大肠杆菌论文
走近大肠杆菌
姓名：*** 班级：****** 学号：*****
上传时间：2012.11.11
引言
大肠杆菌对我们来说并不陌生，当我们出生的那一刻，大肠杆菌就随着母乳进入了我们的体内，记得上生物课时，老师再讲微生物是说到：“我们的肠道里住着很多的大肠杆菌。”当时心中很惶恐，应为在我的印象中，细菌都是有害的，而随着年龄的增长也慢慢了解了，大肠杆菌在正常的栖居条件下是不会致病的，而且，还会帮我们减少蛋白质分解所产生的有害物质，但是这位栖居者有时也会变成一枚炸弹，但我们不注意饮食、生活卫生时，它就会给我们带来疾病，总之，这位伙伴成为了我们一生不可缺少的，让我们更好地了解它，在有限的生命中与它好好相处。
摘要
原核生物、细菌、致病性、预防感染、生物技术
大肠杆菌的认识
肠埃希氏菌(E. coli)通常称为大肠杆菌，是Escherich在1885年发现的，在相当长的一段时间内，一直被当作正常肠道菌群的组成部分，是非致病性的。直到20世纪中叶，才认识到一些特殊血清型的大肠杆菌对人和动物有病原性，尤其对婴儿和幼畜（禽），常引起严重腹泻和败血症，根据不同的生物学特性将致病性大肠杆菌分为5类：致病性大肠杆菌(EPEC)、肠产毒性大肠杆菌(ETEC)、肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)、肠出血性大肠杆菌(EHEC)、肠黏附性大肠杆菌(EAEC)。大肠杆菌属于细菌。
大肠杆菌是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一种细菌，周身鞭毛，能运动，无芽孢，是原核生物具有由肽聚糖组成的细胞壁，只含有核糖体简单的细胞器，没有细胞核但有拟核，细胞质中的质粒常用作基因工程中的运载体。大肠杆菌一般多不致病，为人和动物肠道中的常居菌，能发酵多种糖类产酸、产气，是人和动物肠道中的正常栖居菌，婴儿出生后即随哺
乳进入肠道，与人终身相伴，其代谢活动能抑制肠道内分解蛋白质代谢的有害物质和抑制微生物的生长，还能合成维生素B和K，以及有杀菌作用的大肠杆菌素，但在一定条件下可引起肠道的外感染某些血清型菌株的致病性强，引起腹泻，统称致病性大肠杆菌。
大肠杆菌的检测：在培养基培养时无需添加生长因子，向培养基中加入伊红美蓝遇大肠杆菌，菌落呈深紫色，并有金属光泽，可鉴别大肠杆菌是否存在。
虽然绝大多数大肠杆菌与人类有着良好合作，但是仍有少部分特殊类型的大肠杆菌具有相当强的毒力，一旦感染，将造成严重疫情。其中最具代表性的就是代号为O157:H7的大肠杆菌， O157:H7感染后的主要症状正是出血性腹泻，严重者可伴发溶血尿毒综合征（HUS），危及生命。由于O157:H7危害较大，且可经食物和饮用水在人群中广泛传播，因此食品卫生主管部门已将O157:H7列为常规检测项目。
大肠杆菌O157:H7是肠出血性大肠埃希菌的主要血清型,能引起人的出血性肠炎和溶血性尿路综合征.大肠杆菌O157:H7致病机制与其毒力岛编码的毒力因子有关,这些毒力岛包括染色体上的LEE岛、前噬菌体上的slt基因、大质粒上的hly、katP、espP、toxB、stcE基因.大肠杆菌O157:H7致病机理不是由单一毒力因子所决定,而是多种毒力因子共同作用的结果.
传播途径主要有：食物传播；水传播和接触传播三种，O157:H7大肠杆菌主要是通过污染食物而引起人的感染，O157:H7大肠杆菌的致病能力和对胃酸的抵抗力均较强，对细胞的破坏性大。
动物来源的食物，如牛肉、鸡肉、牛奶、奶制品等是O157:H7大肠杆菌经食物传播的主要因素，尤其是在动物屠宰过程中这些食物更易受到寄生在动物肠道中的细菌污染。另外蔬菜、水果等被O157:H7大肠杆菌污染也可造成大肠杆菌感染爆发。
O157:H7在外环境中的生存能力较强，引起人类感染可能并不需要在外环境中进行增菌,除了饮用水受到污染可造成感染外，其他被污染的水体如游泳池、湖水及其他地表水等都可造成传播。
在上述三条传播途径中，以食物传播为主。有人对自1982年起发生的100
多起 O157:H7爆发流行的感染途径进行统计，发现食源性的占71%（52%为牛肉制品，大部分与快餐店中的汉堡包有关；14%为水果、蔬菜；5%来源于未知食品）、16%为人与人接触感染、12%为水源性感染。
要避免被具有致病作用的大肠杆菌感染，其实非常简单，大肠杆菌其实是非常脆弱的，像沸水这样的温度可以瞬间将其灭活，因为完全不需要对它们有任何恐慌。你只要把食品煮熟，不要吃生食，同时装食品的各类用具也注意清洁，那就不可能被感染了。
生物技术中的应用
微生物这些小小的生物，是人眼不能看到的，虽然这些微生物为我们健康带来了一些威胁，像是当受伤是不能及时处理伤口，会使细菌入侵我们的身体，造成创面感染，严重的会造成败血症，甚至会引起死亡的发生，但是，自发现微生物之后，人们将微生物进行培养，生产出了许多对人类有用的激素、药物等。
大肠杆菌也不例外，作为外源基因表达的宿主，遗传背景清楚，技术操作简单，培养条件简单，大规模发酵经济等特点，成为了基因工程主要原核受体菌，此外还应用于外源DNA克隆和扩增；原核基因高效表达；基因文库构建等一些生物技术方面。
胰岛素也成为了一个很好的例子，起初，胰岛素发现时并不能够大规模的生产，因而生产出来的胰岛素也就有了很高的身价，由于，糖尿病是由于身体不能正常吸收葡萄糖，而使得身体渐渐消瘦，而蛋白质在消化过程中又会产生酸性物质，而使得糖尿病患者酸中毒，于是当时的主要的治疗手段就是饥饿治疗，使得糖尿病成为了绝症。
而现在科学家们把人的胰岛素基因送到大肠杆菌的细胞里，将编码截短的门冬酰胺酶突变体(ansB-C),天然C肽,人IgG1铰链区(hinge),额外的酸敏感二肽(DP)以及富含碱性氨基酸的8肽(KRKRKKSR)的核苷酸序列依次分别插入pET28a载体中,构建表达载体pEDCC.在乳糖的诱导下,融合蛋白ansB-C-hinge-DPKRKRKKSRNGSGR-C-peptide以包涵体形式高效表达.融合蛋白经洗涤和乙醇分级沉淀纯化后,通过酸水解将PKRKRKKSRNGSGR-C-peptide释放出来.C肽N端14肽用胰蛋白酶切割,通过DE52柱与C-peptide分离.结果:构建的表达载体pEDCC序列正确,融合蛋白经分离纯化得到了高纯度的重组人源胰岛
素原C肽.胰岛素基因和大肠杆菌的遗传物质相结合，人的胰岛素基因在大肠杆菌的细胞里指挥着大肠杆菌生产出了人的胰岛素。并随着它的繁殖，胰岛素基因也一代代的传了下去，后代的大肠杆菌也能生产胰岛素了。这样，越来越多的人能够使用胰岛素来治疗糖尿病了。
虽然，大肠杆菌的存在，已经不再是一个秘密，但是，这个伴随我们成长的小家伙，似乎还有许多能力等着我们去探索，在微生物的世界中，也似乎充满了奇迹，快速的增殖，容易变异，似乎一不小心，就会有许多不同种的微生物，但我相信，这些微生物未来还会为我们带来更多的便利。参考文献
《重组人源胰岛素原C肽在大肠杆菌中的克隆、表达与纯化》王学军、顾凯、曹荣月、林洁、吴洁、刘景晶《中国药科大学学报》 2006 第2期；
《大肠杆菌O157：H7的毒力岛与毒力因子的研究进展》周勇（综述）、万成松（审校）《微生物学免疫学进展》2006 第2期；
《小生命，大肠杆菌解开生命奥秘》卡尔·齐默
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大肠杆菌高细胞密度发酵
课程设计说明书 课程名称：发酵工程 设计题目：大肠杆菌的高细胞密度发酵 院系：生物与食品工程学院 学生姓名：郑帅超 学号：201106040030 专业班级：11 生物技术 指导教师：李安华 2014年5月26日
课程设计任务书 设计题目枯草芽孢杆菌产淀粉酶发酵工艺的优化 学生姓名郑帅超所在院系生物与食品工 程学院 专业、年级、班11生物技术 设计要求： 1、树立正确的设计指导思想，严谨负责、实事求是、刻苦钻研、勇于探索的作风和学风。 2、根据所给资料，按照任务书中提出的范围和要求按时独立完成，不得延误，不得抄袭他人成果。 3、说明书应字迹清楚文字通顺，并附有各项设计成果表，摘引其他书籍或杂志的材料必须注明出处。 4、设计标准要求规范、实用、切合实际。 5、设计应严格按有关设计规范进行。 6、设计结束后，以个人为单位提交设计说明书一份（后附流程图）。 学生应完成的工作： 1、在老师的帮助下完成题目设计。 2、学生查阅相关文献、资料制定实验路线，并有指导老师检查实验路线的合理性和可行性。 3、学生在实验室完成实验方案。 4、完成课程设计说明书的初稿，由指导老师帮助修改，最后定稿。 参考文献阅读： [1]李寅等著，高细胞密度发酵技术，化学工业出版社，2006-10-01，177~288. [2]陈坚,李寅,毛英鹰,等. 生物工程学报,1998 ,14(4) :452～455. [3]李民,陈常庆,朴勤,等. 生物工程学报,1998 ,14(3) :270～275. [4]杨汝燕,李民,陈常庆. 工业微生物,1998 ,28(3) :30～33. [5 ]李民,陈常庆,朴勤等,生物工程学报,1998 ,14 (3) :270~275. [6]杨汝燕,李民,陈常庆,工业微生物,1999 ,29(1) :25～28. [7]徐皓,李民,阮长庚,等. 工业微生物,1998 ,28(2) :20～25. [8]刘社际,葛永红,杨立明. 中国生物制品学杂志,1999 ,12 (1) :29 ～31. 工作计划： 2013.5.11分组并确认指导老师，在老师指导下查阅文献，确定题目。 2013.5.12----2013.5.13 进行理论试讲阶段，确定实验路线，然后确定实验方案。 2013.5.14----2013.5.17 进行实验操作和书写设计说明书。 2013.5.18----2013.5.22 修改说明书，和指导老师沟通。 2013.5.23—2013.5.26 上交课程设计说明书，并由指导老师填写评语和成绩。 任务下达日期：2014年5月13日 任务完成日期：2014年5月26日 指导教师（签名）：学生（签名）：
浅析城市滨水景观设计毕业设计论文
目录 摘要 (1) Abstract (2) 1 引言 (3) 2 城市滨水景观的概述 (3) 1.1城市滨水景观的定义 (3) 1.2城市滨水景观的现状与发展 (3) 3 城市滨水景观设计艺术特点 (4) 2.1生态系统性 (5) 2.2开放共享性 (5) 2.3样式多元性 (5) 2.4历史文化性 (5) 2.5多样功能性 (6) 4 城市滨水景观设计类型 (6) 3.1滨江型 (6) 3.2滨海型 (6) 3.3湖泊水域型 (6) 3.3洲岛型 (7) 5 案例分析 (7) 结论 (8) 参考文献 (9) 致谢 (10)
浅析城市滨水景观设计 作者：指导老师： （工作单位：邮编：412000 电话号码：） 随着社会的飞速发展，人们的生活变得更好了也就越来越重视生活品质和艺术美，这钢筋水泥的现代都市让人们开始无比想念自然风光。自古以来，我们都是傍水而居，水带有大自然的味道，他动静结合，具有宁静却灵动的美，在加上倒映景象的韵律，勾勒出夺人眼球的自然景色，让人们总也看不厌。是城市中开放空间的重要组成部分，占着非常重要的地位，城市滨水景观就是依水而设计，它将山、水和植物之间的关系有层次，有设计感的在众人面前展现出来。在景观设计中滨水景观设计较为复杂，但具有独特的观赏价值。本文就是对城市滨水景观得现状进行一个初步的分析研究，简单的介绍了城市滨水景观的定义及现状发展、类型和特点。 关键词：城市滨水景观；大自然；类型；特点
Abstract With the rapid development of society, people's lives better also pay more and more attention to the quality of life and artistic beauty, the reinforced concrete of modern city make people began to miss the natural scenery. Since ancient times, we are all alongside water, water with a taste of nature, his movement, the beauty of peace is a clever, plus reflected the rhythm of images, the outline of eye-catching natural scenery, let people can never see. Is an important part of city open space, occupy very important position, the urban waterfront landscape is designed according to the water, it will be the relationship between the mountains, water and plant level, has the design feeling in front. In landscape design in waterfront landscape design is more complicated, but has a unique ornamental value. This article is about the present situation of urban waterfront landscape to carry out a preliminary analysis and research, simply introduces the definition and the present situation of urban waterfront landscape development, types and characteristics. The key words: Urban waterfront landscape; Nature; Type; Thecharacteristics of
(完整版)大肠杆菌培养基配制及培养方法
大肠杆菌培养 一、菌种冻存液的制备 含有足量细菌的液体培养基离心后在沉淀中加入等量40%甘油，-80o C冻存。 二、培养基制备 LB培养基配方（胰化蛋白胨（Trypton）：10 g/L；酵母提取物（Yeast Extract）：5 g/L；NaCl：10 g/L；pH 7.4） 液体培养基 胰化蛋白胨 10.0g 酵母粉 5.0g 氯化钠 10.0g 水 1000ml pH 7.4 固体培养基在液体培养基的基础上再加入1.5％－2.0％的琼脂 三、平板的制备 1）称取胰化蛋白胨10.0g，酵母粉5.0g，NaCl 10.0g，加入800mL二次水溶解，并用玻璃棒搅拌均匀，用1mol/L的NaOH调pH至7.4左右，定容至1L，调pH 7.4（若溶液pH大于7.4，用1mol/L HCl回调）。 2）分装在锥形瓶中，每瓶量不宜太多，没过瓶底一指左右。如需固体培养基在分装后的液体培养基内加入约2%的琼脂（150mL液体培养基加入2.5g琼脂）。3）在锥形瓶口依次覆盖带滤纸通气小孔的塑料膜和硬质纸，用皮筋捆好。所有锥形瓶如上述操作。用记号笔注明培养基名称、配制日期。 4）高压蒸汽灭菌锅121 oC灭菌15min。 5）灭菌后的培养基取出置电热鼓风干燥器内60oC烘干，待锥形瓶的封口纸干燥后取出。液体培养基可直接保存或使用，此时加有琼脂的培养基不会凝固，可在预先紫外杀菌30min以上的无菌操作台上，将培养基倒入培养皿内，每个培养皿培养基约10-15mL（直径90mm），在培养皿中厚度大约4mm左右。将平皿叠放在无菌操作台上，放置10min左右，待琼脂基本凝固可涂平板。6）若平板不直接使用，灭菌后将培养基在锥形瓶中保存，待需制备平板时，微波炉中火加热约3min，使琼脂熔化，室温冷却20min至不烫手可制备平板。 四、接种大肠杆菌 1）取实验室储备的大肠杆菌BL21冻存液，管口用酒精灯灼烧，打开离心管。2）接种方法一：用灭菌枪头蘸取冻存液在平板边缘上划横条，每三道为一组，旋转平皿一圈，最后中间划之字；接种方法二：用移液枪吸取100uL溶液于平板上，用酒精灯灭菌厚的涂抹棒划十字，涂布平板。 3）因实验一般都要求挑取单菌落，故涂平板适应考虑冻存液内细菌数量，若菌量过大应适当稀释。一般方法一获得单菌落的可能性比较大。涂平板应在酒
(精品论文范文)滨水公园设计说明
滨水公园设计 摘要 畅春园景观设计从生态的角度出发，着重对当地绿色景观的缺乏与大小东湖的水系进行治理规划，改善该区域景观环境匮乏现状，有效地防止生态的破坏欲恶化。提高市容市貌和市民生活环境质量，提供优美静雅的城市滨水景观，满足市民对户外活动的需求。同时将该区域与城市的发展向联系起来，打造成城市对外展示的门窗，运用畅春园设计主题中蕴含的交流合作思想与充实的文化底蕴，来树立城市形象和良好的精神面貌。既迎合了当代社会经济发展的需求，又满足了人们对现代城市景观欣赏的眼光需求，达到城市发展的需求与景观规划的双赢。 关键字：生态景观、城市滨水景观、城市形象。
Abstract Changchunyuan landscape is designed from the point of ecological ecological view.Based on the warter system of Daxiao east Lake, it focises on consummating of local green landscape: the effeltive preventing of the deterioration of ecological desteruction:the imporving of resideuts living standard and quality of the city envioronment for the purpose of provicling a beautifui warterfornt landscape for the citizens altivities.Atthe same time,as a citys display window, it links the development of the design the me of Changchunyuan Landscape, which mainly contains the idea of communication and cooperation, and envichment of cultural foundation, it establishes upstanding image and good mental outlook of the city. All in all ,Changchunyuan Landpscape meets the needs of morden citys development and the demand of peoples appreciative Vision of the urban landscape , which is oibsolutely a win-win situation for both city development and landscape dewign. Key Words：Ecological landscape, urban waterfront landscape, city image
大肠杆菌发酵经验总结
大肠杆菌发酵经验总结 大肠杆菌发酵经验总结 首先，补料速率与比生长速率直接影响着乙酸的生成速率和积累量（主要是补料速率与比生长速率影响发酵液中的残糖量，进而影响），所以适当的控制补料速率和比生长速率，对于控制乙酸的量有很好的效果。 其次，必须要保证充足的溶氧，并严格控制pH值，而且补酸碱的速率尽量缓和，不能太快；温度对于蛋白的表达也有很重要的影响，较低的发酵温度下所生产出的蛋白大多是有活性的，而较高的发酵温度下产生的蛋白大多一包涵体形式存在。 第三，选取合理的诱导时间非常重要，一般的诱导时间选在指数生长后期，而且诱导时的比生长速率最好能控制在0.2之，选在此时诱导，1.将菌体的快速生长期与蛋白合成期分开，使这两个阶段互不影响，有利于蛋白的高表达；2.已经得到了大量的菌体，而且菌体的生物量基本接近稳定，不论是从动力学角度，还是能耗，物料成本方面，都比较合理。 第四，补料过程中的碳氮比也很重要。若氮源过高，会使菌体生长过于旺盛，pH偏高，不利于代产物的积累，氮源不足，则菌体繁殖量少从而影响产量；碳源过多，则容易刑场较低的pH，抑制菌体生长，碳源不足，则容易引起菌体的衰老和自溶。另外，碳氮比不当还会引起菌体按比例的吸收营养物质，从而直接影响菌体的生长和产物的合成。 根据自己的经验，一般情况下，对于一个稳定的发酵工艺下，如果总是在固定的发酵时间段出现溶菌现象，而且能排除噬菌体和染菌的可能性后，那就可能是因为碳氮比不合理造成的。可以适当调整碳氮比。 大家讨论得较多的是关于代副产物乙酸对大肠杆菌发酵的影响，现总结以下几点，并作出相应解决措施。 一、代副产物-乙酸 乙酸是大肠杆菌发酵过程中的代副产物，在多大的浓度下产生抑制作用各种说法不一，一般认为在好气性条件下，5～10g/L 的乙酸浓度就能对滞后期、最大比生长速率、菌体浓度以及最后蛋白收率等都产生可观测到的抑制作用。当乙酸浓度大于10或20g/L 时，细胞将会停止生长，当培养液中乙酸浓度大于12g/L 后外源蛋白的表达完全被抑制。 预防乙酸产生的措施：
滨水城市公园景观设计论文资料
目录 摘要 ........................................................... I ABSTRACT .......................................................... II 绪论 . (1) 一、城市公园的发展状况及可行性分析 (1) （一）发展现状 (1) （二）可行性分析 (1) 二、滨水城市公园的研究内容及意义 (1) （一）研究背景 (1) （二）研究思路 (2) （三）设计理念 (2) 三、滨水城市公园设计理念的实施 (2) （一）功能分区 (2) （二）道路系统设计 (2) （三）植物配置 (2) （四）照明设计 (3) （五）水体设计 (3) 结论 (3) 参考文献 (4) 后记 (5)
绪论 城市公园与千家万户都息息相关，它是人们的第一接触的生活环境，它涉及到每个人的生活利益。城市公园的建设又和国家、社会离不开关系，能影响整个国家的发展好或者坏。在进行城市公园规划的时候，我们要施行“以人为核心”的设计观念和“可持续性发展”的方针，根据地方民俗风情、地方民族特色，创造出高水平的规划设计，提高人们的品味和消费者的观念，从而使中国滨水城市公园的规划能有一个整体上面的提高。 一、城市公园的发展现状及可行性分析 （一)发展现状 从目前的发展来看，我们国家城市公园的规划体系起步起来比较晚，当前还处在不断探索的一个阶段，与国外的那些发达一点的国家相比起来，还是有较大差距的。我们应该从基础开始，通过分析和研究我国城市公园规划发展，重点集中在建立起完善的城市公园规划体系。我们国家的经济发展的很迅速，这种情况下人们对城市公园的功能需求就慢慢的提高了，当前城市公园的设计，都是一些功能单一的形式，虽然有一些经过刻意处理了，但总免不了陷入单一的图案式的平面构成与雕塑式的体量表现中，新的外观掩盖住了特色式的地方风格，而过于追求建筑形式所带来的“美感”，却忽略了人们的实际功能需求，所以很难得到人们的认同，这样反而更加达不到设计所追求的目标。 （二）可行性分析 城市公园是城市的基本构成。公园建设水平影响着居民的生活与城市的容貌，而公园规划设计好坏是直接影响建设水平的先决条件。想要高水平的公园规划设计，就要在最大程度上改善人们的生活环境，推动城市的现代化建设。通过对诸多公园的调查，发现普遍存在社区功能不完善、居住布局不合理、服务设施缺乏、居住环境安全差等问题，缺乏了当地公园建设的文化特色。 二、滨水城市公园的研究内容及意义 (一) 研究背景 我们国家有一些城市是从临近水源的村落随着商业的发展从而慢慢演变出来的。但是河流在不同的城市里面有着不一样的功能和地位，我们对河流的管理，还有河流的重视程度已经有了很明显的变化。那些城市的管理者很多只是把城市的主干河道打造成商业区域、文化区域、供人们休闲娱乐的区域。从而忽略城市其他的水域的管理，导致浪费了资源并且造成了环境污染。我的设计就是要利用当地独特的自然条件，对滨河区域进行整理规划，让滨河区的公园景观设计和我们周围的生活环境协调起来，
城市滨水景观设计论文.docx
摘要城市滨水区是城市规划过程中的重要组成部分，也是连接陆地和水域的枢纽，其具有丰富的景观价值和历史文化价值。 同时，它也是自然生态系统和人工建设系统的综合体。 笔者着重对城市滨水景观设计进行探讨和分析，以期从根本上提升我国城市规划水平。 关键词城市规划；滨水区；景观设计城市化进程的加快，带动了人们日常生活品质的提升。 城市滨水区就是在这一诉求下应运而生的。 其既能够满足日常防洪和水利功能需求，又为人们提供了休闲娱乐空间。 城市滨水区是城市中最富活力和景观特色的生态系统，其一般位于水域濒临的陆地边缘地带，作为水陆之间的连接枢纽。 设计师要以城市水域为中心，对城市滨水景观进行设计，并辅助环境建设和基础设施建设。 １滨水景观设计现状目前，国外滨水景观设计已经居于较为先进的水平。 城市滨水景观设计更加注重城市水系的完整性和生态性。 并且已经逐步将滨水景观设计延伸到自然资源保护、多功能基础设施建设和历史文化保护等层面。 我国滨水景观设计主要被应用到城市基础设施建设中，以提升城市形象，并辅助以休闲娱乐功能。 ２滨水景观设计理念近年来，设计师在对城市滨水景观进行设计
的过程中，不再局限于其防洪需求，更加注重对其在生态环境保护和回归自然层面进行延伸。 设计师在滨水景观设计过程中更加注重生态学理念和美学理念的应用。 比如，在滨水景观设计中，要重视人与自然的关系，注重对其亲水性、近水性和嘻水性进行考虑［１］。 ３滨水景观设计原则３．１防洪安全原则防洪安全是城市滨水区的基本功能。 设计师要结合具体工程情况和其防洪需求进行设计。 应用石材对防洪坡段进行设计，以达到防洪的目的，并给人以独特的视觉观感。 设计师也可以应用花草、灌木、水生植物等进行植物景观塑造。 ３．２生态原则在城市滨水景观设计过程中，要注重生态性原则。 将环境要素和生态要素作为其设计过程中的重要组成部分。 既能够避免对城市滨水地貌造成破坏，又能够达到防洪、生态环境建设和城市景观设计的多重目的。 ３．３空间层次原则滨水景观立面设计包括硬质景观设计和软质景观设计。 硬质景观设计主要依托了道路和平台的多层性，进行空间转化，创造空间高差，以达到立体视觉效果；软质景观设计是借助植物构造和配置，先堆土成坡，然后对其进行立体种植，以形成空间层次感。 ３．４景观统一原则设计师要结合城市特点进行滨水景观设计，
大肠杆菌培养基配制及培养方法
大肠杆菌培养基配制及培养方 法(总2页) -CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1 -CAL-本页仅作为文档封面，使用请直接删除
大肠杆菌培养 一、菌种冻存液的制备 含有足量细菌的液体培养基离心后在沉淀中加入等量40%甘油，-80o C冻存。 二、培养基制备 LB培养基配方（胰化蛋白胨（Trypton）：10 g/L；酵母提取物（Yeast Extract）：5 g/L；NaCl：10 g/L；pH 7.4） 液体培养基 胰化蛋白胨 10.0g 酵母粉 5.0g 氯化钠 10.0g 水 1000ml pH 7.4 固体培养基在液体培养基的基础上再加入1.5％－2.0％的琼脂 三、平板的制备 1）称取胰化蛋白胨10.0g，酵母粉5.0g，NaCl 10.0g，加入800mL二次水溶解，并用玻璃棒搅拌均匀，用1mol/L的NaOH调pH至7.4左右，定容至1L，调pH 7.4（若溶液pH大于7.4，用1mol/L HCl回调）。 2）分装在锥形瓶中，每瓶量不宜太多，没过瓶底一指左右。如需固体培养基在分装后的液体培养基内加入约2%的琼脂（150mL液体培养基加入2.5g琼脂）。 3）在锥形瓶口依次覆盖带滤纸通气小孔的塑料膜和硬质纸，用皮筋捆好。所有锥形瓶如上述操作。用记号笔注明培养基名称、配制日期。 4）高压蒸汽灭菌锅121 oC灭菌15min。 5）灭菌后的培养基取出置电热鼓风干燥器内60oC烘干，待锥形瓶的封口纸干燥后取出。液体培养基可直接保存或使用，此时加有琼脂的培养基不会凝固，可在预先紫外杀菌30min以上的无菌操作台上，将培养基倒入培养皿内，每个培养皿培养基约10-15mL（直径90mm），在培养皿中厚度大约4mm左右。将平皿叠放在无菌操作台上，放置10min左右，待琼脂基本凝固可涂平板。 6）若平板不直接使用，灭菌后将培养基在锥形瓶中保存，待需制备平板时，微波炉中火加热约3min，使琼脂熔化，室温冷却20min至不烫手可制备平板。 四、接种大肠杆菌 1）取实验室储备的大肠杆菌BL21冻存液，管口用酒精灯灼烧，打开离心管。 2）接种方法一：用灭菌枪头蘸取冻存液在平板边缘上划横条，每三道为一组，旋转平皿一圈，最后中间划之字；接种方法二：用移液枪吸取100uL溶液于平板上，用酒精灯灭菌厚的涂抹棒划十字，涂布平板。 3）因实验一般都要求挑取单菌落，故涂平板适应考虑冻存液内细菌数量，若菌量过大应适当稀释。一般方法一获得单菌落的可能性比较大。涂平板应在酒精灯附近进行，若冻存液涂完的平板应倒置，防止平皿盖上产生水蒸气。 五、大肠杆菌的培养
浅析滨水景观中亲水设施规划与设计
浅析滨水景观中亲水设施规划与设计 摘要：该论文从滨水景观中亲水的概述出发，总结出滨水景观中亲水设施的规划与设计的策略方法，并对景观中的亲水设施的规划与设计做出理论性的指导。 关键词：滨水景观；亲水设施；规划；设计 中国自古以来就重视水和城之间的关系，城市选址尤其讲究依山傍水。此外，由于人类与生俱来的亲水性，滨水景观对于人们有着一种内在的持久的吸引力。城市滨水景观区作为一个具有水利、交通运输、游憩、城市形象和生态等综合功能的城市公共空间，其亲水设施规划设计应同时满足多种需求和目标。 1亲水概述 1.1. 亲水的含义 从字面上看，亲水多解释为亲近水体，接触水体的意识。事实上，现代景观学对于亲水的认识已经从简单的接近水体和观赏水景，开始转向景观视觉享受与自然生态共存，并构筑垂钓、戏水、野营、运动等水上活动和亲水活动空间，进而通过滨水环境景观氛围的营造，使人们获得心理和精神情感的安慰。亲水设施是指满足相关亲水活动的设施，如运动场地、散步道、钓鱼露台等。亲水设施的设置需要尊重水体的自然特性，着重考虑丰水期和枯水期，以及可能突发事情时的安全性。 1.2 亲水活动分类 亲水轰动分类的目的是从场地利用的角度考察滨水空间的景观环境特征，为滨水空间环境规划和亲水设施设计提供技术支撑。 1.3 亲水活动的空间范围 水面 根据水体面积、宽幅、形态和水流速度等确定水面的利用活动状况。以河道为例可以分为自然河流、城市内人工河道或者运河。大型自然河流可以从事水上运动、游泳、泛舟等活动。当水面宽度小于10米，水深不足0.5米的河道则不能进行水上运动。如：摩托艇易产生危险性。此外，对于水较浅、水草茂盛的水
大肠杆菌培养基配制及培养方法
. 大肠杆菌培养 一、菌种冻存液的制备 o C冻存。-80 含有足量细菌的液体培养基离心后在沉淀中加入等量40%甘油，二、培养基制备 LB培养基配方（胰化蛋白胨（Trypton）：10 g/L；酵母提取物（Yeast Extract）：5 g/L；NaCl：10 g/L；pH 7.4） 液体培养基 胰化蛋白胨 10.0g 酵母粉 5.0g 氯化钠 10.0g 水 1000ml pH 7.4 固体培养基在液体培养基的基础上再加入1.5％－2.0％的琼脂 三、平板的制备 1）称取胰化蛋白胨10.0g，酵母粉5.0g，NaCl 10.0g，加入800mL二次水溶解，并用玻璃棒搅拌均匀，用1mol/L的NaOH调pH至7.4左右，定容至1L，调pH 7.4（若溶液pH大于7.4，用1mol/L HCl回调）。 2）分装在锥形瓶中，每瓶量不宜太多，没过瓶底一指左右。如需固体培养基在分装后的液体培养基内加入约2%的琼脂（150mL液体培养基加入2.5g琼脂）。3）在锥形瓶口依次覆盖带滤纸通气小孔的塑料膜和硬质纸，用皮筋捆好。所有锥形瓶如上述操作。用记号笔注明培养基名称、配制日期。 4）高压蒸汽灭菌锅121 oC灭菌15min。 5）灭菌后的培养基取出置电热鼓风干燥器内60oC烘干，待锥形瓶的封口纸干燥后取出。液体培养基可直接保存或使用，此时加有琼脂的培养基不会凝固，可在预先紫外杀菌30min以上的无菌操作台上，将培养基倒入培养皿内，每个培养皿培养基约10-15mL（直径90mm），在培养皿中厚度大约4mm左右。将平皿叠放在无菌操作台上，放置10min左右，待琼脂基本凝固可涂平板。 6）若平板不直接使用，灭菌后将培养基在锥形瓶中保存，待需制备平板时，微波炉中火加热约3min，使琼脂熔化，室温冷却20min至不烫手可制备平板。四、接种大肠杆菌 1）取实验室储备的大肠杆菌BL21冻存液，管口用酒精灯灼烧，打开离心管。2）接种方法一：用灭菌枪头蘸取冻存液在平板边缘上划横条，每三道为一组，旋转平皿一圈，最后中间划之字；接种方法二：用移液枪吸取100uL溶液于平板上，用酒精灯灭菌厚的涂抹棒划十字，涂布平板。 3）因实验一般都要求挑取单菌落，故涂平板适应考虑冻存液内细菌数量，若菌量过大应适当稀释。一般方法一获得单菌落的可能性比较大。涂平板应在酒1 / 2 . 精灯附近进行，若冻存液涂完的平板应倒置，防止平皿盖上产生水蒸气。 五、大肠杆菌的培养 1）将接种好的平皿倒置放入37℃的恒温培养箱中培养，大约十几小时后长出菌落。
滨水景观开题报告
西安欧亚学院 本科毕业论文开题报告 题目：陕西佛坪滨河景观带设计学生姓名：王露 分院（系）：艺术设计学院 专业：艺术设计（室内设计）班级：统本艺设（室内）1202班指导教师：崔妍 二零一五年十月
要求 1、开题报告是毕业设计的总体构想，由学生在毕业设计工作前期独立完成。 2、开题报告正文用A4纸打印，各级标题用4号宋体字加黑，正文用小4号宋体字，20磅行距。 3、参考文献不少于5篇（不包括辞典、手册），著录格式应符合GB7714-87《文后参考文献著录规则》要求。 4、年月日等的填写，用阿拉伯数字书写。要符合《关于出版物上数字用法的试行规定》，如“2014年2月28日”。 5、所有签名必须手写，不得打印。 6、对未在安排时间内提交开题报告定稿者或审核不通过者，将由分院组织进行开题答辩，方可进入毕业设计下一环节。
1.课题的意义 在PM2.5极高超标的雾霾之外，在多重污染的都市之外，仍然有一处天然栖息地在等待着您，含氧量极高的空气，山林苍翠，蕴藏着丰富自然与人文自然。秦岭，如世外高人，绵延千里，独立于世。 佛坪，秦岭稀世生态资源极大成者，典藏一切秦岭宝藏，将原生态的山水度假体验奉献于所有前来探寻的人们。 而在佛坪项目建设中，滨河景观带面积较大，而对景观带的设计稍弱，所以为了更丰富佛坪度假区的景观，对滨河景观带进行了调研和设计。 2.滨河景观的概念 滨河景观的设计基本环境是通过周围的驳岸，空间容量和水量，地形高差，水速等来表现的。 滨河景观，顾名思义，包含了两个重要因素：一是滨水，二是景观。滨水的概念从字面上讲，滨水就是临近水的区域或场所。这个区域包含了水体或其局部的水体环境。也包括一部分陆地，更包括与之关联的一切生命体与非生命体。滨河景观设计，是一门水和陆地两种不同的地理形态区域的交界面进行处理，协调人与自然环境，人与人类社会活动之间的关系，并使之符合可持续发展目的的综合设计学。狭义上讲，滨河景观设计是人类为满足可持续发展的需要（包括城市扩张、农田扩大、环境保护等）而对原地理学范畴的水域及其临近区域进行空间的、审美的、功能的科学设计。广义上讲，滨河景观设计是对一切与滨水区域有关的生命体与非生命体、包括物质流、能量流、信息流等进行的综合处理的学科。具体的讲，滨河景观设计一方面要处理人类活动叠加在水、陆这两种地理形态上的“空间安排”，使之具有安全、健康、舒适美观的特质：另一方面还要处理人类系统纳入大生态系统后的复杂的“物质流与能量流”。 [2] “空间安排”是“表”，“大生态系统的物质流和能量流处理”是“里”。只有处理好了“表”、“里”这两个方面的关系，才能说是完成了滨水景观设计。 3.国内外研究现状 工业革命之前，不论是东方还是西方，滨水空间基本处在一种相对原生态的状态下，一部分滨水空间保持着原始的自然景观，另一部分与人们生活联系较为紧密的滨水环境虽经过少许改造，但仍然是人们赖以生存并且繁衍生息的源泉。[3]随着18世纪工业革命的开始，机器化大生产席卷全球，通过这个机遇，滨水空间也受到史无前例的巨大影响和改变。20世纪50年代以来，随着产业结构的调整和变化，经济的迅速发展，许多原先依滨水而居的仓库、航运码头、港口被废弃，加之水体污染严重，滨水地区一度成为环境恶劣、臭气熏天的衰落区代表之一；现代交通20世纪60年代
大肠杆菌培养基配制及培养方法
大肠杆菌培养 、菌种冻存液的制备 含有足量细菌的液体培养基离心后在沉淀中加入等量40即油，-80°C冻存。 、培养基制备 LB 培养基配方（胰化蛋白胨（Trypton ）：10 g/L ；酵母提取物（Yeast Extract ）：5 g/L ；NaCl：10 g/L ；pH 7.4 ） 液体培养基 胰化蛋白胨10.0g 酵母粉5.0g 氯化钠10.0g 水1000ml pH 7.4 固体培养基在液体培养基的基础上再加入1.5％－2.0％的琼脂 三、平板的制备 1）称取胰化蛋白胨10.0g，酵母粉5.0g，NaCl 10.0g，加入800mL二次水溶解，并用玻璃棒搅拌均匀，用1mol/L的NaOH M pH至7.4左右，定容至1L,调pH 7.4 （若溶液pH大于7.4，用1mol/L HCl回调）） 2）分装在锥形瓶中，每瓶量不宜太多，没过瓶底一指左右。如需固体培养基在分装后的液体培养基内加入约2%勺琼脂（150mL液体培养基加入2.5g琼脂）。 3）在锥形瓶口依次覆盖带滤纸通气小孔的塑料膜和硬质纸，用皮筋捆好。所有锥形瓶如上述操作。用记号笔注明培养基名称、配制日期。 4）高压蒸汽灭菌锅121 oC 灭菌15min。 5）灭菌后的培养基取出置电热鼓风干燥器内60oC烘干，待锥形瓶的封口纸干燥后取出。 液体培养基可直接保存或使用，此时加有琼脂的培养基不会凝固，可在预先紫外杀菌30min 以上的无菌操作台上，将培养基倒入培养皿内，每个培养皿培养基约10-15mL （直径90mr）在培养皿中厚度大约4mm左右。将平皿叠放在无菌操作台上，放置10min 左右，待琼脂基本凝固可涂平板。 6）若平板不直接使用，灭菌后将培养基在锥形瓶中保存，待需制备平板时，微波炉中火加热约3min,使琼脂熔化，室温冷却20min至不烫手可制备平板。 四、接种大肠杆菌 1）取实验室储备的大肠杆菌BL21 冻存液，管口用酒精灯灼烧，打开离心管。 2）接种方法一：用灭菌枪头蘸取冻存液在平板边缘上划横条，每三道为一组，旋转平皿一圈，最后中间划之字；接种方法二：用移液枪吸取100uL溶液于平板上，用酒精灯灭菌厚的涂抹棒划十字，涂布平板。 3）因实验一般都要求挑取单菌落，故涂平板适应考虑冻存液内细菌数量，若菌量过大应
大肠杆菌高密度经验总结
大肠杆菌发酵经验总结 首先，补料速率与比生长速率直接影响着乙酸的生成速率和积累量（主要是补料速率与比生长速率影响发酵液中的残糖量，进而影响），所以适当的控制补料速率和比生长速率，对于控制乙酸的量有很好的效果。 其次，必须要保证充足的溶氧，并严格控制pH值，而且补酸碱的速率尽量缓和，不能太快；温度对于蛋白的表达也有很重要的影响，较低的发酵温度下所生产出的蛋白大多是有活性的，而较高的发酵温度下产生的蛋白大多一包涵体形式存在。 第三，选取合理的诱导时间非常重要，一般的诱导时间选在指数生长后期，而且诱导时的比生长速率最好能控制在0.2之内，选在此时诱导，1.将菌体的快速生长期与蛋白合成期分开，使这两个阶段互不影响，有利于蛋白的高表达；2.已经得到了大量的菌体，而且菌体的生物量基本接近稳定，不论是从动力学角度，还是能耗，物料成本方面，都比较合理。 第四，补料过程中的碳氮比也很重要。若氮源过高，会使菌体生长过于旺盛，pH偏高，不利于代谢产物的积累，氮源不足，则菌体繁殖量少从而影响产量；碳源过多，则容易刑场较低的pH，抑制菌体生长，碳源不足，则容易引起菌体的衰老和自溶。另外，碳氮比不当还会引起菌体按比例的吸收营养物质，从而直接影响菌体的生长和产物的合成。 根据自己的经验，一般情况下，对于一个稳定的发酵工艺下，如果总是在固定的发酵时间段出现溶菌现象，而且能排除噬菌体和染菌的可能性后，那就可能是因为碳氮比不合理造成的。可以适当调整碳氮比。 大家讨论得较多的是关于代谢副产物乙酸对大肠杆菌发酵的影响，针对我们论坛所发的帖，我先总结以下几点，并作出相应解决措施。 一、代谢副产物-乙酸 乙酸是大肠杆菌发酵过程中的代谢副产物，在多大的浓度下产生抑制作用各种说法不一，一般认为在好气性条件下，5～10g/L 的乙酸浓度就能对滞后期、最大比生长速率、菌体浓度以及最后蛋白收率等都产生可观测到的抑制作用。当乙酸浓度大于10或20g/L 时，细胞将会停止生长，当培养液中乙酸浓度大于12g/L 后外源蛋白的表达完全被抑制。 预防乙酸产生的措施： 1、通过控制比生长速率来减少乙酸的产生： 比生长速率越高，乙酸产生越多，当比生长速率超过某个值时，乙酸开始产生。可以通过降低温度，调节酸碱度，控制补料等方法来降低比生长速率。 2、透析培养： 在大肠杆菌的培养过程中可以用透析技术除去发酵液中的有害物质，降低乙酸含量从而实现重组菌的高密度发酵和产物的表达。 3、控制葡萄糖的浓度： 葡萄糖是大肠杆菌发酵过程中重要的碳源之一，用其作碳源是要将其控制在一个较低的水平上，以减少乙酸的产生。 常用的控制方法主要有： 恒pH法：大肠杆菌会代谢葡萄等产生乙酸，使pH 值下降。因此可通过pH值的高低作为控制葡萄糖的指标，该法的缺点是pH 的变化不完全是由葡萄糖代谢的结果，容易造成补料体系出错。 恒溶氧法：菌体代谢时会消耗氧，使溶氧下降，当葡萄糖浓度低到一定程度时菌体代谢下降，消耗氧能力下降，溶氧上升。因此，根据溶氧曲线补加葡萄糖，保持溶氧恒定，可以控制葡萄糖在一定的水平。 二、温度