甘油的检测方法汇总

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在发酵行业中,甘油作为底物,是发酵液中生物合成的直接前体,会影响外源蛋白的启动表达效率,其含量的高低直接影响产物的发酵单位,是决定菌种取舍的重要指标,是提高工程菌的发酵密度,提高产品生产率的关键。在生物柴油生产中,它是副产物,其含量直接影响生物柴油的使用性能,是衡量生物柴油产品品质的重要指标之一。此外,甘油能与水结合以防止红细胞的冷冻损伤,能延长红细胞的保存期,被普遍用作细胞内冷冻保护剂等。由于甘油用途很广,因此其含量的测定具有非常重要的意义。

目前国内外甘油含量的测定方法较多,主要有高碘酸氧化法、Cu+络合比色法、酶比色

法法、紫外-可见分光光度法、高效液相色谱法、气相色谱法、近红外光谱法以及原子吸收法等。下面将对其进行简要概述:

、高碘酸法

1. 原理:高碘酸氧化法是目前常见用于甘油含量检测的方法,利用高碘酸与甘油发生氧化还原反应,剩余高碘酸及反应生成的碘酸与碘化钾反应生成碘,再用硫代硫酸钠进行滴定,根据消耗的硫代硫酸钠的量来计算甘油的含量。

2. 操作步骤

准确发酵液10ml于100mL小烧杯中,加少量水溶解,然后转移至100mL容量瓶中,用水稀释至标线,摇匀,静置。用移液管准确移取10mL上述溶液于碘量瓶中,加入20mL高碘酸钠溶

液,混合均匀后,于黑暗中避光静置40min,然后加入碘化钾溶液和20%盐酸溶液各15mL调节pH值在0.8?1.0之间,然后用硫代硫酸钠标准溶液滴定,近终点时,加入2mL淀粉指示

剂溶液,继续滴定至溶液蓝色消失。同时做试样空白。

3. 计算:w(V2-V)C M 100

10/50汉4 勺000

式中:w --- 样品中甘油的含量,%;

V1――空白试样消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积,mL;

V2――试样消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积,mL

C――硫代硫酸钠标准溶液的浓度,mol/L; M甘油相对分子质量;

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