真菌
第一节真菌
真菌（fungi）是一大类不含叶绿素，无根、茎、叶，多数类群为多细胞，大多数呈分支或不分支的丝状体，能进行有性和无性繁殖，营腐生或寄生生活的真核微生物。
根据形态可分为：
酵母菌、霉菌和担子菌
三大类群，但这不是真菌学上的分类方法。
真菌属于单独成立的真菌界，第八版《真菌字典》（Ains worth等，1995）将真菌界分为壶菌门、接合菌门、子囊菌门、担子菌门、半知菌门五个门，酵母菌、霉菌和担子菌分属于真菌的各门。
真菌中能引起人、畜的疾病，或寄生于植物造成作物减产，称为病原性真菌。
一）酵母菌
酵母菌多数为单细胞。
1、酵母菌的形态
大多数酵母菌为球形、卵形、椭圆形、腊肠形、圆筒形，少数为瓶形、柠檬形和假丝状等。菌细胞比细菌大得多，大小约1~5μm×5~30μm或者更大，在高倍镜下可清楚看到。
不形成真正的菌丝：形成的芽体依次相互连接，就象是丝状，称为假菌丝。
酵母菌有典型的细胞结构，有细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核及其他内含物等。
单独的酵母菌细胞是无色的，在固体培养基上形成的菌落，多数是乳白色，少数是黄色或红色。
菌落表面光滑、湿润和黏稠，一般比细菌的菌落大而厚。
酵母菌细胞生长在培养基的表面，菌体容易挑起。有些酵母菌表面是干燥粉状的，有些种培养时间长了，菌落呈皱缩状，还有些种可以形成同心环状等。
菌落的颜色、光泽、质地，表面和边缘特征，均为菌种鉴定的依据。
（二）霉菌(Molds)
又称丝状真菌，是工农业生产中长期广泛应用的一类微生物。
有些霉菌是人和动植物的病原菌，有的能导致饲料等霉败引起中毒。
霉菌由菌丝和孢子构成。
菌丝(hypha)：由孢子萌发而成，菌丝顶端延长，旁侧分支，互相交错成团，形成菌丝体(mycelium)，称为霉菌的菌落。
霉菌菌丝的平均宽度为3～10μm，菌丝的细胞构造基本上类似酵母菌细胞，都具有细胞壁、细胞膜、细胞核、细胞质及其内含物。
细胞壁结构类似酵母菌，成分有差别，但也含有几丁质，占细胞干物质的2%～26%。
幼年霉菌菌丝胞浆均匀，老年时出现液泡。霉菌的菌丝分为两种：一种无隔膜，为长管状的分支，呈多核单细胞，称为无隔菌丝，如毛霉和根霉。
另一种有隔膜，菌丝体由分支的成串多细胞组成，每个细胞内含一个或多个核，菌丝中有隔，隔中央有小孔，细胞核及原生质可流动，称为有隔菌丝。
菌丝可有不同的形态，如螺旋状、球拍状、梳状、结节状和鹿角状等数种，具有鉴别意义。霉菌菌丝在功能上有了一定程度的分化，伸入固体培养基内部或蔓生于固体培养基表面。具有摄取营养物质功能的菌丝称为营养菌丝或基质菌丝，伸向空气中的菌丝称气生菌丝。有的气生菌丝发育到一定阶段，分化成能产生孢子的菌丝称为繁殖菌丝。
2、孢子
是霉菌的繁殖器官。是分类鉴定的主要依据：孢子形成过程、形状、大小、排列及色泽等。无性孢子：不经过两性细胞的结合，直接由营养细胞分裂或营养菌丝分化而形成的孢子称为无性孢子。
可分为
厚垣孢子、节孢子、芽孢子、分生孢子、孢子囊孢子等。
厚垣孢子厚垣孢子：是在菌丝顶端或中间的细胞质浓缩变圆、细胞壁增厚形成的休眠体对外环境有较强的抵抗力
芽孢子：与酵母出芽相似，由母细胞出芽而形成，长大时脱离母细胞或联在母细胞上呈枝叶状。
有性孢子不同的性细胞（又称配子）或性器官结合后，经减数分裂而形成的孢子称为有性孢子。
配子的结合有质配和核配两种形式。
有性孢子常常是真菌在特定的自然条件下形成的用来渡过不良环境的休眠体，主要有：卵孢子、接合孢子、子囊孢子和担孢子等。
接合孢子：是由菌丝生出形态相同或略有不同的配子囊接合而形成的。
担孢子：是菌丝末端形成的外生性的有性孢子，通常为4个，形状有棒状、球形、管状等。
3、霉菌的菌落
霉菌的菌落比细菌、酵母菌的都要大，主要有绒毛状、絮状和蜘蛛网状等，较疏松。
菌落最初呈浅色或白色，当孢子逐渐成熟，菌落相应地呈黄、绿、青、黑、橙等颜色。
有的产生色素，使菌落背面也带有颜色或使培养基变色。
四）微生物学诊断
形态学检查：抹处、染色、检查真菌细胞、菌丝、孢子等；
分离培养：沙堡弱氏培养基。
二、真菌的繁殖与分离培养
1．真菌的繁殖
酵母菌大多数是单细胞微生物，可进行无性繁殖和有性繁殖，以无性繁殖为主。
无性繁殖主要以芽殖、裂殖和产生掷孢子。
芽殖是在成熟的酵母菌细胞先在芽痕处长出一个称为芽体的小突起，随后细胞核分裂成两个核，一个留在母细胞，一个随细胞进入芽体。
当芽体逐渐长大到与母细胞相仿时，子细胞基部收缩，脱离母细胞成为一个新的个体。
有的酵母菌的母细胞与子细胞相连成串而不脱离，似丝状，称为假菌丝。
裂殖为少数酵母菌的繁殖方式，其过程与细胞分裂方式相似。
母细胞伸长，核分裂，细胞中央出现横隔将细胞分为两个具有单核的子细胞。
掷孢子是在营养细胞生出的小梗上形成的无性孢子，成熟后通过一种特有的喷射机制将孢子射出。有性繁殖是指两个性别不同的单倍体营养细胞经接触、细胞壁溶解、细胞膜和细胞质融合，形成的二倍体的细胞核进行分裂（其中一次为减数分裂），形成子囊，子囊破裂后释放孢子。
霉菌以各种无性和有性孢子进行繁殖，而以无性孢子繁殖为主。
霉菌孢子的形态特征也是分类的重要依据。
菌丝的碎片或截段可发育成新的个体，称为断裂增殖。
营养要求低、环境适应能力较强，常用沙堡弱氏培养基，
最适pH为5.6-5.8；
最适生长温度为22~28℃。
生长缓慢，一般需7天以上。真菌的酵母细胞、繁殖菌丝和孢子，都可以生长发育成新的个体。酵母菌的分离方法同细菌。
真菌的分离方法有菌丝分离法、组织分离法和孢子分离法等3类。
菌丝分离法是在无菌条件下设法将目的菌的菌丝片段分离出来，使其在适合的培养基上生长
形成菌落，以获得纯菌种。
常用的方法有划线法和稀释法。
组织分离法是在无菌条件下用镊子取出真菌子实体内部的一小块组织，直接放在适宜的培养基上培养，可获得纯菌种。
孢子分离法是在无菌条件下利用无性和有性孢子能在适宜条件下萌发，生长成新的菌丝体以获得纯菌种的一种方法。
常用的方法也是划线法和稀释法。
）培养条件真菌对外界环境适应力强，对营养要求不高。
在一般培养基上均能生长，常用弱酸性的沙保罗氏培养基或马铃薯琼脂培养基。
最适培养温度为20～28℃；
pH3～6之间生长良好，最适pH为5.6～5.8；
适宜生长在潮湿的环境中，需氧条件下生长良好(酵母菌必须在厌氧条件下才能发酵产生酒精)。
少数是严格厌氧菌，如反刍动物瘤胃中的真菌；
寄生于动物内脏的病原性真菌则在37℃左右时生长良好，常需培养数天至十几天才能形成菌落
真菌的培养方法有固体和液体培养两种基本方法。
固体培养法实验室中进行菌种分离、菌种培养和研究时常使用琼脂斜面和琼脂平板，真菌在其上呈现菌落或菌苔生长，便于观察和分离。
制曲和作发酵饲料生产时，利用谷糠、麸皮等农副产品为原料，按真菌营养要求搭配好，加适量的水拌和成固体培养基作为发酵培养基，根据需要还要经过蒸煮灭菌后，接入菌种进行培养。
液体培养法有浅层培养和深层培养两类。
浅层培养是把培养基置于浅层容器中，利用较大的液体表面积接触空气以保证液体中的氧量，常用浅盘或浅池进行。
浅层培养为静置培养，真菌多在液体表面呈膜状生长，故又称表面培养。
一般实验室科研工作或数量较小的培养，可用浅层培养。
深层培养是把大量的液体培养基置于深层的容器内进行培养。
深层培养时必须用人工方法通入足够的空气，并作适当的搅拌。
为了保证各种条件的控制和防止外来污染，常常使用密闭式容器，这就是一般所称的发酵罐。深层液体培养可用于生产单细胞蛋白饲料等。
培养、制备少量液体种子时，常用摇瓶机、摇床等简单设备，这样既可增加空气的溶解，更多地提供真菌生长繁殖中所需要的氧气，也可有利于培养基中营养成分的充分利用。
真菌的生产培养方法有多种，培养以后的发酵产品亦有多样，但其全部生产过程，主要包括斜面菌种培养、液体种子扩大培养、生产发酵和产品检验分装等4个阶段。
三、病原真菌
曲霉菌主要存在于稻草、秸秆、谷壳、木屑及发霉的饲料中，菌丝及孢子以空气为媒介污染笼舍、墙壁、地面及用具。
致病性曲霉菌有多种，常见的有烟曲霉和黄曲霉。
一）、烟曲霉
1、生物学特性
烟曲霉（Aspergillus fumigatus）为需氧真菌，室温下能正常生长，最适温度37～40℃。
在马铃薯培养基、糖类培养基和血琼脂培养基上都能生长。
烟曲霉的菌丝为有隔菌丝，菌丝纵横交错。
在固体培养基上生长时，菌丝初期为无色到灰白色。
经24～30h开始形成孢子，成熟时孢子逐渐变为浅黄色、草绿色、灰绿色甚至黑色。
1、烟曲霉的生物学特性
气生菌丝末端分化出厚壁的足细胞，在足细胞上生出直立的分生孢子梗，梗的顶部膨大形成顶囊，形似倒置的烧瓶。
顶囊上长满辐射状排列的小梗，小梗顶端长出成串的球形分生孢子。
孢子呈蓝绿色，2.5～3.0μm，分生孢子梗长250～300μm。
菌落呈绒毛状，初期为白色、圆形，后期变为暗绿色或黑绿色，菌落边缘仍呈白色，菌落反面无色或带褐色。曲霉菌孢子抵抗力强：
120℃干热1h或煮沸5min才能被杀死；常用消毒剂为：5%甲醛、石炭酸、过氧乙酸和含氯消毒剂。曲霉菌在消毒剂中一般经1～3h才能死亡
2、致病性
烟曲霉的孢子广泛存在于空气、水和土壤中，极易在潮湿垫草和饲料中繁殖，同时产生毒素。烟曲霉孢子导致家畜发病较少。
孢子和菌丝进入家禽腔性器官并增殖，常造成器官机械性堵塞，加之毒素的作用，常表现为曲霉菌性肺炎，尤其是幼禽敏感性极高。
潮湿环境下，曲霉孢子穿过蛋壳进入蛋内，不仅引起蛋品变质，而且在孵化期间造成死胚，或者雏鸡发生急性曲霉菌性肺炎。
3、微生物学诊断
烟曲霉的检查主要根据菌丝及孢子形态而确定。
取病禽肺、气囊或腹腔上肉眼可见的小结节，尽量剪碎，置载玻片上，加10%～20%氢氧化钾溶液1～2滴，加盖玻片镜检，可见短的分支状有隔菌丝，直径4～6μm，长可达300μm。据此可做出初步诊断。
经过病原分离才能确诊：
分离培养时，取肝脏、肺脏、禽类气囊等组织，接种于马铃薯培养基上，37℃下培养3d，可见菌丝生长。
根据繁殖菌丝末端是否膨大，分生孢子的形态大小及排列特征加以确诊。
4、防治
主要措施是加强饲养管理：
保持禽舍通风干燥，不让垫草发霉，不用发霉的饲料和垫料。
环境及用具保持清洁，发病时可使用制霉菌素。
（二）、黄曲霉
1、生物学特性
黄曲霉（Aspergillus flavus）的生物学特性和培养特征与烟曲霉相似，菌丝形态和孢子排列特征也与烟曲霉相似，但分生孢子梗壁厚而粗糙，孢子有椭圆形及球状。
黄曲霉在察氏琼脂培养基上生长较快，最适温度28～30℃，经10～14d菌落直径可达3～7cm，最初带黄色，然后变成黄绿色，老龄菌落呈暗色，表面平坦或有放射状皱纹，菌落反面无色或带褐色。
2、致病性
黄曲霉的致病性主要是由于黄曲霉毒素的产生。
黄曲霉菌和寄生曲霉菌均产生黄曲霉毒素，该毒素常见于霉变的花生、玉米等谷物及棉子饼等，在鱼粉、肉制品、咸干鱼、奶和肝脏中也可发现。
黄曲霉菌中约30%～60%的菌株产生毒素，而寄生曲霉几乎都能产生黄曲霉毒素。
黄曲霉毒素的熔点为200～300℃，根据其化学结构可分为B1、B2、G1、G2、B2a、G2a、
M1、M2、P1、GM2、毒醇等多种。
种类不同，毒性也不同，但都易溶于脂溶性溶剂，耐热，煮沸不能使之破坏，在pH9～10强碱溶液中，毒素能迅速分解。
黄曲霉毒素对多种动物呈现强烈的毒性作用，比氰化钾的毒性大100倍，仅次于肉毒毒素。不同动物的敏感性不同，鸭、兔、猫、猪、犬较敏感。
黄曲霉毒素的毒性作用主要表现为三个方面：急性或亚急性中毒、慢性中毒、致癌性。
雏鸭急性中毒时，主要病变在肝脏，表现为肝细胞变性、坏死、出血。
实验证明，黄曲霉毒素是目前已知最强烈的致癌物质之一，除致发肝癌外，还能诱发胃癌、肾癌、直肠癌等。
3、微生物学诊断
本病的微生物学诊断主要是毒素的检测。从可疑饲料中提取毒素，饲喂1日龄雏鸭，可见肝脏坏死、出血以及胆管上皮细胞增生等，或以薄层层析法检测毒素。
4、防治
预防措施与烟曲霉的预防相同，一旦中毒发生，治疗意义不大。
第二节支原体
支原体：是一类介于细菌和病毒之间的单细胞微生物，是目前已知能营独立生活的最小微生物分布广泛，可危害人、畜、植物。
一、形态与结构
个体微小、结构简单、无细胞壁的原核细胞型微生物；
形体柔软、高度多形性，常呈球状、丝状、环状、螺旋状等规则形态；
小球状是其基本形态，是繁殖的基础，称为最小繁殖单体；
直径约125-250nm，丝长短不一，具有可塑性；
二分裂繁殖，含DNA和RNA；
能在无生命培养基中繁殖。
支原体直径为0.1～0.3μm，一般约0.25μm，菌体柔软，多数能通过细菌滤器。
质膜含固醇或脂聚糖等稳定组分，细胞质内无线粒体等膜状细胞器，但有核糖体，无鞭毛。革兰氏阴性，常用姬姆萨染色，呈淡紫色。
二、培养
营养要求比一般细菌高，在pH7.8-8.0间生长，低于7.0则死亡；
生长缓慢；典型的菌落呈荷包蛋样，液体培养基不易见到混浊。
多数支原体可在鸡胚的卵黄囊或绒毛尿囊膜上生长。
三、繁殖
复制时基因组复制与胞分裂不同步：细胞结构早于胞浆分裂。
繁殖方式有：
二分裂、出芽、丝状断裂和在细胞释放单体颗粒，大约3－4小时繁殖一代。
四、抗原结构
细胞膜上的蛋白质和糖脂。各型之间交叉少。补体结合试验－糖脂；ELISA－蛋白质；
生长抑制试验（GIT）；代谢抑制试验（MIT）－血清抗体。
五、抵抗力
比细菌敏感，易被消毒剂灭活；
对结晶紫抵抗力强，对青霉素等耐药，对干扰蛋白合成的抗生素敏感。
六、致病机理
获得营养；产生有毒代谢产物；免疫损伤。
大多数支原体为寄生性，单独感染时常常症状轻微或无临床表现，当细菌或病毒感染或受外
界不利因素的作用时可导致人和畜禽发病。
临床上由支原体引起的传染病有：
猪肺炎支原体引发的猪地方性流行性肺炎，即猪的气喘病；
禽败血支原体引起的鸡的慢性呼吸道病；
此外还有牛传染性胸膜肺炎、山羊传染性胸膜肺炎等。
第三节立克次氏体
是一类依赖于宿主细胞和专性细胞内寄生的小型G－原核单细胞微生物。
形态结构和繁殖方式与细菌相似；
生长要求与病毒相似，因此是介于细菌和病毒之间的微生物。
一、特性
1、细菌多形，可呈球形、球杆形、杆形，甚至哑铃形或丝状等，主要是球杆状。
2、大小介于细菌与病毒之间，球状菌直径0.2~0.7um，杆状菌大小0.3~0.6um×0.8~2um。
3、有类似于革兰氏阴性细胞的细胞壁结构和化学组成。
4、专性细胞内寄生。常用动物接种、鸡胚卵黄囊接种、细胞培养等法培养立克次氏体。
5、对理化因素抵抗力不强，尤对热敏感；对一些广谱抗生素敏感，但磺胺药不敏感反而有促进生长作用。
6、致人畜疾病的立克次氏体，多寄生在网状内皮系统、血管内皮细胞或红细胞，并常天然寄生在虱、蚤、蜱、螨等节肢动物体内。
7、主要寄生于上述节肢动物的肠壁上皮细胞中，兼或能进入它们的唾液腺或生殖道内。
二、分类
列为立克次氏体目，下分立克次氏体科、巴通体科及乏质体科3科，计14个属，43个正式种。
三、微生物学诊断
1、微生物学检查：
标本－急性期血液和双份血清；
分离培养－豚鼠；血清学试验－外斐反应。
2、预防和治疗
控制和消灭中间宿主及储存宿主；
特异性：鼠肺疫苗（全细胞灭活苗）；
氯霉素、四环素，禁用磺胺类药。
第四节衣原体
是一类严格细胞内寄生，有独特发育周期，能通过细菌滤器，并形成包涵体的原核细胞型微生物。
介于立克次氏体与病毒之间的微生物。
一、特征
G－，圆形或椭圆形；
有细胞壁，组成与G－菌相似；
有独特的发育周期，二分裂方式繁殖；
专性细胞内寄生；
有核糖体和较复杂的酶类，能进行多种代谢，但缺乏供代谢所需的能量来源；
对多种抗生素敏感。大小在0.3～1.0μm之间。
二、分类
衣原体目，分三个科。
比较重要的有：沙眼衣原体、鹦鹉热衣原体、肺炎衣原体、牛羊衣原体。
三、发育周期
1、原体（elementary body, EB）、始体（initial body）、网状体（reticulate body, RB）。
原体始体（网状体）
小而致密，0.2-0.4μm；球形、椭圆形或梨形。大而疏松，0.2-直径μm，圆形或椭圆形有致密的核、有胞壁、发育成熟核电子致密度较低，无胞壁
Giemsa紫色，Macchiavello 红色Macchiavello蓝色
高度感染性，有毒性无感染性，无毒性
无繁殖力代谢活泼，二分裂方式繁殖
胞外稳定性强胞外稳定性弱
三、发育周期
细胞细小、呈球状等、细胞壁坚韧、具传染性、无繁殖能力的原体(elementary body)和由原体变成细胞较大、圆形或椭圆形、无细胞壁、无传染性的始体(initial body)。
始体经二分裂繁殖，形成子代原体，成熟后自细胞释出，可再感染其他细胞。
衣原体感染的细胞吖啶橙染色，荧光显微镜下可见细胞质内红色的菌体。
包涵体：易感细胞内含繁殖体的始体和子代原体的空泡。
四、培养
专性寄生，可在鸡胚、小鼠和细胞中繁殖。
五、抗原结构
属特异性抗原：脂多糖；
种特异性抗原：外膜蛋白OMP；
型特异性抗原：外膜蛋白抗原、氨基酸可变区。
六、抵抗力
对热、消毒剂敏感；耐低温、抗生素。
七、致病性与免疫性
内毒素样物质－抑制细胞代谢、破坏细胞；
外膜蛋白与吸附、侵入和阻止吞噬体和溶酶体融合有关；
Ⅳ型超敏反应。
八、与畜禽疾病有关的衣原体
鹦鹉热衣原体：雏鸡－白痢样腹泻、厌食；猪－肺炎、腹泻、关节炎和结膜炎等。
九、免疫性
免疫力不强，易造成持续感染和反复感染。
十、微生物学诊断
在人工培养基上不能生长；在感染细胞的胞质中可检查到病原体：主要为原体，也有始体，G－；
碘染色阴性；可在鸡胚卵黄囊生长，并不被磺胺嘧啶钠抑制；免疫学试验－检查属共同抗原与种别抗原。
我国已试制成功绵羊衣原体性流产疫苗，其他类型的衣原体病尚无实用或可靠的疫苗，治疗药物可以选用四环素等。
第五节螺旋体
是一类菌体细长、柔软、弯曲呈螺旋状、无鞭毛而能活泼运动的原核单细胞微生物。
一、螺旋体的生物性状
螺旋或波浪状，有1个或1个以上完整的螺旋；大小差异极大，长3~500μm，宽0.09-3.0μm。
有的螺旋体可通过细菌滤器。
基本结构：
有细胞壁、原始核质、二分裂、对抗生素等敏感药物等。
G－，不易着色；
姬姆萨染色效果好，有的红色，有的蓝色（多为腐生性螺旋体）；
病理组织中的螺旋体：
Levaditi氏镀银染色法——黑褐色、其它细菌和组织均染成黄色；
印度墨汁负染色法——透明无色，背景有颜色，反差明显，形象清晰。
常用相差和暗视野显微镜观察。
细螺旋体属（需氧）较简单，其它较困难且需特殊培养基；密螺旋体属严格厌氧。
分为1个科5个属：
其中与兽医临床关系密切的有密螺旋体属、疏螺旋体属、蛇形螺旋体属和钩端螺旋体属。密螺旋体属：螺旋弯曲而致密、规则或不规则；长5-20μm，宽0.09-0.5μm，螺旋弧幅1mm；镀银法染色较好，培养要求苛刻、厌氧；
有兔密螺旋体和猪痢疾密螺旋体
、致病性
螺旋体广泛存在于自然界水域中，也有很多存在于人和动物的体内。
大部分螺旋体是非致病性的，只有一小部分是致病性的。如猪痢疾蛇形螺旋体是猪痢疾的病原体；钩端螺旋体可感染多种家禽、家畜和野生动物，导致钩端螺旋体病。
对猪痢疾蛇形螺旋体病目前尚无可靠或实用的免疫制剂供预防之用，但可用抗生素或化学治疗剂控制。
但钩端螺旋体国内外已有钩端螺旋体疫苗，效果良好。
几种药用植物内生真菌抗真菌活性的初步研究
几种药用植物内生真菌抗真菌活性的初步研究 #64#微生物学通报 2001年28(6) 参考文献 [1]MasatoshiGOTO,EijiKUWANO,WerasitKANLAYAKRIT,ShinsakuHAYASHIDA,BiosiBiotechB iochem,1995,59: 16~20. [2]MASTOSHGOTO,TSUYOSHISEMIMARU,KENSUKEFURUKAWA,SHINSAKUHAYASHIDA,APPLENVIRONM I- CROBIOL,1994,60:3926~3930. [3]KeijiKAINUMA,HiroshiISHIGAMI,ShoichiKOBAYASHI,JJpnSoc.Starchsci,1985,31:136 ~141. [4]ShinsakuHAYASHIDA,andPerfectoQ.FLOR,AgricBiolChem,1981,45:2675~2681. [5]Cheor-lHoKim,Suk-TaeKwon,HajimeTaniguchi,Dae- SilLee,BiochimicaetBiophysicaActa,1992,1122:243~ 250. [6]HiroshiMorita,KouheiMizuno,MayumiMatsunage,YusakiFujio,JApplGlycoci,1999,46 :15~21. [7]Jun-ichiABE,SusumuHIZUKURI,JJpnSocStarchSci,1988,35:p.43~47. [8]TomokoTAKAHASHI,KeikoKATO,YoshioIKEGAMI,MasachikaIRIE,JBiochem,1985,98:663-671. [9]KohsaiFukuda,YujiTeramoto,M.Goto,J.Sakamoto,S.Mitsuiki,Hayashida,BiosciBiot echBiochem,1992, 56:556~559.
抗真菌药
抗真菌药 第一节基本概述 一、真菌感染分类：浅部真菌感染、深部真菌感染 1、浅部真菌感染： ①致病菌：各种癣菌引起 ②侵犯组织：皮肤、毛发、指(趾)甲等引起手足癣、体癣、股癣、叠瓦癣、甲癣、头癣、黄癣等。 ③特点：浅部真菌感染发病率高。 2、深部真菌感染： ①致病菌：白色念珠菌、新型隐球菌、粗球孢子菌、荚膜组织胞浆菌等。 ②侵犯组织：内脏器官和深部组织 ③特点：发病率虽低但病情严重，病死率较高 二、抗真菌药物分类： 1、按作用分类： ①抗深部：两性霉素B 、咪唑类、三唑类 ②抗浅表：灰黄霉素、制霉菌素、局部应用的咪唑类 2、按化学结构分类： ①唑类： ●咪唑类——克霉唑、咪康唑、酮康唑 ●三唑类——氟康唑、伊曲康唑 ②多烯类：两性霉素B、制霉菌素 ③嘧啶类：氟胞嘧啶 ④烯丙胺类：特比萘芬 ⑤其它类：灰黄霉素 第二节抗真菌药物 （一）抗生素类抗真菌药： 一、两性霉素B ： 1、机制： ①与真菌细胞膜的麦角固醇选择性结合，在细胞膜上形成孔道，增加细胞膜通透性，导致细胞内许多 小分子物质外漏，造成细胞死亡。 ②细菌的细胞膜不含固醇，故对细菌无作用 ③哺乳动物的红细胞、肾小管上皮细胞的细胞膜含有固醇→溶血、肾脏损害等毒性反应。 本药与真菌细胞膜上的麦角固醇亲和力大于对哺乳动物细胞膜固醇的亲和力，故毒性相对低。 2、药理作用： ①广谱：对多种深部真菌如新型隐球菌、白色念珠菌、粗球孢子菌、荚膜组织胞浆菌、皮炎芽生菌、 孢子丝菌、曲霉茵、毛霉菌具有良好的抗菌作用（几乎对所有真菌均有抗菌活性） ②高浓度有杀菌作用。 3、体内过程： ①口服及肌注均难吸收，静脉滴注 ②不易透过BBB 4、临床应用： ①深部：静脉滴注用于全身或内脏真菌感染 ②真菌性脑膜炎：除静脉滴注外，还需鞘内注射
真菌的繁殖方式
真菌的繁殖方式 真菌的繁殖器官由营养体产生或转变而来。有些真菌在形成繁殖器官时，整个菌体转变成一个至多个繁殖结构，这叫做整体产果式，这种结构分化少，比较原始。大多数真菌的繁殖器官只是由菌体的一部分构成，其余部分继续维持正常的营养活动，这叫做分体造果式。真菌的繁殖包括无性生殖、有性生殖和准性生殖。 无性生殖 菌的无性生殖是指不经过两性细胞的结合便产生新的个体。 有性生殖 菌的两个可亲和性细胞核的结合。这种核的结合是通过游动配子配合、配子囊接触交配、配子囊交配、性孢子配合和体细胞配合来实现的。典型的有性生殖过程包括 3个明显不同的阶段：第一阶段叫质配，即两个带核的原生质体在同一细胞内互相配合；第二阶段叫核配，即上述细胞里两核的配合。 真菌有性生殖 的真菌在质配后立即进行核配，重新使染色体的数目减为单倍，这就是有性生殖的第三阶段。 这些孢子是许多真菌用以渡过不良环境的休眠体，也是许多植物病原真菌每次初侵染的传染体，对于真菌的复壮或形成杂种优势具有重要意义。同时，有性孢子也是真菌分类的重要依据。 根据有性生殖的亲和性，真菌可分为同宗配合和异宗配合两类：前者是每一菌体自身可孕，不靠其他菌体的帮助便可单独进行有性生殖；后者是每一菌体自身不孕，不管是否雌雄同体，都需要借助其他可亲和性菌体的相对交配型来进行有性生殖。异宗配合又有两极性和四极性之分。孤雌生殖在真菌中也时有发现。 准性生殖 1952年，美国的G.蓬泰科尔沃和罗珀在丝状真菌中发现的一种导致基因重组的机制。在这种机制中，遗传性的重组不是依赖有性生殖的减数分裂，而是依赖准性生殖的有丝分裂。
准性生殖的第一步是形成异核体。异核体菌丝的形成有3种途径：①异核菌丝的结合；②同质菌丝内的核发生突变；③菌丝内一些单倍体核进行核配形成二倍体核。准性生殖的第二步是两个核的融合，同质的和异质的核都可以核配，形成同质的二倍体核和异质的二倍体核，结果，这个阶段的菌丝细胞中最少含有5类核：两种单倍体核，两种纯合二倍体核，一种异合二倍体核。但是，自发形成异合二倍体核的频率非常低，如构巢曲霉在100万个菌株中才出现一个异合二倍体。准性生殖的第三步包括二倍体核一系列非典型的、不规则 真菌准性生殖 的单倍体化。由于有丝分裂后期姊妹染色单体未分开，或者由于一个染色体分裂为2以后都趋向一极，而造成子核的染色体数目不相等,产生非整倍体，第1个子核多一个染色体（2n+1),第2个子核又少一个染色体（2n-1)。“2n+1”非整倍体又称三体，往往失去一个染色体而成为二倍体。在这个过程中，可以由杂合体变为纯合体。“2n-1”非整倍体又称单体，常在不断的有丝分裂中继续丧失染色体，直至成为单倍体，准性生殖全过程可概括为质配、核配和单倍体化。半知菌不发生有性生殖，发生准性生殖的也只有曲霉、青霉和镰孢霉属中的少数种。在异合二倍体繁殖的有丝分裂中，染色体之间偶尔也发生交换，形成新的组合和连锁（见连锁和交换）。有些新组合的二倍体核在形成分生孢子时进入孢子，而在孢子萌发时生出二倍体菌丝。这样的重组是准性生殖的主要方面，因为它使没有有性生殖的真菌也能得到有性生殖的益处。不过发生的频率很低，仅为有性生殖的1/500。 准性循环的遗传虽然具有有性生殖的内容，但与有性循环之间还有几点区别：①准性循环的过程类似有性循环，但不像有性循环那样固定，而且单倍体化的完成要牺牲大量的非整倍体；②在一个菌丝细胞内，异核现象和异合现象可以同时发生，不过异合机会极少，必须进一步分离才能发现。由于一个二倍体自发分离（体细胞交换和单倍体化）的频率很低，往往需要用各种化学的或物理的因子加以诱导，例如用对氟苯丙氨酸（PFA)诱导构巢曲霉单倍体化就有特别显著的效果，用氟尿嘧啶（FU)诱导构巢曲霉的有丝分裂交换（体细胞交换），效果也很明显。另外还有许多因子，如氮芥、甲醛和紫外线等，对构巢曲霉的单倍体化和有丝分裂交换都起诱导作用。
几种真菌的分离与鉴定
常见真菌的分离与鉴定 病原真菌的一般特性 真菌（Fungi）是微生物中的一个大类，是一群数目庞大的细胞生物，估计全世界已有记载的真菌有10万种以上。它们的子实体小者用显微镜才能见到，大者可达数十厘米，它们共同特征是具有真正的细胞核，产生孢子和不含叶绿素，以寄生或腐生等方式吸取养料，仅少数类群为单细胞，其他都有分支或不分支的丝状体，能进行有性或无性繁殖，具有纤维素（或其他葡聚糖）或几丁质的微纤维或两者兼有的细胞壁的有机体。对人类和动物致病的真菌大约100余种，属于病原真菌。 一、基本性状 （一）形态结构 真菌分单细胞真菌与多细胞真菌两大类，前者属于酵母菌（yeast）一般呈球形或卵圆形，后者称为霉菌（mold）或丝状真菌，呈丝状分枝，菌丝交织象绒球状，另有一些真菌可因寄生环境及培养条件（养料、温度、氧气等）的不同可交替出现两种形态，即在室温中呈霉菌型，在37℃或体内呈单细胞的酵母型，这类真菌有双相性，所以称之为双态真菌或二相真菌。 真菌的细胞结构与一般植物细胞相似，有定型的细胞核及完善的细胞器，但胞壁与细菌胞壁不同，不含粘肽而是由角质及葡聚糖组成，也含有脂多糖蛋白质，其中酵母菌及类酵母菌皆以出芽增殖，不生长真菌丝，革兰氏染色呈阳性，丝状真菌分菌丝及孢子两部分，形态多种多样，分述如下。 1．菌丝（Hypha）真菌在合适的环境中，由孢子生出嫩芽，称为芽管。芽管逐渐延长呈丝状，称菌丝。菌丝继续生长并生长分枝，增殖的菌丝交织组成菌丝体。其中一部分菌丝深入被寄生的物体或培养基中吸取养料，称为营养菌丝体。另一部分菌丝向空间生长，称为气生菌丝体。气生菌丝体能产生孢子者称为生殖菌丝体。菌丝中各个细胞间有明显分隔者，称为有隔菌丝。主要见于病原性真菌。很多非病原真菌的菌丝无明显分隔，称为无隔菌丝。有些菌丝可呈各种特殊形式，如球拍状、破梳状、螺旋状、结节状、关节状、鹿角状、假菌丝。 2．孢子生成孢子是真菌扩大繁殖的一种方式。真菌孢子的抵抗力、形态及作用等均与细菌芽胞不同，分为无性孢子及有性孢子两大类。不经过两性细胞的结合而形成的孢子叫无性孢子，这一繁殖过程称为无性繁殖。常见的无性孢子有5种：关节孢子、厚壁孢子、孢子囊孢子、芽孢和分生孢子。病原真菌属于不完全菌纲，很少产生有性孢子，大多数是无性孢子。 （1）厚壁孢子：当真菌在不利环境中，由菌丝内胞浆缩浓和胞壁增厚而成，呈圆形。当环境好转时可生成芽管成长为菌丝。
研究大型真菌30余年成果累累
研究大型真菌30余年成果累累—— 杨祝良行走在高山峡谷（讲述·一辈子一件事） 人物小传 杨祝良：1963年生于云南省曲靖市，中科院昆明植物所研究员、东亚植物多样性与生物地理学重点实验室主任，专注真菌研究30余年，已发现4个新亚科、21个新属、260余个新种。他为大型真菌绘制族谱，通过编纂书籍、制作宣传挂图等方式，帮助人们提高防范能力，以降低云南野生菌中毒事件发生起数、中毒和死亡人数。 在昆明，即便进入雨季，大多数食用野生菌仍无法人工繁育，不少野生菌价格依然高企。然而，曾经很贵的羊肚菌，这两年价格却大幅下降。“你们在市面上看到的羊肚菌，应该是人工种的。多亏咱们现在人工种植技术水平高，大家才有这样的口福……”一进杨祝良的办公室，映入眼帘的全是菌类期刊专著，杨祝良侃侃而谈。 “我的工作主要是为大型真菌绘族谱、认‘亲戚’” 中国是羊肚菌科物种的世界分布中心，乍看一样的羊肚菌，从分子生物学角度看，却有30多个不同物种。从中找出既容易人工栽培、又高产稳产的物种，谈何容易？前后10多年，杨祝良团队只要出差就在全国各地采集菌株，终于筛选出十几种适合人工栽培的菌株。投放到市场，第一年便见到了效益。可转年再种，有的菌株却出现明显退化，“有的产量骤降，有的干脆不长。”杨祝良带领团队再次聚焦羊肚菌，在基因层面揭示了羊肚菌退化的原理。“现在只要检测两个基因，就能判断菌种是否退化、是否合格。” 研究大型真菌，既有很强的科研价值，又有广阔的市场前景。杨祝良说：“我的工作主要是为大型真菌绘族谱、认‘亲戚’。这就好比一个大家族里可能有10多个家庭，每个家庭里又有不同的成员。哪些能放心吃，哪些有
毒，这些研究清楚了，才能进一步考虑产业发展的问题。”杨祝良说。 后来，杨祝良团队瞄准了被业内评价“很棘手”的牛肝菌科分类。他们联合国际同行，借到了国内外重要标本馆的大多数代表性研究材料，终于收集到了全球该科60余属约400种的2600余份标本样品。“借标本、分析基因组是我们非常常规的工作，虽然看似有些枯燥，但看到收集到的标本样品越来越多，我还是乐在其中。”杨祝良说。 2014年3月，杨祝良团队在国际真菌学主流期刊《真菌多样性》上发表论文，首次构建了世界牛肝菌科的分子系统发育框架。紧接着，他们对我国牛肝菌的物种多样性进行了系统研究，澄清了一大批分类混乱的菌种；其中一些研究成果被国际权威专家誉为牛肝菌研究的“里程碑式成果”。杨祝良说：“能出这样的科研成果，不是因为我们多高明，而是得益于我们国家的发展。” “没有一流的野外工作，就没有一流的科研成果” 杨祝良的科研离不开实验室分子生物学技术的应用，但去野外发现新的野生菌，依然是杨祝良最大的期盼。他说：“没有一流的野外工作，就没有一流的科研成果。” 1998年夏，杨祝良第一次去青藏高原科考。生于云贵高原的杨祝良没想到，自己竟然在海拔3000多米处产生了高原反应。心跳每分钟120次，躺在床上像跑步，“跑”了一晚，第二天连走路都吃力……科考队长劝杨祝良回去，杨祝良想都没想便拒绝了。他说：“要是不坚持住，以后永远也不能站上世界屋脊，这会成为我科研生涯中的一个短板。” 一周后，杨祝良身体逐渐适应，甚至比最初照顾他的同伴走得还快、爬得还高。他说：“那会儿就想把耽误的时间补回来，抓紧机会考察。”也是在那次科考中，杨祝良意外地在海拔4000多米的高山草甸发现了野生菌。“一般认为野生菌应该长在植被茂密的林下，可为何出现在植被稀疏的草甸中呢？
真菌检验带答案
第十六章医学真菌学 一、单5选1 1.真菌区别于细菌的本质特征是： A.具有高度分化的细胞核（有核膜、核仁） B.有单细胞和多细胞等不同形态 C.有多种增殖方式 D. 对抗生素不敏感 E.细胞壁中无肽聚糖 2.为真核细胞型微生物的是： A.细菌 B.真菌 C.支原体 D.衣原体 E.病毒 3.真菌的繁殖结构是： A.芽孢 B.孢子 C.包涵体 D.原体 E.始体 4.真菌细胞壁不含有的成分是： A.几丁质 B.葡聚糖 C.肽聚糖 D.蛋白质 E.脂质 5.真菌的致病性包括： A.真菌毒素中毒 B.条件致病性真菌感染 C.真菌过敏 D.真菌毒素的致癌作用 E.以上全包括 6.真菌感染率明显上升与下列哪种因素相关性最小： A.抗生素使用不当 B.抗癌药物使用增多 C.机体免疫力下降 D.激素使用增多 E.真菌发生耐药变异 7.培养真菌的最适pH是： A.2.0～4.0 B.3.0～4.0 C.4.0～6.0 D.5.0～7.0 E.6.0～8.0 8.培养真菌首选下列哪种培养基： A.普通琼脂平板 B.半固体培养基 C.玻片小培养 D.米汤培养基 E.沙保罗培养基 9.多细胞真菌的菌落类型是： A.酵母型 B.类酵母型 C.丝状型 D.类丝状型 E.混合型 10.关于条件致病性真菌感染，下列说法错误的是： A.引起的是内源性感染 B.致病性强，常造成AIDS或肿瘤等病人的致死性感染
C.是肿瘤、糖尿病及免疫缺陷性疾病治疗中的疑难问题 D.目前无特异预防措施 E.临床感染率呈明显上升趋势 11.检查新型隐球菌感染常用： A.革兰染色法 B.抗酸染色 C.墨汁染色 D.瑞氏染色 E.吉姆萨染色 12.以下哪种真菌不属于浅部真菌： A.红色毛癣菌 B.铁锈色小孢子菌 C.石膏样小孢子菌 D.卡氏肺孢菌 E.絮状表皮癣菌 13.*鹅口疮的病原菌是： A.衣原体 B.细菌 C.真菌 D.螺旋体 E.立克次体 14.真菌感染不用青霉素治疗，是因为真菌： A.缺乏细胞壁 B.真菌产耐青霉素的酶 C.长期使用青霉素已产生耐药 D.细胞壁缺乏肽聚糖 E.亲和力低 15.关于皮肤癣的描述是错误的是： A.主要侵犯皮肤、毛发和指（趾）甲 B.通过直接或间接触而感染 C.在沙保弱培养基上形成丝状菌落 D.一种皮肤癣仅能引起一种癣病 E.可以根据菌丝、孢子及菌落形成作出初步判断 16.下列何种真菌是我国主要的表面感染真菌： A.着色真菌 B.絮状表皮癣菌 C.许兰毛癣菌 D.红色毛癣菌 E.糠秕马拉色菌 17.表皮癣菌属不引起： A.毛发癣 B体癣 C甲癣 D足癣 E手癣 18.实验室诊断皮肤癣菌感染时，皮屑或病发须经哪种溶液处理后再镜检： A.10%Nacl B.70%乙醇 C.10%KOH D.25%KOH E.15%NAOH 19.具有假菌丝的真菌是：
野生大型真菌物种资源调查附表1
附表1 大型真菌调查记录表 网格编号：省市（州）县乡（镇）村（小地点）调查方法：样线（带）法□长：m宽：m 样方法□大小：m×m 样线（带、方）号： 海拔：m- m经纬度：起点N S 终点N S 路线： 调查人：天气：植被类型：表格编号： —1—
注：（1）小生境：林下、沟边、路边、山坡等；（2）基质：树基、树干、树枝、叶面、树桩、腐木、岩面、石隙、洞隙、土坡、岩面薄土、腐生、寄生；（3）生态条件：干燥、湿润、浸水、流水、林荫、散光、直射光。 附表2 大型真菌测量记录表 网格编号：省市（州）县乡（镇）村（小地点）样线（带、方）号：调查人：记录人：表格编号： —2—
附表3 大型真菌访谈调查表 网格编号：省市（州）县乡（镇）村访谈地点：被访谈人姓名：性别：年龄：职业：文化程度：民族： 访谈人：访谈时间：表格编号： —3—
注：（1）丰富程度：多、少、偶见；（2）年采摘量：吨/年，用两位小数表示；（3）价格：元/公斤，用两位小数表示；（4）去向：企业、市场自卖等；（5）用途：食用、药用和其他。 附表4 大型真菌市场调查表 网格编号：省市（州）县乡（镇）村被访企业名称：规模：被访人姓名：职责：联系电话： 访谈人：访谈时间：表格编号： —4—
注：（1）来源：野生、栽培；（2）价格：元/公斤，用两位小数表示；（3）年收购量：吨/年，用两位小数表示；（4）用途：食用、药用和其他。 附表5 大型真菌物种名录 网格编号：省市（州）县统计人日期： 目/科中文名称俗名学名用途营养类型分布备注 —5—
注：（1）用途：药用、食用、毒菌等；（2）营养类型：木生、土生、粪生等。 —6—
常用抗真菌药物简介
常用抗真菌药物简介 自发现第一个抗真菌抗生素灰黄霉素以来，抗真菌药物领域已取得了长足的进展。已有各种抗真菌药物相继应用于临床，它们有着不同的作用机制和治疗效果，这些药物对真菌病的防治发挥了重要作用。但是由于疗效、安全性、耐药性等问题的出现，现有的抗真菌药物仍远远不能满足需要。因此，仍需新的高效安全抗真菌药物问世。从目前来看，较有前途的抑制真菌细胞膜麦角固醇合成与干扰真菌细胞壁合成的两大类药物。此外，像两性霉素B等抗菌活性强但不良反应严重的老药也在不断得到改进。分类目前常用的抗真菌药物根据不同的作用机制可分为：①作用于真菌细胞膜，干扰真菌细胞膜麦角固醇的合成（如唑类、丙烯胺类和吗啉类）以及损害细胞膜脂质结构及其功能的药物（如多烯类）；②影响真菌细胞壁合成的药物（如卡泊芬净）；③干扰真菌核酸合成的药物（如5-氟胞嘧啶，灰黄霉素）；④作用机制尚未明确的药物（如碘化钾等）。 按抗真菌药物的结构类型的不同分为：①唑类（包括三唑类和咪唑类，氟康唑、酮康唑、伊曲康唑、益康唑、咪康唑等）；②丙烯胺类（特比萘芬、萘替芬等）；③吗啉类（阿莫罗芬等）； ④多烯类（两性霉素B、制霉菌素等）；⑤其他类（灰黄霉素、5-氟胞嘧啶、碘化钾、环吡酮胺、卡泊芬净等）。 唑类药物（azoles） 这类药物有共同的N-碳置换的咪唑或三唑环，包括三唑类和咪唑类两大类。唑类药物是近20年来发展较快的一类抗真菌药物，在近年来防治真菌感染中发挥了重要作用。唑类药物的作用部位在真菌的细胞膜。这类药物通过抑制细胞色素P450依赖酶，使麦角固醇合成受阻从而破坏了真菌细胞的完整性；同时使甲基化的固醇堆积，这样则改变了真菌细胞膜的化学成分，使其通透性发生变化，从而阻止了真菌细胞的生长繁殖。有些唑类药物在高浓度时可直接破坏真菌细胞膜，导致细胞内容物外露，发挥杀菌作用这类药物可外用治疗皮肤癣菌病、皮肤粘膜念珠菌病等。系统用药治疗严重的浅部真菌病和深部真菌病等。唑类药物中供外用的有：克霉唑、益康唑、咪康唑、联苯苄唑、酮康唑等。供系统 使用的包括：酮康唑、咪康唑、伊曲康唑、氟康唑、伏立康唑等。 酮康唑ketokonazole 酮康唑是第一个可口服使用的咪唑类广谱抗真菌药物。抗菌谱酮康唑具有广谱抗真菌作用。对皮肤癣菌、糠秕孢子菌、念珠菌属、酵母菌、皮炎芽生菌、粗球孢子菌、荚膜组织胞浆菌、巴西副球孢子菌有抗菌作用。对曲霉、毛霉无抗菌作用。 药代动力学特点该药在胃肠道容易吸收，口服400mg 2小时后，血药浓度达5～6mg/l，但是个体差异较大。胃酸可促进药物吸收，当胃酸分泌减少或与抑制胃酸分泌的药物同时服用时药物吸收减少。口服酮康唑后，药物可分布在皮脂，尿液、乳汁中；但在脑脊液中含量甚微。 临床应用在伊曲康唑与氟康唑问世之前，口服酮康唑是治疗慢性皮肤粘膜念珠菌病的首选药物，但由于其长期服药引起的肝毒性以及停药后复发的问题，临床上限制了对它的使用。现临床可用于念珠菌病、花斑癣、皮肤癣菌病、球孢子菌病、副球孢子菌病、组织胞浆菌病等的治疗。对孢子丝菌病、着色芽生菌病一般无效，对曲霉病、毛霉病以及足菌肿无效。不良反应10％的患者服常规剂量的酮康唑后出现厌食、恶心、呕吐等胃肠道反应。当口服剂量大于800mg/d时，不良反应的发生率高达50％。与食物同时服用或在夜间服药有助于提高对药物的耐受性。肝功能异常、药物性肝炎是酮康唑较重的不良反应。表现为血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶升高，可持续数周；肝活检程肝炎样损害。用药期间应注意检查肝功能（2次/月），尤其要注意碱性磷酸酶的变化。大剂量（大于800mg/d）服用酮康唑能抑制肾上腺与睾丸类固醇激素的合成，引起脱发、性欲减退及男性
真菌分类
第二章鞭毛菌Mastigomycotina 第一节一般形态和分类 一、概述： 鞭毛菌是指Gaümann系统中的古生菌纲Archimycetes和Sparrow系统中的藻状菌纲Phycomycetes 单鞭毛组Uniflagellatae和双鞭毛组Biflagellatae组合在一起的真菌，鞭毛菌亚门同接合菌亚门的真菌统称为低等真菌。现代电子显微镜技术在鞭毛上的应用，使人们确信鞭毛的特征（鞭毛的结构、组成、位置和数量）能合理地反映鞭毛真菌的亲缘关系，所以Ainsworth把这类真菌成立为一个亚门。这类真菌具有能游动的带鞭毛的孢子。 二、形态特征： （一）营养体： 1、由简单到复杂，低等到高等鞭毛菌的形态差别很大，单细胞→单细胞具须→单细胞具无隔无核的根状菌丝→发达的、无隔、分枝繁茂的菌丝体。 2、整体产果holocarpic或分体产果eucarpic。低等的种类为单细胞，兼营养和繁殖二种功能，称为整体产果式；较高等的种类营养和繁殖分工，菌体的一部分形成繁殖体。分体产果有单元式和多元式，单元式即部分菌体产生一个繁殖中心，有寄主体内生和寄主体外生；多元式即部分菌体产生多个繁殖中心，如壶菌目中的节壶菌属Physoderma的休眠孢子为多元式，孢子囊则为单元式。 3、在较高等的种类中老菌丝或繁殖器官的基部都有分隔，隔膜是封闭式的。 4、寄生性陆生菌菌丝，生在寄主的细胞内或细胞间隔，以吸器穿入寄主的细胞内吸养。较低等的寄生陆生菌在寄主细胞内分出根状菌丝，为纤细无核、分枝或不分枝的细丝，有吸养和维系菌体在寄主上的作用。 (二）无性繁殖：无性繁殖体为游动孢子囊，内生游动孢子。游动孢子囊的形状是分属的特征之一。 1、游动孢子囊或孢子囊： 1）产生游动孢子，游动孢子囊间生、顶生，单生或串生。 2）形状：丝状、棒状、柱形、圆形、洋梨形、卵形等，有大型和小型之分。 3）脱落或不脱落，萌发生多个游动孢子，或直接产生芽管。霜霉目在孢子囊成熟时，从孢囊梗上脱落下来，随风传播，这种孢子囊的作用和分生孢子相同，因此又称为分生孢子囊或分生孢子。 （小型游动孢子囊：不产生游动孢子，萌发生芽管，有人称为分生孢子囊。因为这种游动孢子囊以有丝分裂的方式产生，故又称为有丝分裂孢子囊）。 2、游动孢子： 1）形成方式：是以液泡割裂的方式或称作原生质割裂的方式在孢子囊内或在泡囊（泄胞）内形成。 2）类型：具前、后、单、双4类鞭毛，后生尾鞭、前生茸鞭、尾鞭形不等长双鞭毛（游动时长的向后、短的向前）、前茸后尾等长双鞭毛。
野生药用真菌的药用价值
野生药用真菌的药用价值 北京陈康林野生真菌研究院 陈康林 自1929 年英国细菌学家亚历山大·弗莱明第一次从青霉菌中发现青霉素后, 真菌的药用价值在国际上日益受到重视.。青霉素广泛应用已近50 多年。60 年代发展起来的新抗菌素叫头孢霉素, 又称先锋霉素, 已广泛应用于临床。自1930 年德国人发现担子菌有抑瘤活性以来, 特别是日本人于1968 年报道了桑黄子实体的提取物对小鼠肉瘤的抑制率为96.7%之后, 全世界掀起了从真菌中寻找抗癌药物的热潮, 证明500多种真菌具有显著的抑瘤活性。 我国真菌资源十分丰富, 可药用的真菌就达上千种。目前，中国药用及包括实验有效的大型真菌就有500多种。民间利用真菌入药有着悠久的历史, 具有丰富而宝贵的经验, 已有许多真菌被用作生药或制成中成药应用。现将真菌的药用价值按主要的药理作用分述如下。 1 抗癌作用 我国民间利用某些真菌治疗癌症, 如木蹄层孔菌、烟色烟管菌、桑黄、黄柄笼头菌和树舌、云芝、桦褐孔菌、粗褐孔菌、薄皮纤孔菌、黑盖木层孔菌等。自从LucasE . H . (1957)发现美味牛肝菌可抑制小白鼠肿瘤之后, 引起世界各国科学家的重视, 研究发现许多真菌具有抗肿瘤活性。陈康林等人编著的《中国抗肿瘤大型药用真菌图鉴》一书中收集抗肿瘤药用真260种, 其中有18个种的真菌对小白鼠肉瘤S-180和艾氏腹水瘤的抑制率达100 %。 紫杉醇是抗卵巢癌的新药, 是用紫杉树皮提取制备的。美国蒙大拿州立大学的植物病理学家G ar y St ro hi e 和化学家Andrea Stierle 发现紫杉树皮缝中的一种真菌能产生抗癌药紫杉醇。该真菌被命名为Taxolny ce ; andreana。通过深层发酵法可生产紫杉醇。 2 抗菌抗病毒 3 发汗解热 4 助消化作用 5 健胃作用 6 利胆保肝 7 通便 8 降血压 9 降血脂 10 降血糖 11 抗血栓 12 抗心律失常
真菌、细菌、病毒详细特征介绍
真菌、细菌、病毒详细介绍 一、真菌病害 1、定义 真菌性病害是个庞大的家族，在蔬菜上出现的约有1000种，常见的有800种左右，占整个蔬菜病害的80%，所以看到一种病害首先要考虑其是不是真菌性病害。真菌病害是目前已知病害中种类最多的病害，约占病害种类的80%-90%，各类病害中以真菌病害的症状类型最多，可以出现在植物的各个部位。真菌病害的症状特点是在受害部位出现真菌的繁殖器官，真菌在植物上形成的特征称为病症，是诊断病害是否属于真菌病害的主要依据。 真菌病害的症状有的十分明显，可以用于诊断病害的种类和真菌的种类，有的可以用病症和植物受害部位特征（病状）相互配合来初步诊断病害种类，的要将病症在显微镜进行观察，鉴定病菌种类，再诊断病害种类。真菌病害症状的出现时间不一，有的病害初期就出现明显的病症，有的在病害的后期才出现病症，有的病害的初期症状与后期症状相似，有的病害初期和后期症状差别很大。这些特点在真菌病害鉴定上起着决定性作用。因此在真菌病害标本采集时真菌必须要有完整的病害症状。 2、常见症状 （1）白粉类：在花、果、叶及嫩枝上覆盖白色粉状物，后期在白粉物上出现散生状针头大的颗粒，颗粒由白变黄，最后变黑。这类病害通称白粉病，是子囊菌中的白粉菌引起。如狭叶十大功劳白粉病、月季白粉病、紫薇白粉病。
（2）煤污：在叶、枝、果实表面覆盖一层煤烟状物，很易用手擦去。常称为煤污病。这种病害发生通常与蚜虫、木虱、蚧虫密切相关，病菌大多属于子囊菌中的小煤菌目和煤菌目，半知菌中的多种病菌。如枸骨煤污病、大叶黄杨煤污1病。 （3）锈粉：叶、果、枝、干上出现疣状、条状、毛状或毡状突起，后期常破裂，散出淡黄色、桔黄色、锈褐色或黑色粉状物，是病菌不同阶段的孢子，常称为锈病。病菌属于担子菌中的锈菌目。如杨树锈病、梨锈病。 （4）霜霉：可为害叶、果、嫩枝，以叶片最为明显，在叶片背面形成灰白色霜状物，霜状或稀或密，叶片正面往往黄色，无明显边缘，常称为霜霉病，病菌属于霜霉属。如葡萄霜霉病、月季霜霉病。 （5）白绢：通常危害靠近土面的叶、茎、根颈，环境潮湿时产生白色绢丝状菌丝，干燥时菌丝易消失，后期产生油菜籽大小的菌核，菌核初期乳白色逐渐变黄变褐，常称为白绢病。病菌属于半知菌中的小菌核菌。如马蹄筋白绢病、白三叶草白绢病、结香白绢病。 （6）斑点：花、果、叶上局部组织患病死亡后出现的症状。形状有角斑、圆斑、条斑、不规则斑，颜色有灰色、褐色、红色，有的病斑边缘和中间颜色一致，有的不一致，病斑大小不一。根据病斑形状、颜色、大小名称为圆斑、角斑、灰斑、褐斑、黑斑、轮纹、枯斑等等病名，后期病斑上出现霉层、黑点等各种颜色、形状、病症、霉层类病菌大多属于半知菌的丛梗孢目。如大叶黄杨叶斑病、西府海棠叶斑病。小点状类病菌大多属于半知菌的球壳孢目和圆盘孢目，如桂花枯斑病，山茶灰斑病。 （7）炭疽：与斑点相似，但颜色常常是黑褐色，病斑上有轮生状排列的小黑点，潮湿时黑点出现粉红色胶状黏液，其是炭疽病特有的症状。炭疽病也出现在果实，茎干和芽上。病菌属于半知菌的黑盘孢目刺盘孢属。如葡萄炭疽病。
药用真菌应用
药用真菌的应用 唐为芷 摘要：药用真菌是指能治疗疾病，具有药用价值的一类真菌，即对人体有保健作用，对疾病有预防，抑制或治疗价值的真菌。其中有一些种类不仅具有医疗保健作用，还可以食用，被称为药食兼用真菌，广义都称为药用真菌。 关键词：治疗疾病，医疗保健，真菌 它们在生长、发育的代谢活动中，能于菌丝体、菌核或子实体内产生酶、蛋白质、脂肪酸、氨基酸、肽类、多糖(见碳水化合物)、生物碱、甾醇、萜类、苷类以及维生素等具有药理活性或对人体疾病有抑制或治疗作用的物质，临床上或是直接利用菌丝体、菌核或子实体，或是利用从菌体中分离出来的有效物质。 1 药用真菌的分类 药用真菌按其功效可分成滋补强壮类：如冬虫夏草、银耳、灵芝等；利尿渗湿类：如猪苓、粟白发等；止血活血消炎祛痛类：如麦角、肉球菌、木耳、安络小皮伞、马勃、朱红栓菌；止咳化痰类：如金耳、竹黄；安神类：如茯苓；驱虫类：如雷丸；祛风湿类：如空柄假牛肝菌、大红菇；平肝息风类:如蝉花、变绿红菇；降血压类:如草菇；调节机体代谢类：如蜜环菌、香菇、鸡油菌等。 2.药用真菌在我国传统医药中的应用 早在2500年前，我们的祖先岁还未能解释一些真菌治病的机理，但已知道用神曲治疗消化不良，饮食停滞等疾病，用霉菌治疗疮等疾病。随着抗生素的发现，才弄清某些霉菌对疮作用的机制，使过去一些实践医疗经验升华到现代医学的理论水平。在传统的中医中药中，应用最多的还是一些大型真菌，如灵芝，茯苓，猪苓等。 东汉末年编制的《神农本草经》共记载中药365种，其中就有茯苓，猪苓，雷丸等10余种真菌药物。南北朝时期陶弘景编辑的《本草经集注》与《名医别录》，以及唐宋年间编著的本草中，除记载有茯苓，雷丸，木耳等外，还增添了马勃，蝉花，银耳等，对真菌药物的记载也更加明确。明代著名的医药学家李时珍编著的《本草纲目》，载药1892种，据不完全统计，其中有药用真菌40余种，如香菇，马勃，茯苓，猪苓，雷丸，木耳等，并将历代本草中记载的真菌药物归类，大部分收载于菜部卷中，说明李时珍已注意到有些药用真菌同时具有食用的价值，并根据其功效作用进行了较详细的描述。在清初汪昂的《本草备要》中，最早论述了冬虫夏草的药用价值。这些被历代要药物学家推崇的大型真菌，并不断发展，成为我国医药宝库中不可分割的重要组成部分。 3.药用真菌在医疗保健中的应用价值。 3.1 药用真菌药理作用 药用真菌及其代谢产物具有多种生理活性，国内外学者进行过很多研究，其主要药理作用有：
种子真菌危害
种子真菌危害 真菌可穿入植物的角质层和表皮而致病。真菌病是植物病害中最多的一类病害，每种作物都有几种真菌病害，多的达几十种。常见的有黑粉病、锈病、白粉病和霜霉病等。但有些真菌对其他病原物有拮抗作用；有些寄生在其他病原物或昆虫上，对自然界中病原物和害虫的消长有一定影响。种子病害的处理方法１．筛选。当种子中夹杂的虫瘿、活虫数量比较多时，可用过筛的方法清除其中夹杂的病虫。过筛时需根据种粒和被除物的大小、形状，选择筛孔适宜的筛子才符合要求。同时，还可以利用筛子旋转的物理作用，除去不饱满种粒以及其他杂物。２．风选。带病种子或病原物的重量往往比健康种子重量轻，所以依靠风扇或自然风力就能将较轻的坏种子、病原物以及其他杂物分离出去。但用该法只能淘汰部分病种或病原物。３．手选。种子量少时，可以请有经验的人员通过肉眼或用放大镜观察，将病粒、虫粒、菌核、虫瘿、瘪粒挑选出来。４．水选。利用比重原理淘汰病粒、虫粒和其他杂物。常用的方法有清水选和盐水选两种。①清水选：晴天或天气干燥时，在容器内放足水，倒入种子进行搅拌，之后捞去浮在上面的轻种、杂质，最后捞出下沉的种子晾干。操作时动作要迅速，以免病原物因长时间浸水而下沉，从而影响水选效果。②盐水选：与清水选相比能较完全地分离出残余物，选种结果较精细。盐水的浓度应根据不同种子以及对处理的要求来决定。例如，对柠条和皂荚种子可用０．５％～１％的食盐水选种。用盐水处理的时间不宜过长，否则会影响处理效果和种子的发芽率。经过处理的种子，要用清水冲洗后充分晾干贮藏。温水处理利用温水的热量杀死附在种子表面以及潜藏在种子内部的病菌和害虫。使用该方法时要根据不同种子所要处理的对象的不同，在杀死害虫、病菌而又不伤害种子胚芽的情况下采用恰当的水温。如对落叶松种子，先将球果放于３０℃～４０℃温水中浸泡１０分钟，然后放在５０℃～５５℃的室内干燥３～４天，待果鳞干燥后取出脱粒，可杀死其中的广肩小蜂幼虫；对刺槐种子，用８０℃～１００℃的热水烫１～３分钟，可杀死刺槐种子小蜂幼虫；对多花木兰种子，用８０℃的热水浸１～３分钟，可烫死种子内的多花木兰种子小蜂幼虫等等。温水处理过的种子要及时晾干，贮藏待用。药剂处理１．药剂拌种。对有些种实害虫，可在种子堆上均匀喷洒化学药剂来将其杀死，也可用烟剂在仓库里熏蒸。２．药剂浸种。常用的浸种药剂有福尔马林、高锰酸钾、硫酸铜、漂白粉、石灰水等，浸种时间和药剂浓度因种子和病原的不同而不同，需经过试验确定。例如对种实霉烂的种子先用０．５％的高锰酸钾浸１５～３０分钟，然后再浸入４０％的甲醛溶液中１５分钟，取出后堆积两小时，用清水冲洗两次，可杀死其中的病原。３．药剂熏蒸。熏蒸是处理种子害虫的重要措施，主要用来防治害虫。常用的药剂有溴甲烷、磷化铝、二硫化碳和硫酰氟等。在室温下使一种或几种药剂气化，混合在空气中，达到一定浓度时就会使害虫中毒身亡。
真菌克星
【产品特点】 1.喷剂剂型，使用方便。 2.不产生耐药性，可长期反复使用，无需更改真菌的治疗方案。 3.因本品高效无毒，可直接作用在皮肤表面，故不怕宠物舔食。 4.使用本品治疗过程中宠物不会出现厌食症等临床症状。 5.疗效迅速，对真菌的治疗可达到立竿见影的效果。 【药理作用】 Ketoconazole——本品属吡咯类抗真菌药。本品的作用机制主要为高度选择性干扰真菌的细胞色素P-450的活性，从而抑制真菌细胞膜上麦角固醇的生物合成。 Fipronil——非泼罗尼是苯基吡唑类杀虫剂，对GABA支配的氯化物代谢表现出强烈的阻碍作用，干扰氯离子在中枢神经系统突触前后膜之间的正常传递，引起体外寄生虫中枢神经系统紊乱，导致死亡；以胃毒作用为主，兼有触杀和一定的内吸作用。对螨虫亦有很好的治疗作用。 Florfenicol——是在八十年代后期成功研制的一种新的兽医专用氯霉素类的广谱抗菌药【功能主治】用于治疗宠物真菌感染引起的皮肤病，对继发性螨虫及细菌的混合感染亦有很好疗效 【临床应用】 1.对小孢子真菌，马拉色菌及各类真菌感染都有很好的抑制及治疗 效果。 2.真菌在传统治疗过程中易对药物产生耐药性，需不断更换不同的 抗菌药物。真菌克星解决了传统治疗疗程长，疗效差，换药频繁等 问题。在根本上解决了真菌治疗的最大难点——耐药性的问题。 3.传统治疗方法中大剂量使用如灰黄霉素等抗生素会导致宠物厌食 ，降低宠物机体的抵抗力，更易导致其它并发症的发生。使用真菌 克星宠物不会产生耐药性，而且可以配合其它药物同时治疗。 4.真菌克星对螨虫、真菌、细菌的混合性感染也有明显的治疗效果 5.本品作用迅速，起效快，药效持久。
皮肤真菌感染的药物治疗及常用药物介绍
皮肤真菌感染的药物治疗及常用药物介绍皮肤真菌感染可分为浅部及深部二大类。浅部真菌病主要包括皮肤癣菌病如手癣、足癣、体癣、股癣、甲癣及头癣等，还有念珠菌病和花斑糠疹等，临床很常见。深部真菌病主要是皮下真菌病如孢子丝菌病、着色芽生菌病等，较为少见。 绝大多数限局性浅表的真菌感染都可使用外用抗真菌制剂治疗。这类外用药物较多，常用的有咪唑类药物如咪康唑、联苯苄唑、益康唑、酮康唑和克霉唑等。丙烯胺类药物如特比萘芬、萘替芬等，还有吗啉类阿莫罗芬和环吡酮胺等。水杨酸、苯甲酸、十一烯酸、冰醋酸等兼有角质溶解和抑真菌作用，也常用于治疗。剂型有乳膏、软膏、散剂、凝胶剂、溶液剂等(关于制型的选择)。 为了防止复发，治疗在感染症状消失后需再维持1～2周。为了减轻炎症反应，抗真菌外用制剂可与糖皮质激素配合成复合制剂，如益康唑曲安奈德软膏，复方酮康唑软膏等，由于并用的是中效至强效激素，因此此类复方制剂不能用于皮肤薄嫩处，更不能长期使用，以免产生皮肤萎缩等不良反应。对于顽固、泛发或有免疫功能缺陷的病例，可选用系统抗真菌药物治疗。如伊曲康唑一日100mg，连续15日，或100～200mg/次，一日2次，连续7天。也可用特比萘芬250mg/日，1～2周。 头癣及其药物治疗 头癣(tinea capitis)是由皮肤癣菌感染头皮及毛发所致的疾病。根据致病菌种类和宿主反应性不同可分为黄癣、白癣、黑点癣以及脓癣。头癣应采取综合治疗，即口服药物，外用药物以及剃发消毒联合应用。各项措施需配合进行，不可偏废，以免造成治疗失败。 口服药物灰黄霉素为首选药，儿童一日15～20mg/kg口服，成人0.6～0.8g/日，分３次口服，连续服药3～4周。若对灰黄霉素过敏或治疗失败的病例，可采用伊曲康唑、特比萘芬或氟康唑口服。伊曲康唑成人一日100～200 mg，儿童一日3～5 mg/kg，，餐后立即服用，疗程4～6周。特比萘芬成人一日250mg，儿童体重小于20kg者，一日62.5mg，体重20～40kg，一日125mg，疗程4～6周。脓癣治疗除内服抗真菌药物外，急性期可短期口服小剂量糖皮质激素，如有细菌感染需加用抗菌药，注意切忌切开引流。服药结束后进行真菌镜检，如病发真菌镜检仍阳性，需延长疗程。以后每10～14天复查１次，连续３次阴性后方可认为治愈。外用5%～10%硫磺软膏或其他抗真菌外用制剂，搽遍整个头皮，一日2次，连续2 个月。
(整理)抗真菌药联合应用的研究进展
摘要：随着致病真菌耐药的逐年上升，免疫抑制状态下严重真菌感染的增多，以及某些抗真菌药毒副作用大及选择范围小等原因，两种以上抗真菌药的联合应用是临床抗真菌治疗的发展方向之一。近年来抗真菌药联合应用进展较大，有很多联合用药已进入临床应用阶段。本文综述了不同种类抗真菌药联合应用的研究状况。 目前，抗真菌药主要有以下几类：（1）多烯类，如两性霉素B、制霉菌素等；（2）唑类，如氟康唑、伊曲康唑、酮康唑、伏立康唑（voriconazole）和泊沙康唑（posaconaz ole）等；（3）丙烯胺类，如特比萘芬、萘替芬等；（4）杂类，如核酸抑制剂5-氟胞嘧啶等；细胞壁抑制剂类，如尼可霉素Z、棘球白素等。从理论上讲，不同种类的抗真菌药有不同的作用机制和作用部位，联合应用可能有协同作用或相加作用，并可以减少单一用药的剂量及其毒副作用，缩短疗程，还可防止耐药的发生。现将近年来国外的研究进展作一综述。 多烯类与唑类合用 Louiee等先后通过体外实验发现两性霉素B 与氟康唑合用对白色念珠菌有拮抗作用。也有研究证实两性霉素B加咪康唑对光滑念珠菌有拮抗作用。Kontoyiannis等用E-te st方法证实伊曲康唑和两性霉素B对烟曲霉有拮抗作用。但Barchiesi等用棋盘微量稀释法发现，两性霉素B分别与伊曲康唑和氟康唑合用时对新生隐球菌主要表现为协同和相加作用，而且末发现有拮抗作用。 Louie等利用兔白色念珠菌感染模型发现两性霉素B与氟康唑合用表现为拮抗作用。随后又利用小鼠白色念珠菌感染模型发现两件霉素B和氟康唑对敏感株和中度耐药株的菌珠表现为拮抗作用，对氟康唑高度耐药的菌株则表现为相加作用。也有学者利用小鼠白色毛孢子菌感染模型发现两性霉素B与氟康唑合用有协同作用，可减少脏器菌荷量。Barchie si等在小鼠隐球菌病动物实验中也发现，两性霉素B和氟康唑合用可相互增强抗菌活性。
丝状真菌简介
丝状真菌简介 丝状真菌 - 概述 霉菌并不是一个生物分类学的名称，而是丝状真菌的通称，意即“发霉的真菌”。 丝状真菌的菌丝呈长管、分枝状，宽度2～10微米，可不断自前端生长并分枝，无横隔壁，具多个细胞核，并往往能形成分枝繁茂的菌丝体，但又不象蘑菇那样产生大型的子实体。在潮湿温暖的地方，很多物品上长出一些肉眼可见的绒毛状、絮状或蛛网状的菌落，那就是丝状真菌。丝状真菌常用孢子的颜色来称呼，如黑霉菌、红霉菌或青霉菌。 丝状真菌 - 菌落特征 A、形态较大，质地疏松，外观干燥，不透明，呈现或松或紧的形状。 B、菌落和培养基间的连接紧密，不易挑取，菌落正面与反面的颜色、构造，以及边缘与中心的颜色、构造常不一致。 C、菌丝有营养菌丝和气生菌丝的分化，而气生菌丝没有毛细管水，故它们的菌落必然与细菌或酵母菌的不同，较接近放线菌。 丝状真菌 - 菌丝 丝状真菌 构成丝状真菌营养体的基本单位是菌丝。菌丝是一种管状的细丝，把它放在显微镜下观察，很像一根透明胶管，它的直径一般为2~10微米，比细菌和放线菌的细胞约粗几倍到几十倍。菌丝可伸长并产
生分枝，许多分枝的菌丝相互交织在一起，就叫菌丝体。 类型 根据菌丝中是否存在隔膜，可把菌丝分成两种类型： 无隔膜菌丝：菌丝中无隔膜，整团菌丝体就是一个单细胞，其中含有多个细胞核。这是低等真菌（即鞭毛菌亚门和接合菌亚门中的霉菌）所具有的菌丝类型。 有隔膜菌丝：菌丝中有隔膜，被隔膜隔开的一段菌丝就是一个细胞，菌丝体由很多个细胞组成，每个细胞内有1个或多个细胞核。在隔膜上有1至多个小孔，使细胞之间的细胞质和营养物质可以相互沟通。这是高等真菌（即子囊菌亚门和半知菌亚门中的霉菌）所具有的菌丝类型。 菌丝变态 丝状真菌 为适应不同的环境条件和更有效地摄取营养满足生长发育的需要，许多丝状真菌的菌丝可以分化成一些特殊的形态和组织，这种特化的形态称为菌丝变态。 吸器:由专性寄生霉菌如锈菌、霜霉菌和白粉菌等产生的菌丝变态，它们是从菌丝上产生出来的旁枝，侵入细胞内分化成根状、指状、球状和佛手状等，用以吸收寄主细胞内的养料。 假根:根霉属霉菌的菌丝与营养基质接触处分化出的根状结构，有固着和吸收养料的功能。 菌网和菌环:某些捕食性霉菌的菌丝变态成环状或网状，用于捕捉