蓝莓贮藏保鲜技术研究进展

蓝莓组织培养

蓝莓组织培养方案 1、植物介绍： 1）供试材料来源： 选取长势旺盛的幼嫩枝条，去除多余的叶片，切取除顶芽外的第3节~第10节作为外植体。提供的材料希望老师可以从组培室提供。 2）技术路线： 外植体处理→接种→增殖培养→生根培养→移栽 2方法步骤： 1）外植体的剪取与消毒程序的筛选： 切取除顶芽外的第3节~第10节作为外植体段去叶片留叶柄→流水冲洗30min→75%酒精浸泡30s→0.1%升汞溶液消毒 3~7min→无菌水冲洗4~5次→用滤纸吸去水分→将茎段切成带有1~2个腋芽的小段 2)初代培养基的筛选： 选用MS为最基本的培养基，根据需要的不同，添加激素6-BA、

NAA、ZT。 3)增殖培养基的筛选： 以MS为基本培养基，按激素6-BA、NAA、ZT含量的不同， 诱导增殖培养基设4系列处理（培养基1~4号），生根培养 基设2系列处理（培养基5~6号），培养基配方表如下： 表中培养基蔗糖含量：分化和继代培养基为30g/L，pH值5.6~5.8， 在115MPa气压下灭菌20min。 4)生根培养基的筛选 不同的培养基进行生根的优势也不一样，根据大量的材料表明1/4 MS中的小苗生根均明显优于全量的MS培养基，所以用激素以IBA 0.5mg/L效果最好，生根情况好且所需天数也最短。最适培养基应

该为1/4 MS+IBA 0.5mg/L 5)试管苗移栽试验： 当苗根长到1~1.5cm时，打开瓶盖，取出小苗，洗净培养基。用多灵菌500~800倍浸泡30min左右，然后栽入0.1%高锰酸钾消毒过的苗床上。苗床基质分5个处理，分别为沙：草炭土=1:1、沙：蛭石=1：1、纯沙、纯蛭石、腐苔藓。（根据资料查找以腐苔藓为基质最好，成活率达80%以上，草炭土和沙半量也可达50%的成活率。）

蓝莓盆栽种植技术

蓝莓种植技术 蓝莓为多年生落叶或常绿灌木，果实呈蓝色，近圆形，单果重0.5～2.5克，种子极小。果肉细腻，甜酸适度，有香气。可鲜食，亦可加工成果酱、果汁、果酒等。蓝莓栽培最早始于美国，我国原始蓝莓品种几乎都是野生的，不适合栽培。20多年前我国开始引进国外优良品种，至今已引进20多个品种，但尚未形成大规模的生产能力。为推进我国蓝莓生产的发展，现将其栽培技术介绍如下： 一、建园 1.园地选择：蓝莓栽培范围较广，可根据当地气候选择适宜品种，但干旱少雪、易受霜冻的北方地区不宜发展。选择的园地坡度要小，不宜超过10度；土壤pH值4.0～5.5，最适范围4.3～4.8；土壤有机质含量不低于5%；土壤疏松，通气良好，湿润但不积水。 2.园地准备：园地选好后，在定植前一年结合压绿肥深翻，深度以20～25厘米为宜，深翻熟化后整地。在定植前还要对不完全符合要求的土壤进行改良，以利蓝莓生长。 3.定植：蓝莓春、秋栽植均可，以秋栽成活率高，春栽则宜早不宜晚。株行距，兔眼蓝莓常用2米×2米或1.5米×3米，高丛蓝莓用1.2米×2米，矮丛蓝莓用0.5～1米×1米。兔眼蓝莓白花不实，最好配置高丛蓝莓作授粉品种。高丛和矮丛蓝莓白花结果率较高，但配置授粉树可提高果实品质和产量。主栽品种与授粉品种的配置比例为1∶1或1∶2。 二、土肥水管理 1.土壤管理：蓝莓根系分布较浅，而且纤细，没有根毛，因此要求土壤疏松，通气良好。 ①清耕法。从早春至8月份都可进行清耕，入秋后清耕对其越冬不利。高丛蓝莓在沙壤土上栽培常用清耕法。清耕深度以5～10厘米为宜，过深易伤害根系。 ②生草法。采用行间生草，而行内用除草剂。生草法与清耕法相比，同样有利于提高产量，并且具有保持土壤湿度、便于机械作业的优点。 ③土壤覆盖。土壤覆盖在蓝莓生产上应用广泛，它有增加土壤有机质、改善土壤结构、调节和保持土壤湿度、降低土壤pH值、控制杂草等多种作用。给矮丛蓝莓土壤覆盖5～10厘米锯末，在3年内产量可提高30%，单果重增加50%。树叶、稻草及其他作物秸秆也可应用，但效果不如锯末。 ④除草。在蓝莓园管理中，除草是非常重要的一环，做好了可使产量提高1倍以上。在蓝莓生产中，广泛应用化学除草剂。这是因为人工除草费用高，又易伤害根系，特别是矮丛蓝莓栽培，由于根状茎串生行走，几年后整个果园连成一片，根本无法人工除草。蓝莓园常用的除草剂有敌草隆、西玛津、氯苯氨灵、2，6二氯苯、草甘膦、百草枯等。

蓝莓种植与深加工项目可行性研究报告调查报告表格

蓝莓种植与深加工项目可行性研究报告调查报 告表格 TPMK standardization office【 TPMK5AB- TPMK08- TPMK2C- TPMK18】

蓝莓种植与深加工项目可行性研究报告 （立项+批地+贷款） 编制单位：北京中投信德国际信息咨询有限公司 编制时间：二〇二〇年十一月 咨询师：高建

目录 目录 (2) 专家答疑： (4) 一、可研报告定义： (4) 二、可行性研究报告的用途 (4) 1. 用于向投资主管部门备案、行政审批的可行性研究报告 (5) 2. 用于向金融机构贷款的可行性研究报告 (5) 3. 用于企业融资、对外招商合作的可行性研究报告 (5) 4. 用于申请进口设备免税的可行性研究报告 (6) 5. 用于境外投资项目核准的可行性研究报告 (6) 6. 用于环境评价、审批工业用地的可行性研究报告 (6) 三、可行性研究报告的编制依据 (6) 四、可研报告编制收费标准及时间 (7) 1、收费标准 (7) 2、付款方式 (8) 五、我们的优势 (8)

1、良好的信誉保障 (8) 2、专业的咨询团队 (8) 3、丰富案例经验 (9) 4、精准的数据库支持 (9) 六、可研报告编制大纲： (10) 表目录 (28) 表目录 (29) 表1-1 本报告研究范围 (29) 表1-2 报告误差控制表 (29) 表1-3 本报告编制依据 (29) 表1-4 蓝莓种植与深加工新建项目产品型号及产能一览表 (29) 表1-5 蓝莓种植与深加工新建项目项目概况 (29) 表1-6 蓝莓种植与深加工新建项目项目资金来源与使用计划.29 表1-7 蓝莓种植与深加工新建项目综合经济技术指标 (29) 表2-1 蓝莓种植与深加工新建项目主要产品型号及计划产能.29 表2-3 蓝莓种植与深加工新建项目主要产品和规格 (29)

蓝莓组培关键技术汇总

蓝莓组培关键技术汇总 一、愈伤组织的培养 （一）几个概念 1.外植体（explant）：从植物体上分离下来的用于离体培养的材料。 2.分化（differentiation）：细胞在分裂过程中发生结构和功能上的改变，从而在个发育中形成各类组织和器官完成整个生活周期。 3.脱分化（dedifferentiation）:已分化好的细胞在人工诱导条件下，恢复分生能力，回复到分化组织状态的过程。 4.再分化（redifferentiation）:脱分化后具有分生能力的细胞再经过与原来相同的分化过程，重新形成各类组织和器官的过程。 5.愈伤组织（callus）:在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞，多在外植体切面上产生。 6.胚状体（embroid）:-对应于胚（embryo），在离体培养过程中产生一种形似胚（具有明显的根端和芽端），功能与胚相同的结构。胚状体原始细胞特征：原生质浓厚，细胞核较大，处于细胞质中央。 7.人工种子(artificial seed):指将植物离体培养产生的体细胞胚包埋在含有营养成分和保护功能的物质中,在适宜条件下发芽出苗的颗粒体。 （二）愈伤组织类型及特征 1.结构致密型：表面光滑有光泽，结构致密，多为淡黄色或白色，易于再生芽 2.结构松散型：多为白色，可以用于悬浮系建立。 3.胚性愈伤组织：具有产生胚状体能力。 （三）愈伤组织的形成：大致经过起绐期、分裂期和形成期，但三个时期没严格界限。 1.起始期指细胞准备进行分裂的时期，当外植体已分化的活细胞在外源植物生长物质的作用下，通过脱分化起动而进入分裂和形成愈伤组织。 2.分裂期表现为外层细胞出现分裂，细胞分裂进入最旺盛时期，细胞体积最小，细胞核和核仁较大，RNA含量最高。 3.形成层的特征是细胞大小趋于稳定,细胞分裂从分裂期的周缘细胞分裂为主转向了内部组织。 （四）愈伤组织中的形态发生：愈伤组织通过再分化形成再生植株的方式主要有： 1.先产生芽后,在茎的基部长根。 2.先长根,再长芽。 3.愈伤组织的不同部位分别形成根和芽。 （五）胚状体特点 1. 有分化明显的生物两端，根端和芽端。 2.单细胞起源。 3.发育程序同合子胚相似，也经过球形胚、心形胚、鱼雷胚、子叶胚。 4.和周围细胞之间有隔离。 5. 和培养物质没有维管束联系，所以容易从培养物质上剥离。 6.可以在不附加任何激素的培养基上萌发。 （六）胚状体发生途径 1. 直接胚状体发生。 2.间接胚状体发生（愈伤组织分化出胚状体）。 3.从悬浮培养的细胞中诱导。 4.由花粉产生的单倍体胚状体。 5.由原生质体产生胚状体。

野木瓜及其同属植物的研究进展

综述： 野木瓜属植物的研究进展 摘要：本文综述了木通科野木瓜属植物的研究进展。概述了野木瓜植物的化学成分、药理性质及质量控制的研究。为野木瓜属植物的进一步药用开发和药源扩展提供参考。 关键词：野木瓜属植物；化学成分；药理性质；质量控制 一．野木瓜本草及基源 “野木瓜”名称始见于明·朱棣的《救荒本草》[1]，云：“野木瓜，一名八月，又名杵瓜。出新郑县山野中。蔓延而生，妥附草木上。叶似黑豆叶，微小光泽，四五叶搌生一处，结瓜如肥皂大，味甜。古代本草中记载野木瓜属植物的只有清·吴淇俊的《植物名实图考》[1]，曰：“五爪金龙产南安，横根抽茎，茎叶俱绿。就近生小枝，一枝五叶，分布如爪；叶长二寸许，本宽四五分，至末渐肥。复出长尖，细纹无齿，根褐色，硬如萆。”。。。。 1. 野木瓜种属的归类及分布 1.1野木瓜种属的归类 野木瓜[1]Stauntonia系木通科( Lardizabalacea) 9个属的其中一属,该属植物通常为常绿木质藤本，大部分全株及果实皆可入药。其性微苦，平。具镇痛、治咳嗽和痢疾之功，主治风湿痹痛，腰腿疼痛，头痛，牙痛，痛经，跌打伤痛，肠胃炎等症。多数种类为药食两用植物，浆果多汁味甜, 可生食、制果酱和酿酒, 种子榨油, 供食用和工业用。 该属约20余种植物, 我国有23种（2个亚种），本属植物分两个亚属，即有蜜腺状花瓣存在的野木瓜亚属和无蜜腺状花瓣的无瓣亚属。野木瓜亚属有：Stauntonia chinensis DC.、翅野木瓜Staun tonia decora（Dunn）C. Y. Wu.、三叶野木瓜Stauntonia brunoniana Wall. ex Hemsl.、斑叶野木瓜Stauntonia maculata Merr.牛藤果Stauntonia elliptica Hemsl. 野木瓜无瓣亚属按其花药顶端附属体的形状又

蓝莓组培快繁技术实例 · 附配方

蓝莓（Vaccinium corymbosum）属杜鹃花科，越橘属植物。起源于北美，多年生灌木小浆果果树。因果实呈蓝色，故称为蓝莓国际粮农组织将其列为人类五大健康食品之一。 本试验以蓝莓半木质化茎段为外植体，并通过瓶外生根技术，建立起植株再生体系。 1 材料与方法 1.1 外植体材料及培养条件 1.1.1 外植体选择 高灌蓝莓半木质化茎段。 1.1.2 外植体预处理及灭菌 剪取蓝莓半木质化枝条，立即去掉上部叶片带回室内，剪成带有一个叶芽2-3厘米长茎段，在流动自来水中冲洗20-30分钟，在超净工作台上用75%酒精消毒2-3分钟，用无菌水冲洗3次，吸干水后在0.1%升汞中消毒5-8分钟，用无菌水冲洗3次，吸干水分，剪去茎段两端约 0.5-1厘米，立即接种到初代培养基中。 1.1.3 培养条件 诱导培养基：改良WPM + ZT 1.0mg/L 增殖培养基：改良WPM + IAA 0.1mg/L + ZT 2.0mg/L 复壮培养基：改良WPM + IBA 0.1mg/L WPM具体改良为：以硝酸钙 684mg/L、硝酸钾 190mg/L、EDTA铁钠 73.4mg/L和盐酸硫胺素0.1mg/L代替原WPM培养基中的硫酸钾、氯化钙、硫酸亚铁和乙二胺四乙酸钠。 以上培养基均加蔗糖3%，琼脂0.7%，pH值5.2。 培养温度为25℃，光照强度为2000lx，光照时长为12-16时/天。

2 结果与分析 2.1 初代诱导培养 将处理好的外植体立即接种到诱导培养基中，5-6天叶芽开始萌动，10天开始展叶，20天腋芽长到1厘米长，30天腋芽长到1.5-2.5厘米长。 2.2 继代增殖培养 将初代培养长出的茎剪成1.5-2厘米长茎段转接到增殖培养基中。30-35天增殖5-7倍，增殖苗生长健壮。 2.3 复壮培养 将继代苗剪成1-1.5厘米茎段，转接到壮苗培养基，复壮培养30-40天，复壮苗高5-6厘米且粗壮。 2.4 瓶外生根培养

我国蓝莓_越桔_栽培研究现状及发展措施

文章编号:1002-1728(2003)03-0021-03 我国蓝莓(越桔)栽培研究现状及发展措施 Ξ 修英涛,常凤英,姜　河,杨伟力,候利军 (沈阳农业科技开发院,辽宁沈阳　110161) 中图分类号:Q949.772.3文献标识码:B 蓝莓(Blueberry )又名越桔,属于杜鹃花科越桔属(V accinium )植物,灌木小浆果果树,广泛分布于北半球,从北极到热带高山地区均有分布。其果可生食,亦可加工果汁、果酒、果酱等,从其加工果汁的果渣中,可以提取越桔红,是优良的天然食品红色素。蓝梅具有较高经济 价值和广阔开发前景[1、29] 。蓝莓果实含有防止脑神经衰老、增强心脏功能、明目及抗癌等独特功效物质,因此被国际粮农组织列为人类五大健康食品之一[17]。近年来,美国、加拿大、日本、智利和欧洲的很多国家都把蓝莓视为保健与功能食品,倍受人们青睐,国际市场售价昂贵,供不应求[2]。蓝莓的栽培驯化工作1900年始于美国,到目前为止,已选育出适合各地气候条件的优良品种100余个,总栽培面积近20000hm 2,年产量达20万t ,形成了缅因州、佛罗里达州、新泽西州、明尼苏达州等十余个主要产区。继美国之后,荷兰、加拿大、德国、波兰、澳大利亚、新西兰、日本等国竞相引种栽培,根据自己国家的气候特点和资源优势开展了具有本国特色的蓝莓研究和栽培工作,并相继进入商业性栽培[3]。尽管中国也有越桔属植物分布,但对其研究很少。随着人们生活水平的提高,蓝莓、树莓、沙棘、酸枣等以风味独特,营养保健作用日益受到人们的关注,被列入世界第三代水果的行 列[10、11]。自20世纪80年代后,我国科学工作者对我国 野生蓝莓资源的现状及开发利用状况进行了调查,分析了蓝莓的营养成分,并对野生蓝莓进行了初步的加工利 用研究[4、5、6、7、8、9、12、29]。我国蓝莓栽培起步较晚,自1983 年后,有关单位先后从国外引进100个左右蓝莓品种,并进行一些栽培研究工作,筛选出了一些适合我国南方、北方气候条件栽培的品种,并进行了有关育苗、栽培环境与栽培管理方面的研究。 1　栽培品种与育苗技术 111　栽培品种 我国东北山区有着丰富的越桔属资源,其中以笃斯越桔(V .ulginosum )和红豆越桔(V .vitis 2idaea )面积校大、储量较多,集中分布于大小兴安岭、长白山。大兴安岭产量可占全国的90%,丰年产量可达数十万吨[5]。大兴安岭素以高寒著称,被认为是水果栽培的禁地,而野生越桔却生长繁茂。因此要加强对这一地区野生越桔资源保护和开发利用,同时要引进推广适于这一高寒环境的 优质高产栽培品种进行商业化栽培。我国有许多适于蓝 莓栽培的生态区,仅长白山就有近百万亩的强酸沼泽地,稍加改造即可进行商业化栽培。但大面积开发,需要与各地环境相适应的优良品种和大量优质苗木[13]。野生蓝莓品种果实小,产量低,口味差,难以适应商业化栽培需要,因此,自20世纪80年代初以来,吉林农业大学、南京植物研究所、山东省果树研究所等单位先后从美国、加拿大、波兰、芬兰、德国等国家引进蓝莓品种100个左右,并进行了栽培筛选与育苗研究。根据树体特征、果实特点及区域分布分为四类。 矮丛蓝莓:树体矮小,一般高30～50cm ,抗旱能力较强,且有极强抗寒能力,极适宜于东北高寒山区大面积商业化栽培,果实较小,适于做加工原料。代表品种有美登(Biomidom )、斯卫克(Brunswick )、坤蓝(Cumber 2 land )[14、16、27] 。 半高丛蓝莓:一般树高50～100cm ,果实比矮丛蓝莓大,比高丛蓝莓小,抗寒力强,一般可抗-35℃低温,适于北方寒冷地区栽培。代表品种有北陆(Northland )、北村(Northcountry )、北蓝(Northblue )、圣云(St.cloud )[14,16]。 高丛蓝莓:株高2～3m ,果实较大,品质佳,鲜食口感好,可以作鲜果市场销售主栽品种。分为南高丛蓝莓和北高丛蓝莓两类。南高丛蓝莓喜湿润、温暖气候条件,适于我国黄河以南地区发展;北高丛蓝莓喜冷凉气候,抗寒力较强,有些品种可抵抗-30℃低温,适于我国北方沿海湿润地区及寒地发展。代表品种有艾文蓝(Avonblue )、蓝丰(Bluecrop )、爱国者(Patroit )、泽西(Jersey )、艾朗 (Aron )[17、21、27] 。 兔眼蓝莓:一般株高达7m 以上,生产上控制在3m 以下,寿命长、抗湿热,对土壤条件要求不严,且抗旱。适于我国长江以南地区的丘陵地带栽培。代表品种有巨丰(Dellite )、杰兔(Premier )、粉蓝(Powerblue )[27]。112　育苗技术 蓝莓苗木繁殖方法主要有3种,即硬枝扦插、绿枝扦插和组织培养方法。 硬枝扦插:主要适合于高丛蓝莓和矮丛蓝莓。一般于每年春季(3～4月)剪取1年生的营养枝,扦插条长度以15cm 为宜。上部切口为平切,下部切口为斜切,正好位于芽下,扦插基质为腐苔藓或草碳与河沙(1∶1)的混合基质,枝条插入基质时只留一个顶芽,扦插苗床应支离地 Ξ收稿日期:2002-05-08 辽宁农业科学　2003(3):21～23Liaoning Agricultural Sciences

蓝莓种植项目计划书

四川螺湖半岛生态农庄有限公司 蓝莓种植项目计划书 一、项目背景 1、政策和机遇 休闲农业被认为是全球性的"朝阳产业"，具有强大的生机和广阔的前景。休闲农业是以农业生产为依托，和现代旅游业相结合的一种高效农业，是深度开发农业资源潜力，调整农业结构，改善农业环境，增加农民收入的新途径。 今年是一号文件连续第11年关注“三农”问题，在十八大报告中首次将“生态文明建设”独立成篇，农业是和自然结合得最为紧密的产业，对于生态文明影响深远，必然成为国家生态文明建设的重要部分。一号文件要求实现高产高效和资源生态永续利用协调兼顾，加强政府支持保护和发挥市场配置资源决定性作用功能互补。这为现代农业和休闲农业的发展提供了难得的发展机遇。 2、公司简介 四川螺湖半岛生态农庄有限公司成立于2014年2月，注册资本2000万元。公司选址生态良好、环境优美的螺湖

半岛，有效整合自然、农业、文化资源，以生态环境保护为根基，以现代化农庄为方向，实现园区、景区、社区“三区合一”，生产、生态、生活“三生融合”，将项目区建成集农业生产、科普体验、休闲观光、养生度假为一体的国际化农庄。蓝莓种植项目将作为螺湖半岛生态农庄建设的水果种植采摘子项目之一，为农庄建设争光添彩。 3、蓝莓简介 蓝莓(Blueberry)属杜鹃花科越桔属(Vaccinium) 浆果类灌木，其果实内所特有的蓝莓花青素等物质具有提高视力、抗 衰老和防癌等功效，被誉为“21 世纪功能性保健浆果”和“水 果中的皇后”，并被国际粮农组 织列为人类五大健康食品之一， 近年来风靡欧美及日本。 蓝莓果实不仅营养价值高，含有大量对人类健康有益的物质，包括抗氧化物(VA, Vc, VE),靴酸、叶酸(vb)、抗菌成分 和丰富的食用纤维等，概况起来主要有以下几个方面的保健作用: (1)蓝莓果实的VMA(花色苷色素)对眼睛有良好的保健 作用，能够减轻眼的疲劳及提高夜间视力。(2)具有保护毛 细血管及抗氧化的作用。(3)延缓脑神经衰老，增强记忆力。

植物研究进展论文

研究生课程论文 题目：PCR-DGGE在真菌研究中的应用 学院生命科学学院 课程名称植物学科研究进展 专业年级植物学2014级 学号 20141069 姓名成斌 2015年 1月 20日

PCR-DGGE在真菌研究中的应用 成斌 （河北大学生命科学学院河北保定071002） 摘要：变性梯度凝胶电泳（DGGE）在真菌研究中技术应用的主要步骤：从样品中直接提取真菌DNA，选取5′端含GC夹的特异性引物对18S rDNA或IST序列等的部分片段进行扩增，得到合适的目的DNA片段，并在变性梯度的聚丙烯酰胺凝胶中进行电泳，使不同来源的真菌DNA 片段有效分离，再进行各种分类分析。 关键词:PCR-DGGE；变性梯度凝胶；真菌；引物；DNA 丛枝菌根真菌(Arbuscular mycorrhizal fungi, AMF)在自然界分布广泛,能够与80%以上的陆生植 物形成共生体[ 1 - 2 ]。它能够提高植物抗旱性、抗病性,促进生长,提高产量,改善作物矿质营养,被誉为“生物肥料”[ 3 ]。由于AM真菌至今仍然不能被纯培养,给菌种鉴定、遗传学以及群落生态学研究等带来不少难题[ 4 ]。随着分子生物学技术的不断发展,各种分子技术已被应用到AM真菌研究中。目前,国外已在这一领域进行了大量的探索和研究,而国内在该领域研究则进展缓慢[ 5 ]变性梯度凝胶电泳（Denaturing Gradient Gel Electrophoresis，DGGE）是在含有浓度线性递增变性剂的聚丙烯酰胺凝胶电泳中，将具有不同碱基序列而长度相似的双链DNA分离[8]。变性梯度凝胶电泳技术是由Fischer和Lerman于1979年最先提出的用于检测DNA突变的一种电泳技术[ 7 ]。后来,该技术逐渐被应用于微生物生态学研究,并证实了这种技术在研究自然界微生物群落结构变化、遗传多样性和种群差异方面具有明显的优越性,并且该方法能够较准确地反映出环境样品中优势种 群的动态变化规律[ 8 - 9 ]。目前,在原核生物生态学研究中DGGE技术已发展的较为成熟。然而,将其应用于真核生物生态学研究的报道,并不多见[ 5 ]。 1 样品DNA的提取 从样品中提取DNA 的产率，直接决定了DGGE 条带的代表性[14]。DNA产率低，其条带的代表性就差。真菌分布广泛，种类繁多，为获得较高的DNA 提取产率，DNA 提取方法也需要根据样品的特性具体分析，寻找针对性较强的处理方法。 1.1 土壤样品中真菌DNA 的提取 对于土壤样品DNA的提取，通常会采用改良后的Bead-Beating 法[5]。具体方法是：称取10 g土样，

蓝莓种植技术

蓝莓种植技术

蓝莓栽培技术 1、植苗 一般都在春季种植，秋季种植冬季管理不当容易遭受冻害。春季种植通常在3～4月份，苗木新芽萌动前栽植。一般选用2～3年生的苗木，这样的苗木成活率较高。苗木的高度一般在30cm以上，但因品种而异。判断苗木优劣的指标不仅仅是高度，更取决于根系和枝条的粗壮程度。优质苗木的根系发达，钵苗其根系基本长满钵内，而且地上枝条粗壮发达，有基生枝出现。另外，除主栽品种以外，还要选用1～2个以上品种苗木做授粉树，以提高产量。植苗方法定植时将苗木从钵内取出，观察根系的状况，如果根系已经密集网络于底部，则需要用刀将底部轻轻切开呈十字形，用手把中心部的土壤取出并将根系理顺。如果是裸根苗，则需要将根系展开后栽植。栽植苗木时，需要在事先准备好的定植穴或种植床上挖深度为10～15cm、幅度20～30cm的小坑。在小坑内填入一些湿的酸性草炭土或事先配制好的种植土，然后再将苗栽入并将根系展开，让添进的混合草炭土等包围在苗根周围，并向上轻轻提苗1次，以便使根系充分与种植土壤结合，最后覆土至与地面相平。 2、地表覆盖 定植后，就地就近取材在栽植穴的表面覆上一层稻草、腐叶土、树皮、木屑等有机物。地表覆盖具有可以调节地温、防止地表水分

以上，每m3施用硫磺粉1kg可降低草炭pH值到4.0以下，种植时要均匀拌入穴内。其他有机质指粉碎后的作物秸秆、稻壳、麦壳、树叶、锯屑等，经发酵后可作为种植蓝莓的较好资材。如果现在土壤的pH值在7.0以上，种植蓝莓的难度较大，需加大施用硫磺粉和添加土壤有机质来解决，具体方案需专业人员会诊后另行决定。如果土壤的pH值大于7.5，同时灌溉用水的pH值也大于7.5，这样的地块种植蓝莓容易失败，最好不选用种植蓝莓。 4、土壤酸度调整 种植后第2年，有些地块可能会出现土壤pH值上升的情况，需要定期的检测土壤pH值的变化。如果土壤的pH值上升，需要施用硫磺粉进行调整。硫磺粉可结合春季施肥施入。 5、栽植株数 我国种植蓝莓的行间距离因品种、土地状况和管理方式而异。一般高丛蓝莓的行距在 2.0～2.5m，如果考虑到机械作业可扩大到2.5～3.0m。兔眼蓝莓的株行距较北高丛蓝莓大一些，在2.5～3.0m。即使是植株较小的矮丛蓝莓和一些半高丛、南高丛蓝莓的种植行距也要保持在2.0m的行距，这样便于作业管理。一般在较贫瘠的土壤上种植株距可小一些，在较肥沃的土壤上可大一些。北高丛蓝莓的株距一般在1.0～2.0m，南高丛和半高丛蓝莓的株距在1.0～1.5m，兔眼蓝莓的株距在1.5～2.5m左右。 6、施肥

蓝莓种植经济效益分析

蓝莓种植经济效益分析 一、蓝莓基本概况 蓝莓果具有很高的抗氧化能力，是一般水果和蔬菜的4—8倍，另外，蓝莓营养成分丰富，其果实内天然色素的含量最高，花色素SOD的含量超过其他果品多倍，被誉为人类五大健康食品之一。蓝莓果实中含有的花色素、花红素有助改善大脑记忆和智能，减少人体胆固醇积累，改善心血管机能，防止心脏病、尿路感染、增强胶原质，调节血糖、减少HIV病毒复制等功效。目前，用蓝莓果加工出的饮料和果酒是非常畅销产品，国内外年需求量非常大，国内年需求量40余万吨，而且国外市场潜力巨大，需求量是我国年需求量近100倍，产品始终供不应求。 蓝莓被世界誉为“十大水果”之王，属于杜鹃科、越橘亚科，为多年生落叶灌木，它是一种具有极高经济价值的野生浆果，含有蛋白质、碳水化合物、丰富的食用纤维、抗氧化成分、Vc、Ve和β-胡萝卜素，此外还含有多种水溶性的天然花色素苷类物质，对许多眼部疾病具有非常好的预防和治疗效果，由于它独具的天然营养价值使得蓝莓野果倍受世界业内人士的高度重视，发达国家对蓝莓的开发利用较早，已经成为饮料业的顶级产品，高端市场需求强劲。 二、蓝莓产品价格 蓝莓果实柔嫩多汁,可食率为100%,适宜加工。蓝莓作为高档果品，国际市场需求量大，价格较高。欧美市场收购价为7美元每公斤，

零售价15美元每公斤，蓝莓色素销售价达380美元每公斤，并有供不应求之势。国内市场近几年才被认识和俏销，主要靠美国、日本和澳大利亚进口。深加工产品果酒、果酱和蓝莓色素等十分畅销，市场开发潜力极大。蓝莓销售市场已经形成体系，现在蓝莓批发商担心的是蓝莓种植基地能否持续稳定的供应蓝莓。蓝莓价格不菲，

蓝莓温室大棚栽培技术_陈宏毅

多种经营　Diversity Management PR ACT I CAL FOR ES TRY T EC HN OLOGY 43　 二〇〇九年第五期　林业实用技术 蓝莓温室大棚栽培技术 陈宏毅1 　王贺新 2 (1.天津农学院　天津　300384;2.大连大学) 垛高度。高温季节摆2～3层防烧菌,低温季节可放6～7层,通过袋内料升温加速发菌。在垛好后再用打孔器(4分铁管一端加尖)在每个菌棒中央扎一大孔让其通透至另一 端以达充分透气。发菌前10d 要特 别注意料温,控制在35℃以下。10d 左右翻垛1次,依上述操作成品率可达100%。从接种到菌丝长满袋筒一般在45d 左右,可以说菌丝长势一天一个样,可为高产打下良好基础。出菇时处理好环境和袋内温度、湿度和通风等几个因素,保持充分的氧气供应,一般以棉籽壳为主料的转化率150%～200%,头茬每 棒平均出菇0.75～1kg ,收回成本有盈余。以后几茬菇利润要看市场价格而定。 5　科学采菇和销售 实现高收益要把好质量关,掌握好采收时期,平菇子实体多为鲜 菇上市销售,同一品种差别很大,出菇时可从以下几方面进行调整。5.1　及时采收商品菇一般在七成熟时(当菌盖色变浅,边缘开始向上反卷并充分展开菌盖和菌柄连接处有绒毛 时)应及时采收,每堆菇最好在500g 左右,采摘后立即上市。5.2　计划好采摘时间 要估计采摘量和中途运输时 间,摘后的鲜菇最好在2～3h 到达批发市场,若清晨3∶00-4∶00批发,则在午夜采摘装盒,比头天采摘的菇新鲜度好价格高。5.3　合理包装 实践中用泡沫箱简便易行,每箱采菇定量,每堆菇最好在500g 左右,方便消费者。5.4　销售灵活 销售时批发和零售相结合,随时掌握准确价格,不能完全依赖于商贩。5.5　信息反馈 在销售中随时反馈销售情况。在均衡采摘基础上,依市场行情决定是催菇或降温限制生长。★ [摘要]　蓝莓温室大棚促成栽培技术的 关键在于对影响蓝莓种植的诸多因素实现人工控制和调节,从而实现反季节生产 和高产、高效、优质的目标。本文对蓝莓 温室大棚栽培中的温室建造、品种选择、 土壤改良、定植密度以及栽培管理等方面 的关键技术进行了阐述,旨在为我国北方 地区利用温室进行蓝莓反季节促成栽培 提供技术参考。 [关键词]　蓝莓　温室大棚　促成栽培技术蓝莓是全球新兴的保健浆果。自20世纪80年代引种以来,蓝莓种植在我国得到了较快的发展。由于蓝莓种植对气候、土壤、水质等条件要求较高,再加上果实成熟期集中,收获期短,鲜果保存难度大等原因,难以实现一年内蓝莓鲜果的长期供应,蓝莓种植业的发展也受到了一定的制约。为了解决这些问题,2005年起,我们开始了温室大棚栽培试验,并形成了一整套温室栽培促成生产和管理技术。实验表 明:采用温室大棚促成栽培技术,能 提高蓝莓种植的地域适应性,增加 产量,实现反季节生产,提高果实的商品价值,同时实现蓝莓生产的高产、优质和高效的目标。现将蓝莓温室大棚促成栽培的主要技术介绍如下。 1　日光温室大棚的建造 1.1　温室大棚的选址 日光温室大棚应选择地势平坦、光照好、土壤有机质含量高、排灌方便、水土空气无污染的地点建造。在选择种植地块时要了解或测定土壤pH 值和有机质含量。若是山地要尽量选择阳坡中、下部,坡度不宜超过15°,大于15°时要修筑最低8m 宽的梯田。 1.2　温室大棚的规格标准 温室跨度一般在8～10m 左右,墙体厚度为1m ,脊高4m ,后墙高度3m ,在后墙距地面1.5m 高度横向每隔4m 设一个60cm ×60cm 的通风口,温室长度不限;温室后墙土堆和砖砌式均可;温室间应有一定间距,间距不少于温室高度的1.8倍,以不遮光为原则。薄膜可用以聚乙烯为主要原料的PE 无滴水塑料薄膜和以聚氯乙烯为主要原料的PVC 无滴水塑料薄膜两种;棚内较适合蓝莓生长的温度为20～25℃,最高不能超过30℃,最低不能低于12℃。 2　品种的选择 虽然蓝莓温室大棚促成栽培有更大的适应性,但为了节约成本、易于生产管理,品种选择时仍然要依据当地土壤、气候条件、品种特性、DOI :10.13456/j .cn ki .lykt .2009.05.012

蓝莓组织培养与快速繁育技术分析

蓝莓组织培养与快速繁育技术分析 发表时间：2019-06-21T16:40:22.097Z 来源：《工程管理前沿》2019年第06期作者：孙丰 [导读] 采用改进的MW培养基+适量植物激素的组合成功概率最高；生根阶段采用半营养MW培养基+NAA的组合，生根状况最佳。 大兴安岭地区农林科学院 165000 【摘要】本文以栽种于四川的蓝莓无性繁殖品系为外植体来源、对比试验为手法，测试了一系列培养基配方、植物激素种类与用量对蓝莓组织培养的影响，并最终得出结论：在蓝莓的启动与分化培养阶段，采用改进的MW培养基+适量植物激素的组合成功概率最高；生根阶段采用半营养MW培养基+NAA的组合，生根状况最佳。 【关键词】蓝莓；组织培养；对比实验 蓝莓(Blueberry)又名越橘, 属于杜鹃花科乌饭属 (Vaccinum)多年生落叶或常绿果树, 呈灌木状生长。因为果实外表呈深蓝色，故而得名。蓝莓原产于北美，但是实际上在北半球均有分布。我国的蓝莓多生长在华东、华中及东北地区，多为海拔在400至1400米的丘陵或山地地区。其果实为蓝色近圆形浆果，单果重0.5~2.5克，最大可达3.5~5.0克。蓝莓果实具有酸甜适中、香气宜人、果核极小等优点，既可作为水果生食，又可以作为加工果汁、果酒、果干的原料。蓝莓的营养相当丰富，每百克蓝莓鲜果中含有约550毫克蛋白质、500毫克左右脂肪、大约14克碳水化合物；而维生素含量也普遍高于其他水果。蓝莓对气候、土壤的要求很低，适应能力极强，而且病虫害很少，故种植过程中一般无需考虑施用农药。同时，蓝莓果实中含有大量花青素、鞣酸等物质，对于人体细胞抗氧化、减缓衰老有很好的保健作用，故被誉为“水果之王”。本文对蓝莓茎段组织培养技术作了详细的探讨，现展示如下。 1、材料与方法 1.1蓝莓品系 本次实验采用的是日本佐贺县上场营农中心引进的南、北高丛杂交无性后代种苗中，适应四川生长环境最佳的18A、18B、18C三个品系。 1.2无菌材料的制取 将外植体表面用洗衣粉洗净，置于流水下冲洗30min，然后于超净工作台上用70%乙醇进行表面灭菌。1min后采用0.1%氯化亚汞溶液继续浸泡10min，浸泡完毕后用无菌水冲洗5次。冲洗完毕的外植体在解剖镜下去掉芽鳞，再用0.1%氯化亚汞溶液消毒4min，无菌水冲洗5次，最后将枝条切成0.5~1.0cm长的、带腋芽的茎段即可。 1.3实验方法 本次实验采取的培养基是在MS培养基和WPS培养基基础上改良的MW培养基，分别加入不同浓度的BA和NAA制成。本文的目的之一便是从上述不同植物激素配比的培养基中选出最适合蓝莓组织培养的配比。培养基制成之后，调节pH至4.0~5.0，在121摄氏度、131kPa的条件下灭菌20min。植株培养温度（24±2）摄氏度，每日光照16个小时，亮度控制在（1600±200）lx。 2结果与分析 2.1培养基与外植体形式对初始分化的影响 本节分别取MS、WPS、MW三种培养基与休眠芽、嫩芽两种外植体形式进行了六组实验。实验结果证明，使用MW培养基作培养环境、嫩芽为外植体的组合具有最高的生长分化率（~86%），而且采用新抽嫩茎作为外植体的消毒过程十分简便、污染率低，是最佳的培养基与外植体方案。 2.2激素的种类对蓝莓芽组织培养的影响 以改良的MW培养基为基础，加入不同类型、不同浓度的植物激素以及其组合（其中第一组试验是对照组，不额外添加任何植物激素），对蓝莓芽分化情况作对比。具体搭配如下表： B组合中只添加了低浓度的生长素NAA，未添加细胞分裂素，导致只有个别南亚完成了分化，没有形成植株；C组合只添加了细胞分裂素BA，未添加生长素，也只有少量的个体完成了分化，形成的苗数量很少。D组合只添加少量细胞分裂素KT，结果和C组类似。而结合使用了细胞分裂素与生长素的E、F组合，其分化生长的状况明显更好。所以，在培养基中同时加入适量的细胞分裂素和生长素，对植株的生长分化有明显的促进作用。 2.3激素的浓度对蓝莓芽组织培养的影响 本节将蓝莓嫩芽培养瓶分为12个批次，平均分配给2个对照组：甲组6个批次全部添加浓度为0.05的NAA，然后向其中添加不等量的BA，浓度分别为0/0.1/0.3/0.5/0.8/1.0 ；乙组6个批次的处理方式与甲组类似，所有培养瓶中均添加浓度为0.5的BA，然后按照

世界蓝莓生产现状和我国蓝莓发展趋势

世界蓝莓生产现状和我国蓝莓发展趋势 李亚东教授(吉林农业大学浆果研究所) 蓝莓又称越橘，为杜鹃花科越橘属植物，是具有较高经济价值和广阔开发前景的新兴果树树种。果实为蓝色，果实大小因种类不同而异，一般单果重为0.5-2.5g，其果实果肉细腻，种子极小，甜酸适口，有清爽宜人的香气。同时，蓝莓具有较高的保健作用和药用价值，在国内外极受欢迎，并已被国际粮农组织列为人类五大健康食品之一。 蓝莓的种类、品种很多，近几年通过农业科技工作者的努力，现已选育出适合寒带、温带、亚热带等不同气候条件下栽培的种类和优良品种，在很多地区已经推广种植，并取得了很好的经济价值。蓝莓管理技术简便，见果年限短，经济效益大，一般栽后l-2年即可结果，3年进入盛果期，植株寿命长。 一、栽培历史 蓝莓的栽培历史不到一个世纪，最早始于美国。1906年，F.V.coville首先开始了野生选种工作，1937年将选出的15个品种，进行商业性栽培。到上世纪80年代，已选育出适应各地气候条件的优良品种100多个，形成了缅因州、佐治亚州、佛罗里达州、新泽西州、密执安州、明尼苏达州、俄勒冈州主要经济产区，总面积1.9万hm2，产量20万t。目前，蓝莓已成为美国主栽果树树种。到2003年，北美地区栽培面积达到96.9hm2，总产量超过40万t。继美国之后，世界各国竞相引种栽培。各国根据自己的气候特点和资源优势开展了具有本国特色的蓝莓研究和栽培工作。荷兰、加拿大、德国、奥地利、丹麦、意大利、

芬兰、英国、波兰、罗马尼亚、澳大利亚、保加利亚、新西兰和日本等国相继进入商业性栽培。据统计，全球已有30多个国家和地区开始蓝莓产业化栽培，总面积目前达到12万hm2，但仍处于市场供不应求状态。 我国蓝莓栽培起步较晚，但发展速度较快。上世纪80年代初期，吉林省和黑龙江省采集野生资源加工果酒、饮料。吉林省安图县山珍酒厂生产的蓝莓酒曾获农业部银质奖，其产品在市场上很畅销。但由于依靠野果原料供应不稳及果酒市场的衰退，未能形成一个稳定的产业。在采集野生资源基础上，一些林业部门曾作过野生笃斯越橘的家植驯化栽培，但由于产量及产值低，栽培效益差，生产上也难于推广。针对这一问题，吉林农业大学于1983年率先在我国开展了蓝莓引种栽培工作，到1997年，从美国、加拿大、芬兰、德国引入抗寒、丰产的蓝莓优良品种70余个，其中包括高丛蓝莓、半高丛蓝莓、矮丛蓝莓等六大类型。1989年，解决了蓝莓组织培养工厂化育苗技术，扩繁后，在长白山建立了5个蓝莓引种栽培基地。1995年，初步选出适宜长白山区栽培的蓝莓优良品种4个，并开始向生产推广。对一些基本的栽培技术和育苗、土壤管理等也作了研究。1999年，吉林农业大学与日本的环球贸易公司合作，率先在我国开展了蓝莓的产业化生产栽培工作。2000年开始，相继在辽宁、山东、黑龙江、北京、江苏、浙江、四川等地引种试栽。2004年在吉林、辽宁和山东省发展300hm2，总产量300t，产品80%出口日本。到2006年为止，国内种植已经遍布全国各个省市，总面积已近千公顷。 二、经济意义 (一)营养价值及医学价值

蓝莓栽培管理技术

蓝莓栽培管理技术 1、土壤管理技术 蓝莓根系分布较浅，而且纤细，没有根毛，因此要求加强土壤管理以达到适合蓝莓生长所需的理想土壤条件。 土壤管理的核心是通过一系列栽培措施消除限制蓝莓生长的各种障碍因子，主要包括：土壤有机质低（不足5%）、土壤酸度不够（PH大于5）、土壤结构性差（板结或漏水漏肥等）、土壤有效养分不足且不平衡、土壤微生物不丰富等。 通过松土、穴改或槽改、压绿肥、床面覆盖等可提高蓝莓根系土壤有机质，改良土壤结构。当土壤PH值大于5.5时，需施硫磺粉、草炭、松针等调酸，施用量根据土壤PH值高低确定，从而为蓝莓根系发育创造良好的土壤条件。 2、肥料管理技术 2.1蓝莓植物需肥特点： 从整个树体营养水平分析，蓝莓为寡营养植物，与其他果树相比，体内N、P、K、Ca、Mg含量低，由于蓝莓根系分布较浅，而且纤细，没有根毛，所以施肥不当极易引起根系与树体的伤害。蓝莓的另一特点是喜铵态氮果树，对土壤中的铵态氮比硝态氮有较强的吸收能力。蓝莓对氯很敏感，极易引起过量中毒，因此选择肥料种类时不要选用含氯的肥料，如氯化铵、氯化钾等。 2.2蓝莓种植适宜肥料种类： ⑴化肥与有机肥相比，蓝莓更适合营养齐全、微生物丰富、盐分低的有机肥。如：发酵鸡粪、猪粪、牛粪、各种饼肥、骨粉等有机肥。 ⑵蓝莓种植适宜的化学肥料主要有： 硫铵、二铵、硫酸钾、过磷酸钙、重过磷酸钙、各种微量元素肥料等 碳铵（碱性）、硝铵（硝态氮）、氯化铵（含氯）、尿素、氯化钾（含氯）等不适合蓝莓种植。 化肥种类多，蓝莓对不同种类的化肥的反应因土壤类型及肥力高低相差很大。 氮肥：施肥试验表明，随着氮肥施入量增加，产量有下降趋势，果个变小，果实成熟期延迟，而且越冬抽条严重。因此、应因土科学合理施用氮肥。 磷肥：长白山区的非农田土壤往往缺磷，增施磷肥增产效果显著。但当土壤中磷素含量较高时（前茬旱田），增施磷肥不但不能增加蓝莓产量反而延迟果实成熟。 钾肥：钾肥对蓝莓增产显著，而且提早成熟，提高品质，增强抗逆性。但过量无增产作用反而使果实变小，越冬受害严重，并且导致缺镁症发生。在大多数土壤类型上，蓝莓适宜施钾量为硫酸钾40kg/公顷。 2.3施肥量： 蓝莓过量施肥极易造成树体伤害甚至整株死亡。因此，施肥量的确定要慎重，要视土壤肥力及树体营养状况而定。对不同蓝莓产区、不同品种，应根据多年生产试验及研究结果，通过叶片分析技术和土壤分析技术，制定出蓝莓施肥指标体系，科学用于生产，从而避免习惯施肥与盲目施肥。 2.4施肥方式及时期： 高丛蓝莓可采用沟施，深度以10～15cm为宜。矮丛蓝莓成园后连成片，以撒施为主。土壤施肥时期一般是在早春萌芽前进行，可分2次施入，在浆果转熟期再施1次。 2.5蓝莓常见的营养缺素症 缺铁失绿症：是蓝莓常见的一种营养失调症。其主要症状是叶脉间失绿，严重时叶脉也失绿，新梢上部叶片症状较重。引起缺铁失绿的主要原因有土壤pH值过高，石灰性土壤，有机质含量不足等。最有效的方法是施用硫酸亚铁、酸性肥料硫酸铵，若结合土壤改良掺入酸性草炭则效果更好。叶面喷施整合铁0.1%-0.3%，效果较好。 缺镁症：浆果成熟期叶缘和叶脉间失绿，主要出现在生长迅速的新梢老叶上，以后失绿部位变黄，最后呈红色。缺镁症可对土壤施氧化镁或硫酸镁来矫治。 缺硼症：其症状是芽非正常开绽，萌发后几周顶芽枯萎，变暗棕色，最后顶端枯死。引起缺硼症的主要原因是土壤水分不足。充分灌水，叶面喷施0.3%～0.5%硼砂溶液即可矫治。 3、水分管理技术： 3.1蓝莓需水特点：

植物细胞融合的研究进展_综述_郭学民

河北科技师范学院学报　第19卷第1期,2005年3月 Jo ur nal o f Hebei N or mal U niver sity of Science&T echnolog y Co llege V o l.19　No1.1M arch2005 植物细胞融合的研究进展(综述) 郭学民1,2,徐兴友1,2,王同坤1,王华芳2,尹伟伦2 (1河北科技师范学院生命科学系,河北秦皇岛,066600;2北京林业大学生物科学与技术学院)摘要:概述了原生质体分离和培养的影响因素,介绍了近年来国内外原生质体培养与融合及杂种细胞、筛选和鉴定的动态。 关键词:细胞融合;原生质体;筛选与鉴定 中图分类号:Q321+.2 文献标识码:A 文章编号:1672-7983(2005)01-0065-05 细胞融合(cy to mixis),亦称细胞杂交(cell fusio n),是指亲本的两个细胞在特定的物理和化学因子处理下合并为一个杂种细胞的过程[1]。植物细胞融合可分为体细胞杂交(somatic hybridizatio n)和配子-体细胞杂交(gameto-somatic hy br idizatio n),前者是指不经过有性过程,而直接由体细胞原生质体融合产生杂种细胞,形成愈伤组织,并再生出植株的过程[2],后者是指性细胞(如小孢子四分体、精子、精细胞、幼嫩花粉、成熟花粉、卵细胞、助细胞和中央细胞等)原生质体和二倍体原生质体融合产生三倍体杂种细胞,形成愈伤组织,并再生出植株的过程[3]。植物细胞融合是植物细胞工程的一个重要分支,是一种突破物种生殖隔离、创造远缘杂种的新途径,原生质体技术还可用于细胞突变体的筛选、细胞器移植和外源DNA的导入。 自1960年Cocking[4]用酶法分离出番茄根原生质体后,Natag a和T akebe[5]1970年首次利用烟草叶分离原生质体,经培养获得再生植株;1975年以色列的Vardi等[6]首次从木本植物Sham onti甜橙珠心组织诱导胚性愈伤组织,并从愈伤组织分离原生质体,经培养通过胚状体再生出植株;在禾本科植物中,除在珍珠谷、紫狼尾草用悬浮细胞为材料,较早获得原生质体再生植株外,直到1985年Fujim ur a[7]等率先在水稻原生质体培养中获得了再生植株,才出现了重大突破。现已从许多种内、种间、属间甚至亚科间的体细胞杂交获得杂种细胞系或杂种植株。随着多种植物原生质体的成功培养和融合技术的不断改进,植物细胞融合获得了巨大成功。植物细胞融合包括原生质体的制备、细胞融合的诱导、杂种细胞的筛选和培养,以及植株的再生和鉴定等环节。 1　原生质体的分离和培养 1.1　起始材料 起始材料及其生理状态对原生质体的制备及其活力有很大的影响。在以往的双子叶植物培养中,大多以叶片为分离原生质体的材料,近年来,起始材料的适用范围有了较大扩展。目前,以愈伤组织、悬浮细胞和体细胞胚为材料制备原生质体是最主要的方式;禾本科植物原生质体培养获得成功的试验,几乎都是用从幼胚或成熟胚诱导形成的胚性愈伤组织或胚性细胞系来游离原生质体。采用这些材料制备原生质体方法简便、产量高、不污染、不易破碎。 1.2　基因型 同一植物不同基因型的原生质体脱分化与再分化所要求的条件不同,所以在相同条件下,不同品种的再生能力不同。王光远和夏镇澳[8]在水稻原生质体培养中曾用26个品种进行组织培养,其中仅有3个品种(粳稻农虎6号、国香1号和上农香糯)能成功地用于原生质体培养,获得再生植株。据统计,小麦获得原生质体再生植株的基因型只有大约10个[9]。基因型的选择在植物原生质体培养中起着重要作用,它不仅影响原生质体的产量和活力,而且还影响植株的再生。Cheng和Veillenux证明芙薯(Solanum phureja)从原生质体培养到愈伤组织形成受2个独立位点的显性基因的调控[10]。因此,现有 收稿日期:2004-03-09;修改稿收到日期:2004-12-12