支气管肺泡灌洗术的操作方法
把小鼠喉咙处皮肤剪开，用镊子把气管周围的组织分离开，气管暴露出来。注射器7号针头，针尖剪掉，再磨平，把动物仰位固定，针头从嘴巴里进去，伸到气管里。和平时灌胃一样，只是现在伸到气管。在甲状腺（气管显得稍宽处）下面，针头就伸到这里，大约甲状腺过3毫米处。然后拿一根线，从气管下穿过，把针头和气管一起结扎了，其实就是把针头固定在里面，不让它跑出来。打结时用点力，手拨动针头时明显感觉针头动不了就可以了。然后注射器吸取液体推进气管，第一次一般吸不完全，没关系，第二次的液体推进去后就能吸出来很多了。我基本能全部吸出来的。
希望能帮上忙。
标题：小鼠肺泡灌洗标准操作规程
关键词：肺泡灌洗；细胞分类计数；细胞因子
目的：检查小鼠各种病理生理状态(特别是肺部疾病)下，肺部
出现的各种病理改变。
例：哮喘模型中检测嗜酸细胞的分类数有否提高，灌洗
液中各种细胞因子，如IL-4,IL-5,IL-10,IFN-r等水平。
主体内容（操作步骤）：
实验的准备
实验的器材、仪器、药品：4℃遇冷的单纯PBS和4℃遇冷的含1%BSA的PBS；
手术器械：眼科剪，眼科镊，穿刺针或4号半头
皮针；血细胞计数板；低温离心机
实验操作规程：灌洗分单侧和双侧。单侧一般为颈部和胸部解剖，气管和一侧肺叶结扎。再用穿刺针插入气管上端，0.3mlPBS反复冲洗,一般为3遍，每遍冲洗次数根据需要决定，一般3-5次即可。
双侧灌洗则只需要进行颈部解剖，暴露气管进行插管。PBS灌洗量增高到0.8ml.灌洗次数同上。
结果判定：1.回收的灌洗液4℃，1500r离心10分钟，回收上清置于-20℃等待进行细胞因子检测；
2.用1ml含有1%BSA的PBS重悬细胞沉淀，取10ul重悬液进行细胞计数。余液再次4℃离心，参数同上；
3.离心后去上清，不需太彻底，可根据第二步细胞计数所得结果和需要涂片张数决定需要残留多少上清重悬细胞沉淀。一般如果细胞总数有10*6次方/ml的话，用80-100ul重悬可以涂三张片，这样玻片上细胞密度比较适中。
4.涂片后待玻片自然晾干，然后置于10%中性甲醛溶液中固定10分钟以上，随后就可以进行常规HE染色。5。染色后就可以进行细胞分类计数，计算300个以上细胞，结果就比较可靠了。
使用静脉留置针，颈部解剖显露气管，插入留置针，用细线打结固定，拔出针芯。链接注射器，即可开始灌洗！本实验室是这么做的，很方便，效果很好
支气管哮喘小鼠气道反应性无创检测方法的建立
支气管哮喘小鼠气道反应性无创检测方法的建立 李斌恺赖克方洪燕华王法霞陈如冲林少建钟南山 【摘要】目的目前国内对支气管哮喘(简称哮喘) 小鼠的评价多数仅立足于气道炎性指标,不能完全反映哮喘的病理生理特征。本所率先从国外引进了小动物无创检测和有创检测肺功能仪。无创法检测时小鼠不必麻醉,而且每次可以同时检测多只小鼠,具有较大的优越性,但能否取代有创法尚需更多的数据。本研究旨在建立无创检测小鼠气道高反应性的检测方法,并与有创检测方法进行比较。方法根据动物模型和气道反应性检测方法不同,动物分为: ①无创哮喘组; ②无创对照组; ③有创哮喘组; ④有创对照组。采用卵白蛋白致敏和激发,建立BALB/ c 小鼠哮喘模型,生理盐水作为对照,分别用无创和有创的方法测定气道反应性。哮喘动物雾化吸入0 . 2～50 g/ L 倍增浓度的乙酰甲胆碱( Mch) ,测定相应浓度下的增强呼气间歇( Pe nh) 值或气道阻力( RL ) 值等指标。将小鼠吸入Mc h 后RL 或Penh 增加 2 倍的激发浓度以PC100 来表示。所有动物都行支气管肺泡灌洗, 收集灌洗液, 涂片染色后分类计数。结果无创哮喘组PC100 均≤6 . 25 g/ L ,对照组PC100 均≥12 . 5 g/ L 。其Lo g2 ( 10 PC100 ) 值( 5 . 36 ±0 . 84) 显著低于对照组( 7 . 97 ±0 . 82)( P < 0 . 01) 。无创哮喘组从Mc h 浓度3 . 12 g/ L 开始, 其Pe nh 值明显高于对照组。有创哮喘组RL 值从Mc h 浓度0 . 39 g/ L开始就明显高于相应对照组( P < 0 . 05) 。无创组与有创组的气道反应性相关系数R = 0 . 96 ( P < 0 . 01) 。无创哮喘组和有创哮喘组的嗜酸粒细胞分别为( 54 . 00 ±5 . 96) % , ( 55 . 93 ± 5 . 92) % ,显著高于各自对照组的( 0 . 38 ±0 . 52) % , ( 0 . 63 ±0 . 74) %( P < 0 . 01) 。结论本研究表明以Penh 为主要测定指标的无创方法,可以成功检测哮喘小鼠气道高反应性。 【关键词】小鼠;气道反应性; 支气管哮喘;增强呼气间歇; 无创检测 【Ab st ra ct】Objective Most of t he evaluation on asthmatic mouse model only based on the airway inflammation , not fully reflecting its pathophysiology. Noninvasive method of measuring bronchial hyper responsiveness can detect several conscious mice in one time , but whether it can replace the invasive technique needs more data to be identified. This study aims to establish a non-invasive detection of mouse airway hyper responsiveness ,comparing with the invasive method. Methods According to different ways of detection , mice were divided into four groups : non-invasive asthma group , non-invasive control group ,invasive asthma group and invasive control group . Mouse was sensitized and challenged with ovalbumin ( OV A) for asthmatic model . The mice were challenged with increasing concentrations of methacholine aero sol from 0 . 2 250 g/ L ,and the airway resistance was measured. Enhance pause ( Penh) or airway resistance ( RL ) was taken for each group . The dose of methacholine causing 100 % increase of respiratory resistance was defined as PC100 . The PC100 values were converted into Log2 ( 10 PC100 ) for statistical analysis. Bro nchoalveolar lavage cytology was performed to evaluate the airway inflammation. Results The PC100 of non-invasive asthma group was ≤6 . 25 g/ L , and the non-invasive control group’s ≥12 . 5 g/ L . I t s Lo g2 ( 10 PC100 ) value was significantly less than that of control group , ( 5 . 36 ± 0 . 84) vs ( 7 . 97 ± 0 . 82) ( P < 0 . 01) . The Penh value of non -invasive asthma group began significantly increasing when the concentration of Mch was 3 . 12 g/ L . The RL value of invasive asthma group was increasing at the beginning of 0 . 39 g/ L ( P < 0 . 05) . The coefficient rate of two groups was 0 . 96 ( P < 0 . 01 ) . The EOS ( %) of non-invasive asthma group or invasive asthma group was 54 . 00 ± 5 . 96 , 55 . 93 ± 5 . 92 respectively , significantly larger than that of control group ( 0 . 38 ± 0 . 52 ,0 . 63 ±0 . 74 , P < 0 . 01) . Conclusions This study shows that single-chambered barometric whole-body plethysmography as a non- invasive lung function test can success fully detect airway
闭塞性细支气管炎小鼠模型的建立与评价
闭塞性细支气管炎小鼠模型的建立与评价 李松1，邹琳2，符州3，王莉佳4，代继宏3 儿童发育疾病教育部重点实验室1， 重庆医科大学儿童医院临床分子中心2， 重庆医科大学儿童医院呼吸中心3 重庆医科大学儿童医院呼吸实验室4， [摘要] 目的探讨建立闭塞性毛细支气管炎（BO）小鼠动物模型的方法。方法将40只 SPF级 C57BL/6雄性小鼠(6-8w)随机分为对照组和模型组两组。模型组的构建采用初次气管内滴注二乙酰（DA）（490mg/ml，500mg/kg）1次，对照组采用已消毒的蒸馏水代替，其余实验条件和方法均相同， 饲养于SPF级动物中心，至第3天和第7天收集标本。饲养期间观察小鼠一般状态，监测两组体重变化、肺功能改变；支气管肺泡灌洗、细胞计数及炎性细胞分类计数；病理切片、HE染色等。结果模 型组小鼠给予DA（500mg/kg）后1天可出现吼喘、呼吸加快等表现。模型组小鼠BALF液炎性细胞总 数及分类计数可见：3天以中性粒细胞为主，7天以淋巴和单核细胞为主（p＜0.05）；病理切片HE染 色可见典型的BO改变（气道上皮脱落严重；细支气管管腔内及管腔周围3天可见大量炎性细胞浸润， 伴肺泡急性出血，气道上皮大部分脱落，管腔严重闭塞；7天可见管壁增厚，炎症细胞浸润明显，类 纤维化表现）。结论 C57BL/6小鼠给予气管内滴注DA（500mg/kg）1次，可于第7天观察到典型的急 性期BO改变。 [关键词] 闭塞性细支气管炎；二乙酰；小鼠；模型 Establishment and evaluation of model of bronchiolitis obliterans Li Song1, Zou Lin2, Fu Zhou3, Wang Lijia4, Dai Jihong3（1Key Laboratory of Developmental Diseases in Childhood of Ministry of Education, 2Center for Clinical Molecular Medicine, 3Center of Respiratory Disorders, 4Laboratory of Respiratory Disorders ,Children’s Hospital, Chongqing Medical University, Chongqing, 400014, China） [Abstract] Objective Explore the establishment of bronchiolitis obliterans (BO) method of mouse animal model. Methods Fourty C57BL/6 mice ( SPF )were randomly divided into normal control group and BO model group ,20 mice per group. BO group intratracheal 作者简介 李松，硕士研究生，E-mail：qwe130********@https://www.360docs.net/doc/4619142840.html, 通信作者代继宏，主任医师，博士，E-mail：danieljh@https://www.360docs.net/doc/4619142840.html,
支气管哮喘小鼠气道反应性无创检测方法的建立
?论著?支气管哮喘小鼠气道反应性无创检测方法的建立 李斌恺 赖克方 洪燕华 王法霞 陈如冲 林少建 钟南山 【摘要】 目的 目前国内对支气管哮喘(简称哮喘)小鼠的评价多数仅立足于气道炎性指标,不能完全 反映哮喘的病理生理特征。本所率先从国外引进了小动物无创检测和有创检测肺功能仪。无创法检测时 小鼠不必麻醉,而且每次可以同时检测多只小鼠,具有较大的优越性,但能否取代有创法尚需更多的数据。 本研究旨在建立无创检测小鼠气道高反应性的检测方法,并与有创检测方法进行比较。方法 根据动物模 型和气道反应性检测方法不同,动物分为:①无创哮喘组;②无创对照组;③有创哮喘组;④有创对照组。采 用卵白蛋白致敏和激发,建立BALB/c小鼠哮喘模型,生理盐水作为对照,分别用无创和有创的方法测定气 道反应性。哮喘动物雾化吸入0.2～50g/L倍增浓度的乙酰甲胆碱(Mch),测定相应浓度下的增强呼气间 歇(Penh)值或气道阻力(R L)值等指标。将小鼠吸入Mch后R L或Penh增加2倍的激发浓度以PC100来表 示。所有动物都行支气管肺泡灌洗,收集灌洗液,涂片染色后分类计数。结果 无创哮喘组PC100均≤ 6.25g/L,对照组PC100均≥12.5g/L。其Log2(10PC100)值(5.36±0.84)显著低于对照组( 7.97±0.82) (P<0.01)。无创哮喘组从Mch浓度3.12g/L开始,其Penh值明显高于对照组。有创哮喘组R L值从 Mch浓度0.39g/L开始就明显高于相应对照组(P<0.05)。无创组与有创组的气道反应性相关系数R= 0.96(P<0.01)。无创哮喘组和有创哮喘组的嗜酸粒细胞分别为(54.00±5.96)%,(55.93±5.92)%,显 著高于各自对照组的(0.38±0.52)%,(0.63±0.74)%(P<0.01)。结论 本研究表明以Penh为主要测 定指标的无创方法,可以成功检测哮喘小鼠气道高反应性。 【关键词】 小鼠;气道反应性;支气管哮喘;增强呼气间歇;无创检测 Establishment of non2invasive method for measuring airway re sponsiveness of asthmatic mouse model L I B in2kai,LA I Ke2f ang,HO N G Yan2hua,W A N G Fa2x ia,CH EN R u2chong,L I N S hao2j ian,Z HON G N an2shan.Guangz hou I nstitute of Res pi ratory Diseases,the Fi rst A f f iliated Hos pital of Guangz hou Medical College,Guangz hou510120,China Corres ponding author:LA I Ke2f ang 【Abstract】 Objective Most of the evaluation on asthmatic mouse model only based on the airway inflammation,not f ully reflecting its pathophysiology.Noninvasive method of measuring bronchial hyperresponsiveness can detect several conscious mice in one time,but whether it can replace the invasive technique needs more data to be identified.This study aims to establish a non2invasive detection of mouse airway hyperresponsiveness,comparing with the invasive method.Methods According to different ways of detection,mice were divided into four group s:non2invasive asthma group,non2invasive control group,invasive asthma group and invasive control group.Mouse was sensitized and challenged with ovalbumin(OVA)for asthmatic model.The mice were challenged with increasing concentrations of methacholine aerosol f rom0.22 50g/L,and the airway resistance was measured.Enhance pause(Penh)or airway resistance(R L)was taken for each group.The dose of methacholine causing100%increase of respiratory resistance was defined as PC100.The PC100values were converted into Log2(10PC100)for statistical analysis.Bronchoalveolar lavage cytology was performed to evaluate the airway inflammation.Re sults The PC100of non2invasive asthma group was≤6.25g/L,and the noninvasive control group’s≥12.5g/L.Its Log2(10PC100)value was significantly less than that of control group,(5.36±0.84)vs(7.97±0.82)(P<0.01).The Penh value of non2invasive asthma group began significantly increasing when the concentration of Mch was3.12g/L.The 基金项目:“863”计划(2006AA02Z4Z5) 作者单位:510120广州医学院第一附属医院广州呼吸疾病研究所 通信作者:赖克方
支气管肺泡灌洗术的操作方法
把小鼠喉咙处皮肤剪开，用镊子把气管周围的组织分离开，气管暴露出来。注射器7号针头，针尖剪掉，再磨平，把动物仰位固定，针头从嘴巴里进去，伸到气管里。和平时灌胃一样，只是现在伸到气管。在甲状腺（气管显得稍宽处）下面，针头就伸到这里，大约甲状腺过3毫米处。然后拿一根线，从气管下穿过，把针头和气管一起结扎了，其实就是把针头固定在里面，不让它跑出来。打结时用点力，手拨动针头时明显感觉针头动不了就可以了。然后注射器吸取液体推进气管，第一次一般吸不完全，没关系，第二次的液体推进去后就能吸出来很多了。我基本能全部吸出来的。 希望能帮上忙。 标题：小鼠肺泡灌洗标准操作规程 关键词：肺泡灌洗；细胞分类计数；细胞因子 目的：检查小鼠各种病理生理状态(特别是肺部疾病)下，肺部 出现的各种病理改变。 例：哮喘模型中检测嗜酸细胞的分类数有否提高，灌洗 液中各种细胞因子，如IL-4,IL-5,IL-10,IFN-r等水平。 主体内容（操作步骤）： 实验的准备 实验的器材、仪器、药品：4℃遇冷的单纯PBS和4℃遇冷的含1%BSA的PBS； 手术器械：眼科剪，眼科镊，穿刺针或4号半头 皮针；血细胞计数板；低温离心机 实验操作规程：灌洗分单侧和双侧。单侧一般为颈部和胸部解剖，气管和一侧肺叶结扎。再用穿刺针插入气管上端，0.3mlPBS反复冲洗,一般为3遍，每遍冲洗次数根据需要决定，一般3-5次即可。 双侧灌洗则只需要进行颈部解剖，暴露气管进行插管。PBS灌洗量增高到0.8ml.灌洗次数同上。 结果判定：1.回收的灌洗液4℃，1500r离心10分钟，回收上清置于-20℃等待进行细胞因子检测； 2.用1ml含有1%BSA的PBS重悬细胞沉淀，取10ul重悬液进行细胞计数。余液再次4℃离心，参数同上； 3.离心后去上清，不需太彻底，可根据第二步细胞计数所得结果和需要涂片张数决定需要残留多少上清重悬细胞沉淀。一般如果细胞总数有10*6次方/ml的话，用80-100ul重悬可以涂三张片，这样玻片上细胞密度比较适中。 4.涂片后待玻片自然晾干，然后置于10%中性甲醛溶液中固定10分钟以上，随后就可以进行常规HE染色。5。染色后就可以进行细胞分类计数，计算300个以上细胞，结果就比较可靠了。 使用静脉留置针，颈部解剖显露气管，插入留置针，用细线打结固定，拔出针芯。链接注射器，即可开始灌洗！本实验室是这么做的，很方便，效果很好
支气管肺泡灌洗液检查
支气管肺泡灌洗液检查 痰液检查虽可对呼吸道疾病的诊断提供帮助，但不够灵敏与特异且对疾病定位帮助不大。支气管肺泡灌洗术（bronchoalceolar lavage,BAL ）中在纤维支气管镜基础上发展起来的一项新技术。BAL 是应用纤维支气管镜进行支气管肺泡灌洗，采取肺泡表面衬液进行炎症与免疫细胞 及可溶性物质检查的方法。与支气管冲洗少量液体注入支气管信灌注大量的液体进行支气管肺泡灌洗不同，利用支气管肺泡灌洗液进行细胞学、微生物学、寄生虫学和免疫学等方面的各项检验，对一些下呼吸道疾病和诊断、病情观察和预后判断开辟了一条新途径。 支气管肺泡灌洗术分全肺灌洗和肺段亚肺段灌洗。前者多用于治疗，后者多用于采集检验标本。 一、标本采集和处理 通常于局部麻醉后将纤维支气管镜插入右 肺中叶或左肺舌段的支气管，将其项端契入支气管分支开口，经气管活检孔缓缓少入37摄氏度灭菌生理盐水，每次30-50毫升，总量100-250毫升，不 应超过300毫升。每次注液后以-13.3~-19.95kpa 负压吸出，要防止负压过大，过猛。分别收集于用硅油处理进的容器中，容器周围宜用冰块包 围，并及时送检。记录回收液量，至少应回收30-40%以上，BALF 方能进行分析。分别注入的液体每次回收后混合一起进行试验。第一份回收的标本往往混 支气管内成分，为防止其干扰，也可将第一份标本与其它标本分开检查。首先用单层纱布过滤以除去粘液，将滤液离心后分离上清液供生化检查和免疫学测定，沉淀 物供细胞检查。微生物学检查的标本须严格遵守无菌操作；合适的BALF 应要求：①达到规定的回收比例；②不混有血液，红细胞数小于10%；③不应混有多量 的上皮细胞（一般小于3%）。 二、细胞学检查 1．有核细胞计数和分类计数：计数除上皮细胞及红细胞以外的所有细胞，经每毫升回收液的细胞总数表示。细胞分类可用沉淀物制定涂片或用细胞离心器进行，正常非吸烟者BALF 细胞数见表13-1，正常人的BALF 含有核细胞为（5-10）×106/L 。 2．淋巴细胞亚群分析：BALF 中淋巴细胞增多，可用单克隆抗体进行淋巴细胞亚群分析。例如CD 3、CD 4、CD 8、HLA-DR 等以有助于发病机制的研究。正常人非吸烟者BALF 中淋巴细胞表面抗原表型见表13-2。 3．癌细胞：支气管肺癌患者的BALF 沉淀物检出癌细胞，有助于肺癌诊断。 表13-1 正常非吸烟者BALF 细胞 作者 年 例数 注入量 回收量（%） 总细胞数（× 106） 细胞 （×106/ml ） Mac Lym Neut Eos Hunninghske 1983 8 100 52 14．0 26．9 93 7 0 0 北医大三院 1987 10 150 62 13．4 14．7 86 13 0．9 0．05 Ettensohn 1988 78 120 63 7．3 9．4 95 4 1 注：Mac 巨噬细胞；Lym 淋巴细胞；Nuet 中性粒细胞；Eos 噬酸性细胞 表13-2 正常非吸烟者BALF 中淋巴细胞表面抗原表型
支气管-肺泡灌洗检查技术操作规范(详细参考)
支气管-肺泡灌洗检查技术 【概述】 60年代后期随着可曲性纤维支气管镜（简称纤支镜）的开发与 应用，逐渐兴起支气管-肺泡灌洗（Bronchoalvoelar lavage）技术。1974年由Reynolds和Newball首次发表了有关BAL的文章，1989 年欧洲肺病学会建立了BAL协作组并报导了正常人和各种肺疾病患 者支气管-肺泡灌洗液（BALF）多中心检查结果。中华医学会呼吸分 会根据我国具体情况分别于1993年和2002年也制定出有关BALF细 胞学检查技术规范（草案），使此项检查技术在国内得到推广应用。由于BAL能直接获取肺内炎症免疫效应细胞，是探讨肺局部免疫病 理过程的一种相对比较安全有用的检查方法。因此，BAL已成为某 些肺疾病，特别是弥漫性间质性肺疾病以及免疫受损患者肺部感染 等疾病的辅助临床诊断、病变活动性和预后判定的重要检测手段。【适应症】 1.凡能接受纤支镜检查患者均能承受支气管肺泡灌洗的检查。 2.弥漫性间质性肺疾病诊断：特发性肺纤维化、结节病、外源 性过敏性肺泡炎、结缔组织病伴肺纤维化、组织细胞增生症X 以及嗜酸细胞肺浸润等。 3.弥漫性肺部肿瘤和免疫受损患者肺部感染诊断，如卡氏肺孢 子虫肺炎、细支气管肺泡癌。 4.用于肺泡蛋白沉积症的诊断与治疗，行局部和全肺灌洗。
5.用于肺部感染细菌学检测及肺化脓症冲冼引流治疗。 【禁忌证】 1．凡纤支镜的禁忌证均为支气管肺泡灌洗的禁忌证。 2．精神高度紧张不能配合完成纤支镜检查患者。 3．严重通气和换气功能患者，PaO2小于50mmHg或吸氧状态下PaO2小于70mmHg。 4．冠心病、高血压病、心律失常、频发心绞痛患者。 5．主动脉瘤和食道静脉曲张有破裂危险的患者。 6．近期发热、咯血和哮喘发作患者。 【术前准备】 同纤维支气管镜（纤支镜）术前准备，常规在纤支镜于活检刷检前做BAL。局部麻醉剂为2%利多卡因。 【操作程序】 1.灌洗部位选择：对弥漫性间质性肺疾病选择右肺中（B4或B5）或左肺舌叶，局限性肺病变则在相应支气管肺段进行BAL。 2.BAL操作步骤：①首先要在灌洗的肺段经活检孔通过一细硅胶管注入2%利多卡因1-2ml，做灌洗肺段局部麻醉；②然后将纤支镜顶端紧密楔入段或亚段支气管开口处，再经活检孔通过硅胶管快速注入37℃灭菌生理盐水。每次25-50ml,总量100-250ml，一般不超过300 ml；③立即用50-100mmHg负压吸引回收灌洗液，通常回收率为40-60%；④将回收液体立即用双层无菌沙布过滤除去粘液，并
支气管肺泡灌洗、操作技术及评分标准
支气管肺泡灌洗 支气管肺泡灌洗（BAL）是以纤支镜嵌入到肺段或亚段支气管水平，反复以无菌生理盐水灌洗、回收的一项技术，对其回收液（BALF）进行细胞学、生化学、酶学和免疫学等一系列检测和分析，是作为研究肺部疾病的病因、发病机制、诊断、评价疗效和判断预后的一项手段，是纤支镜应用的重要发展。依灌洗范围和应用的不同，将BAL方法分为两种：全肺灌洗和肺段或亚段灌洗。 （一）全肺灌洗用于肺泡蛋白沉着症、严重哮喘发作、肺尘埃沉着症、肺泡微石症的治疗。 以肺泡蛋白沉着症为例简要说明其操作过程。在手术室全麻下进行为宜，先经纤支镜引导下Carlen双腔管，吸纯氧10~15min 后，以150cm H2O压力，滴入37 ℃灭菌生理盐水500~1000ml，然后吸出或任其自行流出或虹吸回收，回收的流失量不超过200ml .灌洗应反复进行，直至洗出液完全清亮，总量一般在3~10L ，个别可高达18L .先灌洗一侧，隔2~3 天再灌另一侧。全肺灌洗技术操作较复杂，有一定风险，为此，根据病人具体情况，可选择小液量选择性肺叶灌洗，每次 50~100ml ，反复灌洗和吸出，一侧肺灌洗总量200 ~ 2000ml，隔3~7 天一次，两肺交替进行。 肺泡蛋白沉着症在采用BAL 治疗前，仅有1 / 4 病例病变可安然无恙全消退，死亡率高达 32 .4 % ；采用灌洗治疗，约3 / 4 患者症状可获缓解，有效者于灌洗后1~2 天，症状即见改善，胸部X 线表现的改善则较慢，一般需数日~数周。严重哮喘发作进行灌洗时，可于灌洗液中加溶痰剂，如乙酰半胱氨酸以增加粘液廓清作用；根据病情，可在局麻下进行小容量（250ml）灌洗，效果良好，操作并发症和死亡率很低，据24521 例的统计，分别为0 .08 ％和0 .01 ％。全肺灌洗治疗肺尘埃沉着症的操作方法，与肺泡蛋白沉着症基本相同，某组治疗之I~III期硅沉粉病70 余例次，灌洗后症状普遍好转，通过灌洗清除SiO2，典型病例肺通气功能、P（A-a）O2均有明显好转，虽然对已经发生的纤维化改变不能逆转，但对阻止病变继续进展，改善患者长期顶后，肯定会有好处。 （二）肺段灌洗主要用于弥漫性间质性肺炎-肺纤维化、石棉沉着病、结节病、弥漫性肺泡癌和卡氏肺囊虫肺炎的诊断和疗效的判定，探讨弥漫性肺间质纤维化的发病机制。当支气管肺感染严重，尤其是支气管结构异常，如支气管扩张症、肺囊肿、变性纤维化等症继发感染时，引流不畅、周身用药难以奏效，可通过BAL 反复灌洗、注药进行治疗。 1 .术前准备用药和麻醉同纤支镜检。 2 .在常规纤支镜检查气道后，于活检和刷检前进行BAL .弥漫性间质性肺疾病常选右肺中叶或左肺舌叶支气管，局限性病变则在相应支气管肺段进行BAL.嵌入后，经纤支镜活检孔注入2 ％利多卡因，做灌洗肺段的局部麻醉，从活检孔快速注入37 ℃灭菌生理盐水l00ml 后，在6 .7 ~ 1 3 .
大、小鼠支气管肺泡灌洗术的研究进展
２０１７年１２月第２７卷一第１２期中国比较医学杂志ＣＨＩＮＥＳＥＪＯＵＲＮＡＬＯＦＣＯＭＰＡＲＡＴＩＶＥＭＥＤＩＣＩＮＥＤｅｃｅｍｂｅｒ，２０１７Ｖｏｌ．２７一Ｎｏ．１２ ［基金项目］贵州省科技计划（黔科合外Ｇ字［２０１５］７００１号）；中央引导地方科技科技发展专项（黔科中引地［２０１６］４００１号）；环境化学与 生态毒理学国家重点实验室开放基金（ＫＦ２０１６－２１）；遗传资源与进化国家重点实验室开放课题（ＧＲＥＫＦ１７－１５）三 ［作者简介］龙隆（１９９１－）男，硕士研究生，专业：公共卫生－环境医学与卫生监督三Ｅ?ｍａｉｌ：４９７１９２９７９＠ｑｑ．ｃｏｍ ［通讯作者］谭红（１９５９－）女，研究员，研究方向：食品安全二环境监测二新化学物质毒理测试研究三Ｅ?ｍａｉｌ：ｔａｎ?ｈｏｎｇ＠ｔｏｍ．ｃｏｍ 研究报告大二小鼠支气管肺泡灌洗术的研究进展 龙一隆１，２，赵显莉２，谭一红２?，张爱华１，杨鸿波２，何锦林２ （１．贵州医科大学公共卫生学院，贵阳一５５００２５；２．贵州省分析测试研究院，贵阳一５５０００２） 一一?摘要?一支气管肺泡灌洗术是研究呼吸系统及其病变的一种重要的动物实验技术，它可以获得呼吸道及肺部深处多种生化因子二炎症介质和免疫细胞等，为动物实验研究提供重要的评价指标和参考依据，是探讨呼吸系统性疾病的一种有效可靠的方法三目前应用于人的支气管肺泡灌洗术已经逐步标准化并在临床广泛开展，但没有一套针对实验动物大小鼠的支气管肺泡灌洗操作的标准三支气管肺泡灌洗液的检测结果受诸多因素共同影响，如灌洗液二灌注压力二灌洗量和回收量以及灌洗液在肺部停留时间等，成功而高效获取灌洗标本是研究和评价呼吸系统性疾病的关键所在三本文总结了目前国内外研究人员常用的灌洗操作方法，为今后进一步开展相关的实验研究提供参考三 ?关键词?一支气管肺泡灌洗术；动物实验；呼吸系统 ?中图分类号?Ｒ－３３一一?文献标识码?Ａ一一?文章编号?１６７１?７８５６（２０１７）１２?０１１５?０５ｄｏｉ：１０ ３９６９．ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１－７８５６ ２０１７ １２ ０２０ Ｒｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｏｆｂｒｏｎｃｈｏａｌｖｅｏｌａｒｌａｖａｇｅｉｎｒａｔｓａｎｄｍｉｃｅ ＬＯＮＧＬｏｎｇ１，２，ＺＨＡＯＸｉａｎ?ｌｉ２，ＴＡＮＨｏｎｇ２?，ＺＨＡＮＧＡｉ?ｈｕａ１，ＹＡＮＧＨｏｎｇ?ｂｏ２，ＨＥＪｉｎ?ｌｉｎ２ （１．ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｕｂｌｉｃＨｅａｌｔｈｏｆＧｕｉｚｈｏｕＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕｉｙａｎｇ５５００２５，Ｃｈｉｎａ；２．ＧｕｉｚｈｏｕＡｃａｄｅｍｙｏｆＴｅｓｔｉｎｇａｎｄＡｎａｌｙｓｉｓ，Ｇｕｉｙａｎｇ５５０００２）一一?Ａｂｓｔｒａｃｔ?一Ｂｒｏｎｃｈｏａｌｖｅｏｌａｒｌａｖａｇｅｉｓａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔａｎｉｍａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｔｅｃｈｎｉｑｕｅｉｎｔｈｅｓｔｕｄｙｏｆｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｓｙｓｔｅｍａｎｄｉｔｓｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓ．Ｉｔｃａｎａｃｑｕｉｒｅａｖａｒｉｅｔｙｏｆｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｆａｃｔｏｒｓ，ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｍｅｄｉａｔｏｒｓａｎｄｉｍｍｕｎｅｃｅｌｌｓｆｒｏｍｔｈｅｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｔｒａｃｔａｎｄｌｕｎｇｓ，ａｎｄｐｒｏｖｉｄｅｓａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｅｖａｌｕａｔｉｏｎｉｎｄｅｘａｎｄｒｅｆｅｒｅｎｃｅｆｏｒａｎｉｍａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ．Ｂｒｏｎｃｈｏａｌｖｅｏｌａｒｌａｖａｇｅｉｓａｎｅｆｆｅｃｔｉｖｅａｎｄｒｅｌｉａｂｌｅｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｄｉａｇｎｏｓｉｓｏｆｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｉｔｈａｓｂｅｅｎｇｒａｄｕａｌｌｙｓｔａｎｄａｒｄｉｚｅｄａｎｄｗｉｄｅｌｙｕｓｅｄｉｎｃｌｉｎｉｃａｌｐｒａｃｔｉｃｅａｔｐｒｅｓｅｎｔ，ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅｒｅｉｓｎｏｓｅｔｏｆｓｔａｎｄａｒｄｆｏｒｂｒｏｎｃｈｏａｌｖｅｏｌａｒｌａｖａｇｅｉｎｒａｔｓａｎｄｍｉｃｅ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆｂｒｏｎｃｈｏａｌｖｅｏｌａｒｌａｖａｇｅｆｌｕｉｄａｒｅａｆｆｅｃｔｅｄｂｙｍａｎｙｆａｃｔｏｒｓ，ｓｕｃｈａｓｔｈｅｌａｖａｇｅｆｌｕｉｄ，ｓｕｃｔｉｏｎｐｒｅｓｓｕｒｅ，ｔｈｅａｍｏｕｎｔｏｆｌａｖａｇｅａｎｄｒｅｃｏｖｅｒｙ，ａｎｄｔｈｅｒｅｔｅｎｔｉｏｎｔｉｍｅｏｆｌａｖａｇｅｆｌｕｉｄｉｎｔｈｅｌｕｎｇｓ．Ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌａｎｄｅｆｆｉｃｉｅｎｔａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎｏｆｌａｖａｇｅｓｐｅｃｉｍｅｎｓｉｓｔｈｅｋｅｙｔｏｔｈｅｓｔｕｄｙａｎｄｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｔｈｉｓｐａｐｅｒｓｕｍｍａｒｉｚｅｓｔｈｅｃｕｒｒｅｎｔｌａｖａｇｅｍｅｔｈｏｄｓｃｏｍｍｏｎｌｙｕｓｅｄｂｙｄｏｍｅｓｔｉｃａｎｄｆｏｒｅｉｇｎｒｅｓｅａｒｃｈｅｒｓ，ａｎｄｐｒｏｖｉｄｅｓａｒｅｆｅｒｅｎｃｅｆｏｒｆｕｒｔｈｅｒｒｅｓｅａｒｃｈｉｎ ｔｈｅｔｈｉｓｆｉｅｌｄ．?Ｋｅｙｗｏｒｄｓ?一ＢｒｏｎｃｈｏａｌｖｅｏｌａｒＬａｖａｇｅ；Ａｎｉｍａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ；Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｓｙｓｔｅｍ一一支气管肺泡灌洗术（ｂｒｏｎｃｈｏａｌｖｅｏｌａｒｌａｖａｇｅ，ＢＡＬ）是研究人和动物呼吸系统性疾病的一种十分重要的实验技术，该技术方法在临床试验和动物实 验研究中都得到了广泛应用与研究［１－３］，但在实验
支气管镜肺泡灌洗术
支气管肺泡灌洗术 【适应证】 20 世纪60 年代后期随着可曲性纤维支气管镜(简称纤支镜)的开发与应用，逐渐兴起支气管肺泡灌洗(bronchoalvoelar lavage，BAL)技术。中华医学会呼吸病学分会根据我国具体情况分别于1993年和2002年也制定出有关支气管肺泡灌洗液(bronchoalvoelar lavage fluid，BALF)细胞学检查技术规范(草案)，使此项检查技术在国内得到推广应用。由于BAL 能直接获取肺内炎症免疫效应细胞，是探讨肺局部免疫病理过程的一种相对比较安全有用的检查方法。因此，BAL已成为某些肺疾病，特别是弥漫性间质性肺疾病以及免疫受损患者肺部感染等疾病的辅助临床诊断、病变活动性和预后判定的重要检测手段。 适应证如下： 1.凡能接受气管镜检查患者均能承受支气管肺泡灌洗的检查。 2.弥漫性间质性肺疾病诊断：特发性肺纤维化、结节病、外源性过敏性肺泡炎、结缔组织病伴肺纤维化、组织细胞增生症X 以及嗜酸性粒细胞肺浸润等。 3.肺部肿瘤和免疫受损患者肺部感染诊断，如卡氏肺孢子虫肺炎、细支气管肺泡癌。 4.用于肺泡蛋白沉积症的诊断与治疗，行局部和全肺灌洗。 5.用于肺部感染细菌学检测及肺化脓症冲冼引流治疗。 【禁忌证】 1.凡气管镜的禁忌证均为支气管肺泡灌洗的禁忌证。 2.精神高度紧张不能配合完成气管镜检查患者。 3.严重通气和换气功能障碍患者，PaO2＜6.67kPa(50mmHg)或吸氧状态下PaO2＜9.33kPa(70mmHg)。 4.冠心病、高血压病、心律失常、频发心绞痛患者。 5.主动脉瘤和食管静脉曲张有破裂危险的患者。 6.近期发热、咯血和哮喘发作患者。 【准备】 1.掌握病情，了解主要病症和病理生理状态，包括重要脏器功能、血容量、电解质和血气状况。 2.备好呼吸、血压、心电、氧饱和度监测和急救的器材和药品。 3.操作前0.5h 肌注阿托品0.5mg，精神紧张或不能配合者肌注安定10mg；吸高浓度氧5min。 4.常规在气管镜气道检查后于活检刷检前做BAL。局部麻醉剂为2%利多卡因。 【方法】
支气管镜肺泡灌洗术
支气管镜肺泡灌洗术
支气管肺泡灌洗术 【适应证】 20 世纪60 年代后期随着可曲性纤维支气管镜(简 称纤支镜)的开发与应用，逐渐兴起支气管肺泡灌洗(bronchoalvoelar lavage，BAL)技术。中华医学会呼吸病学分会根据我国具体情况分别于1993年和2002年也制定出有关支气管肺泡灌洗液(bronchoalvoelar lavage fluid，BALF)细胞学检查技术规范(草案)，使此项检查技术在国内得到推广应用。由于BAL 能直接获取肺内炎症免疫效应细胞，是探讨肺局部免疫病理过程的一种相对比较安全有用的检查方法。因此，BAL已成为某些肺疾病，特别是弥漫性间质性肺疾病以及免疫受损患者肺部感染等疾病的辅助临床诊断、病变活动性和预后判定的重要检测手段。 适应证如下： 1.凡能接受气管镜检查患者均能承受支气管肺泡灌洗的检查。 2.弥漫性间质性肺疾病诊断：特发性肺纤维化、结节病、外源性过敏性肺泡炎、结缔组织病伴肺纤维化、组织细胞增生症X 以及嗜酸性粒细胞肺浸润等。 3.肺部肿瘤和免疫受损患者肺部感染诊断，如卡氏
肺孢子虫肺炎、细支气管肺泡癌。 4.用于肺泡蛋白沉积症的诊断与治疗，行局部和全肺灌洗。 5.用于肺部感染细菌学检测及肺化脓症冲冼引流治疗。 【禁忌证】 1.凡气管镜的禁忌证均为支气管肺泡灌洗的禁忌证。 2.精神高度紧张不能配合完成气管镜检查患者。 3.严重通气和换气功能障碍患者，PaO2＜ 6.67kPa(50mmHg)或吸氧状态下PaO2＜ 9.33kPa(70mmHg)。 4.冠心病、高血压病、心律失常、频发心绞痛患者。 5.主动脉瘤和食管静脉曲张有破裂危险的患者。 6.近期发热、咯血和哮喘发作患者。 【准备】 1.掌握病情，了解主要病症和病理生理状态，包括重要脏器功能、血容量、电解质和血气状况。 2.备好呼吸、血压、心电、氧饱和度监测和急救的器材和药品。 3.操作前0.5h 肌注阿托品0.5mg，精神紧张或不能配合者肌注安定10mg；吸高浓度氧5min。
肺部感染性疾病支气管肺泡灌洗病原体检测中国专家共识(2017年版)
肺部感染性疾病支气管肺泡灌洗病原体检测中国专家共识 (2017年版) 目前国内外应用支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)检测病原体的具体操作及处理流程不同。为了更充分利用BALF的检测价值、增加BALF 病原体的检出率、提高肺部感染性疾病的诊治成功率，需要进一步规范BAL的操作流程及标本处理，以便更好地指导临床。为此，中华医学会呼吸病学分会感染学组组织专家撰写了"肺部感染性疾病支气管肺泡灌洗病原体检测中国专家共识"。 提示 本共识涵盖BAL的定义、适应证、禁忌证、操作流程、标本送检、并发症、临床意义、常见问题说明、BALF标本病原体实验室检测等几个方面，本文仅就常见问题说明展开，感兴趣读者可订阅中华结核和呼吸杂志2017年第八期。 常见问题说明 1灌洗部位的选择： 灌可参考近期的胸部CT，遵循"灌洗病变叶段"的原则，特别是出现新的或进展性的浸润性病变的叶段；影像学提示双肺弥漫性病变时，推荐选择右肺中叶或左肺舌段，这2个部位的灌洗操作便利且回吸收量较多(与下叶比较可增加约20%)。对于肺外周病变，有条件的单位可考虑采用径向超声支气管镜技术进行更准确的定位。 2灌洗液量的选择： 灌灌洗量的多少可影响标本检测的结果，包括细胞比例、蛋白含量及GM水平等。具体灌洗多少生理盐水是合适的，不同文献甚至指南的推荐均有差异。Rennard等发现，灌入20 ml液体后获得的回吸收标本内含有更多的上皮细胞和铁蛋白，表明该标本更可能是BALF。研究结果表明，在灌入60或120 ml液体时所回吸收标本的检测结果差异明显，至少灌入120 ml生理盐水时所回吸收的标本结果才相对稳定。上述文献主要集中于健康成人及间质性肺疾病患者的观察，对于肺部感染性疾病患者，基于查找病原体的目的，又要防止在灌洗过程中感染的扩散，本共识认为采用60～120 ml的灌洗剂量，且分次灌洗，是比较好的方法。 3吸引负压的选择： 吸过大的负压会引起支气管壁塌陷或黏膜损伤，从而影响灌洗液的回收量和质量。但负压过小时，回吸收量亦会受到影响。美国胸科协会发布的指南中推荐采用100 mmHg的负压。在临床实际工作中，可以参考但不局限于这一数值，选择合适的负压(如－100～－150 mmHg)，尽可能多的收集标本。 4BALF的预处理： B对获取的BALF，特别是含有黏液成分时，是否需要无菌纱布过滤？本共识认为不需要常规过滤，因为在过滤过程中，细胞会黏附于纱布，损失部分细胞及其他成分，如肺孢子菌(Pneumocystis jirovecii)更多的存在于黏液成分中。过滤过
支气管肺泡灌洗术(专业知识值得参考借鉴)
本文极具参考价值，如若有用请打赏支持我们！不胜感激！ 支气管肺泡灌洗术(专业知识值得参考借鉴) 一概述支气管肺泡灌洗术（bronohoalveolarlavage，BAL）是在纤维支气管镜检查基础上发展起来的一项新技术。是利用支气管镜向支气管肺泡内注人生理盐水并随即吸出，收集肺泡表面有效液体，检查其细胞成分和可溶性物质的一种方法。有全麻下经卡伦双腔管行一侧全肺灌洗、经纤维支气管镜灌洗两种方法。临床用于诊断多种肺部疾病，如肺泡炎、肺纤维化、石棉肺、肺癌、肺囊虫病、肺泡蛋白沉积症等的临床诊断、鉴别诊断以及研究肺部疾病的病因、发病机制、评价疗效和预后等。 二术前准备1.向患者和家属说明肺泡灌洗的目的、方法和要求，说明支气管肺泡灌洗术是目前治疗PAP的主要方法，并强调方法的有效性和安全性，以及患者在手术过程中应如何配合等。 2.完善术前相关检查：血常规、出凝血时间、血气分析、电解质、肺功能、心电图、X线胸片和CT 等检查结果。 3.指导患者进行有效地咳嗽和呼吸功能锻炼，以利于灌洗后肺功能的恢复和肺部分泌物的排除。 4.术前4小时禁饮禁食。 三适应证由于本法无创伤，操作安全，且可多次重复，故在国内许多医院已应用于临床。 1.肺间质疾病的诊断、鉴别诊断及预后评价。 2.肺部感染的病原学检查。 3.肺癌和其他肺部肿瘤的细胞学诊断。 4.其他肺部疾病的诊断，如肺泡蛋白沉积症、肺含铁血黄素沉着症、弥漫性肺泡出血、石棉肺等。 5.清除顽固性肺部感染患者气道内潴留的痰液。 6.支气管哮喘持续状态、支气管扩张时痰液多、慢性支气管炎和间质性肺炎等的治疗。 四禁忌证1.心力衰竭、严重心律失常、新近发生的心肌梗死，重度肺功能不全及急性呼吸衰竭等； 2.新近大咯血，排除弥漫性肺泡出血的患者； 3.活动性肺结核未经治疗者； 4.有明显电解质异常的患者。 五注意事项1.操作时，应当避免创伤和引起患者咳嗽，否则可导致黏液和血液的明显污染。 2.整个灌洗过程中，支气管镜需一直保持适当位置，以防灌洗液溢出及大气道分泌物污染。
支气管肺泡灌洗液检查教程文件
支气管肺泡灌洗液检 查
支气管肺泡灌洗液检查 痰液检查虽可对呼吸道疾病的诊断提供帮助，但不够灵敏与特异且对疾病定位帮助不大。支气管肺泡灌洗术（bronchoalceolar lavage,BAL）中在纤维支气管镜基础上发展起来的一项新技术。BAL是应用纤维支气管镜进行支气管肺泡灌洗，采取肺泡表面衬液进行炎症与免疫细胞及可溶性物质检查的方法。与支气管冲洗少量液体注入支气管信灌注大量的液体进行支气管肺泡灌洗不同，利用支气管肺泡灌洗液进行细胞学、微生物学、寄生虫学和免疫学等方面的各项检验，对一些下呼吸道疾病和诊断、病情观察和预后判断开辟了一条新途径。 支气管肺泡灌洗术分全肺灌洗和肺段亚肺段灌洗。前者多用于治疗，后者多用于采集检验标本。 一、标本采集和处理 通常于局部麻醉后将纤维支气管镜插入右肺中叶或左肺舌段的支气管，将其项端契入支气管分支开口，经气管活检孔缓缓少入37摄氏度灭菌生理盐水，每次30-50毫升，总量100-250毫升，不应超过300毫升。每次注液后以-13.3~-19.95kpa负压吸出，要防止负压过大，过猛。分别收集于用硅油处理进的容器中，容器周围宜用冰块包围，并及时送检。记录回收液量，至少应回收30-40%以上，BALF方能进行分析。分别注入的液体每次回收后混合一起进行试验。第一份回收的标本往往混支气管内成分，为防止其干扰，也可将第一份标本与其它标本分开检查。首先用单层纱布过滤以除去粘液，将滤液离心后分离上清液供生化检查和免疫学测定，沉淀物供细胞检查。微生物学检查的标本须严格遵守无菌操作；合适的BALF应要求：①达到规定的回收比例；②不混有血液，红细胞数小于10%；③不应混有多量的上皮细胞（一般小于3%）。 二、细胞学检查 1．有核细胞计数和分类计数：计数除上皮细胞及红细胞以外的所有细胞，经每毫升回收液的细胞总数表示。细胞分类可用沉淀物制定涂片或用细胞离心器进行，正常非吸烟者BALF细胞数见表13-1，正常人的BALF含有核细胞为（5-10）×106/L。 2．淋巴细胞亚群分析：BALF中淋巴细胞增多，可用单克隆抗体进行淋巴细胞亚群分析。例如CD3、CD4、CD8、HLA-DR等以有助于发病机制的研究。正常人非吸烟者BALF中淋巴细胞表面抗原表型见表13-2。 3．癌细胞：支气管肺癌患者的BALF沉淀物检出癌细胞，有助于肺癌诊断。 注：Mac巨噬细胞；Lym淋巴细胞；Nuet 中性粒细胞；Eos 噬酸性细胞