梅毒螺旋体检测(TRUST)

梅毒螺旋体检测(TRUST)

梅毒螺旋体(TP)抗体检测(TRUST)【检测用途】

本试剂采用VDRL抗原重悬于含有特制的甲苯胺红溶液中制成。供在白色卡片上进行试验,以检测血清或血浆中反应素用。可作为梅毒病人的诊断和疗效之参考。【检测原理】

梅毒非特异抗体检测是采用抗原抗体凝集反应。其原理如下:采用VDRL抗原(牛心磷脂、卵磷脂及胆固醇)重悬于含有特制的甲苯胺红溶液中制成,供在白色卡片上进行实验,以检测血清或血浆中反应素用。

【储存条件及有效期】

试剂盒于2℃~8℃保存,有效期为12个月

【使用方法】

1.定性试验

(1)分别吸取50微升梅毒阳性对照和阴性对照均匀铺加在纸卡的两个圆圈中。

(2)取待检血清或血浆50微升(不需灭活)置于纸卡的另一圆圈中。

(3)用专用滴管及针头垂直分别滴加TRUST试剂1滴于上述血清中。

(4)按每分钟100转摇动8分钟,肉眼观察结果。

2.定量试验

将待检血清用生理盐水作倍比稀释,然后按上述定性方法进行试验,以呈现明显凝集反应的最高稀释度作为该血清的凝集效价。

【结果判断】

1.阳性反应(+++~++++):可见中等或较大的红色凝聚物。

2.弱阳性反应(+!++):可见较小的红色凝聚物。

3.阴性反应(—):可见均匀的抗原颗粒而无凝聚物。

【注意事项】

1.本试验在23~29℃条件下进行。

2.TRUST试剂使用前充分摇匀。

3.本试验系非特异性反应,需结合临川进行综合分析,必要时需做梅毒螺旋体抗体特异性试验。

梅毒trust tppa tpha

>梅毒螺旋体血球凝集试验(trepomema palidum hmagglutination assay,TPHA) 利用间接血凝法测定人血清或血浆中的梅毒螺旋体的特异性抗体,只要有微量的抗体(血清通常用作1∶80以上稀释)就可使致敏的红细胞发生凝集作用。试验方法中,试剂盒配置的血清吸收剂可消除试验中的生物学假阳性反应,提高试验的特异性。此试验用于确诊梅毒,具有快速、简便、敏感和特异等特点。 梅毒螺旋体明胶凝集试验(treponema pallidum particle assay,TPPA)的试验原理与TPHA基本相同。TPPA试验用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒替代TPHA试验中致敏的红细胞,此致敏颗粒与人血清或血浆中的梅毒螺旋体抗体结合,产生可见的凝集反应,具有较高的敏感性。明胶颗粒为洋红色,在操作步骤上也较为方便,出结果较快。梅毒快速检测试纸条是根据双抗原夹心免疫层析原理,在硝酸纤维素膜上包被TP重组抗原,在玻璃纤维上吸附胶体金标记TP重组抗原,样品中的TP抗体首选与金标抗原结合形成复合物,顺膜渗透至包被反应区,与包被TP抗原结合,形成由胶体金抗原-TP抗体-抗原组成的紫红色反应带。本法简单,无需特殊设备,全部试验过程可在30分钟内完成,故特异性好。 TPHA梅毒螺旋体抗原血清试验其敏感性和特异性高,主要被用于梅毒确诊试验,但对疗效观察意义不大。TPHA是目前梅毒诊断的确诊试验,一旦试验呈阳性反应后,即使经过治疗,也终身不会转阴。TPPA是在TPHA基础上建立的一种新试剂,具有操作简便、不需其他仪器、操作中无需等待血液吸收、2小时读结果的优点。 甲苯胺红不加热血清试验(tolulized red unheated serum test,TRUST)是一种非梅毒螺旋体抗原血清试验,主要用于梅毒的筛选和疗效观察。 梅毒螺旋体感染人体后,宿主迅速对螺旋体表面的脂质作出免疫应答,在3~4周产生抗类脂质抗原的抗体(反应素),此时TRUST试验可呈阳性。 2原理编辑本段 用正常牛心肌的心类脂(Cardiolipin 二磷酸酰甘油衍生物)作为抗原,而不是用螺旋体作为抗原,来测定病人血清中的反应素(非特异性抗体---抗心磷脂抗体)。用来初步筛查

梅毒螺旋体抗体胶体金法测定

梅毒螺旋体抗体胶体金法测定 1【目的】 定性检测血清或血浆中是否含有梅毒抗体 2【该SOP变动程序】 本标准操作程序的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并经下述人员批准:专业主管,科主任。 3原理 梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒(胶体金法)采用高度特异性的抗体抗原反应及免疫层析分析技术来定性检测血清/血浆中是否含有梅毒抗体,试剂盒含有被事先固定于膜上测试区(T)的重组特异性梅毒抗原和质控区(C)的相应抗体。 测试时,血浆/血清标本滴入试剂盒加样孔(S)内,血标本中的梅毒抗体与预包被在膜上的胶体金结合物反应。然后,混合物随之在毛细效应下向上层析,在测试区(T)与固定在膜上的重组特异性梅毒抗原反应。如果血清中含有抗梅毒抗体,在测试区内(T)会出现一条紫红色条带,表明时阳性结果。如果在测试区内(T)没有出现紫红色条带,则血标本中不含有抗梅毒抗体,表明是阴性结果。无论抗梅毒抗体是否存在于血标本中,混合物都会继续向上层析至质控区(C),质控区的相应抗体与胶体金结合物反应出现一条紫红色条带。质控区内(C)所显现的紫红色条带是判定层析过程是否正常的标准,同时也作为试剂的内控标准。 4标本采集与处理: 4.1受检者准备: 4.1.1受检者的状态: a.不可变的生物因素:年龄,性别,生活环境遗传; b.可变的生物因素: A)情绪:原则上患者应在平静,休息的状态下以晨起空腹时采集标本,患者对采集标本时的恐惧、紧张会造成标本采集的失败。 B)运动:受检者应处于平静状态下采集标本,可减少由于运动带来的影响。 C)生理节律变化:昼夜的生理变化可能使测定结果不恒定,晨起固定时间空腹血尽可能减少昼夜节律带来的影响。 4.2采取标本时: A)体位:除非是卧床的病人,一般采血时取坐位。

三种梅毒螺旋体检测

三种梅毒螺旋体检测方法的临床评价 作者:凌聪作者单位:广东省南雄市人民医院检验科,广东南雄512400 【摘要】目的:探讨三种血清梅毒螺旋体检测方法的应用价值。方法:应用甲苯胺红不加热血清学试验(TRUST),酶联免疫吸附试验(ELISA)、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)分别检测596份标本,其中57例确诊为梅毒感染。结果:ELLSA法与TPPA法检测结果之间无显著性差异(P > 0.05),二者敏感性和特异性分别为94.7 %,98.1%和91.2%, 97.2%;TRWST与ELISA法、TPPA法之间有显著性差异(P< 0 .05)。结论:ELISA法和TPPA法在临床的诊断中是较好的血清梅毒螺旋体的检测方法。 【关键词】梅毒螺旋体; 甲苯胺红不加热血清学试验; 酶联免疫吸附试验; 梅毒螺旋体明胶凝集试验 Research on Three Method for Detecting Treponema Pallidum LING Cong The People's Hosptial of Nanxiong, Guangdong Nanxiong 512400, China Abstract: Objective: To explore three kinds of method for detecting treponema pallidum. Method: 596 specimens were detected with TRUST, ELLSA and treponema pallidum particle assay respectively, 57 of them infected treponema pallidum. Result: There's no significance difference between ELISA and TPPA method (P>0.05). The sensibility and specifity was 94.7%, 98.1% and 91.2%, 97.2& while, there's significant difference among TRUST, ELISA and TPPA (P<0.05). Conclusion: It's a good way to detect treponema pallidum with ELISA and PPPA method. Key words: Treponema pallidum; TRUST; ELISA TPPA 梅毒是一种经典的性传播疾病,梅毒螺旋体属于密螺旋体属苍白螺旋体的苍白亚种,是引起人类梅毒的病原体。其传染性强,危害性大,感染后可以引起全身各组织、器官的损害,危害较大。近年梅毒的发病呈上升趋势,因此对梅毒的早期诊断和及时治疗已成为当前重要问题,尤其对控制其蔓延至关重要。实验室如何更合理地选用检测方法,避免错诊、误诊、漏诊而产生医患纠纷等问题是非常必要的。为此,就如何更合理地利用甲苯胺红不加热血清学试验(TRUST)、梅毒酶联免疫吸附试验(ELISA)、梅毒螺旋明胶凝集试验(TPPA)三种不同方法为临床对梅毒的辅助诊断在此进行探讨。我们对2007年1月至2007年12月门诊和妇产科采集的596份标本采用甲苯胺红不加热血清学试验(TRUST)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、梅素螺旋体明胶凝集试验(TPPA)方法进行梅毒检测,结果分析如下。 1 对象与方法 1.1 一般资料:本组596例,男134例,女462例,年龄25~70岁;均为我院皮肤科、外科门诊就诊患者和妇产科住院病人。根据2000年中国卫生部防疫司颁布的性病诊断标准,其中57例临床确诊为梅毒感染。 1.2 方法:596份标本分别采用TRUST,TPPA,ELISA三种方法检测,检测所用试剂在有效期内使用,严格按照试剂操作说明书操作。 1.3 试剂与仪器:①TRUST 试剂由上海荣盛生物技术有限公司提供、仪器使用江苏省姜堰市天力医疗器械TL-2000A型梅毒自动旋转仪;②TPPA 试剂由日本富士欧必株式会社提供;③ELISA 试剂由为厦门新创科技有限公司提供、仪器使用美国生产的Stat fax-2100酶标仪和Stat fax-2600洗板机。 1.4 统计学方法:应用S PS S14.0统计软件,不同方法间的比较采用X2检验。 2 结果

梅毒甲苯胺红不加热血清试验TRUST

梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)1. 测定原理:采用VDRL抗原等特制的甲胺红溶液制成悬液。若样本含有梅毒螺旋体抗体,抗原抗体反应形成肉眼可见的红色凝集块。 2. 标本要求 2.1 血液:血浆(EDTA抗凝)血清。 2.2 测定量:50ul血清或血浆 3.试剂: 3.1 上海荣盛试剂盒(供梅毒血清学试验用) 3.2 试剂盒组成;TRUST抗原悬液 2.5mL×1瓶阴性对照血清1ml×1支阳性对照血清1ml×1支专用滴管及针头1套试验专用卡片120人份 3.3 保存条件:2-10℃ 4.质控;梅毒抗体质控血清,保存条件-15--20℃,使用前放置室温(18-25℃),颠倒混匀。 5.操作程序 5.1 标本测定 5.1.1 分别吸取50ul梅毒阳性对照和阴性对照均匀铺加在纸卡的两个圆圈中。 5.1.2 取待测血清或血浆50ul(不需失活)置于纸卡的另一圆圈中。 5.1.3 用专用滴管及针头垂直分别滴加TRUST试剂一滴于上述圆圈中。 5.1.4 按每分钟100转摇动8分钟。肉眼观察结果。

5.2 注意事项; 5.2.1 本实验在23-29℃环境下进行。 5.2.2 TRUST试剂使用前应充分摇匀。 5.2.3 如做定量试验,可将待检血清用生理盐水作倍比系列稀释,然后按上述定性方法进行试验,以呈现明显凝集反应的最高稀释度作为该血清的凝集效价。 5.2.4 本试验系非特异性反应,需结合临床进行综合分析,必要时需作特异性密螺体试验。 6.结果判断。 6.1 阳性(+++~++++):可见中等或较大的红色凝集物。 6.2弱阳性(+~++):可见较小的红色凝集物。 6.3阴性(—):可见均匀的抗原颗粒而无凝集物。

肾功能实验室检测练习题

精品文档 . 肾功能实验室检查练习题 一、选择题 1、反应肾小球滤过功能最可靠的指标是() A、血尿素 B、血肌酐 C、尿肌酐 D、血尿酸 E、内生肌酐清除率 2、最能反应肾功能损害程度的试验是() A.染料排泄试验 B.清除试验 C.浓缩试验 D.稀释试验 E.尿比重量、尿渗量测定 3、急性肾小球肾炎时,肾小球的滤过功能() A、正常或增高 B、正常或下降 C、正常 D、增高 E、下降 4、肾小管性蛋白尿和肾小球性蛋白尿的区别在于() A.前者尿中β2-MG高 B.后者尿中β2-MG高C、前者尿中清蛋白增高为主 D.后者尿中以清蛋白增高为主 E.后者尿中β2-MG和清蛋白均增高 5、反映肾小球滤过功能早期受损的试验最常用的是() A、BUN测定 B、Ccr C、Cr D、BUN清除率 E、UN 6、肾小管性蛋白尿时尿中出现的蛋白主要为() A、清蛋白 B、γ-球蛋白 C、β2-MG D、脂蛋白 E、α1-球蛋白 7、下列哪种物质属于主动排泌() A、PAH B、NH3 C、奎宁 D、水杨酸 E、K+ 8、下列哪项属于肾小管性蛋白尿中的尿蛋白() A、AIb B、Tf C、α2-MG D、α1-MGE、IgG 9、几乎不被肾小管重吸收的物质是() A、尿素 B、氨基酸 C、肌酐 D、谷胱甘肽 E、Na+ 10、某物质完全由肾小球滤过,由肾完全重吸收,则该物质的清除率是() A、0 B、50% C、65% D、90% E、100% 二、填空题 1、肾功能包括()、()和() 2、肾小管细胞通过()、()离子竞争地与()离子交换 三、简答题 常用肾功能实验室检测有哪些? 答案: 一、1.E2.B3.E4.A5.D6.C7.A8.D9.C10.A 二、1、排泄、调节体内平衡、合成生理性物质 2、k+、H+和Na+

肾功能实验室检测

肾功能实验室检测 常用肾脏功能实验室检测外层:皮质内层:髓质(肾锥体)*皮质在外层主要由肾小体和肾小管构成髓质在内层由~个锥体组成主要含髓袢的降支及升支、集合管及乳头管。 肾锥体开口于肾小盏肾小盏合成肾盂肾盂向下逐渐缩小续于输尿管。 肾脏结构和功能的基本单位:肾单位(nephron)肾小体肾小球肾小囊肾小管近端小管髓袢远端小管*肾单位与集合管共同完成泌尿功能。 肾脏的主要生理功能排尿功能尿素体内代谢产物肌酐尿酸药物外来物质毒物*保留体内所需要的物质,如蛋白质、氨基酸、葡萄糖等、调节功能水、电解质渗透压酸碱平衡*排泄过多的体液保持水平衡调节体液的电解质、渗透压和酸碱平衡。 内分泌功能()肾素肾小球旁细胞产生的一种酶催化血管紧张素原产生血管紧张素I使醛固酮合成增加。 ()促红细胞生成素促进血红蛋白合成。 ()羟化的VitD(OH)VitD对Ca、P代谢有调节作用。 ()激肽释放酶促进水、钠排出增加肾血流量降血压肾病常用的实验室检查:尿液检查肾功能检查肾活检病理检查肾功能检查的目的明确有无肾功能损伤肾脏损伤的程度和范围(累及肾小球、肾小管或两者均累及)借以制定治疗方案观察其动态变化判断预后确定疗效调整剂量。

肾小球功能检查肾小球滤过(glomerularfiltration):当血液流经肾小球的毛细血管网时血浆中的水和小分子溶质包括分子量较小的血浆蛋白质通过滤过膜滤过入肾小囊形成原尿的过程。 原尿的成分除了不含有血细胞和部分血浆蛋白质以外与血浆成分相同。 肾小球滤过示意图决定肾小球滤过作用的因素主要有三方面:滤过膜的通透性是滤过的结构基础有效滤过压是滤过的动力肾血浆流量是滤过的物质基础A、滤过膜的屏障作用由两部分组成()机械性屏障()电荷屏障B、有效滤过压由三种力组成根据三种力作用方向的不同可有:肾小球有效滤过压=肾小球毛细血管压(血浆胶体渗透压囊内压)C、肾血流量通过维持有效滤过压来影响肾小球的滤过功能肾小球滤过率(GFR)(glomerularfiltrationrate):单位时间内(分钟)经肾小球滤过的血浆液体量肾脏清除率(clearance)()定义:肾脏在单位时间内(每分钟)将多少毫升血浆中所含的某物质全部加以清除。 (mlmin)。 ()表示方法U×VC=PC:清除率(mlmin)V:每分钟尿量(mlmin)U:尿中测定物质的浓度(mmolL)P:血中测定物质的浓度(mmolL)UVC=xPAA:个体的体表面积肾清除试验及临床意义肾清除试验物质肾脏对物质清除方式临床意义肌酐菊粉甘露醇肾小球滤过肾小管不重吸收不分泌反应肾小球滤过功能蛋白质选择性滤过不或部分肾小管吸收反应肾小球屏障功能尿素肾小球滤过肾小管部分重吸收不是理想的肾小球功能试验各种电解质肾小球滤过肾小管大部分重吸收

梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒(胶体金法)

梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒(胶体金法) [产品名称] 通用名称:梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒(胶体金法) 英文名称:Diagnostic Kit for Antibody to Treponema Pallidum(Colloidal Gold) [包装规格] 一人份/袋,100袋/盒;25人份/筒,100人份/盒;单支/袋,50支/盒。 [临床意义] 快速检测人血清或血浆中的梅毒螺旋体特异性抗体。 [检验原理] 应用免疫层析式双抗原夹心法原理 [主要组成成份] 由纯化的基因重组梅毒螺旋体(Treponema Pallidum)抗原,免疫重组梅毒螺旋体抗体,固相硝酸纤维膜,胶体金交联的重组梅毒螺旋体抗原及其他试剂制成。 [储存条件及有效期] 4-30℃避光干燥处密封储存,切勿冰冻。有效期24个月。 [样本要求] 采集静脉血1-2ml与干净容器中分离出血或血浆样本,如不及时测定可置4℃冰箱贮存,超过三天应加入0.1%硫柳汞防腐,不可使用冻干样本。 [检验方法] 1、待测样本、检测试纸或其他检测用材料等均在室温平衡后取出试纸条或测试卡。 2、条型产品将测试条有剪头的一段插入血清或血浆样本容器中,约10秒后取出平放,15 分钟内观察显示结果。测试纸插入样本深处不可超过MAX标志线。 3、板型产品用所配滴管加2-3滴(约80μl-120μl)样本于加样孔中,15分钟在观察孔中 观察显示结果。 [检验结果的解释] 阳性:在检测线位置及对照线位置各出现一条反应线。 阴性:仅在对照线位置出现一条反应线。 无效:测试纸无反应线出现或仅在检测线位置出现一条反映现,表明试验失败或检测试纸失效。请用新测试纸重试。如果问题仍然存在,请停止使用本批产品,并与当地经销商联系。[试验方法的局限性] 1、由于技术上和操作上可能出现的失误,以及样本中可能存在的干扰物质,会导致错误的 结果。对可疑结果请重新测试。 2、本试剂只是定性的筛查梅毒螺旋体特异性抗体的存在,它不能确定被测物在样本中的具 体含量。 3、本试剂仅是一种临床辅助诊断工具,如结果呈阳性,请及时采用其他方法做进一步检查 并以医师诊断为准。 [产品性能指标] 测试临床2400多人份临床血清/血浆样本,并与临床所用确诊试剂比较,结果证明该产品的临床诊断灵敏度为98.6%,临床诊断特异性为99.7%。 [注意事项] 1、本品为一次性使用体外诊断试剂,应在有效期内使用。

血清标本中非梅毒螺旋体抗原血清学TRUST试验生物学假阳性的结果分析

血清标本中非梅毒螺旋体抗原血清学TRUST试验生物学假阳性的 结果分析 目的调查本院住院患者梅毒血清学试验TRUST生物学假阳性率并进行临床分析。方法通过2016年10月~12月在本院搜集的10161例住院患者临床病例,结合实验室的梅毒血清学试验,分析TRUST生物学假阳性的发生是否与性别、年龄、疾病等因素相关,并进行统计学分析。结果10161例住院患者TRUST 生物学假阳性率为38(0.37%);男女患者(0.27% vs0.44%)以及各年龄段患者(0.33% vs0.60% vs0.18% vs.0.26% vs0.43%)之间假阳性率均无统计学差异(P <0.05);TRUST假阳性多见于皮肤和皮下组织疾病(2.78%)、血液和造血器官疾病(2.17%)以及肿瘤(0.33%)等患者中,其抗体滴度均较低,不超过1:8。结论TRUST试验生物学假阳性存在一定的发生率,对于容易出现假阳性的患者,建议与TPPA等梅毒螺旋体抗原血清学试验联合检测。 Abstract:Objective To investigate the clinical significance of TRUST biological false positive rate in the hospitalized patients with syphilis serological test.Methods A total of 10161 hospitalized patients were collected from 2016 October to December in the hospital.With syphilis serological laboratory tests,analysis of the occurrence of TRUST biological false positive age and gender,disease,and other relevant factors,and analyzed statistically.Results 10161 cases of hospitalized patients with TRUST biological false positive rate was 38(0.37%);male and female patients(0.27% vs0.44%)and the patients of all ages(0.33% vs0.60% vs0.18% vs.0.26% vs0.43%)there was no significant difference between the false positive rate(P<0.05);TRUST false positive in the skin and subcutaneous tissue diseases(2.78%),disease of blood and hematopoietic tumors(2.17%)and(0.33%)patients,the antibody titers were low,not exceeding 1:8.Conclusion TRUST test biological false positive rate for a certain existence,prone to false positive patients,the suggestion and TPPA such as treponema pallidum antigen serologic test combined detection. Key words:Syphilis;TRUST;Biological false-positive 梅毒(syphilis)是由梅毒螺旋體感染人体而发生的常见性传播疾病,已经问世数百年了,目前在世界范围均有分布,是严重的性传播疾病之一;可以分为获得性梅毒、先天梅毒和妊娠梅毒等[1-3]。梅毒血清学试验为确诊梅毒病例所必需的实验室检查项目,目前常用的梅毒血清学试验包括非梅毒螺旋体抗原和梅毒螺旋体抗原血清学试验.中山大学孙逸仙纪念医院对于梅毒的血清学检测采用了甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)和梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)结合分析的办法,而相对于耗时的TPPA,TRUST具有操作简单、快速和成本低等特点,更适于大批量血样本的筛选,是目前临床实验最为快速简便的检测手段。TRUST试验是用于筛选梅毒病人的非特异性试验,并非确证试验,它的原理是用正常牛心肌的心磷脂作为抗原,测定患者血中的抗心磷脂抗体,是一种凝集反应。除在梅毒的继发期,灵敏度可高达95%~100%外,在梅毒早期、晚期及

第五章常用肾脏功能实验室检测

第五章常用肾脏功能实验室检测 肾脏是一个重要的生命器官,其主要功能是生成尿液,以维持体内水、电解质、蛋白质和酸碱等代谢平衡。同时也兼有内分泌功能,如产生肾素、红细胞生成素、活性维生素D等,调节血压、钙磷代谢和红细胞生成。肾病常用的实验室检测:1.尿液检测这是最古老,但至今仍是最常见的检验技术,用于早期筛选、长期随访;方法简便、价格低廉,也是判断肾病严重程度、预后的重要内容。 2.肾功能检测代表肾脏的最重要的功能,包括:①肾小球滤过功能。②肾小管重吸收、酸化等功能。肾血流量及内分泌功能目前临床应用较少。肾功能检测是判断肾脏疾病严重程度和预测预后、确定疗效、调整某些药物剂量的重要依据,但尚无早期诊断价值。 第一节肾小球功能检测 肾小球的功能主要是滤过,评估滤过功能最重要的参数是肾小球滤过率(glomerular filtration rate,GFR)。正常成人每分钟流经肾脏的血液量为1200~1400ml,其中血浆量为600~800ml/min,有20%的血浆经肾小球滤过后,产生的滤过液(原尿)约为120~160ml/min,此即单位时间内(分钟)经肾小球滤出的血浆液体量,称为肾小球滤过率。为测定GFR,临床上设计了各种物质的肾血浆清除率(clearance)试验。 肾清除率系指双肾于单位时间(min)内,能将若干毫升血浆中所含的某物质全部加以清除而言,结果以毫升/分(ml/min)或升/24小时(L/24h)表示,计算式为: C清除率(ml/min);U为尿中某物质的浓度;V为每分钟尿量(ml/min);P为血浆中某物质的浓度。 利用清除率可分别测定GFR、。肾血流量、。肾小管对各种物质的重吸收和分泌作用。各种物质经肾排出的方式大致分四种: 1.全部由肾小球滤出,肾小管既不吸收也不分泌,如菊粉,可作为GFR测定的理想试剂,能完全反映GFR。 2.全部由肾小球滤过,不被肾小管重吸收,很少被肾小管排泌,如肌酐等,可基本代表GFR。 3.全部由肾小球滤过后又被。肾小管全部吸收,如葡萄糖,可作为。肾小管最大吸收率测定。 4.除肾小球滤出外,大部分通过肾小管周围毛细血管向肾小管分泌后排出,如对氨马尿酸、碘锐特可作为肾血流量测定试剂。 一、血清肌酐测定 【原理】血中的肌酐(creatinine,Cr),由外源性和内生性两类组成。机体每20g肌肉每天代谢产生1mgCr,产生速率为1mg/min,每天Cr的生成量相当恒定。血中Cr主要由肾小球滤过排出体外,肾小管基本不重吸收且排泌量也较少,在外源性肌酐摄入量稳定的情况下,血中的浓度取决于肾小球滤过能力,当肾实质损害,GFR降低到临界点后(GFR下降至正常人的1/3时),血Cr浓度就会明显上升,故测定血肌酐浓度可作为GFR受损的指标。敏感性较血尿素氮(BUN)好,但并非早期诊断指标。 【参考值】全血Cr为88.4~176.8μmol/I。;血清或血浆Cr,男性53~106μmol/L,女性44~97μmol/L。 【临床意义】 1.血Cr增高见于各种原因引起的肾小球滤过功能减退①急性肾衰竭,血肌酐明显的进行性的升高为器质性损害的指标,可伴少尿或非少尿;②慢性肾衰竭血Cr升高程度与病变严重性一致:肾衰竭代偿期,血Cr<178μmol/L;。肾衰竭失代偿期,血Cr>178μmol/L;。肾衰竭期,血Cr明显升高,>445μmol/L。 2.鉴别肾前性和肾实质性少尿①器质性肾衰竭血cr常超过200μmol/L。②肾前性少尿,如心衰、脱水、肝肾综合征、肾病综合征等所致的有效血容量下降,使。肾血流量减少,血肌酐浓度上升多不超过200μmol/L。 3.BUN/Cr(单位为mg/dl)的意义①器质性肾衰竭,BUN与Cr同时增高,因此BUN/Cr≤10:1。②肾前性少尿,。

肾功能实验室检测练习题

肾功能实验室检查练习题 一、选择题 1、反应肾小球滤过功能最可靠的指标是() A、血尿素 B、血肌酐 C、尿肌酐 D、血尿酸 E、内生肌酐清除率 2、最能反应肾功能损害程度的试验是() A.染料排泄试验 B.清除试验 C.浓缩试验 D.稀释试验 E.尿比重量、尿渗量测定 3、急性肾小球肾炎时,肾小球的滤过功能() A、正常或增高 B、正常或下降 C、正常 D、增高 E、下降 4、肾小管性蛋白尿和肾小球性蛋白尿的区别在于() A.前者尿中β2-MG高 B.后者尿中β2-MG高C、前者尿中清蛋白增高为主 D.后者尿中以清蛋白增高为主 E.后者尿中β2-MG和清蛋白均增高 5、反映肾小球滤过功能早期受损的试验最常用的是() A、BUN测定 B、Ccr C、Cr D、BUN清除率 E、UN 6、肾小管性蛋白尿时尿中出现的蛋白主要为() A、清蛋白 B、γ-球蛋白 C、β2-MG D、脂蛋白 E、α1-球蛋白 7、下列哪种物质属于主动排泌() A、PAH B、NH3 C、奎宁 D、水杨酸 E、K+ 8、下列哪项属于肾小管性蛋白尿中的尿蛋白() A、AIb B、Tf C、α2-MG D、α1-MGE、IgG 9、几乎不被肾小管重吸收的物质是() A、尿素 B、氨基酸 C、肌酐 D、谷胱甘肽 E、Na+ 10、某物质完全由肾小球滤过,由肾完全重吸收,则该物质的清除率是() A、0 B、50% C、65% D、90% E、100% 二、填空题 1、肾功能包括()、()和() 2、肾小管细胞通过()、()离子竞争地与()离子交换 三、简答题 常用肾功能实验室检测有哪些? 答案: 一、1.E2.B3.E4.A5.D6.C7.A8.D9.C10.A 二、1、排泄、调节体内平衡、合成生理性物质 2、k+、H+和Na+

梅毒螺旋体抗体测试标准操作规程

1 检验申请 单独检验项目申请:梅毒螺旋体抗体(速写TP);组合项目申请:性病检测、输血前监测定加选本项目。临床医生根据需要提出检验申请。 2 标本采集与处理 2.1 标本采集 2.1.1 采用含高效促凝剂或含分离胶的真空采血管,常规静脉采血约2 ml,无需抗凝。 2.1.2 检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符号。 2.1.3 急诊标本采集后,在检验申请单上填写标本采集时间。 2.1.4 标本采集后与检验申请单一起及时送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态,对不合格标本予以拒收。 2.1.5 下列标本为不合格标本 2.1.5.1 标本量不足:少于0.5 ml的全血标本,或少于0.1ml的血清或血浆。 2.1.5.2 无法确认标本与申请单对应关系的。 2.1.5.3 其它如标识涂改、标本试管破裂等。 2.2 标本保存 2.2.1 标本接收后在30min内将标本离心分离出血清。 2.2.2 标本保存时间:血清室温(15~25℃)下可稳定48h,在冰箱中(2~8℃)可稳定7天。-20℃放置12个月。为避免标本中水份挥发使血清浓缩,对保存超过1天的标本均加塞密闭或覆盖保鲜膜。 2.2.3 已完成测试的标本保存完整的识别号,置2~8℃冰箱内保存7天。备复检。 2.3 标本采集的注意事项 2.3.1 采血前使受检者保持平静、松弛状态。 2.3.2 不建议采集抗凝血标本,如果必须使用血浆,推荐的抗凝剂是肝素。 3 方法原理 本品采用胶体金免疫检测技术和层析原理,定性检测血清(血浆)样本中的梅毒螺旋体抗体。检测时,样本中梅毒抗体可与胶体金标记抗原(大肠杆菌表达)结合形成抗原抗体复合物,由层析作用复合物沿纸条向前移动,经过检测线时与预包被的抗原(大肠杆菌表达)结合形成“Au-TPAg-TPAb-TPAg”夹心物而凝聚显色。游离的胶体金标记梅毒抗原(大肠杆菌表达)则在对照线处与预包被的兔抗TP抗体结合而富集显色。阴性标本则仅在对照处显色。 4 试剂及其他用品 4.1 梅毒螺旋体抗体试验试剂盒,由英科新创(厦门)科技有限公司出品。4.2 试剂盒保存:贮存于4~30℃干燥保存,有效期18个月。 4.3 试剂盒准备:试剂从包装里取出,需尽快进行试验,避免放置于空气中过长时间,导致受潮。 8标本检测步骤:

梅毒螺旋体特异性抗体检测

梅毒螺旋体特异性抗体检测 1.实验原理 梅毒的病原是苍白螺旋体(TP),感染后患者血清学反应较复杂,可产生2种抗体,一种是非梅毒螺旋体抗体;另一种是TP特异性抗体。前者在疾病活动期可检出,但治疗后很快下降,一般用RPR等检测。后者在治疗后相当长时间内都可检测到。Syphagen-TPHA是一种检测TP抗体的特异、灵敏的间接血球凝集试验。适用于梅毒 确诊检查。 2. 标本采集 2.1 标本采集前病人准备:空腹采血 2.2 标本种类:血清或EDTA抗凝血浆 2.3 标本要求:检测标本可以是血清,对于大范围筛选实验,也可用含EDTA的血浆。如果出现可疑结果,用血清标本来确证。用含抗凝剂(EDTA)的试管收集血液,离 心收集血浆,在24小时内检测。 3. 标本储存:血清于2-8℃可存放48小时,在-20℃可存放4周;血浆则用含抗凝 剂(EDTA)的试管收集血液,离心收集血浆,在24小时内检测。 4. 标本运输:室温运输。 5. 标本拒收标准:溶血、脂血或污染标本。 6. 试剂 6.1 试剂名称:梅毒螺旋体抗体诊断试剂 6.2 试剂生产厂家:(日本)富士瑞必欧珠式会社 6.3 包装规格:100人份 6.4 试剂盒组成:溶解液,血清稀释液,致敏粒子,未致敏粒子,阴性对照血清, 阳性对照血清,滴管2支,使用说明书。 6.5 试剂储存条件及有效期 6.6存放于2-10℃,有效期为12个月,不同批号的试剂不得混用。 7. 操作步骤

7.1.1 每人份需4个孔,其中2个用于样品稀释。在第1个孔中加100ul(4滴)稀释液,在第2孔至第4孔中各加25ul(1滴)稀释液。 7.1.2 在第1孔加入25ul标本后,混匀后取25ul加入第2孔,混匀后取25ul加入第3孔,混匀后取25ul丢弃。 7.1.3 在第3孔加25ul(1滴)未致敏粒子;在第4孔加25ul致敏粒子。 7.1.4 轻轻摇晃混匀后,加盖静置于室温,120分钟后观察结果。 7.2 定量检测 7.2.1在第1个孔中加100ul(4滴)稀释液,在第2孔至最后一孔中各加25ul(1滴)稀释液。 7.2.2 在第1孔加入25ul标本,混匀后取25ul加入第2孔,混匀后取25ul加入第3孔,以同样的方式稀释至最后一孔,最后一孔混匀后取25ul丢弃。 7.2.3 在第3孔加25ul(1滴)未致敏粒子;在第4孔至最后一孔分别加25ul致敏粒子。 7.2.4 轻轻摇晃混匀后,加盖静置于室温,120分钟后观察结果。 8. 结果判断与分析 8.1 -粒子成纽扣状聚集,呈现出外周边缘均匀且平滑的圆形 8.2 ±粒子形成小环状,呈现出外周边缘且平滑的圆形 8.3 +粒子环明显变大,其外周边缘不均匀且杂乱地聚集在周围 8.4 ++产生均一的聚集,凝集粒子在底部整体上呈膜状延展 未致敏粒子(最终稀释倍数1:40)的反应图像判定为阴性,致敏粒子(最终稀释倍数1:80以上)的反应图像判定为阳性时,最终判定为阳性。 9. 临床意义:如结果为阳性,说明有梅毒抗体,曾经受到梅毒的感染;如果结果为阴性说明不含梅毒抗体;如果出现临界结果,说明梅毒抗体水平低,处于梅毒早期阶段,或者是预后残留有抗体,并应进一步检查。 10. 操作性能:快速简便、特异性强、灵敏度高 11. 方法局限性:严重溶血或脂血标本会影响结果判断

梅毒螺旋体抗体测定TPPA标准操作规程

1 检验申请 单独检验项目申请: TPPA组合项目申请:RPR+TPPA临床医生根据需要提岀检验申请。 2标本采集与处理 标本采集 常规静脉采血约 2 ml,不抗凝,置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。 标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态,对不合格标本予以拒收。 下列标本为不合格标本 标本量不足。 严重溶血、严重浑浊的标本。 无法确认标本与申请单对应关系的。 其他如标识涂改、标本试管破裂等。 标本保存 标本保存时间:立即测定或放置2?8C冰箱内。 已完成测试的标本保持完整的识别号,置4?8C冰箱内保存7天。 3、方法原理 凝集法。将梅毒的精制菌体成分包被在人工载体明胶离子上?这种致敏离子和样品中的梅毒 螺旋体抗体进反应发生凝集,产生粒子凝集反应,由此可以检测出血清和血浆中的梅毒螺旋体抗体,并且可用来测定抗体效价。 4、试剂及其他用品准备 溶解液8ml/瓶x 1,血清稀释液60ml/瓶x 1,致敏粒子(冷冻干燥)瓶x 5,未致敏粒子(冷冻干燥)瓶x 5,阳性对照血清(液状)瓶x 5。 5质控品与室内质控规则 质控液重建方法:液态质控血清,即开即用,无需特殊准备。 质控品测定:在每一批标本中测定阴性和阳性对照各一次。 质控规则:阴性和阳性对照符合即可。 如岀现失控情况,按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正,并在确认重 新回复到控制状态后开始标本检测。 6操作步骤 将血清稀释液滴入微量反应板第1孔中,共计4滴(100ul ),从第2孔至最后一孔各滴入 1滴 (25ul)。 吸取样品25ul至第1孔中。然后以2n的方式从第1孔稀释至最后一孔。 用试剂盒中提供的滴管在第3孔中滴入1滴(25ul)未致敏粒子,从第 4孔至最后一孔滴入 1 滴(25ul)致敏粒子。 用平板混合器以不会导致微量反应板内容物溅岀的强度混合30秒钟,加盖后于室温(15-30 C)

梅毒实验室测试题

单位:姓名:成绩: 梅毒实验室测试题 一、单选题(共40分,每小题2分) 1、梅毒螺旋体镜检可采用的染色方法:() A 革兰染色 B 美兰染色 C 镀银染色 D 伊红染色 2、非梅毒螺旋体抗体检测可采用的方法:() A TPPA B ELISA C RPR D FTA-ABS 3、TPPA只能检测到:() A IgA B IgG C IgG+IgM+IgA等混合抗体 D IgM 4、梅毒螺旋体镜检一般不采用下列标本:() A 皮肤溃疡组织液 B 羊水 C 血液 D 脑脊液 5、RPR检测不能采用下列标本:() A 血清 B 血浆 C 全血 D 脑脊液 6、ELISA检测不能采用下列标本:() A 血清 B 血浆 C 全血 D 脑脊液 7、梅毒螺旋体病原学检测方法不包括:() A 暗视野显微镜检查 B 镀银染色 C 培养基培养 D 核酸检测 8、RPR/TRUST检测用水平旋转仪的转速是:() A (100±2)转/分 B(100±10)转/分 C (120±2)转/分 D (120±10)转/分 9、RPR/TRUST检测用水平旋转仪的旋转直径是:() A 25±2mm B 18±2mm C 20±2mm D 30±2mm 10、RPR/TRUST试验在水平旋转仪上旋转反应时间:() A 5分钟 B 8分钟 C 10分钟 D 12分钟 11、TRUST试验时每个反应孔滴加的抗原量是:()

A 50μl B 30μl C 25μl D 17μl 12、前带现象主要出现在下列哪一种方法中:() A ELISA B RPR C TPPA D FTA-ABS 13、RPR 试验时每个反应孔滴加的抗原量是:() A 50μl B 30μl C 25μl D 17μl 14、下列哪项方法不是检测非梅毒螺旋体抗体:() A RPR B ELISA C VDRL D TRUST 15、TPPA试验结果判读孔的血清稀释倍数是:() A 1:20 B 1:40 C 1:80 D 1:160 16、ELISA法采用的抗原是:() A 重组抗原 B 完整的梅毒螺旋体 C 超声裂解梅毒螺旋体 D 类脂质 17、TPPA法采用的抗原是:() A 重组抗原 B 完整的梅毒螺旋体 C 超声裂解梅毒螺旋体 D 类脂质 18、RPR法采用的抗原是:() A 重组抗原 B 完整的梅毒螺旋体 C 超声裂解梅毒螺旋体 D 类脂质 19、梅毒血清学检测实验室的生物安全级别是:() A 一级 B 二级 C 三级 D 四级 20、室间质控的主要目的是评价:() A 检测方法有效性 B 检测结果精确性 C 检测结果准确性 D 检测方法可行性 二、是非题(共60分,每小题2分) 1、除部分极早期梅毒外,一般梅毒患者无论是否接受过有效抗梅治疗,梅毒螺旋体特异性 抗体常终身阳性。() 2、RPR/TRUST只能用于梅毒血清学检测初筛。() 3、二期梅毒时,TPPA和RPR两种血清学试验100%阳性。() 4、诊断隐性梅毒时,RPR滴度应在1:8以上。() 5、先天梅毒的实验室检查可采集脐带血进行梅毒血清学试验。()

梅毒螺旋体的检测方法及评价

梅毒螺旋体的检测方法及评价 梅毒螺旋体(treponemapallidum,TP)是引起性传播性疾病梅毒的主 要病原体。1905年由Schandim等首次发现,通过人类粘膜或有破损的皮肤直接接触病人感染性病灶而传播。不但引起人类全身性疾病危害人们的健康,同时还传播给下一代。多年来通过大量的研究工作,建立了许多检测TP的方法。近年来,随着分子生物学和免疫学技术的发展,进一步促进了对TP的研究工作,使得快速、敏感、特异的梅毒诊断方法不断更新完善,有利于广泛开展流行病学调查、预防控制及更准确地指导临床治疗。 TP检测的各种方法 检测TP和抗-TP抗体的方法有梅毒螺旋体检查和血清学检查法。梅毒螺旋体检查主要包括暗视野显微镜检查、直接免疫荧光实验(DFA)及梅毒螺旋体镀银染色检查,其中DFA的特异性较高。梅毒螺旋体检查适用于一、二期梅毒有病损者的患者,受取材及特殊显微镜限制,耗时长,难以为临床所接受。 血清学试验是目前国内外诊断梅毒的主要方法,其种类较多,包括非 螺旋体抗原试验(非特异性试验)和螺旋体抗原试验(特异性试验)。 非特异性试验是以类脂质为抗原的试验方法,世界卫生组织确认诊断梅毒的标准试验有 1性病研究实验室(VDRL)试验; 2不加热血清反应素(USR)实验; 3快速血浆反应素(RPR)试验;

4自动反应素(ART)试验; 5 RST反应素筛选试验和TRUSAT(甲苯胺红不加热血清试验)。这些试验因具有相同的标准化抗原,敏感性相似,对1、2期梅毒有诊断价值,也可做疗效随访用。又因其操作简易,费用低廉,常用作梅毒的筛选检查。但它们的敏感性和特异性比特异试验差,并且生物学假阳性高,结果受多种条件的影响。除对其他螺旋体感染时出现阳性外,假阳性还出现在急、慢性感染,妊娠,高丙种球蛋白血症,结缔组织病,溶血性贫血和其他自身免疫性疾病,也可出现在老年人和一些健康人,但多数情况下查不出原因。在国外上述几种非特异性试验中,除VDRL试验常用外,RPR试验和ART应用较少。 在我国多用RPR和TRUST。就TRUST、RPR两种方法而言,对非特异性反应素抗体导致的阳性标本TRUST法的检出率和重复性都强于RPR 法,这可能与TRUST试剂中表面包裹抗原的甲苯胺红颗粒比RPR试剂中的活性炭颗粒小更易耐受振荡导致TRUST试剂稳定性强有关。 特异性试验是以梅毒密螺旋体本身或非致病的密螺旋体为抗原,以检查病人血清中抗密螺旋体的特异性抗体。目前应用的方法有: 1密螺旋体荧光抗体吸收(FTA-ABS)试验; FTA-ABS试验被认为是当前敏感性和特异性最高的试验方法, 且在1期梅毒头几天就可以测出特异性抗体F3G,常用来最后确诊梅毒,在研究中以它为标准。但提取物为活菌,存在潜在危险性,故其应用受到很大限制。FAT-ABS试验是定性试验,治疗对它的影响也很小,一般用于确诊而不用于筛选。 2梅毒密螺旋体血凝(TPHA)试验; TPHA试验容易操作和定量,特异性

梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)

梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST) 1. 测定原理: 采用VDRL抗原等特制的甲胺红溶液制成悬液。若样本含有梅毒螺旋体抗体,抗原抗体反应形成肉眼可见的红色凝集块。 2. 标本要求 2.1 血液:血浆(EDTA抗凝)血清。 2.2 测定量:50ul血清或血浆 3. 试剂: 3.1 上海荣盛试剂盒(供梅毒血清学试验用) 3.2 试剂盒组成; TRUST抗原悬液 2.5mL×1瓶 阴性对照血清 1ml×1支 阳性对照血清 1ml×1支 专用滴管及针头 1套 试验专用卡片 120人份 3.3 保存条件:2-10℃ 4. 质控;梅毒抗体质控血清,保存条件-15--20℃,使用前放置室温(18-25℃),颠倒混匀。 5. 操作程序 5.1 标本测定 5.1.1 分别吸取50ul梅毒阳性对照和阴性对照均匀铺加在纸卡的两个圆圈中。 5.1.2 取待测血清或血浆50ul(不需失活)置于纸卡的另一圆圈中。 5.1.3 用专用滴管及针头垂直分别滴加TRUST试剂一滴于上述圆圈中。 5.1.4 按每分钟100转摇动8分钟。肉眼观察结果。 5.2 注意事项; 5.2.1 本实验在23-29℃环境下进行。 5.2.2 TRUST试剂使用前应充分摇匀。 5.2.3 如做定量试验,可将待检血清用生理盐水作倍比系列稀释,然后按上述定性方法进行试验, 以呈现明显凝集反应的最高稀释度作为该血清的凝集效价。 5.2.4 本试验系非特异性反应,需结合临床进行综合分析,必要时需作特异性密螺体试验。 6. 结果判断。 6.1 阳性:可见中等或较大的红色凝集物。 6.2弱阳性:可见较小的红色凝集物。 6.3阴性:可见均匀的抗原颗粒而无凝集物。

相关文档
最新文档