HPV临床常用检测方法

由于HPV不能在体外细胞培养，故不能用简便的血清血检测进行HPV的诊断和分型。临床上用于检测HPV的方法包括细胞学方法、免疫组化、原位杂交、斑点杂交、核酸印迹和PCR 等，其中以PCR方法的敏感性最高，是目前应用最多

感染的HPV型别、含量、持续时间决定病变的发展与预后,是进行HPV检测的主要内容。目前主要是通过应用分子生物学方法进行HPV DNA的检测。

1、现有的HPV实验室主要检测手段:

①聚合酶链反应(PCR, Polymerase Chain Reaction):扩增位于两段已知序列之间的DNA片断的方法。该法有较高的敏感度,可进行HPV分型,缺点是对实验室环境要求较高,容易发生样本间的交叉污染,从而导致假阳性率高。

②核酸杂交检测

有较好的特异性和敏感度,还可以进行HPV DNA的分型,各种核酸杂交检测方法有一定的优缺点。

A核酸印迹原位杂交

适用于HPV分型和HPV DNA分子量鉴定,虽然灵敏度高,但因操作复杂,需要新鲜组织标本,不便在临床上大规模使用。

B斑点印迹

其敏感度和特异性均低于核酸印迹原位杂交法,虽然经济实用,但实验过程存在有放射性污染,是环保所不能轻视的问题。

C原位杂交（in situ hybridization，一种核酸杂交技术，可用来测定基因或特定核苷酸序列在核酸分子的所在部位，检测重组体DNA）通过非放射性探针对石蜡组织进行检测,能作定位检测,假阳性率低,但灵敏度不高,大大降低了临床使用价值。

D杂交捕获法(Hybrid Capture)

杂交捕获试验是利用化学发光对抗体捕获的信号加以放大。首先使DNA双链释放并分解成为可以杂交的核苷酸单链,DNA单链与RNA组合探针结合为RNA-DNA杂合体,特异性抗体将RNA-DNA杂合体捕获,偶联有碱性磷酸酶的第二抗体与RNA-DNA杂合体结合,碱性磷酸酶使酶底物发光,根据光的强弱可确定碱性磷酸酶的含量,从而确定RNA-DNA杂合体的含量。能检测13种高危型HPV,包括HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68。

各种检测方法的比较

HPV基因分型检测试剂盒（PCR-反向点杂交法）

【产品用途】

对人乳头瘤病毒（HPV）的感染情况进行定性检测并加以分型，能够检测23种HPV基因型，直接提示感染HPV的基因型；包括18种高危和5种低危型，可用于临床HPV感染的辅助诊断。

【产品优势】

1.精确分型：能同时对23种HPV基因型进行精确分型，包括18种高危型和5种地位型；

2.效率高：单次检测标本数量可达96份；

3.性能好：特异性强、重复性好，均高于98%；

4.设备通用：如普通PCR仪和杂交仪，适应于大、中、小型实验室；

5.内部质控：具有真正意义上的内部质控，检测结果更加准确；

6.可以检测多种临床标本。

【技术方法】

采用PCR和反向点杂交法相结合的基因芯片技术

【检测原理】

将大量不同序列的探针分子固定于支持物的不同位置上，然后与已做标记的样本进行杂交，通过检测杂交信号的强度和分布来进行分析。

【检测标本】

宫颈脱落细胞、液基细胞学标本、疣体组织、石蜡组织切片等

【临床意义】

1.宫颈病变及宫颈癌的筛查；

2.对于未明确诊断意义的非典型鳞状细胞（ASCUS）患者的分流管理；

3.预测病变恶化或术后复发的风险，有效指导术后追踪；

4.指导HPV疫苗的研究及使用。