EGF 表皮生长因子

EGF  表皮生长因子
EGF  表皮生长因子

EGF

1962 年,美国科学家Cohen博士发现了决定皮肤年龄的“表皮

细胞生长因子”EGF(Epidermal Growth Factor)。并进一步证实:

EGF的缺失,是导致皮肤衰老的根本原因,给皮肤补充EGF,可以

使衰老的皮肤再年轻。从此,皮肤年轻与衰老的奥秘被揭开,人类

再年轻的梦想变成现实。

1986年12月10日,Cohen博士因此获得了世界科学的最高

奖之一——诺贝尔奖。

一、EGF简介

EGF是英文Epidermal Growth Factor的缩写,中文名称为表皮

生长因子,是一种广泛存在于人体皮肤细胞内的小分子蛋白,是人体

内固有的一种活性物质。由53个氨基酸组成、相对分子量为6222D、等电点约为4.6。

EGF大量存在于人体上皮细胞内,它可刺激上皮细胞和内皮细

胞生长,使新的表皮细胞不断长成,将死皮层推动并逐渐脱落,保

持肌肤细嫩光滑。同时促进皮肤各种细胞的新陈代谢,增强细胞吸

收营养物质。促使胶原及胶原酶合成,分泌胶原物质、透明质酸和

糖蛋白,调节胶原纤维,具有滋润皮肤、增强皮肤弹性,减少皮肤

皱纹和防止皮肤衰老的作用。

婴儿的皮肤中EGF含量丰富,随着年龄逐渐增大,皮肤中的EGF含量逐渐衰减,皮肤由此出现老化现象。EGF就能从根本上阻

止和逆转皮肤衰老,使肌肤保持年轻状态。

二、表皮细胞生长因子(rhEGF)功能

1、促进细胞再生和组织修复:各生长因子主动与伤口附近细胞

膜上的特异性受体相结合,从而激活蛋白酶,加快蛋白质的合成,

促进成纤维细胞的生长,促进皮肤和粘膜创面愈合并养活疤痕收缩

和皮肤的畸形增生,快速高效修复创伤。应用于皮肤组织的各种损伤,去除暗疮、痤疮、去痣后的小缺损,换肤后的脱皮、发红以及

果酸等使用后导致的皮肤灼伤、磨削后的表皮损伤修复等具有突出

的效果。 EGF 能促进表皮细胞增殖分化,使衰老死亡的细胞得以及

时补充,使损伤的表皮得以即时修复,可用于对换肤、褪红、毛细

血管扩张等各种不良肤质的调整,改善肌肤薄、粗糙、疤痕等不良

状况,使肌肤恢复光洁和平滑。

2、消除皱纹:促进成纤维细胞、表皮细胞代谢、增殖和生长,

促进弹性纤维细胞的发育及增强其功能,激活老化细胞的再生,加

速细胞的新陈代谢和更新,快速代谢老化角质,修复断裂的浅表皮

成纤维细胞,从而消除皱纹。通过EGF等活性因子促进真皮层内纤

维母细胞的增殖,修复老化的胶原纤维与弹性纤维;更多地合成和

分泌胶原蛋白、透明质酸等大分子;改善皮肤微循环,提供良好的

营养环境,维持一定量的皮肤脂肪,还原肌肤弹性,使其均匀紧致,减少皱纹。

3.抗衰老:EGF 能促进表皮组织上皮细胞、角质细胞、成纤维

细胞等多种细胞的生长、分裂,加快新陈代谢,增强其表皮细胞活性,从而使细胞保持质与量的完善,使皮肤皱纹消失,显示出紧实、柔嫩、光洁和富有弹性的健康美。促进细胞新陈代谢(抗衰老):EGF能够促进细胞的增殖、分化。EGF能够使成熟细胞逆分化形成“干细胞岛”,同时遏制衰老基因的表达。EGF从根本上改变皮肤

细胞构成,降低皮肤细胞平均年龄,令肌肤光洁靓丽。

4.淡化色斑:对较黑肤色的皮肤和各类皮肤色素沉着,EGF 可

通过促进新生细胞来替代衰老细胞,以降低皮肤中黑色素和有色细

胞的含量;并且可增加皮肤血流量,改善皮肤微循环,为表皮细胞

提供良好的营养环境,防止代谢产物淤积,有效改善皮肤色泽,使

较黑肤色和各类色素沉着的皮肤白皙完美,均匀靓丽。对较黑皮肤

和各类皮肤色素沉着,加快细胞增生,促进皮下毛细血管网分布,

促进血液循环,使皮肤黑色素加快排出,有效减少黑色素的沉积,

起到美白淡斑的作用。

5. 滋润补水:改善皮肤微循环(光洁),促进透明质酸合成和

分泌(滋润):EGF 能促进细胞外透明质酸、糖蛋白等大分子的合

成和分泌,增强皮肤的亲水性,保持皮肤内水分。EGF能改善皮肤

微循环,令气血通畅,防止代谢产物淤积,使皮肤富有营养。维持

真皮内的水分;肌肤恢复健康,表皮内角质层水分保持能力增强,

让肌肤滋润散发活力。EGF能够改善皮肤微循环,提供良好的营养

环境,维持一定量的皮肤脂肪,还原肌肤弹性,使其均匀紧致,减

少皱纹。

三、EGF作用原理

(一)皱纹的产生原因及机理

皱纹的产生的原因有两个,一是表皮细胞新陈代谢放缓,甚至

停止产生新的表皮细胞来取代老的表皮细胞;二是真皮层的蛋白质(胶原蛋白、弹性蛋白)大量衰减,弹性结构被破坏。

先看表皮层细胞,人体细胞的正常循环周期为:干细胞→新生

细胞→成熟细胞→衰老细胞→细胞凋亡。在正常的情况下,表皮细

胞完成一个循环周期需要28~42天,这段期间细胞都停留在G0期(静止或休眠状态),当表皮细胞接收到指令(Epidermal Growth Factor,EGF)时,就开始进入G1期(活跃的生长周期)进行细胞

的复制分裂,产生新生的细胞。但如有外在因素(如化学刺激、心

理压力导致的内分泌不正常等)的影响,其循环机制将无法激活,

就会产生不正常的循环周期。由28天变成两三个月,甚至高达半年、一年之久,原本老旧的细胞无法替换而不断的老化,细胞膜不断的

角质化,皮肤相对之下就显得黯沉粗糙,皱纹由此产生。

再看真皮层胶原蛋白,真皮层的胶原纤维(主要由胶原蛋白构成)对皮肤起着重要作用,它联结并支撑着表皮层,使皮肤充满弹性,平滑紧致。在18-20岁时,胶原蛋白合成量达到顶峰,皮肤达

到最佳状态。随着年龄增长,胶原蛋白的合成能力减弱并开始加速

流失,导致表皮层和真皮层的联结结构越来越松散,表皮层在重力

作用下开始向下滑动,颈部、眼眶周围的皮肤产生皱纹。

(二)EGF防皱机理

首先,利用EGF的三维结构原理,启动蛋白酪氨酸激素,经

由信息传导系统引起细胞内一系列生化变化,促进小分子化合物从

细胞外环境主动运输;此时老旧细胞因RNA和蛋白质的活化,使静止的细胞进入分裂周期,促进细胞增殖转换。在人体皮肤内,EGF

通过一系列细胞因子的磷酸化将生物信息传导至细胞内。EGF是一

个细胞再生指令(Epidermal Growth Factor,EGF),在EGF的作用下,表皮细胞的分化,增值速度加快;同时能将已经分化成熟的细

胞逆分化成干细胞,干细胞再不断分化出新生细胞。在EGF的这两

种作用下,新细胞在皮肤中所占的比例逐渐大于衰老细胞的比例,

因此,使得皮肤变年轻。

重组人表皮生长因子 Recombinant Human Epidernal Growth Factor(rhEGF)治疗的创面会出现干细胞岛现象,是一种特殊的生物学现象,干细胞岛现象的发现,为从更深层次上解释生长因子加速

受创皮肤的再生提供了更有力的证据。局部应用rhEGF一方面改变

了创面生长因子的外环境,另一方面,生长因子与创面残存表皮干

细胞受体结合,诱导干细胞增值分化,产生一系列促修复效应,对

于补充内源性EGF的不足,启动和调控细胞增值,加速创面修复,

具有重要的临床意义。但对不同原因引起的创面愈合情况不同,针

对不同原因的创面如何改善生长因子的配合及用药方式,以延长表

皮生长因子的作用时间,增强作用效果有待进一步研究。

其次,EGF具有「逆时记忆疗法」的特性,能有效将原生细胞、生长架构体(胶原蛋白、弹力蛋白)和控制细胞的生长因子,进行

最紧密的结合,并发挥最大功效,从而通过这些指令使得人体自我

合成蛋白质(胶原蛋白、弹力蛋白),进而达到传递活化讯息,逆

转肌肤老化过程。

研究表明:极微量的EGF即能强烈刺激细胞生长,抑制衰老基因表达,阻止皮肤衰老,使皮肤各组成份保持最佳生理状态。此外,它还能刺激细胞外一些大分子(如透明质酸和胶原蛋白等)的合成

与分泌,滋润皮肤,是决定皮肤活力和健康的关键因素。

研究发现,EGF 能促进上皮细胞、成纤维细胞的增值;增强表

皮细胞的活力;延缓表皮细胞的老化,使肌肤各组成成份保持最佳

生理状态。高活性的EGF才能促进皮肤细胞的分裂和生长,此外它还能刺激细胞外一些大分子(如透明质酸和胶原白等)的合成与分泌、滋润皮肤,是决定肌肤活力和健康的源泉。

四、应用范围

医药:表皮生长因子在医药领域具有重要的意义,研究表明它

能促进受伤的皮肤组织生长,抑制胃酸的分泌,可促进烧伤皮肤的

生长和皮肤溃疡的愈合,它将在皮肤病、胃病治疗、角膜移植手术中起重要作用。

化妆品:美国学者的研究表明,表皮生长因子具有延缓皮肤细胞衰老、促使人皮细胞的修复和生长的作用,使皮肤光滑丰润。

生化试剂: 本品可为生化试剂在科研、检测等多个领域中使用。

五、包装、储存

包装:0.1mg、1mg、2 mg、10mg、1g/西林瓶,粉状冻干品密封包装。

保存:EGF在溶液中起活性一般只能保存7-10天;EGF冻干粉在室温下可存放180天;建议在2-8℃的冷柜中避光、密封保存,三年其生物活性不改变。

六、使用注意事项

EGF暴露在空气中或溶解后,决定其活性的“二硫键”会氧化断裂,分子结构发生改变,一段时间后即会失去活性,所以EGF不能作为添加剂加在化妆品中使用。EGF只有采用真空冻干技术进行封存,才能充分保证其活性,未启封常温下可保存2年以上。

七、EGF的使用量

按照实验,人体皮肤按照面部、颈部、手背部三个部位的面积计算,表皮细胞能达到逆分化,每天需要量应该是6000个国际活性单位。单独使用EGF,其透皮吸收率只有千分之九,也就是说每天都要用67万单位。这显然是不可能的。因为EGF的价格30万人民币一克,一克EGF有5亿个活性单位,67万单位的EGF就300多元人民币。

那么,就要增加EGF的透皮吸收率,降低成本。经过组合实验,现在成熟的EGF护肤品,其透皮吸收率达到15%以上,也就是说每天一个人的护肤需求量最低也要2万个单位。这数据适合30岁以下的人群。

如果年龄增加,皮肤细胞内由于EGF降解的数量过多,需要补充的EGF 就要增加,再加上年龄越大,皮肤吸收EGF的能力越低,就要加大EGF的供应量。一般40岁的人最低限量4万单位每天,50岁就要6万单位,60岁需要8万单位。

表皮生长因子用于慢性伤口创面治疗的研究

表皮生长因子 epidermal growth factor是Cohen1962年首次在

小鼠颌下腺中发现的一种小分子蛋白质。1975年从人尿中提取出人

表皮生长因子(Human EGF,hEGF)因其具有多种生物学活性和丰

富的临床应用前景,成为近年生物化学和免疫学研究的热点之一。

1.分子结构由53个氨基酸组成的小分子多肤,分子量约为 6000

道而顿,等电点约为4.6,分子内有三对二硫键,因而对酸、碱、热等理

化因素均较稳定。hEGF是一种多功能细胞生长因子,通过与细胞膜

上hEGF受体结合发挥生理作用。促使细胞内部发生一系列复杂的

生化级联反应,使得 RNA 、DNA和蛋白质合成增加,最终促进细胞

生长繁殖、加速细胞新陈代谢。

2.分布、合成及提取颌下腺是EGF的主要合成部位,除此之外,十二指肠粘膜及胰腺导管、角膜上皮细胞、胃粘膜、肾、卵巢、睾丸、前列腺、肝脏等处也可合成EGF。EGF合成后释放到唾液、十

二指肠、尿液、乳汁及血液等体液中。20世纪80年代以前,hEGF的

来源主要是通过组织和体液提取,80年代以后,随着基因工程技术的

发展,人们通过基因重组技术,利用大肠杆菌、酵母菌等生产hEGF 获得了成功,为工业化生产hEGF打下了基础。

3.hEGF对上皮细胞的作用人表皮生长因子对人体各系统都发

挥着重要作用,本文仅阐述其对上皮细胞的作用。EGF可促进细胞

有丝分裂以及糖、蛋白质、RNA、DNA合成,因此有着广泛的促进

上皮细胞分裂增殖的作用,在临床上与很多疾病如免疫性皮肤病、

组织创面修复、牙周炎的治疗等密切相关。其在慢性伤口创面治疗

方面的作用机制为:通过与EGF受体结合剌激表皮细胞(包括多种

组织来源的上皮细胞、各种间质细胞)进入细胞分裂周期,启动细胞

内一些重要功能基因活化、表达、分泌生物活性蛋白质等。促使胶

原纤维呈线状排列,表皮细胞快速规则生长并及时覆盖创面。促进创

面愈合,能明显加速美容、二度烧伤及其它皮肤创伤等伤口的愈合,

并保持创面平整光滑, 减少癍痕形成及色素沉着。

近年来,多位临床研究人员:李晓芳、欧邦军、宋丹、付小

兵等人将其应用于烧伤创面、糖尿病溃疡等各种慢性难愈性伤口的

治疗,其伤口愈合时间及疗效观察与对照组相比都有显著性意义,

取得了较好的临床效果。

4.创面使用的重组人表皮生长因子凝胶制剂药理作用能促进皮

肤创面组织修复过程中DNA、RNA和羟脯氨酸的合成,诱导分化

成熟的表皮细胞逆转化为表皮干细胞,加速创面肉芽组织的生成和

上皮细胞的增殖,从而缩短创面的愈合时间,提高创面修复质量。

其特点有:

4.1 彻底:直接到达细胞核,修复基因,促进细胞分裂繁殖、新生。从根本上治疗疾病,提升身体机能,延长寿命,美化容颜。

4.2 快速:是基因工程和纳米技术的最高阶段成果,小于细胞

200倍,90秒钟到达细胞内部。

4.3 全面:人体固有,与生俱来,伴随生命始终,控制人体全方位,影响生命全过程,是生命活动的必须物质,是生命活动的总司令,是人体生命的主宰,直接命令和调控人的八大系统,激活八大

系统细胞达到最佳的代谢水平,使人体器官达到最佳的运转机能,

提高生命质量。

4.4安全:由天然物质中提取(实验室菌类、鹿茸精华素、海底

植物精华素、人参皂甙),和人体自身分泌的完全一样,对人体无

任何毒副作用和依赖性。

5.EGF的现状和发展科学界对EGF的提取和生产有三大难题

仍无法解决

一是资源少、产量低。早期的EGF是从人的胎盘、尿液中提取的,资源有限,且其中的含量极低,10万升尿液只能提取约一克EGF,这样的提取量根本无法进行大范围的推广和应用,即使在

EGF研究方面处于世界前沿的美国,目前的年提取量尚不足1000克。

二是价格昂贵。由于资源少、产量低、提取难度大,大量的原

料和微量的产出形成难以突破的瓶颈,使EGF的提取成本巨大,导

致1克EGF的国际价格近200万美元。

三是活性难以保证。EGF是一种生物活性蛋白质,其神奇的功

效完全依赖于它的活性,没有活性的EGF毫无作用。EGF在溶液中

起活性一般只能保存7-10天,因此,如果将其添加在美容护肤品中,

生产和使用周期都将超过起活性保存期,使EGF失去作用,所以EGF很难作为添加剂使用。

肝癌中肝细胞生长因子受体的表达及意义

性质,以及钼靶对致密型乳腺,由于脂肪成分较厚,对腺体结构显示较差,造成钼靶诊断率降低,而超声对它具有较高的分辨率,能明显提高PCM 的诊断准确率。MRI 由于软组织分辨率高,对乳腺内部结构分辨率高,脂液性物质是PCM 特征性表现[6],脂液性物质在T1WI 呈高信号,在T2WI 呈高信号,在STIR 脂肪抑制像上呈低信号,较具特征性。而MRI 不足之处是对钙化显示不佳。因此,在临床上,对PCM 钼靶征象不典型或鉴别困难时,利用超声及MRI 联合诊断,能明显提高诊断准确率,对诊断特别困难的病例,应行针吸细胞学检查。 3.4治疗目前手术切除病灶是唯一有效的治疗方 法,而手术的选择应根据钼靶的表现,有时超声、MRI 及CT 也是一种补充,尤其是MRI 及MSCT [7]对分期有很大的帮助PCM 若能完全切除,基本不会复发[参考文献] [1] 罗志琴.浆细胞性乳腺炎钼靶X 线诊断(附15例分析)[J].放射学实践,2006,21(4):356-357. [2]周毅,马丽华,黄其敏.浆细胞性乳腺炎的X 线诊断分 析[J].中国医学影像技术,2000,16(3):216-217.[3]闫少宁,平学军.浆细胞性乳腺炎的钼靶X 线表现[J].宁夏医学杂志,2007,29(8):706-707. [4]唐文,何山,郑轲,等.浆细胞性乳腺炎的临床研究[J].中华实用诊断与治疗杂志,2008,22(11):810-811. [5]张梅,杨斌,李萍.高频超声联合钼靶X 线诊断浆细胞性乳腺炎[J].医学研究生报,2011,24(4):390-394. [6]谭文莉,陆孟莹,黄学菁,等.MRI 在浆细胞性乳腺炎分期中价值[J].临床放射学杂志,2011,30(4):492-495.[7]马海峰,王嵩,王夕富,等.浆细胞性乳腺炎MSCT 细化分型在临床治疗计划中的应用[J].上海医学影像,2009, 18(4):280-282.[收稿日期]2011-09-26 *[作者简介] 黄海静,女,汉族,生于1982年4月,江苏省南通市人,检验师,研究方向:临床检验学。 南通大学学报(医学版) Journal of Nantong University (Medical Sciences)2012∶32(1) C-Met 蛋白是一分子质量为190ku 的异二聚 体,由细胞外50ku 的α亚基和跨膜的145ku β亚 基通过二硫键连接而成。C-Met 受体包括3个功能不同的结构域,即胞外区、跨膜区和胞内区。α亚基 肝癌中肝细胞生长因子受体的表达及意义 黄海静1*,吴月平2,蔡卫华2 (江苏省南通市第三人民医院1检验科,2肝胆外科,南通226006) [摘要]目的:研究肝细胞生长因子受体(c-Met)在肝癌患者组织及血浆中的表达,探讨c-Met 在肝癌发生、发展 所起的作用。方法:对肝癌及慢性肝炎患者进行调查,并且设立正常对照组,应用酶联免疫吸附法检测各组血浆c-Met 水平;应用半定量RT-PCR 法和免疫组织化学法分别检测各组肝组织中的c-Met mRNA 及c-Met 蛋白的表达。结果:肝癌患者血浆中的c-Met 水平明显高于慢性肝炎患者和正常人群(均P <0.05)。肝癌组织中的c-Met 水平明显高于慢性肝炎组织和正常肝组织(均P <0.05)。结论:c-Met 在肝癌组织及血浆中呈高表达,可能与肝癌的发生、发展有关。 [关键词]肝癌;肝细胞生长因子受体;酶联免疫吸附法;逆转录多聚酶链式反应;免疫组织化学[中图分类号]R735.7[文献标志码]A [文章编号]1674-7887(2012)01-0035-03 The study for the expression of hepatocyte growth factor receptor in the serum and tissues in patients with hepatic carcinoma HUANG Haijing 1*,WU Yueping 1,CAI Weihua 2 (1Department of Clinical Laboratory ,2Department of Hepatobiliary Surgery ,the Third Hospital of Nantong ,Nantong 226006) [Abstract]Objective :To study the expression of hepatocyte growth factor receptor(c-Met)in the serum and tissues in pa -tients with hepatic carcinoma ,explore the role of c-Met in the tumorigenesis and progression of human hepatic carcinoma.Methods :Study the patients with hepatic carcinoma or hepatitis ,and establish normal control group ,measure the plasma c-Met concentrations in them by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA).The expression of c-Met mRNA and protein were detected in liver tissue of them by using semi-quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR)and immunohistochemistry respectively.Results :The plasma c-Met concentrations in patients with hepatic carcinoma was high -er than those in hepatitis and normal control group(P <0.05).The expression level of c-Met in hepatic carcinoma was higher than those in hepatitis and normal hepatic tissue(P <0.05).Conclusion :The expression of c-Met in the serum and tissues in pationts with hepatic carcinoma was high ,c-Met may be involved in the tumorigenesis and progression of hepatic carcinoma.[Key words] hepatic carcinoma ;hepatocyte growth factor receptor ;enzyme-linked immunosorbent assay ;reverse transcrip -tion-polymerase chain reaction ;immunohistochemistry 35··

表皮生长因子受体及其临床应用_叶榕

?综述? 表皮生长因子受体及其临床应用 叶榕 【关键词】表皮生长因子受体;肿瘤;临床应用 【中图分类号】R730.5【文献标识码】A【文章编号】1004-5511(2008)03-0164-03 自Cohen在1962年发现表皮生长因子受体(epi-dermal growth factor receptor,EGFR)以来[1],经过近半个世纪的研究,研究者对EGFR的结构和功能有了比较全面的了解。特别是近年来,开发了针对EGFR 的靶向抑制剂,并且在肿瘤内科治疗中取得较好的疗效,使其成为研究热点之一。 1EGFR的分子生物学特性 1.1EGFR的结构与分布EGFR是具有配体介导的酪氨酸激酶活性的多功能跨膜糖蛋白,是定位于人第7号染色体短臂的原癌基因C-erbB-1的表达产物,分子量为170ku。EGFR分子分为三个区域:由619个氨基酸残基构成的伸向膜外识别并结合配体的氨基端区域,位于细胞膜中间含25个疏水氨基酸的跨膜区,以及膜内含542个氨基酸残基、具有酪氨酸激酶活性并能结合NTP的羧基端区域[2]。 除造血系统外,EGFR几乎存在于人体的所有组织中。在大鼠颌下腺主要定位在颗粒曲管上皮细胞内。在前列腺主要分布于腺体腔缘侧的细胞膜上,可见阳性的棕色颗粒,分布具有一定极性。在胃肠道组织如胃壁细胞、十二指肠粘膜上皮细胞和小肠上皮细胞上均有EGFR;在肠粘膜主要分布在刷状缘及基底膜,前者引起物质转运,后者导致细胞生长发育[3]。 1.2EGFR的活化与信号转导机制表皮生长因子(EGF)与靶细胞膜上EGFR结合后发挥生物学效应。两者的结合具有高亲和力,具有时间与温度的依赖性、饱和性和可逆性。研究显示,EGFR与核内染色体相连,可通过直接诱导特殊核蛋白的磷酸化而发挥其生理功能。EGF首先与EGFR的胞外部位结合,导致受体分子发生二聚化,促使EGFR羧基末端的三个酪氨酸残基(Tyr)自身磷酸化位点发生磷酸化,使受体酪氨酸激酶活化,从而磷酸化受体本身及下游的信号分子;磷酸化的受体通过其磷酸化酪氨酸残基可与蛋白质的SH2结构域相互作用,结合胞内信号转导分子。已知EGFR的活化可以使细胞内三磷酸肌醇和二酰基甘油增多,结果引起细胞内游离钙离子增多,激活磷酸蛋白激酶C和磷酸蛋白激酶A,从而介导各种信号转导途径,使细胞增殖和功能发生改变。诱导EGFR自身磷酸化的位点是在其羧基端1068、148、1173和氨基端一个位点的4个Tyr 残基;在体实验主要在1173Tyr残基,其他3个Tyr 残基磷酸化程度较离体少[4]。 1.3EGFR阻断剂①马鞭草醇提液(EV)可能抑制EGFR的表达;②EGF和EGFR之间存在着反向调节;③EGFR配体拮抗的单克隆抗体或EGFR选择性酪氨酸激酶抑制物可对EGFR产生阻断作用[5]。 2EGFR与肿瘤生成的关系 研究显示,在非小细胞肺癌、乳腺癌、卵巢癌、膀胱癌、结肠癌、胃癌、胰腺癌、前列腺癌及头颈部恶性肿瘤中都有EGFR的过度表达[6]。EGFR的高表达可以促进肿瘤细胞的增殖、血管生成、粘附、侵袭和转移,抑制肿瘤细胞的凋亡[7]。 2.1EGFR与肺癌的关系肺癌是目前世界上最常见的实体瘤和最普通的癌症死亡原因[8],80%肺癌的组织类型是非小细胞肺癌(NSCLC),在NSCLC患者中有80%~90%的人表达EGFR,过表达为45%~70%。研究发现,肺癌细胞以自分泌方式分泌转化生长因子a及内皮生长因子,两者与EGFR以配体方式相结合,并且EGFR的表达与肺癌患者预后、不良的肿瘤分化及肺癌细胞远处转移密切相关[9]。 2.2EGFR与乳腺癌的关系EGFR对乳腺癌的诊断和预后价值已得到肯定。Jiang等[10]应用雌激素、他莫西芬、表皮生长因子对乳腺癌MCF-7细胞进行体内、体外实验分析,认为EGFR的表达和患者 作者单位:350101福建福州,福建卫生职业技术学院医学基础部

重组人表皮生长因子凝胶(酵母) (新增)

重组人表皮生长因子凝胶(酵母) Chongzu Ren Biaopi Shengzhangyinzi Ningjiao (Jiaomu) Recombinant Human Epidermal Growth Factor Gel(Yeast) 本品系由高效表达人表皮生长因子基因的酵母,经发酵、分离和高度纯化后,加入凝胶基质制成。含适宜稳定剂,防腐剂,不含抗生素。 1 基本要求 生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。 2 制造 2.1 工程菌菌种 2.1.1 名称及来源 重组人表皮生长因子工程菌株,系由带有人工合成的人表皮生长因子基因的DNA片段整合到酵母菌染色体基因组中构建而成。 2.1.2 种子批的建立 应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”的规定。 2.1.3 菌种检定 主种子批和工作种子批的菌种应进行以下各项全面检定。 2.1. 3.1 划种BMG1琼脂平板 应呈典型酵母菌菌落形态,无其他杂菌生长。 2.1. 3.2 染色镜检 在光学显微镜下观察,应形状规则,用次甲兰染色,无死亡细胞。 2.1. 3.3 筛选标志检查 应符合该基因表型特征。 2.1. 3.4 人表皮生长因子表达量 在摇床中培养,应不低于原始菌种的表达量。 2.1. 3.5 人表皮生长因子基因稳定性检查 涂BMG1琼脂平板,挑选至少50个克隆,用PCR检测人表皮生长因子基因,阳性率应不低于95%。 2.2 原液 2.2.1 种子液制备 将检定合格的工作种子批菌种接种于适宜的培养基(可含适量抗生素)中培养,供发酵罐接种用。 2.2.2 发酵用培养基 采用适宜的不含任何抗生素的培养基。 2.2.3 种子液接种及发酵培养

成纤维细胞生长因子及其与受体作用机制的研究进展

成纤维细胞生长因子及其与受体作用机制 的研究进展1 姜媛媛,任桂萍,王文飞,郝建权,李德山 东北农业大学生命科学学院生物制药教研室,哈尔滨(150030) E-mail:deshanli@https://www.360docs.net/doc/f64940523.html, 摘要:成纤维细胞生长因子(FGF)是一类多肽类物质,其中大多数成员可与肝素结合发挥作用。目前已知FGF至少包括23个因子,即FGF1~23。部分FGF家族成员N末端有大约3O个氨基酸残基组成的典型信号肽序列,可以分泌到细胞外。FGF家族成员是一类生理功能较广泛的生长因子,功能包括促进细胞有丝分裂、趋化与血管生成、促进中胚层和神经外胚层细胞的存活与生长等。本文根据最近的研究成果对 FGF因子及其受体研究进展做一综述,并主要对FGF因子特征及其研究趋势进行了探讨。 关键词:FGF,FGF受体,肝素 中图分类号:Q74 引言: 成纤维细胞生长因子最早是从脑和垂体的提取液中发现的,该物质是一种能促进成纤维细胞生长的多肽类活性物质,可以通过与细胞膜特异性受体结合对细胞生长进行调节。从70年代中期到目前已进行了大量广泛的研究,目前已知FGF至少包括23个因子,它们在一级氨基酸序列上有一定的同源性,并有类似的生物学功能,且广泛存在于体内多种组织中。FGF对中胚层和神经外胚层来源的细胞具有十分明显的促细胞分裂增殖作用,并且在机体内的胚胎发育、细胞生长分化、创伤组织愈合及肿瘤发生发展中起着十分重要的作用。 1. 成纤维细胞生长因子(FGF)家族 成纤维生长因子(Fibroblast growth factor, FGF)又被称为肝素亲和生长因子(Heparin binding growth factor, HBGF),是一类通过与细胞膜特异性受体结合发挥作用的多肽分子。现已知FGF家族至少包括23个成员,即FGF1~FGF23。FGF家族成员之间的氨基酸序列同源性约为25%~50%,其每个成员都有140个氨基酸的中轴,该中轴在不同的成员中有高度的同源性。结构分析表明,此中轴折叠成12条逆向平行的β链,它们又进一步形成圆柱状的结构。部分FGF家族成员N末端有大约3O个氨基酸残基组成的典型信号肽序列,使得它们可通过内质网一高尔基复合体的经典(即自分泌和旁分泌)途径被分泌到细胞外,但其中也有部分FGF则因本身缺乏信号肽结构,不能向外分泌,只能在细胞受损时释放[1]。多数FGF(如FGF3~8、10、15、17~19、21~23)的N末端具有典型的信号肽序列。而FGF16和FGF20虽然没有明确的信号肽序列却也能高效地分泌到细胞外[12]。FGF1 和FGF2也缺乏信号肽序列和正常的分泌途径,却也能出现在胞外基质,推测两者可能来自受伤的细胞,或者通过与内质网-高尔基体通路不同的细胞脱颗粒机制释放至胞外的。此外,FGF 11~14没有典型的信号肽序列,因此认为这些FGF是在胞内发挥作用[13]。由于FGF家族成员之间的氨基酸序列有25%~50%的同源性,分子结构有一定的共性,故FGF不同分子之间的生物学效应既有相似性,又有各自的特点[1-3]。 FGF1(aFGF)和FGF2(bFGF)是最先被发现,也是迄今为止研究最充分的两个成员,因其1本课题得到黑龙江省科技厅重点攻关项目(编号:2006G0461-00)的资助。

表皮生长因子受体

表皮生长因子受体(EGFR)文章来源:易瑞沙更新时间:2010-05-12 字体:[ 大] [ 小] [ 打印] 表皮生长因子受体概述 表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor, EGFR)是原癌基因C-erbB-1 (HER-1)的表达产物,EGFR 家族包括EGFR、C-erbB-2(HER-2)、C-erbB-3、C-erbB-4四个成员,均定位于细胞膜上。erbB-1广泛分布于除血管组织外的上皮细胞膜上;erbB-2在正常人体腔上皮、腺上皮及胚胎中均有普遍的微弱表达;erbB-3在除造血系统外的多数部位有表达;erbB-4在除肾小球及周围神经外的所有成年组织均可检测到其表达。 EGFR(epithelial growth factor receptor,表皮生长因子受体)本身具有酷氨酶激酶活性,一旦与表皮生长因子(EGF)组合可启动细胞核内的有关基因,从而促进细胞分裂增殖。胃癌、乳腺癌、膀胱癌和头颈部鳞癌的EGFR表达增高。 EGFR可分为胞外区、跨膜区和胞内区3部分,其特点如下:胞外区由氨基端的621个氨基酸构成,是配体结合区,对EGFR具有高度亲和力,对热量很稳定。跨膜区由23个氨基酸残基构成螺旋状结构的疏水区,将受体固定于胞膜上。胞内区的542个氨基酸构成3个亚区: 1.近膜亚区(约50个氨基酸)主要作为PKC和erk/MAPK(extracellular signal-regulated kinase/mitogen activated protein kinase)作用的负反馈区域; 2.随后的约250个氨基酸构成酪氨酸激酶亚区,包含SH1和src同源物1的结合位点; 3.羧基端尾部的229个氨基酸构成羧基端亚区。 迄今发现,EGFR共有6种配体:表皮生长因子(epidermal growth factor, EGF)、转化生长因子A(TGFA)、amphireguin、betacelluin(BTC)、heparin-binding EGF (HBEGF)和epiregulin(EPR)。EGFR与其配体的结合具有高亲和性、可饱和性和特异性。 表皮生长因子受体(EGFR)的功能 研究表明在许多实体肿瘤中存在EGFR的高表达或异常表达。EGFR与肿瘤细胞的增殖、血管生成、肿瘤侵袭、转移及细胞凋亡的抑制有关。其可能机制有:EGFR的高表达引起下游信号传导的增强;突变型EGFR受体或配体表达的增加导致EGFR的持续活化;自分泌环的作用增强;受体下调机制的破坏;异常信号传导通路的激活等。EGFR的过表达在恶性肿瘤的演进中起重要作用,胶质细胞、肾癌、肺癌、前列腺癌、胰腺癌、乳腺癌等组织中都有EGFR的过表达。对胶质细胞瘤的研究发现EGFR的高表达主要与其基因扩增有关。但有时EGFR表达水平的调节异常也存在于翻译及翻译后。 EGFR在肿瘤中的高表达还可能与活化后降解减少有关,一些研究指出c-Src可通过抑制受体泛素化和内吞作用而上调EGFR水平。许多肿瘤中有突变型EGFR存在,现已发现许多种EGFR突变型。突变型EGFR的作用可能包括:具有配体非依赖型受体的细胞持续活化;由于EGFR的某些结构域缺失而导致受体下调机制的破坏;异常信号传导通路的激活;细胞凋亡的抑制等。突变体的产生是由于EGFR基因的缺失、突变和重排。EGFR的配体对细胞内信号传导有很大影响。EGFR的配体通过自分泌形式激活EGFR促进细胞增殖,

第六章 表皮生长因子受体抑制常见不良反应及其处理

第六章表皮生长因子受体抑制剂常见不良反应及其处理 表皮生长因子及其受体信号通路在非小细胞肺癌(NSCLC)发生发展中发挥了重要作用,它调控肿瘤细胞增殖、生存和凋亡、血管生成、肿瘤转移等多个生物学过程,是NSCLC治疗的重要靶点之一。针对表皮生长因子受体(EGFR)的靶向药物包括小分子抑制剂(如吉非替尼和厄洛替尼)和单克隆抗体(如西妥昔单抗等)。小分子药物已作为晚期NSCLC的二、三线治疗方案广泛用于临床,EGFR单抗联合化疗一线治疗晚期NSCLC同样也取得了较好的疗效。 EGFR抑制剂(EGFR TKIs)无论是小分子药物还是单克隆抗体,均具有良好的安全性和耐受性,常见不良反应有皮肤毒性和腹泻,罕见不良反应有间质性肺炎、肝功能异常、口腔炎、脱发、口腔干燥等,无威胁患者生命的血液学毒性。与化疗毒副反应的处理措施不同,应用此类药物出现不良反应并非停药的指征,反而是肿瘤对靶向药物敏感的临床信号。许多研究发现皮疹与EGFR TKIs治疗的疗效相关,中重度皮疹患者总体生存明显优于轻度或无皮疹的患者。因此,正确处理EGFR TKIs 引起的不良反应具有十分重要的临床意义。 第一节皮肤毒性 皮肤毒性是最常报道的不良反应,发生率在2/3左右,常见反应包括痤疮样皮疹、甲沟炎及甲裂、毛发改变、皮肤干燥、超敏反应、粘膜炎等(表1)。EGFR TKIs的皮肤毒性/皮疹不属于过敏反应,而是皮肤EGFR受到抑制的结果。正常上皮和滤泡角细胞存在EGFR表达,EGFR在上皮细胞增殖分化等方面发挥重要作用,它可以剌激表皮细胞生长,抑制其分化,保护细胞抵抗紫外线相关损伤,抑制炎症并加速创面愈合。有证据提示EGFR表达或活性改变可伴有上皮异常增生和分化;皮肤毒性的机制还包括上皮角化过度和滤泡阻塞或炎症性反应。 表1 EGFR TKIs相关性皮肤毒性反应 EGFR TKIs引起的皮疹通常为痤疮样皮疹,呈丘疹脓疱样改变。皮疹的发生率随研究和药物而异,在BR.21研究中,皮疹发生率为79%,多为轻中度,3级和4级皮疹发生率分别为8%和1%。单抗皮疹发生率相对较高,在FLEX研究中,接受西妥昔单抗治疗的患者痤疮样重度皮疹的发生率

EGF表皮生长因子

表皮生长因子(EGF) 系于公元1962年由意大利女科学家Mantalcini教授和美国博士Cohen在实验中发现的,并因而获得1986年诺贝尔生 理奬与医学奬,是在小老鼠的颔下腺发现了一种可以促使新生小鼠眼睑早开,牙齿早萌的活性成分,而将这活性成分加入培养皮肤表皮细胞的基质后,发现可以促进皮肤表皮细胞的生长,因此将此活性成分命名为EGF(Epidermal Growth Factor)中文为"表皮细胞生长因子,并证实这种活性蛋白具有免疫和自我调节的能力,并能加速表皮组织的新陈代谢,更新已老死及受损的细胞,原来人体器官和发肤的自我修补功能是由一组称为细胞因子(cytokines)的活性蛋白互相协调而成,而EGF是其中的一种因子。主要作用是促进皮肤细胞的增殖、分化,加速新陈代谢,提高新细胞在皮肤中所占的比例,从而使皮肤变得年轻,微量的EGF可赋予衰老细胞全新的生命力,促使各种受损皮肤修复和再生,它还能刺激细胞外一些大分子(如透明质酸、糖蛋白等)的合成与分泌,滋润皮肤,是决定肌肤活力和健康的源泉。EGF又被称为"美丽因子",人体EGF的含量决定着皮肤年轻的程度。 表皮细胞生长因子(EGF)是由53个氨基酸组成的小分子多 肽,分子量约6000道顿,分子内有三对二硫键结构,因此对酸、热等物理化学因素均很稳定。生长因子是一种蛋白质,主要作用是与细胞表面的接受器结合后,刺激细胞产生一连串的细胞增殖与分化,正常细胞要增殖非有生长因子的刺激不可,皮肤的细胞需要生长因子的刺激来加速更新与再生。EGF是一个相当特殊的3D结构,主要的动作是刺激纤维母细胞上的接受器,结合后,开始制造合成各类纤维和细胞间基质,它的重点在激化细胞的新生、活化纤维母细胞,也就

人表皮生长因子的纯化及浓度在线检测

人表皮生长因子的纯化及浓度在线检测 童望宇1, * , 姚善泾2, * , 朱自强2 (1上海市华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室 上海市 200237; 2浙江省杭州市浙江大学化学工程与生物工程系,杭州 310027) 摘要 在分离纯化快速开拓系统(?KTA explorer 100)中用凝胶(Sephadex G-50 superfine )纯化人表皮生长因子,并在优化条件下对其纯化过程中的hEGF 进行定量测定。用标准人表皮生长因子经离子交换柱、蛋白质扫描分析系统及SDS-PAGE 间相互印证,结果表明:在优化条件下,可得到在SDS-PAGE 上与标准样品hEGF 一样清晰的单条带,其产品纯度高于94%,回收率高于36%;其检测的灵敏度可达1μg/ml 。该法不仅对人表皮生长因子的在线检测行之有效,而且对其它蛋白质纯化的在线检测也具有参考价值。 关键词 人表皮生长因子,层析,检测,纯化 中图分类号 TQ0333 Q819 引言 人表皮生长因子(human epidermal growth factor ,hEGF )是由53个氨基酸残基所组成 的多肽生长因子,分子量约为6200D [1]。人表皮生长因子具有在体内刺激皮肤组织、角膜、肺、气管上皮组织的生长繁殖及抑制胃酸分泌等多种生物学作用,因而可应用于外科伤口的愈合及溃疡病的治疗等医疗领域[2-5]。自1975年Cohen 等人[1]从尿液中首先分离纯化得到人表皮生长因子以来,有关研究的进展很快,除了继续研究从天然来源中分离纯化以外,基于基因工程菌发酵生产也已问世[6-7],但是不管是从天然资源,还是来自基因工程菌发酵液,hEGF 的浓度总是偏低,需要经过较长时间的分离和纯化流程,才能得到相对较纯的产品。为了设计一个高效和可控的纯化过程,hEGF 的在线分析和检测就成为非常重要。 目前,hEGF 的定量检测方法主要有放射免疫分析(Radio immuno-assay, RIA )[4]、放 射受体分析(Radio receptor assay, RRA) [8]、酶联免疫吸附分析(Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA )[9]、酶免疫分析(Enzyme immunoassay, EIA )[10]、反相HPLC [11]和免疫荧光技术[12]等。以上各种方法均有其特点和不同的条件局限性,但均难用于过程的在线检测。 我们在使用?KTA explorer 100进行蛋白质纯化时发现,该系统通过本身带有的软件, 不仅可以与各种层析柱结合进行多种生物质的分离流程研究,而且还可以比较精确地通过出峰面积表示蛋白质量的多少。利用这种定量关系,就为定量确定生物质含量提供了基础。以此为依据,对hEGF 这个比较难于定量与分离的多肽,进行了凝胶层析中在线检测与纯化工艺的优化,达到了纯化与在线定量检测的目的。 1 材料与方法 1.1 仪器与试剂 联系人:童望宇,姚善泾, E-mail: tongwy@https://www.360docs.net/doc/f64940523.html, , yaosj@https://www.360docs.net/doc/f64940523.html, 第一作者:童望宇,男,40岁,博士 * 国家自然科学基金资助项目(批准号:29736180) _______________________________________________________________________________https://www.360docs.net/doc/f64940523.html,

成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)对骨形成的直接调控作用

第三军医大学 硕士学位论文 成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)对骨形成的直接调控作用 姓名:周锐 申请学位级别:硕士 专业:遗传学 指导教师:陈林 2011-05

第三军医大学硕士学位论文
成纤维细胞生长因子受体 3(FGFR3)对骨形成的 直接调控作用*
摘 要
成纤维细胞生长因子受体(fibroblast growth factor receptors, FGFRs)属于受体酪氨 酸蛋白激酶(receptor tyrosine kinase, RTK)家族。目前已发现 4 种 FGFRs,即 FGFR1、 FGFR2、FGFR3、FGFR4。它们之间在氨基酸水平有 55%~72%的一致性。 既往研究表明,FGF/FGFRs 信号通路与骨骼发育、再生和骨骼疾病有密切联系。 FGFR1、2、3 功能增强或丧失突变可导致包括颅缝早闭(craniosynostosis, CS)、软骨发 育不全 (achondroplasia, ACH) 和 CATSHL (camptodactyly, tall stature, scoliosis, and hearing loss)综合征在内的多种人类骨骼系统遗传性疾病。 骨骼的发育是通过软骨内成骨(endochondral ossification) 和膜内成骨(intramembranous ossification)两种方式来完成的。软骨内成骨又经过软骨形成(chondrogenesis)和骨形成 (osteogensis)两个密切相关的过程。而膜内成骨则是一个单独的骨形成的过程,即间充 质密集后直接分化为成骨细胞并成骨。 不同的 FGFRs 在软骨形成和骨形成过程中的作用不一致。总的讲,目前认为 FGFR1、2 主要调节膜内成骨过程,而 FGFR3 则主要参与调控软骨内成骨。已发现人 类 FGFR1(P252R)功能增强点突变和多种 FGFR2 功能增强点突变可影响颅缝膜内成骨 过程,导致颅缝提前闭合,引起囟门早闭综合征;而 FGFR3 功能增强点突变通过抑制 生长板软骨发育,导致软骨发育不全等软骨发育障碍性疾病。 FGFR3 和 FGFR1、2 高度同源,也受可调节骨形成的内源性配体 FGF2、18 等激 活,提示 FGFR3 可能参与调控骨形成过程。而人类 FGFR3 A391E 功能增强型点突变 可引起 Crouzon 等囟门早闭征,则是 FGFR3 影响骨形成的直接证据。模拟人 ACH 的 FGFR3 突变小鼠出生后 15 天长骨骨小梁处成骨细胞分化标志基因 Cbfa1 等表达水平 增高,成年期骨量减少;FGFR3 敲除小鼠骨量减少,骨小梁矿化障碍。这些结果均提 示 FGFR3 可影响成骨细胞功能和骨形成过程。 目前已有多名学者报道利用条件性基因敲除小鼠研究 FGFR1、2 对成骨细胞的直 接调控作用,但关于 FGFR3 对成骨细胞及骨形成的直接调控作用及机制还不完全清
*
本课题受国家重点基础研究发展规划 (973 计划)项目子课题 (2005CB522604)、 国家自然科学基金杰出青年基金
(30425023)、国家自然科学基金重点项目(30530410)、国家自然科学基金青年科学基金项目(30301527)资助。 8

易孚(重组人表皮生长因子凝胶)

易孚(重组人表皮生长因子凝胶) 【药品名称】 商品名称:易孚 通用名称:重组人表皮生长因子凝胶 英文名称:Recombinant Human Epidermal Growth Factor Gel 【成份】 重组人表皮生长因子。 【适应症】 本品适用于皮肤烧烫伤创面(浅Π度至深Ⅱ度烧烫伤创面)、残余创面、供皮区创面及慢性溃疡创面的治疗。 【用法用量】 常规清创后,用生理氯化钠溶液清洗创面,取本品适量,均匀涂于患处。需要包扎者,同时将本品均匀涂于适当大小的内层消毒纱布,覆盖于创面,常规包扎,一日一次或遵医嘱。推荐剂量为每lOOcm2创面使用本品10g(以凝胶重量计)。 【不良反应】 未见严重不良反应。 【禁忌】 对本品过敏者 【注意事项】 本品为无菌包装,用后请即旋紧管口,以防污染。本品无抗菌作用,但不会增加创面感染机会。对感染创面,在进行创面清创的前提下,可考虑联合使用抗菌药物控制感染。对于各种慢性创面,如溃疡、褥疮等,在应用本品前,应先行彻底清创去除坏死组织,有利于本品与

创面肉牙组织的充分接触,提高疗效。当本品的外观、性状发生改变,如出现霉变、变质等现象时,应禁止使用。 【特殊人群用药】 儿童注意事项: 无禁忌。 妊娠与哺乳期注意事项: 尚不明确。 老人注意事项: 无禁忌。 【药物相互作用】 本品遇酒精、碘酒等,可能会使EGF变性,而使活性降低。因此使用酒精、碘酒等消毒后,应再用生理氯化钠溶液清洗创面,然后使用本品。 【药理作用】 1.药理作用:本品为外用重组人表皮生长因子(rhEGF)。可促进动物皮肤创面组织修复过程中的DNA、RNA和羟脯氨酸的合成,加速创面肉芽组织的生成和上皮细胞的增殖,从而缩短创面的愈合时间。 2.毒理研究:(1)重复给药毒性:家兔背部破损皮肤涂抹本品(6g凝胶/次,每日1次,浓度200μg/g,相当于临床用药浓度的20倍),连续36天,给药局部皮肤及各脏器均未见明显毒性反应。本品较长时间局部应用对愈合后创面的远期影响不清楚。 (2)遗传毒性和生殖毒性:尚无动物研究资料。(3)致癌性:研究文献提示,EGF有促进某些肿瘤细胞生长的作用,但也有一些动物和体外研究文献提示,EGF作为一种具有多种功能的细胞因子,可以抑制某些肿瘤细胞的生长。对于烧伤患者(尤其是较大面积烧伤时)局部较长时间使用本品的影响尚不清楚。临床药代动力学研究结果提示患者烧伤面积达5~10%时,

细胞生长因子

细胞生长因子(growth factor):是由造血系统、免疫系统或炎症反应中的活化细胞产生,能调节细胞分化增殖和诱导细胞发挥功能,是高活性多功能的多肽、蛋白质或糖蛋白。 (一)细胞生长因子的种类 细胞生长因子有多种,如表皮生长因子(EGF)、血小板来源生长因子(PDGF)、转化生长因子(TGFα和TGFβ)、成纤维细胞生长因子(aFGF、bFGF)、类胰岛素生长因子(IGF)、神经生长因子(NGF)、血小板来源生长因子(PDGF)、促红细胞生长素(EPO)、集落刺激因子(CSF)等。常见类型如表1所示

①在表皮水平上; 影响角化细胞的活性和生长因素,刺激角化细胞迁移和上皮化,刺激表皮细胞分化和矫正,强烈促进表皮修复和愈合,如EGF、KGF。 ②在真皮水平上; 刺激成纤维细胞活性,增强细胞外基质收缩和构造,提供皮肤 养分,促进皮肤伤口愈合和功能再生,如BFGF、AFGF。 ③在皮肤整体水平; 增强对环境侵袭、紫外线、污染物、刺激物、敏化剂、炎性细胞的抵抗力,巩固、增强皮肤张力,增强皮肤弹性,刺激瘢痕组织褪色,减少瘢痕形成,延缓皮肤衰老。 (二)细胞生长因子分泌特点 在分泌特点上,细胞生长因子主要属于自分泌(autocrine)和旁分泌(paracrine)。各类生长因子都有其相应的受体,是普遍存在于细胞膜上的跨膜蛋白,不少受体具有激酶活性,特别是酪氨酸激酶活性(如PDGF受体、 EGF受体等)

(三)不同细胞生长因子在美容方面的应用 1、表皮生长因子(epidermalgrowth factor,EGF)

(1)概念:EGF是一种由53个氨基酸构成的活性多肽,它的主要生理活性是诱导细胞(尤其是表皮基底层细胞) 增殖、分裂分化,促进其生长。EGF 通过与细胞膜上受体的结合,激活受体,加速皮肤新生细胞替代衰老细胞的进程,使皮肤细胞年轻化。 (2)作用位点:表皮层 (3)EGF在美容方面的功能: a、护肤、修复 EGF 在体内能促进机体表皮细胞、上皮细胞、成纤维细胞的生长、分裂和新陈代谢,促进微血管的生长,改善细胞生长的

大鼠表皮生长因子(EGF)说明书

大鼠表皮生长因子(EGF)酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中表皮生长因子(EGF)的含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠表皮生长因子(EGF)水平。用纯化的大鼠表皮生长因子(EGF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入表皮生长因子(EGF)再与HRP标记抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的表皮生长因子(EGF)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠表皮生长因子(EGF)浓度。 试剂盒组成: 试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份 封板膜2片(48)2片(96) 密封袋1个1个 酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:5400ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存 样本处理及要求: 1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上 清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心 20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。 3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程 中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/ 分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分

重组人表皮生长因子生物学活性测定法

重组人表皮生长因子生物学活性测定法 (细胞增殖法/MTT比色法) 本法系依据重组人表皮生长因子对小鼠胚胎成纤维细胞(Balb/c3T3细胞)的生长具有刺激作用,Balb/c3T3细胞的生长状况因重组人表皮生长因子生物学活性的不同而异,以此检测重组人表皮生长因子的生物学活性。 试剂: (1)RPMI 1640培养液: RPMI 1640培养基粉末1袋(规格为1L),加水溶解并稀释到1000ml,加青霉素105U/ml(1ml),链霉素105mg/ml(1ml),再加碳酸氢钠2.1g,溶解后,混匀,除菌过滤,4℃保存。 (2)维持培养液: 量取新生牛血清4ml,加RPMI 1640培养液到1000ml。 (3)完全培养液: 量取新生牛血清100ml,加RPMI 1640培养液到1000ml。 (4)PBS: 量取氯化钠8g、氯化钾0.2g、磷酸氢二钠1.44g、磷酸二氢钾0.24g,加水溶解并稀释到1000ml的溶液,经121℃,15分钟灭菌。

(5)噻唑蓝(MTT)溶液: 取MTT粉末0.10g,加PBS20ml使溶解,经0.22um滤膜过滤除菌。4℃避光保存。 标准品沉沦的制备: 取理组人表皮生长因子标准品按说明书复溶后,用维持培养液稀释至每1ml 含50 IU。在96孔细胞培养板中,做4倍系列稀释,共8个稀释度,每个浓度做2个孔。以上操作在无菌条件下进行。 供试品溶液的制备: 将供试品按标示量复溶后,用维持培养液稀释成每1ml约含50 IU。在96孔板中,做4倍系列稀释,共8个稀释度,每个浓度做2个孔。以上操作在无菌条件下进行。 测定方法: Balb/c3T3细胞株用完全培养液于37℃、5%二氧化碳培养,控制细胞浓度为每1ml含1.0 X 105 --5.0 X 106个细胞,传代后24—36小时用于生物学活性测定。弃去培养瓶中的培养液,消化和收集细胞用完全培养液配成每1ml含5.0 X 104 --8.0 X 104个细胞的细胞悬液,接种于96孔板中,每孔100ul,于37℃、5%二氧化碳条件下培养。24小时后换成维持培养液。置37℃、5%二氧化碳培

人表皮生长因子(EGF)Elisa试剂盒使用说明书

人表皮生长因子(EGF)Elisa试剂盒使用说明书 供应商:上海乔羽生物有限公司 人表皮生长因子(EGF)Elisa试剂盒使用说明书 Elisa Kit规格:48孔配置/96孔配置 标准品稀释液:1.5ml×1瓶 酶标试剂:3 ml×1瓶(48)/6 ml×1瓶(96) 【人表皮生长因子(EGF) elisa试剂盒】本试剂仅供研究使用 计算: 以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 试剂盒组成: 封板膜:2片(48)/2片(96) 说明书:1份 密封袋:1个 标准品:2700ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶2-8℃保存 酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存 样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存 显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存 显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存 终止液: 3ml×1瓶 6ml×1瓶2-8℃保存 浓缩洗涤液:(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人表皮生长因子(EGF) 水平。用纯化的人表皮生长因子(EGF) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入表皮生长因子(EGF) ,再与HRP标记的表皮生长因子(EGF) 抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的表皮生长因子(EGF) 呈正相关。用酶标仪

EGF表皮生长因子

EGF表皮生长因子 EGF表皮生长因子是天津迦妮生物科技开发有限公司生产的化妆品中主要所含成分,主要针对女性皮肤,有着美白、保湿、祛斑、尤其针对妊娠斑、妊娠纹以及身体受外界影响产生的伤疤效果显著,那么,什么是EGF,为什么EGF在这方面有着自己独特的优势呢?今天迦妮就和你一起系统的去了解其中的奥秘,了解一下为什么我们会钟爱EGF。 表皮生长因子是一种小肽,由53个氨基酸残基组成,是类EGF大家族的一个成员,是一种多功能的生长因子,在体内体外都对多种组织细胞有强烈的促分裂作用。EGF同应答细胞表面的特异受体结合,根据《斯。诺美-走在生物医学美容最前沿》A10文献记载,一旦结合,便促进受体二聚化并使细胞质位点磷酸化。被激活的受体至少可与5种具有不同信号序列的蛋白结合,进行信号转导,在翻译水平上对蛋白质的合成起调节作用。此外EGF 可提高细胞内DNA拓扑异构酶活性,也可促进一些与增殖有关的基因表达,如myc 、fos 等。 中文学名表皮生长因子 拉丁学名Epidermal augmentum factor 别称epidermal growth factor 简称EGF 性质一种小肽 作用多功能的生长因子 发现时间1974年 1974年从人尿中提纯出人的表皮生长因子(hEGF),其结构由53个氨基酸组成,分子量6201道尔顿,分子内有6个半胱氨酸组成的二硫键,形成3个分子内环型结构,组成生物活性所必须的受体结合区域。EGF无糖基部位,非常稳定,耐热耐酸,广泛存在于体液和多种腺体中,主要由颌下腺、十二指肠合成,在人体的绝大多数体液中均已发现,在乳汁、尿液、精液中的含量特异性地增高,但在血清中的浓度较低。众多的实验研究表明,EGF 可刺激多种细胞的增殖,主要是表皮细胞、内皮细胞。用于角膜损伤、烧烫伤及手术等创面的修复和愈合取得了很好的疗效,Montalcini 和Cohen教授因为发现表皮生长因子并分析其结构和作用机理,1986年诺贝尔生理学及医学获奖。 2来源与机理 编辑 表皮生长因子: 一种可刺激表皮和其他多种细胞分裂的蛋白质。

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