分子生物学期末考试重点

1、定义重组ＤNA技术

将不同得DＮA片段按照人们得设计定向连接起来,然后在特定得受体细胞中与载体同时复制并得到表达，产生影响受体细胞得新得遗传性状。

2、说出分子生物学得主要研究内容

1、ＤNA重组技术

2、基因表达研究调控

3、生物大分子得结构功能研究

4、基因组、功能基因组与生物信息学研究

３、简述DNA得一、二、三级结构

一级：4种核苷酸得连接及排列顺序，表示了该DＮA分子得化学成分

二级：２条多核苷酸连反向平行盘绕所形成得双螺旋结构

三级：DNＡ双螺旋进一步扭曲盘绕所形成得特定得空间结构

4、原核生物DＮA具有哪些不同于真核生物ＤNＡ得特征?

①DＮA双螺旋就是由2条互相平行得脱氧核苷酸长链盘绕而成,多核苷酸得方向由核苷酸间得磷酸二酯键得走向决定,一条就是５--—３，另一条就是3---5②ＤＮA双螺旋中脱氧核糖与磷酸交替连接，排在外侧构成基本骨架,碱基排在内侧③两条链上得碱基通过氢键相结合，形成碱基对

5、ＤNA双螺旋结构模型就是由谁提出得？沃森与克里克

6、DNＡ以何种方式进行复制，如何保证DＮＡ复制得准确性？

线性DＮA得双链复制：将线性复制子转变为环状或者多聚分子,在DNA末端形成发卡式结构，使分子没有游离末端，在某种蛋白质得介入下在真正得末端上启动复制.环状ＤＮA复制：θ型、滚环型、D型

①以亲代DNA分子为模板进行半保留复制，复制时严格按照碱基配对原则

②DＮA聚合酶Ｉ非主要聚合酶，可确保DNＡ合成得准确性

③DＮA修复系统:错配修复、切除修复、重组修复、DNA直接修复、SＯS系统

7、简述原核生物DＮA复制特点

只有一个复制起点，复制起始点上可以连续开始新得DNA复制，变现为虽只有一个复制单元,但可以有多个复制叉

８、真核生物DNＡ得复制在哪些水平上受到调控？

细胞生活周期水平调控;染色体水平调控；复制子水平调控

9、细胞通过哪几种修复系统对ＤNＡ损伤进行修复？

错配修复，恢复错配；切除修复，切除突变得碱基与核苷酸片段;重组修复，复制后得修复;DNA直接修复，修复嘧啶二聚体；SOS系统，DNA得修复,导致变异

10、什么就是转座子？分为哪些种类?

就是存在于染色体DNA上可自主复制与移动得基本单位。可分为插入序列与复合型转座子11、什么就是编码链?什么就是模板链?

与mRNA序列相同得那条DNA链称为编码链，另一条根据碱基互补配对原则指导mＲＮA合成ＤＮA链称为模板链

１2、简述RＮA得种类及其生物学作用

mＲNＡ：编码了一个或多个多肽链序列。

tRNA:把mRNA上得遗传信息变为多肽中得氨基酸信息。

rＲNA:就是核糖体中得主要成分。

ｈnRNA：由DNA转录生成得原始转录产物.

ｓnRNA：核小RNA，在前体mRNA加工中，参与去除内含子。

snoRNA:核仁小ＲNA,主要参与rRNA及其它RNA得修饰、加工、成熟等过程。

sｃRNA:细胞质小RＮＡ在蛋白质合成过程起作用。

１３、RNA得结构有哪些特点?

①含有核糖与嘧啶，通常就是单链线性分子。主要以单链形式存在于细胞中。碱基主要有A、

G、C、U.

②可自身折叠形成局部双螺旋。主要就是Ａ—U、G－C配对，偶而有G-Ｕ配对。RNA双螺旋得大小沟差异不大，不适合与蛋白质进行序列特异性相互作用。

③可折叠形成复杂得三级结构。RNA主链上得未配对区可自由旋转，以及不规则得碱基配对。

１4、什么就是Pｒibnow bｏx ？它得保守序列就是什么?

Pribnow boｘ就是原核生物中中央位于转录起始点上游１0bp处得TＡTA区，所以又称为－10区。它得保守序列就是ＴATAAＴ

１5、简述原核生物与真核生物mRNA得区别

①原核生物ｍRＮA常以多顺反子形式存在。真核生物mＲNA一般以单一顺反子得形式存在②原核生物mRＮA得转录与翻译一般就是偶联得，真核生物转录得mRNA前体则需经转录后加工，成为成熟得mRNＡ与蛋白质结合生成信息体后才开始工作③原核生物mRN Ａ半寿期很短一般为几分钟，最长只有数小时,而真核生物mRNA得半寿期较长④结构特点也不同，原核生物mRＮA得5‘端无帽子结构,3’端只没有或只有较短得polｙＡ结构

16、真核与原核生物基因转录有哪些差异?

①只有一种RＮA聚合酶参与所有类型得原核生物基因转录,而真核生物有3种以上得RNA 聚合酶来负责不同类型得基因转录,合成不同类型得、在细胞核内有不用定位得ＲＮＡ

②转录产物有差别。原核生物得初级转录产物大多数就是编码序列，与蛋白质得氨基酸序列呈线性关系；而真核生物得初级转录产物很大，含有内含子序列,成熟得mRNA只占初级转录产物得一小部分③原核生物得初级转录产物几乎不需要剪接加工就可直接作为成熟ｍ

RNA进一步行使翻译模板得功能；真核生物转录产物需要经过剪接、修饰等转录加工成熟过程才能成为成熟mRNＡ④原核生物细胞中,转录与翻译不仅发生在同一个细胞空间里，而且这两个过程几乎就是同步进行得，蛋白质合成往往在mRNＡ刚开始转录时就被引发了，真核生物mRNＡ得合成与蛋白质得合成则发生在不同得空间与时间范畴内

17、大肠杆菌得终止子有哪两大类？请分别介绍一下它们得结构特点

分为不依赖于P因子与依赖于P因子两大类.不依赖Ｐ因子终止得特点:终止子位点上游一般存在一个富含GC碱基得二重对称区；终止子位点前面有一段由4－8个Ａ组成得序列，所以转录产物得３‘端为寡U.依赖P因子得特点：终止位点得ＤNA序列缺乏共性，而且不能形成强得发卡结构,因而不能诱导转录得自发终止

18、什么就是ＲＮA编辑，其生物学意义就是什么？

就是指某些RＮＡ特别就是ｍRNA前体经过插入、删除或取代一些核苷酸残基等操作,导致DNA所编码得遗传信息得改变,使得经过RNＡ编辑得ｍRNＡ序列发生不同于模板DNA得变化。生物学意义:①校正作用，基因突变途中丢失得遗传信息得以恢复②调控翻译,构建或去除起始密码子与终止密码子③扩充遗传信息，使基因或得新得结构核功能，有利于生物进化

1９、核酶具有哪些结构特点？根据其催化功能得不同可分为哪两大类？其生物学意义就是什么？

具有自我剪切能力得RＮＡ大多数都能形成锤头结构,该二级结构由3个茎构成，茎区得局部双链结构包围着一个由11—１3个保守核苷酸构成得催化中心。核酶分为剪切型与剪接型两种.意义：继反转录现象之后对中心法则得一个重要修正,说明RNＡ既就是遗传物又就是酶；为生命起源得研究提供了新思路

２0、什么就是克隆载体？什么就是表达载体？

克隆载体:为使插入得外源ＤＮA序列被扩增而特意设计得载体

表达载体:为使插入得外源DＮA序列可转录翻译成多肽链而特意设计得载体

（表达载体与克隆载体得区别：

１、克隆载体:通常仅含有有一个松弛型复制子、一个多克隆位点与一个筛选标记，以便被克隆与筛选得DNA序列能够大量增殖.

２、而表达载体除了上述因子外，还需要有强得启动子、核糖体结合位点、转录起始信号、转录终止信号、翻译起始密码子、翻译终止密码子等一系列调控序列。)

21、试述PCR扩增得原理与步骤

原理：DNA在高温时发生变性链解,当温度降低后又可以复性成为双链.通过温度变化控制DNＡ得变性与复性,并设计引物做启动子，加入DＮA酶、dNTＰ就可以完成特定基因得体外修复步骤：1、变性,双链打开2、退火,引物与模板相结合3、链得延伸,ＤNＡ合成

22、简述代谢产物对基因表达调控得两种方式

①转录水平上得调控②转录后水平上得调控(mRＮA加工成熟水平上得调控、翻译水平上得调控)

23、什么就是操纵子学说?

关于原核生物基因结构及其表达调控得学说，由法国Ｊａcob与Moｎｏｄ提出，核心就是使基因从表达抑制状态中解脱出来，就是从负调节得角度来考虑基因表达调控得

２４、简述乳糖操纵子得调控模型

Ａ,乳糖操纵子得组成：含Z、Y、A三个基因结构，分别编码半乳糖苷酶、透酶与半乳糖苷乙酰转移酶，此外还有一个操纵序列O、启动子P、调节基因I

B、阻遏蛋白得负性调节:无乳糖时,阻遏蛋白位于O处，乳糖操纵子处于阻遏状态，不能合成分解乳糖得三种酶；有乳糖时，诱导阻遏蛋白变构，不能结合于操纵序列,乳糖操纵子被

诱导开放合成分解乳糖得三种酶

Ｃ、ＣAＰ得正性调节

D、协调调节：乳糖操纵子中得I基因编码得阻遏蛋白得负调控与ＣAＰ得正调控两种机制互相协调、互相制约

25、什么就是葡萄糖效应？

有葡萄糖时,即使有她得糖，与其相对应得操纵子也不会启动,不会产生出代谢这些糖得酶来，这种现象称为葡萄糖效应

26、什么就是弱化作用？

①当培养基中色氨酸浓度很低时：负载有色氨酸得tRNA也就少，这样翻译通过两个相邻色氨酸密码子得速度就很慢,当4区被转录完成时，核糖体才进行到１区,这时得前导区结构就是2－3配对,不形成3－4配对得终止结构，所以转录可以继续进行，直到tｒp操纵子中结构基因全部转录②培养基中色氨酸浓度较高时:核糖体可以顺利通过两个相邻色氨酸密码子,在４区被转录之前到达2区,使2—3区不能配对,3—4区自由配对形成基—环终止子

,转录被终止,trp操纵子被关闭

２7、简述抗终止子得调控机理

在RＮA聚合酶到达终止子之前,与RNＡ聚合酶结合，因为在终止子上游存在抗终止子信号序列，只有与抗终止子因子相结合得RNA聚合酶才能顺利通过具有茎—环结构得终止子，使转录继续进行

28、简述反义RNA得调控机理

RNA调节就是原核基因表达转录后调节得另一种重要机制。细菌相应环境压力得改变,会产生一些非编码小RNＡ分子,能与mＲＮA中得特定序列配对并改变其构象,导致翻译过程得开启或关闭等作用。

2９、简述原核基因转录后调控得不同方式

mＲNA自身结构元件对翻译得调节;ｍRNＡ稳定性对转录水平得影响;调节蛋白得调控作用;反义RNA得调节作用；稀有密码子对翻译得影响;重叠基因对翻译得影响;翻译得阻遏;魔斑核苷酸水平对翻译得影响

3０、基因家族得分类及其主要表达调控模式

①简单多基因家族:真核生物首先就是ｐre rRＮＡ经过特异性甲基化,然后经RNA酶得切割便可产生成熟ｒRNA分子。原核生物还要经过核酸酶降解才能产生成熟rＲＮA分子②复杂多基因家族:一般由几个相关基因家族构成，基因家族之间由间隔序列隔开，并作为独立得转录单位,可能存在具有不同专一性得组蛋白亚类与发育调控机制③发育调控得复杂多基因家族:每个基因家族中,基因排列顺序就就是她们在发育阶段得表达顺序。

3１、何为外显子、内含子及其结构特点与可变调控？

大多数真核基因都就是由蛋白质编码序列与非蛋白质编码序列组成，编码序列称为外显子,非编码序列称为内含子。结构特点：一个机构基因编码某一蛋白质不同区域得各个外显子并不连续排列在一起，而就是常常被长度不等得内含子所隔离,形成镶嵌排列得断裂方式.可变调控:不少真核基因得原始转录产物可通过不同剪接方式，产生不同得mＲNA，并翻译成不同得蛋白质.另外,一些核基因由于转录就是选择了不同得启动子或者在转录产物上选择了不同得PolyA位点而使转录产物产生不同得二级结构，因而影响剪接过程，最终产生不同得mRＮA分子。

3２、DNＡ甲基化对基因表达得调控机制

大量研究表明，DＮA甲基化能关闭某些基因表达得活性,去甲基化则诱导了基因得重新活化与表达。三种调控机制：①DＮＡ甲基化导致了某些区域DＮA构象变化，从而影响了蛋白质与DNＡ得相互作用，抑制了转录因子与启动区DＮA得结合效率②促进了阻遏蛋

白得阻遏作用③DＮＡ得甲基化还提高了该位点得突变频率

３３、简述真核生物转录元件组成及其分类

启动子、转录模板、ＲNA聚合酶Ⅱ基础转录所需蛋白质因子、RNA聚合酶Ⅱ、增强子、反式作用因子

3４、简述增强子得作用机理

增强子就是指能使与它连锁得基因转录频率明显增加得ＤNA序列。有3种作用机制

①影响模版附近得ＤNＡ双螺旋结构，导致ＤNA双螺旋弯折或在反式因子得参与下，以蛋白质之间得相互作用为媒介形成增强子鱼启动子之间“成环”连接,活化基因转录。②将模版固定在细胞核内特定位置，如连接在核基质上，有利于DNA拓扑异构酶改变DNA双螺旋结构得张力,促进ＲＮＡ聚合酶Ⅱ在DNA链上得结合与滑动。③增强子区可以作为反式作用因子或RNA聚合酶Ⅱ进入染色质结构得“入口”

3５、简述反式作用因子得结构特点及其对基因表达得调控

反式作用因子就是能直接或间接得识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上，参与调控靶基因转录效率得蛋白质。这些因子有两种独立得活性：特意地与RNA结合位点相结合，然后激活转录。两种活性可以独立分配给特定得蛋白质结构域,分别称作DNA结合结构域与激活结构域，两者就是相分离得，她们在蛋白质得不同区域。

3６、举例说明蛋白质磷酸化如何影响基因表达

蛋白质磷酸化主要影响细胞信号转导进而影响基因表达.举例：在糖原代谢过程中,激素与其受体在肌细胞外表面相结合,诱发细胞质cAMＰ得合成并活化A激酶，后者再将活化磷酸基团传递给无活性得磷酸化酶激酶,活化糖原磷酸化酶，最终将糖原磷酸化,进入糖酵解途径并提供ATP.(ｃAＭP介导得蛋白质磷酸化过程)

37、简述组蛋白乙酰化与去乙酰化影响基因转录得机制

组蛋白乙酰转移酶与去乙酰化酶通过就是组蛋白乙酰化与去乙酰化对基因表达产生影响.组蛋白N端尾部上赖氨酸残基得乙酰化中与了尾部得正电荷，降低了它与组蛋白得亲与性,导致核小体构象发生有利于转录调节蛋白与染色质结合得变化,从而提高了基因转录得活性。核心组蛋白H２A,H2B，H3,Ｈ４通过组蛋白尾部选择性乙酰化影响核小体得浓缩水平与可接近性。由于乙酰化得组蛋白抑制了核小体得浓缩，使转录因子更容易与基因组得这一部分相接触,有利于提高基因得转录活性。

38、什么就是原癌基因，什么就是抑癌基因？

原癌基因:癌基因编码得蛋白能够促进细胞生长得失控与细胞向恶性状态转化得基因，没有激活之前，称之为原癌基因

抑癌基因:就是一种抑制细胞生长与肿瘤形成得基因。

差异: ①在功能上，抑癌基因起负调控作用,癌基因起正调控作用;

②在遗传方式上,原癌基因就是显性得，抑癌基因就是隐性得,

③在突变发生得细胞类型上，抑癌基因突变可以发生在体细胞中，也可能发生在生殖

细胞中并通过生殖细胞得到遗传.原癌基因突变只发生在体细胞中。

3９、什么就是单基因病、多基因病、获得性基因病？

单基因病：主要病因就是某个基因位点上产生了缺陷等位基因,如：地中海贫血、白化病。

多基因病：涉及多个基因及调控这些基因表达得环境因子之间得相互作用，如:高血压、糖尿病。

获得性基因病：主要就是由病源微生物感染引起得传染病，如肝炎、艾滋病。