层析柱的一些总结

层析柱的一些总结
层析柱的一些总结

多数微生物碱性蛋白酶不耐热,碱土金属,特别是钙对碱性蛋白酶有明显的热稳定作用

碱性蛋白酶是加酶洗涤剂的主要添加剂之一,在丝绸、制革工业中也有广泛用途

热稳定性将酶液分别置于不同的温度条件下(30℃,40℃,50℃,60℃,70℃)保温10min 后,立即在0℃冰浴中冷却,然后在40℃下测碱性蛋白酶活力,以剩余的酶活性作为评价酶的热稳定性的指标。测量三个重复求平均值,将最高的酶活力定义为100%,分别计算不同温度条件下蛋白酶的剩余酶活性与最高酶活性的比值。

以ph7的缓冲液为例,如果你的目标蛋白等电点小于7,呢就带负电荷,用阴离子交换的柱子,如果是大于7,那选择阳离子交换的柱子,如果等电点是7,那上样的缓冲液pH大于它的等电点用阴离子,小于7的用阳离子,如此类推就可以

缓冲液的PH=pI值+1,上阴离子柱,=pI值-1,上阳离子柱,一般缓冲液ph范围在6.5~8.5之间,与PI值相差1个PH是比较理想的。

如果不清楚PI值,可以将蛋白溶到PH梯度的缓冲液里,然后分别试阳离子和阴离子填料(50ul左右得体积就够了),看那个PH下挂得好。

强离子交换剂: 在宽pH范围内载量稳定,所以他的优点是不同pH下载量恒定,可控性好,平衡过程快速、简单。

弱离子交换介质的缺点:适用的pH范围比较小,随着pH不同载量发生变化。但是大部分蛋白等电点在5.5 ~ 7.5 。因此强/弱离子交换介质都可以使用

弱离子交换介质(DEAE、ANX、CM)优点在于:和强离子交换介质的选择性不同,因此我们一般先使用强离子交换,如果优化条件还是达不到理想的分离效果,可以尝试弱离子交换,用选择性不同的介质尝试一下。

因此弱离子交换与强离子交换由于选择性不同,可以说是对不同蛋白的结合力有差异。S

技术规格

离子交换剂类型

Q Sepharose FF 季氨基,强阴离子

DEAE Sepharose FF 二乙基氨基乙基,弱阴离子

ANX Sepharose 4FF 二乙基氨基丙基,弱阴离子

SP Sepharose FF 磺丙基,强阳离子

CM Sepharose FF 羟甲基,弱阳离子

离子容量

Q Sepharose FF 0.18-0.25mmol(Cl-)/ml

DEAE Sepharose FF 0.11-0.16mmol(Cl-)/ml

ANX Sepharose 4 FF 0.13-0.18mmol(Cl-)/ml

SP Sepharose FF 0.18-0.25mmol(H+)/ml

CM Sepharose FF 0.09-0.13mmol(H+)/ml

动态载量

Q Sepharose FF 120mg HSA/ml 填料

DEAE Sepharose FF 110mg HSA/ml 填料

ANX Sepharose 4 FF 5mg 甲状腺球蛋白/ml 填料

SP Sepharose FF 70mg RNAase/ml 填料

CM Sepharose FF 50mg RNAase/ml 填料

压力/流速

Q Sepharose FF 400-700cm/h,100kpa,XK50/30层析柱,柱床高15cm

DEAE Sepharose FF 300-600cm/h,100kpa,XK50/30层析柱,柱床高15cm

ANX Sepharose 4 FF 至少200cm/h,100kpa,XK50/60层析柱,柱床高25cm

SP Sepharose FF 400-700cm/h,100kpa,XK50/30层析柱,柱床高15cm

CM Sepharose FF 300-600cm/h,100kpa,XK50/30层析柱,柱床高15cm

平均颗粒大小 90um(45-165um)

基质

Sepharose FF 高度交联琼脂糖,6%

Sepharose 4 FF 高度交联琼脂糖,4%

PH稳定性

Q Sepharose FF 1-14(短期),2-12(长期)

DEAE Sepharose FF 1-14(短期),2-13(长期)

ANX Sepharose 4 FF 2-14(短期),3-13(长期)

SP Sepharose FF 3-14(短期),4-13(长期)

CM Sepharose FF 2-14(短期),4-13(长期)

化学稳定性

在所有常用的水溶液缓冲液中稳定:8M尿素、6M盐酸胍、70%乙醇、1M NaOH和1M醋酸20%乙醇(Q , DEAE,ANX,CM ),含0.2M醋酸钠的20%乙醇(SP)

保存

保存温度4℃-30℃

l 1M NaOH和醋酸仅在清洗时使用

Phenyl-Sepharose HP

产品名称:苯基-琼脂糖凝胶6FF

性状:白色微球

凝胶类型:疏水层析介质

粒径:45-165μm

工作PH值:3-13

应用:疏水层析介质,快流速,适合生物大分子和疫苗的分离纯化等

产品名称:苯基-琼脂糖凝胶H.P.

性状:白色微球

凝胶类型:疏水层析填料

粒径:24-44μm

工作PH值:3-13

应用:疏水层析介质,高分辨率,适合生物大分子和疫苗的分离纯化等

产品名称:苯基-琼脂糖凝胶CL-4B

性状:白色微球

凝胶类型:疏水层析填料

粒径:45-165μm

工作PH值:3-13

应用:疏水层析介质,适合生物大分子和疫苗的分离纯化等。

产品名称:丁基-琼脂糖凝胶4FF

性状:白色微球

凝胶类型:疏水层析介质

粒径:45-165μm

工作PH值:3-13

应用:疏水层析介质,快流速,适合生物大分子和疫苗的分离纯化等

产品名称:丁基-琼脂糖凝胶H.P.

性状:白色微球

凝胶类型:疏水层析介质

粒径:24-44μm

工作PH值:3-13

应用:疏水层析介质,高分辨率,适合生物大分子和疫苗的分离纯化等

产品名称:丁基-琼脂糖凝胶4B

性状:白色微球

凝胶类型:疏水层析介质

粒径:45-165μm

工作PH值:4-8

应用:疏水层析介质,适合生物大分子和疫苗的分离纯化等

产品名称:辛基-琼脂糖凝胶4FF

性状:白色微球

凝胶类型:疏水层析介质

粒径:45-165μm

工作PH值:3-13

应用:疏水层析介质,快流速,适合生物大分子和疫苗的分离纯化等

产品名称:辛基-琼脂糖凝胶H.P.

性状:白色微球

凝胶类型:疏水层析介质

粒径:24-44μm

工作PH值:3-13

应用:疏水层析介质,高分辨率,适合生物大分子和疫苗的分离纯化等

产品名称:辛基-琼脂糖凝胶CL-4B

性状:白色微球

凝胶类型:疏水层析介质

粒径:45-165μm

工作PH值:3-13

应用:疏水层析介质,适合生物大分子和疫苗的分离纯化等

HPLC内容:

1、反相柱子:一般适用范围比较大。分离极性比较小的物质。极性强的物质先出柱。

ODS就是C18柱子。

RP-8和RP-18分别是C18柱子和C8柱子。

C18柱子和C8柱子是柱子的碳链的长度不一样的。

碳链增长了,也增加了键合相的非极性作用的面积,对保留值和选择性都有影响,随烷基碳链的增长对溶质分离的选择性也增强了.但是对单一或简单组分确实看不出太大区别。

2、正相柱子:一般分离光学异构体和反相柱子不能分离的极性比较大的物质。

APS为NH2柱子

另外diol 代表的是球形硅胶邻二羟基丙基醇基柱,正相柱,极性强的物质后出。

硅胶柱子的特点是可分离异构体,柱子的载样量大,用于制备分离,不污染收集的流分了,缺点是分析应用不方便,如流动相的含水量应该严格控制,再现性较差,需较长的平衡时间,不适用于梯度洗脱。

碱性化合物在氨基和二醇柱上的保留强,而偶极化合物在腈基柱子上的保留强。

建议您看看色谱分析等专业书籍有帮助的。

ODS-A

ODS-A液相色谱柱是国际上是销售最好的一种传统色谱柱,同时也是HPLC中应用最广泛的应用。YMC ODS-A液相色谱采用高度封端的表面结构和具有适当的疏水性,广泛地应用于多种化合物的分离。在严格质量控制体系下,对50个以上的参数进行严格控制,保证了稳定的质量。其通常作为液相色谱标准柱。ODS-AM

ODS-AM液相色谱柱是一种高碳含量的C18柱,具有和ODS-A液相色谱柱相似的选择性。二者的主要区别是ODS-AM液相色谱柱采用的是专利的封端技术,采用十分严格的生产技术规范,可提供优良的峰对称性和更高分离效果的重现性,从而改善较难分离组分的峰形。

ODS-AQ

ODS-AQ液相色谱填料具有中等强度的疏水性和氢键键合相色谱填料,由于其具有相对高的疏水性,其与ODS-A相比有不同的保留行为,其主要用于碳水化合物的分离,如寡聚多糖类、葡萄糖苷类、药物和天然化合物的分离。

ODS-AL

ODS-AL液相色谱柱不仅具有疏水基团的相互作用,而且还具备由硅醇基产生的第二级相互作用,这使其与传统的ODS不同的选择性。当离子间相互作用被优化后,特别推荐用于流动相中含有缓冲液的色谱分离,可以获得高重现性的色谱图。YMC-Pack ODS-AL液相色谱柱采用的是没有封端的高碳含量单层

C18相,其只能在残存的硅醇基活性有利于色谱分离时使用,由于容易发生拖尾峰,不推荐在分析胺类或含碱性基团的化合物中使用。

ODS H80, M80, L80

ODS液相色谱填料是一种以硅胶为载体的三种配基覆盖率不同的ODS填料,不同配基覆盖率将影响馏出物中疏水组分的保留行为,馏出物的官能基团或三级结构将决定分离行为的结果。J'sphere ODS液相色谱

填料几乎不需要考虑疏水性和氢键键合相之间的相互作用,如离子或相互作用,其多用于分离条件的测定。

色谱柱考虑的问题首先是填料的问题,大多数用于HPLC分离的柱填料使用硅胶填料,基于多孔聚合物担体与键和的有机表层(如C18&C8),应用范围较广,颗粒的大小(粒度)在HPLC中极为重要,约5um 的微粒直径兼顾了分析柱的柱效,反压和寿命。更小的多孔微粒对快速分离很有用。小至1.5um的薄壳微粒对极快速地分离蛋白质等大分子较有用。较窄地粒度分布能保证填充床地稳定、高效和压力降最小。总的来说,3或5um全多孔微球填充HPLC色谱柱,能满足大多数分离地需要。

色谱柱地性能指标主要考虑:理论塔板数,峰不对称因子(AS),两种不同溶质地选择性,色谱柱地反压,保留值地重现性,键和相浓度,色谱柱地稳定性。

有几点看法:

1)本人认为,C18是连接了18烷基碳链的反相固定相的总称.ODS 是以硅胶为基质键合的C18填料,而C18还包括其他基质的填料,比如高聚物小球为基质,氧化铝为基质,氧化锆为基质等键合C18链形成的反相固定相,这些可以称为"C18",但是不是ODS.

2)RP- 18也是C18中的一种,不同的公司对C18填料有不同的商业名称,本质应该都是一样的.Merck公司的填料喜欢叫RP-18. 比如Merck 的LiChrospher RP-18, Superspher RP-18,Purospher RP-18. 因此,我认为说"RP-18"是改进型的不妥当.Merck的改进表现在前边的名字上,比如LiCHrospher, Superspher, Purospher表现的是不同的性能.

3) "普通ODS分析酸性、中性或弱碱性化合物时均可以获得较佳的峰不对称度。但当分析药物化合物中的强极性含氮的碱性样品时,样品峰形就极差,拖尾严重,定量分析精度下降",这句话我认为值得商榷.普通的ODS,在分离中性化合物,极弱性的酸或硷化合物的时候可以得到较好的峰形,对于弱至中等极性的酸碱化合物,多数情况下会出现不同程度的拖尾.对于强极性化合物,不单是药物,其他化合物一样,都会出现严重的拖尾现象

再次修改,除掉了不太相关的BDS,应该说论述比较全面了。

C18(C-18)、RP18(RP-18)、ODS有什么区别?

答:C18(C-18)、ODS、RP18(RP-18)的写法一般人从表面上理解没多大的区别,三者之间常常混用,但在具体的不同场合,从严格意义上讲,还是有一定的区别。

一般认为C18是连接了18烷基碳链的反相固定相的总称,除了硅胶基质外,还可以包括其他基质的填料,比如高聚物小球为基质,氧化铝为基质,氧化锆为基质等键合C18链形成的反相固定相。

而ODS 是以硅胶为基质键合的C18填料。因为大部分的C18柱是硅胶基质,因此,在很多场合内二者混为一体。

ODS其后所标的1、2、3、4、5有的是指含碳的不同,有的是不同代的替换产品,如Spherisorb的ODS-1是指未经封尾处理的,含碳量为5.75%,ODS-2是经封尾处理的,含碳量为11.5%。不同厂家的ODS柱性能差异很大。

RP 在不同厂家中使用的含义也不太一致,在waters的色谱柱中,RP18(8)是指经过改进的新型C18(8)柱,其不同在于在经典直链配体之间内嵌极性基团,其选择性同C18(8)有了很大的差异,特别是对含酚基官能团的化合物。Agilent的Bonus-RP柱中RP的含义同Waters。但是在Merck公司的色谱柱中,RP-18同C18意义相同,包括硅胶基质、氧化铝基质、及一体化的Chromolith柱。

因此,光从C18(C-18)、RP18(RP-18)、ODS很难区别不同厂家色谱柱之间结构上的差异,最好从有关厂家的资料中寻找。

层析柱使用方法

层析柱使用方法 层析柱使用方法柱层析和TLC是有机化学工作者必须下苦功夫的两项实验技术。这两项技术掌握与否,对于提高实验的效率至关重要。常见的例子是:在柱层析时,由于层析柱中的硅胶填料装得不均匀(没有填严实),使得柱子在淋洗过程中就因为出现太多气泡变花,导致分离效果不好。更常见的例子是:层析柱虽然装得不错,但是由于淋洗剂选择不恰当,结果导致几十毫克产品,用了几百毫升淋洗剂都还没有完全分离。分离同样的东西,熟手可能只需要半个小时,而一个层析技术不过关的人可能半天都不能得到纯品。由此可见,这两项技术掌握与否,对于提高工作效率,减轻工作量,减少有机溶剂的使用,从而对身心健康和环境保护都有明显的作用。柱层析关键在于柱子是否装好和淋洗剂是否选择恰当。而淋洗剂的选择则是通过TLC确定。这里要指出的一点是:TLC的作用除了跟踪反应进程,检测试剂和原料纯度外,一个重要的用途就是为柱层析选择适当的淋洗剂。 首先谈柱层析: 1:装柱子(添硅胶)时,有两种方法:即湿法装柱和干法装柱,二者各有优劣。不论干法还是湿法,硅胶(固定相)的上表面一定要平整,并且硅胶(固定相)的高度一般为15cm左右,太短了可能分离效果不好,太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。 湿法装柱:是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后,再填入柱子中,然后再加压用淋洗剂“走柱子”,本法最大的优点是一般柱子装的比较结实,没有气泡。 干法装柱:则是直接往柱子里填入硅胶,然后再轻轻敲打柱子两侧,至硅胶界面不再下降为止,然后再填入硅胶至合适高度,最后再用油泵直接抽,这样就会使得柱子装的很结实。接着是用淋洗剂“走柱子”,一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。通常上面加压,下面再用油泵抽,这样可以加快速度。干法装柱较方便,但最大的缺陷在于“走柱子”时,由于溶剂和硅胶之间的吸附放热(可以用手摸柱子明显感觉到),容易产生气泡,这一点在使用低沸点的淋洗剂时如乙醚,二氯甲烷更为明显。虽然产生的气泡在加压的情况下不易察觉,但是,一旦撤去压力,如在上样、加溶剂等操作的时候,气泡就会释放出来,严重时,整个柱子变花,样品不可能平整地通过,当然也就谈不上分离了。解决的办法是:第一、硅胶一定要天结实;第二、一定要用较多的溶剂“走柱子”,一定要到柱子的下端不再发烫,恢复到室温后再撤去压力。也有介绍在硅胶的最上层填上一小层石英砂,防止添加溶剂的时候,使得样品层不再整齐。但我的感觉是如果小心上样,添加溶剂,则没有这个必要。 2:上样也有干法和湿法之分:干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后,在加入少量硅胶,拌匀后再旋去溶剂。如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。干法上样较麻烦,但可以保证样品层很平整。湿法上样就是用少量溶剂(最好就是展开剂,如果展开剂的溶解度不好,则可以用一极性较大的溶剂,但必须少量)将样品溶解后,再用胶头滴管转移得到的溶液,沿着层析柱内壁均匀加入。然后用少量溶剂洗涤后,再加入。湿法较方便,熟手一般采用此法。上样完毕后,接着即用淋洗剂淋洗。淋洗剂一般采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。由于层析柱和薄板的不同,即使两者使用的硅胶都相同,但是在把TLC分析得到的展开剂用在柱层析时,也显得极性偏大,所以要稀释一倍,但又不能稀释太多,否则成了靠扩散作用来分离,效果也不会好。 谈TLC,需要切记的是: 第一、某种样品在这种展开剂中只显示一个点,并不等于在别的展开剂中也只显示一个点。因此在寻找展开剂时,多尝试几种比例不同,成分不同的展开剂。展开剂的极性太小,点分不开,极性太大,也分不开.一般以目标产物的Rf值在0.3左右为最佳。 第二、点不能点得太浓,否则容易重叠,不易判断,因为如果两个点相近的话,一浓就变成一个点第三、板上点的展开的清晰程度和溶剂的极性和物质在该溶剂中的溶解性有关,只有两者比较合适了,才能有一个交好的分离效果。 选择适当的展开剂是首要任务.一般常用溶剂按照极性从小到大的顺序排列大概为:石油迷

过柱子我的经验总结

过柱子经验总结 Swrl20041219据网络资源整理支持小木虫 1、选柱子:现在见到的柱子径高比一般在1:5-10。 2、称量:100-300目硅胶,称30-70倍于上样量;如果极难分,也可以用100 倍量的硅胶书中写硅胶量是样品量的30-40倍,具体的选择要具体分析。如果所需组分和杂质分的比较开(是指在所需组分R f在0.2--0.4,杂质相差0.1以上),就可以少用硅胶。 3、选洗脱剂:一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。极性小的用乙酸乙酯:石油醚系统;极性较大的用甲醇:氯仿系统;极性大的用甲醇:水:正丁醇:醋酸系统。要使所需点在Rf值在0.2-0.3左右的比较好。常用溶剂的极性顺序:石油醚<环己烷/己烷<苯乙醚<氯仿<乙酸乙酯<正丁醇<丙酮<乙醇<甲醇<水。 一般把两种溶剂混合时,采用高极性/低极性的体积比为1/3的混合溶剂。拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸。乙酸乙酯/石油醚= 4:1可用TLC分开。乙酸乙酯和石油醚(60-90)。 4、搅成匀浆:先把硅胶泡在烧杯中,用干硅胶体积一倍的溶剂泡,用超声波超半个小时,中间看到气泡时用玻璃棒搅一下。如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系,就用石油醚拌;如果洗脱剂是氯仿/醇体系,就用氯仿拌。 5、装柱: A、用溶剂把柱子饱和一次,因为溶剂和硅胶饱和时放出的热量可能使产品分解。 B、将柱底用棉花塞紧,不必用海沙,加入约1/3体积石油醚(氯仿),装上蓄液球,打开柱下活塞,将匀浆一次倾入蓄液球内。随着沉降,会有一些硅胶沾在蓄液球内,用石油醚(氯仿)将其冲入柱中。 C、装柱时一定要保证无气泡,同时敲打柱体使柱体更均匀、紧凑,装毕,用洗脱液冲三次。 6、压实:装柱完后,加入更多的石油醚,用双联球或气泵加压,直至流速恒定。柱床约被压缩至9/10体积。无论走常压柱或加压柱,都应进行这一步,可使分离度提高很多,且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂。 7、上样:干法湿法都可以。

2017年高速公路公司工作总结

2017年高速公路公司工作总结 7 2017年是公司成立的第一年,短短两个月内,在总公司和王董事长的关心支持下,XX公司完成了筹划、组建、发展,各项工作已经走上正轨,完成通行费收入元,基本实现了征收目标。以下就各项具体工作进行汇报: 一、完成的工作 (一)、组建工作:目前,公司已经完成了办公楼搬迁和基本办公用品的配置,人员全部到岗,收费站、监控中心、公司机关日常工作已有条不紊地展开。 1、确保办公用品齐全。为了确保收费、机关的办公设施全面及时到位,公司班子领导带领中层人员多次到商开学习调研,通过实地查看咨询,结合我公司实际情况,制定购买计划,列出预算,经反复比较价格、质量,较快地配置齐全了基本办公用品,有效地确保了工作的顺利开展。 2、办公设施搬迁。因工作需要,公司办公地点由交通局搬迁至监控中心综合楼,搬迁前公司作出了详细的计划,将公司固定资产进行登记,搬迁中全程监控,有效地保证了公司的财产安全。 3、人员调配。我们对公司人员进行了一次摸底,然后根据每位同志的年龄、知识结构、身体条件等因素,为每位安排了最

适合的岗位,做到人尽其才,才尽其用。 (二)、自身建设:内强素质,外树形象为了适应XX高速公路运营工作的需要,全面提高员工素质,树立XX高速良好形象,公司组织了富有成效的自身建设工作。 1、军训。我们参加了省高发组织的军事训练。军训中同志们抱定“流血流汗不流泪,掉皮掉肉不掉队”的思想,列队列,站军姿,走正步,刻苦训练,轻伤不下火线,强健体魄,培养了团队精神,并光荣参加了省高发公司组织的阅兵仪式,受到教官和省高发公司领导的一致赞扬。 2、业务培训。为巩固业务知识,同志们分散到商开公司各收费站,学习,实践。他们以商开工作人员为师,认真学习、虚心请教,亲手实践,很快掌握票卡管理、车型辨认、事故处理等运营管理基本技能,为下一步上岗打下良好的基础。 3、革命传统教育。在公司领导的带领下,全体员工参观了焦裕禄同志事迹展览,看着焦书记带领兰考人民在极端恶劣的条件自力更生艰苦奋斗,同志们的心灵受到了强烈地震撼,纷纷表示,一定要学习好焦裕禄精神立足本职,扎根岗位、搞好工作。 4、开展“我为谁工作”大型讨论活动,开展投稿、演讲、劳动竞赛手段,改变工作观念。首先,在工作上变“要我工作”为“我要工作”,激发广大员工的工作热情,以建立全员参与机制和完善激励机制为手段,调动广大员工参与劳动竞赛积极性,为公司运营管理提供强劲动力。其次,组织开展劳动竞赛,以提

层析柱的一些总结

多数微生物碱性蛋白酶不耐热,碱土金属,特别是钙对碱性蛋白酶有明显的热稳定作用 碱性蛋白酶是加酶洗涤剂的主要添加剂之一,在丝绸、制革工业中也有广泛用途 热稳定性将酶液分别置于不同的温度条件下(30℃,40℃,50℃,60℃,70℃)保温10min 后,立即在0℃冰浴中冷却,然后在40℃下测碱性蛋白酶活力,以剩余的酶活性作为评价酶的热稳定性的指标。测量三个重复求平均值,将最高的酶活力定义为100%,分别计算不同温度条件下蛋白酶的剩余酶活性与最高酶活性的比值。 以ph7的缓冲液为例,如果你的目标蛋白等电点小于7,呢就带负电荷,用阴离子交换的柱子,如果是大于7,那选择阳离子交换的柱子,如果等电点是7,那上样的缓冲液pH大于它的等电点用阴离子,小于7的用阳离子,如此类推就可以 缓冲液的PH=pI值+1,上阴离子柱,=pI值-1,上阳离子柱,一般缓冲液ph范围在6.5~8.5之间,与PI值相差1个PH是比较理想的。 如果不清楚PI值,可以将蛋白溶到PH梯度的缓冲液里,然后分别试阳离子和阴离子填料(50ul左右得体积就够了),看那个PH下挂得好。 强离子交换剂: 在宽pH范围内载量稳定,所以他的优点是不同pH下载量恒定,可控性好,平衡过程快速、简单。 弱离子交换介质的缺点:适用的pH范围比较小,随着pH不同载量发生变化。但是大部分蛋白等电点在5.5 ~ 7.5 。因此强/弱离子交换介质都可以使用 弱离子交换介质(DEAE、ANX、CM)优点在于:和强离子交换介质的选择性不同,因此我们一般先使用强离子交换,如果优化条件还是达不到理想的分离效果,可以尝试弱离子交换,用选择性不同的介质尝试一下。 因此弱离子交换与强离子交换由于选择性不同,可以说是对不同蛋白的结合力有差异。S 技术规格 离子交换剂类型 Q Sepharose FF 季氨基,强阴离子 DEAE Sepharose FF 二乙基氨基乙基,弱阴离子 ANX Sepharose 4FF 二乙基氨基丙基,弱阴离子 SP Sepharose FF 磺丙基,强阳离子 CM Sepharose FF 羟甲基,弱阳离子 离子容量 Q Sepharose FF 0.18-0.25mmol(Cl-)/ml DEAE Sepharose FF 0.11-0.16mmol(Cl-)/ml ANX Sepharose 4 FF 0.13-0.18mmol(Cl-)/ml SP Sepharose FF 0.18-0.25mmol(H+)/ml CM Sepharose FF 0.09-0.13mmol(H+)/ml 动态载量 Q Sepharose FF 120mg HSA/ml 填料 DEAE Sepharose FF 110mg HSA/ml 填料 ANX Sepharose 4 FF 5mg 甲状腺球蛋白/ml 填料 SP Sepharose FF 70mg RNAase/ml 填料 CM Sepharose FF 50mg RNAase/ml 填料

合成过柱子经验谈

关于柱层析和TLC之我的体会 层析和TLC是有机化学工作者必须下苦功夫的两项实验技术。这两项技术掌握与否,对于提高实验的效率至关重要。常见的例子是:在柱层析时,由于层析柱中的硅胶填料装得不均匀(没有填严实),使得柱子在淋洗过程中就因为出现太多气泡变花,导致分离效果不好。更常见的例子是:层析柱虽然装得不错,但是由于淋洗剂选择不恰当,结果导致几十毫克产品,用了几百毫升淋洗剂都还没有完全分离。分离同样的东西,熟手可能只需要半个小时,而一个层析技术不过关的人可能半天都不能得到纯品。 由此可见,这两项技术掌握与否,对于提高工作效率,减轻工作量,减少有机溶剂的使用,从而对身心健康和环境保护都有明显的作用。 柱层析关键在于柱子是否装好和淋洗剂是否选择恰当。而淋洗剂的选择则是通过TLC确定。这里要指出的一点是:TLC的作用除了跟踪反应进程,检测试剂和原料纯度外,一个重要的用途就是为柱层析选择适当的淋洗剂。 首先谈柱层析: 装柱子(添硅胶)时,有两种方法:即湿法装柱和干法装柱,二者各有优劣。不论干法还是湿法,硅胶(固定相)的上表面一定要平整,并且硅胶(固定相)的高度一般为15cm左右,太短了可能分离效果不好,太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。 湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后,再填入柱子中,然后再加压用淋洗剂“走柱子”,本法最大的优点是一般柱子装的比较结实,没有气泡。 干法装柱则是直接往柱子里填入硅胶,然后再轻轻敲打柱子两侧,至硅胶界面不再下降为止,然后再填入硅胶至合适高度,最后再用油泵直接抽,这样就会使得柱子装的很结实。接着是用淋洗剂“走柱子”,一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。通常上面加压,下面再用油泵抽,这样可以加快速度。干法装柱较方便,但最大的缺陷在于“走柱子”时,由于溶剂和硅胶之间的吸附放热(可以用手摸柱子明显感觉到),容易产生气泡,这一点在使用低沸点的淋洗剂时如乙醚,二氯甲烷更为明显。虽然产生的气泡在加压的情况下不易察觉,但是,一旦撤去压力,如在上样、加溶剂等操作的时候,气泡就会释放出来,严重时,整个柱子变花,样品不可能平整地通过,当然也就谈不上

年度高速公路工作总结(精)

年度高速公路工作总结 200x年是公司成立的第一年,短短两个月内,在总公司和王董事长的关心支持下,商亳公司完成了筹划、组建、发展,各项工作已经走上正轨,完成通行费收入元,基本实现了征收目标。以下就各项具体工作进行汇报: 一、完成的工作 (一)、组建工作:目前,公司已经完成了办公楼搬迁和基本办公用品的配置,人员全部到岗,收费站、监控中心、公司机关日常工作已有条不紊地展开。 1、确保办公用品齐全。为了确保收费、机关的办公设施全面及时到位,公司班子领导带领中层人员多次到商开学习调研,通过实地查看咨询,结合我公司实际情况,制定购买计划,列出预算,经反复比较价格、质量,较快地配置齐全了基本办公用品,有效地确保了工作的顺利开展。 2、办公设施搬迁。因工作需要,公司办公地点由交通局搬迁至监控中心综合楼,搬迁前公司作出了详细的计划,将公司固定资产进行登记,搬迁中全程监控,有效地保证了公司的财产安全。

3、人员调配。我们对公司人员进行了一次摸底,然后根据每位同志的年龄、知识结构、身体条件等因素,为每位安排了最适合的岗位,做到人尽其才,才尽其用。 (二)、自身建设:内强素质,外树形象 为了适应商亳高速公路运营工作的需要,全面提高员工素质,树立商亳高速良好形象,公司支部了富有成效的自身建设工作。 1、军训。我们参加了省高发支部的军事训练。军训中同志们抱定“流血流汗不流泪,掉皮掉肉不掉队”的思想,列队列,站军姿,走正步,刻苦训练,轻伤不下火线,强健体魄,培养了团队精神,并光荣参加了省高发公司支部的阅兵仪式,受到教官和省高发公司领导的一致赞扬。 2、业务培训。为巩固业务知识,同志们分散到商开公司各收费站,学习,实践。他们以商开工作人员为师,认真学习、虚心请教,亲手实践,很快掌握票卡管理、车型辨认、事故处理等运营管理基本技能,为下一步上岗打下良好的基础。 3、革命传统教育。在公司领导的带领下,全体员工参观了焦裕禄同志事迹展览,看着焦书记带领兰考人民在极端恶劣的条件自力更生艰苦奋斗,同志们的心灵受到了强烈地震撼,纷纷

柱层析的一些心得

常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分离的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望能有所帮助。 1.吸附剂 常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、氧化镁、碳酸钙和活性炭等:吸附剂一般要经过纯化和活性处理,颗粒大小应当均匀。对吸附剂来说粒子小、表面积大,吸附能力就高,但是颗粒小时,溶剂的流速就太慢,因此应根据实际分离需要而定。供柱色谱使用的氧化铝有酸性、中性和碱性3种。酸性氧化铝是用1%盐酸浸泡后,用蒸馏水洗至氧化铝的悬浮液pH为4,用于分离酸性物质;中性氧化铝的pH约为7.5,用于分离中性物质;碱性氧化铝的pH约为10,用于胺或其它碱性化合物的分离。 因硅胶略带酸性,只能用于对酸不敏感的化合物的分离。常用300-400目的柱硅胶或H 硅胶。若化合物的R f值相差较大,则可考虑使用200-300目硅胶以加快层析速度。 另:因吸附剂的比表面较大,天气潮湿时或长期放置中吸附的水分会对分离效果产生极大的影响(相当于大大增加了固定相的极性导致样品分不开),因此应将吸附剂放入90~100度烘箱内烘2小时后,取出在干燥器中冷却后再使用。使用的硅胶,不用时一定要密封,防止吸潮。TLC所用的硅胶板一定要保存在干燥器里面,或使用前在红外烘箱里干燥一段时间。 2.溶质的结构与吸附能力的关系 化合物的吸附性与它们的极性成正比,化合物分子中含有极性较大的基团时,吸附性也较强,氧化铝对各种化合物的吸附性按以下次序递减: 酸和碱>醇、胺、硫醇>酯、醛、酮>芳香族化合物>卤代物、醚>烯>饱和烃 3.柱子可以分为:加压,常压,减压。 压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的,但是时间也最长,比如天然化合物的分离,一个柱子几个月也是有的。 加压柱是一种比较好的方法,与常压柱类似,只不过外加压力使淋洗剂走的快些。压力的提供可以是压缩空气,双连球是常用的手动加压的方法。特别是在容易分解的样品的分离中适用。压力不可过大,不然溶剂走的太快就会减低分离效果。个人觉得加压柱在普通的有机化合物的分离中是比较适用的。 体会:过柱时是否加压要具体分析,通常情况下直径比较粗的柱子用常压即可,因其横截面积的缘故淋洗剂的流速已足够快。通常控制柱子下端液体流速大约在0.5~1滴每秒的范围比较合适。 减压柱能够减少硅胶的使用量,感觉能够节省一半甚至更多,但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发(有时在柱子外面有水汽凝结),以及有些比较易分解的东西可能得不到,而且还必须同时使用水泵抽气(很大的噪音,而且时间长)。一般不推荐使用。 4.柱子的尺寸 从理论上讲应该是粗长的好。柱子长了,相应的塔板数就高。柱子粗了,上样后样品的原点就小(反映在柱子上就是样品层比较薄),这样相对的减小了分离的难度。试想如果柱子十厘米,而样品就有二厘米,那么分离的难度可想而知,恐怕要用很低极性的溶剂慢慢冲了。而如果样品层只有0.5厘米,那么各组分就比较容易得到完全分离了。当然采用粗大的柱子要牺牲比较多的硅胶和溶剂了,不过这些成本相对于产品来说也许就不算什么了。

过柱子的经验总结

过柱子的经验总结 Revised as of 23 November 2020

过柱子的经验总结 单一溶剂的极性大小顺序为: 石油醚(小)→环己烷→四氯化碳→三氯乙烯→苯→甲苯→二氯甲烷→氯仿→乙醚→乙酸乙酯→乙酸甲酯→丙酮→正丙醇→甲醇→吡啶→乙酸(大) 混合溶剂的极性顺序: 苯∶氯仿(1+1)→环己烷∶乙酸乙酯(8+2)→氯仿∶丙酮(95+5)→苯∶丙酮(9+1)→苯∶乙酸乙酯(8+2)→氯仿∶乙醚(9+1)→苯∶甲醇(95+5)→苯∶乙醚(6+4)→环己烷∶乙酸乙酯(1+1)→氯仿∶乙醚(8+2)→氯仿∶甲醇(99+1)→苯∶甲醇(9+1)→氯仿∶丙酮(85+15)→苯∶乙醚(4+6)→苯∶乙酸乙酯(1+1)→氯仿∶甲醇(95+5)→氯仿∶丙酮(7+3)→苯∶乙酸乙酯 (3+7)→苯∶乙醚(1+9)→乙醚∶甲醇(99+1)→乙酸乙酯∶甲醇(99+1)→苯∶丙酮(1+1)→氯仿∶甲醇(9+1) 过柱子经验总结 1, 选柱子:现在见到的柱子径高比一般在 1:5-10. 2, 称量:100-300 目硅胶,称 30-70 倍于上样量;如果极难分,也可以用 100 倍量的硅胶书中写硅胶量是样品量的 30-40 倍,具体的选择要具体分析.如果所需组分和杂质分的比较开(是指在所需组分 Rf 在杂质相差以上) , 就可以少用硅胶.

3, 选洗脱剂:一般淋洗剂是采用 TLC 分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的 溶剂.极性小的用乙酸乙酯:石油醚系统;极性较大的用甲醇:氯仿系统;极性大的 用甲醇:水:正丁醇:醋酸系统.要使所需点在 Rf 值在左右的比较好.常用溶剂 的极性顺序:石油醚<环己烷/己烷<苯乙醚<氯仿<乙酸乙酯 <正丁醇<丙酮<乙醇<甲 醇<水. 一般把两种溶剂混合时, 采用高极性/低极性的体积比为 1/3 的混合溶剂. 拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸. 乙酸乙酯/石油醚= 4:1 可用 TLC 分开.乙酸 乙酯和石油醚(60-90). 4, 搅成匀浆:先把硅胶泡在烧杯中,用干硅胶体积一倍的溶剂泡,用超声波超半个 小时,中间看到气泡时用玻璃棒搅一下.如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系,就用石油醚拌;如果洗脱剂是氯仿/醇体系,就用氯仿拌. 5, 装柱: A, 用溶剂把柱子饱和一次, 因为溶剂和硅胶饱和时放出的热量可能使 产品分解. B,将柱底用棉花塞紧,不必用海沙,加入约 1/3 体积石油醚(氯仿),装 上蓄液球,打开柱下活塞,将匀浆一次倾入蓄液球内.随着沉降,会有一些硅胶沾在 蓄液球内,用石油醚(氯仿)将其冲入柱中. C,装柱时一定要保证无气泡,同时敲打 柱体使柱体更均匀,紧凑,装毕,用洗脱液冲三次. 6, 压实:装柱完后,加入更多的石油醚,用双联球或气泵加压,直至流速恒定. 柱床 约被压缩至 9/10 体积.无论走常压柱或加压柱,都应进行这一步,可使分离度提 高很多,且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂. 7, 上样:干法湿法都可以. A,在硅胶上层加少量无水硫酸钠(以免样品被洗脱剂冲散)取适量样溶液上样.上样后,加入一些洗脱剂,再将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面.然后就可以放心地加入大量洗脱剂,而不会冲坏硅胶表面. B,用少量的溶剂溶 样品加样,加完后将下面的活塞打开,待溶剂层下降至石英砂面时,再加少量的低

高速公路公司2017年上半年工作总结

高速公路公司2017年上半年工作总结 次 **年是许平南高速公路通车运营的第一年。半年来,在公司领导班子的正确领导下、文秘部落在公司全体员工的共同努力下,公司克服了雨、雪、雾等恶劣天气及阻路等突发事件,紧紧围绕“靠服务占市场,向管理要效益,以改革求发展,用创新争一流”的经营方针,团结一致、开拓创新,较圆满的完成了上半年的工作,为实现**年全年经营目标奠定了良好的基础。现将**年上半年工作总结如下:一、团结奋进,克服困难,圆满完成**年度上半年工作任务在公司通车典礼上,董事长向社会各界做出了“加强养护保畅通、规范管理创造一流、资本运作谋发展”三项承诺,按照三个承诺的要求,围绕经营工作总体思路和工作目标,回顾半年来的工作,主要表现在以下几个方面:通行费征收稳步提高,超额完成上半年征收目标通行费征收是公司赖以生存和发展的根本,通行费征收管理工作也是各项工作的重中之重。**年,公司通行费的征收目标是2亿元。截止到5月份,公司通行费的实际收入为75486336元,比原计划超额完成2977365元,6月份预计收入16000000元。上半年累计收入91486336元,占全年计划收入的45。74%﹪超出了上半年公司制定的通行费收入计划。日常养护工作实施,确保路况良好围绕公司经营工作总体思路和工作目标,养护管理工作以“建设是发展,养护也是发展”为指针,切实改变重建轻养、重突击性养护轻经常性养护的倾向,对高速公路路况,特别是建设期质量存在缺陷的重点段和重点部位加强养护检测。以“提早预防,及时养护,立足小养,避免大养,确保有良好路况”为具体出发点,以“学习先进的养护技术,提高管理水平”为标准和具体要

过柱子总结

过柱子总结 吸附剂与洗脱剂 (一)吸附剂与洗脱剂 根据待分离组分的结构和性质选择合适的吸附剂和洗脱剂是分离成败的关键。 1.吸附剂的要求 ①对样品组分和洗脱剂都不会发生任何化学反应,在洗脱剂中也不会溶解。 ②对待分离组分能够进行可逆的吸附,同时具有足够的吸附力,使组分在固定相与流动相之间能最快地达到平衡。 ③颗粒形状均匀,大小适当,以保证洗脱剂能够以一定的流速(一般为1.5mL·min-1)通过色谱柱。 ④材料易得,价格便宜而且是无色的,以便于观察。 2、常用吸附剂的种类:氧化铝、硅胶、聚酰胺、硅酸镁、滑石粉、氧化钙(镁)、淀粉、纤维素、蔗糖和活性炭等。 3、几种常见吸附剂的特性 (1)氧化铝:市售的层析用氧化铝有碱性、中性和酸性三种类型,粒度规格大多为100~150目。 碱性氧化铝(pH9—10):适用于碱性物质(如胺、生物碱)和对酸敏感的样品(如缩醛、糖苷等),也适用于烃类、甾体化合物等中性物质的分离。但这种吸附剂能引起被吸附的醛、酮的缩合。酯和内酯的水解、醇羟基的脱水、乙酰糖的去乙酰化、维生素A和K等的破坏等不良副反应。所以,这些化合物不宜用碱性氧化铝分离。 酸性氧化铝(pH3.5—4.5):适用于酸性物质如有机酸、氨基酸等以及色素和醛类化合物的分离。 中性氧化铝(pH7—7.5):适用于醛、酮、醌、苷和硝基化合物以及在碱性介质中不稳定的物质如酯、内酯等的分离,也可以用来分离弱的有机酸和碱等。 (2)硅胶:硅胶是硅酸的部分脱水后的产物,其成分是SiO2·xH2O,又叫缩水硅酸。柱色谱用硅胶一般不含粘合剂。 适用范围:非极性和极性化合物,适用于芳香油、萜类、甾体、生物碱、强心甙、蒽醌类、酸性、酚性化合物、磷脂类、脂肪酸、氨基酸,以及一系列合成产品如有机金属化合物等。(3)聚酰胺:色谱用聚酰胺主要又锦纶6(聚己内酰胺)和锦纶66(聚己二酰己二胺)两种,分子量一般在16000~20000,其亲水性和亲脂性均较好,因此既可分离水溶性成份,也可分离脂溶性成分。可溶于浓盐酸、甲酸及热的乙酸、甲酰胺和二甲基甲酰胺中;微溶于乙酸和苯酚等;不溶于醇、氯仿、丙酮、乙醚、苯等;对碱稳定,对强酸可水解。 聚酰胺色谱的原理:兼具吸附色谱和分配色谱的功能。采用强极性洗脱剂时主要为吸附色谱——正相色谱;采用弱极性洗脱剂时主要为分配色谱——反相色谱。 分离对象:能与聚酰胺形成氢键的化合物,如酚类、酸类、醌类、硝基化合物及含羟基、氨基、亚氨基的化合物及腈和醛等类化合物。 聚酰胺在水中吸附能力的规律:

柱层析知识总结

柱层析知识总结 柱层析 利用层析柱将混合物各组分分离开来的操作过程称为柱层析。柱层析是层析技术中的一类,依据其作用原理又可分为吸附柱层析、分配柱层和离子交换柱层析等。其中以吸附柱层析应用最广。以下只介绍吸附柱层析的相关问题,其操作方法也可作为其他类型柱层析的参考。 1.吸附柱层析的器材 (1)层析柱 实验室中所用的玻璃层析柱有两种形式:一是下部带有活塞的玻璃管,活塞的芯最好是聚四氟乙烯制作的,这样可以不涂真空油脂,以免污染产品。如果使用普通的玻璃活塞,则真空油脂要小心地涂薄涂匀。另一种是将玻璃管下端拉细,套上一段弹性良好的管子。这段管子必须是不能被淋洗剂溶解的,普通橡皮管一般不可充作此用,因为橡皮易被氯仿、苯、THF等溶剂溶胀,而聚乙烯管子对大多数溶剂是惰性的,所以常常使用。用一只螺旋夹控制流速,此外,薄膜塑料柱因使用方便、节省淋洗剂、减少蒸发量等优点,应用日趋广泛。薄膜塑料柱总是以扁平成卷保存的,两侧常有很深的折痕。使用前需将裁取的一段薄膜管一端扎紧,另一端套在一段玻璃管上并用棉线扎紧。将这段玻璃管穿过一个单孔塞。然后将薄膜管放进一根又粗又长,下端拉细了的玻璃管内,使塞子塞紧大玻璃管的口。用水泵自大玻璃管下端抽气,薄膜柱即因内部压强大于外部而自行展圆。待装入吸附剂后在其下部扎几个小孔即可使用。 层析柱的尺寸根据被分离物的量来确定,其直径与高度之比则根据被分离混合物的分离难易而定,一般在1∶8到1∶50之间。柱身细长,分离效果好,但可分离的量小,且分离所需时间长;柱身短粗,分离效果较差,但一次可以分离较多的样品,且所需时间短。如果待分离物各组分较难分离,宜选用细长的柱子,如果要处理大量的较易分离的或对分离纯度要求较低的混合物,则可选用粗而短的柱子。最常使用的层析柱,直径与长度之比在1∶8 到1∶15 之间。 (2)吸附剂 柱层析中最常使用的吸附剂是氧化铝或硅胶。其用量为被分离样品的30~50倍,对于难以分离的混合物,吸附剂的用量可达100倍或更高。对于吸附剂应综合考虑其种类、酸碱性、粒度及活性等因素,最后用实验方法选择和确定。 市售氧化铝有酸性、碱性和中性之分。酸性氧化铝是用1%盐酸浸泡后,用蒸馏水洗到其浸出液的pH值为4,适用于分离酸性物质;碱性氧化铝浸出液的pH值为9~10,用以分离胺类、生物碱及其他有机碱性化合物。中性氧化铝的相应pH值为7.5,适合于醛、酮、醌、酯等类化合物的分离以及对酸、碱敏感的其他类型化合物的分离。硅胶没有酸碱性之分,可适用于各类有机物的分离。 柱层析所用氧化铝的粒度一般为100~150目,硅胶为60~100目,如果颗粒太小,淋洗剂在其中流动太慢,甚至流不出来。 氧化铝和硅胶的活性各分五个等级。哪个活性级别分离效果最好,要用实验方法确定,而不是盲目选择高的活性级别,最常使用的是Ⅱ~Ⅲ级。如果吸附剂活性太低,分离效果不好,可通过“活化”来提高其活性。所谓“活化”就是指用加热的方法除去吸附剂所含的水分,提高其吸附活性的过程。通常是将吸附剂装在瓷盘里放进烘箱中恒温加热。“活化”的温度和时间应根据分离需要而定。氧化铝一般在200℃恒温4h,硅胶在105~110℃恒温0.5~1h。“活化”完毕,切断电源,待温度降至接近室温时,从烘箱中取出放进干燥器中备用。有的样品在活性高的吸附剂中分离效果不好,可将吸附剂放在空气中让其吸收一些水分,分离效果反而好一些。 此外,一些天然产物带有多种官能团,对微弱的酸碱性都很敏感,则可用纤维素、淀粉或糖类作吸附剂。活性碳是

高速公路年度工作总结

高速公路年度工作总结

养护管理工作总结 第一部分2010年汇报篇 2010年,在省交通厅、高管局、交投集团、省公司、分公司各级领导的正确指导下,分公司养护部的各项工作开展正常,并取得了较好的成效。今年的养护工作,我们任务艰巨,面临的压力较大,主要体现在两个方面,一是今年涉及到养护施工单位的招标更换,各绿化单位质保期到期,需接手绿化管养工作,管理工作量大而繁重;二是今年是五年一次的“全国干线公路大检查”时期,各项任务工作艰巨。为处理好这两项艰巨任务,公司领导和养护部全体成员同心协力,加班加点,已经取得了阶段性成效,现将基本工作情况汇报如下 一、完成工作产值情况 2010年1-12月份完成养护费用暂估19561796元,其中:日常养护费用4173655元,绿化管养费用890908元,专项费用6637742元,除雪抢险费用2328814元,水毁抢险费用2828329元,日常监理费用1048873元,专项监理费用172581元,路桥检测费用980894元,其他养护费用500000元。 完成主要工程量:苗木修剪89689.12 m2,许禹互通区苗木补栽4312棵;更换护栏板924m、立柱141根,清

洗护栏板2901.75km,清洗防眩网1665.89km,机械清扫路面3656.09km,裂缝处理9403.47m,新泽西护栏涂装恢复13800m2,桥梁墙式护栏涂装恢复5840 m2,跨线天桥涂装15527.5 m2,防眩网更换8832m,防抛网更换394块,路缘石更换10700m,隔离栅刺丝补装5470m,烧伤路面处理299.76 m2,桥头跳车处置2处1250m2,新增护栏板2244m,立柱561m;计日工2726工日,素土回填4990.09 m3,回填6%石灰土359.4m3,回填6%水泥土540.26m 3,圬工4366.54m3等。 二、工作成效 1、日常保洁高效及时,为各项检查活动创造良好环境 2010年,分公司接待任务重,除日常保洁外,重大节日、庆典、活动、大小会议等共实施各类迎检特情养护作业243次,养护部全力组织,确保外业畅洁绿美,经统计累计投入养护大小机械300余台次、养护人工3200余人次,按时保质保量的完成了所有迎检任务,给途经的社会司乘人员、前来参加会议的各级领导留下了干净、整洁、美观、规范的高速公路管理形象。 2、路况病害调查、排除安全隐患

高速公路年终个人工作总结

高速公路年终个人工作总结 高速公路年终个人工作总结(一) 辉煌的20XX年即将过去,将20XX年取得的成果和成绩将在20XX年发扬下去,发扬我们不怕吃苦,不怕奉献的精神,创造更加辉煌的20XX 年,而奋斗吧!总结20XX年的优点和过失,规划20XX年工作思想和动向。 作为一名收费员,首先要把收费业务练熟练精,为收费事业添砖加瓦。作为一名合格的收费员,不仅要把业务技能掌握熟练,而且要牢记收费员的职责,遵守公司的规章制度,为建设更加便利的高速公路和满意的高速公路而奋斗。 今年刚加入收费系统,认识和了解上都不全面,经过上班,培训,实习,对收费工作有很大的认识。收费是一个非常枯燥乏味的工作,但是我们既然来参加这项工作,就要干好收费这一行,我们一定要做到特别能吃苦,特别能忍受,特别能奉献,将自己的光彩展现到高速公路上。一.认清当前的形势,思想上高度重视,积极进行准备,当前的任务形势,参加所站的收费能手和服务之星的评比,为站,为班,为个人的荣誉而奋斗,我们定会在自己的岗位上放出耀眼的光芒,创造出属于自己的一片天地。二.思想上高速重视,重视这一次所里组织的评比,人人都应该争先恐后的报名,养成良好的习惯。积极进行准备,把自己的业务练得更精,更强,尽职尽责尽心,为实现目标而奋斗。1.练就过硬的收

费本领,争当优秀收费员,加强人员的集体荣誉感,要以站为家的思想。2.尽职尽责尽心扎实干好工作,克服严寒,虽然说这里的环境气候比较冷,但是我们要克服困难,尽本职尽自己的责任,尽到自己的心,扎实干好工作。3.立足本职岗位,争创一流成绩,立足自己的岗位,为争创一流成绩而奋斗,确保单位能正常的运行,要融入这个大家庭,建设和谐的工作环境,为取得骄傲的成绩,我们必须严要求,高标准,完成各项任务。 我个人认为,在一个集体中,不仅业务上熟练,而且养成作风上都要有章有律,纪律是可以确保一个集体的凝聚力,是完成各项任务的风向标。一.防松防散,严养成,确保收费秩序正规化,正常化。1.松散现象对个人和集体危害很大。2.影响了团队和集体当前重大任务的完成。3.损坏了收费人员良好的形象。4.危害个人的成长进步。二.自觉做到思想不松,作风不散,干自己职责以内的事,做好岗位特殊情况的记录,遵守安全规定,干劲不减的作风,为收费生活增光彩。1.重新认识,排除干扰,做到思想稳定,认识统一,行动听指挥。2.正规纪律,严守纪律,做到上班期间作风严谨,一丝不苟。3.安心本职工作,多做贡献,有一份热,发一份光的精神,缺点会克服掉的,为了建设更加繁荣的高速公路而努力吧! 从上班到现在,我给自己总结了以下几点,我会努力

柱层析方法经验归纳汇总

1、选柱子:有玻璃柱和不锈钢柱两种,实验室常用玻璃柱。径高比一般在1:5-10。 根据吸附剂用量(体积)确定柱子大小,一般吸附剂应填充到柱子体积的1/4~1/5。 柱子可以分为:加压,常压,减压。 压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。 其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的,但是时间也最长,比如天然化合物的分离,一个柱子几个月也是有的。 减压柱能够减少硅胶的使用量,感觉能够节省一半甚至更多,但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发(有时在柱子外面有水汽凝结),以及有些比较易分解的东西可能得不到,而且还必须同时使用水泵抽气(很大的噪音,而且时间长)。 加压柱是种比较好的方法,与常压柱类似,只是外加压力使淋洗剂走的快些。压力的提供可以是压缩空气,双连球或小气泵。特别在容易分解的样品的分离中适用。压力不可过大,不然溶剂走的太快就会减低分离效果。加压柱在普通的有机化合物的分离中是比较适用的。 柱子的尺寸为粗长的最好。柱子越长,相应的塔板数就越高。柱子越,上样后样品的原点就越小(反映在柱子上就是样品层比较薄),这样相对的减小了分离的难度。 无水无氧柱适用于对氧、水敏感,易分解的产品。可以湿柱,也可以干柱。不过在样品之前至少要用溶剂把柱子饱和一次,因为溶剂和硅胶饱

和时放出的热量有可能是产品分解,毕竟要分离的是敏感的物质,小心不为过。因为分离的物质比较敏感,所以接收瓶一定要用可密封的,遵循schlenk操作。至于是加压、常压、减压,随需而定。因为是schlenk操作,所以点板是个问题,如果样品是显色的,恭喜了,不用点板,直接看柱子上的色带就行了。如果样品无色,只好准备几十个schlenk瓶,一瓶一瓶的点,不过几次之后就知道样品在哪,也就可以省些了。 无水无氧柱中用的比较多的是用氧化铝作固定相。因为硅胶中有大量的羟基裸露在外,很容易是样品分解,特别是金属有机化合物和含磷化合物。而氧化铝有碱性、中性和酸性的,选择余地比较大,但比硅胶要贵些。听说有个方法,就是用石英做柱子,然后用HF254做固定相,这样在柱子外面用紫外灯一照就知道产品在哪里了,没有验证过。 2、选择吸附剂:200-300目硅胶,称30-70倍于上样量;如果极难分,也可以用100倍量的硅胶。干硅胶的视密度在左右,所以要称40 g硅胶,用烧杯量100 ml也可以。 书中写硅胶量是样品量的30-40倍,具体的选择要具体分析。如果所需组分和杂质分的比较开(是指在所需组分Rf在,杂质相差以上),就可以少用硅胶。 用硅胶作固定相过柱子的原理是一个吸附与解吸的平衡。所以如果样品与硅胶的吸附比较强的话,就不容易流出。这样就会发生,后面的点先出,而前面的点后出。这时可以采用氧化铝作固定相。 常用吸附剂的种类:氧化铝、硅胶、聚酰胺、硅酸镁、滑石粉、氧化钙(镁)、淀粉、纤维素、蔗糖和活性炭等。

[精选工作总结范文]:高速公路工作总结

高速公路工作总结 ____高速公路是四川省高速公路建设项目的重点项目之一,目前我公司所在的____高速__合同段则是此项目的节点工程,受交通厅及各级领导重视。在业主、公司领导统一部署下,我们认真贯彻落实各项目标任务,将__高速__段的工作作为我们全体项目员工的重要事务来做,精心支部,狠抓落实,保证此项工程的有序进行。一、 基本情况__合同段位于四川省雅安市某某县,起于__村,经__,止于__,起讫桩号为k72+990.83-k84+720,路线全长11.____9公里。主要工程有土石方工程设计数量313.46(万m3),变更数量(万m3),变更后数量(m3);桥梁工程设计数量(中桥3座、大桥及特大桥____6.8单幅米/12座),变更数量(小桥、中桥、大桥及特大桥m/座),变更后数量(中桥3座、大桥及特大桥____6.8单幅米/12座);防护工程设计数量(____55m3),变更数量(m3),变更后数量(____55m3)。是目前__高速汉源片区的最大标段。二、主要作法(一)、加强支部领导,实行目标管理根据本项目实际情况,制定项目管理的各项规章制度,绘制了详细的支部结构图,在项目经理带领下,设了两个副经理,一个总工、一个副总工,将工程划分为了两个工区,六个工段,项目部设立了6部(安保部、质检部、物供部、商务部、测控部、书记)三室(试验室、财务室、办公室)。整个项目部按照“管事理人”的原则,在项目经理的带领下协调与生产同时进行,对项目负责实施。为明确责任,实行目标管理,项目部对施工作业组实行阶段性目标任务的锁定。目标一旦确定下来,各作业组、各项目人员必须全力以赴,谁

出问题谁负责。项目质检部和安保部分别对项目部管理人员签定了质量责任卡、安全责任卡和安全生产协议。项目部对工程质量、进度、文明施工、安全生产和工程成本控制等都有明确要求,有力地保障了工程的实施。 高速公路工作总结 ____高速公路是四川省高速公路建设项目的重点项目之一,目前我公司所在的____高速__合同段则是此项目的节点工程,受交通厅及各级领导重视。在业主、公司领导统一部署下,我们认真贯彻落实各项目标任务,将__高速__段的工作作为我们全体项目员工的重要事务来做,精心支部,狠抓落实,保证此项工程的有序进行。一、 基本情况__合同段位于四川省雅安市某某县,起于__村,经__,止于__,起讫桩号为k72+990.83-k84+720,路线全长11.____9公里。主要工程有土石方工程设计数量313.46(万m3),变更数量(万m3),变更后数量(m3);桥梁工程设计数量(中桥3座、大桥及特大桥____6.8单幅米/12座),变更数量(小桥、中桥、大桥及特大桥m/座),变更后数量(中桥3座、大桥及特大桥____6.8单幅米/12座);防护工程设计数量(____55m3),变更数量(m3),变更后数量(____55m3)。是目前__高速汉源片区的最大标段。二、主要作法(一)、加强支部领导,实行目标管理根据本项目实际情况,制定项目管理的各项规章制度,绘制了详细的支部结构图,在项目经理带领下,设了两个副经理,一个总工、一个副总工,将工程划分为了两个工区,六个工段,项目部设立了6部(安保部、质检部、物供部、商务部、测控部、书记)三室(试验室、财务室、办公室)。整个项目部按照“管事理人”的原则,在项目经理的带领下协调与生产同时进行,

高速公路2017上半年运营工作总结

高速公路2017上半年运营工作总结 20xx年是许平南高速公路通车运营的第一年。半年来,在公司领导班子的正确领导下、在公司全体员工的共同努力下,公司克服了雨、雪、雾等恶劣天气及阻路等突发事件,紧紧围绕“靠服务占市场,向管理要效益,以改革求发展,用创新争一流”的经营方针,团结一致、开拓创新,较圆满的完成了上半年的工作,为实现20xx年全年经营目标奠定了良好的基础。现将20xx年上半年工作总结如下: 一、团结奋进,克服困难,圆满完成20xx年度上半年工作任务 在公司通车典礼上,董事长向社会各界做出了“加强养护保畅通、规范管理创造一流、资本运作谋发展”三项承诺,按照三个承诺的要求,围绕经营工作总体思路和工作目标,回顾半年来的工作,主要表现在以下几个方面: (一)通行费征收稳步提高,超额完成上半年征收目标 通行费征收是公司赖以生存和发展的根本,通行费征收管理工作也是各项工作的重中之重。20xx年,公司通行费的征收目标是2亿元。截止到5月份,公司通行费的实际收入为75486336元,比原计划超额完成2977365元,6月份预计收入16000000元。上半年累计收入91486336元,占全年计划收入的45.74%﹪超出了上半年公司制定的通行费收入计划。 (二)日常养护工作实施,确保路况良好 围绕公司经营工作总体思路和工作目标,养护管理工作以“建设是发展,

养护也是发展”为指针,切实改变重建轻养、重突击性养护轻经常性养护的倾向,对高速公路路况,特别是建设期质量存在缺陷的重点段和重点部位加强养护检测。以“提早预防,及时养护,立足小养,避免大养,确保有良好路况”为具体出发点,以“学习先进的养护技术,提高管理水平”为标准和具体要求,提高养护工作的管理水平。截止到20xx年6月21日(三)及时采取有效措施、确保道路安全畅通 (四)编制了公司20xx年度收支计划和公司“十一五”发展规划(草案)企业发展部根据部门提出20xx年度收支计划与各部门进行了费用项目的衔接,将各项费用指标细化,做到切合实际,达到公司内部控制的目的。收支计划已提交经理办公会讨论,近期即可下发。根据省建投的通知要求,结合公司实际,编制了公司“十一五”规划(草案)。规划结合国家当前的经济形式,高速公路市场的发展趋势和河南省“十一五”发展规划的思路,把公司的发展分为三个阶段,第一阶段:强化公司内部管理,确保通行费应征不漏;加强养护管理,提供优良通行环境;提高服务水平,树立良好形象。第二阶段:充分利用资本市场功能,广开融资渠道,想方设法筹措资金;利用在资本市场募集到的资金和公司通行费收入,投资开发新的路桥项目,实现主营业务的持续发展、滚动发展。第三阶段:在突出、稳定主业务的基础上,寻求与公路行业相关或具有良好发展前景的投资机会,培育新的利润增长点。公司的发展目标是达到“四个一流”,即“一流的管理、一流的路况、一流的效益、一流的形象”;争取在香港主板上市成功,成为河南省在香港唯

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