细胞培养技术总结
血清使用问题的总结
一、血清灭活问题。
1、问：加到培养基中的血清必须灭活吗？
答：不是必须的，看做什么实验了。
2、问：四季青胎牛血清灭活是56℃30分钟吗？
答：如果用于培养大多数的肿瘤细胞，血清一般是不需要灭活的，这样可以有效保存血清中的生长因子。但是如果用于培养一些表面具有补体受体的细胞，如内皮细胞，血清是需要灭活，一般是56℃，30min。
3、问：我要做滋养细胞培养，胎牛血清要灭活吗？
答：进口的一般都已灭活，国产的不一定，最好还是灭活一下再用较安全。
4、问：我用病毒上清转染细胞，培养用的血清需要灭活吗？因为血清中可能有些补体和抗体，是不是会影响转染？我想未灭活的血清中含些抗体补体可能会和病毒相结合，影响转染，正确吗？细胞是单核细胞白血病细胞，病毒是病毒包装细胞PT67收集的病毒上清。为什么要用无血清培养基加病毒孵育几小时，目的是什么？
答：血清一定要灭活，可以先用无血清培养基加病毒孵育几小时以后再加血清。避免杂蛋白对病毒和宿主结合过程的干扰，一般是2-6小时，根据细胞的状态决定。血清不一定需要灭活，灭活的目的是将血清中的补体灭活！这要根据实际情况而定，如果没有把握那就灭活吧，也不麻烦56度半个小时。
5、问：(1)我买的是杭州四季青的新生牛血清，要灭活吗？有些说法是需要，有些说直接解冻后就可以加入到培养基中；我配制胰蛋白酶液，用的是D-PBS，有关系吗？
答：关于血清的热灭活，是很多人感兴趣也存在一定争议的话题。大多数实验室将血清的热灭活还是作为常规来执行，因为有两个作用，第一是灭活补体，第二是灭活血清中可能存在的支原体。但是实验者并没有考虑热处理对血清中的生长因子、氨基酸等成分带来的负面影响。
我在实验室处理血清的时候，有一次水浴箱在灭活过程中出现故障，温度升高到80℃，血清变成了凝胶状，我重新处理了另外一份血清，将两份血清对比，发现高温直接影响到血清所含的抗体蛋白。在56℃下灭活半小时以上，肯定也会对里面的蛋白起到破坏作用。下次有机会我做个延长灭活时间的实验试试，看看到底有多大的影响。热灭活之后，血清放在四度冰箱久了，就会有沉淀产生，这常常会被认为是微生物污染或者是黑胶虫污染。为了验证到底有没有污染，常常又会把血清放置37℃温育，但是血清中的蛋白会进一步析出，最后还是要做镜检，无菌培养试验，和革兰氏染色试验，非常麻烦。
我看过一份资料，里面提到70%的实验者认为灭活是理所当然的。常规灭活建议的温度在45℃到62℃之间，而时间则从15分钟到60分钟不等。其中最常用的手法是56℃热处理30分钟。随着血清采集、处理、加工工艺的提高，许多早先认为是热灭活的原因已经不再成立，只有少数对血清进行热灭活的研究者在实验中证实了这一步骤的有效性和必要性。有人比较过11个不同细胞株，发现其中热灭活对6 个细胞株(HBAE，MDBK，
Vero，成纤维细胞，MRC-5)的生长带来负面影响，三个细胞株(FOX-NY，MDCK和CHO-K1)不受热灭活的影响，而只有两个细胞株(Balb/3T3，
Sp2/0Ag14 hybrid)，在热灭活之后，细胞生长有轻微的改善。所以，在正常的操作下，热灭活通常对细胞的生长没有明显的促进作用。
你可以摸索一下，血清从-20℃冰箱拿出来之后在常温解冻，然后混匀分装成两份，一份灭活，一份不灭活，比较这两种血清对细胞是否有影响。然后再确定是灭活还是不灭活。这个过程最多也就一个星期。同时你还要考虑血清灭活与否对你后续的实验有没有影响。
问：(2)分装后的血清从-20℃取出放4℃让其液化，却见血清比较混浊，有沉淀产生，这属正常吗？
答：正常。
二、血清灭活时温度问题。
1、问：因为实验室水浴锅失控，血清灭活时，温度到了61.7℃，这血清还能用吗？
答：多长时间啊？短时间应该可以吧，我有一次加热了一个多小时，还照样用。
2、问：我灭活胎牛血清时，用的电磁炉，定在了70℃，本来说调温度到56℃再放血清的，后来忘了，就把血清放进去了，所以灭活的温度肯定超过56℃了，不知道这样对血清有没有影响？
答：常规灭活建议的温度在45℃到62℃之间，而时间则从15分钟到60
分钟不等，其中最常用的手法是56℃热处理30分钟。看看你养的细胞是什么，一般的话估计问题不大，要是很珍贵的细胞还是慎重一点啊。热灭
活目的是为了去除血清中补体等对热敏感的物质，在对补体灭活以外，热处理同时也对血清中可能存在的支原体具有灭活作用。现在好像不主张热灭活，热灭活经常给血清产品带来负面影响，对血清的加热经常导致血清中沉淀的产生，此外，有研究结果证实热灭活步骤减弱了胎牛血清和小牛血清对细胞的促粘附作用。
三、血清的制备方法问题。
1、问：我的实验需要自己制备一些血清用于培养细胞，有没有人知道用于培养细胞的血清需要怎样的制备过程？
答：自己制备血清当心污染啊。如果无菌条件好的话，用静置析出方法就行。
2、问：一般我们用得胎牛血清用前还要灭活，我想用大鼠的血，不知道要不要灭活？
答：你直接把采来的血液在离心管里4℃过夜，离心，取上清，在无菌过滤，也可灭活，然后分装冻存，用时再配。
3、问：如果灭活会不会对血清中的一些因子有损伤？
答：加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。在进行免疫学研究、培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时，推荐使用热灭活血清。灭活一般不会对血清中的一些因子损伤的。
四、血清的保存问题。
1、问：2006年6月到期的GIBCO胎牛血清到2007年5月还能用吗？
答：只有试试了，如果一直在-20℃冻着来者，应该还可以，先少用点看看。养细胞系应该没问题，原代不行。
2、问：请问我自然溶化好的胎牛血清和1640培养基今天用不上，明天用，我不想放到冰箱里，放在室温下一晚行吗？100毫升培养瓶加多少培养基呢？
答：可以放4℃。4-5ml。
3、问：4℃冰箱内保存3个月的胎牛血清，能否继续使用？相关细胞和其它试剂的代价比较高，不敢轻易尝试。
答：需要长期保存的胎牛血清必须要保存在-20至-70℃的低温冰箱中，4℃冰箱中保存时间不要超过1个月。
五、FBS可否代替人AB型血清？
问：我现在在做人的外周血b淋巴细胞的培养，文献上要求用人的AB型血清，但是我觉得很多代理商都没有。我想FBS代替，但不知道可否，我先是担心免疫排斥之类，但是我查了些资料后，应该不会(我觉得)。但是我又不能够TRY。因为细胞因子确实太贵了，所以咨询一下。谢谢！
答：你最好照文献的做。除非你系列实验证明你用代用品的结果与文献的相同(你还是要用到文献的试剂)。细胞培养的影响因素很多，特别是培养基的成分。
六、血清和培养基的种类及品牌问题。
1、问：细胞培养的胎牛血清用哪个公司的产品比较好呢？周围有人用PAA 或Hyclone的，这两种跟Gibco或sigma出品的差别大吗？
答：如果是长得非常快得细胞如pa317，293，c6等恶性肿瘤细胞，一般得国产血清就可以，如果是原代培养的细胞，最好应用胎牛血清或类标准胎牛血清，Hyclone公司血清的质量不如GIBCO(同类血清)。国产的杭州四季青和甘肃民海(中美和资)不错。有些细胞(如：sf9，293还有其他一些元代细胞)，用Gibco的比其他两种好很多，会大大加速试验进度。对于其他一些细胞(如：vero，MDCK，pk)四季青，Hyclone的小牛血清足矣！另外，Gibco的还要看产地。
2、问：最近要订一瓶胎牛血清，实验室之前都在用小牛血清，没有买过胎牛血清。请问哪个公司的好一些？问过试剂公司，有两种：一种是PAA 的(分普通级和优级)，一种是Hyclone的(只有普通级，而且是新西兰产的)。试剂公司推荐使用PAA优级的，但看好多文献都用Hyclone的，公司说是因为现在Hyclone的都不是美国进口的了。请问用的哪种胎牛血清比较好？
答：民海的效果还不错，要是不放心国产的，那就买进口的。进口的好多公司都有，新西兰产的效果一般。Hyclone和Gibco的都还可以。民海的似乎比四季青的要好些。复蒙的感觉也不错。
3、问：四季青“无噬菌体、低内毒素胎牛血清”与“无支原体胎牛血清”的区别？培养肿瘤传代细胞用哪一个比较好些？
答：用无支原体胎牛血清就可以啦。
4、问：SKBR-3细胞培养用哪种型号的1640培养基及胎牛血清？
答：我一直用GIBCO的1640，你可以买含HEPES的1*10L的包装，胎牛血清也是用的GIBCO，10%就行。请查阅：https://www.360docs.net/doc/e96050593.html,
七、培养基血清浓度问题。
问：在1640里加血清时加多了，90ml里加了20ml血清，约为18%，以前都是加10ml的，查了网上多建议用10%-15%，有关系吗？
答：我认为一般来说血清浓度的较大波动对细胞的状态影响较大，建议再加90ml1640调成10%。血清浓度大当然细胞状态感觉要好，但是高浓度的血清可能改变细胞的基因表达谱，影响后续实验的结果。10%的浓度培养鼻烟癌细胞很好。
八、心肌细胞原代培养时血清的使用问题。
1、问：在进行心肌细胞原代培养时，需要用含血清的培养基中止胰酶的消化作用，我现在使用的是含血清10%的培养液，但近日看北医一个细胞培养的课件发现，有用1%血清培养液进行中止消化的，想问一下，1%的是否可以，效果是否有保证？这样确实能节省不少血清的。
答：关于心肌细胞元代培养的FBS问题：
(1)1%的血清完全培养基可不可以，得看你胰酶的用量。但是在心肌细胞元代培养就不行。10%的FBS完全培养基效果都不太好，开始心肌细胞元代培养需要高浓度的FBS，20%左右，但这就有出现另一个问题，在FBS 完全培养基中，成纤维细胞呈优势细胞，须得在培养基加入适量的BrdU 以抑制其生长，纯化心肌细胞。
(2)FBS的作用不仅仅是拿来中和胰酶，只是FBS中的一些蛋白质如α-巨球蛋白等有抑制胰酶活性作用。
(3)元代心肌细胞培养的FBS使用，有讲究：刚开始使用20%左右的高浓度的FBS，后逐渐递减为无血清的DMEM/F-12培养基培养。
2、问：我胰酶的用量是0.08% ，并混和了0.08%的胶原酶。FBS要高浓度递减是否是说的在细胞培养中啊，难道在消化时终止也需要如此高的浓度吗，还有，我的BRDU只用到48小时就不用了，因为担心其损伤太大，可以持续用多久呢？
答：我用10%FBS终止的，然后差速1h，然后还是用10%FBS的HG-dmem 养的，没有用brdu，心肌细胞还是比较多和稳定的，我第3天就可以用，第2天晚上看就会有搏动。
九、牛血清污染噬菌体的问题。
1、问：有谁知道小牛血清制造过程中怎样能够避免噬菌体的污染，以及对已污染噬菌体的牛血清怎样能够除去噬菌体？
2、问：我也想知道，我用的血清中大部分都有噬菌体，它对细胞培养到底有什么影响？
暂无回答。
十、问：MTT加药的时候加不加血清？加药时要用无血清的培养基吗？答：我的药就是用含血清的培养基稀释的，不含血清的培养基对细胞有毒性或抑制作用，无形中对细胞造了一个serum-free的模型，细胞在提内本来就是有血清供应，如果该药物都不能对抗，那该药物就没有什么临床价值了，这是我的理解。
十一、AB血清的制备问题。
问：本人想从人的外周血中分离AB血清的，用于B淋巴细胞的培养。谢谢大家给点建议。人的血，来之不易啊。
答：是AB血型人的血清吗？这种血清即没有抗A型抗原抗体，也没有抗B型抗原抗体。分离血清时将采集的血液注入试管中，待血液凝固后离心分离血清。可将采集的血液放在37℃水浴箱中促进血液凝固，减少凝固时间。离心可在2500～3000rpm，10min，足可以分离血清。分离后将血清吸出保存即可。分离血清的量可按采集血液的50%左右计算，因为红细胞占总血液的50%左右。当然整个过程要注意无菌操作。
十二、PC12细胞培养所用血清问题。
问：我正准备购买上海细胞所的未分化的PC12细胞，需要灭活的马血清，可现在买血清很困难，好像是海关有封锁，代理商这么说的，我原定购买的Gibco的horse surum，现在无法买到了，好容易找到一个目前可以进血清的公司Hyclone，有一种Donor Equine serum是马血清吗？
答：Hyclone的Donor Equine serum可以用，我以前用的就是这个。我当时是在鼎国(重庆办事处)买的，100ml大概140元，具体不记得了。当时是看它比别的进口的马血清便宜。另外：我买了以后灭活的。
十三、血清或培养基产生了颜色或沉淀的问题：
1、问：我用的是四季青的胎牛血清，56℃30分钟灭活后出现了白色少量絮状沉淀，是不是污染？还能不能再用？血清的生产日期是2006年7月(现在是2007年6月11日)。
答：应该问题不大。你可以取少量血清放入培养皿中，37℃过夜培养看看就知道是否污染了。血清中沉淀物的出现有许多种原因，但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成，而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血渭解冻后，也会存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但
这些絮状沉淀物，并不影响血清本身的质量。若您欲去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装至无菌离心管内，以400g稍微离心，上清液即可接着加入培养基内一起过滤。
2、问：我用MTT法测细胞的增殖，用DMSO裂解细胞，发现把DMSO 加入到孔中就会形成乳白色(用的含胎牛血清的1640培养基，由于没有离板子的离心机，所以没有去除培养基直接加的DMSO)。以前用含小牛血清的培养基没有看到有这种情况。该怎么解决？
答：为什么要用离心机离心呢？难倒你养的是悬浮细胞吗？如果是贴壁细胞的话直接将MTT倒掉，再加DMSO即可，我们就是这么做的，效果很好！并且测细胞的增殖的话如果不去掉MTT就加DMSO的话误差应该很大！有时不一定就是血清的原因，可能跟你的MTT放置的时间或以及其他成分有关！
3、问：(1)GIBCO胎牛血清500ml，今天解冻后没有混匀直接分装，结果使得前面的几管是清亮的，后面就带有棕色的，不知有没有影响？估计有什么影响？前面的成分好还是棕色的成分好啊？
答：肯定有。最好还是重新混合重新分装，我觉得有效成分会集中在棕颜色部分。
问：(2)为什么会出现棕色呢？
答：血清中的棕色多一些可能是因为红蛋白的含量高些的缘故吧。
问：(3)血清灭活之后可以存放吗？我的是前天灭活的，但是没有加到培养基里，而是放在冰箱里，那下次可以直接用吗？还是再次灭活啊？
答：当然可以，如果多的话，分装后最好放在－20℃，下次用时再解冻，也不用再灭活。最好用一管拿一管，少许血清可以放在4℃。分装时还要注意不要装得太满，以免溢出污染。
十四、问：悬浮细胞培养时能否加血清？如果加了会有什么结果？为什么悬浮细胞培养时就不能加血清？
答：血清是细胞培养基中重要的培养成份之一，对细胞生长有广泛影响。在细胞培养时，我们通常会加入10%的血清。血清的质量对细胞培养的成功至关重要。一般说来，牛血清包括以下成分：生长因子(如激素，白细胞介素等)，他们可以促进细胞生长；贴附因子，他们可以促进细胞的贴壁，往往只有细胞贴壁才能增值(悬浮培养的细胞除外)；蛋白质(如血清白蛋白，球蛋白等)，既可以作为营养物质，又可以中止胰酶的作用；还有很多成分不明的物质。血清还可以起到解毒作用，如脂肪酸、重金属和某些蛋白酶的毒性。血清还可以是细胞免受机械损伤。因此，无论是贴壁细胞还是悬浮细胞，血清是必不可少的。除非因实验要求无血清培养时，例如：为使细胞同步化时，我们会采用无血清培养的。单纯的说悬浮细胞培养不能加血清就没有太多的道理了。
十五、Gibico的胎牛血清内是否含糖？
问：我想做糖诱导细胞凋亡的试验。细胞培养液里加入了20%的胎牛血清。因此胎牛血清里是否含有糖对我实验的培养液糖终浓度影响比较大。今天打电话问GIBCO公司的技术顾问，回答我糖浓度少于5μg/ml，因此基本可认为是不含糖。但我今天把胎牛血清送到我们医院检液科，结果却是：
6.2mmmol/l(葡萄糖氧化酶法)。难道是检测人血清的血糖浓度的方法不能用于检查牛血清吗？(另起茶水验尿事件？)检验科没有给我回答。
答：应该是不含糖的。请参照gibco的网站：
https://www.360docs.net/doc/e96050593.html,/content/sfs/brochures/B_08A00_0619_FBS_bro.pd f。第五页我做了个记号。直接点击链接就可以看到它的说明书页面。我想我们肯定要以公司的说明书为准。至于为什么检验科测起来有误差，我想可能是样本不一样，需要用标志品矫正有关。具体需要检验科的战友解释了。
十六、关于中和消化液需要的血清量。
问：用胰蛋白酶消化细胞后，需要用血清中和。具体这种中和作用所要求的胰蛋白酶和血清之间的比例是多少？
答：做了很久的试验，真的没有想过胰酶和血清的对应关系。不过细想下来，这个应该也没有固定的比值。血清的品种都是不同的，成分必然有差异，如何能确定其与胰酶的比值关系？我们消化细胞的时候，如果是传代，细胞变形后，吸出胰酶直接加入适量的hanks液或者全培，这个量看自己的喜好和吹打细胞方便而定。一般都可以中止消化的。不会存在继续消化的事情。如果是从组织上消化细胞做原代培养，我一般都使用全培进行中止，而且加的很多，0.25%的胰酶，用10%血清，按1:2的比例应该是足够的。当然全培是2，一般我养细胞的时候，会用国产的比较便宜的血清配制全培，专门用于中止消化，这样有几个好处：一是中止消化的效果应该好于hanks液吧，再是也有利于维持细胞活性。而且这部分液体会被离心
去掉，血清便宜，离心掉了不会心疼。而养细胞的时候用好血清。个人观点，仅供参考。
十七、血清中的悬浮物问题。
1、问：发现培养的细胞瓶中背景有许多的小黑点，培养液中也有一些漂浮的物。看了之前的帖以为是胶原虫。本打算换液，换液前特意看了下前些天配的培养液，肉眼发现培养液中有悬浮的颗粒状物质(不多)，于是放在镜下观察，新鲜培养液中有一些悬浮的小颗粒，不多。(培养液是
R1640+20%牛血清+1%双抗)于是又将分装在4℃保存的小牛血清拿出观察，肉眼可见5、6个白色小小球状的物质，在血清瓶稍靠下的部位悬浮。镜下观察，也有少量的不知什么物质的东西漂浮。小牛血清是Hyclone新西兰的，标签上写已经经过2μm滤膜过滤处理。根据上述培养液的情况，是否说明培养液已被污染？如果是正常的血清是不是在镜下不应该看到
杂物，哪怕是极少量的？根据上述血清的描述，是不是说明血清也存在问题，还能用吗？补充：细胞培养以来生长状态就不好。买血清的时候厂家说明不用灭活，所以未灭活。
答：(1)血清应该-20℃保存，解冻血清时，请按照的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温)，若血清解冻时改变的温度太大实验显示非常容易产生沉淀物。(2)血清中沉淀物的出现有许多种原因，但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成，而血纤维蛋白在血清解冻后，也会存在于血清中，亦可造成沉淀物。
(3)若您一次无法用完一瓶，建议您无菌分装血清，再放回冷冻，若存放于4℃时，请勿超过一个月，储存在2－8℃时，血清中的各种蛋白和脂蛋白，可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。
(4)解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。
(5)排出了血清的原因，在考虑实验用品和无菌操作的问题。
(6)细菌病毒、衣原体、黑胶虫污染也很常见，如果细胞死的太多，影响较大建议更换培养液。
2、问：今天在配培养液时，发现血清里面有小碎片样的漂浮物，血清仍然清亮，不浑浊。不知道是什么，问了实验室的学长，说仍然可以用，但还是不放心，没有用血清。求助园子的各位达人，这可能是血清出了什么问题？我的血清用了一个月不到，四季青的。
答：可能的原因：(1)培养液配置时Votex不够，当时是清亮的，但过一段时间会析出来；(2)真菌污染。
十八、污染和过滤的问题。
1、问：怀疑血清染菌，想用滤膜过滤一下，可否自己用0.22μm滤膜过滤？对血清性质有多大影响？有做过的么？
答：可以过滤的，血清当出厂时都是0.22μm或0.1μm过滤除菌。想证明有没有染菌不用过滤这么麻烦，只要放置于37℃过夜就可以了，如果有微生物污染会变浑浊的，如果还是澄清的就说明没有问题的。实验室中血清很难直接过滤，一般要加到培养基中再过滤。我们实验室制备培养基时，都使用滤膜过滤，一般而言如果制备1-2瓶培养基，一个滤膜及一支30ml
注射器可以过滤50ml小牛血清。如果大量制备培养基也可以将血清加到培养基中，使用0.22微米的大滤膜一起过滤。
2、问：我怀疑我用的完全1640培养液被污染了，准备重新过滤消毒，过滤后是否需要补充胎牛血清？如需又如何补充？
答：完全1640培养液被污染了，如果是支原体的话，过滤没有作用，支原体可以通过滤膜。我们用1640液，都是配液后保留500ml，然后其他的分装100-200ml，现用现配因为血清比1640要贵，如果你想过滤的话，建议你加原比例血清，因为血清不会很容易通过滤膜。最主要的还是找到可能污染的原因。
3、问：加好了血清双抗的培养基由于污染了再过滤后还能用吗？
答：建议不要用了。在加了双抗的情况下已经污染，那么细菌污染的可能性会较小了。一般的过滤除不能去除病毒或者部分真菌的污染的。
4、问：我准备把使用的完全1640培养液重新过滤一遍，不知道培养液中的血清成分是否能通过滤膜，过滤后是否还需要补充胎牛血清？如需又如何补充？
答：可以透过，但是随着液体量的增多会很慢，如果不加压会比较麻烦，还有最好用低蛋白吸附的，不然损失是比较大的。
十九、更换无血清培养基后细胞大量死亡的问题。
问：我使用Lipofectamine2000转染成骨细胞，在转染前要换上无血清的培养基。本来条件模的好好的，转染效率也可以接受。但是寒假一回来就发生了怪事：细胞在有血清的培养基中长的好好的，一换无血清的培养基就死亡。大概4个小时就能看到较多的细胞飘起来。但是原来我换无血清培
养基，就算放那里10个小时都是没问题的啊。已经换了不同批次的培养基，甚至吸管什么的都换过了，但是就是不行，是怎么回事？
答：(1)两周后的培养液应补加谷氨酰胺，或者重新配液，转染时应不含抗生素。
(2)确认操作方法和环境，建议检查一下。
(3)Lipofectamine2000，脂质体的毒性很大，如果有质粒参与对细胞损伤更大，如果Lipofectamine2000在常温放置过，对细胞更大，假期冰箱是否断过电。
(4)培养箱的温度、c02浓度，湿度。
二十、完全培养液的相关定义。
问：“完全培养液一词”，是指加了血清的培养液吗？我在做含药血清的实验，涉及到血清添加量的问题。所以想弄明白文中所指的“完全培养液”是否是含药血清。
答：原液是指配置后过滤除菌。不完全培养液是指不含有血清的原液，其他成分已补充。完全培养液是指不完全培养液加入血清后称完全培养液。二十一、血清相关知识总结。
使用胎牛血清的注意事项：
血清是细胞培养中最重要的元素之一。下面是实验室里常会遇到的问题，仅供大家参考：
1、保存血清最好的方法：
建议血清应保存在-5℃至-2O ℃。然而，若存放于 4 ℃时，请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶，建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。
2、如何解冻血清才不会使产品质量受损：
建议您将血清从冷冻箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之溶解，然后在室温下使之全溶。但必须注意的是，溶解过程中必须规则地摇晃均匀。
3、血清解冻后发现有絮状沉淀物出现，该如何处理：
血清中沉淀物的出现有许多种原因，但最普的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成，而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血渭解冻后，也会存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物，并不影响血清本身的质量。
若您欲去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装至无菌离心管内，以400g 稍微离心，上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物，因为它可能会阻塞您的过滤膜。
4、何谓热灭活：
一般是以56℃，30 分钟来处理已解冻的血清，因为此加热步骤，可以使补体去活化，而补体所参与的反应有: 溶细胞活性，平滑肌的收缩，肥大细胞和血小板组胺的释放，增强吞噬作用，淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和激活。
5、关于胎牛血清的灭活：
有必要做热灭活吗？
实验显示，经过正确处理的热灭活血清，对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进，或完全没有任何作用，甚至通常因为高温处理影响了血清的质量，而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清，沉淀物的形成会显著的增多，这些沉淀物在倒立显微镜下观察，像是“小黑点”，常常会让研究者误以为是血清遭受污染，而把血清放在37℃环境中，又会使此沉淀物更增多，使研究者误认为是微生物的分裂扩增。
因此我们建议您，若非必须，您可以不需要做热处理这一步。如此一来，不但节省您宝贵的时间，更确保您血清的质量！
6、血清相关知识：
如何避免沉淀物的产生？
我们建议您在使用血清的时候，注意下列的操作:
(1)解冻血清时，请按照所建议的逐步解冻法(-2O℃至4℃至室温)，若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃)，实验显示非常容易产生沉淀物。
(2)解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。
(3)请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害，而影响血清的质量。(4)血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。
(5)若必须做血清的热灭活，请遵守56℃，30 分钟的原则，并且随时摇晃均匀。温度过高，时间过久或摇晃不均匀，都会造成沉淀物的增多。
[就业平台人员工作总结]就业平台人员工作总结
[就业平台人员工作总结]就业平台人员工作 总结 今年以来，我区就业工作在区委、区政府的正确领导下，在市人社局的具体指导下，以及全区目标单位的共同努力下，认真贯彻落实中央、省、市就业工作会议精神和决策部署，紧紧围绕年度工作目标和三项要点开展就业工作。一是统一思想，坚决落实就业工作实名制;二是主动作为，确保创业担保贷款发放;三是落实政策，完成就业精准扶贫任务。各项主要目标任务均实现"时间过半、任务过半"目标，现将半年工作总结如下。 一、全年目标实现"过半"。 截止6月底，新增就业16109人次，占年度目标的80.55%;帮扶困难群体再就业2308人次，占年度目标的69.93%;扶持创业带动就业3825人次，占年度目标的85%;城镇登记失业率3.0%。组织开展创业意识和创业培训527人，占年度目标的52.7%。形成"15分钟就业圈"方案，拟报市人社局审核后实施。 二、主要工作和措施。 (一)以"春风行动"为主题，开展系列服务活动促就业。年初，在区委区政府的领导下，区人力资源局审时度势，联合大街网举办了为期一天的"千企万人"互联网+""综合招聘会。本次招聘会线上线下邀请到了联邦快递(中国)、卓尔、华中数控等数千家优质企业，提供管理、技术、销售、文员等各类工种的就业岗位达7000余个。本次招聘会突出"互联网+"的特点，分为线上线下两个渠道。此次招聘会目的是
为供需双方搭建有利平台，形成品牌效应。做好企业与社区的对接，优化人力资源结构配置，助推企业转型升级，推动实现更高质量的就业创业。 (二)以"第五届武汉大学生"互联网+"创新创业项目大赛"活动为契机，完善创业环境，打造"硚口"名片。本次大赛由市人民政府主办，市人力资源和社会保障局、硚口区人民政府承办，中国武汉人才市场、相关高校、企业和社会机构协办的公益性赛事，是鼓励大学生参与"大众创业、万众创新"的服务平台。举办此次大赛是区委区政府针对硚口区"老工业区、底子薄、困难多、任务重"的实际情况，审时度势开展的一次大赛，较好地打造了"生态硚口""创业基地"的城市名片，为吸引各大企业和高新人才奠定了基础，也是响应国家"创业带动就业"的有力举措。 (三)主动作为，确保创业担保贷款发放落实。与区财政局、民政局积极沟通协调，传达市局通知精神，大力争取相关部门支持，扩大贷款范围和数额。结合我区财政相对困难的实际，我们做了大量工作，争取兄弟部门的理解。针对去年小额贷款审批时限长、放款慢等问题，今年更换了担保公司和金融机构，并获得了区政府的批准和财政部门的支持。为今年的创业担保贷款任务顺利完成奠定了基础。 (四)落实政策，重点援助，完成就业精准扶贫任务。认真学习领会并执行《关于武汉市社会保险补贴相关问题的处理意见》(武人社函〔xx〕28号)文件精神，落实好促进就业的各项政策。对市内就业困难人员从事个体经营或灵活就业的，继续享受不超过3年的社会保
税源管理科,工作总结
税源管理科,工作总结 篇一：征收管理科工作总结 征收管理科****年工作总结 征收管理科****年在市局征管科、法规科、稽查局和区局各位局长的正确领导和指引下，在各兄弟科、室、所（分局）同志们的密切配合、大力支持下，按照区局党组“树立三个理念、打牢三个基础、实现三个一流”工作思路，以纳税人为本的服务理念，实现税收征管工作规范化、科学化、精细化管理的工作目标，积极推进以税务信息化系统为依托的税收征管基础建设，充分发挥征收管理科决策、监督、指导、协调的优势和能力，经过全科同志的共同努力，较好地完成了征收管理科****年的各项工作任务。现将具体工作情况总结如下： 一、履顺程序，规范个体纳税人定额管理。 ****年1月份由于小规模纳税人征收率由原来的工业6%，商业4%统一下调到3%，同时也为了解决我局个体纳税人定期定额执行期管理混乱，时常出现的未及时进行分月汇总申报造成的违章案源信息问题，达到规范个体纳税人定期定额管理的目的，区局决定对个体纳税人定期定额全部重新定额核定，统一将个体纳税人定期定额执行期止规定为12月31日。我带领全科同志克服了春节提前造成的时间紧、任务重，齐心协力，利用半个月时间完成了全局1146户个体纳税人
的定期定额重新核定工作（其中起征点以上474户，起征点以下672户）。4月份为进一步规范个体纳税人的税收征管，强化“公开、公平、公正、透明”的税收征管理念，根据《个体工商户税收定期定额征收管理办法》（总局令第16号）规定，征收管理科对有关个体纳税人核定定额及停业管理程序重新进行了明确和规范。利用办税服务大厅电子显示屏滚动公示、公布定额以及停业情况。各税务所（分局）利用新添置的定额公示板，张贴定额、停业公示文书接受广大纳税人监督。截止12月31日，我局公示、公布个体纳税人定额信息151户。其 。 础建设。 我们在工作实践中逐步摸索出一条完善信息化系统基础建设的新路子，经局党组研究决定成立“税务信息化系统应用领导小组”，征收管理科负责制定了《××市××区国家税务局税务信息系统应用领导小组工作的实施方案》，对税务信息系统基础建设工作进行统一指挥和协调。领导小组的成立，不仅有效解决信息化系统运行中遇到的问题，使小组成员之间可以互相学习，取长补短，业务能力共同提高，而且也提高了办税效率和纳税人的满意度，促进了全体税务干部对税务信息化系统的有效利用，更好地为税收征管工作服务。
风电场检修工作总结结尾
风电场检修工作总结结尾 篇一：吉利风电场XX年度检修工作总结 吉利风电场XX年度检修工作总结 XX年吉利风电场在蒙东分公司和集团公司的正确领导下，全体干部职工同心协力、顽强拼搏，克服了东北电限电严重、设备运行不稳定等困难，较好地完成了全年各项工作任务。现将一年来的工作情况汇报如下： 一、发电量完成情况 截至 XX年十一月底，吉利风电场共完成发电量万kwh，上电量万kwh，年可利用小时数小时，综合厂用电率完成%。吉利风电场XX年风电机组可利用率高达%，为风电场较好完成各项指标打下坚实基础。 二、生产方面： 1、加强对运行设备的日常管理，加大设备巡回检查力度及设备测温工作，制订设备检修计划，做到计划检修。 2、积极与东北调和沈阳办事处协调沟通工作，尽最大努力争取电量，做到每度必争，减少限电电量损失。 3、积极督促风机厂家，加强风机设备的检修维护质量，严格执行设备缺陷管理制度，及时消缺，提高风机的可靠性和利用小时数。 4、积极利用停电的机会进行隐患处理。 5、利用春、秋检时机，对电气设备进行预防性试验，
及时分析影响经济运行指标的因素，合理调整运行方式。 三、安全管理方面 1、加强安全思想教育，提高职工的安全意识。利用安全活动日、学习集团公司安全事故案例，观看警示教育片、应急演练等手段，强化职工的安全意识。 2、制订和完善各项规章制度，严格执行“两票三制”等各项规章制度，杜绝习惯性违章。对发生的不安全现象严肃考核。 3、加强设备缺陷管理，严禁设备带病运行。认真开展春、秋检活动，在春、秋检活动中查出设备隐患、缺陷2项，并进行全部处理，确保活动落到实处，不走过场。 4、制订事故预案，积极开展事故预想、反事故演习，提高职工的应变能力。同时开展消防演练，熟练掌握消防工器具的使用方法，严防火灾事故的发生。 5、强化道路交通安全管理，严禁车辆带病行驶，严禁司机酒后驾驶、疲劳驾驶，并对风场道路塌陷地方进行暂时性填充及插警示标识，确保了交通安全。 四、职工教育培训情况 1、制定切实可行的培训计划。培训方式多样化，采取集中授课、跟班检修、技术问答、现场考问、师傅带徒弟（签订师徒合同）等方式提高职工的技术水平。 2、制定考核制度。采取定期考试的方式，检验学员的
实验总结细胞培养方法
实验总结细胞培养方法公司内部档案编码：[OPPTR-OPPT28-OPPTL98-OPPNN08]
一、培养细胞常用配置培养基的配置：基础培养基500ml+胎牛血清50ml+双抗5ml 冻存液的配置：10 % DMSO + 90%胎牛血清 依次比例酌量配置。 超净工作台常规配置 移液器1套（2.5μl、20μl、200μl、1ml），酒精灯1盏，液器1 台，斜架1台，酒精喷壶1个，酒精棉球缸1个，污缸1个， 常规耗材：培养瓶（50㎝2），定量移液管（5ml、10ml），枪头 （1ml、200μl、10μl），培养皿，6/24/48/96孔板，医用脱脂棉球，冻存管 所需试剂：培养基，胎牛血清，双抗，DMSO，胰酶，75%酒精…… 实验前准备：所需的各项高压后的耗材及污物缸放于超净工作台内，用酒精喷壶喷洒实验台面，并关闭工作台打开紫外灯照射30min后开始实验操作。培养基及胰酶恢复常温后使用，可37℃水浴5-10min 二、细胞复苏 步骤：
1. 紫外消毒30min后关闭紫外灯，开启超净台正常工作状态，用酒精消毒操作者的双手。 2. 培养液（DMEM），恒温水浴箱37℃预热20min，备用。超净台内准备一支15ml离心管备用。 3.将所需的培养基确保瓶身干净后酒精消毒放于工作台面内，点燃酒精灯，再将瓶口对准在酒精灯上消毒2-3次，旋开瓶盖后需再次分别消毒瓶口和瓶盖。 4. 从液氮保存罐中取出冻存管，立即放入37℃水浴中，快速摇晃，直至冻存液融化至黄豆粒大小后迅速取出。 5. 将细胞悬液移入15ml离心管，缓慢加入4ml培养液，离心 （1000r/min，5min）。 6. 取出2个培养皿并做好标记（复苏日期等），提前加入5-10ml培养液；离心结束后用1ml培养液悬液混悬沉淀细胞后分别加入培养皿内。 7. 将培养基瓶口和瓶盖消毒2-3次后拧紧，熄灭酒精灯，整理实验台面，取出实验试剂及污缸等，关闭超净工作台。 8. 将培养瓶放入培养箱内培养 注意事项：
细胞培养试剂及操作流程
实验规范化流程 一、细胞培养所需 1、10%FBS 1640培养液。 2、10%FBS DMEF/12培养液。 3、10%FBS DMEM/High Glucose 培养液。 4、PBS ：商品化的粉末，一袋溶于2L 去离子水中，高压后4℃保存。 5、胰酶 6、冻存液：10%DMSO 、>10%FBS ，其余成分为1640 7、真核抗生素： G418: 50mg/ml MDA-MB-231 800ug/ml MCF-7 800ug/ml SK-BR3 100ug/ml T47D 400ug/ml) 嘌呤霉素（Puromycin ）:10mg/mL 、 MCF-7 4ug/ml T47D 1ug/ml MDA-MB-231 5ug/ml 潮霉素（Hygromycin B ）:50mg/mL T47D 200ug/ml MDA-MB-231 800ug/ml MCF-7 50ug/ml 8、原核抗生素：双抗（抗青霉素、链霉素）（使用浓度：1%原液） 环丙沙星 左氧氟沙星（储存浓度5mg/ml ，使用浓度5ug/ml ） 9、细胞因子：IL-6、EGF （10ug/ml ） 10、抗肿瘤药物：阿霉素（储存浓度50Mm,使用浓度0.01mM ） 一、细胞培养相关技术 1、细胞复苏 准备：37℃水浴锅、培养液、15ml 离心管、滴管、培养瓶或培养皿试验流程： （1）将细胞从-80℃或液氮取出，遵”慢冻速溶“的原则，迅速在37℃下使其液化。 （2）将融化的细胞悬液加入适量新鲜培养液稀释吹匀，转移到15ml 离心管内。 （3）将离心管以1000rpm 转速离心5min 。 （4）小心弃去上清，最好用枪头除尽，加入新鲜的培养液6ml ，重选吹匀后转移到细胞培养瓶或培养皿，放入37℃、5%CO2细胞培养箱内培养。 2、细胞传代
税源管理科工作总结XX
税源管理科,工作总结,XX 篇一：税源管理纳税服务工作岗位年度个人工作总结 稅源管理纳税服务工作岗位 =个人原创，绝非网络复制，欢迎下载= 转眼之间，一年的光阴又将匆匆逝去。回眸过去的一年，在×××（改成稅源管理纳税服务岗位所在的单位）稅源管理纳税服务工作岗位上，我始终秉承着“在岗一分钟，尽职六十秒”的态度努力做好稅源管理纳税服务岗位的工作，并时刻严格要求自己，摆正自己的工作位置和态度。在各级领导们的关心和同事们的支持帮助下，我在稅源管理纳税服务工作岗位上积极进取、勤奋学习，认真圆满地完成今年的稅源管理纳税服务工作任务，履行好×××（改成稅源管理纳税服务岗位所在的单位）稅源管理纳税服务工作岗位职责，各方面表现优异，得到了领导和同事们的一致肯定。现将过去一年来在稅源管理纳税服务工作岗位上的学习、工作情况作简要总结如下：一、思想上严于律己，不断提高自身修养一年来，我始终坚持正确的价值观、人生观、世界观，并用以指 篇二：市场管理科XX年工作总结 市场管理科一季度工作总结
一季度，市场管理科紧紧围绕中心三个三建设，在建设技术市场体系方面主要完成了以下工作： 1、贯彻落实有关技术市场管理的法规、政策，认真开展技术合同认定登记和统计工作。根据全国技术合同认定登记统计系统的数据，从1月1日至3月31日，全省共认定登记技术合同317项，成交金额亿元，比上年同期增长%。为了加强对全省技术合同登记机构的监督管理，完成全年技术合同成交额达120亿元的目标任务，我们建立了年初有目标任务、年中、年末有总结、考核的管理机制，要求各机构严格按照《技术合同认定登记管理办法》和《技术合同认定规则》开展技术交易管理和服务工作，贯彻落实技术市场各项优惠政策。按照年初工作部署，一季度，我们首先对全省4家行业技术合同登记站点进行了检查，提出了加强营改增税收政策宣传和继续挖掘潜力，扩大服务覆盖面等工作要求。 2、加强技术市场工作体系建设，在全省范围内新增部分基层技术合同登记站点。技术合同认定登记是各类科技创新主体享受国家技术交易优惠政策的重要依据，登记站的设立应当遵循合理布局、方便登记的原则。为了扩大技术市场优惠政策的涵盖领域，真实地反映我省科技成果转化的状况，XX年拟新增设3家技术合同登记站点。一季度，完成了《关于增设省级技术合同登记站点的工作方案》的制定，并根据
风电运行工作总结
年终工作总结 年即将过去，作为一名运行值班人员，我始终以积极的态度，饱满的热情学习专业技术知识，严格遵守各项运行规程，团结同事，虚心求教，不断提高自己的工作能力，努力干好本职工作，现将入职以来的工作加以总结：（一）工作认真负责，爱岗敬业，以“团队、开拓、拼搏、荣耀”的公司理念来严格要求自己，使自己做到诚信待人，踏实做事，服从领导安排，克服各种困难，始终以积极认真的态度来对待工作，特别是自入职来，风场遇到的两次比较大的线路跳闸故障，努力配合团队进行故障排除，以最快的速度恢复送电，尽可能的为公司减少损失。但由于刚刚入职，自己在工作方法和工作步骤上还有所欠缺，导致在工作效率上不能使自己满意。 （二）在技术上认真学习，理论上不断学习熟记操作规程，运用书籍、互联网等资料介质使自己了解和深入学习风电场和变电站技术方面的知识，在实践上严格遵守运行规程，培养个人独立操作和独立值班的能力，保证不发生误操作事故，并把工作中遇到的问题和取得的经验，注意的事项随时记下来，虚心想领导和同事请教，与日俱增的提高自己的技术文化水平和增加自己的工作经验。
（三）在自我能力提升方面，若把“技术”比作“智商”，那么“能力”就可比作是“情商”。“智商”高，不一定能成功的完成工作，因为一个人的技术力量毕竟是有有限的。能力高的人才能配合同事更有效的、更迅速的完成工作。能力包括协调能力和处理事故的能力，在这两种能力的提升方面，自己还有所欠缺，需要在以后的工作中多下功夫，努力使自己成为一个善于沟通、善于交流的人。 （四）在工作经验的积累方面，本着熟能生巧的原则，同样的工作每次干的体会和收获都不一样，实践当中，注意工作中的每一个细节，比如说工作使用的工具、注意的事项、技术方面的要点和正确的工作步骤。不断的去学习、牢记和熟练。知道自己能成功、效率的完成工作为止。 在这一年的工作中，总体上来说，对自己的工作基本上满意，但还有很多不足之处和不尽人意的地方，需要以后多多改进和修正。 新的一年应该有新的开始，也应该有新的压力，制定新的合理的目标才会有新的突破和新的发展，通过下面几句话来明确自己的工作目标和工作决心： （一）“今天工作不努力、明天努力找工作”，用这句话来时刻警示自己端正工作态度，无论什么样的工作，都要尽自己最大的能力去完成。2009年，公司三期工程有可能进行，这对于我来说，即是一个机会又是一个挑战，所谓机会是可
细胞培养技术个人总结
总结---细胞培养 一．基本理论概论 原代培养: 也叫初代培养，指直接从体内取出的细胞、组织和器官进行的第一次的培养。 传代培养：将细胞从一个培养瓶转移到另外一个培养瓶即称为传代或传代培养。 细胞系：原代培养物成功传代后，则称之为细胞系。(如细胞系的生存期有限，则称之为有限细胞系；已获无限繁殖能力能持续生存的细胞系，称连续细胞系或无限细胞系。) 细胞株：通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物称为细胞株。 培养类型：细胞培养，组织培养，器官培养。 细胞生长的方式：贴附生长，悬浮生长 培养细胞的形态（形态不一定，环境改变形态可能改变）：成纤维性型细胞，上皮型细胞（单层膜样生长），游走性细胞（游散生长，常有伪足跟突起） 二．培养过程及要点（切记无菌操作） （一）工作环境的处理 1. 实验进行前，无菌室及无菌操作台以紫外灯照射30-60 分钟灭菌，以70 % 酒精擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70 % 酒精擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后，再进行下一个细胞株之操作。 2. 实验用品以70 %酒精擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在台面之中央无菌区域，勿在边缘之非无菌区域操作。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置，其它实验用品用完即应移出，以利于气流之流通。 3. 小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。吸管口切勿碰到容器瓶口 4. 工作人员应注意自身之安全，须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒 感染之细胞株应特别小心操作，并选择适当等级之无菌操作台(至少Class II)。操作过程中，应避免引起aerosol 之产生，小心毒性药品，例如DMSO 及TPA 等，并避免尖锐针头之伤害等。 5. 定期检测下列项目： CO2 钢瓶之CO2 压力。CO2 培养箱之CO2 浓度、温度、及水盘是否有污染(水盘的水用无菌水，每周更换)。无菌操作台内之airflow 压力，定期更换紫外线灯管及HEPA 过滤膜，预滤网(300 小时/预滤网，3000 小时/HEPA)。 6. 水槽可添加消毒剂(Zephrin 1:750)，定期更换水槽的水。 （二）试验用玻璃塑料用品清洗及其消毒灭菌 清洗： （1）玻璃器皿的清洗（酸液由重铬酸钾，浓硫酸，蒸馏水配置） 浸泡—刷洗—浸酸—冲洗 （2）胶塞的清洗 刚买回的常含滑石粉等杂质，先用自来水冲洗后再按常规方法处理。2%NaoH或洗衣粉煮沸10-20分钟---1%稀Hcl浸泡30分钟或蒸馏水冲洗后再煮沸10-20分钟—晾干备用 （3）塑料制品的清洗 2%NaoH浸泡过夜—自来水冲洗--5%稀Hcl浸泡30分钟—自来水和蒸馏水冲干备用。
税源管理年度工作总结
税源管理年度工作总结 税源管理年度工作总结范文 税源管理年度工作总结今年以来，税源管理一科在县国税局的统一领导下，真对所管辖的纳税户多，征管区域大、范围广的实际情况，按照县局目标管理的总体要求，通过合理分工，全体人员坚持依法治税，齐心协力，以税收收入为中心，以管理服务为基础，与时俱进，进一步夯实税收征管基础，在去年的工作基础上，全面完成了县局下达的税收工作任务，使税收征管上了一个新台阶，具体工作做法总结如下： 一、以组织税收收入为中心，坚持依法治税。为了确保税收收入的完成，管理一科及时将县局下达的税收任务，落实到每一个人，每一户企业。 同时依托ctias等信息，深入企业调查研究，分析企业生产经营变化等情况，着力强化税收管理，全年一共组织税收收入5809.59万元；（其中增值税4793.26万元、企业所得税1016.33万元）,代收个人利息所得税339.91万元。较去年比增长2236.44万元，(其中:增值税增长1391.85万元,企业所得税增长844.59万元)，代收利息税增长37.37万元,全面超额完成了县局下达的各项税收任务。 二、合理分工，提高效力。根据税源管理一科管户广、企业分散等特点，年初根据县局目标管理的要求，和工作岗位体系，工作任务等，结合每人的具体情况。
将工作职责落实到人，使每个人的工作职责分明，细化分工，相互协作，充分发挥了每个人的作用。按照科长负责全面，管理员按南北区域划分、行业划分的原则。具体做出了较为合理的分工,调动了全体人员的工作积极性,充分发挥了全体人员的工作热情,使全科各项工作能及时、全面地完成。办事效力显着提高，为纳税人提供优质服务打下了良好基础。 三、加强税收征管质量和数据质量的落实管理，坚持依法治税。 根据县国税局的要求，年初制订了管理一科工作计划,并组织全科认真学习，使每个人明确自己的岗位责任。按照市局征管质量和数据质量要求，及时对每个纳税户每月的征管质量和数据质量进行跟踪，出现问题及时处理，确保了税收征管质量和数据质量的提升，提高了征管“五率”。加强了增值税一般纳税人的税收管理，把住认定调查关，对照一般纳税人的标准，对未达标的企业，如企业的生产规模，财务核算不够健全，防伪税控的防盗设备不达标准等，及时提出了整改意见。企业被认定增值税一般纳税人怎样进行税收申报等业务，专管员及时进行辅导，使初认定一般纳税人的企业在税收申报方面及时、完整不出错。对不符合一般纳税人条件的企业，在年检时提出取消资格意见，XX年取消了二户不符合一般纳税人资格的企业。对服装针织企业实行验货制度，会昌晋昌服饰织造有限公司，从XX年至今一直配合坚持验货，会昌县海鑫服饰有限公司由于财务混乱，通过半年多的辅导仍未改正，管理员入时提出取消增值税一般纳税人意见，取消了该企业的增值税一般纳税人资格。
风机检修个人工作总结
风机检修个人工作总结 尊敬的各位领导，各位同事大家好： 伴随着时间的流逝，我们XX风电即将翻开崭新的一页，踏上新的征程，蓦然回首2011已经过半。在过去的半年里，工作中有苦有乐，偶尔有些许惆怅，但更多的是喜悦！功过倶全，不妨在此复述一二。 一，安全方面 公司一贯的宗旨是“安全生产、以人为本”，在这方面，每次开例会时一如既往从不厌其烦的宣传，督促员工认真执行并达到行之有效的结果。闲暇之余，也会和大家一起探讨以往电力企业发生过的事故，从中发现问题，总结经验教训，杜绝了人身伤亡类事故的发生。 二，工作 认真贯彻预防为主的方针，每天上班时着重加强设备的巡查检视工作，提高工作效率增加工作安全系数及时排除工作中的安全隐患，反复叮嘱员工遵守操作规程，杜绝事故发生。对于设备的故障总是及时发现，及时安排消缺，使整个风电场正常确保当日的安全生产。每天晚上休息时间，根据风机的运行情况还要预先把第二天的工作大概摸排一下，以便次日的工作能更加有序的进行。 三，检修
风电场有很多时候事故是突发性的，做到了不讲条件，随叫随到，稳定再走。 今年3月份的#3风机箱变抢修期间、带领检修人员不畏严寒，在零下二十多度，大风沙的天气下，忘我的工作，为#3风机提前运行做出了应有的贡献；2月份和4月份的线路故障排查期间，每次冒着严寒带领检修人员从夜晚一直工作到第二天白天，不计薪酬的，不辞辛劳地逐条线路，逐个箱变的排查，直至最终的故障排除；风电场的用水系统由于是几家共用的，所以水系统压力变化不好控制，以至于风电场的水系统多次出现漏水，生活区无水的现象发生。没有用水对于一个身处戈壁的群体是多么可怕的事情，我急大家所急，多次联系自来水厂家人员来风场抢修，保障了风场建设和生活用水的供给；针对近期的XX一期风机验收，每天积极的联系XX场家人员验收，终于在今天7月初完成了30台风机的验收工作；对于“四查一改”，认真从自身查起，对于工作中的不足，努力的改正。对于管辖的设备，仔细的排查，不放过每一次的隐患，力求详尽，经最大的可能查找任何可能存在的不安全隐患，彻底排除、整改，保证设备的安全进行。对于新进场的人员积极的组织安全知识学习，讲解、积极的组织培训新员工对风机知识方面的学习，为新员工能早一天的进入现场作业打下了坚实的基础。 四，学习
细胞培养总结
细胞培养学习总结 --贴壁细胞培养技术 一、细胞培养一般流程： ㈠、复苏： 1、实验前做好相关准备工作（水浴锅37℃；超净工作台的无菌环境；准备 好实验相关仪器和试剂）。 2、把冻存管从液氮灌中取出来，立即投入37℃（≦40℃）水浴锅中，晃动 冻存管，使液体在1min以内全部融解（关键步骤），用酒精棉擦拭其外壁，放到超净工作台里。 3、把上述细胞悬液吸到15ml的离心管中，加入适量培养基，(用培养基把 冻存管洗一遍，把粘在壁上的细胞都洗下来，转移时不要直接倒，以防污染)，1000转离心1-3min（可根据所培养细胞调整）。 4、吸弃上清液，加适量培养基把细胞吹散成细胞悬液，转移到培养瓶中， 加适量完全培养基（常为覆盖培养瓶底面即可）。 5、标好细胞种类和日期、培养人名字等，放到CO2培养箱中培养，细胞贴 壁后再换培养基。 6、注意观察细胞生长状态，及时换液或传代。 ㈡、换液： 1、实验前做好相关准备工作（超净工作台的无菌环境；准备好实验相关仪 器和试剂）。 2、取出培养瓶，用75%酒精消毒后放入超净实验台。 3、吸弃旧培养液，用适量（如2ml）PBS（磷酸盐缓冲液）清洗细胞（可根 据细胞状态洗1-2遍，一般从没有细胞的那一侧倒掉）。 4、加入适量新鲜完全培养基，放回培养箱继续培养。 ㈢、传代：
1、实验前做好相关准备工作（超净工作台的无菌环境；准备好实验相关仪 器和试剂）。 2、取出培养瓶，用75%酒精消毒后放入超净实验台。 3、吸弃旧培养液，用适量（如2ml）PBS（磷酸盐缓冲液）清洗细胞（可根 据细胞状态洗1-2遍）。（前面步骤同换液） 4、加适当的胰蛋白酶（0.05%）(能覆盖细胞就行)，放入细胞培养箱中消化 1-2min（根据不同类型细胞而定）。 5、细胞都变圆后加如入等体积的完全培养基终止消化。 6、用滴管缓慢吹打细胞，使细胞都悬浮起来成细胞悬液，吸到15ml的离心 管中，1000转离心1-3min。 7、倒掉上清液，加1-2ml完全培养基，将细胞吹散成单个细胞。 8、根据细胞浓度把细胞传到几个培养瓶中，加入适量完全培养基（一般癌 细胞一个培养瓶分2个），放回培养箱中继续培养。 ㈣、冻存： 1、实验前做好相关准备工作（预先配置好冻存液放入4℃保存，常为 10%DMSO+90%血清，配制过程中加入DMSO要缓慢，且边滴边摇；超净工作台的无菌环境；准备好实验相关仪器和试剂）。 2、取出培养瓶，用75%酒精消毒后放入超净实验台。 3、吸弃旧培养液，用适量（如2ml）PBS（磷酸盐缓冲液）清洗细胞（可根 据细胞状态洗1-2遍）。 4、加适当的胰蛋白酶（0.05%）(能覆盖细胞就行)，放入细胞培养箱中消化 1-2min（根据不同类型细胞而定）。 5、细胞都变圆后加入等体积的完全培养基终止消化。 6、用滴管缓慢吹打细胞，把细胞都悬浮起来成细胞悬液，吸到15ml的离心 管中，1000转离心1-3min。（同细胞传代中步骤） 7、倒掉上清液，加入预制的冻存液制成细胞悬液，分装到灭菌的冻存管中， （注意不要加满，预留其结冰后的空间，一般1.8ml的冻存管加入≦1.5ml 的细胞悬液）。
细胞培养基本实验操作一般培养试剂介绍常用培养基及基本特性 HBSS的配制和使用攻略
常用培养基及基本特性 1、RPMI-1640 Medium RPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞，杂交瘤细胞的培养，是目前应用十分广泛的培养基。主要用于悬浮细胞培养。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。 2、Minimum Essential Medium（MEM） 也称最低必需培养基，它仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素。成分简单，可广泛适应各种已建成细胞系和不同地方的哺乳动物细胞类型的培养。MEM-Alpha一般用于培养一些难培养细胞类型，而其它没有特殊之处的细胞株则几乎均可采用MEM来培养。 3、DMEM-高糖（标准型）是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物细胞培养,更适合高密度悬浮细胞培养。适用于附着性较差，但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养，也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。 4、DMEM-低糖（标准型）是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物细胞培养。低糖适于依赖性贴壁细胞培养，特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养。 5、DMEM/F12 DMEM/F12培养基适于克隆密度的培养。F12培养基成分复杂，含有多种微量元素，和DMEM以1：1结合，称为DMEM/F12培养基（DME/F12medium），作为开发无血清配方的基础，以利用F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的营养成分为优点。该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培养。为了增强该培养基的缓冲能力，改良之一是在DMEM/F12（1：1）中加入15mM HEPES缓冲液。 6、McCoy’s 5A McCoy’s 5A Medium 主要为肉瘤细胞的培养所设计，可支持多种（如骨髓、皮肤、肺和脾脏等）的原代移植物的生长，除适于一般的原代细胞培养外，主要用于作组织活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纤维细胞、人淋巴细胞、HT-29、BHL-100等上皮细胞。 7、Iscove’s Modified Dulbecco Medium (IMDM) Guilber 和Iscove将Dulbecco’Medium 改良为Iscove’s Medium，用于培养红细胞和巨噬细胞前体。此种培养液含有硒、额外的氨基酸和维生素、丙酮酸钠和HEPES。并用硝酸钾取代了硝酸铁。IMDM还能够促进小鼠B淋巴细胞，LPS刺激的B细胞，骨髓造血细胞，T细胞和淋巴瘤细胞的生长。IMDM为营养非常丰富的培养液，因此可以用于高密度细胞的快速增殖培养。 8、M-199 Medium
云平台推进工作总结
前湖小学云平台推进工作总结 自云平台教师账号发布以来，我校积极贯彻上级相关会议和文件要求，本着边建边用的原则，借助云平台开展活动，取得了较好的效果。 一、云平台账号开通情况 教师账号除年龄大的外，其他全体教干教师账号全部开通，并正常运行。 二、云平台数据情况 一个多月，我校全体教干教师共发表文章；发表视频；群组论坛帖子；文章浏览量；视频观看量位居全镇前列。 三、设备情况 我校为新建校，电化教学设备配备标准高，数量多，宽带光纤直接到各科室，现在启用的各室网络均已接通。 四、管理要求及具体建设情况 我们成立了云平台工作领导小组，专人负责云平台的管理和指导，制度约束和鼓励，活动推进等方式推进云平台使用。 1、加强机构平台建设，方便教师网络交流 我们利用机构平台，为教师进一步搭建了各类管理平台、应用平台、资源建设平台等，如教务管理平台、后勤管理平台、政教管理平台、安全管理平台等管理平台，方便部门负责人上传发布相关信息，开展活动，同时也方便教师了解学校各部门信息，参与网络活动，提高了学校教育管理的透明度，提升了管理效益。还开展了网络教研平台，方便教师参与网络教研活动，提高了教研效益，促进了教师专业成长。 2、加强制度建设，促进云平台建设效益 出台《玉山镇朱仓小学云平台管理要求》，要求教干教师按要求建设自己的云空间，完成上传任务，积极参加学校开展的网络教研活动，通过制度约束教干教师，让云平台的各功能充分发挥功效，引导教师积极反思，促进其专业成长。 3、开展网络教研活动，促进云平台功能发挥 为了让云平台充分发挥其功效，促进教师专业成长，我们开展了尝试着开展了一些网络教研活动，取得了较好的效果，一是利用云平台开展了网络理论学习活动，通过云平台提供的评论、投票、分享等功能，老师们参与网络教研活动不受时空限制，我们要求教师利用教余时间认真学习领会，把自己的所思所获以博文的形式发表在云平台中，同时将自己的观点在网络教研平台上以评论的形式发表，老师们的观点得以碰撞，思想得到进一步的交流提升，所学得以内化。其次利用例会时间，面对面进行研讨交流，统一认识，随机确定主讲人，阐述自己的见解，通过面对面的交流，充分发挥了以点带面的辐射作用，理论学习效果提升明显。最后学校教务处对此次活动进行总结提升。 除了网络理论学习活动，我们还用云平台提供的魔方课堂功能，开展了网络集体备课活动，目前这项活动正在进行中。 4、奖惩规定 为了鼓励教师积极参与到云平台建设中来，我们正在研究奖惩规定，目前这项工作正在讨论，这个规定主要从以下几个方面考虑： 一是云平台数据量化列入综合量化
2016年税源管理年度工作总结范文_税务工作总结
2016年税源管理年度工作总结范文_税务工作总结 2016年税源管理年度工作总结范文s("fzoom");s("hzh0");s("hzh1");s("hzh2");税源管理一科在县国税局的统一领导下，真对所管辖的纳税户多，征管区域大、范围广的实际情况，按照县局目标管理的总体要求，通过合理分工，全体人员坚持依法治税，齐心协力，以税收收入为中心，以管理服务为基础，与时俱进，进一步夯实税收征管基础，在去年的工作基础上，全面完成了县局下达的税收工作任务，使税收征管上了一个新台阶，具体工作做法总结 一、以组织税收收入为中心，坚持依法治税。为了确保税收收入的完成，管理一科及时将县局下达的税收任务，落实到每一个人，每一户企业。同时依托ctias等信息，深入企业调查研究，分析企业生产经营变化等情况，着力强化税收管理，全年一共组织税收收入5809.59万元；（其中增值税4793.26万元、企业所得税1016.33万元）, 代收个人利息所得税339.91万元。较去年比增长2236.44万元，(其中:增值税增长1391.85万元,企业所得税增长844.59万元)，代收利息税增长37.37万元,全面超额完成了县局下达的各项税收任务。 二、合理分工，提高效力。根据税源管理一科管户广、企业分散等特点，年初根据县局目标管理的要求，和工作岗位体系，工作任务等，结合每人的具体情况。将工作职责落实到人，使每个人的工作职责分明，细化分工，相互协作，充分发挥了每个人的作用。按照科长负责全面，管理员按南北区域划分、行业划分的原则。具体做出了较为合理的分工,调动了全体人员的工作积极性,充分发挥了全体人员的工作热情,使全科各项工作能及时、全面地完成。办事效力显著提高，为纳税人提供优质服务打下了良好基础。 三、加强税收征管质量和数据质量的落实管理，坚持依法治税。根据县国税局的要求，年初制订了管理一科工作计划,并组织全科认真学习，使每个人明确自己的岗位责任。按照市局征管质量和数据质量要求，及时对每个纳税户每月的征管质量和数据质量进行跟踪，出现问题及时处理，确保了税收征管质量和数据质量的提升，提高了征管“五率”。加强了增值税一般纳税人的税收管理，把住认定调查关，对照一般纳税人的标准，对未达标的企业，如企业的生产规模，财务核算不够健全，防伪税控的防盗设备不达标准等，及时提出了整改意见。企业被认定增值税一般纳税人怎样进行税收申报等业务，专管员及时进行辅导，使初认定一般纳税人的企业在税收申报方面及时、完整不出错。对不符合一般纳税人条件的企业，在年检时提出取消资格意见，xx年取消了二户不符合一般纳税人资格的企业。对服装针织企业实行验货制度，会昌晋昌服饰织造有限公司，从xx年至今一直配合坚持验货，会昌县海鑫服饰有限公司由于财务混乱，通过半年多的辅导仍未改正，管理员入时提出取消增值税一般纳税人意见，取消了该企业的增值税一般纳税人资格。 四、加强税源分析和税收计划管理。管理一科为了加强税收计划考核，实行了重点税源分析和税收预测工作，规定每月10日前报送本月税收预测，每季20日前向县局报送下一季度的税收预测计划，为了保证计划的准确性，管理一科要求重点企业每月20日前报送税收预测表，税收管理人员根据企业报送的税收预测进行认真分析，通过计划管理，使我县税收收入计划得到有效的组织入库。 五、开展纳税评估工作和“四小票”的审核工作。根据纳税评估工作要求，我科利用评估系统软件对增值税一般纳税人全面进行了纳税评估，对评估出较大问题的企业进行约谈五户次，转实地核查的一户，通过约谈和核查，一方面从管理上对企业多一份约束力，另一方面企业自身也对纳税事宜多一份认识。“四小票”是增值税一般纳税人取得的用于增值税进项抵扣的票据，根据国税总局系统对开具和取的“四小票”的比对出现的错误数据进行核查，通过核查大部份是人为操作出现误填误录情况，未发现人为有意识的偷税行为。 六、推行电子多元化申报制度。根据市国税局要求，我管理一科电子多元化申报工作，按照县国税局统一按排，进行了扎实的宣传和动员工作，上半年对一般纳税人网上申报面达60%，小规模纳税人电话申报面达100%。下半年网上申报面，除新认定的二户商贸企业外
HUVEC细胞培养心得
HUVEC 培养交流讨论： 各位仁兄，我查了一下，关于HUVEC 的贴子有几千篇，不知有那位知道的多的能给总结一下？我想应该有以下几 1、讲清HUVEC 与ECV304区别 2、HUVEC 原代与细胞株的关系、区别问题 3、能否总结一下国内有哪些单位可以买到HUVEC ？是原代还是细胞株？ 4、培养中到底添加ECGS 还是ECGF ？ 5、有些推荐细胞的应该讲清自己的是原代还是细胞株，能养多少代。 希望能抛砖引玉。 票数+收藏2回帖16浏览2686我也要发帖 举报 ? 浙江医院招聘浙江省老年医学研究所（临床医学） ? 请教关于HUVEC 细胞的培养 ? 求购HUVEC ? 【互助小组】正在养或已经养过HUVEC 的请进。 docter_zhao ? 0 2004-08-03 15:14 消息 引用 分享 huvec 必需加ECGS 及肝素，否则很难生长增殖 举报 ? zjqlucky ? 15 ? 5 ? 7 2004-08-03 17:27 消息 引用 分享 docter_zhao wrote: huvec 必需加ECGS 及肝素，否则很难生长增殖 这个好像也未必吧，我养的原代的huvec 只用20％胎牛血清的RPMI1640也长的很好呀，只是传ecgs 能传这么多代吧 票数+收藏1 举报 ? 2004-09-08 00:20 消息 引用 分享 我们曾试过用m199或DMEM 加20％胎牛血清原代培养，感觉效果不佳，后来加了ECGS 及肝素，发现细胞长得能有改变 票数+收藏1 举报 引用 分享 huvec 是脐静脉内皮细胞,不是那么难养,细胞可以从脐带自己提取,卖现成的细胞株也不贵,用内皮细胞的配套培email-sinian19988@https://www.360docs.net/doc/e96050593.html,
监管平台建设工作总结
监管平台建设工作总结 一、建设初期、未雨绸缪 1、在招标文件中明确对各投标单位在数据采集、填报、审核所用到的人、设备的要求，同时将信息平台建设作为业主关心的问题之一写入招标文件，让各单位在招投标阶段就对信息平台建设有所了解进而有所重视； 2、积极配合开发单位开展对口化需求分析工作。由于信息平台建设涉及的专业、业务流程较多，因此在需求分析阶段需要将需求分析工作分散到各个职能部室进行，而工程技术部作为牵头部门负责管理整个平台建设； 3、在中标单位确定后适时安排人员培训，使各单位信息平台负责人真正地了解信息平台建设的目的、内容、数据采集、填报及审核的方法等等。 二、建设中期、EDCA循环（E代表开发、D代表使用、C代表检查、A代表实施） 信息平台自投用来以其简洁的界面、较为完善的功能、较为简单的操作赢得了用户的一致好评，这些都为数据的及时、准确和完整提供了保证，但信息平台乃新生事物，不可能一步到位，需要经历EDCA 这样一个过程去不断完善。 1、E
要求开发单位在项目部设置一名对管道施工有一定了解的协调人员，负责收集项目部、各参建单位在使用信息平台过程中所提出的各类问题，而后尽快解答。 2、D 用户使用信息平台上报、审核、汇总进而分析数据，因此信息平台建设完全依据项目划分进行架构，如此相应的用户权限、所需要上报的数据类型、数量等等皆一目了然，同时为了让数据填报、审核人员知道应该填什么数据、审什么数据、什么样的数据是合格的，项目部先后制定下发了《大港石化—济南—枣庄成品油管道工程项目信息管理平台管理办法》共计3版次。 3、C 项目部注重检查在信息平台建设工作中的重要性，检查不仅能检验前一段时间填报数据的及时、准确及完整，同样可以指导下一步数据填报、审核行为，检查亦是对信息平台本身功能上的检验，通过用户反馈及所提出的合理化建议去完善信息平台，总之一切工作紧紧围绕数据的及时性、准确性和完整性展开。信息平台建设作为“一把手工程”必须得到所有参建单位领导的重视，否则工作很难开展，为此，项目部先后组织了四次专项检查，第一次检查过后对各单位进行了打分、排名及下发不符合通知单，一是让各单位领导知道自己在全线同类单位中的位置，二是有利于项目部有的放矢地开展帮助提高工作，前三次检查间隔均为1个月，第四次2个月，通过下发不符合通知单
社区协税护税工作总结
社区协税护税工作总结 篇一：乡20XX年协税护税总结 **乡20XX年协税护税工作总结 ***乡始终把协税护税工作当成一项重要任务来抓，20XX年全乡实现地税收入417万元，国税收入230万元，均超额完成任务。在今后的工作中，我们将再接再厉，力争圆满地完成20XX年的协税护税工作。 一是强化宣传，营造依法纳税的良好氛围。通过制作宣传版面、悬挂宣传条幅、张贴标语、发放宣传手册、出动宣传车等形式，深入宣传与税收相关的法律法规，提高纳税人的纳税意识，让依法纳税光荣、偷税漏税可耻的观念深入人心，开创协税护税工作新局面。 二是加强部门协作，形成工作合力。加强工商、财政、税务、安监等部门的沟通协调，相关部门凝成一股绳，心往一处想，劲往一处使，齐抓共管，建立协税护税组织网络，多管齐下，解决协税护税过程中遇到的困难和问题。 三是加大协税护税力度，做到应收尽收。我们将组织国税所、地税所、财税所、工商所的工作人员，深入街道和村组，认真进行税源普查，抓大不放小，突出重点，全面兼顾，据实核定税额，据实征收，强化征管手段，坚持依法征收，依法管理，坚决打击偷逃漏税行为，确保税源不流失。
四是强化优质服务，积极培植税源。在征税的同时，做好服务工作，为纳税人提供政策和信息支持，积极主动帮助纳税人解决一些实际困难和问题，用热情周到的服务来赢得纳税人的信任。积极搭建招商平台，开展招商引资活动，落实优惠政策，为入驻商户提供宽松、和谐的环境，做到巩固现有的，培植将来的，力争形成税源的良性增长。五是加强队伍建设，落实责任制。积极组织工作人员学习税法知识，交流税收经验，提高征收水平；加强作风建设，严格执行税收征收纪律；明确相关部门在协税护税工作中的职责，建立绩效考核制，实行季考核、年总评，并根据考核结果，对做出突出贡献的单位和个人给予奖励，积极调动各方工作的积极性，确保圆满完成全年的目标任务。篇二：协税护税办20XX年工作总结 协税护税办20XX年工作总结 20XX年，协税办以科学发展观为统揽，以谋发展、保增长、调结构、促转型为主线，以组织收入工作为中心，按照“抓大不放小”的原则，不断创新机制、完善服务、强化征收，确保了税收的应收尽收，促进了辖区经济平稳较快发展。现将工作总结如下： 一、税收完成情况 20XX年全年任务8701万元，1—11月，我办税收预计完成8057万元，占全年任务的92.5%，比去年同期的6860万元增长了17.4%，增收收1197万元。 二、税源工作开展情况 （一）领导重视，加强税源经济建设