相反，组蛋白去乙酰化与基因活性的阻遏有关。
26、受体蛋白分子三个结合区：DNA结合区，位于C端的激素结合区和保守性较低的N端。
27、能与某个（类）专一蛋白因子结合，从而控制基因特异表达的DNA上游序列称为应答元件。应答元件主要有：
–热激应答元件（HSE）
–糖皮质应答元件（GRE）
–金属应答元件（MRE）
28、热激蛋白：许多生物在最适温度范围以上，能受热诱导合成一系列热休克蛋白（heat shock protein，HSP），又称热激蛋白。
29、rRNA化学修饰：甲基化
原核生物：碱基甲基化
真核生物：核糖甲基化
30、简单转录单位：这类基因只编码产生一个多肽，其原始转录产物有时需要加工，有时则不需要加工。
31、复杂转录单位：含有复杂转录单位的主要是一些编码组织和发育特异性蛋白质的基因，它们除了含有数量不等的内含子以外，其原始转录产物能通过多种不同方式加工成两个或两个以上的mRNA。
第十一章
1、人类基因组计划：是指对人类全基因组的测序工作。
参与者包括：美、英、日、法、德和中国。
我国于承担其中1%的任务，即人类3号染色体短臂上约30Mb的测序任务。
主要任务：四张图——物理图、转录图、遗传图、全序列图
2、Sanger DNA聚合酶的双脱氧链终止原理
●DNA聚合酶能以单链DNA为模板，合成出准确的DNA互补链序列；
●如果以ddNTP（p417）为底物，掺入到新合成的寡核苷酸链的3‘端后，DNA链的延伸被终止，形成长短不一的核酸片段（长度相邻者仅差一个碱基）
●电泳分离长短不一的核酸片段，根据片段3’端的双脱氧碱基，便可依次阅读合成片段的碱基排列顺序。
生化及分子生物学复习资料
生化及分子生物学复习资料（15天15题） 一、变性蛋白质的性质改变 ①结晶及生物活性丧失是蛋白质变性的主要特征。 ②硫水侧链基团外露。 ③理化性质改变，溶解度降低、沉淀，粘度增加，分子伸展。 ④生理化学性质改变。分子结构伸展松散，易被蛋白酶水解。 蛋白质一、二、三、四级结构；β-折叠、α-螺旋 二、B型双螺旋DNA的结构特点 1. 两条反向平行的多核苷酸链围绕一个“中心轴”形成右手双螺旋结构，螺旋表面有一条大沟和小沟； 2.磷酸和脱氧核糖在外侧，通过3’，5 ’－磷酸二酯键相连形成DNA的骨架，与中心轴平行。碱基位于内侧，与中心轴垂直； 3. 两条链间存在碱基互补：A与T或G与C配对形成氢键，称为碱基互补原则（A与T为两个氢键，G与C为三个氢键）； 4. 螺旋的稳定因素为碱基堆集力和氢键； 5. 螺旋的直径为2nm，螺距为，相邻碱基对的距离为，相邻两个核苷酸的夹角为36度。 DNA变性（复性）、增色（减色）效应 三、酶催化作用特点 一般特点(同普通的催化剂)：1、只催化热力学上允许的化学反应（G<0）；2、降低活化能，但不改变化学反应的平衡点；3、加快化学反应速度，但催化剂本身反应前后不发生改变。 特殊之处：1.催化具有高效性；2.高度的专一性(只能催化一种底物或一定结构的底物）； 3.易失活； 4.催化活性受到调节和控制； 5.催化活性与辅助因子有关 (全酶=酶蛋白＋辅助因子） 维生素；酶促反应速度；抑制剂；酶原 四、生物氧化的特点 1.反应条件温和。
2.生物氧化并非代谢物与氧直接结合，而是以脱氢为主的逐步反应。 3.生物氧化是逐步进行的，能量释放也是逐步的，一部分生成ATP。 4.终产物CO2为有机物氧化成有机酸进而脱羧生成。 呼吸链；氧化磷酸化；底物水平磷酸化；解偶联剂 五、磷酸戊糖途径的生理意义 1. 是体内生成NADPH的主要代谢途径 2. 该途径的中间产物为许多化合物的生物合成提供原料。 3. 与光合作用联系起来，实现某些单糖间的互变。 糖酵解；三羧酸循环；糖异生（掌握反应历程） 六、软脂酸β-氧化和从头合成的比较 β-氧化；α－氧化作用；ω－氧化作用 七、如何判断蛋白质的营养价值
医学分子生物学
医学分子生物学 疾病和基因关系始终是医学领域关注的重大问题。在孟德尔遗传规律被重新认识的初期，就发现许多疾病受到遗传因素的控制，遵守孟德尔遗传因子的传递规律。遗传连锁定律的提出，现代经典遗传学理论体系的完善，极大地促进了对遗传性疾病的认识。上世纪40年代，L Pauling提出了”分子病”的概念，1956年，V Ingram发现血红蛋白β链第六位氨基酸从谷氨酸突变为缬氨酸是导致镰刀状贫血的原因。几乎同时，J.Lejeune发现Down综合症是由于21号染色体三陪体异常所致，系列染色体疾病病因。1976年，H Vanmus 和M Bishop在对肿瘤病毒学的研究中，发现了病毒癌基因，继而又无确定细胞癌基因的存在，此后抑癌基因也相继被发现，建立了肿瘤发生的基因理论，肿瘤被认为是体细胞的遗传病得到了普遍的认可。1983年，将亨廷顿病基因定位于第四号染色体上，1986年，克隆了慢性肉芽肿病的致病基因，同年杜氏肌营养不良和视网膜母细胞瘤的基因，也被定位克隆成功，掀起了单基因遗传病致病基因鉴定和克隆的热潮。世纪之交，人类基因组计划的完成，新的DNA标记的发现，为研究常见病的遗传因素成为了可能，2005年，首次用全基因组关联分析（GWAS），解析了视网膜黄斑变性病的相关基因，揭开了复杂性疾病易感基因确定的序幕，此后，一系列的常见多发疾病基因的GWAS研究，极大地丰富了人们对疾病发病机制的认识，加深了对疾病发生发展机制的认知。今天，疾病和基因关系仍是很长一段时间的重点工作，解析疾病基因,不但可以确定疾病的遗传易感性，有目的的开展预防、诊治，更
重要的是了解疾病新的致病机制，为分子诊断、分子靶向干预提供分子靶点。另一方面，药物作用靶点分子基因在人群的多态性，对药物作用的疗效影响；参与药物吸收、分布、代谢、排泄和毒性（admet）的基因多态性，也会影响药物的疗效，即药物基因组方面的研究，必将成为后基因组时代的重要研究内容。以疾病基因组学和药物基因组学为代表的组学研究进展，将为个体化医疗、精准医学提供理论和实践基础。
考研普通生物学考研朱玉贤《现代分子生物学》考研真题
考研普通生物学考研朱玉贤《现代分子生物学》考研 真题 第一部分考研真题精选 一、选择题 1DNA模板链为5′-ATTCAG-3′，其转录产物是（）。[浙江海洋大学2019研] A．5′-GACTTA-3′ B．5′-CUGAAU-3′ C．5′-UAAGUC-3′ D．5′-CTGAAT-3′ 【答案】B查看答案 【解析】在RNA转录过程中，RNA是按5′→3′方向合成的，以DNA双链中的反义链为模板，在RNA聚合酶催化下，以4种核苷三磷酸（NTPs）为原料，根据碱基配对原则（A-U、T-A、G-C）。因此答案选B。 2DNA的变性（）。[扬州大学2019研] A．可以由低温产生 B．是磷酸二酯键的断裂 C．包括氢键的断裂 D．使DNA的吸光度降低 【答案】C查看答案 【解析】DNA的变性是指当DNA溶液温度接近沸点或者pH较高时，DNA 双链的氢键断裂，最后完全变成单链的过程。DNA的复性是指热变性的DNA经缓慢冷却，从单链恢复成双链的过程。A项，DNA的变性是由于高温引起的，故A
项错误；B项，DNA的变性是核酸双螺旋碱基对的氢键断裂，但不涉及其一级结构的改变，故B项错误；D项，当DNA溶液温度升高到接近水的沸点时（DNA变性），260nm的吸光度明显增加，这种现象称为增色效应，故D项错误。 3密码GGC的对应反密码子是（）。[浙江海洋大学2019研] A．GCC B．CCG C．CCC D．CGC 【答案】B查看答案 【解析】根据碱基互补配对原则，G与C相互配对。因此答案选B。 4原核生物启动序列－10区的共有序列称为（）。[扬州大学2019研] A．TATA盒 B．CAAT盒 C．Pribnow盒 D．GC盒 【答案】A查看答案 【解析】绝大部分启动子都存在两段共同序列：位于－10bp处的TATA区和－35bp处的TTGACA区。因此答案选A。 5．色氨酸生物合成操纵子为下列（）方面的例子。[浙江海洋大学2019研] A．正调控可抑制操纵子 B．负调控可诱导操纵子 C．正调控可诱导操纵子
生物化学基本概念
生物化学基本概念
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生物化学基本概念（２80) 一、绪论 １生物化学 2 分子生物学(狭义、广义) 3 结构生物学 4 基因组学 5蛋白质组学 6 糖生物学 7生物工程 8 基因工程 ９酶工程 10 蛋白质工程 11 细胞工程 １2 发酵工程 １3生化工程 １4 模式生物 二、核酸化学 1 核酸 2 拟核区 3质粒 4 沉降系数 5N-Ｃ糖苷键 ６第二信使 7 转化现象 8 类病毒 ９沅病毒（蛋白质侵染因子) 10 核酸的一级结构 11 DNA的一级结构 12 RＮA的一级结构 １3 寡核苷酸 １4 多核苷酸 １5 DNA的二级结构 1６ＤＮＡ的三级结构 17 正超螺旋
1８负超螺旋 19 RＮＡ的二级结构 2０RNＡ的三级结构 2１发夹结构 ２2 多顺反子 23 单顺反子 ２４减色效应 25 增色效应 2６核酸的变性 27 核酸的复性 28ＤNA的熔点（Tｍ、熔解温度) 29 退火 30 分子杂交 ３1 Soｕthｅrn 印迹法 32Ｎouthern 印迹法 三、蛋白质化学 1激素 2抗体 3 补体 4 干扰素 5 糖蛋白 ６蛋白质氨基酸 7非蛋白质氨基酸 8等电点（PＩ） 9肽 １０生物活性肽 11 双缩脲反应 1２构型 13 构象 1４蛋白质的一级结构 15蛋白质的二级结构 １6蛋白质的三级结构 17蛋白质的四级结构 18二面角
19β-折叠 ２0 β-转角 21 无规则卷曲 22超二级结构 ２3 结构域 24分子病 25 可变残基 26 不变残基 ２７电泳 ２8 透析 29 相对迁移率 3０盐析 31 盐溶 32 蛋白质的变性作用 33 变性蛋白 ３4 蛋白质的复性 35 简单蛋白 36 结合蛋白 3７糖蛋白 38脂蛋白 39色蛋白 ４0 核蛋白 41 磷蛋白 42 金属蛋白 4３可逆沉淀 44 不可逆沉淀 四、酶学 1 酶 2 单纯酶 3 结合酶 4 酶蛋白 5 辅因子 6全酶 7 辅酶
中南大学_医学分子生物学试题库答案.pdf
医学分子生物学习题集 （参考答案） 第二章基因与基因组 一、名词解释 1.基因(gene)：是核酸中储存有功能的蛋白质多肽链或RNA序列信息及表达这些信息 所必需的全部核苷酸序列。 2.断裂基因(split gene)：真核生物基因在编码区内含有非编码的插入序列，结构基因 不连续，称为断裂基因。 3.结构基因(structural gene)：基因中用于编码RNA或蛋白质的DNA序列为结构基因。 4.非结构基因(non-structural gene)：结构基因两侧一段不编码的DNA片段，含有基 因调控序列。 5.内含子(intron)：真核生物结构基因内非编码的插入序列。 6.外显子(exon)：真核生物基因内的编码序列。 7. 基因间DNA (intergenic DNA)：基因之间不具有编码功能及调控作用的序列。 8. GT-AG 法则 (GT-AG law)：真核生物基因的内含子5′端大多数是以GT开始，3′ 端大多数是以 AG 结束，构成 RNA 剪接的识别信号。 9.启动子(promoter)：RNA聚合酶特异识别结合和启动转录的DNA序列。 10.上游启动子元件(upstream promoter element )：TATA合上游的一些特定的DNA序 列，反式作用因子，可与这些元件结合，调控基因转录的效率。 11.反应元件(response element)：与被激活的信息分子受体结合，并能调控基因表达的 特异DNA序列。 12.poly(A)加尾信号 (poly(A) signal) ：结构基因末端保守的 AATAAA 顺序及下游 GT 或T富含区，被多聚腺苷酸化特异因子识别，在mRNA 3′端加约200个A。 13.基因组(genome)：细胞或生物体一套完整单倍体的遗传物质的总称。 14.操纵子(operon)：多个功能相关的结构基因成簇串联排列，与上游共同的调控区和下 游转录终止信号组成的基因表达单位。 15.单顺反子(monocistron)：一个结构基因转录生成一个mRNA分子。 16.多顺反子(polycistron)：原核生物的一个mRNA分子带有几个结构基因的遗传信息，
612生物化学与分子生物学
中科院研究生院硕士研究生入学考试 《生物化学与分子生物学》考试大纲 一、考试内容 1.蛋白质化学 考试内容 ●蛋白质的化学组成，20种氨基酸的简写符号 ●氨基酸的理化性质及化学反应 ●蛋白质分子的结构（一级、二级、高级结构的概念及形式） ●蛋白质一级结构测定的一般步骤 ●蛋白质的理化性质及分离纯化和纯度鉴定的方法 ●蛋白质的变性作用 ●蛋白质结构与功能的关系 考试要求 ●了解氨基酸、肽的分类 ●掌握氨基酸与蛋白质的物理性质和化学性质 ●了解蛋白质一级结构的测定方法（目前关于蛋白质一级结构测定的新方法和新思路很多，而教科书和教学中 涉及的可能不够广泛，建议只让学生了解即可） ●理解氨基酸的通式与结构 ●理解蛋白质二级和三级结构的类型及特点，四级结构的概念及亚基 ●掌握肽键的特点 ●掌握蛋白质的变性作用 ●掌握蛋白质结构与功能的关系 2.核酸化学 考试内容 ●核酸的基本化学组成及分类 ●核苷酸的结构 ●DNA和RNA一级结构的概念和二级结构要特点；DNA的三级结构 ●RNA的分类及各类RNA的生物学功能 ●核酸的主要理化特性 ●核酸的研究方法 考试要求 ●全面了解核酸的组成、结构、结构单位以及掌握核酸的性质 ●全面了解核苷酸组成、结构、结构单位以及掌握核苷酸的性质 ●掌握DNA的二级结构模型和核酸杂交技术 ●了解microRNA的序列和结构特点（近年来针对非编码RNA的研究越来越深入，建议增加相关考核） 3. 糖类结构与功能 考试内容 ●糖的主要分类及其各自的代表 ●糖聚合物及其代表和它们的生物学功能 ●糖链和糖蛋白的生物活性 考试要求 ●掌握糖的概念及其分类 ●掌握糖类的元素组成、化学本质及生物学功用 ●理解旋光异构 ●掌握单糖、二糖、寡糖和多糖的结构和性质 ●掌握糖的鉴定原理 4. 脂质与生物膜 考试内容
医学分子生物学讲义复习重点
分子生物学 1.ORF 答:ORF是open reading frame的缩写，即开放阅读框架。在DNA链上，由蛋白质合成的起始密码开始，到终止密码为止的一个连续编码列，叫做一个开放阅读框架。 2.结构基因 答：结构基因（structural genes）可被转录形成mRNA,并翻译成多肽链，构成各种结构蛋白质或催化各种生化反应的酶和激素等。 3.断裂基因 答：基因是核酸分子中贮存遗传信息的遗传单位，一个基因不仅仅包括编码蛋白质或 RNA 的核酸序列，还包括保证转录所必需的调控序列、位于编码区 5 ' 端与 3 ' 端的非编码序列和内含子。真核生物的结构基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成，去除非编码区再连接后，可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质，这些基因称为断裂基因（split gene）。 4.选择性剪接 答：选择性剪接（也叫可变剪接）是指从一个mRNA前体中通过不同的剪接方式（选择不同的剪接位点组合）产生不同的mRNA剪接异构体的过程，而最终的蛋白产物会表现出不同或者是相互拮抗的功能和结构特性，或者，在相同的细胞中由于表达水平的不同而导致不同的表型。 5.C值 答：基因组的大小通常以其DNA的含量来表示，我们把一种生物体单倍体基因组DNA的总量成为C值（C value）。 6.生物大分子 答：生物大分子指的是作为生物体内主要活性成分的各种分子量达到上万或更多的有机分子。常见的生物大分子包括蛋白质、核酸、脂类、糖类。 7.酚抽提法 答：酚抽提法最初于1976年由Stafford及其同事提出，通过改良，以含EDTA、SDS及无DNA酶的RNA酶裂解缓冲液破碎细胞，经蛋白酶K处理后，用pH8.0的Tris饱和酚抽提DNA，重复抽提至一定纯度后，根据不同需要进行透析或沉淀处理获得所需的DNA样品。 8.凝胶过滤层析 答：凝胶过滤层析也称分子排阻层析或分子筛层析，利用凝胶分子筛对大小、形状不同的分子进行层析分离，是根据分子大小分离蛋白质混合物最有效的方法之一。 9.多重PCR 答：多重PCR技术是在一个反应体系中加入多对引物，同时扩增出多个核酸片段，由于每对引物扩增的片段长度不同，可用琼脂糖凝胶电泳或毛细管电泳等技术加以鉴别。 10.荧光域值 答：荧光阈值是在荧光扩增曲线上人为设定的一个值，它可以设定在荧光信号指数扩增阶段任意位置上，一般荧光阈值的设置是基线荧光信号的标准偏差的10倍。 11.退火 答：温度突然降至37-58℃时，变性的DNA单链在碱基互补的基础上重新形成氢
现代分子生物学考研复习重点
现代分子生物学考研复习资料整理 第一章绪论 分子生物学：是研究核酸、蛋白质等所有生物大分子的形态、结构及其重要性、规律性和相互关系的科学 分子生物学的主要研究内容 1、DNA重组技术 2、基因表达调控研究 3、生物大分子的结构功能研究——结构分子生物学 4、基因组、功能基因组与生物信息学研究 5、DNA的复制转录和翻译 第二章染色体与DNA 半保留复制：DNA在复制过程中碱基间的氢键首先断裂，双螺旋解旋并被分开，每条链分别作为模板合成新链，产生互补的两条链。这样新形成的两个DNA分子与原来DNA分子的碱基顺序完全一样，因此，每个子代分子的一条链来自亲代DNA，另一条链则是新合成的，所以这种复制方式被称为DNA半保留复制 DNA半不连续复制：DNA双螺旋的两条链反向平行，复制时，前导链DNA的合成以5′-3′方向，随着亲本双链体的解开而连续进行复制；后随链在合成过程中，一段亲本DNA单链首先暴露出来，然后以与复制叉移动相反的方向、按照5′-3′方向合成一系列的冈崎片段，然后再把它们连接成完整的后随链，这种前导链的连续复制和后随链的不连续复制称为DNA 的半不连续复制 原核生物基因组结构特点：1、基因组很小，大多只有一条染色体2、结构简练3、存在转录单元，多顺反子4、有重叠基因 真核生物基因组的结构特点：1、真核基因组庞大，一般都远大于原核生物的基因组2、真核基因组存在大量的重复序列3、真核基因组的大部分为非编码序列，占整个基因组序列的90％以上，该特点是真核生物与细菌和病毒之间最主要区别4、真核基因组的转录产物为单顺反子5、真核基因是断裂基因，有内含子结构6、真核基因组存在大量的顺式作用元件，包括启动子、增强子，沉默子等7、真核基因组中存在大量的DNA多态性8、真核基因组具有端粒结构 DNA转座（移位）是由可移位因子介导的遗传物质重排现象 DNA转座的遗传学效应：1、转座引入插入突变2、转座产生新的基因3、转座产生的染色体畸变4、转座引起生物进化 转座子分为插入序列和复合型转座子两大类 环状DNA复制方式：θ型、滚环型和D-环型 第三章生物信息的传递（上）从DNA到RNA 转录：指拷贝出一条与DNA链序列完全相同的RNA单链的过程 启动子：是一段位于结构基因5′段上游区的DNA序列，能活化RNA聚合酶，使之与模板DNA准确地结合并具有转录起始的特异性 原核生物启动子结构：存在位于-10bp处的TATA区和-35bp处的TTGACA区，其是RNA聚合酶与启动子的结合位点，能与σ因子相互识别而具有很高的亲和力 终止子：是给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列（促进转录终止的DNA序列） 终止子的类型：不依赖于ρ因子和依赖于ρ因子 增强子：能增强或促进转录起始的序列 增强子的特点：1、远距离效应2、无方向性3、顺式调节4、无物种和基因的特异性5、具
生物化学、化学生物学、分子生物学,三者联系与区别
一、生物化学、化学生物学、分子生物学，三者联系与区别 欧洲化学生物学的一个专门刊名为ChemBioChem刊物，这部刊物在我所阅读的文献中被反复提及，我查到该文献的两位主编分别是Jean-Marie Lehn教授和Alan R. Fersht教授，他们在诠释刊物的宗旨[1]时指出：ChemBioChem意指化学生物学和生物化学，其使命是涵盖从复杂的碳水化合物、多肽蛋白质到DNA/RNA，从组合化学、组合生物学到信号传导，从催化抗体到蛋白质折叠，从生物信息学和结构生物学到药物设计，这一范围宽广而欣欣向荣的学科领域。既然化学生物学涵盖面这么广泛，它到底和其它学科之间怎么区分呢？ 想到拿这个题目出来介绍是因为这是我在第一节课课堂讨论中的内容，我们小组所参考的文献主要是关于对化学生物学这门学科的认识，化学生物学的分析手段以及一些新的研究进展，比如药物开发和寻找药物靶点。当时课堂上对于题目中三者展开过热烈讨论，作为新兴学科的化学生物学，研究的是小分子作为工具解决生物学问题的学科，它如何从生物化学和分子生物学中分别出来，这也是我自己最开始产生过矛盾的问题，这里我结合所查阅的文献谈一下自己的理解。 1.1 生物化学(Biological Chemistry) 生物化学是研究生命物质的化学组成、结构、化学现象及生命过程中各种化学变化的生物学分支学科[1]。根据一些生物化学的书我归纳了一下，其研究的基本内容包括对生物体的化学组成的鉴定，对
新陈代谢与代谢调节控制，生物大分子的结构与功能测定，以及研究酶催化，生物膜和生物力学，激素与维生素，生命的起源与进化。 生物化学对其他各门生物学科的深刻影响首先反映在与其关系比较密切的细胞学、微生物学、遗传学、生理学等领域。通过对生物高分子结构与功能进行的深入研究，揭示了生物体物质代谢、能量转换、遗传信息传递、光合作用、神经传导、肌肉收缩、激素作用、免疫和细胞间通讯等许多奥秘，使人们对生命本质的认识跃进到一个崭新的阶段。(摘自https://www.360docs.net/doc/9217343253.html,/view/253496.htm) 1.2 化学生物学（Chemical Biology） 化学生物学是使用小分子作为工具解决生物学的问题或通过干扰/调节正常过程了解蛋白质的功能[1]。曾看到过一篇关于介绍化学生物学的奠基人Schreiber的文章，他曾经指出：“化学生物学是对分子生物学的有力补充，分子生物学采用定点突变的方法来改变生物分子如蛋白质和核酸的功能；而化学生物学是采用化学的手段，如运用小分子或人工设计合成的分子作为配体来直接改变生物分子的功能[2]。” 化学生物学是近年来出现的新兴研究领域，它融合了化学、生物学、物理学、信息科学等多个相关学科的理论、技术和研究方法，是一个有活力、有应用前景的新学科。它主要研究的内容包括[3]：1化学遗传学—采用小分子活性化合物作为探针,探索和调控细胞过程 (1)基因表达的小分子调控
生物化学与分子生物学问答题
机体是如何维持血糖平衡的（说明血糖的来源、去路及调节过程）？ 血液中的葡萄糖称为血糖，机体血糖平衡是糖、脂肪、氨基酸代谢协调的结果，也是肝、肌、脂肪组织等器官代谢协调的结果（由于血糖的来源与去路保持动态平衡，血糖是组织、中枢神经、脑能量来源的主要保证）。 A.血糖来源（3分） 糖类消化吸收：食物中的糖类经消化吸收入血，这是血糖最主要的来源；肝糖原分解：短期饥饿后，肝中储存的糖原分解成葡萄糖进入血液；糖异生作用：在较长时间饥饿后，氨基酸、甘油等非糖物质在肝内异生合成葡萄糖；其他单糖转化成葡萄糖。 B.血糖去路（4分） 氧化供能：葡萄糖在组织细胞中通过有氧氧化和无氧酵解产生ATP，为细胞供给能量，此为血糖的主要去路。合成糖原：进食后，肝和肌肉等组织将葡萄糖合成糖原以储存。转化成非糖物质：可转化为甘油、脂肪酸以合成脂肪；可转化为氨基酸、合成蛋白质。转变成其他糖或糖衍生物（戊糖磷酸途径），如核糖、脱氧核糖、氨基多糖等。血糖浓度高于肾阈时可随尿排出一部分。 C.血糖的调节（2分） 胰岛素是体内唯一降低血糖的激素，但胰岛素分泌受机体血糖的控制（机体血糖升高胰岛素分泌减少）。胰岛素分泌增加，糖原合酶活性提高、糖原磷酸化酶活性降低，糖原分解降低、糖原合成提高，血糖降低。否则相反（胰岛素分泌减少，糖原合酶活性降低、糖原磷酸化酶活性提高，糖原分解提高、糖原合成降低，血糖提高）。胰高血糖素、肾上腺素作用是升高机体血糖。胰高血糖素、肾上腺素分泌增加，糖原合酶活性降低、糖原磷酸化酶活性提高，糖原分解提高、糖原合成降低，血糖提高。否则相反。 老师，丙酮酸被还原为乳酸后，乳酸的去路是什么 这个问题很重要。 肌组织产生的乳酸的去向包括：大量乳酸透过肌细胞膜进入血液，在肝脏进行糖异生转变为葡萄糖。大量乳酸进入血液，在心肌中经LDH1催化生成丙酮酸氧化供能；部分乳酸在肌肉内脱氢生成丙酮酸而进入到有氧氧化供能。大量乳酸透过肌细胞膜进入血液，在肾脏异生为糖或经尿排出体外。 下面问题你能回答出来不 1说明脂肪氧化供能的过程 （1）脂肪动员：脂肪组织中的甘油三酯在HSL的作用下水解释放脂酸和甘油。 （2）脂酸氧化：经脂肪酸活化、脂酰CoA进入线粒体、β-氧化、乙酰CoA进入三羧酸循环彻底氧化成H2O 和CO2并释放能量。 （3）甘油氧化：经磷酸化、脱氢、异构转变成3-磷酸甘油醛，3-磷酸甘油醛循糖氧化分解途径彻底分解生成H2O 和CO2并释放能量。 1．丙氨酸异生形成葡萄糖的过程 答：（1）丙氨酸经GPT催化生成丙酮酸。（2）丙酮酸在线粒体内经丙酮酸羧化酶催化生成草酰乙酸，后者经苹果酸脱氢酶催化生成苹果酸出线粒体，在胞液中经苹果酸脱氢酶催化生成草酰乙酸，后者在磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶作用下生成磷酸烯醇式丙酮酸。（3）磷酸烯醇式丙酮酸循糖酵解途径至1，6-双磷酸果糖。1，6-双磷酸果糖经果糖双磷酸酶催化生成6-磷酸果糖，再异构成6-磷酸葡萄糖。6-磷酸葡萄糖在葡萄糖-6-磷酸酶作用下生成葡萄糖。
分子生物学复习资料 绝对重点
分子生物学复习资料 （第一版） 一名词解释 1 Southern blot / Northern blot—DNA斑迹法 / RNA转移吸印技术。是为了检测待检基因或其表达产物的性质和数量（基因拷贝数）常用的核酸分子杂交技术。二者均属于印迹转移杂交术，所不同的是前者用于检测DNA样品；后者用于检测RNA样品。 2 cis-acting element / trans-acting factor—顺式作用元件 / 反式作用因子。均为真核生物基因中的转录调控序列。顺式作用元件是与结构基因表达调控相关、能被基因调控蛋白特异性识别和结合的特定DNA序列，包括启动子和上游启动子元件、增强子、反应元件和poly （A）加尾信号。反式作用因子是能与顺式作用元件特异性结合、对基因表达的转录起始过程有调控作用的蛋白质因子，如RNA聚合酶、转录因子、转录激活因子、抑制因子。 3VNTR / STR—可变数目串联重复序列 / 短串联重复。均为非编码区的串联重复序列。 前者也叫高度可变的小卫星DNA，重复单位约9～24bp,重复次数变化大,变化高度多态性；后者也叫微卫星DNA，重复单位约2～6 bp，重复次数约10～60次，总长度通常小于150bp 。（参考第7题） 4 viral oncogene / cellular oncogene—病毒癌基因 / 细胞癌基因。病毒癌基因指存在于逆转录病毒中、体外能使细胞转化、体内能导致肿瘤发生的基因；细胞癌基因也叫原癌基因，指存在于细胞内，与病毒癌基因同源的基因序列。正常情况下不激活，与细胞增殖相关，是维持机体正常生命活动所必须的，在进化上高等保守。当原癌基因的结构或调控区发生变异，基因产物增多或活性增强时，使细胞过度增殖，从而形成肿瘤。 5 ORF / UTR—开放阅读框 / 非翻译区。均指在mRNA中的核苷酸序列。前者是特定蛋白质多肽链的序列信息，从起始密码子开始到终止密码子结束，决定蛋白质分子的一级功能；后者是位于前者的5＇端上游和3＇端下游的、没有编码功能的序列，主要参与翻译起始调控，为前者的多肽链序列信息转变为多肽链所必需。 6 enhancer / silencer—增强子 / 沉默子。均为顺式作用元件。前者是一段含多个作用元件的短DNA序列，可特异性与转录因子结合，增强基因的转录活性，可以位于基因任何位置，通常在转录起始点上游-100到-300个碱基对处；后者是前者内含的负调控序列，结合特异蛋白因子时，对基因转录起阻遏作用。 7 micro-satellite / minisatellite—微卫星DNA / 小卫星DNA 。卫星DNA是出现在非编码区的串联重复序列，特点是有固定重复单位且重复单位首尾相连形成重复序列片段，串联重复单位长短不等，重复次数大小不一。微卫星DNA即STR；小卫星DNA分为高度可变的小卫星DNA（即VNTR）和端粒DNA。（参考第3题） 8 SNP / RFLP—单核苷酸多态性 / 限制性片段长度多态性。前者是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性，它是人类遗传变异中最常见的一种，占所
生化和分子生物学
华中科技大学生物学硕士研究生入学考试《生化与分子生物学》 考试大纲 第一部分考试说明 一、考试性质 全国硕士研究生入学考试是为高等学校招收硕士研究生而设置的。其中，生物学（专业部分）由我校自行出题。它的评价标准是高等学校优秀本科毕业生能达到的及格或及格以上水平，以保证被录取者具有基本的生物学知识而有利于我校在录取时择优选拔。 二、评价目标 生物学（专业部分）考试在重点考查生物化学和分子生物学的基础知识、基本理论的基础上，注重考查理论联系实际的能力，说明、提出、分析和解决这些学科中出现的现象和问题。 ?正确地理解和掌握有关的基本概念、理论、假说、规律和论断 ?运用掌握的基础理论知识和原理，可以就某一问题设计出实验方案 ?准确、恰当地使用专业术语，文字通顺、层次清楚、有论有据、合乎逻辑地表述 三、考试形式和试卷结构 o答卷方式：闭卷，笔试，所列题目全部为必答题 o答题时间：180分钟 o题型比例：名词解释约15％；填空题约25％；简答和计算约30％；分析论述约30％ 第二部分考查要点 一、分子生物学 （一）DNA 1、DNA的结构 DNA的构成，DNA的一级结构、二级结构、高级结构 2、DNA的复制 DNA的半保留复制，复制起点、方向和速度，复制的几种主要方式 3、原核生物和真核生物DNA复制特点 原核生物DNA复制特点，真核生物DNA复制特点，DNA的复制调控 4、DNA的修复 四种修复方式
5、DNA的转座 转座子的分类和结构特征，转座机制，转座作用的遗传学效应，真核生物的转座子 （二）生物信息的传递（上）——从DNA到RNA 1、RNA的转录 转录的基本过程，转录机器的主要成分 2、启动子与转录起始 启动子的基本结构，启动子的识别，酶与启动子的结合，－10区和－35区的最佳间距，增强子及其功能，真核生物启动子对转录的影响 3、原核生物与真核生物mRNA的特征比较 原核生物mRNA的特征，真核生物mRNA的特征 4、终止和抗终止 不依赖于ρ因子的终止，依赖于ρ因子的终止，抗终止 5、内含子的剪接、编辑及化学修饰 RNA中的内含子，RNA的剪接，RNA的编辑和化学修饰 （三）生物信息的传递（下）——从DNA到蛋白质 1．遗传密码 三联子密码及其破译，遗传密码的性质 2．tRNA tRNA的结构、功能及种类，氨酰－tRNA合成酶 3．核糖体 核糖体的结构，rRNA，核糖体的功能 4．蛋白质合成的生物学机制 氨基酸的活化，肽链的起始、延伸和终止，蛋白质前体的加工，蛋白质合成抑制剂，RNA分子在生物进化中的地位 5．蛋白质运转机制 翻译－运转同步机制，翻译后的运转机制，核定位蛋白的运转机制，蛋白质的降解 （四）分子生物学研究法 1、重组DNA技术发展史上的重大事件 略 2、DNA操作技术 核酸的分离、提纯和定量测定的方法，核酸的凝胶电泳，分子杂交，细菌转化，核苷酸序列分析，基因扩增，DNA与蛋白质相互作用研究 2、基因克隆的主要载体系统 质粒DNA及其分离纯化，重要的大肠杆菌质粒载体，λ噬菌体载体，柯斯质粒载体，pBluescript噬菌体载体
(珍贵)浙江大学05-12年博士医学分子生物学真题
2012浙江大学医学分子生物学（乙）回忆版： 一．名词解释（3分*5） 1.The Central Dogma 2.Telomere 3.nuclear localization signal, NLS 4.Protein Motif 5.Splicesome 二．简答题：（5分*9） 1.一个基因有哪些结构组成？ 2.基因、染色体、基因组的关系？ 3.表观遗传机制改变染色质结果的机制？ 4.内含子的生物学意义？ 5.什么是蛋白质泛素化？其生物学意义是什么？ 6.蛋白质纯化的方法？ 7.MicroRNA是什么？它如何发挥作用？ 8.什么是全基因组关联研究（Genome Wide Association Studies,GWAS）？其研究目的是什么？ 9.分子生物学研究为什么需要模式生物？ 三．问答题：（10分*4） 1.人体不同部位的细胞其基因组相同，为什么表达蛋白质的种类和数量不同？ 2.用分子生物学知识，谈谈疾病发生机制？ 3.有一块肿瘤组织及癌旁组织，设计一个实验证明细胞内蛋白质在肿瘤发生发展中的作用？ 4.目前，基因靶点研究已成为新药开发的用药部分，结合目前药物靶点在新药开发中的应用，谈谈你的建议和观点？
2011浙江大学博士入学考试医学分子生物学试题回忆 一、英文名解 1、冈崎片段： 2、反式作用因子： 3、多克隆位点： 4、micro RNA： 5、分子伴侣： 二、简答 1、蛋白质四级结构。 2、真核转录调控点。 3、表观遗传学调控染色质。 4、真核RNA聚合酶类型及作用。 5、基因突变。 6、组学概念及举例。 7、简述兔源多克隆抗体的制备。
生物化学与分子生物学试题库完整
“生物化学与分子生物学” 题库 第二军医大学基础医学部 生物化学与分子生物学教研室编制 2004年7月
第一篇生物大分子的结构与功能 第一章蛋白质的结构与功能 一、单项选择题（A型题） 1.蛋白质的一级结构是指下面的哪一种情况？( ) A、氨基酸种类的数量 B、分子中的各种化学键 C、氨基酸残基的排列顺序 D、多肽链的形态和大小 E、氨基酸的连接方式 2.关于蛋白质分子三级结构的描述，其中错误的是:( ) A、天然蛋白质分子均有这种结构 B、具有三级结构的多肽链都有生物学活性 C、三级结构的稳定性主要是次级键维系 D、亲水基团多聚集在三级结构的表面 E、骨架链原子的空间排布 3、学习“蛋白质结构与功能”的理论后，我们认识到错误概念是（）。 A、蛋白质变性是肽键断裂所致 B、蛋白质的一级结构决定其空间结构 C、肽键的键长较单键短，但较双键长 D、四级结构蛋白质必定由二条或二条以上多肽链组成 E、蛋白质活性不仅取决于其一级结构，还依赖于高级结构的正确 4、通过“蛋白质、核酸的结构与功能”的学习，认为错误的概念是（）。 A、氢键是维系多肽链β-折叠的主要化学键 B、DNA分子的二级结构是双螺旋，维系其稳定的重要因素是碱基堆积力 C、蛋白质变性后可以恢复，但DNA变性后则不能恢复 D、谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸三者组成GSH E、蛋白质亚基具有三级结构，而tRNA三级结构呈倒L形 5、“蛋白质分子结构与功能”一章学习，告之我们以下概念不对的是（）。 A、氢键不仅是维系β-折叠的作用力，也是稳定β-转角结构的化学键 B、活性蛋白质均具有四级结构 C、α-螺旋的每一圈包含3.6个氨基酸残基 D、亚基独立存在时，不呈现生物学活性的 E、肽键是不可以自由旋转的 6、关于蛋白质分子中α-螺旋的下列描述，哪一项是错误的？（） A、蛋白质的一种二级结构 B、呈右手螺旋
医学分子生物学
第一章总论 一、名词解释： 1．单体、有效部位2．一次代谢产物、二次代谢产物3．有效成分、无效成分 ４．正相色谱、反相色谱5．水/醇法、醇/水法 二、填空题： 1．溶剂提取法中选择溶剂的依据__________。 2．色谱法按其基本原理分为________、________、________、________。 3．硅胶为________性吸附剂，适于分离________成分，化合物的极性越大，与吸附剂吸附得越____，越_____被洗脱下来。 4．凝胶色谱法分离天然产物中大分子时，主要依据化合物____________差异。 5．葡聚糖凝胶的商品型号是按其交链度大小分类，并以________表示。英文字母G代表________，后面的阿拉伯数字表示凝胶的吸水量再乘以________的值，如G-25的吸水量为________。 6．分配层析是利用各成分在的两相溶剂中不同而进行分离的层析方法。 7．聚酰胺吸附属于________吸附，是一种用途十分广泛的分离方法，特别适于分离________、________、________类化合物。 8．硅胶活化温度________，时间________，超过________丧失吸附力，硅胶含水量达________不能作吸附剂使用，只能作分配色谱。 9．中药液体制剂常采用“水提醇沉”法，水可以提取如糖类、_________、________、_______ 等成分，醇沉可以沉淀________、__________等物质。 10．使用混合溶剂重结晶时，一般是将样品先溶于__________的溶剂中，在加热的情况下滴加__________溶剂直至__________，再稍滴加__________溶剂使__________后让其渐渐析晶。 11．纸色谱的原理属__________，特别适合于________成分的分离鉴定，如_________、_________、__________等。 12．聚酰胺在含水溶剂中的吸附能力大致有三个规律①__________②__________③__________。 13.硅胶、氧化铝吸附剂的用量一般为试样量的__________倍，试样极性较小、难以分离者， 吸附剂用量可适当提高至试样量的__________倍。 14.TLC展开时，使组分R f值达到__________的溶剂系统可选用为柱色谱分离该相应组分的 最佳溶剂系统。 15.活性炭是__________吸附剂，对__________物质具有较强的吸附力，在水溶液中吸附力 __________，在有机溶剂中吸附力__________。 16.常见的极性有机溶剂有甲醇、乙醇、丙酮、正丁醇等，欲从水提取也重萃取极性成分，
医学分子生物学试题答案
名词解释： 基因是核酸中贮存遗传信息的遗传单位，是贮存有功能的蛋白质多肽链或RNA序列信息及表达这些信息所必需的全部核苷酸序列。 基因组（gencme）：细胞或生物中，一套完整单倍体遗传物质的总和（包括一种生物所需的全套基因及间隔序列）称为基因组。基因组的功能是贮存和表达遗传信息。 SD序列(Shine-Dalgarno sequence,SD sequence) 是mRNA能在细菌核糖体上产生有效结合和转译所需要的序列。SD序列与16S rRNA的3’末端碱基(AUUCCUCCAC-UAG-5’)互补，以控制转译的起始 分子克隆：克隆（clone）：是指单细胞纯系无性繁殖，现代概念是将实验得到的人们所需的微量基因结构，引入适当的宿主细胞中去，在合适的生理环境中进行无性繁殖，从而利用宿主的生理机制繁衍人们所需要的基因结构，并进行表达。由于整个操作在分子水平上进行，所以称为分子克隆（molecular cloning）。 动物克隆(Animal cloning)就是不经过受精过程而获得动物新个体的方法. 基因诊断：就是利用现代分子生物学和分子遗传学的技术方法，直接检测基因结构 （DNA水平）及其表达水平（RNA水平）是否正常，从而对疾病做出诊断的方法。 基因治疗就是将有功能的基因转移到病人的细胞中以纠正或置换致病基因的一种治疗方法，是指有功能的目的基因导入靶细胞后有的可与宿主细胞内的基因发生整合，成为宿主细胞遗传物质的一部分，目的基因的表达产物起到对疾病的治疗作用。 转基因动物就是把外源性目的基因导入动物的受精卵或其囊胚细胞中，并在细胞基因组中稳定整合，再将合格的重组受精卵或囊胚细胞筛选出来，采用借腹怀孕法寄养在雌性动物（foster mother）的子宫内，使之发育成具有表达目的基因的胚胎动物，并能传给下一代。这样，生育的动物为转基因动物。 探针：在核酸杂交分析过程中，常将已知顺序的核酸片段用放射性同位素或生物素进行标记。这种带有一定标记的已知顺序的核酸片段称为探针。 限制性核酸内切酶：限制性核酸内切酶（restriction endonuclease）是一类专门切割DNA 的酶，它们能特异结合一段被称为限制酶识别顺序的特殊DNA序列并切割dsDNA。 载体：要把一个有用的基因（目的基因-研究或应用基因）通过基因工程手段送到生物细胞（受体细胞），需要运载工具携带外源基因进入受体细胞，这种运载工具就叫做载体（vector）。 限制性片段长度多肽性分析(RFLP):DNA片段长度多态性分析（restriction fragment length polymer-phism,RFLP）基因突变导致的基因碱基组成或(和)顺序发生改变,会在基因结构中产生新的限制性内切酶位点或使原有的位点消失. 用限制酶对不同个体基因组进行消化时，其电泳条带的数目和大小就会产生改变，根据这些改变可以判断出突变是否存在。 简答题： 1.蛋白质的生物合成过程中的成分参与，参与因子，作用？ mRNA是合成蛋白质的“蓝图（或模板）” tRNA是原料氨基酸的“搬运工” rRNA与多种蛋白质结合成核糖体作为合成多肽链的装配机（操作台） tRNA mRNA是合成蛋白质的蓝图，核糖体是合成蛋白质的工厂，但是，合成蛋白质的原料——20种氨基酸与mRNA的碱基之间缺乏特殊的亲和力。因此，需要转运RNA把氨基酸搬运到核糖体中的mRNA上 rRNA 核糖体RNA（rRNA）和蛋白质共同组成的复合体就是核糖体，核糖体是蛋白质合成的场所。
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医学分子生物学复习资料
蛋白质、糖蛋白与蛋白聚糖、脂蛋白、细胞信号传导 名词解释： 1、构型：指一个有机分子中各个原子特有的固定的空间排列。这种排列不经过 共价键的断裂和重新形成是不会改变的。不同构型之间相互转化会涉及化学键 的断裂，构型的改变往往使分子的光学活性发生变化。 2、构象：构成分子的原子和基团因为化学键的旋转而形成在三维空间的不同的 排布、走向。不同的构象之间可以相互转化而不涉及化学键的破裂。构象改变 不会改变分子的光学活性。 3、肽平面：肽键具有部分双键性质而不能自由旋转，这样C、N 原子同它们连接的 O、H和两个 Cα共六个原子就被约束在一个刚性平面上，这个平面被称为肽平面。 4、基序或模体：相邻的几个二级结构相互作用形成有规则的组合体称为超二级 结构，是特殊的序列或结构的基本组成单元，又称为基序或模体。 5、结构域：蛋白质的超二级结构进一步组合折叠成半独立紧密的球状结构域。 6、糖蛋白：在分子组成中以蛋白质为主，其一定部位以共价键与若干糖链（约4%）相连所构成的分子。 7、蛋白聚糖：蛋白聚糖是一类由蛋白质和糖胺聚糖通过共价键相连而成的化合物，其分子中的含糖量通常为50%~90%。 8、血脂：血浆所含的脂类统称为血脂，它包括甘油三酯、磷脂、胆固醇及游离 脂酸。 9、血浆脂蛋白：在血浆中血脂与蛋白质结合，形成血浆脂蛋白。 10、载脂蛋白：血浆脂蛋白中蛋白质部分称为载脂蛋白。 11、脂蛋白受体：脂蛋白受体是一类位于细胞膜上的糖蛋白，它们能以高亲和 性的方式与其相应的脂蛋白配体相互作用，介导细胞对脂蛋白的摄取和代谢， 从而进一步调节血浆脂蛋白和血脂的水平。 12、细胞通讯（ cell communication）：指一个细胞发出的信息通过介质传递 到另一个细胞产生相应反应的过程。
生物化学笔记(整理版)1
《生物化学》绪论 生物化学可以认为是生命的化学，是研究微生物、植物、动物及人体等的化学组成和生命过程中的化学变化的一门科学。 生命是发展的，生命起源，生物进化，人类起源等，说明生命是在发展，因而人类对生命化学的认识也在发展之中。 20世纪中叶直到80年代，生物化学领域中主要的事件： （一）生物化学研究方法的改进 a. 分配色谱法的创立——快捷、经济的分析技术由Martin.Synge创立。 b. Tisellius用电泳方法分离血清中化学构造相似的蛋白质成分。吸附层析法分离蛋白质及其他物质。 c. Svedberg第一台超离心机，测定了高度复杂的蛋白质。 d. 荧光分析法，同位素示踪，电子显微镜的应用，生物化学的分离、纯化、鉴定的方法向微量、快速、精确、简便、自动化的方向发展。 （二）物理学家、化学家、遗传学家参加到生命化学领域中来 1． Kendrew——物理学家，测定了肌红蛋白的结构。 2． Perutz——对血红蛋白结构进行了X-射线衍射分析。 3． Pauling——化学家，氢键在蛋白质结构中以及大分子间相互作用的重要性，认为某些protein具有类似的螺旋结构，镰刀形红细胞贫血症。 （1．2．3．都是诺贝尔获奖者） 4．Sanger―― 生物化学家 1955年确定了牛胰岛素的结构，获1958年Nobel prize化学奖。1980年设计出一种测定DNA内核苷酸排列顺序的方法，获1980年诺贝尔化学奖。 5．Berg―― 研究DNA重组技术，育成含有哺乳动物激素基因的菌株。 6．Mc clintock―― 遗传学家发现可移动的遗传成分，获1958年诺贝尔生理奖。 7．Krebs―― 生物化学家 1937年发现三羧酸循环，对细胞代谢及分生物的研究作出重要贡献，获1953年诺贝尔生理学或医学奖。 8．Lipmann―― 发现了辅酶A。 9． Ochoa——发现了细菌内的多核苷酸磷酸化酶 10．Korberg——生物化学家，发现DNA分子在细菌内及试管内的复制方式。（9．10．获1959年的诺贝尔生理医学奖） 11．Avery―― 加拿大细菌学家与美国生物学家Macleod,Carty1944年美国纽约洛克菲勒研究所著名实验。肺炎球菌会产生荚膜，其成分为多糖，若将具荚膜的肺炎球菌（光滑型）制成无细胞的物质，与活的无荚膜的肺炎球菌（粗糙型）细胞混合 －>粗糙型细胞也具有与之混合的光滑型的荚膜－>表明，引起这种遗传的物质是DNA 12．Wilkins―― 完成DNA的X-射线衍射研究，对Watson和Crick确定DNA分子的双螺旋结构是至关重要的。三人共获1962年诺贝尔生理医学奖。 13．Nirenberg―― 生物化学家在破译遗传密码方面作出重要贡献。