流式细胞仪临床应用手册

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流式细胞仪临床应用手册

流式细胞仪临床应用手册

案场各岗位服务流程

销售大厅服务岗:

1、销售大厅服务岗岗位职责:

1)为来访客户提供全程的休息区域及饮品;

2)保持销售区域台面整洁;

3)及时补足销售大厅物资,如糖果或杂志等;

4)收集客户意见、建议及现场问题点;

2、销售大厅服务岗工作及服务流程

阶段工作及服务流程

班前阶段1)自检仪容仪表以饱满的精神面貌进入工作区域

2)检查使用工具及销售大厅物资情况,异常情况及时登记并报告上级。

班中工作程序服务

流程

行为

规范

迎接

指引

递阅

资料

上饮品

(糕点)

添加茶水工作1)眼神关注客人,当客人距3米距离侯客迎询问客户送客户

注意事项

15度鞠躬微笑问候:“您好!欢迎光临!”2)在客人前方1-2米距离领位,指引请客人向休息区,在客人入座后问客人对座位是否满意:“您好!请问坐这儿可以吗?”得到同意后为客人拉椅入座“好的,请入座!”

3)若客人无置业顾问陪同,可询问:请问您有专属的置业顾问吗?,为客人取阅项目资料,并礼貌的告知请客人稍等,置业顾问会很快过来介绍,同时请置业顾问关注该客人;

4)问候的起始语应为“先生-小姐-女士早上好,这里是XX销售中心,这边请”5)问候时间段为8:30-11:30 早上好11:30-14:30 中午好 14:30-18:00下午好

6)关注客人物品,如物品较多,则主动询问是否需要帮助(如拾到物品须两名人员在场方能打开,提示客人注意贵重物品);

7)在满座位的情况下,须先向客人致

待;

阶段工作及服务流程

班中工作程序工作

要求

注意

事项

饮料(糕点服务)

1)在所有饮料(糕点)服务中必须使用

托盘;

2)所有饮料服务均已“对不起,打扰一

下,请问您需要什么饮品”为起始;

3)服务方向:从客人的右面服务;

4)当客人的饮料杯中只剩三分之一时,

必须询问客人是否需要再添一杯,在二

次服务中特别注意瓶口绝对不可以与

客人使用的杯子接触;

5)在客人再次需要饮料时必须更换杯

子;

下班程

序1)检查使用的工具及销售案场物资情况,异常情况及时记录并报告上级领导;

2)填写物资领用申请表并整理客户意见;3)参加班后总结会;

4)积极配合销售人员的接待工作,如果下班

1.3.3.3吧台服务岗

1.3.3.3.1吧台服务岗岗位职责

1)为来访的客人提供全程的休息及饮品服务;

2)保持吧台区域的整洁;

3)饮品使用的器皿必须消毒;

4)及时补充吧台物资;

5)收集客户意见、建议及问题点;

1.3.3.3.2吧台服务岗工作及流程

阶段工作及服务流程

班前阶段1)自检仪容仪表以饱满的精神面貌进入工作区域

2)检查使用工具及销售大厅物资情况,异常情况及时登记并报告上级。

班中工作程序服务

流程

行为

规范

问询需求按需求提

供饮品客户离开后清理桌面

服务准迎客:保得知需客户

班中工作程序工作

要求

注意

事项

1)在饮品制作完毕后,如果有其他客户仍

在等到则又销售大厅服务岗呈送;

2)所有承装饮品的器皿必须干净整洁;

下班程序5)检查使用的工具及销售案场物资情况,异常情况及时记录并报告上级领导;

6)填写物资领用申请表并整理客户意见;7)参加班后总结会;

8)积极配合销售人员的接待工作,如果下班时间已经到,必须待客人离开后下班;

1.3.4展示区服务岗岗位职责

1.3.4.1车场服务岗

1.3.4.1.1车场服务岗岗位职责

1)维护停车区的正常停车秩序;

2)引导客户车辆停放,同时车辆停放有序;

3)当车辆挺稳时,上前开车门并问好;同时提醒客户锁好车门;4)视情况主动为客户提供服务;

5)待车辆停放完好后,仔细检查车身情况请客户签字确认;

1.3.4.1.2

阶段工作及服务流程

班前阶1)自检仪容仪表

好,如出现异常现象立即报告或报修

3)检查停车场车位是否充足,如有异常及时上报上级领导

班中工作程序服务

流程

行为

规范

1.敬礼

2.指引停车

3.迎客问好

4.目送

阶段工作及服务流程

班中工作程序工作

要求

注意

事项

1)岗位应表现良好的职业形象时刻注

意自身的表现,用BI规范严格要求自

2)安全员向客户敬礼,开车门,检查车

辆情况并登记,用对讲系统告知销售大

厅迎宾,待客人准备离开目送客人离

开;

引导敬为问指引销售

检查车

为引敬

下班程序1)检查使用的工具情况,异常情况及时记录并报告上级领导;

2)参加班后总结会;

3)统计访客量;

4)积极配合销售人员的接待工作,如果下班时间已经到,必须待客人离开后下班;

1.3.4.2展示区礼宾岗

1.3.4.

2.1展示区礼宾岗岗位职责

1)对过往的客户行标准的军礼,目视;

2)与下一交接岗保持信息联系,及时将信息告知下一岗位,让其做好接待工作;3)热情礼貌的回答客户的提问,并做正确的指引;

4)注视岗位周边情况,发现异常及时上报上级领导;

1.3.4.

2.2展示区礼宾岗工作及服务流程

阶段工作及服务流程

班前阶段1)自检仪容仪表

2)检查周边及案场区设备、消防器材是否良好,如出现异常现象立即报告或报修

班中工作程序服务

流程

敬礼问指引样板敬礼目送

行为

规范

1.迎接客户

2.指引客户

3.为客户提供帮

助4.目送客户

工作要求注意事项1)礼宾岗必须掌握样板房户型、面积、朝向、在售金额、物业服务管理费用等客户比较关注的话题;

2)礼宾岗上班后必须检查样板房的整体情况,如果发现问题必须及时上报并协助销售进行处理;

3)视线范围内见有客户参观时,远处目视,待客户行进1.5米的距离时,敬军礼并主动向客户微笑问好,“欢迎您来参观样板房,这边请,手势指引样板房方向”;

阶段工作及服务流程

班中工作程序工作

要求

注意

4)参观期间,礼宾岗需注意背包或穿大

衣等可以重点人员进行关注,避免样板

房的物品丢失,当巡检时发现有物品丢

员进行询问,根据销售部的意见决定是否报警;

5)样板房开放时间,在未经销售、项目部允许而进行拍照、摄像等行为劝阻,禁止任何人员挪动展示物品;

6)样板房开放时礼宾岗要关注老人、小孩、孕妇及行动不便的人群,对在参观过程中出现的意外及物品损坏必须及时上报上级领导,根据销售部的意见进行处理并做好登记;

7)样板房开放期间礼宾岗要礼貌准确的回答客户的问题,对不能回答的问题需引导给销售人员由其进行解答,严禁用含糊不清或拒绝来回答;

8)留意客户是否离开样板房,通知电瓶车司机来接客户;

9)当客户参观完毕离开样板房,待客户1.5米距离时微笑敬礼目送客户,手势指向出门的方向,若电瓶车未到,向客户致歉并说明电瓶车马上就到;

10)每天下班要对样板房物品进行检查

级领导呈报,根据销售部意见进行处理并做好记录;

11)礼宾岗下班后要关闭样板房的水源、电源及监控系统并与晚班人员做好交接;

12)对于特殊天气,样板房礼宾岗要检查周边环境,以防不则;

下班程序1)检查使用的工具情况,异常情况及时记录并报告上级领导;

2)参加班后总结会;

3)统计访客量;

4)积极配合销售人员的接待工作,如果下班时间已经到,必须待客人离开后下班;

1.3.4.3电瓶车服务岗

1.3.4.3.1电瓶车服务岗岗位职责

1)严格按照规定的路线及线路行驶,将客人送到指定地点;

2)正确执行驾驶操作流程,确保车行安全;

3)了解开发建设项目的基本情况并使用统一说辞,在允许的情况下礼貌回答客户问题;4)车辆停放时及时对车辆进行清洁,确保车辆干净;

5)负责车辆的检查;

6)对车辆实施责任化管理,未经允许任何人不得驾驶;

8)做好电瓶车的交接工作

1.3.4.3.2电瓶车服务岗工作及服务流程

阶段工作及服务流程

班前阶段1)自检仪容仪表

2)检查电瓶车运行状态,如发现问题立即上报上级领导进行维修并做好记录

班中工作程序服务

流程

行为

规范

1)迎接客户上车2)转弯、减速、避让

提示客户3)下车提示客户小心

工作

要求

注意

事项

1)电瓶车驾驶员载客至样板房过程中

禁止鸣笛、超速、遇车避让;

2)客户上车时应主动问好,欢迎您来到

XX项目,车辆行驶时应提示客户坐稳扶

好,到达目的地时,驾驶员提示客户样

板房已经到达请小心下车,客户离开电

问指引车辆起车辆行驶下

请慢走;

3)带客户下车时应检查车上是否有遗留物品,并提示客户随身带好物品;4)电瓶车必须严格按照规定路线行驶;5)做好行车记录;

下班程序1)待客户全部离开后将电瓶车开至指定位置,并将车辆进行清洁及充电;

2)整理客户意见,参加班后会;

3)积极配合销售人员的接待工作,如果下班时间已经到,必须待客人离开后下班;

1.3.5样板房服务岗

1.3.5.1样板房讲解岗岗位标准

1.3.5.1.1样板房讲解岗岗位职责

1)负责来访样板房客户的全程接待与讲解;

2)协助、配合置业顾问介绍;

3)客户离开后,样板房零星保洁的处理;

4)收集客户意见、建议及现场问题点的填写(样板房日常庶务)反馈单,下班后递交案场负责人;

1.3.5.1.2样板房讲解刚工作及服务流程

阶段工作及服务流程

段作;

2)检查样板房设备设施运行情况,如有异常

及时上报并做好登记;

3)检查样板房保洁情况及空调开启情况;

设备设施班中工作程序服务

流程

行为

规范

1)站立微笑自然2)递送鞋套3)热情大

方、细致讲解4)温馨道别保持整洁

工作

要求

注意

事项

1)每日对接样板房设备清单,检查空调

开启及保洁状态;

2)站在样板房或电梯口,笑意盈盈接待

客户;

3)顾客出现时,身体成30度角鞠躬“欢

迎光顾XX样板房”

4)引领入座并双手递上鞋套,双手递上

时不宜过高,与客人坐下时的膝盖同

高;

迎客,引导客协助置向客户

免重复;

6)专注你接待的客户,勿去应其他客

户,以示尊重,对其他客户微笑点头以

示回应;

7)若无销售人员带领的客户,要主动介

绍房子的户型及基本信息,谈到房子的

价位时请客户直接与销售人员联系不

要直接做回答;

8)参加样板房时,未经销售或其他人员

允许谢绝拍照及录像,谢绝动用样板房

物品及附属设施,对客遗失物品做好登

记并上报上级领导;

9)时刻注意进入样板房的客户群体,特

别是小孩,要处处表达殷勤的关心,以

示待客之道;

10)时刻留意客户的谈话,记下客户对样

板房的关注点和相关信息;

11)送别,引领客户入座示意脱下鞋套双

手承接,客户起身离去时,鞠躬说感谢

您参观样板房,并目送客户离开;

下班程1)检查样板房设备设施是否处于良好的运营

2)需对接样板房物品清单;

3)整理客户意见,参加班后会;

4)积极配合销售人员的接待工作,如果下班

时间已经到,必须待客人离开后下班;

1.3.5.2样板房服务岗岗位标准(参见销售大厅服务岗岗位标准)

1.3.6案场服务岗管理要求

培训及例会岗前培训BI规范及楼盘基本情况

在岗培训每

月至少一次

1)公司企业文化2)客户服务技

巧3)客户心理培训4)突发事件

处理5)营销知识培训6)职业安

全7)7S现场管理

例会

日会:每日参加案场管理岗组织

的总结会并及时接收案场信息

周会:每周参加管理岗组织的服

务类业务点评会

客户信息收集反馈

每日汇总客户信息反馈到案场管理岗

样板房客户车场岗客户

监督考

核1)考核频次:至少每月一次;

2)考核人:案场管理岗;

3)每月汇总客户信息反馈表,依据上级检查及客户满意度调查情况进行绩效加减;

4)由案场负责人直接考核;

5)连续两个月考核不合格者直接辞退

1.4案场基础作业岗

1.4.1案场基础作业岗任职资格

岗位类

岗位名称任职资格基

础作业岗安

基本要求:

1)男性:身高1.80米

以上;

2)年龄:(18-30)岁;

3)普通话标准;

4)学历:高中以上;

技能要求:

1)熟悉项

目的基本

情况

2)具备过

硬的军事

素质

素质要求:

1)性格:开朗、主动服

务意识强有亲和力;

2)从业经历:具有同岗

位经验半年以上

案场保洁岗及绿化养护岗基本要求:

1)男女不限;

2)年龄30岁以下

3)学历:初中以上

技能要求“

案场保洁岗:

熟知药剂使

用及工具使

案场绿化养

护岗:熟知树

木习性及绿

化养护知识素质要求:具有亲和力,

对保洁及绿化工作有认

同感

案场技术保障岗基本要求:男性五官端

学历:中专(机电一体化)

技能要求:

1)具有水

或电及空

调证书;

2)熟悉各

岗位操作

工具的使

用;

3)同岗工

作一年以

素质要求:

踏实肯干,具有亲和力及

主动服务意识

通用规范

参照

标准 君正物业员工BI 规范手册

1.4.3安全岗岗位标准 1.4.3.1安全岗岗位职责

1)负责销售案场管理服务区域的安全巡视工作,维持正常秩序; 2)监督工作区域内各岗位工作状态及现场情况及时反馈信息;

3)发现和制止各种违规和违章行为,对可疑人员要礼貌的盘问和跟踪察看; 4)谢绝和制止未经许可的各类拍照、摆放广告行为; 1.4.3.2安全岗作业要求

1)按照巡视路线巡视签到检查重点部位;

2)遇见客户要站立、微笑、敬礼,礼貌的回答客户的提问并正确引导; 3)人过地净,协助案场保洁人员做好案场的环境维护; 4)在每一巡视期内检查设备设施运行状态并做好记录; 5)协助做好参观人员的车辆引导、指引和执勤工作;

1.4.4保洁岗岗位标准

1.4.4.1保洁岗岗位职责

1)负责案场办公区域、样板房及饰品的清洁工作;

2)负责案场外围的清洁工作;

3)负责案场垃圾的处理;

4)对案场杂志等资料及时归位;

1.4.4.2保洁岗作业要求

1)每天提前半小时上岗,对案场玻璃、地面等进行全方位清洁;2)卫生间每十分钟进行一次巡视性清洁;

3)阴雨天提前关闭门窗;

4)掌握清洁器具的使用;

5)熟知清洁药剂的配比及使用;

1.4.5绿化岗岗位标准

1.4.5.1绿化岗岗位职责

1)负责管理区域内一切绿化的养护;

2)确保绿化的正常存活率;

3)对绿植进行修剪及消杀;

1.4.6案场技术岗岗位标准

1.4.6.1案场技术岗岗位职责

1)全面负责案场区域内设备设施的维护、维修及保养;

2)协助管理岗完成重大接待工作案场的布置;

1.4.6.2案场技术岗岗位要求

1)每日案场开放前对辖区设备设施进行检查,保障现场零事故;2)每日班后对设备设施进行检查保障正常运行并做好相关记录;3)报修后5分钟赶到现场;

4)接到异常天气信息,对案场设备进行安全隐患排除;

1.4.7案场基础作业岗岗位要求

培训及例会岗前培训BI规范及楼盘基本情况

在岗培训每

月至少一次

1)公司企业文化2)客户服务技

巧3)客户心理培训4)突发事件

处理5)营销知识培训6)职业安

全7)7S现场管理

例会

日会:每日参加案场管理岗组织

的总结会并及时接收案场信息

周会:每周参加管理岗组织的服

务类业务点评会

客户信息收集反馈

每日汇总客户信息反馈到案场管理岗

监督考

核1)考核频次:至少每月一次;2)考核人:案场管理岗;

样板房客户车场岗客户

一、流式细胞仪技术参数

一、流式细胞仪技术参数 1 工作条件: 1.1 电源要求: 220V (±10%)、50-60HZ 1.2 环境温度:16-30℃ 1.3 湿度:20-80% 2 用途:免疫分析、淋巴细胞亚群分析;细胞周期分析、凋亡分析;感染分析、肿瘤细胞分析;多重细胞因子分析等。 3 技术规格和参数 3.1 激发系统: 3.1.1 激发光源:405nm紫色固态激光器、488nm蓝色固态激光器和640nm红色固态激光器,固定光路,空间立体激发。 3.1.2 激光塑形:自动的多棱镜塑形系统,光斑大小:9x65um椭圆形光斑 3.1.3 流动室规格:180x430μm 3.2 荧光收集和检测 3.2.1 光胶耦合物镜,数值孔径1.2,大面积收集发射荧光。 3.2.2 每一激发激光对应一个独立检测单元,光胶耦合物镜自动分开汇集每一激光激发的发射荧光进入相对应检测单元,避免光谱交叉。 *3.2.3 配备1个独立八角型全反射检测系统、2个独立三角型全反射检测系统 3.2.4 光学检测系统内部采用全反射检测光路系统,荧光信号到达检测器只经过一个长通滤光片,信号能量损失最小。 3.2.5 检测系统依次优先检测易衰减的长波长信号,保证弱信号灵敏度。 *3.2.6 共计12个信号检测器,包括10个光电倍增和和2个散射光探测器。 3.2.7 荧光通道组合:405nm紫色激光器对应3个检测通道,滤光片包

括450/50nm、 525/50nm、 605/40 nm;488nm蓝色激光器对应4个检测通道滤光片包括530/30nm、 575/25nm、695/40nm、780/60 nm; 640nm 红色激光器对应3个检测通道,检测滤光片包括:670/30nm、712/21nm、780/60 nm。通道之间最低光谱交叉,滤光片带有智能芯片,直接插拔,自动识别。 *3.2.8 荧光检测灵敏: FITC<100MESF,PE<50MESF(提供英文原版参数);CFDA检测结果FITC<5MESF,PE<5MESF(提供检测报告)。 *3.3 样本分析速率:>32,000个细胞/秒(提供英文原版参数)。 3.4 变异系数:全峰宽CV<3% *3.5 采用正压上样系统,非注射泵或蠕动泵。样本残留量<0.2%。 3.6 最小样本量:≤30ul 3.7 检测颗粒大小:0.5-50μm 3.8 数字信号处理:18bit动态范围,符合IEEE 32bit浮点分辨率。3.9 脉冲处理系统:能同时分析脉冲信号峰值、脉冲积分(面积)及脉冲宽度,可区分多倍体细胞、粘连细胞。 3.10 可溶性蛋白分析:具备多重可溶性蛋白分析功能,包括:细胞因子、炎症因子、趋化因子等;可达单管数十重分析,包括:多重定量及动力学分析。 *3.11 液流车:独立液流车,避免振动影响仪器主机光路和液流;自动控制所有压力、鞘液、清洗液等,大体积液体储备保证长时间、稳定工作;鞘液桶20L,废液桶10L,清洗液桶5L,关机液桶5L。开关机自动清洗液路,正常状态鞘液消耗<1.10 L/h,待机状态鞘液消耗<1 mL/h。 3.12 配置淋巴细胞亚群自动分析软件,无需手动设置,实现淋巴细胞亚群分型的全自动化。 3.13 主软件:Windows系统,原版专业化流式数据收集及处理软件, 可按用户需求设置条件进行数据分析和报告。 3.14 临床自动软件:标配临床自动软件,拥有具CFDA认证的4色及6

【基础科学】BD FACSCALIBUR流式细胞仪操作手册(共27页)

BD FACSCalibur流式细胞仪 FACS101 Handbook 本课程介绍「表面抗原流式分析」有关之基础工作原理。如希望进一步了解流式细胞技术应用,请至本公司网站订阅FACSinformation电子报。 如需要本课程手册,欢迎至本公司网站下载。 如需要免疫荧光染色方法,请至本公司网站下载。 一、BD FACSCalibur基本结构 1.1仪器本体: 1. 电源开关:在BD FACSCalibur仪器右侧下方,先启动仪器本体,再打开计算机。 2. 光学系统:BD FACSCalibur 基本配有一支波长488 nm 的氩离子雷射 以BD FACSCalibur 基本型为例 ?FSC Diode 只收488 nm波长散射光 ?SSC PMT 只收488 nm波长散射光 ?FL1 PMT 荧光光谱峰值落在绿色范围(波长515-545 nm) ?FL2 PMT 荧光光谱峰值落在橙红色范围(波长564-606 nm) ?FL3 PMT 荧光光谱峰值落在深红色范围(波长 >650 nm)

3. 仪器面板: 仪器前方面板的右下方有三个流速控制键、及三个功能控制键。 流速控制: LO:样品流速:12 μl /min MED:样品流速:35 μl /min HI: 样品流速:60 μl /min 功能控制: ?RUN:此时上样管加压,使细胞悬液从进样针进入流动室。(正常显示绿色;黄色时表示仪器不正常,请检查是否失压。) ?STANDBY:无样品或暖机时之正常位置,此时鞘液停止流动,雷射功率自动降低。 ?PRIME:去除流动室中的气泡,流动室施以反向压力,将液流从流动室冲入样品管,持续一定时间后,以鞘液回注满流动室。PRIME 结束,仪器 恢复STANDBY状态。 4. 储液箱抽屉: 在主机左下方之储液箱抽屉。可向前拉开,内含鞘流液筒、废液筒、鞘液过滤器Sheath Filter,及空气滤网 Air filter。请注意气路减压阀VENT TOGGLE之位置。

BD流式细胞仪原理与典型故障分析

Instrumentation and Equipments 仪器与设备, 2018, 6(3), 95-98 Published Online September 2018 in Hans. https://www.360docs.net/doc/485345139.html,/journal/iae https://https://www.360docs.net/doc/485345139.html,/10.12677/iae.2018.63015 BD Flow Cytometer Principle and Typical Malfunction Analysis Xiusheng Qiu*, Caihui Zeng, Liting Zhang The Third Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University, Guangzhou Guangdong Received: Aug. 23rd, 2018; accepted: Sep. 11th, 2018; published: Sep. 18th, 2018 Abstract Flow cytometry is a device for automatic cell analysis and cell separation. In this paper, the prin-ciple of BD flow cytometry is introduced, and the common faults of flow cytometry are described. After analysis, the troubleshooting process is described in detail. Flow cytometry instrument equipment failure can be divided into liquid road faults, hardware failure, software failure, and all three cases. Only by accumulating in use can we fast judge the fault, and quickly solve the problem. Keywords Flow Cytometer, Principle, Malfunction Analysis BD流式细胞仪原理与典型故障分析 丘秀生*,曾彩辉,张丽婷 中山大学附属第三医院,广东广州 收稿日期:2018年8月23日;录用日期:2018年9月11日;发布日期:2018年9月18日 摘要 流式细胞仪是对细胞进行自动分析和分选的装置,已经渐渐成为生物科学重要的分析仪器。本文介绍了BD流式细胞仪的原理,并对流式细胞仪常见的典型故障做了阐述,进行分析后,并对故障的排除过程进行了详细的阐述。流式细胞仪维中设备故障可分为液路故障、硬件故障、软件故障和三者兼具的情况,只有在使用过程中不断积累,才能快速判断故障,并迅速的排除。 *通讯作者。

流式细胞仪上机培训手册(仅供参照)

流式细胞仪上机操作培训手册 一、样本处理 以PBMC表面抗原的流式检测步骤为例 1)取样。取新鲜提取或冻存后复苏的PBMC; 2)编号。根据实验设计,标记好流式管,如每份PBMC设两管: a)1号管:相应同型对照; b)2号管:CD3,CD4,CD8,CD56四标管; 3)加样。用移液器取100ul细胞/管(约1×106个细胞/管),分别加到已经标记 好的流式管底部; 4)洗涤。加入1ml PBS/管,涡旋1600rpm/min,离心6min; 5)染色。弃上清,加入100 μl PBS/管涡旋混匀细胞,并根据实验设计,向各流 式管中加入相应的荧光素标记抗体,混匀,室温避光孵育30min(操作尽量保持在避光条件下进行。) 6)洗涤。加入1ml PBS/管,涡旋1600rpm/min,离心6min; 7)重悬。弃上清,加入0.5ml PBS/管,混匀,上机检测(可选择BD FACSCanto II或BD Accuri C6)。 (注:若不能及时上机,应加入4%多聚甲醛固定,并于4℃避光保存。)8)试验结果分析。(注:实验过程中如果进行多色标记,需要调节荧光补偿)。参考值:

二、上机检测 BD FACSCanto II简要操作流程启动流式细胞仪 1 打开流式细胞仪电源 2 启动计算机,打开软件登录 3 确保软件连接到流式细胞仪 必要时,点击Cytometer > connect 检查液体水平 1 启动流式细胞仪后,检查液体水平 低液面水平或者废液桶满都用红色指示。

2 如果液流车未自动开启,选择Cytometer > Fluidics Startup。 3 当液流启动完成后,点击OK关闭对话框。 检查气泡 1 在检查完液体水平后,开启流动室门,检查流动室中是否有气泡。

流式细胞仪的原理和用途

流式细胞仪(FlowCytometry) 1 流式细胞仪得概念及其发展历史 1。1 流式细胞仪得基本概念流式细胞仪(flow cytonletry,FCM)就是对高速直线流动得细胞或生物微粒进行快速定量测定与分析得仪器,主要包括样品得液流技术、细胞得计数与分选技术,计算机对数据得采集与分析技术等。流式细胞仪以流式细胞术为理论基础,就是流体力学、激光技术、电子工程学、分子免疫学、细胞荧光化学与计算机等学科知识综合运用得结晶。流式细胞术就是一种自动分析与分选细胞或亚细胞得技术。其特点就是:测量速度快、被测群体大、可进行多参数测量,即对同一个细胞做有关物理、生物化学特性得多参数测量,且在统计学上有效。 1。2 流式细胞仪得发展简史最早得流式细胞仪雏形诞生于1934年,Moldavan提出使悬浮得单个血红细胞流过玻璃毛细管,在亮视野下用显微镜进行计数,并用光电记录装置测量得设想。1953年Crosland-Taylor根据牛顿流体在圆形管中流动规律设计了流动室。其后又经过Coulter、Parker & Horst、Kamentsky、Gohde、Fulwyler、Herzenberg等人得不断改进,设计了光电检测设备与细胞分选装置、完成了计算机与流式细胞仪得物理连接及多参数数据得记录与分析、开创了细胞得免疫荧光染色及检测技术、推广流式细胞仪在临床上得应用。近20年来,随着流式细胞仪及其检测技术得日臻完善,人们越来越致力于样品制备、细胞标记、软件开发等方面得工作,以扩大FCM得应用领域与使用效果。 宋平根得《流式细胞术得原理与应用》就是迄今为止对流式细胞仪及其技术阐述得最为详尽与透彻得中文著作.这本书非常详细地介绍了流式细胞术得历史、结构、原理、技术指标等,例举了其在医学与生物工程中得应用,非常适合从事此方面专业研究得人。由于这本书就是13年前出版得,所以基本上没有涉及植物流式细胞仪检测技术。此外对于只需要对流式细胞仪有些基本认识得人士来说,这本书太复杂太深奥。谢小梅主要介绍了流式细胞仪在生物工程中得应用。杨蕊概括了流式细胞仪得工作原理,简单提及了流式细胞仪得应用。本文在分析这三篇论著或文章得优缺点后,用比较通俗得语言介绍了掌握流式细胞仪检测技术必须了解得一些原理,并对目前市场上得主流型号进行了客观得性能概括。 2 流式细胞仪得工作原理与技术指标 2。1 流式细胞仪工作原理除电源外,流式细胞仪主要由四部分组成:流动室与液流系统:激光源与光学系统;光电管与检测系统;计算机与分析系统,其中流动室就是仪器得核心部件。这四大部件共同完成了信号得产生、转换与传输得任务. 流动室与液流系统

BD FACSCalibur流式细胞仪操作手册

B D F A C S C a l i b u r流式细胞仪 FACS101Handbook 本课程介绍「表面抗原流式分析」有关之基础工作原理。如希望进一步了解流式细胞技术应用,请至本公司网站订阅FACSinformation电子报。 如需要本课程手册,欢迎至本公司网站下载。 如需要免疫荧光染色方法,请至本公司网站下载。 一、BDFACSCalibur基本结构 1.1仪器本体: 1.电源开关:在BDFACSCalibur仪器右侧下方,先启动仪器本体,再打开计算机。 2.光学系统:BDFACSCalibur基本配有一支波长488nm的氩离子雷射 以BDFACSCalibur基本型为例 ?FSCDiode只收488nm波长散射光 ?SSCPMT只收488nm波长散射光 ?FL1PMT荧光光谱峰值落在绿色范围(波长515-545nm) ?FL2PMT荧光光谱峰值落在橙红色范围(波长564-606nm) ?FL3PMT荧光光谱峰值落在深红色范围(波长>650nm) 3.仪器面板: 仪器前方面板的右下方有三个流速控制键、及三个功能控制键。 流速控制: LO:样品流速:12?l/min MED:样品流速:35?l/min HI:样品流速:60?l/min

功能控制: ?RUN:此时上样管加压,使细胞悬液从进样针进入流动室。(正常显示绿色;黄色时表示仪器不正常,请检查是否失压。) ?STANDBY:无样品或暖机时之正常位置,此时鞘液停止流动,雷射功率自动降低。 ?PRIME:去除流动室中的气泡,流动室施以反向压力,将液流从流动室冲入样品管,持续一定时间后,以鞘液回注满流动室。PRIME结束,仪器恢 复STANDBY状态。 4.储液箱抽屉: 在主机左下方之储液箱抽屉。可向前拉开,内含鞘流液筒、废液筒、鞘液过滤器SheathFilter,及空气滤网Airfilter。请注意气路减压阀VENTTOGGLE之位置。 ?鞘液筒:位于抽屉左侧,容积4升。装八分满鞘液筒,仪器可以运行大约3小时。筒上装有液面感应器,鞘液用完时,仪器软件上会有显示。鞘液筒盖 上有金属环扣,保证鞘液筒密闭。 ?废液筒:位于抽屉右侧,容积4升。筒上装有液面感应器,废液盛满时,仪器软件上会有显示。注意废液可能有潜在的生物传染性。 ?鞘液过滤器:0.22?m过滤器,去除鞘液中的杂质,保证进入流动室的鞘液是干净的。 ?气路减压阀:沿箭头方向移动阀门开关,鞘液筒减压,气压恢复正常。在鞘液筒添加鞘液时,需要减压。 ?空气过滤网:用于过滤冷却雷射的空气。 5.上样品区: 上样品区是样本管的上样位置。它包括三个部分,一个是进样针 SampleInjectionTube,将样本输入流动室,还有就是支撑架 TubeSupportArm、和液滴存留系统DropletContainmentSystem。 ?进样针:是一根不锈钢管,将细胞从样本针中吸入流动室。进样管外有一套管,是液滴保留系统的一部分。 ?支撑架:用于支撑样本管、并负责启动液滴存留系统。支撑架有三个位置:位于样本管之下的中位,样本管左侧或右侧。 液滴存留系统:系统由支撑架、真空帮浦和外套管组 成。当支撑架位于左侧或右侧位置时,真空帮浦就会启 动,将液体从外管吸入废液筒内。上样时,须注意将支 撑架位于中位,以避免过多样品被抽吸到废液筒内(当 支撑架位于中位,真空帮浦停止工作)。更换样品时, 让仪器保持RUN的模式,使得进样针可以反冲;切换到 STANDBY模式前,确保液路已冲洗彻底以免碎片沈积到 流动室中。

流式细胞仪现状与临床应用进展

流式细胞仪现状与临床应用进展 北京大学第一医院检验科 吴煦,王建中 作者吴煦,毕业于北京医科大学医学检验专业,在美国BD公司生命科学部从事流式细胞仪及其相关产品的技术应用支持工作,现在北京大学第一附属医院检验科攻读硕士学位,师从王建中教授。 摘要:本文主要介绍了流式细胞仪以及新发展的仪器检测技术和目前主要的临床应用,包括细胞免疫表型分析,红细胞和血小板分析,细胞功能分析,以及细胞DNA分析等;最后介绍了临床流式细胞分析应用的新进展和新的应用领域,以及流式细胞术应用于细胞组学提供预测医学信息的概况。 关键词:流式细胞术,流式荧光定量分析,流式微球技术,流式细胞原位杂交分析,细胞组学 Status Quo and Clinical Application Development of Flow Cytometry Clinical Laboratory, Peking University First Hospital Xu Wu, Jianzhong Wang ABSTRACT: This article introduced flow cytometry techniques, and presently major clinical applications, such as immunophenotyping, red blood cell and platelet analysis, cell function analysis, and DNA analysis. Finally, it introduced newly exploited clinical applications and new diagnostic fields of flow cytometry, and cytomics by flow cytometry to provide diagnostics information as predictive medicine. KEY WORDS: Flow cytometry, Quantitative flow cytometry, Cytometric bead array, Flow-FISH, Cytomics 流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)是一种对处在液流中的细胞或其他生物微粒,以及人工合成微球逐个进行多种物理或生物学特征快速定量分析和分选的技术[1]。流式细胞仪是测量细胞的散射光和标记荧光强度的细胞分析仪,是在单个细胞分析基础上发展起来的对细胞的物理或化学性质(如大小、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等)进行快速测量,并分类收集的高精密仪器。流式细胞仪可以高速分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个细胞特征参数,进行定性或定量分析,具有速度快、精度高、准确性好等特点,成为当代最先进的细胞定量分析技术。如今,流式细胞仪(图1,最常用的流式细胞仪,配备双色激光器)以其快速、灵活、大量、灵敏和定量的特点,广泛应用于基础研究和临床实践各个方面,如细胞生物学、细胞遗传学、生物化学、免疫学、肿瘤学、血液学等。

流式细胞仪的原理及应用

山西大学研究生学位课程论文(2013 ---- 2014 学年第一学期) 学院(中心、所):生物技术研究所 专业名称:微生物学 课程名称: 论文题目:流式细胞仪的原理及其应用 授课教师(职称):崔晓东 研究生姓名:常姣 年级:研一 学号:201323001003 成绩: 评阅日期: 山西大学研究生学院 年月日

流式细胞仪的原理及其应用 姓名常姣专业微生物学 摘要本文简要论述了流式细胞仪( flowcyt ometry, FCM) 的工作原理, 并对其某些科学领域研究中的应用进行阐述, 包括在生物学、免疫学、临床学中的研究应用。 关键词 FMC;生物学;免疫学;临床学 流式细胞仪( fl o w c y to me tr y, F CM) 研制、发展、革新和应用领域的扩展,都是由生物学、生物技术、计算机科学、电子工程学、流体力学、激光技术、分子生物学、有机化学和物理学等多个学科综合发展和应用而实现的。近代流式细胞仪,由于单克隆抗体技术、定量细胞化学和定量荧光细胞化学的应用,使其在生物学、临床医学等众多研究领域的应用愈来愈广泛和重要,尤其在生物学中对细胞周期的动力学分析、细胞因子、细胞凋亡、信号传导、R N A / D N A 的分析、细胞表面受体及特异性抗原的分析等领域发挥着独特作用,具有操作简单、分析精确、重复性好、费用低廉、分析速度快等优点。 1流式细胞仪的构成及工作原理 流式细胞仪主要由液流系统、光学系统、电子系统、分析系统和细胞分选系统五个部分组成。将待测细胞制成单细胞悬液, 经荧光染料染色后加入样品管, 在一定气体压力下待测样品被压入流动室。待测细胞在鞘液的包裹下单行排列, 依次通过检测区, 被荧光染料染色的细胞受到强烈的激光照射后, 产生散射光和荧光信号。这两种信号同时被前向光电二极管和90°方向的光电倍增管(PMT) 接收。散射光分为前向角散射(forwardscatter, FSC) 和侧向角散射(sidescatter, SSC) 。前者主要反映被测细胞的大小, 后者主要反映被测细胞的胞质、胞膜、核膜的折射等, 以及细胞内颗粒的性状。光信号通过波长选择通透性滤片后, 经光电倍增管接收后转为电信号, 再经数/模转换器转换为可被计算机识别的数学信号, 以一维直方图或二维点阵图及数据表或三维图形显示出来[1,2]。 流式细胞仪还可以对分析中的目的细胞进行分选, 它是通过分离含有单细胞的液滴而实现的。流动室的喷嘴上安装有超高频的压电晶体, 可以产生高频振荡, 使液流断裂为均匀的液滴, 待测细胞就包含在液滴之中。将这些液滴充上正或负电荷, 当带电液滴通过电场, 便会在电场的作用下发生偏转, 然后落入相应的收集器中, 从而实现细胞分选[2]。 2流式细胞仪的应用 流式细胞术的应用,简单用一句话概括就是,凡能被荧光分子标记的细胞或微粒均能用流式细胞仪检测。其中细胞生物学领域是流式细胞术在基础研究中应用范围最广泛的领域,因为最初这个技术就是为此目的而设计的。 2.1流式细胞仪在生物学中的应用 流式细胞仪在生物学中的应用越来越广泛,如在细胞生物学、细胞遗传学、分子生物学、神经生物学、微生物学、分子免役学、植物学等等许多生物学基础学科的应用和在细胞凋亡、细胞周期调控、细胞因子及细胞分型等研究中的应用[3]。 2.1.1 对凋亡细胞的分析 细胞凋亡是生物体生长发育过程中出现的正常现象, 在生物体形态构成、正常细胞更替以及维持

性控冻精使用技术手册

第一部分性控技术和性控冻精的概况 一、性控技术的概念和在畜牧业生产中的重要意义 性别控制:通过人为的干预使雌性动物繁殖出人们所期望的性别后代的一种繁殖新技术。奶牛XY精子分离技术是指将公牛的精液根据精子自身X染色体和Y染色体的DNA含量不同,把这两种类型的精子通过物理方法、计算机技术等进行有效的分离,将X精子分装冷冻后,用于牛的人工授精,使母牛怀孕的技术,母牛率可以达到90%以上;根据精子自身X、Y染色体中DNA含量的不同而有效分离的冻精就叫性控冻精。从经济效益来讲,该技术的应用将直接为奶农带来更多的获得良种母牛机会,增加了奶农的收入。 其重要意义在于: 1、产母犊效益提高良种母犊出生数量,使良种奶牛的繁育数量呈几何速度增长,加速牛群改良和更新,迅速达到良种化规模养殖,增加规模效益。 2、充分利用现有优质种公牛和高产奶牛的遗传潜力母牛一生能产6~7胎,平均可以留下3头母牛,采用性控冻精使高产奶牛一生可以产6~7头优质母牛。 3、提高生产性能加速低产奶牛的改良步伐,迅速扩大良种奶牛群,产奶性能得到快速提升,产奶效益不断增加。 以上三点都说明在使用性控冻精后可以显著的提高奶牛养殖的经济效益,同时与胚胎工程技术的结合可以使奶牛的品种改良一步到位。 二、性控冻精在我国应用的重要性和在国内的应用及效果 由于我国奶牛的品种质量较差,平均单产达不到 3500公斤/头,远低于世界平均单产5500公斤/头的水平,更达不到以色列、美国等奶业发达国家奶牛单产的一半。因此从我国实际情况分析,全国各地对良种牛的需求量非常大。奶牛是单胎动物,自然状态下,一头母牛一年只能繁殖一胎,终生平均也只能提供3头左右的母牛后代。由于奶牛自然繁殖率低,繁殖速度慢,年增长速度仅为15%,使得国内现有高产、良种奶牛扩繁速度受到很大限制;若从国外大批引进良种奶牛不但成本高,而且受到国外牛源和国家检疫的限制;因此,高产纯种奶牛的缺乏成为目前我国奶业快速发展的主要瓶颈。奶牛XY精子分离技术是目前最先进、最经济的良种繁育技术,X精子分离纯度已达到90%以上,分离后受胎率和常规冻精相当;这样意味着如果得到一头良种母牛犊,采用传统的冻精配种,则需要4剂精液,花费二年的时间;而采用性控冻精,只需要2剂,花费一年的时间。XY精子分离技术不论从繁育的成本还是从良种扩繁速度上考虑,都是畜牧业良种繁殖改良技术上的一场革命。 该产品已经在全国22个省市进行了广泛的推广和使用,以可信的质量和受胎率、母牛率在同类产品中最好(下表为部分抽样统计结果)得到了各级政府部门和养殖户(场)的称赞和认可。

流式细胞仪入门手册

流式细胞仪入门 -----导航篇 二OOO年四月

目录 前言 第1章综述 第2章液流系统 第3章散射光信号及荧光信号 3.1 散射光信号 3.2 荧光信号 第4章光电系统 4.1 光平台 4.2 光学滤片 4.3 信号探测器 4.4 阀值 第5章数据分析 5.1 数据采集及显示 5.2 设门 5.3 细胞亚群的数据分析 5.4 流式细胞仪其它应用的数据分析第6章分选 6.1 分选 第7章激光器及光路校正 7.1 激光器的工作原理 7.2 光路校正 第8章答案

序论 学习仪器的最好方法是操作仪器,然而在理解原理的基础上进行仪器操作无疑会起到事半功倍的作用。 本书介绍了流式细胞仪的基本知识,并从不同角度详尽阐述了各种台式机(FACScan TM,FACSort TM,FACSCalibur TM,和BD LSR)与大型机(FACS Vantage TM,FACSVantage TM SE,和FACStar PLUSTM)之间的不同。阅读本书有助于增强读者操作仪器的动手能力和经验。

第一章综述 流式细胞术是一项快速检测分析单个粒子多物理特性的高技术,通常指细胞通过激光束时在液流中的特性,即粒子的大小,密度或是内部结构,以及相对的荧光强度。通过光电系统记录细胞的散射光信号和荧光信号可得知细胞特性。 流式细胞仪主要由三部分组成:流动室和液流系统;光路系统以及电系统。其作用如下: 液流系统:依次传送待测样本中的细胞到激光照射区。 光路系统:细胞由激光激发,通过光学滤片产生光信号,并传送到相应的探测器。 电系统:把光信号转换为电信号。对于有分选装置的仪器,电系统可初始化分选条件。 在流式细胞仪中,细胞被传送到液流中的激光照射区。任何存在于悬液中的直径为0.2-150微米的粒子或细胞都适用于流式分析。在实际工作中,用实体组织进行流式细胞分析往往是不可能的,分析之前必须对其进行分解。被液滴包绕的粒子称为细胞液柱,当粒子经过激光照射区时,通过激光激发产生散射光。含有荧光的粒子就会表现出其荧光特性。散射光和荧光由光路系统(相应的透镜,滤片和探测器)收集。分光器和滤光片引导散射光和荧光至相应的探测器,把光信号转换为电信号。 单个粒子通过其表现出的光散射和荧光属性,通过列表模式(List mode)完成数据采集,并对样本中的细胞亚群进行分析。

流式细胞仪临床应用手册

流式细胞仪临床应用手册 案场各岗位服务流程 销售大厅服务岗: 1、销售大厅服务岗岗位职责: 1)为来访客户提供全程的休息区域及饮品; 2)保持销售区域台面整洁; 3)及时补足销售大厅物资,如糖果或杂志等; 4)收集客户意见、建议及现场问题点; 2、销售大厅服务岗工作及服务流程 阶段工作及服务流程 班前阶段1)自检仪容仪表以饱满的精神面貌进入工作区域 2)检查使用工具及销售大厅物资情况,异常情况及时登记并报告上级。 班中工作程序服务 流程 行为 规范 迎接 指引 递阅 资料 上饮品 (糕点) 添加茶水工作1)眼神关注客人,当客人距3米距离侯客迎询问客户送客户

注意事项 15度鞠躬微笑问候:“您好!欢迎光临!”2)在客人前方1-2米距离领位,指引请客人向休息区,在客人入座后问客人对座位是否满意:“您好!请问坐这儿可以吗?”得到同意后为客人拉椅入座“好的,请入座!” 3)若客人无置业顾问陪同,可询问:请问您有专属的置业顾问吗?,为客人取阅项目资料,并礼貌的告知请客人稍等,置业顾问会很快过来介绍,同时请置业顾问关注该客人; 4)问候的起始语应为“先生-小姐-女士早上好,这里是XX销售中心,这边请”5)问候时间段为8:30-11:30 早上好11:30-14:30 中午好 14:30-18:00下午好 6)关注客人物品,如物品较多,则主动询问是否需要帮助(如拾到物品须两名人员在场方能打开,提示客人注意贵重物品); 7)在满座位的情况下,须先向客人致

待; 阶段工作及服务流程 班中工作程序工作 要求 注意 事项 饮料(糕点服务) 1)在所有饮料(糕点)服务中必须使用 托盘; 2)所有饮料服务均已“对不起,打扰一 下,请问您需要什么饮品”为起始; 3)服务方向:从客人的右面服务; 4)当客人的饮料杯中只剩三分之一时, 必须询问客人是否需要再添一杯,在二 次服务中特别注意瓶口绝对不可以与 客人使用的杯子接触; 5)在客人再次需要饮料时必须更换杯 子; 下班程 序1)检查使用的工具及销售案场物资情况,异常情况及时记录并报告上级领导; 2)填写物资领用申请表并整理客户意见;3)参加班后总结会; 4)积极配合销售人员的接待工作,如果下班

自己总结:流式细胞仪的原理和用途

流式细胞仪(Flow Cytometry) 1 流式细胞仪的概念及其发展历史 1.1 流式细胞仪的基本概念流式细胞仪(flow cytonletry,FCM)是对高速直线流动的细胞或生物微粒进行快速定量测定和分析的仪器,主要包括样品的液流技术、细胞的计数和分选技术,计算机对数据的采集和分析技术等。流式细胞仪以流式细胞术为理论基础,是流体力学、激光技术、电子工程学、分子免疫学、细胞荧光化学和计算机等学科知识综合运用的结晶。流式细胞术是一种自动分析和分选细胞或亚细胞的技术。其特点是:测量速度快、被测群体大、可进行多参数测量,即对同一个细胞做有关物理、生物化学特性的多参数测量,且在统计学上有效。 1.2 流式细胞仪的发展简史最早的流式细胞仪雏形诞生于1934年,Moldavan提出使悬浮的单个血红细胞流过玻璃毛细管,在亮视野下用显微镜进行计数,并用光电记录装置测量的设想。1953年Crosland-Taylor根据牛顿流体在圆形管中流动规律设计了流动室。其后又经过Coulter、Parker & Horst、Kamentsky、Gohde、Fulwyler、Herzenberg等人的不断改进,设计了光电检测设备和细胞分选装置、完成了计算机与流式细胞仪的物理连接及多参数数据的记录和分析、开创了细胞的免疫荧光染色及检测技术、推广流式细胞仪在临床上的应用。近20年来,随着流式细胞仪及其检测技术的日臻完善,人们越来越致力于样品制备、细胞标记、软件开发等方面的工作,以扩大FCM的应用领域和使用效果。 宋平根的《流式细胞术的原理和应用》是迄今为止对流式细胞仪及其技术阐述的最为详尽和透彻的中文著作。这本书非常详细地介绍了流式细胞术的历史、结构、原理、技术指标等,例举了其在医学和生物工程中的应用,非常适合从事此方面专业研究的人。由于这本书是13年前出版的,所以基本上没有涉及植物流式细胞仪检测技术。此外对于只需要对流式细胞仪有些基本认识的人士来说,这本书太复杂太深奥。谢小梅主要介绍了流式细胞仪在生物工程中的应用。杨蕊概括了流式细胞仪的工作原理,简单提及了流式细胞仪的应用。本文在分析这三篇论著或文章的优缺点后,用比较通俗的语言介绍了掌握流式细胞仪检测技术必须了解的一些原理,并对目前市场上的主流型号进行了客观的性能概括。 2 流式细胞仪的工作原理和技术指标 2.1 流式细胞仪工作原理除电源外,流式细胞仪主要由四部分组成:流动室和液流系统:激光源和光学系统;光电管和检测系统;计算机和分析系统,其中流动室是仪器的核心部件。这四大部件共同完成了信号的产生、转换和传输的任务。 流动室和液流系统

流式细胞仪临床应用手册

目录

第一部分流式细胞术简介 1流式细胞术定义 流式细胞仪是集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术以及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型高科技仪器,为生物医学与临床检验学发展提供了最强有力的工具。 流式细胞分析技术(flowcytometry,FCM)又称流式细胞术,是20世纪70年代发展起来的一种快速、准确、客观的检测技术,它能够同时检测快速直线流动状态中的单个细胞或微球的多项物理及生物学特性--在极短的时间内高速分析上万个甚至是几十万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,对其加以定性定量分析,还可以对特定群体加以分选。目前,流式细胞术已经广泛用于临床应用与基础研究,在免疫学、遗传学、血液学、肿瘤学、细胞生物学、细胞遗传学、生物化学等医学与生命科学所有领域内发挥着重要的作用。 2流式细胞仪工作原理 制备成单细胞悬液的标本或单个微粒在上样前进行荧光染色。流式细胞仪检测到上样管后,产生一定的气体压力将待测样本压入流动池。同时鞘液(不含细胞或微粒的缓冲液)在仪器产生的高压作用下从鞘液管喷出,鞘液管入口方向与样本流形成一定的角度,形成一个圆形的鞘液流,包围着细胞或微粒高速流动,使待测细胞在鞘液的包裹下单行排列,逐个地通过流式细胞仪的激光聚焦区(流动池),从而被检测到,并发出散射光及荧光等多种光学信号。光学信号通过光电信号转换器及电子信号处理系统采集及分析后,最后以图形的形式将数据结果显示在电脑屏幕上。 3流式细胞仪的主要结构 光学系统,液流系统,信号处理及放大系统,计算机系统。

4流式细胞仪检测信号 散射光信号:FSSS 荧光信号:FL1FL2FL3FL4… 5流式结果数据分析 6流式细胞仪检测样品 可用于流式细胞仪检测的样本种类多样,包括各种细胞(如外周血、骨髓、细针穿刺、灌洗液、实体组织、悬浮或贴壁培养的细胞),微生物,人工合成微球等;血清、血浆、培养上清、细胞裂解液等。 如果检测样本为实体组织时,我们可以用物理化学(天然,机械研磨/消化)等方法将其制备成单细胞悬液5×105-1×107cells/ml ,并在上机前用300目筛网过滤。 7流式细胞仪检测范围 细胞结构 细胞功能 单参数直方图分析 双参数点图分析 双参数点图分析 双参数等高图分析 双参数密度图分析 三维图分析

BD_FACSCalibur流式细胞仪操作手册

BD FACSCalibur流式细胞仪 一、BD FACSCalibur基本结构 1.1仪器本体: 1. 电源开关:在BD FACSCalibur仪器右侧下方,先启动仪器本体,再打开计算机。 2. 光学系统:BD FACSCalibur 基本配有一支波长488 nm 的氩离子雷射 以BD FACSCalibur 基本型为例 FSC Diode 只收488 nm波长散射光 SSC PMT 只收488 nm波长散射光 FL1 PMT 荧光光谱峰值落在绿色范围(波长515-545 nm) FL2 PMT 荧光光谱峰值落在橙红色范围(波长564-606 nm) FL3 PMT 荧光光谱峰值落在深红色范围(波长 >650 nm)

3. 仪器面板: 仪器前方面板的右下方有三个流速控制键、及三个功能控制键。 流速控制: LO:样品流速:12 μl /min MED:样品流速:35 μl /min HI: 样品流速:60 μl /min 功能控制: ?RUN:此时上样管加压,使细胞悬液从进样针进入流动室。(正常显示绿色;黄色时表示仪器不正常,请检查是否失压。) ?STANDBY:无样品或暖机时之正常位置,此时鞘液停止流动,雷射功率自动降低。 ?PRIME:去除流动室中的气泡,流动室施以反向压力,将液流从流动室冲入样品管,持续一定时间后,以鞘液回注满流动室。PRIME 结束,仪器 恢复STANDBY状态。 4. 储液箱抽屉: 在主机左下方之储液箱抽屉。可向前拉开,内含鞘流液筒、废液筒、鞘液过滤器Sheath Filter,及空气滤网 Air filter。请注意气路减压阀VENT TOGGLE之位置。

流式细胞仪临床应用手册

目录 第一部分流式细胞术简介 (1) 第二部分流式项目检测列表 (4) 第三部分流式细胞术在各类疾病中的应用 (7) 第一章感染性疾病 (7) 第二章肿瘤、细胞治疗应用 (9) 第三章血液系统疾病 (14) 第四章器官移植检测 (15) 第五章风湿免疫性疾病 (16) 第六章呼吸系统疾病 (18) 第七章消化系统疾病 (20) 第八章泌尿系统疾病 (21) 第九章心脑血管疾病 (22) 第十章妇产科及儿科相关疾病 (24) 第十一章内分泌患者免疫功能检测 (26) 第十二章皮肤科疾病 (27)

第一部分流式细胞术简介 1 流式细胞术定义 流式细胞仪是集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术以及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型高科技仪器,为生物医学与临床检验学发展提供了最强有力的工具。 流式细胞分析技术(flow cytometry,FCM)又称流式细胞术,是20世纪70 年代发展起来的一种快速、准确、客观的检测技术,它能够同时检测快速直线流动状态中的单个细胞或微球的多项物理及生物学特性--在极短的时间内高速分析上万个甚至是几十万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,对其加以定性定量分析,还可以对特定群体加以分选。目前,流式细胞术已经广泛用于临床应用与基础研究,在免疫学、遗传学、血液学、肿瘤学、细胞生物学、细胞遗传学、生物化学等医学与生命科学所有领域内发挥着重要的作用。 2 流式细胞仪工作原理 制备成单细胞悬液的标本或单个微粒在上样前进行荧光染色。流式细胞仪检测到上样管后,产生一定的气体压力将待测样本压入流动池。同时鞘液(不含细胞或微粒的缓冲液)在仪器产生的高压作用下从鞘液管喷出,鞘液管入口方向与样本流形成一定的角度,形成一个圆形的鞘液流,包围着细胞或微粒高速流动,使待测细胞在鞘液的包裹下单行排列,逐个地通过流式细胞仪的激光聚焦区(流动池),从而被检测到,并发出散射光及荧光等多种光学信号。光学信号通过光电信号转换器及电子信号处理系统采集及分析后,最后以图形的形式将数据结果显示在电脑屏幕上。 3 流式细胞仪的主要结构 光学系统,液流系统,信号处理及放大系统,计算机系统。

流式细胞仪工作原理与应用范围

流式细胞仪工作原理与应用范围 2008-11-01 10:30 流式细胞仪就是进行流式细胞分析的仪器,它集电子技术、计算机技术、激光技术、流体理论于一体,是一种非常先进的检测仪器,被誉为试验室的“CT”。 流式细胞术(Flow CytoMeter,FCM)是一种在功能水平上对单细胞或其他生物粒子进行定量分析和分选的检测手段,它可以高速分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,与传统的荧光镜检查相比,具有速度快、精度高、准确性好等优点,成为当代最先进的细胞定量分析技术。 工作原理 将待测细胞染色后制成单细胞悬液。用一定压力将待测样品压入流动室,不含细胞的磷酸缓冲液在高压下从鞘液管喷出,鞘液管入口方向与待测样品流成一定角度,这样,鞘液就能够包绕着样品高速流动,组成一个圆形的流束,待测细胞在鞘液的包被下单行排列,依次通过检测区域。 流式细胞仪通常以激光作为发光源。经过聚焦整形后的光束,垂直照射在样品流上,被荧光染色的细胞在激光束的照射下,产生散射光和激发荧光。这两种信号同时被前向光电二极管和90°方向的光电倍增管接收。光散射信号在前向小角度进行检测,这种信号基本上反映了细胞体积的大小;荧光信号的接受方向与激光束垂直,经过一系列双色性反射镜和带通滤光片的分离,形成多个不同波长的荧光信号。 这些荧光信号的强度代表了所测细胞膜表面抗原的强度或其核内物质的浓度,经光电倍增管接收后可转换为电信号,再通过模/数转换器,将连续的电信号转换为可被计算机识别的数字信号。计算机把所测量到的各种信号进行计算机处理,将分析结果显示在计算机屏幕上,液可以打印出来,还可以数据文件的形式存储在硬盘上以备日后的查询或进一步分析。 检测数据的显示视测量参数的不同由多种形式可供选择。单参数数据以直方图的形式表达,其X轴为测量强度,Y轴为细胞数目。一般来说,流式细胞仪坐标轴的分辨率有512或1024通道数,这视其模数转换器的分辨率而定。对于双参数或多参数数据,既可以单独显示每个参数的直方图,也可以选择二维的三点图、等高线图、灰度图或三维立体视图。 细胞的分选是通过分离含有单细胞的液滴而实现的。在流动室的喷口上配有一个超高频电晶体,充电后振动,使喷出的液流断裂为均匀的液滴,待测定细胞就分散在这些液滴之中。将这些液滴充以正负不同的电荷,当液滴流经带有几千伏特的偏转板时,在高压电场的作用下偏转,落入各自的收集容器中,不予充电的液滴落入中间的废液容器,从而实现细胞的分离。 应用范围 可用于白血病的分型、肿瘤细胞染色体的异倍性测定,以及免疫学研究,并已开

BD流式细胞仪

目录 简介流式细胞仪 (3) 流式细胞仪的临床检验项目 淋巴细胞亚群分析 (4) 肿瘤细胞DNA检测分析 (5) 白血病及淋巴瘤免疫分型 (6) 残余白血病检测 (6) 网织红细胞计数 (7) 造血干细胞计数 (7) 血小板疾病及活化血小板检测 (8) HLA-B27检测 (8) 器官移植的配型及免疫状态监控 (9) AIDS诊断及治疗监控 (9) 流式细胞仪的临床/医学研究 (10) 流式细胞技术的发展及国内现况 (10) 建议流式细胞仪之机型----BD公司FACSCalibur 仪器主要特点 (11) 配套设施(计算机、软件、试剂、样本制备仪、售后服务) (12) 仪器主要技术参数 (15) BD公司全球及中国业务介绍 BD公司流式细胞仪培训计划 BD公司推荐配置单 BD公司仪器与其他厂家仪器比较表 一、简介流式细胞仪

(一)流式细胞仪概念 流式细胞术(Flow Cytometry ,FCM)是一种对处在液流中的细胞或其它生物微粒(如细菌)逐个进行多参数的快速定量分析和分选的技术。 简言之,流式细胞仪是测量染色细胞标记物荧光强度的细胞分析仪,是在单个细胞分析和分选基础上发展起来的对细胞的物理或化学性质,如大小、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等进行快速测量并可分类收集的高技术,FCM以其快速、灵活、大量、灵敏和定量的特色,广泛应用于基础研究和临床实践各个方面,包括细胞生物学、肿瘤学、血液学、免疫学、药理学、遗传学及临床检验学等,在各学科领域发挥着重要的作用。 (二)原理 待测样本的细胞悬液,在鞘液的包围和约束下,细胞排成单列高速由流动室喷嘴喷出,形成细胞液柱。当液柱通过检测区,在入射的激光束照射下产生前向散射光(FSC)和侧向散射光(SSC),它们分别反映细胞大小和颗粒度,根据这些特性可以将细胞分类。经一种或几种特殊荧光标记的样本,在激光束的激发下所产生的特定荧光,可被光学系统检测并输送到计算机进行分析,得到细胞相应的各种特性。 (三)流式细胞仪检测的细胞特性 二、流式细胞仪的临床检验项目 目前在国内最常见的临床应用有两大类:一为肿瘤细胞的DNA含量析; 另一为细胞表面的表型测定,包括淋巴细胞亚型分析、免疫功能监测、白血病和淋巴瘤免疫分型、残余白血病检测、以及HLA-B27组织抗原检测等等。 1、淋巴细胞亚群分析 淋巴细胞亚群分析可以通过相对计数、绝对计数与率的变化监控疾病状态下的免疫状况(如肿瘤、感染性疾病、免疫性疾病等),以此辅助诊断、追踪病情发展及决定用药时机。

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