病毒鉴定的方法有哪些
病毒鉴定的方法有哪些？
从培养的细胞中分离病毒，然后采用免疫荧光和分子生物学技术进行病毒核酸检测已被成功地用于病毒的鉴定。目前最常用的病毒定量检测方法有以下三大类：用于病毒感染力检测的技术，如病毒空斑形成试验，半数组织培养感染剂量TCID50测定和免疫荧光等；病毒核酸和病毒蛋白检测技术，如实时定量多聚酶链反应（qPCR），免疫印迹，免疫沉淀，酶联免疫吸附测定（ELISA）和血凝试验等；还有就是那些直接对病毒颗粒进行计数的方法，如流式细胞分析或透射电镜技术。
病毒检测方法的局限性
病毒鉴定方法
1.培养细胞的显微学观察
材料和仪器
细胞生长培养基：含10% FBS(胎牛血清), 4-6 mM Glutamine（谷氨酰胺）的高葡萄糖DMEM，若有需要可加入青霉素，链霉素，庆大霉素，两性霉素等
维持培养基：上述新鲜的细胞培养基，但血清FBS浓度减少至为2%
宿主细胞：铺满单层细胞的8孔培养腔室玻片（chamber slides）
PBS磷酸缓冲液
Bouin's固定液
吉姆萨（Giemsa）缓冲液
吉姆萨（Giemsa）染色液
丙酮，丙酮：二甲苯（2:1），丙酮：二甲苯（1:2），二甲苯
中性树胶
移液枪头(10 到100 微升)
移液管
生物安全柜（超净台）
二氧化碳培养箱
倒置显微镜
实验方案
接种宿主细胞至Chamber Slides：选择合适的细胞接种密度（比如8-孔Chamber Slides，接种30,000细胞/孔），培养基为细胞生长培养基（10%FBS-DMEM）。轻轻地前后左右摇晃chamber slides使细胞分布均匀。将细胞置培养箱培养过夜，第二天，显微镜下观察细胞确认细胞是否分布均匀并达到80%以上的融合度。
制备不同稀释度的病毒液：标记6支无菌离心管，第1管加入990 μl细胞生长培养基，剩下5管加入900μl细胞生长培养基。按以下方法进行梯度稀释：在第1管中加入10 μl 病毒原液（稀释度1:100）充分混匀，然后从第1管吸100 μl至第2管中混匀，依次类推，进行10倍梯度稀释。管1至管6的稀释度分别为10-3 到10-7。
感染细胞：吸去培养孔中的培养液，每孔加入0.5 mL维持培养液（2%FBS-DMEM），再加入100 μl不同稀释度（10-2 至10-7稀释）的病毒液至其中一孔，留一孔不加作为空白对照。将细胞置二氧化碳培养箱37oC 或34oC 培养1-4周，追踪观察致细胞病变效应（CPE）发生情况。
吉姆萨染色：一旦观察到细胞病变效应，轻轻地用PBS将细胞洗3次，每次5min，然后加入Bouin's固定液固定10 min。用吉姆萨缓冲液洗3次，然和加入Giemsa染液染色1 h，再用吉姆萨缓冲液清洗后依次用丙酮处理15s，2:1的丙酮-二甲苯处理30s，1:2的丙酮-二甲苯处理30s，最后用二甲苯处理10 min紧接着用中性树胶封片。显微镜下观察CPE，包涵体，细胞融合及病毒空泡形成情况。病毒感染细胞后形成的CPE图片范例可以在很多图谱，网站和博客上找到，例如ASM Microbe Library
2.免疫荧光(IF)检测方法
材料和仪器
细胞生长培养基：含10%FBS(胎牛血清), 4-6mM Glutamine（谷氨酰胺）的高葡萄糖DMEM，若有需要可加入青霉素，链霉素，庆大霉素，两性霉素等
宿主细胞：铺满单层细胞的8孔培养腔室玻片（chamber slides）
PBS磷酸缓冲液
一抗
FITC标记的二抗
细胞核染料DAPI
5-4 %多聚甲醛（PFA，pH7.4），或者甲醇
移液枪头(10 到100 微升)
离心管
生物安全柜（超净台）
二氧化碳培养箱
荧光显微镜
实验方案
接种宿主细胞至Chamber Slides：选择合适的细胞接种密度（比如8-孔Chamber Slides，接种30,000细胞/孔），培养基为细胞生长培养基（10%FBS-DMEM）。轻轻地前后左右摇晃chamber slides使细胞分布均匀。将细胞置培养箱培养过夜，第二天，显微镜下观察细胞确认细胞是否分布均匀并达到80%以上的融合度。
病毒感染：每孔细胞加0.1 mL病毒储存液，留一孔不加作为阴性对照。将细胞放回CO2 培养箱，37°C 或34°C 培养48h。
免疫荧光染色观察：病毒感染48h后，吸去培养液，将细胞用预冷的甲醇固定5min（也可用新鲜制备的4%多聚甲醛固定）后，用含0.2% triton X的PBS室温破膜5min。将细胞用PBS清洗后，加入推荐浓度的一抗孵育2h，PBS清洗5遍，然后再加入荧光（Alexa fluor 488 或FITC）标记的二抗进行孵育，PBS清洗5遍，加入DAPI染细胞核，在相差及荧光显微镜下观察结果。
3.分子学方法
用实时定量逆转录PCR（Real-time RT-PCR）来检测流感病毒比终点检测方法更为快捷，且敏感度跟细胞培养法相当甚至更佳
用分子技术从临床样本中直接对病毒基因组进行鉴定是21世纪的重大发现之一。核酸扩增技术包括PCR、基于核酸序列的扩增(NASBA)和劳伦斯利弗莫尔微生物检测阵列(LMDA)等都无疑是快速检测和鉴定大多数已知人类病毒的领先技术。PCR可以在体外将DNA序列的一段特定区域扩增106倍，因此是一种极其敏感的检测手段。PCR还可以用于病毒RNA 的鉴定，只需先将RNA逆转录成DNA，然后再进行PCR分析，这一方法被称之为逆转录PCR （RT-PCR）。
采用特异性的引物鉴定甲型流感病毒。M：Marker，阳性对照（+），阴性对照（-），泳道1-10
为扩增的212 bp甲型流感病毒片段
用实时定量逆转录PCR（Real-time RT-PCR）来检测流感病毒比终点检测方法更为快捷，且敏感度跟细胞培养法相当甚至更佳
Real-time PCR实验原理图
病毒的分离鉴定讲课教案
病毒的分离鉴定
病毒的分离与鉴定 要证明某种疾病是由某一感染性病毒所引起，则必须满足以下原则： ①从患病者体内分离出病毒； ②在实验动物或寄主细胞中可以培养； ③证明这种培养物具有滤过性； ④在原始宿主或相关种属内能产生同样的病症； ⑤能重新分离出病毒。 1.病毒的分离 1.1标本的处理 1.1.1标本的收集 a)粪便标本：将5g粪便标本和50ml PBS放入盛有20-25颗玻璃小 珠的100ml无菌瓶中，搅拌成悬液，倒出上清，3000×g，4℃离心6min。 b)拭子和生物体液：拭子浸在2-3ml运载培养基中，将棉拭子中的 液体尽量挤出以获得标本，如果液体被污染，应3000×g 4℃离心30min。 c)组织标本：用无菌乳钵或匀浆器研磨组织标本，同时加入足量的 PBS制备成20%的悬液，3000×g 4℃离心30min。 1.1.2 除菌处理 a)粪便可加青链霉素使最终浓度为10000单位/毫升，置4℃过夜。 b)鼻咽拭子一般加抗生素最终浓度为2000单位/毫升，置4℃作用
4小时。 c)对乙醚有抵抗的病毒如鼻病毒、肠道病毒、呼肠孤病毒、腺病 毒、痘病毒等，则可加入等量的乙醚4℃过夜除菌。 1.2病毒的分离培养 病毒是严格的细胞内寄生微生物，培养病毒必须使用细胞。根据病毒的不同选用敏感动物（动物接种）、鸡胚（鸡胚接种）或离体细胞进行分离培养（细胞培养）。 1.2.1 鸡胚接种 a)鸡卵的选择：一般都选新鲜、10天以内的受精卵以保证规格质 量上的一致。 b)孵育：孵育时可将鸡卵放入卵箱内进行,气室向上，孵育的最适 温度为38--39℃，相对湿度为40—70％，孵育8日后，鸡卵应每天翻动1—2次，以帮助鸡胚发育匀称和防止鸡胚膜粘连。 c)检卵：鸡卵孵育4～5天后，即可用检卵器检查鸡胚发育情况 （二天一次）。①未受精鸡卵：在检卵器上仅见到模糊的阴影。 ②活鸡卵：鸡胚发育4天后，在检卵器上就可见到清晰的血管， 鸡卵内有一小黑点（鸡胚），有明显的自然转动。③死胎：如果发现鸡卵血管模糊、扩张、胚胎活动呆滞或不能自主地转动，则可判断胚胎频死或已经死亡，应将其挑捡出来。鸡胚孵育完毕后，用铅笔划出气室边缘和胚胎的位置待用。 d)接种：
病毒分离方法
植物内生菌分离方法 植物内生菌分离方法 匿名提问 2009-02-18 20:04:53 发布 自然科学学术 6个回答 回答 曲恋| 2009-02-18 20:45:40 有0人认为这个回答不错| 有0人认为这个回答没有帮助 植物内生放线菌是一类大有开发潜力的微生物资源。目前使用的分离条件和技术尚不完善，容易被外源菌和内生真菌、细菌污染，因此内生放线菌尤其是稀有内生放线菌的选择性分离技术至少是今后一段时间研究的重点。介绍了植物内生放线菌选择性分离方法并提出值得研究的问题。( 添加评论(0) nk0226 | 2009-07-25 11:13:09 有0人认为这个回答不错| 有0人认为这个回答没有帮助 植物病毒与病毒防治 Plant Virology& Control of Plant Virology 32学时2学分 一、课程性质、地位和任务 植物病毒与病毒防治是研究病原病毒与植物病毒病害相互关系的生物学科。本课程重点讲授植物病毒相关生物学特性与研究进展：病毒侵染寄主植物生理效应与抗病免疫；植物亚病毒病原等基础理论知识。同时，根据植物病毒基础研究需要，课程理论讲授与实验技能训练并重。通过本课程的学习，使学生进一步熟悉病毒病原与其它相关病原的区别要点，病害宏观及微观鉴定基本技术、方法、手段，并能在实践中应用。为独立开展植物病毒及病毒病害研究奠定基础。 二、课程教学的基本要求 要求学生重点掌握以下内容： （1）植物病毒的传播途径及传毒机制；
（2）病毒侵染植物内部症状，侵染增殖过程； （3）植物受病毒侵染的生理效应与抗病免疫； （4）植物亚病毒病原的基本特性； （5）植物病毒与病毒病害诊断鉴定的程序与方法。 三、课程理论教学大纲及学时分配 1. 绪论（2学时） 1.1 病毒的发现与病毒学的发展 1.2 研究病毒的意义与任务 1.3 植物病毒与其他病毒的关系 1.4病毒与其他微生物的区别 2. 病毒的分类与命名（3学时） 主要介绍病毒分类和命名的基本原则相关指标。重点：植物病毒的命名和分类系统。 2.1 病毒命名和分类的发展 2.2 病毒命名的系列 2.3 病毒分类的系列 2.4 植物病毒的命名和分类系统 3. 病毒侵染植物与增殖与增殖过程及遗传与变异（5学时） 主要讲授植物病毒侵染方式，在寄主体内的增殖过程，病毒遗传变异的本质。难点:病毒进入寄主细胞的方式及粒体装配。 3.1病毒粒体的吸附与侵入 3.2病毒粒体的脱壳与生物合成 3.3病毒粒体的装配与释放 3.4病毒的遗传与变异 3.5病毒的体外重新组与生物活性 4. 植物病毒的传播途径及传毒机制（5学时） 主要讲授病毒的介体传播和非介体传播的两大途径，以及不同介体传播机制与病害发生流行关系，难点：介体持久性传毒（口针传毒）与非持久性传毒（巡回传毒）机理。 4.1介体传毒 4.2非介体传毒 4.3种子与花粉传毒 4.4传毒机制 5. 病毒侵染植物生理效应与抗病免疫（5学时） 主要介绍病原侵染植物的内部症状（内含体）、病毒在植物体内的运转及生理活性物质改变与寄主抗病机理。难点：病毒侵染植物的生理变化与寄主的免疫反应。 5.1病毒侵染植物内部症状（内含体及其类型） 5.2病毒在植物体内的运输
初中化学物质的鉴定与鉴别
鉴定与鉴别都是用来检验物质的常用方法，都是通过化学实验，根据物质的特性反应去查出要检验的物质。因此，物质检验的关键是必须熟练掌握各物质（或离子）的特征反应，正确地选择试剂和实验方法。但是我们必须首先明白鉴定与鉴别。物质的鉴定与鉴别共同的要求是：根据物质的特有反应，选择适当的试剂，达到反应灵敏、现象明显、操作简便、结论可靠的效果。（物质的鉴定题和鉴别题的要求是不铜的。根据实验确定某一物质的习题是鉴定题；根据实验区别几种已知物质的习题是鉴别题）下面我们分别来具体谈谈我对它们的理解。 一、物质的鉴定： 是根据物质的某一特性，用化学方法来确定它是不是这种物质或含不含有某种成分或某一物质的组成。通常必须分别检验出阳离子和阴离子，对物质进行确认。常见离子的检验：按现象归类： 一、生成沉淀法：
二、生成气体法： 例1：怎样用实验方法鉴定一无色溶液是盐酸？写出实验过程及怨偶观的化学方程式。 分析：要证明该无色溶液是盐酸，既要证明其中含H+，又要证明其中含Cl-。要证明H+的存在，可用紫色石蕊试液或锌粒；要证明Cl-的存在，可用硝酸银溶液和稀硝酸。 例2：怎样鉴定一白色固体为碳酸钡？ 分析：碳酸钡中既有Ba2+又有CO 32-，检验Ba2+可用硫酸溶液及稀硝酸；检验CO 3 2-， 选用盐酸及石灰水。
例3：怎样用实验方法来鉴定一蓝色溶液是硫酸铜溶液？写出所起反应的化学方程式。 分析：要证明该蓝色溶液是硫酸铜溶液，既要证明其中含Cu2+，又要证明其中含2-。要证明Cu2+的存在，可用比铜活泼的金属，浸入溶液，金属表面将会覆盖SO 4 2-的存在，加氯化钡溶液和稀硝酸，会出现不溶的白色上红色的铜；要证明SO 4 沉淀硫酸钡。但要看清沉淀的颜色，必须先排除溶液中蓝色铜离子的干扰，可先加氢氧化钠溶液，使铜离子进入氢氧化铜沉淀中去。 练习：1、怎样用实验证明某物质是硫酸铵？ 2、怎样证明氯酸钾中含有氯元素和钾元素？ 二、物质的鉴别： 根据不同物质的特性，用化学方法把两种或两种以上的已知物质一一区别开。鉴别时只需利用某一特征反应，确定某物质的一部分就可达到鉴别的目的。且已知n种，确定n-1种，则余下的既为可知。 解题的原则是：以最简单的方法，即能用物理方法尽量不用化学方法。用最少的试剂，能不用其它试剂尽量不用。取得最明显的实验现象来加以鉴别和检验。在进行实验时，步骤要严密而清晰；在进行判断时，证据要确凿。 当然在常见物质鉴别题可根据允许使用的试剂的多少分为3种类型： 1、任选试剂的鉴别题：（可用多种试剂） 2、只允许用一种试剂的鉴别题； 3、限制用被鉴物本身作试剂的鉴别题。 进行物质的检验时应注意：（先取样，后操作；先现象，后结论） （1）正确地选择试剂，简述操作步骤，正确描述现象，经过分析、推理得出结论。结论必须是肯定或否定的，不是似是而非。并要写出有关的化学方程式。（2）不能向待测物质中直接加入试剂，而只应当取少量试样进行检验。如被检验物质是故态，而检验时又需要用溶液时，应先取少量试样用蒸馏水溶解配成溶液后，再进行检验。 （3）不能把要检验的物质当作已知物来叙述实验现象。叙述的顺序是先说明加入何种物质后，再根据产生的现象，再确定是何种物质。
物质的检验和鉴别
物质的检验和鉴别 检验与鉴别都是用来检验物质的常用方法，都是通过化学实验，根据物质的特性反应去查出要检验的物质。因此，物质检验的关键是必须熟练掌握各物质（或离子）的特征反应，正确地选择试剂和实验方法。但是我们必须首先明白鉴定与鉴别。物质的鉴定与鉴别共同的要求是：根据物质的特有反应，选择适当的试剂，达到反应灵敏、现象明显、操作简便、结论可靠的效果。 1．检验原理 (1)依据物质的特殊性质进行检验。如物质的颜色、气味、溶解性等。 (2)依据物质间反应时所产生的特殊反应现象。即所选的试剂和被检验的物质在发 生化学反应时，必须能够产生下列现象之中的一种：①变色；②放出气体(通常指产生气体的气味或在溶液中反应时产生的气泡)；③生成沉淀等。 2．常见有特殊颜色的物质 Fe2O3：红棕色Fe3O4：黑色 Fe2＋：浅绿色Fe3＋：黄色 Fe(OH)3：红褐色Cu：红色 CuO：黑色无水CuSO4：白色 CuSO4·5H2O：蓝色Cu2＋：蓝色 Cu(OH)2：蓝色S：黄色(注：离子代表含有这种离子的溶液) 常见气体的检验 气体检验方法现象 氧气将带火星的木条插入有关容器内木条复燃 氢气点燃，在火焰上方罩一个冷而干燥的小烧杯 发出淡蓝色火焰，烧杯 水珠凝结 依次通过灼热的氧化铜和白色的无水硫酸 铜 黑色氧化铜变红，白色 蓝 二氧化碳通入澄清石灰水中澄清的石灰水变浑浊 一氧化碳点燃，在火焰上方罩一个冷而干燥的小烧 杯，再向烧杯内倒入澄清石灰水，振荡 发出淡蓝色火焰，烧杯 水珠凝结，石灰水变浑浊依次通过灼热的氧化铜和澄清石灰水 黑色氧化铜变红，澄清 变浑浊
甲烷 点燃，在火焰上方罩一个冷而干燥的小烧杯，再向烧杯内倒入澄清石灰水，振荡 发出蓝色火焰，烧杯壁上有水珠凝结，石灰水变浑浊 氮气 将点燃的木条插入有关容器内，再倒入澄清石灰水，振荡 木条马上熄灭，石灰水不变浑浊 氯化氢 将湿润的蓝色石蕊试纸放在瓶口 蓝色石蕊试纸变红 通入水里，滴入硝酸银溶液和稀硝酸 生成白色沉淀，不溶解于稀硝酸 水蒸气 通过白色的无水硫酸铜 白色无水硫酸铜变蓝 常见物质的检验 二、物质的鉴别： 根据不同质的特性，用化学方法把两种或两种以上的已知物质一一区别开。鉴别时只需利用某一特征反应，确定某物质的一部分就可达到鉴别的目的。且已知n 种，确定n-1种，则余下的既为可知。 解题的原则是：以最简单的方法，即能用物理方法尽量不用化学方法。用最少的试剂，能不用其它试剂尽量不用。取得最明显的实验现象来加以鉴别和检验。在进行实验时，步骤要严密而清晰；在进行判断时，证据要确凿。 当然在常见物质鉴别题可根据允许使用的试剂的多少分为3种类型： 1、任选试剂的鉴别题：（可用多种试剂） 2、只允许用一种试剂的鉴别题； 3、限制用被鉴物本身作试剂的鉴别题。 物质 使用试剂 现象 酸（H ＋ ） （1）紫色石蕊试液 （2）PH 试纸 （3）加入锌粒或镁条 变红 PH ＜7 产生可燃性气体 碱（OH － ） 紫色石蕊试液 PH 试纸 无色酚酞试液 变蓝 PH ＞7 变红 硝酸银溶液和稀硝酸 生成白色沉淀，沉淀不溶于稀硝酸硫酸或可溶性硫酸盐 硝酸钡溶液和稀硝酸 生成白色沉淀，沉淀不溶于稀硝酸碳酸盐 盐酸和澄清石灰水 产生气体，气体能使澄清石灰水变铵盐 氢氧化钠，加热，湿润的红色石蕊试纸。 产生刺激性气味的气体，能使湿润蕊试纸变蓝
病毒的分离鉴定
病毒的分离鉴定 Prepared on 22 November 2020
病毒的分离与鉴定 要证明某种疾病是由某一感染性病毒所引起，则必须满足以下原则： ①从患病者体内分离出病毒； ②在实验动物或寄主细胞中可以培养； ③证明这种培养物具有滤过性； ④在原始宿主或相关种属内能产生同样的病症； ⑤能重新分离出病毒。 1.病毒的分离 1.1标本的处理 标本的收集 a)粪便标本：将5g粪便标本和50mlPBS放入盛有20-25颗玻璃小 珠的100ml无菌瓶中，搅拌成悬液，倒出上清，3000×g，4℃离心6min。 b)拭子和生物体液：拭子浸在2-3ml运载培养基中，将棉拭子中的 液体尽量挤出以获得标本，如果液体被污染，应3000×g4℃离心30min。 c)组织标本：用无菌乳钵或匀浆器研磨组织标本，同时加入足量的 PBS制备成20%的悬液，3000×g4℃离心30min。 除菌处理 a)粪便可加青链霉素使最终浓度为10000单位/毫升，置4℃过夜。
b)鼻咽拭子一般加抗生素最终浓度为2000单位/毫升，置4℃作用 4小时。 c)对乙醚有抵抗的病毒如鼻病毒、肠道病毒、呼肠孤病毒、腺病 毒、痘病毒等，则可加入等量的乙醚4℃过夜除菌。 1.2病毒的分离培养 病毒是严格的细胞内寄生微生物，培养病毒必须使用细胞。根据病毒的不同选用敏感动物（动物接种）、鸡胚（鸡胚接种）或离体细胞进行分离培养（细胞培养）。 鸡胚接种 a)鸡卵的选择：一般都选新鲜、10天以内的受精卵以保证规格质 量上的一致。 b)孵育：孵育时可将鸡卵放入卵箱内进行,气室向上，孵育的最适 温度为38--39℃，相对湿度为40—70％，孵育8日后，鸡卵应每天翻动1—2次，以帮助鸡胚发育匀称和防止鸡胚膜粘连。 c)检卵：鸡卵孵育4～5天后，即可用检卵器检查鸡胚发育情况 （二天一次）。①未受精鸡卵：在检卵器上仅见到模糊的阴影。 ②活鸡卵：鸡胚发育4天后，在检卵器上就可见到清晰的血管， 鸡卵内有一小黑点（鸡胚），有明显的自然转动。③死胎：如果发现鸡卵血管模糊、扩张、胚胎活动呆滞或不能自主地转动，则可判断胚胎频死或已经死亡，应将其挑捡出来。鸡胚孵育完毕后，用铅笔划出气室边缘和胚胎的位置待用。 d)接种：
病毒的分离与鉴定
病毒的分离与鉴定 （一）病毒的分离病毒分离的一般程序是：检验标本→杀灭杂菌(青、链霉素)→接种易感的动物→出现病状鸡胚→病变或死亡细胞培养→细胞病变→鉴定病毒种型(血清学方法)无菌标本(脑脊液、血液、血浆、血清)可直接接种细胞、动物、鸡胚；无菌组织块经培养液洗液洗涤后制成10～20%悬液离… （一）病毒的分离 病毒分离的一般程序是： 检验标本→杀灭杂菌(青、链霉素)→接种易感的动物→出现病状 鸡胚→病变或死亡 细胞培养→细胞病变 →鉴定病毒种型(血清学方法) 无菌标本(脑脊液、血液、血浆、血清)可直接接种细胞、动物、鸡胚；无菌组织块经培养液洗液洗涤后制成10～20%悬液离心后，取上清接种；咽洗液、粪便、尿、感染组织或昆虫等污染标本在接种前先用抗生素处理，杀死杂菌。 1．细胞培养用分散的活细胞培养称细胞培养（Cell culture）。所用培养液是含血清（通常为胎牛血清）、葡萄糖、氨基酸、维生素的平衡溶液，pH7.2～7.4。细胞培养适于绝大多数病毒生长，是病毒实验室的常规技术。 原代细胞培养(Primary cell culture) 用胰蛋白酶将人胚（或动物）组织分散成单细胞，加一定培养液，37℃孵育1-2天后逐渐在培养瓶底部长成单层细胞，如人胚肾细胞、兔肾细胞。原代细胞均为二倍体细胞，可用于产生病毒疫苗，如兔肾细胞生产风疹疫苗，鸡成纤维细胞产生麻疹疫苗，猴肾细胞生产脊液灰质炎疫苗。因原代细胞不能持续传代培养，故不便用于诊断工作。 二倍体细胞培养(Diploid cell cultune) 原代细胞只能传2-3代细胞就退化，在多数细胞退化时，少数细胞能继续传下来，且保持染色体数为二倍体，称为二倍体细胞。二倍体细
初中化学常见物质的鉴别
初中化学常见物质的鉴 别 Company number：【0089WT-8898YT-W8CCB-BUUT-202108】
（一）初中化学物质的检验 1、 气体的检验 [1]氧气：带火星的木条放入瓶中，若木条复燃，则是氧气．？ [2]氢气：在玻璃尖嘴点燃气体，罩一干冷小烧杯，观察杯壁是否有水滴，往烧杯中倒入澄清的石灰水，若不变浑浊，则是氢气．？ [3]二氧化碳：通入澄清的石灰水，若变浑浊则是二氧化碳．？ [4]氨气：湿润的紫红色石蕊试纸，若试纸变蓝，则是氨气．？ [5]水蒸气：通过无水硫酸铜，若白色固体变蓝，则含水蒸气． [6]一氧化碳：在玻璃尖嘴点燃气体，在火焰上方罩一干冷小烧杯，观察烧杯内壁无水珠生成，然后将烧杯迅速倒转，往烧杯中倒入澄清的石灰水，若澄清的石灰水变浑浊，则是一氧化碳． [7] 氮气：将燃烧的木条伸入集气瓶中，木条熄灭，然后向集气瓶中倒入澄清石灰水，石灰水不变浑浊。 2、离子的检验. （1）酸液（H+）：⑴用紫色石蕊试液或PH试纸 ⑵活泼金属（如：镁条、锌粒等） ⑶不溶性碱（如：氢氧化铜等） ⑷某些金属氧化物（如：铁锈） [5]碳酸盐（如：碳酸钠等） （2）碱液（OH-）：⑴紫色石蕊试液或无色酚酞或PH试纸
⑵某些可溶性盐（如：硫酸铜、氯化铁） （3）盐酸和Cl-：用AgNO3溶液和稀HNO3，若产生白色沉淀，则是氯离子 (4)硫酸和SO42-：硝酸钡溶液Ba(NO3)2和稀硝酸／先滴加稀盐酸再滴入氯化钡BaCl2 区别Cl-和SO42-:先用 Ba(NO3)2溶液再用AgNO3溶液 (5)CO32-：用盐酸和石灰水 (6)铵盐（NH4+）：氢氧化钠溶液并加热，把湿润的红色石蕊试纸放在试管口，产生使湿润的红色石蕊试纸变蓝的气体。 (7)Cu2+：用可溶性碱（如：氢氧化钠、氢氧化钙）若产生蓝色沉淀则是铜离子 (8)Fe2+：用可溶性碱（如：氢氧化钠、氢氧化钙）若产生红褐色沉淀则是铁离子 (9)Ca2+：用可溶性碳酸盐（如：碳酸钠）若产生白色沉淀则是钙离子 *相关例题 [1]如何检验NaOH是否变质:滴加稀盐酸，若产生气泡则变质？ [2]检验生石灰中是否含有石灰石：滴加稀盐酸，若产生气泡则含有石灰石？ [3]检验NaOH中是否含有NaCl：先滴加足量稀硝酸，再滴加AgNO3溶液，若产生白色沉淀，则含有NaCl。？ [4]检验三瓶试液分别是稀HNO3,稀HCl,稀H2SO4？
犬细小病毒的分离与鉴定
犬细小病毒的分离与鉴定 摘要：采用细胞培养法对疑似犬细小病毒的粪便和内脏进行了分离和鉴定，并对分离到的病毒进行生物学特性鉴定和动物回归试验。结果共分离到3株CPV，分离株在猫肾细胞F81产生明显细胞病变，血凝效价达1∶27～1∶210，细胞病变能被犬细小病毒阳性血清所抑制，接种幼犬后，分离株3可以引起试验犬发病死亡。 关键词：犬细小病毒；分离；鉴定 犬细小病毒（Canine parvovirus，CPV）属于细小病毒科细小病毒属，为单股、负义、线形无囊膜的DNA病毒[1]。CPV可引起犬的出血性肠胃炎和心肌炎，并使白细胞大量减少，在幼犬中的发病率和死亡率都很高[2]。CPV对多种理化因素和常用消毒剂具有较强的抵抗力，在4～10 ℃存活6个月，37 ℃存活2周，56 ℃存活24 h，80 ℃存活15 min，在粪便中可存活数月至数年[3]；该病毒对乙醚，氯仿和醇类有抵抗力[4]。CPV一年四季均可发病，以冬、春多发[5]，饲养管理条件骤变、长途运输、寒冷、拥挤均可促使该病发生[6]。病犬是主要传染源，其呕吐物、唾液、粪便中均有大量病毒[7]。根据临床症状和血清学反应，可做出准确诊断[8-13]。本研究通过对山东毒株分离，并对其部分生物学特性进行研究，为该病的防治和后续研究提供一定的理论基础。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 主要试剂DMEM培养基为Gibco产品；小牛血清、谷氨酸胺、双抗、胰蛋白酶等购自大连宝生物TaKaRa有限公司；其他化学试剂均为分析纯试剂。 1.1.2 病料病料为2009～2011年聊城大学兽医院收集或其他养犬场送检的可疑CPV病料，包括20份粪便样品和10份脏器。 1.1.3 试验动物和细胞8只40～50日龄的山东细犬幼犬（抗CPV HI抗体效价小于1∶4），健康状况良好；猫肾传代细胞系（F81）和犬肾传代细胞系（MDCK）等由聊城大学农学院实验室保存。 1.2 方法 1.2.1 试剂的配制 1）1%猪红细胞悬液的制备。用20 mL注射器内吸入阿氏液3～5 mL，于健康猪前腔静脉采血10～15 mL，立即混匀，4 ℃保存备用。使用时用PBS洗涤保存的猪红细胞，1 000 r/min离心5 min，洗涤3次，取红细胞泥1 mL加稀释液100 mL，再加入小牛血清白蛋白0.1 g，即为1%猪红细胞悬液。 2）HA抗原配制。用移液器向V型血凝板每孔加稀释液25 μL，然后吸取25 μL经福尔马林灭活的CPV细胞培养物，在血凝板上倍比稀释，最后1孔不稀释，作为阴性对照；接着每孔加稀释液25 μL和1%猪红细胞悬液50 μL，于振荡器上振荡1 min混匀，于4 ℃冰箱静置1～2 h，待红细胞完全沉淀后判定。判定的方法是以50%红细胞凝集为终点，在对照孔红细胞完全不凝集，呈圆形小点
病毒的分离鉴定
病毒的分离与鉴定 要证明某种疾病是由某一感染性病毒所引起，则必须满足以下原则： ①从患病者体分离出病毒； ②在实验动物或寄主细胞中可以培养； ③证明这种培养物具有滤过性； ④在原始宿主或相关种属能产生同样的病症； ⑤能重新分离出病毒。 1.病毒的分离 1.1标本的处理 1.1.1标本的收集 a)粪便标本：将5g粪便标本和50ml PBS放入盛有20-25颗玻璃小 珠的100ml无菌瓶中，搅拌成悬液，倒出上清，3000×g，4℃离心6min。 b)拭子和生物体液：拭子浸在2-3ml运载培养基中，将棉拭子中的 液体尽量挤出以获得标本，如果液体被污染，应3000×g 4℃离心30min。 c)组织标本：用无菌乳钵或匀浆器研磨组织标本，同时加入足量的 PBS制备成20%的悬液，3000×g 4℃离心30min。 1.1.2 除菌处理 a)粪便可加青链霉素使最终浓度为10000单位/毫升，置4℃过夜。 b)鼻咽拭子一般加抗生素最终浓度为2000单位/毫升，置4℃作用4 小时。
c) 对乙醚有抵抗的病毒如鼻病毒、肠道病毒、呼肠孤病毒、腺病毒、 痘病毒等，则可加入等量的乙醚4℃过夜除菌。 1.2 病毒的分离培养 病毒是严格的细胞寄生微生物，培养病毒必须使用细胞。根据病毒的不同选用敏感动物（动物接种）、鸡胚（鸡胚接种）或离体细胞进行分离培养（细胞培养）。 1.2.1 鸡胚接种 a) 鸡卵的选择：一般都选新鲜、10天以的受精卵以保证规格质量上 的一致 。 b) 孵育：孵育时可将鸡卵放入卵箱进行,气室向上，孵育的最适温度 为38--39℃，相对湿度为40—70％，孵育8日后，鸡卵应每天翻动1—2次，以帮助鸡胚发育匀称和防止鸡胚膜粘连。 c) 检卵：鸡卵孵育4～5天后，即可用检卵器检查鸡胚发育情况（二 天一次）。①未受精鸡卵：在检卵器上仅见到模糊的阴影。②活鸡卵：鸡胚发育4天后，在检卵器上就可见到清晰的血管，鸡卵有一小黑点（鸡胚），有明显的自然转动。③死胎：如果发现鸡卵血管模糊、扩、胚胎活动呆滞或不能自主地转动，则可判断胚胎频死或已经死亡，应将其挑捡出来。鸡胚孵育完毕后，用铅笔划出气室边缘和胚胎的位置待用。 d) 接种：
系统辨识复习资料
1请叙述系统辨识的基本原理（方框图），步骤以及基本方法 定义：系统辨识就是从对系统进行观察和测量所获得的信息重提取系统数学模型的一种理论和方法。 辨识定义：辨识有三个要素——数据、模型类和准则。辨识就是按照一个准则在一组模型类中选择一个与数据拟合得最好的模型 辨识的三大要素：输入输出数据、模型类、等价准则 基本原理： 步骤：对一种给定的辨识方法，从实验设计到获得最终模型，一般要经历如下一些步骤：根据辨识的目的，利用先验知识，初步确定模型结构；采集数据；然后进行模型参数和结构辨识；最后经过验证获得最终模型。 基本方法：根据数学模型的形式：非参数辨识——经典辨识，脉冲响应、阶跃响应、频率响应、相关分析、谱分析法。参数辨识——现代辨识方法（最小二乘法等） 2随机语言的描述 白噪声是最简单的随机过程，均值为零，谱密度为非零常数的平稳随机过程。 白噪声过程（一系列不相关的随机变量组成的理想化随机过程） 相关函数： 谱密度： 白噪声序列，白噪声序列是白噪声过程的离散形式。如果序列 满足： 相关函数： 则称为白噪声序列。 谱密度： M 序列是最长线性移位寄存器序列，是伪随机二位式序列的一种形式。 M 序列的循环周期 M 序列的可加性：所有M 序列都具有移位可加性 辨识输入信号要求具有白噪声的统计特性 M 序列具有近似的白噪声性质，即 M 序列“净扰动”小，幅度、周期、易控制，实现简单。 3两种噪声模型的形式是什么 第一种含噪声的被辨识系统数学模型0011()()()()n n i i i i y k a y k i b u k i v k ===-+-+∑∑，式中,噪声序列v(k)通常假定为均值为零独立同分布的平稳随机序列,且与输入的序列u(k)彼此统计独立. 上式写成：0 ()()()T y k k v k ψθ=+。其中，()()()()()()()=1212T k y k y k y k n u k u k u k n ψ------????L L ，，，，，，， ) ()(2τδστ=W R +∞ <<∞-=ωσω2)(W S )}({k W Λ,2,1,0,)(2±±==l l R l W δσ2)()(σωω== ∑ ∞-∞=-l l j W W e l R S ???≠=≈+=?0 , 00,Const )()(1)(0ττττT M dt t M t M T R bit )12(-=P P N
病毒分离鉴定技术
猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的猪的一种繁殖障碍与呼吸困难的传染病。其特征为发病母猪厌食、发热，怀孕后期发生流产、死胎和木乃伊胎，幼龄仔猪发生呼吸道症状[1]。1987年在美国中西部首先发现该病，并分离到病毒，其后在北美、欧洲、亚洲等国家流行。目前该病已在全球范围内传播、蔓延。我国郭宝清等[4]于1996年首次从暴发流产的胎儿中分离到PRRSV。国内诸多血清学检测结果表明，该病在我国许多地方已有流行[5]。河南某猪场"猪场发生临床症状疑似PRRS的传染病，用间接ELISA法检测，呈PRRS 抗体阳性。从病猪肺、淋巴结病料中分离到1株疑似PRRSV，并对其进行了一系列的鉴定。 1材料与方法 1.1材料 1.1.1病料采自河南某猪场疑似PRRS发病仔猪肺脏及淋巴结。 1.1.2细胞及血清细胞系Marc145、Vero、PK15均购自中国兽药监察所；阳性血清购自中国兽药监察所；阴性血清采自无PRRS病史猪场的新生仔猪血清，经中和试验证明为阴性。 1.1.3主要试剂及试剂盒RNasin、dNTP、反转录 Buffer、MMLV、rTaq酶均购自宝生物(大连)工程有限公司；琼脂糖为 Sigma公司产品；其他常规试剂均为分析纯；UNIQ10柱式Trizol 总RNA抽提纯化试剂盒购自上海生工生物工程技术服务有限公司。
1.1.4RTPCR引物设计根据GenBank公布的PRRSV美洲株ORF5核苷酸序列，参照文献[6]自行设计并由宝生物(大连)工程有限公司合成下述一对引物，引物扩增片段长度为720bp；上游引物P1 5′CTG GAG CCG TGC TAT CAT3′；下游引物P2 5′TCC ATT TCA TGA CAC CTG3′。 1.2方法 1.2.1细胞培养生长液为含100 mL/L新生牛血清(NCS)的RPMIl640培养液；维持液为含20 mL/L NCS的RPMIl640培养液。Marc145、Vero和PK15细胞均在体积分数为5%的CO2培养箱中于37 ℃培养至单层后传代培养。 1.2.2病料的处理无菌采集发病仔猪的淋巴结、肺脏、脾脏等组织并剪碎，用Hanks液研磨并制成5倍～10倍的乳悬液，反复冻融3次后，经5 000 r/min离心30 min，上清悬液用0.22μm微孔滤膜过滤后，－20 ℃保存备用。 1.2.3病毒的分离将上述处理的病料悬液1 mL分别接种于长成单层的 Marc145细胞、Vero细胞和PK15细胞，37 ℃吸附1 h，补加维持液至8 mL，继续培养3 d～5 d，反复冻融3次，收获培养上清液，同时设参考毒株、正常细胞作为对照。出现典型PRRSV细胞病变时按上述方法继续传代，供进一步检测备用，连传5代未出现CPE者判为阴性。
常见物质的鉴别方法汇总
常见物质的鉴别方法 1.重要离子的鉴别 （1）被鉴离子：阳离子——H+、Ag+、Ca2+、Ba2+、Cu2+、Fe3+等；阴离子：Cl-、OH-、CO32-、SO42-等。 （2）考查形式：判断离子共存；确定离子的组合方法；确定物质的组成；对鉴别方案或结论的评价等。 问题1有如下试剂：①pH试纸②酚酞溶液③稀HCl④Na2CO3溶液⑤石蕊试液。其中能将水、稀硫酸、澄清石灰水三种无色液体一次性鉴别开来的是。 问题2下列各组稀溶液中，利用组内物质的相互反应，就能将各种物质鉴别出来的是 A.Na2CO3、H2SO4、HCl、KNO3 B.CuSO4、KOH、NaCl、NaOH C.Na2SO4、Na2CO3、BaCl2、HNO3 D.NaNO3、MgCl2、KCl、Ba(OH)2 问题3某校实验室在搬迁时，不慎把三瓶无色溶液的标签损坏了，只知道它们分别是盐酸、BaCl2溶液和Na2C03溶液。甲、乙、丙三位学生各用一种试剂，一次性鉴别都取得了成功。已知：Na2C03溶液显碱性，BaCl2溶液呈中性。 (2)丁学生认为不用任何试剂即可鉴别，请你简要叙述他的鉴别过程(一种方法即可)： 。 1.若将氧气和二氧化碳两种无色气体区别开来，下列方法中不可行的是（） A.分别通人澄清的石灰水中 B.分别通人滴有紫色石蕊试液的水中 C.将带火星的小木条分别插入到两瓶气体中 D.分别通人蒸馏水中 2.下列有关物质的检验或区分方法中不正确的是（） A.向某物质中加入稀盐酸，有无色气体放出，则证明该物质是碳酸盐 B.鉴别氧气和空气两瓶气体时，将燃着的木条分别插入瓶中，燃烧更旺的为氧气 C.鉴别铁粉和石墨粉时，分别加入稀盐酸，若有气体放出，则证明为铁粉 D.某化肥与碱共热，若产生使湿润红色石蕊试纸变蓝的气体，证明为铵态氮肥 3.鉴别三瓶无色溶液：H2SO4、CaCl2、NaCl可选用试剂（） A.AgNO3溶液 B.紫色石蕊试液 C.酚酞试液 D.Na2CO3溶液 4.为了鉴别室温下饱和石灰水和蒸馏水，现提供下列方法( ) ①用pH试纸测试溶液的pH；②用光学显微镜观察；③用嘴尝； ④滴加FeCl3溶液；⑤加热观察。其中可行的是（） A.①②④ B.③④⑤ C.①④⑤ D.②③⑤ 5.下列各组物质的溶液，不另加试剂无法一一鉴别的是（） A.NaOH HCl CuSO4MgSO4 B.KNO3HCl CaCl2NaOH C.Na2CO3K2SO4BaCl2HCl D.NH4NO3H2SO4NaOH MgCl2 6.区分日常生活中的下列各组物质，所加试剂或操作方法完全正确的是（） 需鉴别物质方法1 方法2 A.硫酸铵和碳酸钙加水溶解加熟石灰 B.一氧化碳和二氧化碳闻气味通过灼热的氧化铜 C.食盐水和蒸馏水测pH 蒸发结晶 D.真黄金和假黄金（铜锌合金）看颜色灼烧 7.现有甲、乙、丙、丁4瓶无色溶液，分别是稀盐酸、稀硝酸、烧碱、澄清的石灰水中的一种，通过下图所示的实验过程可以将它们一一鉴别。其中所加试剂X可能是（）
初中化学常见物质的鉴别方法
物质的鉴别 物质的鉴别是初中化学中考必考的知识点之一，由于涉及的基础知识比较多，所以学生掌握起来比较困难。初中化学物质鉴别主要包括气体、固体、溶液的鉴别。常见的方法归纳如下： 1、气体的检验 （1）检验气体最简单的方法：用燃烧的木条 （2）可燃性气体的检验：用带尖嘴的导管导出气体，点燃，根据检验燃烧产物来确定可燃性气体。 （3）还原性物质的检验：通过灼热的金属氧化物后验证还原产物。 【点拔】气体检验不取样品。 2、固体的检验： （1）先取样品。（取少量的待测固体放入试管中） （2）检验固体最简单的方法是用水，若水检验不出就用酸。 例：用一种试剂检验下列各组固体物质 a.NH4NO3NaOH CaCO3 b. C Fe CuO （3）要证明某物质的成分必须阴阳离子分别证明.如：证明某溶液时硫酸铜溶液。必须分别证明Cu2+、SO42-存在。 3、溶液的检验 步骤：取样品，向其中滴加少量某试剂，观察现象，得出结论。 检验原则：最简便的方法，最常用的试剂，最明显的现象。 （1）常见离子的检验
H+：紫色石蕊、活泼金属、难溶性金属氧化物、难溶性碱、碳酸盐、 PH试纸 OH-: 酸碱指示剂、可溶性铜盐、可溶性铁盐、PH试纸 CO32-: 先向其中滴加稀盐酸、再将生成的气体通入澄清石灰水中NH4+：与熟石灰混合研磨，有氨味 （2）只用一种试剂一次性鉴别溶液。 解题方法：向待测溶液中滴加试剂后出现三种不同的现象： ①有气泡冒出、有沉淀生成、无现象 ②生成两种沉淀，但颜色不同，最后一种无现象 （3）不外加试剂鉴别物质 初中阶段常考查的习题有两种类型： ①有四种溶液：a.FeCl3溶液 b.MgCl2溶液 c.NaOH溶液 d.KCl 溶液在不用其他试剂的情况下，鉴别顺序是_________ 【点拔】：四种溶液中有颜色的溶液可以通过观察看出，第二种鉴别出来的物质就是与它反应有明显现象的物质，以此类推。 ②有四种无色溶液：Na2CO3 Na2SO4 BaCl2 HNO3不外加试剂也能鉴别出来。 【点拔】其中三种溶液两两作用能生成两种沉淀，一种沉淀溶于酸，一种沉淀不溶于酸，第四种溶液是酸溶液。不外加试剂也能鉴别出来。
病毒的分离与测定
第二十九讲病毒的分离与测定 教学目的：掌握病毒效价的测定方法 教学重点：噬斑法、终点法 教学难点：病毒的分离与鉴定 课时分布：1学时 教学过程： 一、病毒的分离与纯化 1、病毒的分离 病毒的分离是将疑有病毒的样品经处理后，接种于敏感的宿主，经培育后，通过检查其特异性病理表现或其它方法以肯定病毒的存在。 （1）标本的采集与处理标本应含有足够量的活病毒；加入抗菌素除细菌；研磨或超声波处理破碎细胞，让病毒充分释放出来；标本处理后立即接种，否则冷冻保藏。 （2）标本接种与感染表现接种实验宿主（动植物、细菌）、鸡胚或细胞（要求：操作简单、易于培养、产生的感染结果易判定）。噬菌体以噬菌斑为标记；动物病毒产生致细胞病变效应；植物病毒致敏感质感植物出现坏死斑或枯斑。 2、病毒纯化 通过分离得到的是病毒感染的宿主机体、组织或破细胞后的抽提物，或感染的宿主的体液、血液和分泌物，或培养液，须将杂质成分除去。 （1）病毒纯化的标准：纯化的病毒制备物应保持其感染性；纯化的病毒毒粒应具有均一性。 （2）病毒纯化的方法毒粒的主要成分是蛋白质，故可利用蛋白质提纯方法纯化；毒粒具一定的大小、形状和密度，可离心提取。 二、病毒的测定 在谷氨酸、抗菌素、酶制剂等生产中，经常出现不正常的发酵现象。发酵缓慢、发酵液含菌数下降、菌体畸形、耗糖缓慢或停止，镜检时发现有云雾状碎片，严重时以致倒罐。
1、病毒的物理颗粒计数 （1）电镜下直接计数 （2）血细胞凝集试验许多有包膜的动物病毒能在一定条件下凝集一定种类的脊椎动物红血球，凝集量与病毒浓度成正比。 此外，可根据病毒的抗原性质，与抗体发生特异性结合，利用分光光度计对病毒进行定量。但灵敏度较低，多在特殊情况下使用。总之，该方法测得的是有活力与无活力病毒数量的总和。 2、病毒的感染性测定 测定的是因感染所引起宿主或细胞发生某一特异性病理反应的病毒数量。 病毒感染单位：能引起宿主或宿主细胞一定特异性反应的病毒最小剂量。 病毒效价：指单位体积病毒悬液的感染单位数目。 （1）噬菌斑的测定 噬菌斑：噬菌体感染敏感细胞后，通过复制使宿主细胞裂解，释放大量噬菌体，扩散到周围的细胞中，继续侵染，从而在有噬菌体的地方形成一个透亮无菌近似圆形的空斑。它是phage存在的一种指示性指标。 在液体培养基中培养物变清。一个phage产生一个噬菌斑，故可根据在固培上形成的噬菌斑数测得phage的效价。通常是将噬菌体悬液分别与高浓度的敏感细菌以及半固体琼脂均匀混合后涂布在较高浓度的营养琼脂上，培养后计算噬菌斑数便可算出噬菌体效价。 ①双层平板法 底层培养基10ml 上层培养基4ml、凝固 指示菌0.2 ml、检样0.1 ml →32℃16-24h 测定前，事先配制含2%和1%的琼脂底层培养基和上层培养基，将铺成平板，用无菌吸管吸取一定量的指示菌和被测样品与上层培养基混合，冷到45℃迅速倒在底层平板上铺平，凝固后恒温培养16—20小时，如有phage存在，则在双层琼
系统辨识
系统辨识理论综述 郭金虎 【摘要】全面论述了系统辨识理论的提出背景以及理论成果，总结了系统辨识理论的基本原理、基本方法以及基本内容，并对其应用及发展做了全面的讨论。 【关键词】系统辨识；准则函数 1概述 系统辨识问题的提出是由于随着科学技术的发展，各门学科的研究方法进一步趋向定量化，人们在生产实践和科学实验中，对所研究的复杂对象通常要求通过观测和计算来定量的判明其内在规律，为此必须建立所研究对象的数学模型，从而进行分析、设计、预测、控制的决策。例如，在化工过程中，要求确定其化学动力学和有关参数，已决定工程的反应速度；在热工过程中，要求确定如热交换器这样的分布参数的系统及动态参数；在生物系统方面，通常希望获得其较精确的数学模型，一般描述在生物群体系统的动态参数；为了控制环境污染，希望得到大气污染扩散模型和水质模型；为进行人口预报，做出相应的决策，要求建立人口增长的动态模型；对产品需求量、新型工业的增长规律这类经济系统，已经建立并继续要求建立其定量的描述模型。其他如结构或机械的振动、地质分析、气象预报等等，都涉及系统辨识和系统参数估计，这类要求正在不断扩大。 2系统辨识的基本原理 2.1系统辨识的定义和基本要素 实验和观测是人类了解客观世界的最根本手段。在科学研究和工程实践中，利用通过实验和观测所得到的信息，或掌握所研究对象的特性，这种方式的含义即为“辨识”。关于系统辨识的定义，1962年，L.A.Zadeh 是这样提出的：“系统辨识就是在输入和输出数据观测的基础上，在指定的一组模型类中，确定一个与所测系统等价的模型”。1978年，L.Ljung 也给出了一个定义：“辨识既是按规定准则在一类模型中选择一个与数据拟合得最好的模型”。可用图2-1来说明辨识建模的思想。 0 G g G 等价准则系统原型 系统模型激励信号y g y e J u 图2-1 系统辨识的原理
高中常见化学物质鉴别
物质鉴别题的类型和解题步骤、方法 一、鉴定、鉴别和推断的区别和联系 鉴定、鉴别和推断都属于物质的检验，它们的共同点是：依据物质的特殊性质和特征反应，选择适当的试剂和方法，准确观察反应中的明显现象，如颜色的变化、沉淀的生成和溶解、气体的产生和气味、火焰的颜色等，进行判断、推理。 鉴定通常是指对于某一种物质的定性检验，根据物质的化学特性，分别检出阳离子、阴离子；鉴别通常是指对分别存放的两种或两种以上的物质进行定性辨认，可根据一种物质的特性区别于另一种，也可根据几种物质的颜色、气味、溶解性、溶解时的热效应等一般性质的不同加以区别；推断是通过已知实验事实，根据性质分析推求出被检验物质的组成和名称。我们要综合运用化学知识对常见物质进行鉴别和推断。 1．常见气体的检验 常见 气体检验方法 H2 纯净的氢气在空气中燃烧呈淡蓝色火焰，混合空气点燃有爆鸣声，生成物只有水。不是只有氢气才产生爆鸣声；可点燃的气体不一定是氢气 O2 可使带火星的木条复燃 Cl2 黄绿色，能使湿润的碘化钾淀粉试纸变蓝（O3、NO2也能使湿润的碘化钾淀粉试纸变蓝） HCl 无色有刺激性气味的气体。在潮湿的空气中形成白雾，能使湿润的蓝色石蓝试纸变红；用蘸有浓氨水的玻璃棒靠近时冒白烟；将气体通入AgNO3溶液时有白色沉淀生成。 SO2 无色有刺激性气味的气体。能使品红溶液褪色，加热后又显红色。能使酸性高锰酸钾溶液褪色。 H2S 无色有具鸡蛋气味的气体。能使Pb(NO3)2或CuSO4溶液产生黑色沉淀，或使湿润的醋酸铅试纸变黑。 NH3 无色有刺激性气味，能使湿润的红色石蕊试纸变蓝，用蘸有浓盐酸的玻璃棒靠近时能生成白烟。 NO2 红棕色气体，通入水中生成无色的溶液并产生无色气体，水溶液显酸性。 NO 无色气体，在空气中立即变成红棕色 CO2 能使澄清石灰水变浑浊；能使燃着的木条熄灭。SO2气体也能使澄清的石灰水变混浊，N2等气体也能使燃着的木条熄灭。
(完整)系统辨识—最小二乘法汇总,推荐文档
最小二乘法参数辨识 201403027 摘要:系统辨识在工程中的应用非常广泛,系统辨识的方法有很多种,最小 二乘法是一种应用极其广泛的系统辨识方法.阐述了动态系统模型的建立及其最小二乘法在系统辨识中的应用,并通过实例分析说明了最小二乘法应用于系统辨识中的重要意义. 关键词:最小二乘法;系统辨识;动态系统 Abstract: System identification in engineering is widely used, system identification methods there are many ways， least squares method is a very wide range of application of system identification method and the least squares method elaborated establish a dynamic system models in System Identification applications and examples analyzed by the least squares method is applied to illustrate the importance of system identification. Keywords: Least Squares; system identification; dynamic system
引言 随着科学技术的不断发展,人们认识自然、利用自然的能力越来越强,对于未知对象的探索也越来越深入.我们所研究的对象,可以依据对其了解的程度分为三种类型:白箱、灰箱和黑箱.如果我们对于研究对象的内部结构、内部机制了解很深入的话,这样的研究对象通常称之为“白箱”;而有的研究对象,我们对于其内部结构、机制只了解一部分,对于其内部运行规律并不十分清楚,这样的研究对象通常称之为“灰箱”;如果我们对于研究对象的内部结构、内部机制及运行规律均一无所知的话,则把这样的研究对象称之为“黑箱”.研究灰箱和黑箱时,将研究的对象看作是一个系统,通过建立该系统的模型,对模型参数进行辨识来确定该系统的运行规律.对于动态系统辨识的方法有很多,但其中应用最广泛,辨识 效果良好的就是最小二乘辨识方法,研究最小二乘法在系统辨识中的应用具有现实的、广泛的意义. 1．1 系统辨识简介 系统辨识是根据系统的输入输出时间函数来确定描述系统行为的数学模型。现代控制理论中的一个分支。通过辨识建立数学模型的目的是估计表征系统行为的重要参数，建立一个能模仿真实系统行为的模型，用当前可测量的系统的输入和输出预测系统输出的未来演变，以及设计控制器。对系统进行分析的主要问题是根据输入时间函数和系统的特性来确定输出信号。对系统进行控制的主要问题是根据系统的特性设计控制输入，使输出满足预先规定的要求。而系统辨识所研究的问题恰好是这些问题的逆问题。通常，预先给定一个模型类μ={M}（即给定一类已知结构的模型），一类输入信号u和等价准则J=L(y，yM)(一般情况下，J是误差函数，是过程输出y和模型输出yM的一个泛函)；然后选择使误差函数J达到最小的模型，作为辨识所要求的结果。系统辨识包括两个方面：结构辨识和参数估计。在实际的辨识过程中，随着使用的方法不同，结构辨识和参数估计这两个方面并不是截然分开的，而是可以交织在一起进行的。 1.2系统辨识的目的 在提出和解决一个辨识问题时，明确最终使用模型的目的是至关重要的。它对模型类（模型结构）、输入信号和等价准则的选择都有很大的影响。通过辨识建立数学模型通常有四个目的。 ①估计具有特定物理意义的参数有些表征系统行为的重要参数是难以直接测量的，例如在生理、生态、环境、经济等系统中就常有这种情况。这就需要通过能观测到的输入输出数据，用辨识的方法去估计那些参数。 ②仿真仿真的核心是要建立一个能模仿真实系统行为的模型。用于系统分析的仿真模型要求能真实反映系统的特性。用于系统设计的仿真，则强调设计参数能正确地符合它本身的物理意义。 ③预测这是辨识的一个重要应用方面，其目的是用迄今为止系统的可测量的输入和输出去预测系统输出的未来的演变。例如最常见的气象预报，洪水预报，其他如太阳黑子预报，市场价格的预测，河流污染物含量的预测等。预测模型辨识的等价准则主要是使预测误差平方和最小。只要预测误差小就是好的预测