固相萃取 ppt
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固相微萃取原理及使用 ppt课件
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固相微萃取原理及使用
萃取头直接接触样品，等到吸附 平衡后，在送入到进样器内进行脱附 后分析。 这种联用技术正好和SPMEGC互补。
缺点：吸附平衡时间长， 脱附条件不易优化， 萃取头负载材料可用的不多。
capilary coated polymeric material
31
固相微萃取原理及使用
5
固相微萃取原理及使用
固相微萃取(solid phase microextraction）
• 1989年；Pawliszyn
• Supelco1993年推出了商品化的SPME装置
• 1995年Pawliszyn等；空气中苯系物分析；SPME在气相 色谱中快速进样装置； 萃取丝内用CO2冷却装置
• 1997年Pawliszyn等；测定病人呼吸气中一些成分的 SPME萃取装置
• 挥发性强的化合物在较短时间内即可达到分配平 衡，而挥发性弱的待测物质则需要相对较长的平 衡时间。
16
固相微萃取原理及使用
搅拌强度
• 增加传质速率,提高吸附萃取速度,缩短达到平衡的 时间
• 磁力搅拌，高速匀浆，超声波。采取超声振动就 比电磁搅拌达到平衡的时间大大缩短
17
固相微萃取原理及使用
盐效应
固相微萃取原理及使用
萃取方法
• 直接法（Di-SPME） 适合于气体基质或干净的 水基质
• 顶空法（HS-SPME） 适合于任何基质，尤其是直接SPME无法处理的脏水、油脂、血液、
污泥、土壤等 • 膜保护法（membrane-protected-SPME）
通过一个选择性的高分子材料膜将试 样与萃取头分离，以实现间接萃取，膜的 作用是保护萃取头使其不被基质污染， 同时提高萃取的选择性。 • 衍生化法（derivatization SPME） • 冷SPME法（cooled SPME）
固相微萃取原理及使用
萃取头直接接触样品，等到吸附 平衡后，在送入到进样器内进行脱附 后分析。 这种联用技术正好和SPMEGC互补。
缺点：吸附平衡时间长， 脱附条件不易优化， 萃取头负载材料可用的不多。
capilary coated polymeric material
31
固相微萃取原理及使用
5
固相微萃取原理及使用
固相微萃取(solid phase microextraction）
• 1989年；Pawliszyn
• Supelco1993年推出了商品化的SPME装置
• 1995年Pawliszyn等；空气中苯系物分析；SPME在气相 色谱中快速进样装置； 萃取丝内用CO2冷却装置
• 1997年Pawliszyn等；测定病人呼吸气中一些成分的 SPME萃取装置
• 挥发性强的化合物在较短时间内即可达到分配平 衡，而挥发性弱的待测物质则需要相对较长的平 衡时间。
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固相微萃取原理及使用
搅拌强度
• 增加传质速率,提高吸附萃取速度,缩短达到平衡的 时间
• 磁力搅拌，高速匀浆，超声波。采取超声振动就 比电磁搅拌达到平衡的时间大大缩短
17
固相微萃取原理及使用
盐效应
固相微萃取原理及使用
萃取方法
• 直接法（Di-SPME） 适合于气体基质或干净的 水基质
• 顶空法（HS-SPME） 适合于任何基质，尤其是直接SPME无法处理的脏水、油脂、血液、
污泥、土壤等 • 膜保护法（membrane-protected-SPME）
通过一个选择性的高分子材料膜将试 样与萃取头分离，以实现间接萃取，膜的 作用是保护萃取头使其不被基质污染， 同时提高萃取的选择性。 • 衍生化法（derivatization SPME） • 冷SPME法（cooled SPME）
第二章固相萃取技术上PPT课件
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分离模式
➢反相萃取
（极性液体相，非极性改良固体相） 疏水性相互作用 非极性—非极性相互作用 范德华力或色散力 硅胶键合C18,C8, C4，C2,-苯基等，可以从强极性的溶剂中 吸附非极性到中等极性的化合物。
.
正相固相萃取
• 吸附剂：极性键合相，如硅胶键合－NH2、－CN，
-Diol（二醇基）；极性吸附剂，如silica、florisil（硅酸 镁吸附剂）、(A-,N-,B-)alumina（氧化铝吸附剂）、硅藻 土等。流动相为中等极性到非极性样品基质。
• 反相萃取体系常选用一定比例组成的有机溶 剂-水混合液，有机溶剂比例应大于样品溶液 而小于洗脱剂溶液。
.
洗涤
固相萃取
干扰物
分析物
.
操作步骤
固相萃取
四
高强度溶剂洗脱
洗
脱
洗脱目标分析物
/
收 集
.
四.洗脱及收集分析物
• 选择适当的洗脱溶剂洗脱被分析物，收集洗脱 液，挥干溶剂以备后用或直接进行在线分析。
与其他分析仪器的联用。
.
6
第一节 概述
固相萃取存在的不足： 1、一些样品的复杂基体有时会较大程度的降 低萃取的回收率； 2、污染严重的复杂样品尤其是含有胶体或固 体小颗粒的样品会不同目的程度的堵塞固定相的微 孔结构，引起柱容量和穿透体积的降低、萃取 效率和回收率的严重恶化； 3、柱体和固定相材料的纯度有时仍不够理想， 使得测定的空白难以进一步降低； 4、固定相的选择性有时仍显不足，需进一步 提高等。
阳离子交换固相萃取。
.
分离模式
➢ 离子交换
带有电荷的化合物靠静电吸引到带有电荷的吸附剂表面 按键合的离子基团的性质分类：
固相萃取_SPE_技术PPT课件
一. 概述
样品类型
SPE可以用于所有类型样品的处理，但是液 体样品是最容易处理的。
Survey response %
Liquids Solids Goos and creams Gaseous Other
二.SPE基本原理
SPE是一种吸附剂萃取，样品通过填充吸附 剂的一次性萃取柱，分析物和杂质被保留在柱 上，然后分别用选择性溶剂去除杂质，洗脱出 分析物，从而达到分离的目的。
SPE的分离模式主要取决于填充剂的类型和 溶剂的性质。
二.SPE基本原理
SPE也是一个柱色谱分离过程，分离机理、 固定相和溶剂的选择等方面与高效液相色谱 （HPLC）有许多相似之处。
但是SPE柱的填料粒径（>40µm）要比HPLC 填料（3~10µm）大。由于短的柱床和大的粒 径，SPE柱效比HPLC色谱柱低得多。
以硅胶为基质的固定相的分类
NON-POLAR PHASES
C18 Octadecyl C2 Ethyl CH Cyclohexyl PH Phenyl
SPECIALTY PHASES
PBA CERTIFY ENVIRELUT ACCUCAT
Increasing polarity
POLAR PHASES
H
五. SPE的类型
依据柱中填料（吸附剂）来划分，可将SPE 法分为吸附型和键合相分配型（BPC）。
吸附型SPE是采用极性较强的硅胶、硅藻土 和氧化铝等吸附剂，样品进入柱中，分析物的 极性官能团先迅速被吸附至极性吸附剂上，而 后以低极性溶剂转至中极性溶剂陆续洗去杂质 及洗脱出分析物。
五.SPE的类型
五. SPE的类型
硅胶键合非极性固定相
填充剂使用非极性烷烃类化学键合相 （C18、C8、 C6H5-C6H11等）的SPE分离方式称为反相BPC。最适 用于极性基质中萃取非极性化合物。
固相萃取法讲稿39页PPT
40、人类法律，事物有规律，这是不 容忽视 的。— —爱献 生
31、只有永远躺在泥坑里的人，才不会再掉进坑里。——黑格尔 32、希望的灯一旦熄灭，生活刹那间变成了一片黑暗。——普列姆昌德 33、希望是人生的乳母。——科策布 34、形成天才的决定因素应该是勤奋。——郭沫若 35、学到很多东西的诀窍，就是一下子不要学很多我们国家的法律中只有某种 神灵， 而不是 殚精竭 虑将神 灵揉进 宪法， 总体上 来说， 法律就 会更好 。—— 马克·吐 温 37、纲纪废弃之日，便是暴政兴起之 时。— —威·皮 物特
38、若是没有公众舆论的支持，法律 是丝毫 没有力 量的。 ——菲 力普斯 39、一个判例造出另一个判例，它们 迅速累 聚，进 而变成 法律。 ——朱 尼厄斯
31、只有永远躺在泥坑里的人，才不会再掉进坑里。——黑格尔 32、希望的灯一旦熄灭，生活刹那间变成了一片黑暗。——普列姆昌德 33、希望是人生的乳母。——科策布 34、形成天才的决定因素应该是勤奋。——郭沫若 35、学到很多东西的诀窍，就是一下子不要学很多我们国家的法律中只有某种 神灵， 而不是 殚精竭 虑将神 灵揉进 宪法， 总体上 来说， 法律就 会更好 。—— 马克·吐 温 37、纲纪废弃之日，便是暴政兴起之 时。— —威·皮 物特
38、若是没有公众舆论的支持，法律 是丝毫 没有力 量的。 ——菲 力普斯 39、一个判例造出另一个判例，它们 迅速累 聚，进 而变成 法律。 ——朱 尼厄斯
固相萃取法及进展课件
固相萃取法及进展课件
目录
• 固相萃取法简介 • 固相萃取技术分类 • 固相萃取的应用领域 • 固相萃取的进展与挑战 • 固相萃取的实际案例分析
01
固相萃取法简介
定义与原理
定义
固相萃取法是一种样品预处理技术， 通过固体吸附剂吸附目标物，实现目 标物与复杂基质的分离。
原理
基于吸附剂与目标物之间的吸附作用， 将目标物从复杂的基质中分离出来， 再通过洗脱液将目标物洗脱下来，实 现目标物的富集或净化。
高分离效果。
应用
用于复杂样品中多类化合物的分 离和富集。
特点
固定相通常为复合型材料，结合 了多种作用机制的特点。
03
固相萃取的应用领域
环境样品处理
固相萃取在环境样品处理中主 要用于水样和土壤样品的预处 理，以去除杂质、富集目标组分。
通过使用不同性质的固相萃取 柱，可以选择性地吸附目标污 染物，从而实现高效分离。
食品中农药残留的固相萃取检测
总结词
固相萃取技术在食品中农药残留的检测中具有高灵敏度、高特异性和低检测限的特点， 为食品安全提供了有力保障。
详细描述
农药残留是影响食品安全的重要因素之一，固相萃取技术能够有效地从食品中提取农药 残留，通过气相色谱、液相色谱等方法进行定性和定量分析，为食品安全监管提供技术
药物中手性分子的固相萃取拆分
总结词
固相萃取技术能够有效地实现药物中手性分 子的拆分，为药物研发和质量控制提供了新 的解决方案。
详细描述
手性分子是药物研发中的重要组成部分，由 于其对映异构体的生理活性可能存在显著差 异，因此需要进行有效的拆分。固相萃取技 术能够通过不同的手性固定相实现手性分子 的拆分，为药物研发和质量控制提供了新的 解决方案。
目录
• 固相萃取法简介 • 固相萃取技术分类 • 固相萃取的应用领域 • 固相萃取的进展与挑战 • 固相萃取的实际案例分析
01
固相萃取法简介
定义与原理
定义
固相萃取法是一种样品预处理技术， 通过固体吸附剂吸附目标物，实现目 标物与复杂基质的分离。
原理
基于吸附剂与目标物之间的吸附作用， 将目标物从复杂的基质中分离出来， 再通过洗脱液将目标物洗脱下来，实 现目标物的富集或净化。
高分离效果。
应用
用于复杂样品中多类化合物的分 离和富集。
特点
固定相通常为复合型材料，结合 了多种作用机制的特点。
03
固相萃取的应用领域
环境样品处理
固相萃取在环境样品处理中主 要用于水样和土壤样品的预处 理，以去除杂质、富集目标组分。
通过使用不同性质的固相萃取 柱，可以选择性地吸附目标污 染物，从而实现高效分离。
食品中农药残留的固相萃取检测
总结词
固相萃取技术在食品中农药残留的检测中具有高灵敏度、高特异性和低检测限的特点， 为食品安全提供了有力保障。
详细描述
农药残留是影响食品安全的重要因素之一，固相萃取技术能够有效地从食品中提取农药 残留，通过气相色谱、液相色谱等方法进行定性和定量分析，为食品安全监管提供技术
药物中手性分子的固相萃取拆分
总结词
固相萃取技术能够有效地实现药物中手性分 子的拆分，为药物研发和质量控制提供了新 的解决方案。
详细描述
手性分子是药物研发中的重要组成部分，由 于其对映异构体的生理活性可能存在显著差 异，因此需要进行有效的拆分。固相萃取技 术能够通过不同的手性固定相实现手性分子 的拆分，为药物研发和质量控制提供了新的 解决方案。
《固相萃取法及进展》课件
05
固相萃取法的应用实例
总结词
固相萃取法在环境样品中有机污染物的分离与富集方面具有广泛应用，能够有效地去除干扰物质，提高目标化合物的回收率。
详细描述
固相萃取法常用于水、土壤、大气等环境样品中有机污染物的分离与富集，如多环芳烃、有机氯农药、多溴联苯醚等。通过选择合适的吸附剂和洗脱液，可以实现对目标化合物的快速、高效分离与富集，为后续的检测分析提供可靠的样品处理方法。
VS
联用技术可以降低样品前处理的成本和时间。
详细描述
通过将固相萃取与其他分离技术联用，可以实现自动化和连续化的样品前处理过程，从而大大降低人力成本和时间成本，提高分析效率。
总结词
自动化固相萃取技术提高了处理通量和操作的简便性。
随着自动化技术的发展，越来越多的研究者开始研究自动化固相萃取技术。这种技术通过集成机械臂、液体处理装置和检测系统等设备，实现了样品的自动化处理和检测。自动化固相萃取技术不仅提高了处理通量，还简化了操作步骤，降低了人为误差，提高了分析结果的准确性和可靠性。
总结词
详细描述
总结词
自动化固相萃取技术在药物分析、环境监测等领域得到广泛应用。
要点一
要点二
详细描述
自动化固相萃取技术以其高效、准确和简便的特点，在药物分析、环境监测、食品安全等领域得到广泛应用。通过自动化固相萃取技术，可以快速准确地分离和富集复杂样品中的目标物，为后续的检测提供可靠的样品处理保障。
注意事项
确保实验器材的清洁度，避免交叉污染。
将样品进行稀释或浓缩，以满足后续分析需求。
样品处理
将已知量的目标物加入样品中，以评估方法的准确度和精密度。
加标
将加标样品通过注射器加入到固相萃取柱中。
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离子浓度相近时，电荷高，水合离子半径小的离 子易被吸附。
强酸性阳离子交换柱 : Fe3+>Cr3+>Al3+>Ca2+>Mg2+>K+>NH4+>Na+>H+>Li
+
弱酸性： H+ >Fe3+ > Cr3+> Al3+> Ca2+> Mg2+> >K+≈ NH4+ > Na+> Li+
强碱性： Cr2O72- >SO42- >CrO42- >NO3- >Cl- >OH- >F>HCO3- >HSiO3-
弱碱性：OH->Cr2O72->SO42->CrO42->NO3->Cl->HCO3-
离子洗脱顺序
吸附顺序中位于前面的离子可以洗脱后面的离子 高浓度时, 可用顺序后面的离子洗脱前面的离子。 洗脱剂可以是酸或碱，能中和待分析物所带电荷，
或中和键合硅胶官能团所带电荷。
讨论
某化合物的Pka>4, 需用什么柱子吸附？如何洗脱？
3.8.1 固相萃取（SPE）
1、固相萃取装置：固相萃取柱是一根直径为数毫米的 小柱子。由柱管、烧结垫和固定相 三部分组成。
固相萃取 小柱
与HPLC比较，(1) 柱效低（柱床短、填料粒径大, n=10－50塔 板）,只能分开保留性质有很大差别的化合物;(2) 目标物被固定相 牢固吸附或完全不被保留;(3) SPE柱是一次性柱。
3、固相萃取法的优点 与传统液液萃取法相比，（1）富集倍数高，分离
选择性和重现性好，被萃物的回收率高；（2）；不需 要用超纯溶剂，所需溶剂少，环境污染小；（3）操作 简单、省时（为液-液萃取的1/12） 、省力（可批量进 行），可消除乳化现象，易于实现自动化等。
4、固相萃取法的模式
• 反相萃取 • 正相萃取 • 离子交换萃取 • 免疫亲和萃取
➢ 强阳离子交换柱 SCX (内装R－SO3H交换剂) ➢ 弱阳离子交换柱WCX (含有－COOH、磷酸基 －PO3H2、酚基－ －OH的离子交换树脂) ➢ 强阴离子交换柱 SAX
➢ 弱阴离子交换柱 WAX 以伯胺（-NH2）、仲胺(-NHR)或叔胺（-
NR2）为交换基团的离子交换树脂。
离子选择性吸附顺序
HLB和ODS比较： pH适用范围宽： 1-14 柱子不怕抽干，碳链不 会塌陷。
可通过调节样品溶液的 pH值来选择性的保留酸性、 中性和碱性化合物。
高保留性
➢正相固相萃取
极性吸附剂：如硅胶键合-NH2、-CN、二醇基等 洗脱溶剂：非极性或弱极性，如正己烷、环己烷等。
应用：从非极性或弱极性溶剂中吸附极性化合物。
6、固相萃取的一般操作程序
活化吸附剂 在萃取之前必须用适当的溶剂进行预 处理，以除去吸附剂中可能存在的杂质，并使吸附剂溶 剂化，以提高萃取的重现性和回收率。
上样 让试样溶液以一定的流速通过柱子（可利用 抽真空、加压或离心等方式）。
洗涤 用中等强度的溶剂将干扰组分洗脱下来
目标化合物的洗脱 用适当强度的洗脱剂将目标化合物脱在收集管中。
如抗生素、咖啡因、药物、染料、芳香油、脂溶 性维生素、杀菌剂、除草剂、碳水化合物、苯酚、类 固醇、表面活性剂、茶碱等。
非极性烷基
极性功能团
溶剂膜
有机分子 非极性部分
硅胶表面
硅胶-C18H37，ODS
HLB柱 hydrophilic-lipophillic balance
HLB: 亲脂的二乙烯基苯和亲水的N-乙烯基吡咯烷酮 按比例聚合而成。
➢ -NH2：有较强的氢键结合能力，对某些多官能团化合 物如甾体、强心甙等有较好的分离能力。 -CN：从样品溶液中吸附极性化合物, 如酚类、类固醇等 ➢ -Diol(二醇基): 可用于分离有机酸、甾体和蛋白质。
形成氢键的强弱: -NH2> -CN>二醇基
➢ 离子交换固相萃取
类似离子交换分离法，见《分析化学》分离一章。
环境分析：富集空气、水中的痕量有机物如多环芳烃、 大环内酯类抗生素、酚类、苯并芘等，及重金属。
农药残留分析：有机氯、有机磷、氨基甲酸酯类农药 残留及菊酯类、磺酰脲类除草剂等。
食品分析：猪肉中莱克多巴、牛奶和虾中氯霉素及蔬 菜、水果中的农药残留、食品添加剂等。
临床分析：人血清中秋水仙碱、9－硝基喜树碱等。 中草药及天然产物中有效成分分析：金银花中绿原酸、 葡萄中白藜芦醇、枸杞中的类胡萝卜素等。
为提高目标化合物的浓度，可将收集到的化合物用氮气 吹干，再溶于小体积的溶剂中。
7、固相萃取技术的应用
（1）除去干扰组分；（2）富集痕量待测组分，提高 分析灵敏度。
SPE目前已广泛应用于医药、食品、环保、商检、农 药残留等领域中，通过与各种色谱仪、光谱仪、质谱、 核磁等仪器联用，来分离富集和测定痕量待测组分。
5、固相萃取中样品溶液pH值的控制
过柱前，需调节样品基体的pH值，以提高分离效率。 （1）带有羧基和酚羟基的化合物用反相柱分离时(如 C18)，需要抑制化合物的解离，增大其在反相柱上的保 留，应向样品溶液中加酸（如1%的磷酸水溶液）使 pKa－pH＜2， 99%以上的羧基会离解；（2）分离弱 酸时，应选阴离子交换柱，为了使目标化合物和吸附剂 上的离子基团均带电荷，需调节pH－pKa>2，当用强碱 型阴离子交换剂时，样品溶液采用5%的氨水溶液，使 pH>9即可；（3)分离弱碱时，应选阳离子交换柱，需调 节共轭酸的pKa－pH＜2，99%以上的胺基会结合质子 呈阳离子态，一般pH＜7即可，当用R－SO3H型吸附剂 时，样品溶液采用1%磷酸或甲酸水溶液即可。在离子 交换固相萃取中，不仅要使待分析物以离子状态存在, 而且pH值要在离子交换柱的使用范围内。
吸附：因能在水溶液中电离出弱酸根离子，故可以用 强阴离子交换柱 SAX 或弱阴离子交换柱 WAX萃取。
吸附之前，先调节溶液PH>6 ，使化合物以离子 状态存在。
洗脱：若用SAX柱——需用PH<2的酸性溶液洗脱 （能中和弱阴离子）, 或用一种高浓度阴离子洗脱。
若用WAX柱——需用PH<2的酸性溶液洗脱（能中和 弱阴离子）, 或用一种高浓度阴离子洗脱, 也可用碱性 溶液洗脱(能中和硅胶表面的氨基)。
3.8 固相萃取和固相微萃取技术
Solid Phase Extraction SPE And Solid phase Micro-Extraction SPME
皆属于非溶剂型萃取分离技术，为柱色谱分离过 程，其分离机理、固定相和淋洗液溶剂的选择与 HPLC相似。SPE自70年代商品化问世以来，发展迅 速，目前SPE是一种最常用的样品前处理技术，主要 用于样品组分的分离、纯化和浓缩。
2、固相萃取的原理 当样品溶液通过固相萃取柱时，由于固体吸附剂
对目标化合物的吸附能力大于母液对该化合物的溶解 能力，使目标化合物被吸附在吸附剂表面，而其他组 分则流出柱子。再用洗脱液将目标化合物洗脱或加热 解吸附，以达到分离和富集目标化合物的目的。
目标化合物与吸附剂的极性越接近，则亲和力越大，保留越强。
➢ 反相固相萃取（Reversed-Phase)
吸附剂：非极性或弱极性，如硅胶键合C18（ODS最常 用), C8, C4，C2, -苯基、高聚物等。
C4 、C8 ，-苯基的疏水性弱, 对非极性物质保留较C18弱. 洗脱溶剂：极性的甲醇、乙腈、丙酮及乙酸乙酯等。
应用：可以从强极性的溶剂中吸附非极性～中等极性的 化合物。
强酸性阳离子交换柱 : Fe3+>Cr3+>Al3+>Ca2+>Mg2+>K+>NH4+>Na+>H+>Li
+
弱酸性： H+ >Fe3+ > Cr3+> Al3+> Ca2+> Mg2+> >K+≈ NH4+ > Na+> Li+
强碱性： Cr2O72- >SO42- >CrO42- >NO3- >Cl- >OH- >F>HCO3- >HSiO3-
弱碱性：OH->Cr2O72->SO42->CrO42->NO3->Cl->HCO3-
离子洗脱顺序
吸附顺序中位于前面的离子可以洗脱后面的离子 高浓度时, 可用顺序后面的离子洗脱前面的离子。 洗脱剂可以是酸或碱，能中和待分析物所带电荷，
或中和键合硅胶官能团所带电荷。
讨论
某化合物的Pka>4, 需用什么柱子吸附？如何洗脱？
3.8.1 固相萃取（SPE）
1、固相萃取装置：固相萃取柱是一根直径为数毫米的 小柱子。由柱管、烧结垫和固定相 三部分组成。
固相萃取 小柱
与HPLC比较，(1) 柱效低（柱床短、填料粒径大, n=10－50塔 板）,只能分开保留性质有很大差别的化合物;(2) 目标物被固定相 牢固吸附或完全不被保留;(3) SPE柱是一次性柱。
3、固相萃取法的优点 与传统液液萃取法相比，（1）富集倍数高，分离
选择性和重现性好，被萃物的回收率高；（2）；不需 要用超纯溶剂，所需溶剂少，环境污染小；（3）操作 简单、省时（为液-液萃取的1/12） 、省力（可批量进 行），可消除乳化现象，易于实现自动化等。
4、固相萃取法的模式
• 反相萃取 • 正相萃取 • 离子交换萃取 • 免疫亲和萃取
➢ 强阳离子交换柱 SCX (内装R－SO3H交换剂) ➢ 弱阳离子交换柱WCX (含有－COOH、磷酸基 －PO3H2、酚基－ －OH的离子交换树脂) ➢ 强阴离子交换柱 SAX
➢ 弱阴离子交换柱 WAX 以伯胺（-NH2）、仲胺(-NHR)或叔胺（-
NR2）为交换基团的离子交换树脂。
离子选择性吸附顺序
HLB和ODS比较： pH适用范围宽： 1-14 柱子不怕抽干，碳链不 会塌陷。
可通过调节样品溶液的 pH值来选择性的保留酸性、 中性和碱性化合物。
高保留性
➢正相固相萃取
极性吸附剂：如硅胶键合-NH2、-CN、二醇基等 洗脱溶剂：非极性或弱极性，如正己烷、环己烷等。
应用：从非极性或弱极性溶剂中吸附极性化合物。
6、固相萃取的一般操作程序
活化吸附剂 在萃取之前必须用适当的溶剂进行预 处理，以除去吸附剂中可能存在的杂质，并使吸附剂溶 剂化，以提高萃取的重现性和回收率。
上样 让试样溶液以一定的流速通过柱子（可利用 抽真空、加压或离心等方式）。
洗涤 用中等强度的溶剂将干扰组分洗脱下来
目标化合物的洗脱 用适当强度的洗脱剂将目标化合物脱在收集管中。
如抗生素、咖啡因、药物、染料、芳香油、脂溶 性维生素、杀菌剂、除草剂、碳水化合物、苯酚、类 固醇、表面活性剂、茶碱等。
非极性烷基
极性功能团
溶剂膜
有机分子 非极性部分
硅胶表面
硅胶-C18H37，ODS
HLB柱 hydrophilic-lipophillic balance
HLB: 亲脂的二乙烯基苯和亲水的N-乙烯基吡咯烷酮 按比例聚合而成。
➢ -NH2：有较强的氢键结合能力，对某些多官能团化合 物如甾体、强心甙等有较好的分离能力。 -CN：从样品溶液中吸附极性化合物, 如酚类、类固醇等 ➢ -Diol(二醇基): 可用于分离有机酸、甾体和蛋白质。
形成氢键的强弱: -NH2> -CN>二醇基
➢ 离子交换固相萃取
类似离子交换分离法，见《分析化学》分离一章。
环境分析：富集空气、水中的痕量有机物如多环芳烃、 大环内酯类抗生素、酚类、苯并芘等，及重金属。
农药残留分析：有机氯、有机磷、氨基甲酸酯类农药 残留及菊酯类、磺酰脲类除草剂等。
食品分析：猪肉中莱克多巴、牛奶和虾中氯霉素及蔬 菜、水果中的农药残留、食品添加剂等。
临床分析：人血清中秋水仙碱、9－硝基喜树碱等。 中草药及天然产物中有效成分分析：金银花中绿原酸、 葡萄中白藜芦醇、枸杞中的类胡萝卜素等。
为提高目标化合物的浓度，可将收集到的化合物用氮气 吹干，再溶于小体积的溶剂中。
7、固相萃取技术的应用
（1）除去干扰组分；（2）富集痕量待测组分，提高 分析灵敏度。
SPE目前已广泛应用于医药、食品、环保、商检、农 药残留等领域中，通过与各种色谱仪、光谱仪、质谱、 核磁等仪器联用，来分离富集和测定痕量待测组分。
5、固相萃取中样品溶液pH值的控制
过柱前，需调节样品基体的pH值，以提高分离效率。 （1）带有羧基和酚羟基的化合物用反相柱分离时(如 C18)，需要抑制化合物的解离，增大其在反相柱上的保 留，应向样品溶液中加酸（如1%的磷酸水溶液）使 pKa－pH＜2， 99%以上的羧基会离解；（2）分离弱 酸时，应选阴离子交换柱，为了使目标化合物和吸附剂 上的离子基团均带电荷，需调节pH－pKa>2，当用强碱 型阴离子交换剂时，样品溶液采用5%的氨水溶液，使 pH>9即可；（3)分离弱碱时，应选阳离子交换柱，需调 节共轭酸的pKa－pH＜2，99%以上的胺基会结合质子 呈阳离子态，一般pH＜7即可，当用R－SO3H型吸附剂 时，样品溶液采用1%磷酸或甲酸水溶液即可。在离子 交换固相萃取中，不仅要使待分析物以离子状态存在, 而且pH值要在离子交换柱的使用范围内。
吸附：因能在水溶液中电离出弱酸根离子，故可以用 强阴离子交换柱 SAX 或弱阴离子交换柱 WAX萃取。
吸附之前，先调节溶液PH>6 ，使化合物以离子 状态存在。
洗脱：若用SAX柱——需用PH<2的酸性溶液洗脱 （能中和弱阴离子）, 或用一种高浓度阴离子洗脱。
若用WAX柱——需用PH<2的酸性溶液洗脱（能中和 弱阴离子）, 或用一种高浓度阴离子洗脱, 也可用碱性 溶液洗脱(能中和硅胶表面的氨基)。
3.8 固相萃取和固相微萃取技术
Solid Phase Extraction SPE And Solid phase Micro-Extraction SPME
皆属于非溶剂型萃取分离技术，为柱色谱分离过 程，其分离机理、固定相和淋洗液溶剂的选择与 HPLC相似。SPE自70年代商品化问世以来，发展迅 速，目前SPE是一种最常用的样品前处理技术，主要 用于样品组分的分离、纯化和浓缩。
2、固相萃取的原理 当样品溶液通过固相萃取柱时，由于固体吸附剂
对目标化合物的吸附能力大于母液对该化合物的溶解 能力，使目标化合物被吸附在吸附剂表面，而其他组 分则流出柱子。再用洗脱液将目标化合物洗脱或加热 解吸附，以达到分离和富集目标化合物的目的。
目标化合物与吸附剂的极性越接近，则亲和力越大，保留越强。
➢ 反相固相萃取（Reversed-Phase)
吸附剂：非极性或弱极性，如硅胶键合C18（ODS最常 用), C8, C4，C2, -苯基、高聚物等。
C4 、C8 ，-苯基的疏水性弱, 对非极性物质保留较C18弱. 洗脱溶剂：极性的甲醇、乙腈、丙酮及乙酸乙酯等。
应用：可以从强极性的溶剂中吸附非极性～中等极性的 化合物。