选修3(人教版)1.2基因工程操作的基本步骤

专题1 1.2 基因工程的基本操作程序

课前预习案

一、预习目标

简述基因工程原理及基本操作程序。

二、预习内容

1.基因工程的基本操作程序主要包括哪四个步骤？

2.目的基因主要是指什么，也可以是什么？目前常用的获取目的基因的方法有哪三种？

3.什么是基因文库？有哪几种？如何区分？

4.从基因文库中获取目的基因的依据有哪些？（找出5条）

5.利用PCR技术扩增目的基因：

（1）PCR的含义：一项在生物体外_____特定DNA片段的核酸合成技术。其原理是。（2）前提：有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成_________。

（3）过程：目的基因DNA受热变性后解链为，与相应互补序列结合，然后在作用下进行延伸，形成DNA。

（4）方式：成______形式扩增（约为_____，其中n为扩增循环的次数）。

6.人工合成法：当基因较，核苷酸序列时，可以通过DNA合成仪用化学方法直接合成。

7.基因工程的核心是什么？目的是什么？

8.一个基因表达载体由什么组成？各有什么功能（作用）？

9.什么是转化？

10.将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是什么?除此之外，还有什么方法？

11.转基因动物中采用最多，最为有效的将目的基因导入动物细胞的方法是什么？

12.大肠杆菌细胞最常用的转化方法是：首先用__ _处理细胞，使细胞处于一种____________ _____ 的生理状态，这种细胞称为__________。第二步是将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与细胞混合，在一定的温度下促进细胞吸收DNA分子，完成转化过程。

13.目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键是什么？检测方法是什么？

14.检测目的基因是否发挥功能作用的第一步是什么？检测方法是什么？

15.检测目的基因是否翻译成蛋白质的方法是什么？除了上述分子检测外，有时还需要进行什么水平的鉴定？

三、预习自测

1.下列有关基因工程操作顺序的组合中，正确的一组是（）

①目的基因的检测与表达②目的基因与运载体结合③将目的基因导入受体细胞④目的基因的提取

A、①②③④

B、④③②①

C、④②③①

D、③④②①

2.下列有关基因工程技术的叙述，正确的是( )

A．重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶和基因进入受体细胞的载体

B．所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列

C．选用细菌作为重组质粒的受体细胞主要是因为细菌繁殖快、遗传物质少

D．只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达

3.下列属于获取目的基因的方法的是( )

①利用mRNA反转录形成②从基因组文库中提取③从受体细胞中提取

④利用PCR技术⑤利用DNA转录⑥人工合成

A．①②③⑤B．①②⑤⑥C．①②③④D．①②④⑥

四、提出疑惑

同学们，通过你的自主学习，你还有哪些疑惑？

课内探究案

一、学习目标及重难点：

1、简述基因工程原理及基本操作程序。

2、尝试设计某一转基因生物的研制过程。

学习重点：基因工程基本操作程序的四个步骤。

学习难点：（1）从基因文库中获取目的基因。（2）利用PCR技术扩增目的基因。

二、学习过程

（一）目的基因的获取

1.PCR技术与DNA复制有何异同

比较项目DNA复制PCR技术

不同点场所酶引物温度

相同点

2.如何区分不同的基因文库？（见课本第10页表格）

（二）基因表达载体的构建

1.作为基因工程表达载体，只需含有目的基因就可以完成任务吗？为什么？

2.基因表达载体的构建需要哪些工具酶？

3.将目的基因与运载体混合并用DNA连接酶处理后，会出现几种结果？

（三）将目的基因导入受体细胞

1.根据农杆菌可将目的基因导入双子叶植物的机理，你能分析出农杆菌不能将目的基因导入单子叶植物的原因吗？若想将一个抗病基因导入单子叶植物，你应该如何做？

生物种类植物细胞动物细胞微生物细胞

常用方法

受体细胞

转化过程

（四）目的基因的检测与鉴定

1.为什么要有“目的基因检测与鉴定”这一步？

2.分子检测过程中，有哪几种杂交带？各说明什么问题？

基因工程的基本操作步骤主要方法、技术或组成

步骤一：

步骤二：

步骤三：导入植物细胞：导入动物细胞：导入微生物细胞：

步骤四：

β-珠蛋白是动物血红蛋白的重要组成成分。当它的成分异常时，动物有可能患某种疾病，如镰刀形细胞贫血症。假如让你用基因工程的方法，使大肠杆菌生产出鼠的β-珠蛋白，想一想，应如何进行设计？

四、当堂检测

1.下列关于基因工程的叙述，正确的是（）

A.基因工程经常以抗菌素抗性基因为目的基因

B.细菌质粒是基因工程常用的运载体

C.通常用一种限制性核酸内切酶处理含目的基因的DNA ，用另一种处理运载体DNA

D.为培育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为载体 2.PCR 技术扩增DNA ，需要的条件是（）

①目的基因 ②四种脱氧核苷酸 ③DNA 聚合酶等 ④mRNA ⑤核糖体 ⑥RNA 引物

A ．①②③⑥

B ．②③④⑥

C ．①②③

D ．①②⑤⑥ 3.基因工程是在DNA 分子水平上进行设计施工的，在其基本操作步骤中，不进行碱基互补配对步骤是 A ．人工合成基因 B ．目的基因与运载体结合

C ．将目的基因导入受体细胞

D ．目的基因的检测和表达

4.目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过鉴定和检测才能知道。下列属于目的基因检测和鉴定的是（）

①检测受体细胞是否有目的基因 ②检测受体细胞是否有致病基因 ③检测目的基因是否转录mRNA ④检测目的基因是否翻译蛋白质 A.①②③ B.②③④ C.①③④ D.①②④ 5.人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体加工合成。通过转基因技术，可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是（）

A ．大肠杆菌

B ．酵母菌

C ．T4噬菌体

D ．质粒DNA

课后练习与提高

1.应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的。这里的基因探针是指（）

A.人工合成的免疫球蛋白的DNA 分子

B.用放射性同位素或荧光分子等标记的蛋白质分子

C.人工合成的苯丙氨酸羟化酶的DNA 分子

D.用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA 分子 2.下列获取目的基因的方法中需要模板链的是( )

①从基因文库中获取目的基因 ②利用PCR 技术扩增目的基因 ③反转录法 ④通过DNA 合成仪利用化学方法人工合成

A ．①②③④

B ．①②③

C ．②③④

D ．②③

3.下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。

（）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？为什么？人胰岛细胞

大肠杆菌

胰岛素 mRNA

①

人胰岛素人胰岛素

大量的A

重复进行

③

④

②

⑤ ⑥

⑦

⑧

⑨ ⑩

。

（2）过程②必需的酶是酶，过程③必需的酶是酶。

（3）若A中共有a个碱基对，其中鸟嘌呤有b个，则③④⑤过程连续进行4次，至少需要提供胸腺嘧啶个。

（4）在利用AB获得C的过程中，必须用切割A和B，使它们产生，再加入，才可形成C。

（5）为使过程⑧更易进行，可用（药剂）处理D。

(6)上述过程中涉及的现代生物技术有。

(7)在利用大肠杆菌生产人胰岛素过程中，目的基因是，所用载体是。表达载体的结构组成包括____________、____________、____________、____________。

(8)目的基因在大肠杆菌中表达时，必须经过和过程。

专题1 1.2 基因工程的基本操作程序

【课前预习学案参考答案】

1.目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定

2.编码蛋白质的基因一些具有调控作用的因子从基因文库中获取目的基因；利用PCR技术扩增目的基因；通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。

3.基因文库是指将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因。有基因组文库、部分基因文库两种。区别见课本第10页表格。

4.基因的核苷酸序列；基因的功能；基因在染色体上的位置；基因的转录产物mRNA；基因的表达产物蛋白质。

5.（1）复制 DNA复制（2）引物（3）单链引物单链 DNA聚合酶（4）指数2n

6.小已知人工

7.基因表达载体的构建使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给后代；使目的基因能够表达和发挥作用。

8.组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因（如抗生素基因）

①启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。

②终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端,能使转录在所需要的地方停下来。

③标记基因的作用：鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。

9.目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程

10.农杆菌转化法基因枪法、花粉管通道法 11.显微注射技术 12. Ca2+ 能吸收周围环境中DNA 分子感受态感受态13.检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因 DNA分子杂交

14.检测目的基因是否转录出了mRNA 分子杂交技术 15.抗原-抗体杂交个体生物学水平

三、预习自测 1.C 2.C 3. D

【课内探究案参考答案】

比较项目DNA复制PCR技术

不同点场所生物体内生物体外酶解旋酶、DNA聚合酶DNA聚合酶

引物RNA引物RNA引物

温度常温55～95℃

相同点原理相同

（二）基因表达载体的构建

1.不可以。因为目的基因在表达载体中得到表达并发挥作用，还需要有其他控制元件，如启动子、终止子和标记基因等。必须构建上述元件的主要理由是：

（1）生物之间进行基因交流，只有使用受体生物自身基因的启动子才能比较有利于基因的表达；（2）通过cDNA文库获得的目的基因没有启动子，只将编码序列导入受体生物中无法转录；

（3）目的基因是否导入受体生物中需要有筛选标记；

（4）为了增强目的基因的表达水平，往往还要增加一些其他调控元件，如增强子等；

（5）有时需要确定目的基因表达的产物存在于细胞的什么部位，往往要加上可以标识存在部位的基因（或做成目的基因与标识基因的融合基因），如绿色荧光蛋白基因等。

2.限制酶、DNA连接酶

3.目的基因-运载体连接、运载体-运载体连接、目的基因-目的基因（三）将目的基因导入受体细胞

1根瘤农杆菌广泛存在于双子叶植物中。根瘤农杆菌具有趋化性，即植物的受伤组织会产生一些糖类和酚类物质吸引根瘤农杆菌向受伤组织集中。研究证明，主要酚类诱导物为乙酰丁香酮和羧基乙酰丁香酮，这些物质主要在双子叶植物细胞壁中合成，通常不存在于单子叶植物中，这也是单子叶植物不易被根瘤农杆菌侵染的原因。

利用农杆菌侵染单子叶植物进行遗传转化时，是需要加上述酚类物质的，同时单子叶植物种类不同，农杆菌侵染进行遗传转化的效果也有很大差异。

生物种类植物细胞动物细胞微生物细胞

常用方法农杆菌转化法显微注射技术Ca2＋处理法

受体细胞体细胞受精卵原核细胞

转化过程将目的基因插入到Ti质粒的

T—DNA上→农杆菌→导入

植物细胞→整合到受体细胞

的DNA上→表达

将含有目的基因的表达载

体提纯→取卵（受精卵）

→显微注射→受精卵发育

→获得具有新性状的动物

Ca2＋处理细胞→感受态

细胞→重组表达载体与

感受态细胞混合→感

受态细胞吸收DNA分子

（四）目的基因的检测与鉴定

1.目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性。

2.见答案最后的附加。基本操作如下：（1）从小鼠中克隆出β-珠蛋白基因的编码序列（cDNA）。（2）将cDNA前接上在大肠杆菌中可以适用的启动子，另外加上抗四环素的基因，构建成一个表达载体。（3）将表达载体导入无四环素抗性的大肠杆菌中，然后在含有四环素的培养基上培养大肠杆菌。如果表达载体未进入大肠杆菌中，大肠杆菌会因不含有抗四环素基因而死掉；如果培养基上长出大肠杆菌菌落，则表明β-珠蛋白基因已进入其中。（4）培养进入了β-珠蛋白基因的大肠杆菌，收集菌体，破碎后从中提取β-珠蛋白。

五、当堂检测 1.B 2.A 3.C 4. C 5. B

【课后练习与提高参考答案】 1. D 2. D

3. （1）不能皮肤细胞中的胰岛素基因未表达（或未转录），不能形成胰岛素mRNA

（2）逆转录解旋（3）15（a－b）（4）同一种限制性内切酶相同的黏性末端 DNA 连接酶（5）CaCl2 （6）基因工程（7）人胰岛素基因质粒目的基因启动子终止子标记基因（8）转录翻译

类型步骤检测内容方法结果显示

分子检测第一步目的基因是否进入受体细胞

DNA分子杂交（DNA和

DNA之间）

是否成功显示出杂交带第二步目的基因是否转录出mRNA

分子杂交技术（DNA和

mRNA之间）

是否成功显示出杂交带第三步目的基因是否翻译出蛋白质抗原—抗体杂交是否成功显示出杂交带

个体水平鉴定包括抗虫、抗病的接种实验，以确定是否有抗性以及抗性的程度；基因工程产品与天然产品的活性比较，以确定功能是否相同等

基因工程主要内容及流程

基因工程制药姓名：惠霞学号：2011506024 班级：2011级生技1 班

基因工程制药一．基因工程制药常用的工具酶：基因工程的重要特点之—是在体外实行DNA分子的切割和重新连接。例如要取得所需药物之目的基因并要将此特定目的基因与载体DNA连接在—起，在很大程度上要依赖于某些工具酶。 (一) 限制酶(Restriction enzymes) 限制酶即限制性核酸切酶的简称，是一类专一性很强的核酸切酶。与一般的DNA水解酶不同之处在于它们对碱基作用的专一性上及对磷酸二酯键的断裂方式上具有一些特殊的性质。限制酶的种类 Ⅰ型酶：早期提取的酶类，是一类复杂的多功能酶，在基因工程上的应用价值不大。 Ⅱ型酶：相对分子质量较小，为20000～100000，是简单的单功能酶，作用时无需辅助因子或只需Mg2＋。能识别双链DNA上特异的核苷酸序列，底物作用的专一性强，而且其识别序列与切断序列相一致。这类酶对基因工程中的生化操作特别重要。 (二) DNA聚合酶(DNA polymerase) DNA聚合酶是能够催化DNA复制和修复DNA分子损伤的一类酶，这类酶作用时大多数需要DNA模板并且优先作用于DNA模板，也可作用于RNA模板，但效率较低。 1．大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ 2. 大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ大片断Klenow 片断 3. T4噬菌体DNA聚合酶 4. 经修饰的T7噬菌体DNA聚合酶（测序酶） 5. T aqDNA聚合酶及AmpiTaqTMDNA聚合酶 6. 反转录酶

（三）DNA连接酶（DNA ligase）：能将两段DNA拼接起来的酶。 1. T4噬菌体DNA连接酶：催化DNA的5'羟基之间形成磷酸二酯键。 2. 大肠杆菌DNA连接酶：用途较窄，不常用。（四）基因工程中常用的其他酶 1. 末端脱氧核苷酸转移酶（末端转移酶或TDT酶） 2. T4噬菌体多核苷酸酶 3. 核酸酶（Nuclease） 4. 碱性磷酸酯酶（Alkaline phosphodiesterase）：能催化去除单链或双链DNA和RNA 分子中的5' 磷酸基（脱磷酸作用）。分为细菌碱性磷酸酯酶（BAP），牛小肠碱性磷酸酯酶（CIP）。二．基因工程制药中常用的克隆载体载体：能在细胞进行自我复制的DNA分子就是外源DNA片段（基因）的运载体（Vector）,又可称为分子载体或无性繁殖载体。基因工程制药中常用的目的基因克隆载体主要有：质粒、λ噬菌体、M13噬菌体和粘粒。（一）质粒 1.质粒（Plasmid）是一些存在于微生物细胞染色体外的闭合环状双链的小型DNA分子，是能进行独立复制并保持恒定遗传的辅助性遗传单位。 2 常用的几种质粒载体（1）pBR322及其衍生载体 pBR322 最早构建成功的较理想载体，分子质量2.6×106u，4.36kb，属松弛型复制，含有两个抗性基因（Tetr和Ampr），已确定32个限制酶切割位点的相对位置。BamH I

考点一基因工程的概念及操作工具

考点一基因工程的概念及操作工具(5年13考) (2015天津、福建、重庆、浙江、江苏；2014新课标、天津、北京、山东、江苏、海南；2013全国大纲卷、广东……) 一、基因工程的概念基因工程的别名基因拼接技术或DNA重组技术操作环境生物体外操作对象基因操作水平DNA分子水平原理基因重组基本过程剪切→拼接→导入→表达结果人类需要的基因产物或生物类型供体提供目的基因受体表达目的基因本质目的基因在受体体内的表达优点可定向改造生物的遗传性状二、DNA重组技术的基本工具 1．限制性核酸内切酶(简称：限制酶) ?? ? ?? 来源：主要从原核生物中分离作用：割断两个核苷酸之间的磷酸二酯键作用特点：专一性，即限制酶可识别特定的核苷酸序列结果 ? ? ?错位切：产生两个相同的黏性末端平切：形成平末端 2．DNA 常用类型E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶来源大肠杆菌T4噬菌体功能连接黏性末端连接黏性末端或平末端结果都缝合磷酸二酯键，如图 3.载体 (1)种类：质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。 (2)质粒的特点 ?? ? ?? 能自我复制有一个至多个限制酶切割位点有特殊的标记基因

1．下图为限制酶和DNA连接酶的关系，据图回答： (1)限制酶和DNA连接酶的作用部位相同吗相同。 (2)DNA连接酶起作用时是否需要模板不需要。 2．探究载体所具条件的意义条件意义稳定并能自我复制目的基因稳定存在且数量可扩大有一个至多个限制酶切割位点可携带多个或多种外源基因具有特殊的标记基因便于重组DNA的鉴定和选择基因工程操作工具的综合考查导学号(经典高考题)根据基因工程的有关知识，回答下列问题： (1)限制性核酸内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有________和________。 (2)质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下： AATT C……G G……CTTAA 为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性核酸内切酶切割，该酶必须具有的特点是______________________________。 (3)按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即________DNA连接酶和 ________DNA连接酶。 (4)反转录作用的模板是________，产物是_____________________________________。若要在体外获得大量反转录产物，常采用________技术。 (5)基因工程中除质粒外，________和________也可作为运载体。 (6)若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是____________________________________________________________________。名称作用部位作用底物作用结果限制酶磷酸二酯键DNA将DNA切成两个片段 DNA连接酶磷酸二酯键DNA片段将两个DNA片段连接为一个DNA分子DNA聚合酶磷酸二酯键脱氧核苷酸DNA DNA酶磷酸二酯键DNA将DNA片段水解为单个脱氧核苷酸解旋酶碱基对之间的氢键DNA将双链DNA分子局部分解为两条长链RNA聚合酶磷酸二酯键核糖核苷酸将单个核糖核苷酸依次连接到单链末端 (1)根据目的基因两端的限制酶切点确定限制酶的种类

基因工程基本过程

基因工程基本过程基因工程（genetic engineering），也叫基因操作、遗传工程，或重组体DNA 技术。它是一项将生物的某个基因通过基因载体运送到另一种生物的活性细胞中，并使之无性繁殖（称之为"克隆"）和行使正常功能（称之为"表达"），从而创造生物新品种或新物种的遗传学技术。一般说来，基因工程是专指用生物化学的方法，在体外将各种来源的遗传物质（同源的或异源的、原核的或真核的、天然的或人工合成的DNA片段）与载体系统（病毒、细菌质粒或噬菌体）的DNA 结合成一个复制子。这样形成的杂合分子可以在复制子所在的宿主生物或细胞中复制，继而通过转化或转染宿主细胞、生长和筛选转化子，无性繁殖使之成为克隆。然后直接利用转化子，或者将克隆的分子自转化子分离后再导入适当的表达体系，使重组基因在细胞内表达，产生特定的基因产物。常用的工具酶限制性内切酶—主要用于DNA分子的特异切割 DNA甲基化酶—用于DNA分子的甲基化核酸连接酶—用于DNA和RNA的连接核酸聚合酶—用于DNA和RNA的合成核酸酶—用于DNA和RNA的非特异性切割核酸末端修饰酶—用于DNA和RNA的末端修饰其它酶类--用于生物细胞的破壁、转化、核酸纯化、检测等。主要过程有为四步：一．获得目的基因有多种方法可获得目得基因 1.构建cDNA文库分离目的基因过程：（1）从真核细胞中提取mRNA，以其为模板，在反转录酶的作用下合成cDNA的第一条链。（2）以第一条链为模板，以反转录酶或DNA聚合酶Ｉ作用下合成cDNA的第二条链。（3）在甲基化酶作用下使cDNA甲基化。

（4）接头或衔接子连接。（5）凝胶过滤分离cDNA。（6）通过核酸探针法或免疫反应法从cDNA文库中分离特异cDNA克隆。 2.人工化学合成法适于已知的核苷酸序列且校小的ＤＮＡ片断合成，常用方法有磷酸二酯法、磷酸三酯法、亚磷酸三酯法、固相合成法、自动化合成法等。过程：先用以上方法合成基因DNA不同部位的两条链的寡核苷短片段，再退火成为两端形成粘性末端的DNA双链片段。然后将这些DNA片段按正确的次序进行退火连接起来形较长的ＤＮＡ片段，再用连接酶连接成完整的基因。 3.利用PCR技术直接扩增目的基因 PCR（Polymerase Chain Reaction）法，又称为聚合酶链反应或PCR扩增技术，已知待扩增目的基因或DNA片段两侧的序列，根据该序列化学合成聚合反应必需的双引物，类似于DNA的天然复制过程，用ＰＣＲ法进行扩增，特异地合成目的cDNA链，用于重组、克隆。二．载体的选择与制备 1.载体的选择（以质粒为例） ⑴载体必须是复制子。 ⑵具有合适的筛选标记，便于重组子的筛选。 ⑶具备多克隆位点（MCS），便于外源基因插入。 ⑷自身分子量较小，拷贝数高。 ⑸在宿主细胞内稳定性高。 (6)应具有很强的启动子，能为大肠杆菌的RNA聚合酶所识别 (7)应具有阻遏子，使启动子受到控制，只有当诱导时才能进行转录。 (8)应具有很强的终止子，以便使RNA聚合酶集中力量转录克隆的外源基因，而不转录其他无关的基因，且所产生的mRNA较为稳定。 (9)所产生的mRNA必须具有翻译的起始信号。 2.制备有多种分离质粒的方法，如碱裂解法、煮沸裂解法、层析柱过滤法等。目前一般使用碱变性法制备质粒DNA。这个方法主要包括培养收集细菌菌体，裂解细胞，将质粒DNA与染色体DNA分开及除去蛋白质和RNA。

基因工程的基本操作程序教案

一、教材分析《基因工程的基本操作程序》是专题1《基因工程》的第二节，也是《基因工程》的核心，上承《DNA重组技术的基本工具》，下接《基因工程的应用》。本节课主要介绍了基因工程的基本操作程序的四个步骤，教学内容多，难点多，最好化整为零、各个击破。二、教学目标 1．知识目标：简述基因工程原理及基本操作程序。 2．能力目标：尝试设计某一转基因生物的研制过程。 3．情感、态度和价值观目标：（1）关注基因工程的发展。（2）认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。三、教学重点和难点 1、教学重点基因工程基本操作程序的四个步骤。 2、教学难点（1）从基因文库中获取目的基因（2）利用PCR技术扩增目的基因四、学情分析本节课内容较多，难点较多，学生学习起来有一定困难，所以之前应该要求学生做好预习，尽量采用化整为零、各个击破的教学策略。五、教学方法 1、学案导学：见学案。 2、新授课教学基本环节：预习检查、总结疑惑→情境导入、展示目标→合作探究、精讲点拨→反思总结、当堂检测→发导学案、布置预习六、课前准备 1．学生的学习准备：预习《基因工程的基本操作程序》，初步把握基因工程原理及基本操作程序。 2．教师的教学准备：多媒体课件制作，课前预习学案，课内探究学案，课后延伸拓展学案。七、课时安排：2课时八、教学过程（一）预习检查、总结疑惑检查学生落实预习的情况并了解学生的疑惑，使教学具有针对性。（二）情境导入、展示目标教师首先提问：（1）什么是基因工程？（基因工程的概念）（2）DNA重组技术的基本工具有哪些？（限制酶、DNA连接酶、载体）（3）运载体需要具备哪些条件？（有一个或多个限制酶切割位点；有标记基因；能在受体细胞中稳定存在并自我复制或者整合到受体细胞染色体DNA上随染色体DNA的复制而同步复制）上节课我们学习了DNA重组技术的基本工具，本节课我们将继续学习《基因工程》的核心内容——基因工程的基本操作程序。我们来看本节课的学习目标。（多媒体展示学习目标，强调重难点）（三）合作探究、精讲点拨

转基因基本步骤

第一步：目的基因的获取 1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。 2.原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合成法_。 3.PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建 1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。 2.组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。第三步：将目的基因导入受体细胞_ 1. 转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。 2.常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化方法是：先用Ca2+ 处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。 3.重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。第四步：目的基因的检测和表达 1.首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA

考点一基因工程的概念及操作工具

考点一基因工程的概念及操作工具(5年13考) (2015天津、福建、重庆、浙江、江苏；2014新课标、天津、北京、山东、江苏、海南；2013全国大纲卷、广东……) 一、基因工程的概念二、DNA 1．限制性核酸内切酶(简称：限制酶) ????? 来源：主要从原核生物中分离作用：割断两个核苷酸之间的磷酸二酯键作用特点：专一性，即限制酶可识别特定的核苷酸序列结果??? 错位切：产生两个相同的黏性末端平切：形成平末端 2．DNA 连接酶都缝合磷酸二酯键，如图 3.载体 (1)种类：质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。

(2)质粒的特点????? 能自我复制有一个至多个限制酶切割位点有特殊的标记基因 1．下图为限制酶和DNA 连接酶的关系，据图回答： (1)限制酶和DNA 连接酶的作用部位相同吗？相同。 (2)DNA 连接酶起作用时是否需要模板？不需要。 2．探究载体所具条件的意义基因工程操作工具的综合考查导学号67241264(经典高考题)根据基因工程的有关知识，回答下列问题： (1)限制性核酸内切酶切割DNA 分子后产生的片段，其末端类型有________和________。 (2)质粒运载体用EcoR Ⅰ切割后产生的片段如下： AATT C ……G G ……CTTAA 为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA 除可用EcoR Ⅰ切割外，还可用另一种限制性核酸内切酶切割，该酶必须具有的特点是______________________________。 (3)按其来源不同，基因工程中所使用的DNA 连接酶有两类，即________DNA 连接酶和________DNA 连接酶。 (4)反转录作用的模板是________，产物是_____________________________________。若要在体外获得大量反转录产物，常采用________技术。 (5)基因工程中除质粒外，________和________也可作为运载体。 (6)若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是____________________________________________________________________。 1．限制酶、DNA 连接酶、DNA 聚合酶等相关酶的分析比较

自编基因工程操作步骤学案

山东省昌乐一中2011-2012高二生物学案必修三编号05 2012.1.4 班级姓名 1．2基因工程的基本操作程序编制：王福玲徐军胜审核：王福玲审批：【学习目标】：简述基因工程原理及基本操作程序。【重点难点】： 1.基因工程基本操作程序的四个步骤。 2.从基因文库中获取目的基因。 3.利用PCR技术扩增目的基因。【自主学习】基因工程的基本操作程序主要包括4个步骤：的获取、基因表达的构建、将细胞、的检测与鉴定。一、目的基因的获取 1、概念：目的基因主要是指编码蛋白质的。也可以是一些具有调控作用的因子。 2、来源：（1）可以从自然界中已有中直接分离出来。（2）从中获取目的基因。 3、获取目的基因的方法：根据基因的有关信息，如基因的序列，基因功能、基因在上的位置、基因的转录产物，以及基因的翻译产物等特性来获取目的基因。（1）利用PCR技术扩增目的基因：①PCR技术是一项在生物体外复制片段的核酸合成技术。②条件：提供已知的核苷酸序列，根据这段序列合成。（2）人工合成方法：当基因较小，核苷酸序列已知时，可以用人工方法合成（例如，通过直接合成）。二、基因表达载体的构建 1、表达载体的组成表达载体：目的基因、、、标记基因。启动子：它是一段有，位于基因的首端，它是的识别和结合部位，起动转录mRNA。终止子：位于基因的尾端，终止过程。标记基因：用于受体细胞是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。 2、表达载体的功能：使目的基因在受体细胞中存在，并且给下一代，同时使能够表达和发挥作用。三、将目的基因导入受体细胞 1、将目的基因导入植物细胞（1）农杆菌转化法：①转化：目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为。②农杆菌特点：在自然条件下能感染植物和植物，，对植物没有感染力；Ti质粒的可以转移至受体细胞，并整合到受体细胞的上。（2）基因枪法又叫。

基因工程的基本操作程序教案

基因工程的基本操作程序教案 Prepared on 24 November 2020

专题一基因工程的基本操作程序一、教材分析《基因工程的基本操作程序》是专题1《基因工程》的第二节，也是《基因工程》的核心，上承《DNA重组技术的基本工具》，下接《基因工程的应用》。本节课主要介绍了基因工程的基本操作程序的四个步骤，教学内容多，难点多，最好化整为零、各个击破。二、教学目标 1．知识目标：简述基因工程原理及基本操作程序。 2．能力目标：尝试设计某一转基因生物的研制过程。 3．情感、态度和价值观目标：（1）关注基因工程的发展。（2）认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。三、教学重点和难点 1、教学重点基因工程基本操作程序的四个步骤。 2、教学难点（1）从基因文库中获取目的基因（2）利用PCR技术扩增目的基因四、学情分析

本节课内容较多，难点较多，学生学习起来有一定困难，所以之前应该要求学生做好预习，尽量采用化整为零、各个击破的教学策略。五、教学方法 1、学案导学：见学案。 2、新授课教学基本环节：预习检查、总结疑惑→情境导入、展示目标→合作探究、精讲点拨→反思总结、当堂检测→发导学案、布置预习六、课前准备 1．学生的学习准备：预习《基因工程的基本操作程序》，初步把握基因工程原理及基本操作程序。 2．教师的教学准备：多媒体课件制作，课前预习学案，课内探究学案，课后延伸拓展学案。七、课时安排：2课时八、教学过程（一）预习检查、总结疑惑检查学生落实预习的情况并了解学生的疑惑，使教学具有针对性。（二）情境导入、展示目标教师首先提问：（1）什么是基因工程（基因工程的概念）（2）DNA重组技术的基本工具有哪些（限制酶、DNA连接酶、载体）（3）运载体需要具备哪些条件（有一个或多个限制酶切割位点；有标记基因；能在受体细胞中稳定存在并自我复制或者整合到受体细胞染色体DNA 上随染色体DNA的复制而同步复制）

高中生物选修3专题《基因工程：DNA重组技术基本工具》教学设计

DNA重组技术基本工具的教学设计设计思路 “DNA重组技术的基本工具”这节课位于人教版高中生物选修三第一专题第一节第二课时。基因工程是现代生物技术的核心内容，通过模拟DNA重组过程，将具体的操作程序有机联系起来，加深对这一程序的理解，有利于提高学生的认知水平和接受能力。针对重点难点对教学内容进行结构化处理，并与基因工程的实际操作练习起来；在模拟探究的过程中不断生成问题，引导学生依据载体的特点，按照相似性原理，选择和建立模型，进而对模型进行“剪”与“连”等操作，并分析操作结果。教学分析 1．教材分析重点：DNA重组技术的三种基本工具难点：载体的特点及应用 2．学情分析通过上一节课的学习，学生们已初步掌握了“DNA重组技术的基本工具”有哪些，其作用是什么。但这些基本工具在实际应用中如何发挥作用，是非常抽象的内容，仅仅靠学生的想象，很难真正理解并融会贯通；同时，中学生的心理发育特点，决定了他们更乐于通过实际动手操作来解决遇到的问题，同时对自己新发现的问题有更加强烈的探究欲望。 3．教学条件分析对于本节课的教学设计而言，需要如下教学条件：电脑，投影仪，彩色复印纸，剪刀，双面胶。教学目标简述基因工程原理及基本操作程序掌握基因工程基本操作程序的四个步骤通过动手操作、小组合作，提高学生自主学习及合作探究的能力。教学策略与手段教学模式：探究式教学，通过创设问题情境，在分析问题、解决问题的过程中不断生成一系列新的问题，培养学生的自学能力，以及探究和思维能力。教学策略：利用教学多媒体，自制教具，使抽象的问题形象化，引导学生自主动手操作，解决每一程序中的技术难点和重点。教学手段：PPT，自制教具，投影仪等综合教学辅助工具。本节课模拟探究的是载体与目的基因的连接，所以将教材提供的碱基序列加以调整，用彩色打印纸打印，如图：

“基因工程的基本操作程序”教学设计

“基因工程的基本操作程序”教学设计 1 教材分析《基因工程的基本操作程序》是人教版选修3专题1基因工程中第2节内容，本节是《基因工程》专题的核心，上承《DNA重组技术的基本工具》一节，下接《基因工程的应用》。对于基因工程，学生接触得很少，文字描述中会感到抽象，为此，教材中采用形象化得呈现方式简述了基因工程基本操作程序的四个步骤。例如，基因文库中把基因组文库比作国家图书馆，而把cDNA文库比作某市图书馆，这样便于学生理解和掌握。此外，在教材处理中还呈现主干，割舍枝杈，将非主干内容以《生物技术资料卡》、《拓展视野》等方式呈现，做到有主有次。 2 学情分析学生经过上一节的学习已经掌握DNA重组技术所需三种基本工具的作用及基因工程载体所需条件等知识，具备学习基因工程的基本操作程序一节的基础；而且经过一年必修教材的学习，学生的生物基础知识较扎实，思维的目的性、连续性和逻辑性已初步建立。但基因工程一节对学生来说难点较多，如果处理不好，会变成简单的死记硬背。因此在教学过程中，应在教师引导下适时加强学生解决问题和运用概念图等生物学语言归纳结论等方面的能力。 3 教学目标 3.1 知识目标 ⑴简述基础理论研究和技术进步催化了基因工程 ⑵简述基因工程的原理和基本步骤 3.2 能力目标 ⑴学会运用概念图总结基因工程的基本步骤及方法 ⑵尝试运用基因工程原理，提出解决某一实际问题的方案 3.3 情感态度与价值观 ⑴关注基因工程的发展 ⑵认同基因工程的应用促进生产力的提高 4 教学重点与难点 4.1 教学重点基因工程基本操作程序的四个步骤 4.2 教学难点 ⑴从基因文库中获取目的基因 ⑵利用PCR技术扩增目的基因 5 教学整体思路采用从“整体-部分-整体”的教学思路，首先引用基因工程案例使学生从整体上了解基因工程的四个步骤，其次采用分步探究的形式帮助学生理解各个步骤的原理、方法和过程，最后教师引导学生用概念图将所学的知识从整体上再次整合。

基因工程的基本操作步骤

水寨中学生物自主探究学案内容：基因工程的基本操作程序课时：2课时年级：高二编号64 一、教学目标 1．知识目标：了解基因工程原理及基本操作程序。 2．能力目标：尝试设计某一转基因生物的研制过程。 3．情感、态度和价值观目标：（1）了解基因工程的发展。（2）认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。二、教学重点和难点 1、教学重点基因工程基本操作程序的四个步骤。 2、教学难点（1）从基因文库中获取目的基因（2）利用PCR技术扩增目的基因第一课时三、教学过程（一）复习上节内容 1、什么是基因工程？DNA重组技术的基本工具有哪些？运载体需要具备哪些条件？以上问题可以不展示（二）讲授新课 1、基因工程的基本步骤包括那四步？ 2、第一步：目的基因的获取（１）为什么要有目的基因的获取这一步骤？（２）目的基因的获取方法有哪些？（3）为什么要建立基因文库？怎么建立的？

（4）如何从基因文库中获取目的基因？（5）为什么要建立cDNA文库？如何获取cDNA？（5）PCR技术的原理是什么？利用PCR技术扩增目的基因的前提是什么？（6）如何获取引物？（7）请你用文字和箭头描述PCR技术扩增的过程？ 3、第二步：基因表达载体的构建（基因工程的核心步骤）（1）在基因工程的操作过程中，为什么要构建基因表达载体？单独的DNA片段能不能稳定遗传？（2）参考课本P11页图1—10基因表达载体模式图，在学案上绘出基因表达载体的模式图，并标出其组成部分。并了解什么是启动子、终止子？他们位于哪里？有什么作用？标记基因的作用是什么？

思考:1、作为基因工程的表达载体，只需含有目的基因就可以完成任务吗？为什么 2、完成教材P11页的“寻根问底” 第二课时 4、第三步：将目的基因导入受体细胞（1）为什么要把目的基因导入受体细胞而不是在外界培养让其维持稳定和表达？（2）什么是转化？（3）将目的基因导入植物细胞的方法有哪些？最常用的方法是哪种？（结合示意图，了解农杆菌转化法的基本过程）（4）将目的基因导入动物细胞的基本操作程序是怎样的？要用到什么技术？（5）早期的基因工程为什么选择原核生物作为受体细胞？大肠杆菌细胞最常用的转化方法是？

(完整版)基因工程的基本工具练习题及答案

第三次生物练考题命题人：王娜选择题答案：题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 答案一、选择题（每小题5分，共计70分） 1、在基因工程中使用的限制性核酸内切酶，其作用是( ) A、将目的基因从染色体上切割出来 B、识别并切割特定的DNA核苷酸序列 C、将目的基因与运载体结合 D、将目的基因导入受体细胞 2、下列四条DNA分子，彼此间具有粘性末端的一组是（） ①② ③④ A．①②B．②③C．③④D．②④ 3、基因工程是DNA分子水平的操作，下列有关基因工程的叙述中，错误的是( ) A、限制酶只用于切割获取目的基因 B、载体与目的基因必须用同一种限制酶处理 C、基因工程所用的工具酶是限制酶，DNA连接酶 D、带有目的基因的载体是否进入受体细胞需检测 4、下列有关基因工程的叙述，正确的是：（） A．DNA连接酶的作用是将两个黏性末端的碱基连接起来 B．目的基因导入受体细胞后，受体细胞即发生基因突变 C．目的基因与运载体结合的过程发生在细胞外 D．常使用的运载体有大肠杆菌、噬菌体和动植物病毒等5、下列关于DNA连接酶的叙述中，正确的是（） A. DNA连接酶连接的是两条链碱基对之间的氢键 B. DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和脱氧核糖 C. DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和核糖 D. 同一种DNA连接酶可以切出不同的黏性末端 6、实施基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限制性内切酶。从大肠杆菌中提取的一种限制性内切酶EcorI，能识别DNA分子中的GAATTC序列，切点在G与A之间。这是应用了酶的（） A.高效性 B.专一性 C.多样性 D.催化活性受外界条件影响 7、下列有关质粒的叙述，正确的是（） A．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 B．质粒是细菌细胞质中能自主复制的小型环状DNA分子 C．质粒只有在侵入宿主细胞后才能在宿主细胞内复制 D．细菌质粒的复制过程一定是在宿主细胞外独立进行的 8、右图所示为限制酶切割某DNA分子的过程，从图中可知，该限制酶能识别的碱基序列及切点是 A.CTTAAG，切点在C和T之间 B.CTTAAG，切点在G和A之间 C.GAATTC，切点在G和A之间 D.GAATTC，切点在C和T之间 9、关于右图DNA分子片段的说法正确的是（） A．限制性内切酶可作用于①部位，解旋酶作用于③部位 B．②处的碱基缺失导致染色体结构的变异 C．把此DNA放在含15N的培养液中复制2代，子代中含15N的DNA占3/4 D．该DNA的特异性表现在碱基种类和（A+T）/（G+C）的比例上 10、基因治疗是指：（） A．运用人工诱变的方法，使有基因缺陷的细胞发生基因突变而恢复正常 B．运用基因工程技术，把有缺陷的基因切除，达到治疗疾病的目的 T A G G C C A T T A C C G G T A ① G A T A T G C A T A T 15N 14N ② ③ … … …

基因工程的基本过程

基因工程的基本过程基因工程主要包括几个过程： 1、目的基因的制备； 2、选择合适的载体，将目的基因与载体相连接生成重组DNA分子； 3、将重组DNA片段导入受体； 4、选择目的基因； 5、目的基因的表达。对于整个基因过程来讲，目的基因的获取是关键，它直接涉及到产物，而且还影响到产物的量。很多在基因操作过程中，目的基因是很难获得的，所以通常采取先生成基因文库的方法，然后从基因文库中筛选。如果目的基因的序列以及它的调控等信息很清楚，可以直接通过PCR或cDNA获取，这样就大大减少了选择目的基因的盲目性，可以将整个过程简化为以下步骤：图10-3-8 基因工程过程

(1)目的基因的分离和制备目的基因是指准备导入受体细胞内的，以研究或应用为目的所需要的外源基因称目的基因。获得目的基因的方法很多，但也是十分困难的一步。目前获得目的基因有4条途径： 1.从生物基因组群体中分离目的基因原核生物基因组较小，基因容易定位，用限制性内切酶将基因组切成若干段后，用带有标记的核酸探针，从中选出目的基因。真核生物一般通过基因组文库的方法获得目的基因。图10-3-1 限制性内切酶

限制性内切酶(restrictive enzyme)是20世纪60年代末在细菌中发现的，能水解DNA分子骨架的磷酸二酯键，使一个完整的DNA分子切成若干段，每一种限制酶，都有自己特定的作用位点，而且切口或切下来的序列，往往是回文结构（palindromes）。例如Eco RI把GAATTC在GA之间切开，形成粘性末端。也有一些限制酶作用的结果产生不含粘性末端的平整末端，如HapI。多在原核生物中存在，能识别4～6个特苷酸特定的碱基序列。限制酶对细菌有保护作用，某些入侵的噬菌体可因DNA链被限制性酶切断而不能在细菌中繁殖，“限制”因此而得名。限制酶不能切开细菌本身的DNA，这是因为细菌DNA的腺嘌呤和胞嘧啶甲基化（-CH3）而受到保护之故。这样就可以用限制性内切酶把一个基因组DNA分成很多片段，对于原核生物比较小的基因组来说，可以直接用标记地探针来获取在通过特定的方法，对于比较大的基因组，可以先制作基因文库，然后钓取所需要的带有目的基因的片段。 2.人工合成目的基因DNA片段人工合成目的基因DNA片段有化学合成和酶促合成法两条途径。一般是采用DNA合成仪来合成长度不是很大的DNA片段。 3.PCR反应合成DNA 聚合酶链式反应（PCR)是以DNA变性、复制的某些特性为原理设计的。通过PCR技术获取所需要的特异DNA片段在实际应用用得非常多，但是前提条件是必须对目的基因有一定的了解，需要设计引物。PCR技术的原理如下：

人教版选修三基因工程的基本操作程序教案

《基因工程的基本操作程序》教学设计教学目标 1.简述基因工程原理及基本操作程序。 2.尝试设计某一转基因生物的研制过程。 3.培养学生探索科学的严谨态度教学重难点【教学重点】基因工程基本操作程序的四个步骤。【教学难点】（1）从基因文库中获取目的基因。（2）利用PCR技术扩增目的基因。教学工具多媒体教学过程复习提问： 1.DNA重组技术的基本工具有那些，各自的作用和特点是什么？ 2.我们所学过的育种方法有那些？其中基因工程育种有那些优点？导入：通过基因工程的概念我们可知,我们能够应用DNA重组技术和转基因技术赋予生物以新的遗传特征，但是无论是DNA重组技术还是转基因技术都需要找到对我们有利的目的基因，我们该如何去寻找目的基因哪，目的基因又将如何连接到载体上哪，以及如何将载体导入受体？这些都是我们所要共同探究的问题!现在让我们共同学习一下1.2基因工程的基本操作。思考1.我们在前面提到的苏云芽孢杆菌中的抗虫基因、胰岛素基因、干扰素基因等都可以作目的基因。可是要在浩瀚的“基因海洋”中，找到特定的目的基因可以用什么样的方法和途径呢？ 2、基因工程的基本操作程序主要包括：、、新课教学：

基因工程的基本操作步骤主要包括：目的基因的获取；基因表达载体的构建；将目的基因导入受体细胞；目的基因的检测与鉴定。一．目的基因的获取 1．目的基因：主要是指编码蛋白质的结构基因。 2．目的基因的获取方法：（1）从基因文库中获取基因文库：将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因。构建基因文库的目的：为了在不知目的基因序列的情况下，便于获得所需的目的基因。基因组文库：含有一种生物的所有基因。部分基因文库（如cDNA文库）：含部分基因，可由mRNA反转录而来。（2）利用PCR技术扩增目的基因 PCR：是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。原理：DNA双链复制原料：模板DNA；RNA引物；四种脱氧核苷酸；热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；离子方法：DNA受热变性解旋为单链、冷却后RNA引物与单链相应互补序列结合、DNA 聚合酶作用下延伸合成互补链。特点：指数形式扩增二．基因表达载体的构建 1．目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在；可以遗传给下一代；使目的基因能够表达和发挥作用。目的基因： 2．基因表达启动子：位于基因首端，RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动转录基因载体的组成终止子：位于基因尾端，使转录在所需要的地方停下来标记基因：鉴别受体细胞中是否含有目的基因

专题1.2 基因工程的基本操作程序

学习目标 1.简述基因工程原理及基本操作程序。 2.尝试设计某一转基因生物的研制过程。

同步学案 1.基因操作的基本步骤（1）提取目的基因：目的基因就是人们所需要的基因。提取途径：a.鸟枪法：从供体细胞的DNA中直接分离基因，工具是，优点是，缺点是，具有一定的。 b.人工合成法:两个途径：一是反转录法，就是目的基因转录成的做模板,形成单链DNA，再合成；二是反推法,就是以已知的序列，推出序列，再推出序列，然后人工合成。【答案】特定、限制性内切酶、简便、工作量大、盲目性、mRNA、反转录、双链DNA、氨基酸、mRNA、基因碱基

2.例：生物学家通过基因工程培育出了能够通过乳房生物反应器生产人的血清蛋白（1）“分子手术刀”，（2）“分子缝合针”，（3）“分子运输车”。（4）操作步骤：从人的获取目的基因；目的基因与结合构建基因表达载体；在基因表达载体中还应插入和终止子。然后把基因表达载体导入牛的，通过发育形成的牛体细胞含人的，成熟的牛产的的奶中含有，证明基因操作成功。

【答案】（1）限制性内切酶（或限制酶）（2）DNA连接酶（3）基因进入受体细胞的载体（4）基因组文库、载体、启动子、受精卵、血清蛋白基因、人的血清蛋白。

3.根据基因工程中的操作步骤，回答以下问题：目的基因能与运载体结合，说明，目的基因能在受体细胞中得到表达，说明，受体细胞具备的条件是。如何检验质粒是否导入受体细胞？。如何检测目的基因是否得到表达？。【答案】DNA组成成分相同，都遵循碱基互补配对原则、所有生物公用一套遗传密码、没有与运载体相同的质粒或没有与运载体质粒相同的标记基因、检测质粒的标记基因、检测是否出现目的基因所控制的性状

基因工程的基本操作程序教学案

1．2基因工程的基本操作程序【课标要求】 1．简述基因工程基本操作程序的四个步骤 2．尝试设计某一转基因生物的研制过程。【本节重难点】重点：基因工程基本操作程序的四个步骤难点：（1）从基因文库中获取目的基因（2）利用PCR技术扩增目的基因【学习过程】一、基因工程的基本操作程序简述 ①目的基因的； ②的构建； ③将目的基因； ④目的基因的。二、基因工程的基本操作程序（一）目的基因的获取 1．目的基因：主要是指的基因，也可以是一些具有作用的因子。 2．原核细胞和真核细胞的基因结构（1）原核细胞的基因结构（2）真核细胞的基因结构

3．目的基因的获取目的基因可以从中分离出来，也可以用合成。常用的方法有以下几种：（1）从基因文库中获取目的基因 ①基因组文库和部分基因文库（如cDNA文库）基因组文库cDNA文库文库类型cDNA文库基因组文库文库大小基因中启动子基因中内含子基因多少物种间的基因交流 ②从基因文库中得到目的基因，可以根据一些信息，如根据基因的、基因的、基因在染色体上的、基因的，以及基因的等特性。（2）利用PCR技术扩增目的基因 ①PCR是____________________________________技术，是的缩写。

②原理：____________________。， ③前提：有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成_________。 ④条件：DNA模板、。 ⑤扩增过程： a．变性（℃）：目的基因DNA受热变性后接连为单链b．退火（℃）：与单链相应互补序列结合 c．延伸（℃）：在的作用下进行延伸 Taq酶的特点是。 PCR技术与DNA复制的比较： PCR技术DNA复制相同点原理原料条件不同点解旋方场所酶结果（3）化学法直接合成

基因工程的基本操作程序教案

基因工程的基本操作程序教案 Company Document number：WTUT-WT88Y-W8BBGB-BWYTT-19998

人教版《基因工程的基本操作程序》教学设计

“基因工程的基本操作程序”一节的教学设计 1 教材分析《基因工程的基本操作程序》是人教版选修3专题1基因工程中第2节内容，本节是《基因工程》专题的核心，上承《DNA重组技术的基本工具》一节，下接《基因工程的应用》。对于基因工程，学生接触得很少，文字描述中会感到抽象，为此，教材中采用形象化得呈现方式简述了基因工程基本操作程序的四个步骤。例如，基因文库中把基因组文库比作国家图书馆，而把cDNA文库比作某市图书馆，这样便于学生理解和掌握。此外，在教材处理中还呈现主干，割舍枝杈，将非主干内容以《生物技术资料卡》、《拓展视野》等方式呈现，做到有主有次。【1】 2 学情分析学生经过上一节的学习已经掌握DNA重组技术所需三种基本工具的作用及基因工程载体所需条件等知识，具备学习基因工程的基本操作程序一节的基础；而且经过一年必修教材的学习，学生的生物基础知识较扎实，思维的目的性、连续性和逻辑性已初步建立。但基因工程一节对学生来说难点较多，如果处理不好，会变成简单的死记硬背。因此在教学过程中，应在教师引导下适时加强学生解决问题和运用概念图等生物学语言归纳结论等方面的能力。 3 教学目标 3.1 知识目标 ⑴简述基础理论研究和技术进步催化了基因工程 ⑵简述基因工程的原理和基本步骤 3.2 能力目标 ⑴学会运用概念图总结基因工程的基本步骤及方法 ⑵尝试运用基因工程原理，提出解决某一实际问题的方案 3.3 情感态度与价值观 ⑴关注基因工程的发展 ⑵认同基因工程的应用促进生产力的提高 4 教学重点与难点 4.1 教学重点基因工程基本操作程序的四个步骤 4.2 教学难点 ⑴从基因文库中获取目的基因 ⑵利用PCR技术扩增目的基因 5 教学整体思路采用从“整体-部分-整体”的教学思路，首先引用基因工程案例使学生从整体上了解基因工程的四个步骤，其次采用分步探究的形式帮助学生理解各个步骤的原理、方法和过程，最后教师引导学生用概念图将所学的知识从整体上再次整合。【2】 6 教学过程教学环节教师行为学生活动导入新课1）出示我国有知识产权的转基因抗虫棉的培育图解 2）质疑：转基因抗看图并回答：首先

选修3(人教版)1.2基因工程操作的基本步骤

基因工程主要内容及流程

考点一基因工程的概念及操作工具

基因工程基本过程

基因工程的基本操作程序教案

转基因基本步骤

考点一基因工程的概念及操作工具

自编基因工程操作步骤学案

基因工程的基本操作程序教案

高中生物选修3专题《基因工程：DNA重组技术基本工具》教学设计

“基因工程的基本操作程序”教学设计

基因工程的基本操作步骤

(完整版)基因工程的基本工具练习题及答案

基因工程的基本过程

人教版选修三 基因工程的基本操作程序 教案

专题1.2 基因工程的基本操作程序

基因工程的基本操作程序教学案

基因工程的基本操作程序教案

人教版《基因工程的基本操作程序》教学设计

人教版选修三基因工程的基本操作程序教案