医院检验中心VCS白细胞五项分类原理技术特点和应用问题
医院检验中心VCS白细胞五项分类原理、技术特点和应用
问题
VCS原理和技术特点
在一个流式通道内,对单个白细胞进行直接、同时、三重测量,然后再进行三维分析。
1.Scatterpak试剂保证”接近原态”分析,避免化学方法对细胞
特性的破坏
Scatterpak(Erythrolyse—低渗、低pH、具表面活化性)
(Stabilyse—高渗、高pH)
WBC EL 肿胀ST：恢复等渗、生理pH 接近原态
RBC----------------- 肿胀---------------------------------------去除debris-------流式通道
PLT 肿胀El的表面活化作用继续发挥去除debris
(28μL) (300μL×2) (133μL)
2.流体动力聚焦细胞,令其在流式通道内作最适的单细胞排
列
ISOTON III作为鞘流
3.VCS检测-视角与手工相似
VCS技术检测细胞的角度与镜检血片相似,都是从体积、核质比、颗粒特性、膜特性和形态等方面观察。但检测工具的敏感度大大提高,描绘程度上更精细,细胞的状态比染色情况下的更自然。
Volume
◆运用低频电流准确分析细胞体积
体积是区分白细胞亚群一个很重要的参数,它能有效区分LY和MO。但仍然存在一定程度的混淆,如：LY和BA(φ同在9-12μm范围);不成熟LY和NE(φ同在12-14μm范围) ◆该技术1967年开始使用
◆库尔特专利
Conductivity-Opacity
◆运用高频电磁探针检测细胞内含物(细胞核、颗粒和其他
化学组份)的特性。
细胞膜对高频电流具传导性,当电流通过细胞时,细胞核、颗粒和细胞内的化学组份令电流的传导产生变化,其变化量(RF)可以用来反映细胞内含物的信息
◆RF=f(细胞体积,细胞内含物传导性)
◆Opacity(阻光性)是指将细胞体积对RF的影响去除后的高
频传导数据,可以更确切地描述细胞内含物
Opacity?RF/DC
◆该参数可用来进一步区别体积差不多的细胞,如：LY和
BA(φ同在9-12μm范围),由于它们的核质比不同而在C参数上有所区别
◆库尔特先生在60年代着手研究该项技术,1970年获美国专
利
Light Scatter-RLS
◆运用一个氦氖激光源发出的单色激光扫描细胞,收集细胞
多角度(20-70度)的散射光(MALS),提供关于细胞形态,膜结构和颗粒性的信息
◆MALS=f(细胞体积、细胞膜结构和颗粒性)
Rotated Light Scatter=Log(LS)/DC,减少细胞体积的影响◆S在根据细胞的颗粒类型和颗粒数量区分细胞时十分有
用,VCS最成功之处在于它对EO的识别能力和计数
其它五分类仪器对EO的分辨往往不够成功或精度不高,因为很难将它与其它粒细胞区分完全
◆库尔特先生对流式光感应系统的研究可以追溯到20多年
前的Fulwyler前辈时代,同时库尔特公司在流式细胞仪的制作过程中积累了丰富的激光技术经验。
4.三维分析
◆根据每个细胞的V、C、S检测量,将她们分布到一个三维
坐标(256×256×256=16,777,216)上,用数学公式计算出各白细胞亚群的分布区,其分辨率是至今为止最高的
◆高分辨率不仅令五项分类清晰,还令异常得以敏感特异的
显示,原始细胞可以进一步区分是淋巴区、单核区、还是粒细胞区
◆高分辨率提供科研潜力
5.VCS统计量达到8000个细胞,保证一定的精度
6.VCS分类与手工分类的相关系数：LY>0.9; NE>0.9; MO>0.7
7.流式通道有进一步发展的潜力
◆MAXM：RET%
◆STKS：RET%、CD4、CD8
8.清晰的白细胞分布图
◆在仪器屏幕和打印报告上,我们可以看到三维座标有代表
性的三个侧面：
DF1-V和S座标面,可观察到LY、NE、EO和MO 4个细胞亚群
DF2-V和C座标面,可观察到LY、MO和颗粒细胞
DF3-V和C座标面,是DF-2去除NE和EO后的画面,可观察到LY、MO和BA细胞
◆另外还有一个汇总了V、C、S三种技术的直方图,可协助
进行数据判断
◆点分布图上用各种颜色代表不同细胞浓度：
黄>红>绿>蓝
医院检验中心VCS白细胞五项分类原理技术特点和应用问题
医院检验中心VCS白细胞五项分类原理、技术特点和应用 问题 VCS原理和技术特点 在一个流式通道内,对单个白细胞进行直接、同时、三重测量,然后再进行三维分析。 1.Scatterpak试剂保证”接近原态”分析,避免化学方法对细胞 特性的破坏 Scatterpak(Erythrolyse—低渗、低pH、具表面活化性) (Stabilyse—高渗、高pH) WBC EL 肿胀ST：恢复等渗、生理pH 接近原态 RBC----------------- 肿胀---------------------------------------去除debris-------流式通道 PLT 肿胀El的表面活化作用继续发挥去除debris (28μL) (300μL×2) (133μL)
2.流体动力聚焦细胞,令其在流式通道内作最适的单细胞排 列 ISOTON III作为鞘流 3.VCS检测-视角与手工相似 VCS技术检测细胞的角度与镜检血片相似,都是从体积、核质比、颗粒特性、膜特性和形态等方面观察。但检测工具的敏感度大大提高,描绘程度上更精细,细胞的状态比染色情况下的更自然。 Volume ◆运用低频电流准确分析细胞体积 体积是区分白细胞亚群一个很重要的参数,它能有效区分LY和MO。但仍然存在一定程度的混淆,如：LY和BA(φ同在9-12μm范围);不成熟LY和NE(φ同在12-14μm范围) ◆该技术1967年开始使用 ◆库尔特专利
Conductivity-Opacity ◆运用高频电磁探针检测细胞内含物(细胞核、颗粒和其他 化学组份)的特性。 细胞膜对高频电流具传导性,当电流通过细胞时,细胞核、颗粒和细胞内的化学组份令电流的传导产生变化,其变化量(RF)可以用来反映细胞内含物的信息 ◆RF=f(细胞体积,细胞内含物传导性) ◆Opacity(阻光性)是指将细胞体积对RF的影响去除后的高 频传导数据,可以更确切地描述细胞内含物 Opacity?RF/DC ◆该参数可用来进一步区别体积差不多的细胞,如：LY和 BA(φ同在9-12μm范围),由于它们的核质比不同而在C参数上有所区别 ◆库尔特先生在60年代着手研究该项技术,1970年获美国专 利 Light Scatter-RLS
白细胞分类
白细胞分类 一、白细胞的形态、计数和分类 白细胞无色呈球形，有细胞核，体积比红细胞大，直径在7～20μm之间。正常人白细胞计数在4000～10000/mm3范围内，平均为7000/mm3。血涂片中白细胞，经复合染料染色后，可根据其形态差异和细胞质内有无特有的颗粒可分为两大类五种细胞。 1．粒细胞此类白细胞的细胞质内含有特殊着色颗粒。颗粒的着色性质不同又可分为①中性粒细胞；②嗜酸性粒细胞；③嗜碱性粒细胞。应当指出，这种划分并不表示细胞本身或其吞噬对象的酸性或碱性。 2．无粒细胞又可分为单核细胞与淋巴细胞。 此五种细胞各占的百分率称为白细胞分类计数。成年人各种白细胞的分类计数为：中性粒细胞60～70%，嗜酸性粒细胞1～4%，嗜碱性粒细胞0.5%～1%，单核细胞3%～8%，淋巴细胞20%～30%。它们的形态特征见表5-1及图5－4。 检查白细胞总数及各种细胞的分类计数对于临床诊断有一定意义。在新药开发中，为鉴别某种药物对机体有无亚急性和慢性毒性，也往往把它列为检测的项目。白细胞数超过10000/mm3称为白细胞增多症；少于4000/mm3称为白细胞减少症，均属于病理范围。此外，还要注意白细胞分类计数的变化。这些对于诊断机体的疾病有重要意义。 二、白细胞的功能 白细胞是机体防御系统的一个重要组成部分。它通过吞噬和产生抗体等方式来抵御和消灭入侵的病原微生物。
1．吞噬作用吞噬作用是生物体最古老的，也是最基本的防卫机制之一。对于其要消灭的对象无特异性，在免疫学中称之为非特异性免疫作用。中性粒细胞和单核细胞的吞噬作用很强，嗜酸性粒细胞虽然游走性很强，但吞噬能力较弱。 白细胞可以通过毛细血管的内皮间隙，从血管内渗出，在组织间隙中游走。它们吞噬侵入的细菌、病毒、寄生虫等病原体和一些坏死的组织碎片。一般认为，白细胞能向异物处聚集，并将其吞噬，这是因为白细胞有趋化性。由于细菌体或死亡的细胞所产生的化学刺激，诱发白细胞向该处移动。组织发炎时产生一种活性多肽，也是白细胞游动的诱发物质之一。 中性粒细胞内的颗粒为溶酶体，内含多种水解酶，能消化其所摄取的病原体或其他异物。一般一个白细胞处理5～25个细菌后，本身也就死亡。死亡的白细胞集团和细菌分解产物构成脓液。 单核细胞由骨髓生成，在血液内仅生活3～4天，即进入肝、脾、肺和淋巴等组织转变为巨噬细胞。变为巨噬细胞后，体积加大，溶酶体增多，吞噬和消化能力也增强。但其吞噬对象主要为进入细胞内的致病物，如病毒、疟原虫和细菌等。巨噬细胞还参与激活淋巴细胞的特异免疫功能。此外，它还具有识别和杀伤肿瘤细胞，清除衰老与损伤细胞的作用。 2．特异性免疫功能淋巴细胞也称免疫细胞，在机体特异性免疫过程中起主要作用。所谓特异性免疫，就是淋巴细胞针对某一种特异性抗原，产生与之相对应的抗体或进行局部性细胞反应，以杀灭特异性抗原。血液中淋巴细胞按其发生和功能的差异，分为T淋巴细胞和B淋巴细胞两类。 （1）细胞免疫细胞免疫主要是由T细胞来实现的。这种细胞在血液中占淋巴细胞总数的80％～90％。T细胞受抗原刺激变成致敏细胞后，其免疫作用表现以下三个方面。直接接触并攻击具有特异抗原性的异物，如肿瘤细胞，异体移植细胞；分泌多种淋巴因子，破坏含有病原体的细胞或抑制病毒繁殖；B细胞与T细胞起协同作用，互相加强，来杀灭病原微生物。 （2）体液免疫体疫免疫主要是通过B细胞来实现的。当此细胞受到抗原刺激变成具有免疫活性的浆细胞后，产生并分泌多种抗体，即免疫球蛋白，以针对不同的抗原。B细胞内有丰富的粗面内质网，蛋白质合成旺盛。抗体通过与相应抗原发生免疫反应，抗体能中和、沉淀、凝集或溶解抗原，以消除其对抗体的有害作用。 3．嗜碱性和嗜酸性粒细胞的功能这两种细胞在血液中停留时间不长，主要在组织中发生作用。 （1）嗜碱性粒细胞这类细胞的颗粒内含有组织胺、肝素和过敏性慢反应物质等。肝素有抗凝血作用，组织胺可改变毛细血管的通透性。过敏性慢反应物质是一种脂类分子，能引起平滑肌收缩。机体发生过敏反应与这些物质有关。嗜碱性细胞在结缔组织和粘膜上皮内时，称肥大细胞，其结构和功能与嗜碱性细胞相似。
人体八种白细胞类型
白细胞亦称白血球，它的功能是使机体免受病原体（细菌和病毒）、癌细胞、异物侵入，是人体的守卫者。白细胞来源于骨髓中的造血干细胞，在骨髓中发育后进入血液和淋巴液循环，也存在于血管和淋巴管外的组织中。 人体中白细胞有八种类型，具体细胞类型如下。 1 巨噬细胞 巨噬细胞是个头最大的白细胞。 巨噬细胞由单核细胞分化发育而来，单核细胞几乎存在于所有组织中。巨噬细胞对细胞残体和病原体进行吞噬和消化，这一过程称为吞噬作用。巨噬细胞内的溶酶体会释放溶菌酶破坏病原体。吞噬细胞还是参与适应性免疫的专职抗原提呈细胞。除了免疫功能外，吞噬细胞还扮演者促进生殖 细胞发育、性激素、骨组织的再吸收以及血络的形成。巨噬细胞如下图所示： 2 树突状细胞 类似于吞噬细胞，树突状细胞也是一种单核细胞。树突状细胞成熟时会伸出许多树突样或伪足样突起，与神经元的树突相似。树突状细胞通常存在于跟外界接触的皮膜(黏膜)部位，比如皮肤、内层的鼻子、肺、胃与肠的内层。树突状细胞通过摄取、加工处理和递呈抗原到淋巴结和淋巴器官 中的淋巴细胞帮助机体识别病原体，启动特异性免疫应答。树突状细胞如下图所示： 3 B淋巴细胞 B细胞是淋巴细胞的成分之一。B细胞受抗原刺激后，会增合成和分泌一种特殊的蛋白质——抗体对抗病原体，抗体与抗原结合帮助机体识别病原体，并使之成为靶细胞被其他免疫细胞清除。被称为记忆细胞的B细胞可以保持对病原菌生物分子标记物的记忆，使得同一种抗原再次进入机体 时免受感染。这使得机体保持针对特定病原体的长期免疫力。B淋巴细胞如下图所示： 4 T淋巴细胞 类似于B细胞，T细胞也是淋巴细胞之一。T淋巴细胞来源于骨髓，迁移到胸腺内分化成熟。T 细胞通过直接杀伤靶细胞和释放淋巴因子参与免疫反应。T细胞包括细胞毒性T细胞、辅助性T细胞、抑制性T细胞、自然杀伤T细胞和记忆T细胞。细胞毒性T细胞直接杀伤靶细胞，辅助性T细胞协助B细胞产生抗体，抑制性T细胞抑制B细胞和其他T细胞对抗原的免疫应答。 NKT细胞具有T细胞和NK细胞两重性质，但是NKT细胞不是NK细胞而是T细胞。T淋巴细胞 如下图所示： 5 自然杀伤细胞 自然杀伤细胞是分布于血液循环的淋巴细胞，它能识别被感染细胞和衰老细胞。NK细胞含有化学颗粒，NK细胞能够识别肿瘤或病毒感染的细胞，通过释放化学颗粒吞噬破坏病变细胞。这些化学颗粒能溶解病变细胞的细胞膜，促使细胞凋亡,最终杀伤靶细胞。 同时应该区分NK细胞和某些T细胞，比如NKT细胞，不要相互混淆。自然杀伤细胞如下图所 示： 6 嗜中性粒细胞
检验基础之白细胞检查
白细胞检查 【概要】三类五种 ·单核细胞（M） ·淋巴细胞（L） 白细胞计数 【定义】指测定单位体积的血液中各种白细胞的总数。 【方法】显微镜计数法和血液分析仪计数法 【原理】显微镜计数法 用白细胞计数稀释液（多为稀乙酸溶液），将血液稀释一定倍数并破坏成熟红细胞后，滴入血细胞计数盘中，在显微镜下计数一定范围内白细胞数，经换算求得每升血液中各种白细胞 显微镜计数法和血液分析仪计数法 【操作方法】显微镜计数法 0.38ml稀释液＋20μl血→混匀（棕褐色）→充池→静置2～3min→计数（低倍镜，四角4个大方格）→计算 【质量控制】 1.经验控制 血涂片上WBC分布密度与WBC数量关系 （1）与红细胞数比较：红细胞数/白细胞数约为500～1000：1。 （2）与血涂片白细胞分布密度一致性。
2.计数误差 （1）技术误差： 通过熟练操作、仪器校准而减小，甚至避免。 （2）固有误差： 是计数室内每次血细胞分布不可能完全相同所致的误差。若白细胞数太低（＜3×109/L），可增加计数量（数8个大方格白细胞数）或减低稀释倍数，太高（＞15×109/L），可增加稀释倍数。 （3）有核红细胞： 正常情况下，外周血中不会出现有核红细胞。若出现大量有核红细胞，其不能被白细胞稀释液破坏，计数时与白细胞一同被计数，使白细胞计数值假性增高。 校正公式为：校正后白细胞数/L＝校正前白细胞数× （Y为白细胞分类计数时，100个白细胞中有核红细胞的数量）。 【参考值】 成人：（4～10）×109/L。 新生儿：（15～20）×109/L。 6个月～2岁：（11～12）×109/L。 儿童：（5～12）×109/L 【临床意义】 由于中性粒细胞占白细胞总数的50%～70%，所以白细胞计数与中性粒细胞计数的临床意义基本上一致。 白细胞分类计数（DC） 【检测原理】 求得各种白细胞的比值（百分率）； 各类白细胞的绝对值（白细胞计数值×白细胞分类计数%）。 【质量控制】 1.影响分类计数准确性因素 （1）细胞分布不均： 体尾交界最佳， “城垛”式移动。 【质量控制】主要因素 （2）形态识别差异 ①杆状核和分叶核诊断标准差异；
五分类血细胞计数仪
五分类血细胞计数仪 ?CBC分析原理和技术 ?库尔特原理 ?HGB测量原理 ?白细胞分类原理 ?三分类原理：库尔特直方图分类 ?五分类原理：VCS三维分析原理 1. CBC分析原理和技术 库尔特原理 当一个不良导体颗粒，例如血细胞，通过两个电极之间时，导致电路的电阻抗发生变化。 库尔特原理图 负压 HGB测量原理 I C S H H G B检测参考方法 氰化高铁血红蛋白(H i C N-H b)测定方法试剂反应时间长达5分钟以 氰化H G B检验方法(细胞仪) 氰化血红蛋白(C N-H b)测定方法试剂成分：氰化钾两者不可混为一谈！ 2.白细胞分类原理 三分类原理：库尔特直方图分类 向一个计数池的稀释血样加入溶血剂 细胞化学-体积法 溶血剂令不同亚群的白细胞不同程度地失水皱缩，显示体积差异； 电阻法技术得到白细胞分布直方图 根据直方图上的体积范围定义白细胞三项分类 L Y:35-90f L，M O:90-160f L，G R:160-450f L 五分类原理：VCS三维分析 分析外周血液中的淋巴细胞 单核细胞 嗜中性粒细胞 嗜酸性粒细胞 嗜碱性粒细胞 运用V C S技术,对白细胞进行多参量分析大小、核形、颗粒特性 V CS三维分析原理 运用V、C、S三种探针,在流式通道的某一位点,对通过的单列白细胞，进行逐个的、同时的、三重的检测，以及三维分析,以确定其亚群性质。 V-低频波，分析细胞体积； C-高频波，分析细胞核型； S-激光，分析细胞的颗粒特性。 接近原态的W B C分析 S c a t t e r P a k双试剂系统的作用 去红细胞:红细胞溶解剂（低渗透压，低P H液）通过渗透压差溶解红细胞； 保持白细胞原态:溶解终止液（高渗透压，高P H液）令白细胞恢复到“接近原态”大小。流体动力聚焦
白细胞计数实验报告(仅供参照)
白细胞计数和分类 目的：掌握血涂片制备的操作要领、瑞氏染色方法、正常外周血五种白细胞形态特点、 原理：各种白细胞必须经过染色，才易于区分其类别。常用者为瑞氏（Wright’s）染色法和姬姆萨(Giemsa)染色法。测定外周血液中各种白细胞的相对比值，以观察其数量、形态和质量变化，通过显微镜观察染色血涂片，计算血液中各类白细胞的百分率，称为白细胞分类计数。利用白细胞总数和各类白细胞的百分率，即可计算每mm3血液中各类白细胞的绝对值。 实验器材：香柏油、盖玻片、推片、采血针或注射器、小滴管、消毒棉球、瑞氏染液、pH6.4~6.8磷酸盐缓冲液、蒸馏水、计数板及专用盖片、针1ml 刻度移液管、1ml EP管、光学显微镜。20ul刻度移液管、推片 实验步骤 白细胞分类 1．血片制作： 取一滴血，滴于洁净无油脂的玻片一端。左手持玻片，右手再取边缘光滑的另一玻片作为推片。将推片边缘置于血滴前方，然后向后拉，当与血滴接触后，血即均匀附在二玻片之间。此后以二玻片约呈30—45度的角度平稳地向前推至玻片另一端。推时角度要一致，用力应均匀，即推出均匀的血膜（血膜不可过厚、过薄）。将制好的血涂片晾干，不可加热。 注：（1）良好涂片标准：１) 呈头、体、尾舌形 ２) 血膜厚薄适宜 ３) 两边留有空隙（2）涂片好坏与下列因素有关：1）血滴大小 2）推片与玻片之间角度 3）推片速度 2、血涂片的染色步骤： （1）用蜡笔在血膜两端各划一道线，以免染料外溢，置涂片于染色架上。（2）滴加瑞氏染液，共计七八滴数，以盖满血膜为度，静置1分钟。（3）再滴加等量的磷酸缓冲盐溶液，轻轻摇动，并轻吹液体使染色液与缓冲液混合均匀，静置15分钟。 （4）用清水冲洗。切勿先倾去染液再冲洗，否则沉淀物附于血膜上不宜出去。冲洗后斜置血涂片于空气中干燥。或先用滤纸吸取水分迅速干燥，即可镜检。 3、白细胞分类计数：先用低倍镜检查涂片及染色是否均匀。然后加一滴香柏油于血膜厚薄均匀处（一般在体尾交界处），在油镜下由此处开始按其形态特征进行分类计数，计数移动时避免重复。根据所见到的100个白细胞，记录各种白细胞所占的百分数。
白细胞五分类原理和散点图特征
血细胞仪白细胞五分类法原理和散点图特征2008-12-14来源:检验世界网浏览:5747次转发至：我要评论【字号：大中小】 核心提示：本文主要介绍全自动血细胞分析仪在白细胞五分类上的原理和散点图分布特点。此类仪器在红细胞、血红蛋白、血小板和计算参数上一般会采用类似的测定原理和计算方法，此类仪器的进展和其功能特点可参考作者撰写的其它文章。赞 北京协和医院检验科张时民检验地带网 血细胞分析技术已经进入自动化时代，而具有白细胞五分类或更多分析参数的仪器也普遍的应用于国内各级医院实验室中，为临床诊断和治疗服务。而具有18项参数带有白细胞三分群功能的血细胞分析仪也已经普及进入到基层医院和社区医疗中心，在许多大型医院中已不占主流位置，因此可以说目前在较大医院的检验科，常规血细胞分析仪已经进入全自动化和白细胞五分类的时代。 本文主要介绍全自动血细胞分析仪在白细胞五分类上的原理和散点图分布特点。此类仪器在红细胞、血红蛋白、血小板和计算参数上一般会采用类似的测定原理和计算方法，此类仪器的进展和其功能特点可参考作者撰写的其它文章（见参考文献）。具有白细胞五分类功能的血细胞分析仪器是指通过各种物理和化学技术对白细胞进行分析，以获得外周血液中白细胞的五种常见类型，嗜中性粒细胞，嗜酸性粒细胞，嗜碱性粒细胞，淋巴细胞和单核细胞的百分率和绝对值的测定结果，此外还应该具有对出现异常白细胞的提示或初步分类功能。 目前国内外具有开发研制白细胞五分类法仪器的主要为欧美和日本生产厂商，比较着名的欧美厂家有Beckman-Coulter；ABBOTT；Siemens（Bayer）；ABX；日本有Sysmex 和NihonKohdon。在国内已经有迈瑞（MINDRAY）公司生产几个型号的五分类血细胞分析仪器投入医疗市场。 检验地带网 一简要发展史 1974年，一种名为HEMALOGD的具有初步白细胞分类功能的白细胞分析仪问世。1982年，Technicon公司生产了H6000型血液细胞分析仪器，应该是首款具有白细胞五分类能力的仪器。同时代日本日立公司推出图像分析法的白细胞分析仪HITACHI8200型，仅仅是用于完成白细胞血片分类的仪器，没有其他血细胞计数分析能力。Technicon公司1985年开发了比较成熟的具有白细胞五分类功能的TechniconH1型血液细胞分析仪，随后升级为H2型和H3型。 COULTER公司在1987年开发研制其经典VCS技术，并推出持续具有多年影响力的、具有白细胞五分类功能的血液细胞分析仪MAXM型。 1990年前后，欧洲和日本许多厂家都陆续推出了各种类型的具有白细胞五分类功能的血细胞分析仪器。各厂家设计生产的此类血细胞分析仪，其在白细胞分类技术上原理各不相同，分析测定项目略有不同，且形式多样，结构复杂，试剂种类和成分也趋于复杂。不断改进和升级的新产品使得仪器在白细胞分类技术上更加成熟和可靠。而技术的提高也带来了仪器和消耗品（试剂）价格的增加。 检验地带网 二仪器原理和散点图特点 1体积、电导和激光散射原理 这是Beckman－Coulter公司生产的血细胞分析仪所采用的经典分析方法，他集三种物理学检测技术于一体，在细胞处于自然原始的状态下对其进行多参数分析。该方法也称为体积、电导、激光散射血细胞分析法。此技术采用在标本中首先加入红细胞溶血
骨髓细胞形态学检验及白细胞疾病教学课件
---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 骨髓细胞形态学检验及白细胞疾病教学课件 实验诊断学吉林大学第一医院实验诊断教研室续薇教授博士生导师 2019 级临床医学七年制教研室电话： 88782622 第四章第二节白细胞疾病的实验检测1. 适应症（1）出现不明原因的外周血细胞数量、成分及形态异常。 （2）出现不明原因的发热，肝脾及淋巴结肿大等。 （3）出现不同原因的骨痛、骨质破坏、肾功能异常、黄疸等。 （4）血液系统疾病治疗后的定期复查及化疗后的疗效观察。 （5）其他： 骨髓活检、造血干细胞培养等。 （一）适应症及禁忌症二、骨髓细胞形态学检查2. 禁忌症（1）有出血倾向或凝血时间明显延长，严重血友病患者。 （2）晚期妊娠的妇女做骨髓穿刺时应慎重。 1. 骨髓细胞学检查的适应症及禁忌症？（二）骨髓细胞学检查的程序 3.骨髓细胞染色 1.骨髓样本取材 2.骨髓涂片制备 4.合格标本判断 5.显微镜形态学检查 6.形态学诊断 7.骨髓形态学报告单 1、骨髓样本取材通过骨髓穿刺术获取骨髓样本，穿刺部位有髂前上棘、髂后上棘、胸骨和脊柱棘突。 一般取自髂后上嵴，采集量： 0.2ml 取材满意应该是无骨髓稀释。 骨髓涂片骨髓稀释判断标准： 1 / 3
如抽吸骨髓时混进血液，称为骨髓部分稀释。 如抽出的骨髓液实际上就是血液，称为骨髓完全稀释。 具体特征如下： ① 完全稀释： 与血涂片的细胞成分完全一样② 部分稀释： 骨髓小粒和油滴少或不见，骨髓特有细胞少，有核细胞少，成熟细胞： 幼稚细胞gt;3:5。 骨髓稀释 2、骨髓涂片制备涂片上血膜应位于涂片中央位置，呈舌状，分为头、体、尾三部分，骨髓涂片的同时作末梢血涂片，涂片数量应在穿刺前依据疾病诊断需要而定。 涂片太厚细胞聚集不能展开，细胞形态不好辨认；太薄细胞全被推散，分布不匀，分类困难。 涂片满意应该是细胞均匀分布又不太分离。 骨髓稀释 3、骨髓细胞染色染液多选取瑞氏-姬姆萨复合染液，通常情况下，室温染色15~30min，流水冲去染液。 染色太深结构不清；太浅不易形态辨认。 染色时间的长短与细胞数量和种类相关，如细胞数量多染色时间长，同样细胞数量时，粒细胞白血病染色时间较淋巴细胞白血病时间长。 染色满意应该是细胞染色后核结构清晰。 油滴的分级 ( - )：
如何认识血常规中白细胞和分类值的意义
如何认识血常规中白细胞和分类值的意义 全网发布：2012-07-24 23:00 发表者：陈贤楠(访问人次：33653) 血常规中的白细胞总数和分类是临床医生诊断和治疗疾病重要的参考资料，尤其在儿科急性发热、感染性疾病诊治中，血常规检查常是区别细菌性感染或病毒感染以及感染严重度必不可少的手段。但我在日常工作中也经常发现，某些家长或医生由于对白细胞总数和分类分析的片面性，导致抗生素滥用或疾病严重度判断的偏移。在此作简短讨论并提出自己的看法：北京儿童医院感染内科陈贤楠 一、必须牢记以下的基本概念： 1、白细胞总数(WBC)和分类(包括绝对值和相对百分数)值反映的是炎症指标，换言之，感染性炎症和非感染性炎症均可以引起上述参数的变化。 2、在儿科发热的患儿，白细胞和分类值常反映感染性炎症，也常作为鉴别细菌性或非细菌性感染的指标。即：细菌性感染常表现为白细胞总数和中性粒细胞绝对值和百分数升高。 3、但是在复杂性慢性、反复性发作的疾病（如哮喘、过敏咳嗽、过敏肠病等）和重症感染又伴有全身炎症反应（如各种病原体引起的重症感染、感染性休克）时，上述数值的判断必须慎重，因为它既受感染性炎症，又受非感染炎症的影响。 4、病毒感染时通常白细胞正常或减少，分类中淋巴细胞比例增加，但某些特殊病毒或病毒感染综合征时白细胞总数和中性粒细胞可增高。 5、白细胞总数和分类，作为血常规三项重要信息之一(其他二项是红细胞和血小板计数)，也是血液病和骨髓功能重要指标。如白白血病、白细胞减少症等。 二、当前儿科门诊对血常规白细胞总数分析的常见偏移和误区有： 1、以成人的白细胞和分类正常值来判断小儿的化验值。小儿各年龄段血常规中白细胞级分类有很大的不同（见下表）；白细胞主要分粒细胞(包括嗜中性、嗜酸性和嗜碱性)和淋巴细胞(单核细胞)。白细胞的分类中以粒细胞和淋巴细胞的变化比较突出：生后4～6天至～4～6岁期间以淋巴细胞（lymphocyte,L）占优势约占60%为主，中性粒细胞(neutrophil,N)约为30%；而在出生后4～6天前和4～6岁后直至成人则以中性粒细胞为优势，约占65%。 白细胞值正常范围在国内外不同教科书中有所不同的，但各年龄组的变化趋势是一致的。而目前个医院包括儿童医院化验单上均以成人正常值为标准，不少儿科医生也以此标准值去判断不同年龄患儿，这是一个很大的误区，也是抗生素滥用的重要原因。 2、白细胞和分类值增高作为感染疾病未愈的指标、作为继续应用抗生素的证据。许多家长因为化验白细胞高而不敢停用抗生素。事实上对只咳嗽不发热，没有明显感染病灶的孩子轻度的白细胞增加没有太大意义，更不能区分是细菌或病毒感染。因为有多种因素可以引起血常规中白细胞总数增高，如精神紧张、哭闹、运动或活动、预防接种，疼痛刺激等等。一天中的不同时间，服药、食物等也可使白细胞值改变。有人观察到：在12～24小时内，没有任何干预情况下，血常规中的白细胞计数可以由15.0~20.0×109/L下降至10.0×109/L（即从每立方毫米1.5万～2万降至1万以下）。 3、过度解读白细胞总数和分类，如机械、简单地用来判断感染病原体、抗生素选择的指标。 三、白细胞生成、循环和清除过程--有利于纠正上述误区 以上已提及：白细胞主要由粒细胞和淋巴细胞组成。以白细胞中占优势的中性粒细胞为例：
白细胞系统检验.
白细胞系统检验 血液循环中5种白C： 中性粒细胞：杆状核；分叶核 淋巴细胞：T
源发于Lcell恶性肿瘤，ex:淋巴细胞白血病、淋巴瘤 急性传染病恢复期 2、减少：应用肾上腺皮质H或烷化剂或APG治疗，杀伤Lcell 往往是绝对值的减低。 放射线的损伤。 （三）单核C，单核C↑，不会有白C↑ 增高有一定意义，单核C白血病，L瘤，何杰金氏病（HD） 骨髓增生异常综合证（MDS） 慢性粒C白血病：中性，嗜酸，嗜碱粒C均增多 急性感染恢复期 某些原虫、寄生虫感染，ex：疟疾，黑热病 （四）嗜酸粒C 不伴有白C↑ 增多：变态反应性疾病 寄生虫病：尤其是寄生在血液中的寄生虫。ex：血吸虫肺吸虫 皮肤病 某些血液病，嗜酸粒C的白血病 淋巴瘤 慢性粒C的白血病 高嗜酸性粒C增多综合证 （五）嗜碱粒C 不伴有白C↑ 增多嗜碱性粒C的白血病 慢性粒C的白血病 骨髓纤维化 慢性溶血 肺结核 骨髓细胞学检查 适应症：主要用于诊断各种造血系统疾病 各种贫血 各种白血病 各种紫癜，血小板减少 脾功能亢进 淋巴瘤 其他非造血系统疾病 原因不明的发热，恶病质：原因不明的肝、脾、淋巴结肿大；周围血出现。 幼稚细胞，可疑细胞以及血细胞的单项或多项原因不明的减少，增多。 禁忌症：甲型血友病 一、细胞发育的阶段性： 1、淋巴细胞、单核细胞为原始、幼稚、成熟三个阶段。 2、粒C 原始、幼稚（早、中、晚），成熟（杆状、分叶核） 红C 幼稚（早、中、晚） 3、有时，细胞核浆发育不同步，一般以发育快的时期为标准，（多数以核为主） eg :粒C 核早幼浆中幼所以粒C处于中幼粒 二、细胞发育的简单规律：
白细胞疾病的实验诊断↑◇◇
白细胞疾病的实验诊断 第一节概述 一、白血病疾病诊断试验的应用 外周血细胞检测、骨髓细胞学检测、骨髓病理学检测、细胞免疫性及遗传学检测 二、常见白细胞良性疾病分类： ⒈白细胞减少症 ⒉中性粒细胞功能异常症 ⒊传染性单核细胞增多症 ⒋单核细胞吞噬功能异常症如反应性组织细胞增多症 ⒌类白血病反应 三、白细胞肿瘤性疾病分类 ⒈骨髓增殖性肿瘤 ⒉骨髓增生异常综合症 ⒊急性髓系白血病和相关前体细胞肿瘤 ⒋前体淋巴细胞肿瘤 ⒌成熟B-细胞肿瘤 ⒍成熟T和NK-细胞肿瘤 ⒎霍奇金淋巴瘤等 第二节白细胞疾病的常用实验检测 一、血液常规检验 二、骨髓细胞形态学检验 ⒈适应证 ⑴造血系统疾病 ⑵考虑某些寄生虫感染可能 ⑶原因未明的系列表现： 发热；肝、脾、淋巴结肿大；骨痛或骨质破坏；皮肤损害；血沉异常增快，或蛋白尿。 ⒉▲禁忌症：凝血因子缺乏患者如血友病。 ⒊标本采集—骨髓穿刺 ⑴取材部位：髂后、髂前上棘，胸骨，棘突或局部病灶。 ⑵骨髓液采集：涂片：0.2ml；骨髓培养：2～3ml，抗凝。 ⒋涂片染色：瑞氏染色。 【参考范围】 ⒈判断骨髓增生程度 骨髓增生程度以骨髓中有核细胞的数量来反映，一般直接在低倍镜下观察骨髓成熟红细胞与有核细胞之间的比例作出判断。
⑴粒细胞系统： ■约占有核细胞的40%～60%。 ■原粒细胞＜2%，早幼粒细胞＜5%，中幼粒、晚幼粒细胞各约＜15%，杆状核粒细胞＞分叶核粒细胞；嗜酸性粒细胞＜5%，嗜碱性粒细胞＜1%，大多为成熟型； ■细胞形态染色基本正常。 ⑵红细胞系统： ■约占有核细胞的20% ■原红细胞＜1%，早幼红细胞＜5%，以中、晚幼红细胞为主，各占10%左右。 ■细胞形态染色基本正常。成熟红细胞大致正常。 ⑶粒红比值(M/E)： ■粒系细胞与幼红细胞百分率之和的比值。2～4:1。 ⑷淋巴细胞系统： ■约占有核细胞的20%，小儿可达40% ■成熟淋巴为主，原淋、幼淋巴细胞很少见。 ⑸巨核细胞系统： ■1.5cm×3cm的涂片中有7～35个。原巨0～5%，幼巨0～10%，颗粒巨10%～50%，产板巨20%～70%，裸核巨0～30%。 ⑹其他细胞： 单核细胞＜4%，成熟型为主。浆细胞＜2%，成熟型为主。纤维细胞、内皮细胞、脂肪细胞、肥大细胞、成骨细胞等非造血细胞成分。 ⑺核分裂细胞为0.1%。 【临床意义】 ⑴造血系统疾病 ⑵某些血液病及其相关疾病 ⑶某些寄生虫感染性疾病 ⑷恶性肿瘤骨髓转移 ⑸某些类脂质沉积病
白细胞分类计数的临床意义
白细胞分类计数的临床意义 人体内白细胞总数和种类白细胞的百分比是相对稳定的。正常人每立方毫米的血液时白细胞为止5000～10000个。各种白细胞的百分比为：中性粒细胞50～70％；嗜酸性粒细胞1～4％；嗜好碱性粒细胞0～1％；淋巴细胞20～40％；单核细胞为1～7％。机体发生炎症或其他疾病都可引起白细胞总数及各种白细胞的百分比发生变化，因此检查白细胞总数及白细胞分类计数成为辅助诊断的一种重要方法。 粪便中的白细胞当肠道有炎症时增多其数量多少与炎症轻重及部位有关偑晩鄌回閳呀。小肠炎症时白细胞数量不多丂毡鞔蹑雉鞙，均匀混合于粪便内且因细胞部分被消化而不易辨认。佯爬癋觝韏亨鳅结肠炎症如菌痢时亢曣蛡钆醰蜇，白细胞大量出现甚至满视野仼托磺醠闍韫嫊媳，并可见到退化的白细胞，还可见到边缘已不完整或已破碎核不清楚、成堆的脓细胞。过敏性肠炎肠道寄生虫病（如阿米巴痢疾或钩虫病）时粪便中有时还伴有夏科-雷登伇気销详銄僀 （Charcot-Leyden）両松铵鐂鎥结晶，如用瑞氏染液染色可见到嗜酸性粒细胞。 流行病学及临床研究发现，白细胞与脑血管病的发生和预后有关。文献报道，对10000余人两年的观察研究表明，白细胞增高是脑梗死的先兆之一；而中性粒细胞增高的相关性最大，尤其小于65岁组最明显。血中白细胞数越高，发生脑梗死的危险性越大。梗死组织周围有白细胞浸润，且梗死灶周围的毛细血管存在白细胞聚集现象。对脑血管病患者白细胞的流变性研究，亦发现白细胞在脑血管病的病理生理过程中起着重要作用。 白细胞计数（WBC） 白细胞计数（WBC）介绍： 白细胞计数是指计数单位体积血液中所含的白细胞数目。旧称白血球，是机体防御系统的重要组成部分 白细胞计数（WBC）原理： 用白细胞计数稀释液（多用稀乙酸溶液），将血液稀释一定倍数并破坏红细胞后，滴入庆数盘中，在显微镜下计数一定范围内的白细胞数，经换算即可求得每升血液中各种白细胞的总数。 白细胞计数（WBC）正常值： 成人（4.0～10.0）×109／L； 儿童（5.0～12.0 ）×109／L；
白细胞不分类
机型：贝克曼库尔特HMX血液分析仪分析仪故障：白细胞不分类 美国贝克曼库尔特公司生产的HMX全自动五分类血液分析仪，具有分析速度快、检测项目多、结果准确、重复性好、性能稳定等特点，被广泛应用于各医院检验科，但在日常工作中常遇到白细胞不分类的现象，HMX 血液分析仪进行白细胞分类是采用VCS技术，是从体积、核质比、颗粒特性、膜特性和形态等方面对白细胞综合分析，在分类中涉及两种试剂：一种是五分类溶血剂；另一种是稳定剂，稀释液(IS0T0N I)作为鞘液，当全血进入混匀池时，五分类溶血素(低渗)首先将细胞胀大，但由于红细胞膜比较薄，很快就胀破，只剩下胀大的白细胞，这时稳定剂(高渗)注入混匀池，使白细胞恢复到原态，混匀后的样品在样品压力与鞘流的作用下，在流式通道内作单细胞排列，进行三种参数的同时测量，然后经过计算得出结果，现将造成白细胞不分类的原因及排除方法介绍如下： 一、温度问题：按照分析仪使用说明，要求温度控制在：20～29℃，但有文献报道：妇最佳温度控制在25℃左右，因为溶血剂中的表面活性剂能与细胞膜作用，破坏脂质双层结构在细胞膜表面的表面活性剂，利用流体动力聚集细胞形成由密到疏的表面活性剂层，由于其疏水基团较大为不良导体，加之膜结构疏松肿胀从而使粒细胞在分析仪上的表现体积变大。倘若温度太低，会使溶血剂溶解红细胞的能力减弱，使红细胞不能完全溶解，从而干扰白细胞的分类计数。 分析仪故障排除方法：室内温度未达到要求时，应采用空调或取暖器将温度控制在2O℃以上，最好在25℃左右。 二、试剂配比问题：血液、溶血剂、稳定剂三者之比为：28：300：133，若该比例失衡则导致溶血不充分或溶血过度，以致于大量红细胞或很少细胞进入流式通道内，因此导致白细胞分类不正常。 分析仪故障排除方法：可通过调节液流比例相应参数加以纠正。 三、标本的问题： 1、部分血液病、肿瘤化疗病人等出现不分类；因为这些病人在治疗过程中使用的药物使红细胞的抗溶能力增强，使红细胞不能完全溶解，还有部分化疗后白细胞总数很低，使分析仪在规定的时间内很难测到足够量的白细胞，从而导致白细胞分类不准确或不分类，甲亢病人的白细胞不分类也有可能与药物影响有关。 分析仪故障排除方法：对于已确诊的病人且进行治疗观察的标本应做复片即用显微镜进行检查确认。 2、有报道黄疸、高血脂(血浆乳浊)、孕妇以及新生儿标本部分不分类，其原因是红细胞碎片难于溶解所致。 分析仪故障排除方法：将标本稀释使标本浓度降低，溶血剂浓度相对增高，可使红细胞破坏完全，将分析仪由全自动状态进入半自动状态便可进行测试，取百分比作为结果，绝对值采用总数乘以百分比。
临检 白细胞检查 练习题
第三章白细胞检查 一、A1 1、在疾病过程中，出现中性粒细胞的核象右移常表示 A、病情好转 B、预后良好 C、预后不良 D、机体抵抗力好 E、骨髓造血功能旺盛 2、白细胞数小于2×109/L，采用下列方法中哪项是错误的 A、重新采血复查 B、取血量20μl，改为40μl C、可数8个大方格白细胞数结果乘2 D、结合分类涂片细胞分布综合判断 E、减低稀释倍数 3、中性粒细胞出现空泡，提示 A、细胞发生吞噬现象 B、细胞衰老 C、细胞分裂 D、细胞融合 E、细胞核与胞质发育不平衡 4、退行性核左移提示 A、机体的反应性强 B、骨髓造血功能减低 C、骨髓造血功能旺盛 D、预后良好 E、感染程度较轻 5、血涂片计数100个WBC见到25个有核RBWBC计数值为10×109/L，则WBC计数的真实值为 A、4×109/L B、6×109/L C、8×109/L D、10×109/L E、12.5×109/L 6、正常人血涂片中中性粒细胞核分叶最为多见的是 A、二叶 B、三叶 C、四叶 D、五叶 E、六叶 7、引起淋巴细胞数量增多的疾病是 A、百日咳、肾移植术后、结核 B、结核、百日咳、应用肾上腺皮质激素 C、肾移植术后、结核、接触射线
D、接触射线、应用肾上腺皮质激素、结核 E、百日咳、严重化脓性感染、淋巴细胞性白血病 8、关于中性粒细胞反应性增多的叙述，错误的是 A、机体对各种病因的应激反应 B、动员骨髓储备池中的粒细胞释放 C、动员边缘池粒细胞进入循环池 D、增多的粒细胞主要是原始或幼稚粒细胞 E、急性溶血所致的中性粒细胞增高属反应性增多 9、不会引起白细胞数量增多的疾病是 A、流行性出血热 B、伤寒 C、狂犬病 D、百日咳 E、急性心肌梗死 10、引起中性粒细胞数量增加的疾病是 A、伤寒 B、疟疾 C、心肌梗死 D、过敏性休克 E、副伤寒 11、与遗传性疾病有关的粒细胞异常形态改变是 A、Alder-Reilly畸形 B、Dohle小体 C、棒状小体 D、Mott细胞 E、棘形细胞 12、下列哪项与中性粒细胞的退行性变无关 A、胞体肿大 B、核固缩 C、核棘突 D、核溶解 E、结构模糊 13、关于中性粒细胞中毒颗粒的描述，不正确的是 A、比正常中性颗粒粗大 B、染色呈黑色或紫黑色 C、可遍布于细胞核上 D、大小不等 E、分布不均匀 14、不属于中性粒细胞毒性变化的是 A、Russell小体 B、中毒颗粒 C、空泡
白细胞检验
白细胞检验 一、名词解释 1、篮细胞:也称涂抹细胞，多因推片时人为造成，有时是细胞衰老退化所致，如核溶解、核固缩等，涂抹细胞大小不一，通常只有一个核而无胞质，胞核肿胀，结构模糊不清，染成均匀淡紫红色，有的可见核仁，有时呈扫帚状，型如竹篮，故又称篮细胞。 2、Auer小体：在瑞氏或吉姆萨的血或骨髓涂片中，白细胞胞质中出现染红色细杆状物质，1条或数条不等，长1~6um，称为Auer小体. 3、MDS:骨髓增生异常综合征,是一组异质性后天性克隆性疾患，其基本病变是克隆性造血干、祖细胞发育异常，导致无效造血以及恶性转化危险性增高。 4、柴捆细胞：急性髓系白血病，M3型、急性早幼粒细胞白血病(APL)患者，骨髓中以颗粒增多的异常早幼粒细胞增生为主，占30%一90%(NEC)，原粒细胞比例无明显增加。早幼粒细胞特点为细胞大小不一，胞核常不规则，染色质粗细不等，核仁常被嗜天青颗粒所覆盖而不清。胞质量丰富，含有大量密集紫红色嗜天青颗粒，并可见蓝色无颗粒之外浆呈伪足状突出。Auer小体易见，有时可呈"柴捆状"称为"柴捆细胞" 5、M蛋白：是浆细胞或B淋巴细胞单克隆恶性增殖所产生的一种大量的异常免疫球蛋白，其本质是一种免疫球蛋白或免疫球蛋白的片段。因其多见于多发性骨髓瘤。 6、多发性骨髓瘤：是恶性浆细胞病中最常见的一种类型，多发性骨髓瘤的特征是单克隆浆细胞恶性增殖并分泌大量单克隆免疫球蛋白。 7、类白血病反应：是指患者在某些情况下出现外周血白细胞显著增高(＞50×109/L)和(或)存在有异常未成熟白细胞，与某些白血病相类似，但随后病程或尸检证实没有白血病。类白血病反应是正常骨髓对某些刺激信号作出的一种反应。 二、选择题 1.急性早幼粒细胞白血病在形态学分类中属于（ C ）。 A.M1 B.M2 C.M3 D.M4 E.M5 2.急性髓细胞白血病微分化型在形态学分类中属于（ E ）。 A.M1 B.M2 C.M3 D.M4 E.M0 3.急性粒细胞白血病部分分化型在形态学分类中属于C A.M1 B.M2 C.M3 D.M4 E.M5 4.下列哪种骨髓表现符合M2（C）。 A.原始粒细胞占骨髓NEC的90%以上 B.原始粒细胞占骨髓NEC的30%～89%，单核细胞＞20% C.原始粒细胞占骨髓NEC的30%～89%，其他粒细胞＞10%，单核细胞＜20% D.原始粒细胞占骨髓NEC的90%以上，单核细胞＜20% E.原始粒细胞占骨髓NEC的30%以上，各阶段粒细胞占30%～80%，各阶段单核细胞＞20% 5.下列哪种骨髓表现符合M4（C）。 A.原始粒细胞占骨髓NEC的30%以上，各阶段粒细胞占30%～80%，各阶段单核细胞＞20% B.原始粒细胞占骨髓NEC的90%以上 C.原始粒细胞占骨髓NEC的30%～89%，单核细胞＞20% D.原始粒细胞占骨髓NEC的30%～89%，其他粒细胞＞10%，单核细胞＜20% E.原始粒细胞占骨髓NEC的90%以上，单核细胞＜20% 6.下列哪种骨髓表现符合M6（E）。 A.原始粒细胞占骨髓NEC的90%以上 B.原始粒细胞占骨髓NEC的30%～89%，单核细胞＞20% C.骨髓中幼红细胞≥50%，原始粒细胞占骨髓NEC≥30%
血细胞分析仪五分类检测技术及原理
血细胞分析仪五分类检测技术及原理 血细胞分析仪是医院临床检验应用非常广泛的仪器之一，随着科学技术日新月异的发展，血细胞分析的技术也从几年前的三分类转向现在的五分类，从二维空间进而转向三维空间，同时现代血细胞分析仪的五分类技术许多采用了先进的技术，如鞘流技术、激光技术等。下面就五分类血细胞分析仪器的检测方法及其应用加以说明。 1 采用阻抗、激光散射和荧光染色技术检测法 直流电阻抗法（DC）用于测量细胞体积大小。激光散射产生的前向散射光、侧向散射光和侧向荧光可用于探测白细胞体积大小、细胞内含物的情况（细胞核以及颗粒情况），侧向荧光则可以反映细胞内脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）的含量，特有的嗜酸性粒细胞检测溶血剂Str-matolyzer-EO可将除了嗜酸细胞以外的所有细胞溶解或萎缩，含有完整嗜酸细胞的液体通过小孔可以按照电阻法计数技术进行计数。在嗜碱细胞通道中，使用特殊溶血剂Strmatolyzer-BA可将除了嗜碱细胞以外的所有细胞溶解或萎缩，含有完整嗜碱细胞的液体通过小孔可以按照电阻法计数技术进行计数。幼稚细胞检查通道（IMI）可以根据幼稚细胞膜比成熟细胞膜表面含有脂质较少的现象，在细胞稀释悬液中加入硫化氨基酸，由于占位不同，结合在幼稚细胞表面的氨基酸较多，对溶血剂有抵抗作用，当加入溶血剂后成熟细胞易被溶解，而幼稚细胞不易被破坏，可通过电阻法检测出来。综合各个测量方法，得到白细胞五分类的图形和数据。这种技术主要应用在Sysmex研制和开发的SE-9000、SE-9500、XE-2100、XT-1800等系列血液分析仪中。 2 电阻抗和射频电导联合检测法 这种方法是分别采用四个检测系统来检测不同类型的细胞:（1）淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞检测系统:在细胞悬浮液中加入溶血剂使红细胞溶解，而使白细胞保持完整，细胞浆及核形态近似于生理状态，当这些细胞通过检测系统时，对白细胞进行电阻抗法（测量细胞体积）和射频电导法（检测细胞核和颗粒密度）的联合检测，结果将细胞分成淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞三个群体。（2）嗜酸性细胞和嗜碱性细胞两种检测系统:在细胞悬浮液中加入特殊的溶血剂，除嗜酸性细胞和嗜碱性细胞外，其他细胞均被溶解或萎缩，再对保持完整的嗜酸性细胞或嗜碱性细胞进行计数。（3）幼稚细胞检测系统:在细胞悬浮液中加入硫化氨基酸，由于占位不同，结合在幼稚细胞的氨基酸比成熟细胞多，且对溶血剂有抵抗作用，当加入溶血剂时，成熟细胞被溶解，只保留着可能存在的幼稚细胞用来计数。目前日本东亚公司的NE1500、SYSNEX公司的SE9000血细胞分析仪就是采用这种方法进行五分类的。 3 多角度激光偏振光散射检测法
白细胞疾病习题
[单选,A4型题,A3/A4型题]男性，52岁，头晕、乏力伴腰痛3个月，化验 Hb82g/L，WBC6.2×10/L，PLT175×10/L，ESR116mm/h，尿蛋白(+)，骨髓浆细胞52%，血白蛋白电泳见M带，X线检查见L、L椎体压缩性骨折。最可能的诊断是() A．慢性肾炎 B．骨转移瘤 C．多发性骨髓瘤 D．反应性浆细胞增多症 E．华氏巨球蛋白血症 [单选,A4型题,A3/A4型题]男性，52岁，头晕、乏力伴腰痛3个月，化验 Hb82g/L，WBC6.2×10/L，PLT175×10/L，ESR116mm/h，尿蛋白(+)，骨髓浆细胞52%，血白蛋白电泳见M带，X线检查见L、L椎体压缩性骨折。化验检查最不可能出现的是() A．高钙血症 B．高尿酸血症 C．氮质血症 D．血黏稠度明显降低 E．血β-微球蛋白升高 [单选,A4型题,A3/A4型题]男性，52岁，头晕、乏力伴腰痛3个月，化验 Hb82g/L，WBC6.2×10/L，PLT175×10/L，ESR116mm/h，尿蛋白(+)，骨髓浆细胞52%，血白蛋白电泳见M带，X线检查见L、L椎体压缩性骨折。本例免疫球蛋白分型肯定不是() A．IgG B．IgA C．不分泌型 D．轻链 E．IgD [单选,A4型题,A3/A4型题]男性，52岁，头晕、乏力伴腰痛3个月，化验 Hb82g/L，WBC6.2×10/L，PLT175×10/L，ESR116mm/h，尿蛋白(+)，骨髓浆细胞52%，血白蛋白电泳见M带，X线检查见L、L椎体压缩性骨折。最有可能诊断是() A．霍奇金病 B．非霍奇金淋巴瘤
D．继发感染 E．骨髓纤维化 [单选,A4型题,A3/A4型题]男性，52岁，头晕、乏力伴腰痛3个月，化验 Hb82g/L，WBC6.2×10/L，PLT175×10/L，ESR116mm/h，尿蛋白(+)，骨髓浆细胞52%，血白蛋白电泳见M带，X线检查见L、L椎体压缩性骨折。最佳治疗方案() A．放射治疗 B．化疗 C．生物治疗 D．手术治疗 E．联合化疗加骨髓移植 [单选,A4型题,A3/A4型题]男性，68岁，发热1周。查体：贫血貌，无肝、脾、淋巴结肿大，血红蛋白80g/L，白细胞2×10/L，血小板45×10/L。确诊最有价值的检查是() A．核素骨扫描 B．骨髓检查 C．腹部B超检查 D．磁共振 E．血清碱性磷酸酶 [单选,A4型题,A3/A4型题]男性，68岁，发热1周。查体：贫血貌，无肝、脾、淋巴结肿大，血红蛋白80g/L，白细胞2×10/L，血小板45×10/L。骨髓检查原粒细胞占50%，治疗首选() A．放射治疗 B．血浆交换 C．联合化疗 D．干扰素治疗 E．造血干细胞移植 [单选,A4型题,A3/A4型题]男性，68岁，发热1周。查体：贫血貌，无肝、脾、淋巴结肿大，血红蛋白80g/L，白细胞2×10/L，血小板45×10/L。不常用于本病治疗的药物是() A．马法兰 B．柔红霉素