细胞增殖练习题
《细胞的增殖》练习题
一、选择题
1. 下列有关细胞不能无限长大的原因中，不正确的是 A. 与细胞表面积和体积的比有关 B. 细胞核的大小是有一定限度的 C. 细胞体积过大不利于细胞内的物质交流 D. 细胞内各种细胞器的数目和种类限制
1?下图是按顺时针方向表示的 4种植物细胞的细胞周期，其中说法正确的是
B ?图中b 表示细胞增殖过程的一个细胞周期 C. 甲图的a 与丙图的a 所用的时间可能一样长 D.
b 中，由于DNA 的复制使染色体数目增加一倍
2?有丝分裂间期细胞内发生了复杂的变化，其结果是 （ ）。
A . DNA 含量增加了一倍，染色体数不变
B . DNA 含量和染色体数都增加一倍
C . DNA 含量不变，染色体数目增加一倍
D . DNA 含量和染色体数均不变
7.细胞有丝分裂过程中，DNA 复制、着丝点分裂、姐妹染色单体形成及消失依次发生在
（
）
A .间期、后期、间期、后期
B .间期、后期、中期、后期
C .间期、后期、末期、后期
D .前期、中期、后期、末期
1.菠菜根的分生区细胞不断分裂使根向远处生长，在分裂过程中不会出现的是（ ）
A. 细胞分裂间期，中心体的两个中心粒各自产生一个新的中心粒
B. 细胞分裂中期，染色体形态较固定、数目较清晰
C. 细胞分裂前期，核膜和核仁逐渐消失
A .温度对植物
D .细胞分裂末期，高尔基体参与细胞壁的形成
2. 某生物体细胞中有丝分裂中期含有染色单体数44条，那么该生物的体细胞中染色体的
实际条数是
A. 44 条
B. 88 条
C. 22 条
D. 11 条
3. 细胞进行有丝分裂过程中，染色体、染色单体，DNA分子的数量比为 1 : 2 : 2时，该
细胞处于（）
A?中期或后期 B.后期或末期C?前期或后期 D.前期或中期
6?人体细胞增殖过程中，如果纺锤体不能形成，则会发生（）
A. 细胞中的个别染色体增加
B. 染色体不能复制
C. 在后期，染色体不能平均分开
D. 对细胞增殖无任何影响
与高等植物细胞有丝分裂相比，下列叙述中不.是动物细胞有丝分裂显著特点的是（
）
A. 染色体经过复制后精确均分到两个子细胞中
B. 中心体周围发射出星射线
C. 在细胞分裂末期，细胞缢裂成两部分
D. 在细胞分裂初期，两组中心粒分别移向细胞两极
11. 下列关于有丝分裂的说法，正确的是（）
A. 分裂间期由于蛋白质合成旺盛，核仁的活动会加强
B. 显微镜下可看见核仁、核膜的时期只有间期、末期
C. 分裂后期，着丝粒分开，姐妹染色单体数目加倍
D. 高等动植物细胞的细胞质分裂方式相同
3.处于有丝分裂过程中的动物细胞，细胞内的染色体数（a）、染色单体数（b）、DNA分子数
（c）可表示为如图所示的关系，此时细胞内可能发生着（）。
A ?中心粒移向两极
B ?着丝点分裂
C.①⑤④③②
D.⑤④③②①
C .细胞膜向内凹陷
D . DNA 分子进行复制
& （2010烟台）a 、b 、c 分别是一些生物细胞某个分裂时期的示意图，下列有关描述正 确的是
（ ）
A ?图a 表示动物细胞有丝分裂间期
B ?图b 表示人红细胞分裂的某个阶段
C .图c 表示植物细胞有丝分裂中期
D .图c 细胞中含有8条染色单体
12. （2010潍坊）用高倍镜观察洋葱根尖细胞的有丝分裂，下列相关叙述正确的是 A .中心体发出的星射线形成纺锤体 B. 细胞板出现在分裂期的中期
C. 直接用高倍镜找到分生区的细胞进行观察
D .各时期的长短与视野中相应时期细胞的数量成正相关
11,下列关于“观察植物细胞的有丝分裂”实验的叙述中，正确的是 （ ）
A .装片制作的正确顺序是：解离T 染色T 漂洗T 制片
B .视野内可以看到某个细胞分裂的连续变化过程
C .看到的根尖细胞都正在分裂
D .看到的分生区细胞大多具有完整的细胞核 F 图是细胞有丝分裂时期示意图，下列叙述不正确的是
（
1.下图表示一个细胞有丝分裂过程中染色体变化的不同情况，
在整个细胞周期中,
变化的顺序应该是 （C ）
A 丁期的母细胞有4条染色体 C 甲期的细胞内含有4条染色体
B 乙期与丙期细胞内染色体数量相等 D 丙期是辨认染色体形态数目最佳时期
染色体
A. ①④⑤③②
B. ②③①④⑤ 41
h r
◎ ◎关⑸X
纺锤丝
6.下列各项中，能看到完整细胞核的是（）。
A .正在分裂的细菌
B ?人的成熟红细胞
C. 洋葱根尖细胞有丝分裂的后期
D .蛙的红细胞的分裂过程
6.右图为某真核生物细胞分裂过程中DNA含量变化的图解，下列叙述中正确的是（
）
①从AB段开始合成大量蛋白质
②若该细胞是植物细胞，则在CD段该细胞中将出现赤道板
若该细胞是动物细胞，则在CE段该细胞中有中心体
A. ①② B .②③ C .①③ D .①②③
7?关于有丝分裂过程中染色体、DNA和染色单体的变化，下列说法中正确的是（
）
A. 有丝分裂的全过程都能看到染色体
B. 在细胞周期中，染色单体数量随着染色体数量的增加而增加
C. 细胞分裂后期和末期，核DNA分子数与染色体数相同
D. 有丝分裂的全过程中核DNA和染色单体的数量始终保持一致
11.下面是人体细胞分裂时，不同细胞分裂期的A、B C D四个时期染色体和DNA的统计数据，那么姐妹染色单体分离可以发生在（）
答案：d
a是染色体数，b是染?图中的甲、乙、丙表示动物细胞有丝分裂过程中的三个阶段，
色单体数，c是DNA分子数，a、b、c的数量关系正确的是（
(1) A 图表示是动物细胞还是植物细胞? (2) A 图细胞所处的细胞分裂期是 _
⑶A 图细胞染色体数目是 __________ 条，DNA 分子 ________ 个，该细胞有丝分裂的结果形
成 _______ 个子细胞，每个子细胞中染色体数目有 ____________ 条。
(4) __________________________________ B 图细胞处于细胞分裂周期的 期。
(5) B 图中共有染色体 _______ 个，DNA 分子 ________ 个，该种类的生物体细胞中含染色 体 _______ 条， _________ 对。
(6) C 图表示的是 ________ 细胞进行有丝分裂的 _________ 期，此期细胞内发生的主要变 化是 _________________________________________________________________________________
C.乙、丙 D .甲、乙、丙
4. 细胞增殖过程中DNA 含量会发生变化。通过测定一定数量细胞的 DNA 含量，可分析其
细胞周期。根据细胞 DNA 含量不同，将某种连续增殖的细胞分为三组，每组的细胞数
如下图。从图中所示结果分析其细胞周期，正确的是( A. 丙组细胞正在进行 DNA 复制 B. 乙组细胞正在进行着丝点分裂 C. 丙组中只有部分细胞的染色体数目加倍
D. 将周期阻断在DNA 复制前会导致甲组细胞数减少
13. 下图中，A B 、C 三图是不同生物细胞有丝分裂图，据图回答下列问题
:
________ 。理由是：a —，该期的主要变化是
K ■不
(
细胞增殖及细胞活力检测方法
细胞增殖及细胞活力检测方法 目前主要有两种用于检测细胞增殖能力的方法。一种是直接的方法，通过直接测定进行分裂的细胞数来评价细胞的增殖能力。另一种是间接的方法，即细胞活力（cell viability）检测方法，通过检测样品中健康细胞的数目来评价细胞的增殖能力。显然，细胞活力检测法并不能最终证明检测样品中的细胞是否在增殖。如细胞在某一培养条件下会自发启动凋亡程序，但药物的干扰可抑制凋亡的发生；这时若采用细胞活力检测法，显然可以区分两种条件下的细胞数量，但我们并不能从药物干扰组细胞数大于对照组的事实说明药物可促进细胞增殖的结论。所以最直接的证据应该采用方法一。 用于检测细胞增殖能力最经典的方法是用氚标记的胸腺嘧啶核苷处理细胞，再检测DNA链中氚含量。若细胞具有增殖能力，DNA合成过程中将会采用氚标记的胸腺嘧啶核苷作为合成原料，因此检测细胞DNA链内标记核苷酸的量可判断细胞是否进行DNA 的合成。 但更为常用的方法是BrdU检测法。用BrdU预处理的细胞中，BrdU可代替胸腺嘧啶核苷插入复制的DNA双链中，而且这种置换可以稳定存在，并带到子代细胞中。细胞经过固定和变性处理后，可用免疫学方法检测DNA中BrdU的含量（如采用鼠抗BrdU单克隆抗体特异识别BrdU,再采用辣根过氧化酶标记的山羊抗鼠IgG二抗标记，最后用比色法或荧光的方法进行定量测定），从而判断细胞的增殖能力。Calbiochem/EMD公司提供一种BrdU检测试剂盒，以微孔板的形式，合并所有清洗、固定、变性的步骤以单一试剂当中。比色检测在一抗二抗标记后在450nm下读数，
所有操作在3小时内结束。而且该试剂盒的灵敏度与市场上其他同类产品相比是最强的。1000个细胞以上水平的检测只需用BrdU预孵育2小时，100个细胞则采用过夜预孵育，即可检测细胞的增殖能力。 BrdU法的一个缺点是需要固定和变性等破坏DNA的处理。有些情况下，研究者可能希望在测定细胞增殖能力的同时检测细胞的总DNA含量，然而，在变性条件下，DNA 的双链结构将被破坏，DAPI和Hoechest 33342等核酸标记探针就不再能识别DNA，因而也无法估计DNA总量。Molecular Probes公司的Click-iT EdU检测试剂盒可以解决这个问题。这种方法不需要变性步骤，因为荧光探针标记的叠氮化物小分子，而不是庞大的抗体分子，可以很轻易的识别并结合未变性DNA双链中的EdU分子。采用BrdU方法时，你必须非常小心的去对DNA进行变性，才能一方面使BrdU抗体进入细胞，另一方面又保留足够的双链DNA分子来进行细胞周期的分析。有了EdU 后则不同，由于你不再需要变性，这一切都很简单了；另外，常常用于DNA变性的HCl，可能破细胞内坏蛋白的抗原识别位点，因而限制了BrdU检测法中同时检测其他蛋白的应用，但这种情况在EdU法中不存在。 图1：EdU及BrdU原理示意图（摘至invitrogen说明书） 在一些情况下，细胞活力的检测相当于细胞增殖能力的测定。用于细胞活力检测的方法又很多，这些方法主要采用特殊的试剂来测定细胞的代谢活力，Alamar Blue，MTT及其他四唑盐。它们通过检测细胞的氧化还原活性来检测细胞增殖能力，所以这是一种间接的方法。 Calbiochem的快速细胞增殖试剂盒，或者，严格来说，叫细胞活力试剂盒，采用一
人教版高中生物必修1第6章第1节 细胞的增殖教案
第六章细胞的生命历程 第1节细胞的增殖 一、教学目标 知识方面： 1、简述细胞生长和增殖的周期性。 2、描述细胞的无丝分裂。 能力方面：模拟探究细胞大小与物质运输的关系，探讨细胞不能无限长大的原因。 二、教学重点、难点及解决方法 1、教学重点： ⑴细胞生长和增殖的周期性。 ⑵真核细胞有丝分裂的过程。 解决方法： ⑴用吹塑板做成细胞和染色体模型，边讲解边在黑板粘贴有丝分裂各时期剪贴图。 ⑵运用多媒体再现动态的植物细胞有丝分裂过程。 2、教学难点：真核细胞有丝分裂过程中，各个时期染色体行为和数目的变化，以及DNA数量的变 化。 解决方法：用传统的教学方式与现代教学手段相结合，既让学生感受细胞分裂过程的动态性和连续性，又能克服电教手段转瞬即逝的弊端，再通过表格、曲线图呈现变化。 三、课时安排：2课时 四、教学方法：实验法、讲解法、启发法。 五、教具准备：课件 六、学生活动 1、通过实验，启发学生发现事物的规律性。 2、指导学生阅读教材，找出知识点，回答相关问题。 七、教学程序 第1课时 [问题探讨]出示教材P110图讨论： 1、推测象与鼠相应器官和组织的细胞大小差异如何？ 2、生物体的长大，是靠细胞数量的增多还是靠细胞体积的增大？（让学生明确多细胞生物体体积的增大，即生物体的生长，既靠细胞生长增大细胞的体积，还要靠细胞分裂增加细胞的数量。不同动（植）物同类器官或组织的细胞大小一般无明显差异，器官大小主要决定于细胞数量的多少。）
导言：细胞为什么都那么微小呢？什么因素限制了细胞的长大？让我们通过模拟实验来探讨之。 一、细胞不能无限长大 [实验：细胞大小与物质运输的关系]先引导学生设计模拟实验的方案，然后讨论各种方案的可行性，最后实验按教材P110——111提供的方案。 1、据测量结果计算后填入教材P111表中。 2、写出实验结论。 3、讨论回答教材P111的讨论题。 4、教师总结：细胞体积越大，其相对表面积越小，细胞的物质运输的效率就越低。细胞表面积与体积的关系限制了细胞的长大。 二、细胞通过分裂进行增殖 1、细胞增殖是重要的细胞生命活动，是生物体生长、发育、繁殖、遗传的基础。 2、细胞以分裂的方式进行增殖。细胞在分裂之前，必须进行一定的物质准备。细胞增殖包括 物质准备和细胞分裂整个连续的过程。 有丝分裂 3、真核细胞的分裂方式无丝分裂 减数分裂 三、有丝分裂 引言：有丝分裂是真核生物进行细胞分裂的主要方式。细胞进行有丝分裂具有周期性。（学生阅读教材P112） 教师提问： 1、什么叫细胞周期？ 2、一个细胞周期包括哪两个阶段？ 3、什么是分裂间期，什么是分裂期？哪个时期长？ 4、细胞分裂间期有什么特点？ 5、新的细胞周期从什么开始？ 6、要观察细胞的有丝分裂过程采用什么样的细胞比较好？分裂期细胞有哪些特点呢？下面我 们以高等植物细胞为例，来了解有丝分裂的过程。 教师可先用吹塑板做成细胞和染色体模型，边讲解边在黑板粘贴有丝分裂各时期剪贴图。 1、前期：⑴染色质成为染色体（特点见教材P113）⑵核仁逐渐解体，核膜逐渐消失⑶纺缍体形成⑷染色体散乱地分布在纺缍体的中央（两失两现一散乱）
CCK8法检测细胞增殖预实验
SRT-1720, EX527 —定要应用在白血病细胞株起作用的浓度方可比较对 293T细胞和白血病细胞株的不同影响，请重复实验。 实验日期：2015/08/22-2015/08/27 实验项目：CCK8法检测细胞增殖 实验地点：广西医科大学药基楼14楼生物靶向中心 实验人员：高宗燕、宁海萍、李登峰 实验目的：检测SRT-1720/EX527刺激293T细胞后对细胞增殖的影响 主要试剂：SRT-1720,EX527,CCK8试剂盒 主要仪器：酶标仪 实验步骤： 一、制作标准曲线（测定细胞具体数量时） 1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，然后接种细胞至96孔板。 2、设置4个细胞浓度梯度：0, 2000，4000，8000,每组4个复孔。 3、接种后培养24小时使细胞贴壁，然后加CCK试剂培养4小时后测定OD值，制作出一条以细胞数量为 横坐标（X轴），OD值为纵坐标（Y轴）的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量（试用此标准曲线的前提是实验的条件要一致，便于确定细胞的接种数量以及加入CCK后的培养时间。） 图一、标准曲线 二、细胞增殖检测 1、在96孔板中配置100卩泊勺细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时（在37C, 5% CO2的条件下）。 2、向培养板加入10 ^L SRT-1720（终浓度3um）, EX527 （终浓度100um）。 3、将培养板在培养箱孵育约24h 4、每孔加入10卩L CCK溶液（注意不要再孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数）。
5、将培养板在培养箱内孵育2小时。
6、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。 图二、3um SRT1720刺激293T细胞后的细胞增殖曲线。该曲线呈S形，符合细胞正常生长情况。 图三、100um EX527刺激293T细胞后的细胞增殖曲线。该曲线前部分呈S形，符合细胞正常生长情况，但 在进入对数期之后曲线有下滑，之后进入平台期。 分析： SRT1720为SIRT1特异性活化剂，在前期实验中对白血病细胞株的生长表现出抑制作用，此次实验中SRT1720对正常细胞（293T）的生长无明显抑制作用。暗示SIRT1的活化对正常细胞的生长可能无明显影 响。 小剂量EX527为SIRT1特异性抑制剂，在前期实验中大剂量EX527对白血病细胞株的生长表现出抑制作用，而小剂量EX527无此效应，此次实验中大剂量EX527对正常细胞（293T）的生长可能有轻度抑制作用。但不能以一次实验结果做出肯定的结论，该实验还需重复。
高中生物知识点——细胞的增殖
高中生物知识点——细胞的增殖 知识点1细胞不能无限长大 1.细胞生长的原因 (1)细胞的生长 (2)细胞数目的增多 2.细胞不能无限长大的原因 (1)细胞体积越大，其相对表面积越小，细胞的物质运输效率越低。细胞表面积与体积的关系限制了细胞的生长。 (2)细胞核所控制的细胞质范围有一定的限度，细胞核中的DNA不会随细胞体积的扩大而增加。细胞的核质比限制了细胞的生长。 3.模拟实验 (1)琼脂块的表面积与体积之比：随琼脂块的增大而减小。 (2)NaOH的扩散速率(深度)：随琼脂块的体积增大保持不变。 (3)NaOH扩散的体积与整个琼脂块体积之比：随琼脂块体积的增大而减小。 知识点2细胞通过分裂进行增殖 1．细胞周期
1．细胞的增殖状态 (1)能持续分裂的细胞：红骨髓造血细胞、形成层细胞、根尖分生区细胞等； (2)暂时停止分裂的细胞：肝脏细胞、黄骨髓造血细胞等； (3)不能持续分裂的细胞：高度分化的细胞，如神经细胞、精子等。 3.细胞周期的判断方法 (1)细胞周期以分裂间期为起点，而不能以分裂期为起点。 (2)分裂间期的时间远远长于分裂期。 知识点3有丝分裂 1.真核细胞的分裂方式 真核细胞可进行有丝分裂、无丝分裂和减数分裂。 2.有丝分裂过程（以高等植物细胞为例） (1)分裂间期 完成DNA的复制和有关蛋白质的合成 (2)分裂期
3.有丝分裂中规律性变化规律 (1)有丝分裂相关结构的变化规律 (2)有丝分裂过程中染色体行为变化规律
(3)核DNA、染色体及染色单体数目变化规律(以二倍体为例) 数量变化： 曲线变化模型： (4)染色体、染色单体及DNA三者之间的数量关系 当有染色单体存在时，染色体∶染色单体∶DNA＝1∶2∶2。 当无染色单体存在时，染色体∶DNA＝1∶1。 4.动植物细胞有丝分裂的区别 5.有丝分裂的意义 亲代细胞的染色体经过复制后精确地平均分配到两个子细胞中，保持了细胞的亲子代之间遗传性状的稳定性。
高一生物 细胞的增殖 第2课时示范教案 新人教版
高一生物 细胞的增殖 第 2 课时示范教案 新人教版
●教学过程 ［课前准备］
教师准备一对染色体在有丝分裂过程中变化的模型剪贴图。如图 6—1-2。
图 6—1-1 染色体的复制
图 6—1-2 着丝点分裂，姐妹染色单体分开成两条染色体
学生用橡皮泥制作染色体的模型，以供上课用。
［情境创设］
教师：上节课我们观察植物细胞的有丝分裂，观察到的细胞是死的还是活的？为什么？
学生：是死的，解离的时候已经把细胞杀死了。
教师：为什么要对视野中的细胞进行计数？
学生：因为细胞已经被杀死，我们不能观察到细胞分裂的动态过程，只能用看到的视野中细胞的多少
来说明细胞分裂的某个时期的长短。
教师：同学们回答得很精彩（掌声鼓励）。下面我们就一起来认识有丝分裂的过程。
［师生互动］
教师演示有丝分裂细胞周期的动画课件。
学生观察。
教师引导学生总结：
有丝分裂是真核生物进行细胞分裂的主要方式。细胞进行有丝分裂具有周期性。即连续分裂的细胞，
从一次分裂完成时开始，到下一次分裂完成时为止，为一个细胞周期。一个细胞周期包括两个阶段：分裂
间期和分裂期。
教师：同学们上节课的实验结果怎样呢？
学生：根据实验的计数，我们发现：细胞分裂间期的细胞最多，大约是其他各期细胞的 8 倍。
教师：非常好！引导学生观察课本 P112 表 6—1 不同细胞的细胞周期持续的时间（t/h）。在细胞周期里，
哪一个时期长？
学生：细胞分裂间期。
教师：细胞分裂间期有什么特点呢？
1
EDU-细胞增殖检测
荧光显微镜检测方法(以96孔板，A549贴壁细胞为例) 细胞培养 取对数生长期细胞，以每孔4×103~1×105细胞接种于96孔板中，培养至正常生长阶段。 药物处理 (可选)客户可以根据实验需要进行各种药物处理。 EdU标记 1.1 用细胞培养基按1000：1的比例稀释EdU溶液(试剂A)，制备适量50μM EdU培养基； 注：1)EdU浓度与孵育时间相关，短时间孵育(<2h)宜采用高浓度(10~50 μM)，长时间孵育(>24h)宜采用低浓度(1~10μM)； 2)如果需配置10μM EdU培养基，需调整为5000：1稀释比例； 3)配置好的培养基的保存时间取决于培养基的性质。 表1 EdU培养基及染色反应液的使用量参考 注：1)*表示贴壁细胞通常采用的培养容器，EdU培养基与染色反应液用量以覆盖细胞为宜； 2)悬浮细胞EdU用量依据培养体积而定。 1.2 每孔加入100μL 50μM EdU培养基孵育2小时，弃培养基； 注：1)最佳孵育时间与细胞周期相关(表2)，大多数细胞系均可采用2小时孵育时间； 2)EdU培养基用量以没过细胞为宜，但需要保证EdU孵育时间内的营养物质持续供给(表1)； 1.3 PBS清洗细胞1~2次，每次5分钟。 注：清洗目的是将未渗入DNA的EdU洗脱，清洗方式依据不同的细胞类型而定，贴壁不牢的细胞请降低清洗强度。 表2 EdU孵育时间设定参考
注：1)EdU孵育时间取决于细胞周期，一般为细胞周期的1/10至1/5，但大多数细胞系均可采用2h孵育时间。孵育时间越长，细胞增殖数量就越多； 2)*考虑到细胞培养基、温度、湿度、光线等其他因素的影响，具体实验的细胞群体细胞周期会有所变化。 表3细胞实验EdU孵育浓度及时间参考 注：如果您有采用BrdU进行实验的经验，可以参照BrdU实验的相关参数进行EdU实验。细胞固定化 2.1 每孔加入50μL 细胞固定液(即含4% 多聚甲醛的PBS)室温孵育30分钟，弃固定液；注：1)低浓度的多聚甲醛有利于细胞结构的保持，当需要抗体染色时，需采用Triton X-100透化细胞以利于抗体进入细胞内。 2)可采用其他方式进行细胞固定。 2.2 每孔加入50μL 2 mg/mL 甘氨酸，脱色摇床孵育5分钟后，弃甘氨酸溶液；
高一生物细胞增殖知识点总结
高一生物细胞增殖知识点总结 1、染色质：在细胞核中分布着一些容易被碱性染料染成深色的物质，这些物质是由DNA和蛋白质组成的。在细胞分裂间期，这些物质成为细长的丝，交织成网状，这些丝状物质就是染色质。 2、染色体：在细胞分裂期，细胞核内长丝状的染色质高度螺旋化，缩短变粗，就形成了光学显微镜下可以看见的染色体。 3、姐妹染色单体：染色体在细胞有丝分裂的间期进行自我复制，形成由一个着丝点连接着的两条完全相同的染色单体。。每条姐妹染色单体含1个DNA，每个DNA一般含有2条脱氧核苷酸链。 4、有丝分裂：大多数植物和动物的体细胞，以有丝分裂的方式增加数目。有丝分裂是细胞分裂的主要方式。亲代细胞的染色体复制一次，细胞分裂两次。 5、细胞周期：连续分裂的细胞，从一次分裂完成时开始，到下一次分裂完成时为止，这是一个细胞周期。一个细胞周期包括两个阶段：分裂间期和分裂期。分裂间期：从细胞在一次分裂结束之后到下一次分裂之前，叫分裂间期。分裂期：在分裂间期结束之后，就进入分裂期。分裂间期的时间比分裂期长。 6、纺锤体：是在有丝分裂中期细胞质中出现的结构，
它和染色体的运动有密切关系。 7、赤道板：细胞有丝分裂中期，染色体的着丝粒准确地排列在纺锤体的赤道平面上，因此叫做赤道板。 8、无丝分裂：分裂过程中没有出现纺锤体和染色体的变化。例如，蛙的红细胞。 1)染色体的数目＝着丝点的数目。 2)DNA数目的计算分两种情况：①当染色体不含姐妹染色单体时，一个染色体上只含有一个DNA分子；②当染色体含有姐妹染色单体时，一个染色体上含有两个DNA分子。 1、染色质、染色体和染色单体的关系：第一，染色质和染色体是细胞中同一种物质在不同时期细胞中的两种不同形态。第二，染色单体是染色体经过复制后仍连接在同一个着点的两个子染色体；当着丝点分裂后，两染色单体就成为独立的染色体。 2、染色体数、染色单体数和DNA分子数的关系和变化规律：细胞中染色体的数目是以染色体着丝点的数目来确定的，无论一个着丝点上是否含有染色单体。在一般情况下，一个染色体上含有一个 DNA分子，但当染色体复制后且两染色单体仍连在同一着丝点上时，每个染色体上则含有两个DNA分子。 3、植物细胞有丝分裂过程：分裂间期：完成DNA分子的复制和有关蛋白质的合成。结果：每个染色体都形成两个
细胞增殖MTT检测经验总结
细胞增殖检测：MTT实验经验总结 MTT分析法以活细胞代谢物还原剂3-（4，5）-dimethylthiahiazo （-z-y1）-3，5-di- phenytetrazoliumromide，MTT噻唑蓝为基础。MTT为黄色化合物，是一种接受氢离子的染料，可作用于活细胞线粒体中的呼吸链，在琥珀酸脱氢酶和细胞色素C的作用下tetrazolium环开裂，生成蓝色的formazan结晶，formazan结晶的生成量仅与活细胞数目成正比（死细胞中琥珀酸脱氢酶消失，不能将MTT还原）。还原生成的formazan结晶可在含50%的N，N-二甲基甲酰胺和20%的十二甲基磺酸钠（pH 4.7）的MTT溶解液中溶解，利用酶标仪测定490 nm处的光密度OD值，以反映出活细胞数目。也可以用DMSO来溶解。 MTT粉末和溶液保存时都需要避光，用铝箔纸包好就可以。实验的时候我一般关闭超净台上的日光灯来避光，觉得这样比较好。 一、步骤 1、接种细胞 用含10%胎小牛血清得培养液配成单个细胞悬液，以每孔1000－10000个细胞接种到96孔板，每孔体积200ul。 2、培养细胞 同一般培养条件，培养3－5天（可根据试验目的和要求决定培养时间）。 3、呈色 培养3－5天后，每孔加MTT溶液（5mg/ml用PBS 配）20ul.继续孵育4小时，终止培养，小心吸弃孔内培养上清液，对于悬浮细胞需要离心后再吸弃孔内培养上清液。每孔加150ul DMSO，振荡10分钟，使结晶物充分融解。 4、比色 选择490nm波长，在酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值，记录结果，以时间为横坐标，吸光值为纵坐标绘制细胞生长曲线。 二、注意事项 1、选择适当得细胞接种浓度。 2、避免血清干扰：一般选小于10%的胎牛血清的培养液进行试验。在呈色后尽量吸尽孔内残余培养液。 3、设空白对照：与试验平行不加细胞只加培养液的空白对照。其他试验步骤保持一致，最后比色以空白调零。 MTT实验吸光度最后要在0-0.7之间，超出这个范围就不是直线关系， IC50是半抑制率，意思是抑制率50％的时候药物的浓度。把药品稀释成不同的浓度，然后计算各自的抑制率，以药品的浓度为横坐标，抑制率为纵坐标作图，然后得到50％抑制率时候的药品浓度，就是IC50。要点：药品2倍稀释，多做梯度，做点线图即可！ 三、举例 各组浓度0.1、0.01、0.001、0.0001、0.00001、0.000001，稀释倍数为10，最大浓度为0.1，抑制率为0.95、0.80、0.65、0.43、0.21，0.06。代入计算公式：
Brdu细胞增殖检测试验
Brdu检测细胞增殖实验 实验操作: 1．铺细胞，每个3.5cm dish 10万个，在37℃、5%CO孵箱中培养72h （细胞密度2至50-60%左右）。 2．Brdu（5-溴-2′-脱氧尿苷）加入培养细胞中，1mg/ml，标记48h。(量：Brdu以铺满整个dish底面为准。) 3．固定：PBS洗细胞爬片3次，每次5min，在摇床上晃动清洗，4%PFA 固定30min。 4．变性：将固定好的细胞爬片用PBS洗3次，每次5min，2mol/L的HCl 在37℃条件下变性5min，可放置于37℃恒温孵箱，应用封口膜把培养皿封好。（120r/m） 5．中和：0.1mol/L的硼酸钠（PH8.3）中和10min，PBS洗3次，每次5min。（50r/m） 6．加入1ml的0.2%TritonX-100，10min。 7．吸出TritonX-100，用PBS洗3次，每次5min。 8．加入1ml 3%的BSA封闭，室温1h，可在摇床上晃动。 9．吸出BSA，用PBS洗3次，每次5min。 10．加一抗（尿嘧啶脱氧核苷Brdu（鼠单抗）1:200），用1%BSA稀释，4度过夜。 11．将孵好一抗的细胞爬片用PBS洗3次，每次10min。 12．加二抗（羊抗鼠IgG/Alexa Fluor 594 1: 100），用1%BSA稀释，避光室温孵育1h。（60 r/min） 13．将孵好二抗的细胞爬片用PBS洗3次，每次10min。
14．加DAPI染细胞核，储存浓度为1mg/ml，应将DAPI完全混匀，可用手弹几下，一般稀释比例为1:1000（用PBS稀释），避光室温反应10min。 。10min次，每次3洗PBS染好的细胞爬片用DAPI．将15． 16．中性树胶封片，荧光显微镜观察，200×镜下取5个视野，计数Brdu 阳性细胞和蓝染的细胞核数目，然后进行统计分析。 试剂配制： a.Brdu的溶解：室温下，将250mg粉末溶于2.5ml的DMSO中，储存浓度为100mg/ml分装，每管120ul，-20℃保存。 b. 2 mol/L HCl：取8.333mL 12 mol/L HCl的浓HCl，加入DDW定容至 50 mL。 c. 0.1 mol/L硼酸钠：称量1.907g硼砂（NaB·10HO 381.36 g/mol），加入DDW224定容至50 mL，调PH=8.3。 d. 0.2% Triton X-100：有0.5%的 Triton-100（2.5 mL原液溶解于47.5 mL的PBS中），用PBS稀释至0.2%。 e. 3% BSA：称量1.5g BSA，溶解于50 mL的PBS中。 f. 1% BSA：用PBS稀释3%BSA至1%。 g. 4%FPS：4%多聚甲醛。 我是用DDW配制的，后来我发现很难溶，磁力搅拌器加热搅拌，虽然温度控制在60℃以下，也总是担心多聚甲醛分解为甲醛，所以，我就总结为如下：提前配制。 4%多聚甲醛溶液（pH7.2）试剂：多聚甲醛（PFA） 4g DDW 至100ml 配制方法：称取4g多聚甲醛（粉末状），置于三角烧瓶中，加入80mlDDW，放入37恒温水浴箱，每隔1-2小时摇晃混匀，16-24小时PFA会完全溶解。
CCK8检测细胞增殖毒性的原理、方法及注意事项
CCK8检测细胞增殖/毒性的原理、方法及注意事项 一、CCK8检测细胞增殖/毒性的原理 Cell Counting Kit-8（简称CCK-8）试剂可用于简便而准确的细胞增殖 和毒性分析。其基本原理为：该试剂中含有WST-8【化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物（Formazan dye）。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。 用途：药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验 CCK8的优点： ?使用方便，省去了洗涤细胞，不需要放射性同位素和有机溶剂； ?CCK-8法能快速检测； ?CCK-8法的检测灵敏度很高，甚至可以测定较低细胞密度； ?CCK-8法的重复性优于MTT 法； ?CCK-8法对细胞毒性小； ?CCK-8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液，毋需预制，即开即用。 CCK8的缺点： ?与MTT法相比，CCK8和XTT的价格比较贵。 ?CCK8试剂的颜色为淡红色，与含酚红的培养基颜色接近，不注意的话容易产生漏加或多加。 与以往的增殖/毒性测定试剂相比较： 检测方法MTT法XTT法WST-1法CCK8法甲臢产物的水差（需加有机好好好
溶性溶剂溶解） 产品性状粉末2瓶溶液溶液1瓶溶液 使用方法配成溶液后 使用 现配现用即开即用即开即用检测灵敏度高很高很高高 检测时间较长较短较短最短 检测波长560-600nm420-480nm420-480nm430-490nm 细胞毒性高，细胞形态 完全消失很低，细胞形 态不变 很低，细胞形 态不变 很低，细胞形 态不变 试剂稳定性一般较差一般很好 批量样品检测可以非常适合非常适合非常适合便捷程度一般便捷便捷非常便捷 二、CCK8检测细胞增殖/毒性的方法 实验一：细胞增殖分析 1、制备细胞悬液：细胞计数 2、接种到96孔板中：根据合适的铺板细胞数，每孔约100ul细胞悬液，同样的样本可做3个重复。 3、37℃培养箱中培养：细胞接种后贴壁大约需要培养2-4小时，如果 不需要贴壁，这步可以省去。 4、加入10ul CCK8：由于每孔加入CCK8量比较少，有可能因试剂沾在孔壁上而带来误差，建议在加完试剂后轻轻敲击培养板以帮助混匀。或 者直接配置含10%CCK8的培养基，以换液的形式加入。 5、培养1-4小时:细胞种类不同，形成的Formazan的量也不一样。如 果显色不够的话，可以继续培养，以确认最佳条件。特别是血液细胞形 成的Formazan很少，需要较长的显色时间（5-6小时）。 6、测定450nm吸光度：建议采用双波长进行测定，检测波长450-490nm，参比波长600-650nm。 实验二：细胞毒性分析 1、制备细胞悬液：细胞计数 2、接种到96孔板中：根据合适的铺板细胞数，每孔约100ul细胞悬液，同样的样本可做3个重复。 3、37℃培养箱中培养：细胞接种后贴壁大约需要培养2-4小时，如果 不需要贴壁，这步可以省去。
高中生物必修一细胞的增殖.docx
第 1节细胞的增殖 1.多细胞生物体体积的增大，即生物的生长，既靠增大细胞的体积，还要靠增加细胞的数量。 2.不同动植物同类器官或组织的细胞大小一般，器官大小主要决定于。 3.细胞体积越大，其相对表面积越，细胞的物质运输的效率就越。的关系限制了细胞的长大。 4.是重要的生命活动，是生物体生长、发育、繁殖、遗传的基础。 5.细胞在分裂之前，必须进行一定的。细胞增殖包括：和整个连续的过程。 6.细胞周期：。其包括两个阶段：。 7.分裂间期为分裂期进行活跃的物质准备，完成，同时细胞有。 8.分裂期的前期：期的染色质丝螺旋缠绕，缩短变粗，成为染色体。核仁逐渐，核膜逐渐。从细胞的发出，形成一个的纺锤体。染色体分布在纺锤体的中央。 9.分裂期的中期：每条染色体的排列在细胞中央的一个平面上，这个平面的位置成为。 10.分裂期的后期：每个分裂成两个，分开，成为两条子染色体，由纺 锤丝着分别向细胞的移动。这两套染色体的和完全相同。 11.分裂期的末期：纺锤丝逐渐，出现了新的。在赤道板的位置出现了一 个，细胞板有细胞的向，逐渐形成了新的。大多数子细 胞进入下一个细胞周期的状态。 12.动物细胞有丝分裂的过程，与植物细胞的基本相同。不同的特点是：第一，动物细胞有由一对构成的中心体，中心粒在倍增，成为两组。中心粒的，发出无数条放射状的， 两组中心粒之间的形成了。第二，动物细胞分裂的末期不形成细胞板，而是细 胞膜从细胞的，最后把细胞成两部分，每部分都含有一个。 13.有丝分裂的重要意义，是将亲代细胞的。 14.由于染色体上有遗传物质，因而在细胞的和之间保持了遗传性状的。 15.因为在分裂过程中没有出现的变化，所以叫做。 16.细胞无丝分裂的过程比较简单，一般是，，缢裂成为两个细胞核；接着，整个细胞从中部成两部分，形成两个子细胞。 17.在高等植物体内，有丝分裂常见于等细胞。由于各个细胞的分裂是进行的，因此在同一分生组织中可以看到处于的细胞。染色体容易被着色。 18.解离液是，目的是用药液使。 19.漂洗：待根尖后，用镊子取出，放入盛有的玻璃皿中漂洗。 20.染色：把根尖放入盛有质量浓度为的龙胆紫溶液或。 21.制片的目的是使，有利于观察。 22.把制成的装片先放在显微镜下观察，扫视整个装片，找到分生区细胞：。再换成显微镜仔细观察，首先，然后再观察。注意观察各时期细胞内的特点。最后观察的细胞。 23.有条件的学校，可以观察的有丝分裂装片。 24.装片的制作流程为：。 25.统计全班的结果，求每个时期细胞数目的。
细胞增殖检测MTT法
细胞增殖检测：MTT法 MTT分析法以活细胞代谢物还原剂3-（4，5）-dimethylthiahiazo （-z-y1）-3，5-di- phenytetrazoliumromide，MTT噻唑蓝为基础。MTT为黄色化合物，是一种接受氢离子的染料，可作用于活细胞线粒体中的呼吸链，在琥珀酸脱氢酶和细胞色素C的作用下tetrazolium环开裂，生成蓝色的formazan结晶，formazan结晶的生成量仅与活细胞数目成正比（死细胞中琥珀酸脱氢酶消失，不能将MTT还原）。还原生成的formazan结晶可在含50%的N，N-二甲基甲酰胺和20%的十二甲基磺酸钠（pH 4.7）的MTT溶解液中溶解，利用酶标仪测定490 nm处的光密度OD值，以反映出活细胞数目。也可以用DMSO 来溶解。 MTT粉末和溶液保存时都需要避光，用铝箔纸包好就可以。实验的时候我一般关闭超净台上的日光灯来避光，觉得这样比较好。 一、步骤 1、接种细胞 用含10%胎小牛血清得培养液配成单个细胞悬液，以每孔1000－10000个细胞接种到96孔板，每孔体积200ul。 2、培养细胞 同一般培养条件，培养3－5天（可根据试验目的和要求决定培养时间）。 3、呈色 培养3－5天后，每孔加MTT溶液（5mg/ml用PBS 配）20ul.继续孵育4小时，终止培养，小心吸弃孔内培养上清液，对于悬浮细胞需要离心后再吸弃孔内培养上清液。每孔加150ul DMSO，振荡10分钟，使结晶物充分融解。 4、比色
选择490nm波长，在酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值，记录结果，以时间为横坐标，吸光值为纵坐标绘制细胞生长曲线。 二、注意事项 1、选择适当得细胞接种浓度。 2、避免血清干扰：一般选小于10%的胎牛血清的培养液进行试验。在呈色后尽量吸尽孔内残余培养液。 3、设空白对照：与试验平行不加细胞只加培养液的空白对照。其他试验步骤保持一致，最后比色以空白调零。 MTT实验吸光度最后要在0-0.7之间，超出这个范围就不是直线关系， IC50是半抑制率，意思是抑制率50％的时候药物的浓度。把药品稀释成不同的浓度，然后计算各自的抑制率，以药品的浓度为横坐标，抑制率为纵坐标作图，然后得到50％抑制率时候的药品浓度，就是IC50。要点：药品2倍稀释，多做梯度，做点线图即可！ 三、举例 各组浓度0.1、0.01、0.001、0.0001、0.00001、0.000001，稀释倍数为10，最大浓度为0.1，抑制率为0.95、0.80、0.65、0.43、0.21，0.06。代入计算公式： Pm=0.95 Pn=0.06 P=0.95+0.80+0.65+0.43+0.21+0.06=3.1 Xm=lg0.1=-1 lgI=lg0.1/0.01=1 lgIC50=-1-1*（3.1-（3-0.95-0.06）/4）=-3.6025 IC50=0.00025
高中生物 《细胞的增殖》练习题
细胞的增殖练习 一．选择题 1．高等动物器官的大小主要决定于( ) A．细胞体积的大小，B．细胞数量的多少 C．细胞体积的大小和数量的多少D．细胞大小一般无明显差别 2．下列叙述正确的是( ) A．细胞只能适度增大，不能无限增大B．细胞越小越好 C．生物细胞的大小可以各种各样D．细胞越大越好 3．在一个细胞周期中( ) A、分裂间期占有的时间长 B、分裂间期占有的时间短 C、分裂期占有的时间长 D、分裂间期和分裂期占有的时间相当 4．关于植物细胞有丝分裂中期叙述不正确的是( ) A．染色体的形态较稳定，数目较清晰 B．每条染色体都有两条染色单体 C．每条染色体的着丝点都排列在细胞中央的赤道板位置上 D．每条染色体中只有一个ＤＮＡ分子 5．细胞核中每条染色体着丝点分裂为两个，一条染色体的两条染色单体彼此分开的时期是A．前期 B，中期 C，后期 D．末期( ) 6．植物有丝分裂期中，不具有姐妹染色体的是( ) A．前期 B．中期 C．后期 D．末期 7．动物细胞中心粒倍增的时期是( ) A．分裂间期 B．分裂前期 C．中期 D．后期 8．生物有丝分裂使细胞的亲代和子代保持遗传性状的稳定，这是因为 ( ) A．子代细胞和亲代细胞的染色体上的遗传物质DNA不变 B．分裂间期染色体和DNA自我复制一次 C．分裂后期染色体和DNA分子平均分配了一次 D．分裂期细胞平均分裂了一次 9．动物细胞的无丝分裂中( ) A．一般是细胞核先延长，中部凹陷缢裂为两个细胞核 B．一般是整个细胞先延长，中部凹陷缢裂为两个细胞 C．有纺锤丝的出现 D．也有染色体的出现 10．人体皮肤受伤后，伤口处细胞分裂促使伤口愈合，这种细胞分裂是( ) A．无丝分裂B．有丝分裂C．减数分裂D．分裂生殖11．在观察洋葱根尖细胞有丝分裂的过程中，你观察时，处于哪一个时期的细胞最多A．分裂中期B．分裂后期C．分裂前期或分裂末期D．分裂间期( ) 12．洋葱根尖细胞染色用龙胆紫溶液或醋酸洋红液，主要是因为 A．易使细胞染色 B．细胞质着色( ) C．细胞壁着色 D．染色体着色 13．有丝分裂中“丝”指的是( ) A．染色质丝 B．染色体 C．姐妹染色体 D．纺锤丝 14．细胞既不能无限长大，也不能无限小，细胞最小的限度是由什么决定的( ) A．生物的种类所决定 B．细胞的表面积与体积的比
RTCA技术在细胞增殖检测中的应用
Non-Agonistic Bivalent Antibodies That Promote c-MET Degradation and Inhibit Tumor Growth and Others Specific for Tumor Related c-MET Sameer A.Greenall1¤,Ermanno Gherardi2,Zhanqi Liu3,Jacqueline F.Donoghue1,Angela A.Vitali3, Qian Li1,Roger Murphy3,Luisa Iamele2,Andrew M.Scott3.,Terrance G.Johns1*. 1Oncogenic Signaling Laboratory,Monash Institute of Medical Research,Monash University,Clayton,Victoria,Australia,2Medical Research Council Centre,Cambridge, United Kingdom,3Tumour Targeting Laboratory,Ludwig Institute for Cancer Research,Heidelberg,Victoria,Australia Abstract The c-MET receptor has a function in many human cancers and is a proven therapeutic target.Generating antagonistic or therapeutic monoclonal antibodies(mAbs)targeting c-MET has been difficult because bivalent,intact anti-Met antibodies frequently display agonistic activity,necessitating the use of monovalent antibody fragments for therapy.By using a novel strategy that included immunizing with cells expressing c-MET,we obtained a range of mAbs.These c-MET mAbs were tested for binding specificity and anti-tumor activity using a range of cell-based techniques and in silico modeling.The LMH 80antibody bound an epitope,contained in the small cysteine-rich domain of c-MET(amino acids519–561),that was preferentially exposed on the c-MET precursor.Since the c-MET precursor is only expressed on the surface of cancer cells and not normal cells,this antibody is potentially tumor specific.An interesting subset of our antibodies displayed profound activities on c-MET internalization and degradation.LMH87,an antibody binding the loop connecting strands3d and4a of the7-bladed b-propeller domain of c-MET,displayed no intrinsic agonistic activity but promoted receptor internalization and degradation.LMH87inhibited HGF/SF-induced migration of SK-OV-3ovarian carcinoma cells,the proliferation of A549 lung cancer cells and the growth of human U87MG glioma cells in a mouse xenograft model.These results indicate that c-MET antibodies targeting epitopes controlling receptor internalization and degradation provide new ways of controlling c-MET expression and activity and may enable the therapeutic targeting of c-MET by intact,bivalent antibodies. Citation:Greenall SA,Gherardi E,Liu Z,Donoghue JF,Vitali AA,et al.(2012)Non-Agonistic Bivalent Antibodies That Promote c-MET Degradation and Inhibit Tumor Growth and Others Specific for Tumor Related c-MET.PLoS ONE7(4):e34658.doi:10.1371/journal.pone.0034658 Editor:Jun Li,Sun Yat-sen University Medical School,China Received September14,2011;Accepted March6,2012;Published April12,2012 Copyright:?2012Greenall et al.This is an open-access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution License,which permits unrestricted use,distribution,and reproduction in any medium,provided the original author and source are credited. Funding:This work was supported by funding from the National Health and Medical Research Council of Australia(#1012020,#280912and#487922),the James S.McDonnell Foundation(#220020173)and the Victorian Government’s Operational Infrastructure Support Program.T.G.J.is a recipient of a Clinical Fellowship from the Victorian Cancer Agency.The funders had no role in study design,data collection and analysis,decision to publish,or preparation of the manuscript. Competing Interests:The authors have declared that no competing interests exist. *E-mail:terry.johns@https://www.360docs.net/doc/4d1172858.html, .These authors contributed equally to this work. ¤Current address:CSIRO Division of Materials Science and Engineering,Parkville,Victoria,Australia Introduction C-MET,the receptor for hepatocyte growth factor/scatter factor(HGF/SF),is produced as a170kDa precursor protein (p170c-MET)which is subsequently cleaved by the pro-protein convertase furin to produce a disulphide-linked heterodimeric receptor tyrosine kinase(RTK).The mature receptor consists of an extracellular50kDa a-chain and an extracellular/intracellular 145kDa b-chain that contains the TK domain.The a-chain and the N-terminal part of the b-chain associate to form a7-bladed b-propeller,the SEMA domain,which contains the main binding site for HGF/SF[1].Upon HGF/SF binding,c-MET homo-dimerizes leading to activation of its TK domain,as well as autophosphorylation of several tyrosine residues including the C-terminal residues Y1349and Y1356.Phosphorylated Y1349and Y1356form a multi-substrate docking site capable of binding several adaptor proteins to initiate downstream signaling associ-ated with the PI3K/Akt and Ras/MAPK pathways[1,2]. The HGF/SF:c-MET signaling axis has an important role in the initiation and progression of several aggressive cancers including glioblastoma multiforme(GBM)[3,4,5].As such,c-MET has been intensely investigated as a therapeutic target with several classes of agents being developed as therapeutics,including small molecular weight tyrosine kinase inhibitors(TKIs),which prevent the activation of c-MET by acting as ATP-binding competitors.These TKIs have been shown to have anti-tumor activity in both in vitro and in vivo models(reviewed in[2,6]),with several candidates currently being evaluated clinically.Monoclo-nal antibodies(mAbs)directed to c-MET or HGF/SF represent an alternative class of therapeutics that is attracting considerable interest.Treatment of U87MG GBM xenografts with Rilotumu-mab,a fully human neutralizing antibody directed to HGF/SF, significantly inhibited tumor growth in mouse xenograft models [7,8].Another anti-HGF/SF mAb,TAK-701,effectively reversed c-MET-induced gefitinib resistance in several in vitro and in vivo models of NSCLC[9].