结核病实验室要求
结核病实验室要求
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一、各级各类实验室职责
（一）结防机构结核病实验室
1、国家结核病参比实验室
在卫生部和中国疾病预防控制中心的领导下，国家结核病参比实验室负责全国结核病实验室工作的规划、质量控制和生物安全等技术管理，为各级提供技术支持和技术服务。
根据国家结核病控制规划的要求，组织全国结核病实验室的工作，参与国家有关技术政策的制定和组织实施。
制定和推行结核病细菌学检查技术标准、操作规程及规章制度。
建立可行的全国结核病实验室质量控制标准和质量保证系统，并负责组织实施，协调、检查各省（市、自治区）结核病实验室工作。
除常规的分枝杆菌检查项目外，还应承担其它结核病诊断新技术，新方法的实施和基础研究，承担分枝杆菌最终的菌种鉴定工作。
开展有关的实施性研究。
培训结核病实验室技术人员。
接受跨国参比实验室的质量控制。
2、省级结核病参比实验室
在国家结核病参比实验室的技术指导下，负责全省结核病实验室工作计划的制定和实施、培训、督导和质量控制等技术管理。
按照国家和省结核病控制规划的要求，在国家参比实验室的统一部署下，规划本省结核病实验室工作，指导省内各级结核病实验室工作并提供技术支持。
根据国家结核病实验室质量保证体系的要求，组织全省各级实验室痰涂片镜检的质量保证工作，按要求对所辖的地市、县级实验室进行督导和评估，指导地市级实验室对各县级实验室的盲法复检和现场评估。
对本省各级结核病实验室所用耗材、试剂的质量进行评估和核准，为全省统一提供抗酸染色试剂，为省内开展分离培养的实验室统一提供培养基。
按国家统一的标准化操作程序开展涂片镜检、分离培养、药物敏感性测定和分离株的初步鉴定，有条件的省参比实验室，可建立完整的分枝杆菌菌种鉴定体系。
开展有关科研活动和实施性研究工作。
负责组织、实施本省结核病实验室技术人员的培训工作。
接受国家参比实验室的质量控制和管理，按有关规定上报各类表格。
3、地（市）级结核病实验室
在省级参比实验室的指导下，制定本地（市）结核病实验室工作计划。
根据国家结核病实验室质量保证体系的要求，组织实施本地市痰涂片镜检的盲法复检和现场评估，并按要求向省参比实验室报告结果。
按国家统一的标准化操作程序开展痰涂片镜检工作，有条件的地市可以在省参比室的核准和指导下开展分离培养工作。
对县级实验室以及乡镇卫生院查痰点提供技术支持。
培训所辖县（市）结核病实验室技术人员，监督辖区内检验人员培训后上岗制度。
接受省级参比室的质量控制、技术培训和现场督导。
4、县（区）级结核病实验室
在省、地（市）参比实验室的指导下，制定本县（市）结核病实验室检查的工作计划。
按照国家结核病实验室质量保证体系的要求，做好本实验室开展检查项目的室内质控工作，承担同级间实验室（县级）第一复检者盲法复检工作，在所属地（市）级实验室的组织下，开展痰涂片镜检盲法复检。
按国家统一的标准化操作程序常规开展痰涂片镜检工作，根据实际情况有能力、具备条件的可以开展结核菌培养。
接受上级实验室的督导、现场评估和定期培训。
对辖区内乡镇卫生院查痰点的工作提供技术支持。
（二）乡镇查痰点
乡镇查痰点在我国结核病防治工作中发挥着重要作用，它可以方便结核病可疑症状者就医，增加病人发现。各地应根据实际情况设立乡镇查痰点。
乡镇查痰点应该按卫生部要求开展工作，国家统一的标准化操作程序开展痰涂片镜检工作，并按规定送痰涂片至县级进行复检；
接受上级实验室的培训、现场督导和技术指导。
（三）医疗机构实验室
医疗机构结核病实验室在相应级别临床检验中心和上级结核病实验室的技术指导下，开展质量有保证的结核病实验室检查工作，严格按照相关各项标准化、规范化操作程序进行实验室相关活动，并接受结核病实验室的质量控制。
二、实验室生物安全
根据我国《病原微生物实验室生物安全管理条例》和《实验室生物安全通用要求》，国家对病原微生物实行分类管理，对实验室实行分级管理。国家实行统一的实验室生物安全标准，实验室应当符合国家标准和要求；一级、二级实验室不得从事高致病性病原微生物实验活动，三级、四级实验室从事高致病性病原微生物实验活动，应当具备下列条件：（1）实验目的和拟从事的实验活动符合国务院卫生主管部门或者兽医主管部门的规定；（2）通过实验室国家认可；（3）具有与拟从事的实验活动相适应的工作人员；（4）工程质量经建筑主管部门依法检测验收合格。实验室所用设施、设备和材料（含防护屏障）均应符合国家相关的标准和要求。对于医疗废弃物，为了防止疾病传播，保护环境，保障人体健康，医疗废弃物的处理应该严格按照《中华人民共和国传染病防治法》和《中华人民共和国固体废物污染环境防治法》以及《医疗废物管理条例》的规定和要求进行。
（一）涂片镜检实验室基本要求
实验室应有实验室分区（涂片染色区域和读片镜检区域），布局应该符合生物安全二级（BSL-2）的要求；
实验室应在靠近出口处设置洗手池；
实验室的墙壁、天花板和地面应平整、易清洁、不渗水、耐化学品和消毒剂的腐蚀，地面应防滑；
实验操作台面应能防水，耐腐蚀、耐热；
实验室中的厨柜和实验台应牢固，厨柜、实验台彼此之间应保持一定距离，以便于清洁；
对于实验室中可开启的窗户，应安装纱窗；
实验室内应保证工作照明，避免不必要的反光和强光；
应有适当的消毒设备；
在实验室门口处应设挂衣装置，个人便装与实验室工作服分开放置；
10、实验室应该装备开展痰涂片检查所需要的仪器和设备。
（二）结核杆菌培养实验室基本要求
满足国家生物安全二级（BSL-2）的基本要求；
实验室门应带锁并可自动关闭，实验室的门应有可视窗；
应在实验室内配备生物安全柜，在实验室所在的建筑内应配备高压蒸汽灭菌器；
应设洗眼设施，必要时应有应急喷淋装置；
应通风，如使用窗户自然通风，应有防虫纱窗；
有可靠的电力供应和应急照明。必要时，重要设备如培养箱、生物安全柜、冰箱等应设备用电源；
实验室出口应有在黑暗中可明确辨认的标识；
应有足够的存储空间摆放物品以方便使用，在实验室工作区域外还应当有供长期使用的存储空间。
（三）结核杆菌抗结核药物敏感性试验实验室基本要求
根据我国《病原微生物实验室生物安全管理条例》和《实验室生物安全通用要求》的规定，卫生部关于印发《人间传染的病原微生物名录》的要求，对于结核分枝杆菌大量活菌操作须在符合生物安全三级（BSL-3）的环境中进行，而对于样本检测：包括样本的病原菌分离纯化、药物敏感性实验、生化鉴定、免疫学实验、PCR核酸提取、涂片、显微观察等初步检测活动，可以在符合生物安全二级（BSL-2）的环境中进行。
结核病的实验室诊断方法及评价
耐多药结核病的实验室诊断条件：因耐多药结核分枝杆菌的生物危险性， 1）需P2及以上实验室，目前我院实验室条件基本具备即将投入运行， 2）日常培养及涂片用的生物安全柜滤膜已超出使用年限，工作人员生物安全得不到保障，应定期予以更换。 耐多药结核分枝杆菌主要以结核分枝杆菌体外药物敏感性测定作为其诊断依据。因此其基础是培养，只有培养出阳性结核分枝杆菌才能进一步通过结核分枝杆菌体外药物敏感性测定诊断是否为耐多药结核分枝杆菌。 1.已进人临床常规应用的测定方法:目前包括绝对浓度法、比例法及应用BACTEC460、BACTEC 960、BacT/ ALERT 3D、ESPII等仪器系统快速检测结核分枝杆菌的药物敏感性。其中:绝对浓度法以最低抑菌浓度或以无生长为终点作为判断标准，是我国目前普遍采用的方法;比例法以是否能够抑制99%的细菌生长作为判断标准，是世界卫生组织推荐使用的方法;后四种仪器方法则是比例法的特化，其特点是以细菌的代谢过程指示细菌生长状况。 2.处于研究探索阶段的测定方法:此类方法很多，抗性比例法、Etests法、噬菌体生物扩增法、液体变色培养基测定法、荧光素酶测定法、硝酸盐还原试验等。 3分子生物学方法对结核分枝杆菌耐药性检测已有一些进入临床检测。基因突变是引起抗结核药物耐药性的最主要的原因。多种以PCR为基础的分子生物学技术用于检测与耐药相关基因的突变，作为快速耐药性检测方法在实验室或临床得到开展。这些方法具体包括：主要是DNA序列分析法，聚合链反应-单链构象多态性分析（PCR-SSCP），另外还包括基因芯片技术、异质性双链构象分析、变性梯度凝胶电泳、线性探针杂交技术、RNA/RNA错配检测技术和分子灯塔技术等。由于结核分枝杆菌的耐药性与基因突变的确切关系未完全阐明，检测耐药相关基因的分子生物学方法虽然能快速准确地检测到耐药相关基因的突变，但由于判断药物敏感性时存在固有的缺陷，检测结核分枝杆菌耐药性的基因型鉴定法不能完全替代表型鉴定法。 结核病的实验室诊断方法及评价 (一)标本的采集 1．痰标本采集新发病人应在抗结核药物治疗前留取痰标本。治疗中的病人应停药2～3天后留取痰标本。病人于清晨漱口后，留取3～5ml合格的痰标本(深咳后吐出的黏液痰、脓样痰、干酪样痰、褐色血样痰或含少量新鲜血液的血痰)，遇到唾液或口永，应重新留取。至少采集3次。WHO推荐的采集容器为国际通用的螺旋盖痰瓶、可密封塑料盒或蜡纸盒。痰容器上应标明病人姓名、编号、检查项目和容器序号。 2.胃冲洗液幼儿不会吐痰，常将痰液咽下，故可用清晨空腹胃洗出液，直接涂片染色或进行结核杆菌培养，连续作三次可提高培养阳性率。胃液结核杆菌检出率以浸润性肺结核和干酪性肺炎为最高，其次为粟粒型肺结核。胃液、痰液或其他分泌物中结核杆菌检查，有时对诊断有决定性意义。 3.支气管肺泡灌洗和支气管冲洗支气管肺泡灌洗和支气管冲洗液至少5ml并以无菌容器盛装，以用于检验。 4.病灶组织或干酷块等先用组织研磨器磨碎后再行涂片。 5．尿液留全量夜尿，静置4或5小时后，弃上清液，取沉淀部分尿液10ml，3000rpm．离心30min，取沉渣涂片。 6.体液或脑脊液无菌操作收集体液或脑脊液，放置冰箱或室温24h，待薄膜形成后
结核病临床实验室检测
结核病临床实验室检测 当前，我国结核病临床实验室检测的分类：光学检测、免疫学检测、分子生物学检测和微生物学检测，其中微生物学检测是结核病检测的金标准，也是我国疾控系统所采用的主要方法。 光学检测包括胸透和X光片，该方法主要是临床用于肺结核的筛查，发现肺部的阴影和继发性结核的病灶，是临床上用于检测继发性结核的主要方法，灵敏度和特异性都非常差。 免疫学检测包括细胞免疫和体液免疫，其中，细胞免疫是利用结核分支杆菌的特异性抗原对患者的免疫细胞进行刺激，致使患者的免疫细胞释放出γ-干扰素等细胞因子，再通过检测细胞因子的含量来间接的判断是否感染结核分枝杆菌，该方法是最近几年比较火的一个项目，特别是在一些综合性医院，因为该项目收费高，各医院开展的积极性也比较高；体液免疫就是利用结核分支杆菌特异性抗原（LAM、38KD、16KD等）来检测患者体液中的lgM或lgG，灵敏度和特异性大概都在70%左右，该方法在前几年比较流行，但现在因为WHO的文章的反驳，大部分临床医院已经放弃了这种方法，还有少量的单位在使用，主要用于临床的辅助诊断。 分子生物学检测包括结核病的临床诊断和结核分支杆菌的药敏检测，结核病的分子生物学诊断主要是通过PCR等方法来检测痰标本或胸腹水等中的DNA或RNA片段，该方法相较于传统的微生物学来说具有快速和灵敏度高的特点，缺点就是操作比较麻烦，对操作人员的要求较高。结核药敏的分子生物学检测就是检测结核分支杆菌耐药基因的突变位点，该方法也比较快速，但目前研究比较清楚的耐药基因突变位点仅限于一线抗生素中的利福平和异烟肼等仅有的几种药，而我国是一个结核分支杆菌耐药比较严重的国家，仅仅有一线抗生素还不能满足临床的需要。 微生物学检测包括染色、培养和药敏实验，微生物学检测是结核病临床检测的金标准。染色有抗酸染色和荧光染色两种，是目前我国结防系统进行结核病初期筛查的主要方法，该方法简单、快速费用低，但阳性率比较低，据统计我国根据染色法进行结核病的筛查阳性发现率还不到10%；培养法包括固体培养法和液体培养法，固体培养基分改良罗氏培养基和酸性罗氏培养基，两者的区别在于对标本的要求不同，改良罗氏培养基要求的是PH值中性的标本，酸性罗氏培养基要求接种碱性标本即痰标本经过消化后不经过中和直接接种，据临床统计固体培养的阳性率在10~15%之间，阳性报阳时间21~28天为多，临床收费在10~40元之间。液体培养是以7H9培养基为基础，添加生长因子和抑菌剂，目前市场上的液体培养基以进口的为主，辅以仪器，以BD、赛默飞世尔和梅里埃，国产试剂和仪器目前还没有，在进口仪器中以BD公司的MGIT960一家独大，在中国90%的疾控系统和临床单位都拥有该仪器，该仪器是以购买为主，不投放，价格在70万元左右，据临床统计液体培养的阳性率30~45%左右，平均报阳时间在14天左右，临床收费在100~180元之间。药敏实验目前在中国有绝对浓度法和比例法，该方法是以固体罗氏培养基为基础，分别添加一线或二线抗生素，比例法的平均出结果的时间在28天，该方法无法做结核一线抗生素中的吡嗪酰胺，液体药敏的出结果时间在7~14天，结核药敏的临床收费是按每种抗生素收费的，固体法每种药的收费在7~25元/种药物，液体全自动药敏的收费在90~120元/种药物。
结核菌的实验室检测
结核菌的实验室检测 实验室检查是确诊结核病、选择治疗方案、评价治疗效果的重要依据，也是发现传染源，控制结核病流行的重要手段。目前，结核病常用的实验室检查主要包括：痰涂片检查、痰结核菌培养及药物敏感性试验、分子生物学检查等。 1.痰涂片检查 痰标本采集： 一般应采集3种痰标本： 即时痰：就诊即时咳出的痰 清晨痰：清晨深咳出的痰 夜间痰：就诊前夜间咳出的痰。 痰标本的要求： 痰标本采集的时间、痰标本质量好坏和是否在使用抗结核药等均直接影响结核菌的检出。痰标本应以脓样、干酪样或脓性粘液样性质的痰液为合格标本。痰量为3ml～5ml。晨痰涂片阳性率比较高。当患者痰少时，可采用高渗盐水超声雾化导痰。 痰涂片结果：包括：阳性、阴性 结果的意义： 涂片染色阳性只能说明抗酸杆菌存在，不能区分是结核菌还是非结核分枝杆菌。由于我国非结核分枝杆菌病较少，故检出抗酸杆菌对
诊断结核病有极重要的意义。直接涂片方法简单、快速，应作为常规检查方法。涂片阴性不能排除肺结核，连续检查3次以上,可提高其检出率。 2痰结核菌培养 确定诊断： 临床怀疑肺结核，但直接痰涂片结果为阴性，为进一步明确诊断，可进行痰培养。确定诊断的培养检查应采集2个合格的痰标本，即夜间痰和晨痰。 耐药监测： 以耐药监测为目的的培养，主要是为了获得分枝杆菌的纯培养物用于药敏试验，所以一般选用涂片阳性的标本进行培养。 药敏试验：这是了解抗结核药物是否对结核菌敏感、诊断耐药结核以及指导结核病治疗的有效手段。 痰培养结果：包括：阳性、阴性 痰结核菌培养的灵敏度高于痰涂片检查，可直接获得菌落，便于与非结核分枝杆菌鉴别。未进行抗结核治疗或停药48-72小时的肺结核患者可获得比较高的检出率。痰结核菌培养所需时间较长，一般需培养4-8周。
结核杆菌实验室生物安全规程教程文件
结核杆菌实验室生物 安全规程
结核杆菌实验室生物安全规程 1、实验室管理制度 （1）实验室入口处必须贴上生物危险标志，注明危险因子，生物安全级别，试验室负责人和相关负责人姓名和电话。 （2）实验室应有明显的区域划分，清洁区，办污染区和污染区。 （3）无论进入实验室时间长短，必须填写工作日志。要严格遵守实验室的一切操作规程。 （4）进行结核菌操作时，需有两名工作人员同时进入实验室，尽量避免单独检验地带网工作。 （5）在对大批量的痰标本和菌株进行分离培养和药敏试验前，英语中心新主任和实验室主任讨论，必要时加强预防措施。 （6）试验室人员应做结核菌素试验，试验结果为阴性时，应接种卡介苗，并做好登记记录。 （7）外来进修，参观人员必须学习实验室的一切规章制度和有关操作规程，经试验室主任批准方可进入实验室。 2、标本采集人员安全要求 （1）标本采集人员的防护：痰标本有病人自行留取，采集咽拭子等特殊标本，采集人员应穿防护服，戴一次性口罩，帽子，戴医用手术手套。 （2）采集标本污染器材的处理：采集标本的痰盒，试管等污染器材军需高压处理。 3、标本运送安全要求 痰标本需留置在特制的痰盒内（直径4cm，高2cm的光口盖密闭的塑料盒），并放置在专用的痰标本运送箱内，运送过程中切勿倒置，严防痰液外溢。由有专人送至痰检实验室，标本送达后痰标本运送箱检验地带网及时用乙醇或是碳酸等化学消毒剂或高压的办法彻底消毒。 4、实验操作安全要求 （1）结核病细菌学实验室要求 结核病细菌学实验室应为生物安全Ⅲ级实验室，用于临床诊断，教学，属中度危险。应具备安全设备，缓冲间实验室条件应满足工作任务的要求，有完善的试验设施，试验室的环境应清洁，卫生，安静，无污染，试验室内的管线设置应整齐，要有安全管理措施和报警，应积及急救设施，房间数量不少于七间，包括实验室准备室，培养机制备室，显微镜检查
结核病实验室要求.
一、各级各类实验室职责 （一）结防机构结核病实验室 1、国家结核病参比实验室 在卫生部和中国疾病预防控制中心的领导下，国家结核病参比实验室负责全国结核病实验室工作的规划、质量控制和生物安全等技术管理，为各级提供技术支持和技术服务。 根据国家结核病控制规划的要求，组织全国结核病实验室的工作，参与国家有关技术政策的制定和组织实施。 制定和推行结核病细菌学检查技术标准、操作规程及规章制度。 建立可行的全国结核病实验室质量控制标准和质量保证系统，并负责组织实施，协调、检查各省（市、自治区）结核病实验室工作。 除常规的分枝杆菌检查项目外，还应承担其它结核病诊断新技术，新方法的实施和基础研究，承担分枝杆菌最终的菌种鉴定工作。 开展有关的实施性研究。 培训结核病实验室技术人员。 接受跨国参比实验室的质量控制。 2、省级结核病参比实验室 在国家结核病参比实验室的技术指导下，负责全省结核病实验室工作计划的制定和实施、培训、督导和质量控制等技术管理。 按照国家和省结核病控制规划的要求，在国家参比实验室的统一部署下，规划本省结核病实验室工作，指导省内各级结核病实验室工作并提供技术支持。 根据国家结核病实验室质量保证体系的要求，组织全省各级实验室痰涂片镜检的质量保证工作，按要求对所辖的地市、县级实验室进行督导和评估，指导地市级实验室对各县级实验室的盲法复检和现场评估。 对本省各级结核病实验室所用耗材、试剂的质量进行评估和核准，为全省统一提供抗酸
染色试剂，为省内开展分离培养的实验室统一提供培养基。 按国家统一的标准化操作程序开展涂片镜检、分离培养、药物敏感性测定和分离株的初步鉴定，有条件的省参比实验室，可建立完整的分枝杆菌菌种鉴定体系。 开展有关科研活动和实施性研究工作。 负责组织、实施本省结核病实验室技术人员的培训工作。 接受国家参比实验室的质量控制和管理，按有关规定上报各类表格。 3、地（市）级结核病实验室 在省级参比实验室的指导下，制定本地（市）结核病实验室工作计划。 根据国家结核病实验室质量保证体系的要求，组织实施本地市痰涂片镜检的盲法复检和现场评估，并按要求向省参比实验室报告结果。 按国家统一的标准化操作程序开展痰涂片镜检工作，有条件的地市可以在省参比室的核准和指导下开展分离培养工作。 对县级实验室以及乡镇卫生院查痰点提供技术支持。 培训所辖县（市）结核病实验室技术人员，监督辖区内检验人员培训后上岗制度。 接受省级参比室的质量控制、技术培训和现场督导。 4、县（区）级结核病实验室 在省、地（市）参比实验室的指导下，制定本县（市）结核病实验室检查的工作计划。 按照国家结核病实验室质量保证体系的要求，做好本实验室开展检查项目的室内质控工作，承担同级间实验室（县级）第一复检者盲法复检工作，在所属地（市）级实验室的组织下，开展痰涂片镜检盲法复检。 按国家统一的标准化操作程序常规开展痰涂片镜检工作，根据实际情况有能力、具备条件的可以开展结核菌培养。 接受上级实验室的督导、现场评估和定期培训。 对辖区内乡镇卫生院查痰点的工作提供技术支持。 （二）乡镇查痰点 乡镇查痰点在我国结核病防治工作中发挥着重要作用，它可以方便结核病可疑症状者就医，增加病人发现。各地应根据实际情况设立乡镇查痰点。
《结核病防治管理办法》
《结核病防治管理办法》（卫生部令第92号） 第一章总则 第一条为进一步做好结核病防治工作，有效预防、控制结核病的传播和流行，保障人体健康和公共卫生安全，根据《中华人民共和国传染病防治法》及有关法律法规，制定本办法。 第二条坚持预防为主、防治结合的方针，建立政府组织领导、部门各负其责、全社会共同参与的结核病防治机制。加强宣传教育，实行以及时发现患者、规范治疗管理和关怀救助为重点的防治策略。 第三条卫生部负责全国结核病防治及其监督管理工作，县级以上地方卫生行政部门负责本辖区内的结核病防治及其监督管理工作。 卫生行政部门应当积极协调有关部门加强结核病防治能力建设，逐步构建结核病定点医疗机构、基层医疗卫生机构、疾病预防控制机构分工明确、协调配合的防治服务体系。 第四条各级各类医疗卫生机构应当按照有关法律法规和卫生行政部门的规定，在职责范围内做好结核病防治的疫情监测和报告、诊断治疗、感染控制、转诊服务、患者管理、宣传教育等工作。 第二章机构与职责 第五条卫生部组织制定全国结核病防治规划、技术规范和标准；统筹医疗卫生资源，建设和管理全国结核病防治服务体系；对全国结核病防治工作进行监督检查及评价。 第六条县级以上地方卫生行政部门负责拟订本辖区内结核病防治规划并组织实施；组织协调辖区内结核病防治服务体系的建设和管
理，指定结核病定点医疗机构；统筹规划辖区内结核病防治资源，对结核病防治服务体系给予必要的政策和经费支持；组织开展结核病防治工作的监督、检查和绩效评估。 第七条疾病预防控制机构在结核病防治工作中履行以下职责：（一）协助卫生行政部门开展规划管理及评估工作； （二）收集、分析信息，监测肺结核疫情；及时准确报告、通报疫情及相关信息；开展流行病学调查、疫情处置等工作； （三）组织落实肺结核患者治疗期间的规范管理； （四）组织开展肺结核或者疑似肺结核患者及密切接触者的追踪工作； （五）组织开展结核病高发和重点行业人群的防治工作； （六）开展结核病实验室检测，对辖区内的结核病实验室进行质量控制； （七）组织开展结核病防治培训，提供防治技术指导； （八）组织开展结核病防治健康教育工作； （九）开展结核病防治应用性研究。 第八条结核病定点医疗机构在结核病防治工作中履行以下职责：（一）负责肺结核患者诊断治疗，落实治疗期间的随访检查；（二）负责肺结核患者报告、登记和相关信息的录入工作； （三）对传染性肺结核患者的密切接触者进行检查； （四）对患者及其家属进行健康教育。 第九条非结核病定点医疗机构在结核病防治工作中履行以下职责：
结核病实验室要求
一、实验室生物安全 实验室环境安全：根据我国《病原微生物实验室生物安全管理条例》、《实验室生物安全通用要求》、《人间传染的病原微生物名录》和《医疗机构临床实验室管理办法》的规定，结核分枝杆菌大量活菌操作须在符合生物安全三级（Laboratory Biosafety Level 3）的环境中进行；样本检测（包括涂片、显微镜观察、样本的病原菌分离纯化、药物敏感性试验、生化鉴定、免疫学实验、PCR核酸提取等初步检测活动），可以在符合生物安全二级（Laboratory Biosafety Level 2）的环境中进行。实验室所用设施、设备和材料（含防护屏障）均应符合相关的标准和要求。 实验室操作安全：由具有相关专业知识和操作技能的工作人员进行实验室操作，实验人员应该认真负责，格按照标准化、规化的操作程序进行各项实验室操作。 菌种或样本运输安全：为保障人体健康和公共卫生安全，在运输可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本时，须按照《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》的要求进行包装、运输、操作、保藏和管理。 废弃物处理安全：为防止疾病传播，保护环境，保障人体健康，医疗废弃物的处理应格按照《中华人民国传染病防治法》和《中华人民国固体废物污染环境防治法》，以及《医疗废物管理条例》的相关规定妥善处理。 （一）痰涂片镜检实验室基本要求 1.实验室应分区（痰涂片染色区域和读片镜检区域），布局应符合生物安全二级防护的要求。
2.准入规定，在实验室门上应标有国际通用的生物危害警告标志，未经批准任人不得进入实验室工作区域，实验室的门应随时关闭。 3.个人防护，在实验室工作时，应穿防护服、隔离衣，并佩戴口罩（面具）和手套等。 4.实验室墙壁、天花板和地板应易清洁、不渗液，并耐化学品和消毒剂的腐蚀，地面应防滑。 5.实验操作台面应耐热、防水，耐消毒剂、酸、碱和有机溶剂的腐蚀。 6.实验室应保证操作时的照明，避免不必要的反光和闪光。 7.实验室应设置洗手池、洗眼器或喷淋设备。 8.实验室中的器具和实验台应坚固耐用，在实验台、生物安全操作柜和其他设备之间及下面，应留有足够空间，以便于清洁。 9.实验室中可开启的窗户应安装纱窗。 10.实验室应有适当的消毒设备。 11.在实验室门口处应设挂衣装置，个人便装与实验室工作服分开放置。 12.实验室应装备开展痰涂片检查所需要的仪器和设备。 （二）结核分枝杆菌培养实验室基本要求 1.满足生物安全二级的基本要求。 2.准入规定，在实验室门上应标有国际通用的生物危害警告标志，未经批准任人不得进入实验室工作区域，实验室的门应随时关闭。 3.个人防护，在实验室工作时，应该穿防护服、隔离衣，并佩戴口罩（面具）和手套等。 4.实验室墙壁、天花板和地板应光滑、易清洁、不渗液，并耐化学品和消毒
结核病实验室要求
结核病实验室要求 LG GROUP system office room 【LGA16H-LGYY-LGUA8Q8-LGA162】
一、各级各类实验室职责 （一）结防机构结核病实验室 1、国家结核病参比实验室 在卫生部和中国疾病预防控制中心的领导下，国家结核病参比实验室负责全国结核病实验室工作的规划、质量控制和生物安全等技术管理，为各级提供技术支持和技术服务。 根据国家结核病控制规划的要求，组织全国结核病实验室的工作，参与国家有关技术政策的制定和组织实施。 制定和推行结核病细菌学检查技术标准、操作规程及规章制度。 建立可行的全国结核病实验室质量控制标准和质量保证系统，并负责组织实施，协调、检查各省（市、自治区）结核病实验室工作。 除常规的分枝杆菌检查项目外，还应承担其它结核病诊断新技术，新方法的实施和基础研究，承担分枝杆菌最终的菌种鉴定工作。 开展有关的实施性研究。 培训结核病实验室技术人员。 接受跨国参比实验室的质量控制。 2、省级结核病参比实验室 在国家结核病参比实验室的技术指导下，负责全省结核病实验室工作计划的制定和实施、培训、督导和质量控制等技术管理。 按照国家和省结核病控制规划的要求，在国家参比实验室的统一部署下，规划本省结核病实验室工作，指导省内各级结核病实验室工作并提供技术支持。 根据国家结核病实验室质量保证体系的要求，组织全省各级实验室痰涂片镜检的质量保证工作，按要求对所辖的地市、县级实验室进行督导和评估，指导地市级实验室对各县级实验室的盲法复检和现场评估。 对本省各级结核病实验室所用耗材、试剂的质量进行评估和核准，为全省统一提供抗酸染色试剂，为省内开展分离培养的实验室统一提供培养基。 按国家统一的标准化操作程序开展涂片镜检、分离培养、药物敏感性测定和分离株的初步鉴定，有条件的省参比实验室，可建立完整的分枝杆菌菌种鉴定体系。
结核病的实验室诊断技术
!!作者单位""&!!!"杭州(浙江省中西医结合医院结核病治疗中心 结核病的实验室诊断技术 李!锋!朱!敏 !!!摘!要"!由于结核菌耐药性增强(以及不少国家和地区忽视对结核病的控制(使得结核病再次成为一个严重的全球性公共卫生问题’随着免疫学&分子生物学技术的飞速发展(目前涌现出许多新型诊断技术’本文总结目前结核病实验室诊断技术(作一综述’ !关键词"!结核病% 实验室诊断!!结核病作为单因致死率最高的传染性疾病(目前疫情再次呈现上升趋势’其诊断主要依靠医生的临床经验并结合传统的结核菌检测和胸部f 线检查’由于胸部f 线的特异性不强(常给结核病的诊断和鉴别诊断带来很多干扰’结核病的实验室诊断技术近年来发展迅速(本文就其现状及展望作一概述(归纳起来大致有如下几个方面" J @C :?J :)O $也有实验室通过色谱)&* 或质谱)%*来鉴定分枝杆菌中特异性的物质(该法可从涂 片阴性的标本中检测出分枝杆菌(但需要特殊的设备且耗资巨大’I !免疫学检测 *细胞免疫学检测目前常用纯化蛋白衍生物 #) I C ;G ;>H )C :@>;
实验室检查
实验室检查 1.定义：以离体的人血液、体液、分泌物、排泄物和脱落物等为标本，通过试剂、设备、仪器、技术等进行检测，并进行全面的质量控制，最终得到可靠的检测结果或数据，辅助临床诊断、治疗及预后判断等。 2.临床实验室 医院内的检验科、部分临床科室的实验室。 门诊部、诊所的实验室。 性病、结核病防治院（所）的实验室。 采供血机构的实验室。 卫生防疫部门从事人体健康检查的实验室。 卫生检疫部门对出入境人员进行健康检查实验室。 独立的临床检验机构。 3.主要内容（按学科分类） 临床基础检验（临床一般检验） 含临床输血检验、脱落细胞学检验 临床血液学检验 临床生物化学检验 临床免疫学检验 临床病原体检验（微生物与寄生虫检验） 分子生物学检验 遗传学检验 第一节临床一般检验 一、血液一般检验（血常规检查+血沉） 二、尿常规检验
三、粪便常规检验 四、体液检查（脑脊液、胸腔和腹腔积液） 五、分泌物（阴道分泌物、精液、前列腺液）一、血液一般检查 红细胞参数 红细胞计数（RBC） 血红蛋白测定（Hb） 血细胞比容测定（Hct ） 平均红细胞体积（MCV） 平均血红蛋白含量（MCH） 平均血红蛋白浓度（MCHC） 红细胞体积分布宽度（RDW） 血沉（ESR） 白细胞参数 白细胞计数（WBC） 白细胞分类计数（N , L, M, E, B） 血小板参数 血小板计数（PLT） 平均血小板体积（MPV） 血小板体积分布宽度（PDW） 白细胞分类计数（手工法）
2.白细胞计数WBC的临床意义 A．白细胞WBC↑ 急性细菌感染或炎症：最常见原因 严重的组织损伤：如手术、心肌梗死 溶血、急性大出血 急性中毒 肿瘤性增多 白血病（未成熟细胞） B．白细胞WBC↓ 某些感染：病毒（最常见）、伤寒、原虫 某些血液病：再障，营养缺乏 理化因素致骨髓抑制： 射线（放化疗）、金属（铅汞）、 化学药物（镇痛药、磺胺类药的服用） 脾功能亢进：破坏增加 自身免疫性疾病：粒细胞自身抗体 3. PLT 4. 红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation, ESR) ESR: 抗凝RBC在第一小时内和1h末不同时间段内下沉的距离。 临床应用: 炎症：结核、风湿热等 组织损伤及坏死：心机梗塞↑，心绞痛- 良、恶性肿瘤鉴别：恶性↑，良性- 球蛋白增高类疾病
结核病实验室基本建设要求
结核病实验室基本建设要求 结核病实验室的建设，包括新建、改建和扩建，必须遵守国家有关法律、法规和规定，以及适应和满足社会对结核病控制和卫生服务的需求。 一、选址要求 结核病实验室建设首先考虑生物安全、环境保护和建筑技术规范等规定和要求，同时要避开化学、生物、粉尘、噪声、震动、强电磁场等污染源及易燃易爆场所。 二、建设 设计和建造应符合国家和地方建设规划。参照《生物安全实验室建筑技术规范（GB 50346-2011)》和《实验室生物安全通用要求（GB 19489-2008)》保证实验室用房达到生物安全标准，要有单独的办公用房。 三、验收 参照GB/T37140-2018检验检测实验室技术要求验收规范，实验室设计时应保证对生物、化学、辐射和物理等危险源的防护水平控制在经过评估的可接受程度，防止危害环境。 四、实验室生物安全及基本要求 实验室环境安全：结核病实验室设计原则遵循《WS233-2017病原微生物实验室生物安全通用准则》中关于实验室设施和设备要求。按照《人间传染的病原微生物名录》，针对结核分枝杆菌的各项操作，应在生物安全二级或三级实验室中进行。 结核属于第二类病原微生物，是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。
二级生物安全实验室从事高志致病性病原微生物实验室活动除应满足《人间传染的病原微生物名录》对实验室防护级别的要求外还应向省级卫生和计生行政主管部门申请。 三级和四级生物安全实验室从事高致病性病原微生物实验活动，应取得国家卫生和计生行政主管部门颁发的《高致病性病原微生物实验室资格证书》。 五、实验室分区及其基本要求 标本登记不少于3m2，涂片镜检实验室不少于15m2，培养基制备不少于15m2，储存室不少于10m2，培养室不少于15m2，药敏及鉴定不少于25m2，分子生物学实验室不少于30m2，消毒洗刷不少于10m2，培训/会议室建议在20m2左右。流程：标本接受-涂片镜检-培养-药敏实验。实验室需要由良好的自然通风，必要时应配备通风换气设备。接种、分离及鉴定细菌等操作应在生物安全柜中进行。为防止在对结核分枝杆菌等传染性极强微生物检验时引起交叉污染，保护工作人员健康，实验室应至少划分为3个区。 （一）清洁区：包括办公室、休息室、实验数据处理等等。此区域禁止进行病原等污染标本的检测和相关试验活动。 （二）缓冲区：位于清洁区与操作区之间的缓冲地带，穿戴隔离衣，设置水源供工作人员洗手及紫外灯消毒用品等。此区域禁止进行病原等污染标本的检测和相关试验活动。 （三）污染区（操作区）：实验室的操作区是开展实验研究的核心区域，最基本的要求如下。 1、整洁：微生物操作区是各种病原菌相对集中的地方，为了减少粉尘流动，防止交叉污染，操作区应与外界分开。实验室工作人员进入操作区应穿隔离衣、佩戴口罩、帽子及鞋套。实验室必须设洗手池，宜设置在靠近实验室的出口处和实验室的缓冲区处，洗手龙头应为自动感应式、长手柄式或脚踏式，备有洗手消毒皂液，必要时配备快速手消毒液。 2、门禁：实验室的门应有可视窗，并可自动关闭；如有可开启式窗户，应安装可防蚊虫的纱
肺结核——不容忽视的“白色瘟疫
不容忽视的“白色瘟疫” 结核病是目前致死人数最多的传染病。为保护自己免受感染，下面我们来一起了解“白色瘟疫”——结核病。 每年3月24日是世界防治结核病日。1882年的这天，罗伯特?科赫发现了结核病的致病菌——结核杆菌。 一、流行概况 结核病困扰人类已有上万年的历史。科学家们在9000年前的以色列人遗骸和2000年前的埃及木乃伊上都发现了肺结核感染的痕迹。欧洲结核病是在工业革命后，由于社会化大生产造成结核病传播，病人因为严重贫血而脸色苍白，日渐瘦损，因此被称为痨病，或白色瘟疫（与“黑死病”相对照）。直到上世纪40年代链霉素发明之前，结核病都被视为绝症。 在很多人眼里，随着“白色瘟疫”时代的结束，结核病应该早已载入史册。但事实上，随着耐多药结核病，糖尿病、艾滋病合并结核病的增多，结核病不仅没有消失，反而成为世界公共卫生的一大难题。世界卫生组织报道，目前全球近1/3的人已感染结核杆菌，活动性肺结核病人约2000万，每年新发结核病人约800-1000万，每年约有300万人死于结核病。结核病已成为全世界成人因传染病而死亡的主要疾病之一。 我国是全球22个结核病高负担国家之一，活动性肺结核病人数居世界第二位。我国肺结核疫情有以下特点：一是感染人数多。二是发
病人数多。三是现患人数多。四是耐药患者人数多。五是结核菌/艾滋病病毒双重感染人数多。六是疫情分布不平衡。 二、结核病分类 结核杆菌可以侵入人体的任何器官，如脑、胃肠、心包、盆腔、骨、腹膜、淋巴、皮肤等，但绝大多数人感染结核杆菌后，其发病部位在肺部，称为肺结核--最常见、对人群健康威胁最大。其它部位的病变，统称为肺外结核。 三、结核菌是如何传播的？ （一）传染源：正在排菌的肺结核患者。 患者痰中的结核杆菌越多，其传染的危险性越大。 （二）传播途径：一是通过呼吸道传染，以飞沫传染为最主要的方式。二是经消化道进入人体，饮用未经消毒带有结核杆菌的牛奶可能引起肠道感染。 （三）易感人群：人群对于结 核杆菌普遍易感。 四、结核病症状 （一）肺结核早期及全身症状 肺结核病人早期表现为周身不 适、倦怠、精神不振、烦躁不安，如果上述症状持续时间较长而没有特殊原因者，可能为肺结核的早期症状，应该引起重视。 午后低热：肺结核患者常有一些结核中毒症状，其中发热最常见。一般为午后37.4℃~38.0℃的低热，可持续数周，热型不规则，部分
肺结核的实验室及其他检查
一、结核菌检查痰中找到结核菌是确诊肺结核的主要依据。痰菌阳性说明病灶是开放性的（有传染性）。若排菌量多（每毫升10万条以上），直接涂片检查易呈阳性，为社会传染源。厚涂片法能提高发现率。荧光显微镜检查适用于大量标本快速检查。无痰或儿童不会咳嗽，可采用清晨的胃洗涤液查找结核菌。成人可用纤支镜检查或从冲洗液中查找结核菌。痰菌量较少（每毫升1万条以下），可用集菌法。培养法更为精确，除能了解结核菌有无生长繁殖能力，并可作药物敏感试验和菌型鉴定。结核菌生长缓慢，使用改良罗氏培养基，一般需4－8周始能报告。使用含14C的棕榈酸作碳源底物的7H12培养基测量细菌代谢过程中所产生14C的量，即可推算出标本中是否含有抗酸杆菌（BACTEC法），在5－7天即可报告，比一般培养法缩短了时间，且可作药物敏感试验和菌型鉴定，但缺点是标本可因污染而影响检查结果。将标本在体外用聚合酶链反应（PCP）方法，使所含微量结核菌DNA得到扩增，用电泳法检出。1条结核菌约含1fgDNa ，40条结核菌即可有阳性结果。此法不用体外预培养，特异性强，2天可出报告，快速、简便，还可以作菌型鉴定，但时有假阳性或假阴性。 二、影像学检查胸部X线检查不但可早期发现肺结核，而且可对病灶部位、范围、性质、发展情况和治疗效果作出判断，对决定治疗方案很有帮助。除荧光透视和X线摄片处，必要时还可采用点片或特殊体位（如前弓位）摄片、体层摄片及支气管造影等。摄片结合透视能提高诊断的准确性，可发现肋骨、纵隔、膈肌或心脏遮盖的细小病灶，并能观察心、肺、膈肌的动态。荧光缩影X线检查适用于集体肺部健康检查。肺结核的常见X线表现有：纤维钙化的硬结病灶（斑点、条索、结节状，密度较高，边缘清晰），浸润性病灶（云雾状、密度较淡、边缘模糊）干酪性病灶（密度较高、浓度不一）和空洞（有环形边界的透光区）。肺结核病灶一般在肺的上部、单侧或双侧，存在时间较长，常有多种性质不同的病灶混合存在和肺内播散迹象。胸部CT检查对于发现微小或隐蔽性病变，了解病变范围及组成，对于诊断是有帮助的。三、结核菌素（简称结素）试验旧结素（old tuberculin，OT）是从生长过结核菌的液体培养基中提练出来的结核菌代谢产物，主要含有结核蛋白。在人群中作普查时，可用1：2000的OT稀释液0.1ml（5IU），在左前臂屈侧作皮内注射，经48－72h 测量皮肤硬结直径，如小于5mm为阴性，5－9mm为弱阳性（提示结核菌感染或非结核性分支杆菌感染），10－19mm为阳性反应，20mm以上或局部发生水泡与坏死者为强阳性反应。结素的纯蛋白衍化物（purified protein derivative，PPD）为纯结素，不产生非特异性反应。PPD-PT23是由丹麦制造供应世界许多国家使用，已经取代OT.我国从人型结核菌制成PPD （PPD-C），又从卡介苗制成BCG-PPD，0.1ml为5IU，用于临床诊断，硬结平均直径≥5mm为阳性反应。结素试验除引起局部皮肤反应外，还可引起原有结核病灶和全身反应。临床诊断一般使用5IU，如无反应，可在一周后再用5IU皮试（产生结素增强效应），若仍为阴性，大多可除外结核感染。结素试验阳性反应仅表示结核感染，并不一定患病。我国城市成年居民的结核感染率在60％以上，故用5IU结素进行检查，其一般阳性结果意义不大。但如用高稀释度（1IU）作皮试呈强阳性者，常提示体内有活动性结核灶。结素试验对婴幼儿的诊断价值比成年人大，因为年龄越小，自然感染率越低；3岁以下强阳性反应者，应视为有新近感染的活动性结核病，须给予治疗。结素试验阴性反应除提示没有结核菌感染外，还见于以下情况。结核菌感染后需4－8小时有变态反应充分建立；在这变态反应前期，结素试验可为阴性。在应用糖皮质激素等免疫抑制剂者，或营养不良及麻疹、百日咳等病人，结素反应也可暂时消失。严重结核病和各种危重病人对结素无反应，或仅为弱阳性，这都是由于人体免疫力连同变态反应暂时受到抑制的结果；待病情好转，又会转为阳性反应。其他如淋巴细胞免疫系统缺陷（如淋巴瘤、白血病、结节病、艾滋病等）病人和老年人的结素反应也常为阴性。四、其他检查结核病人血象一般无异常。严重病例可有继发性贫血。急性粟粒型肺结核可有白细胞总数减低或类白血病反应。活动性肺结核的红细胞沉降率（简称血沉）可增快，但对诊断无特异性价值，血沉正常也不能排除活动性肺结核。病人无痰或痰
检测痰中结核杆菌几种方法的对照
检测痰中结核杆菌几种方法的对照 发表时间：2011-07-14T08:06:36.360Z 来源：《中外健康文摘》2011年第15期供稿作者：苏京华王茶花[导读] 目的探讨建立快速、准确的痰结核分枝杆菌检测方法。 苏京华王茶花（上饶县人民医院江西上饶 334100） 【中图分类号】R446.1 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085 (2011)15-0168-02 【摘要】目的探讨建立快速、准确的痰结核分枝杆菌检测方法。方法采用直接涂片抗酸染色法、离心沉淀集菌法和结核菌培养法对痰结核分枝杆菌进行检测，并对其检出率进行比较。结果培养法检出率最高为14.8%。但检测时间较长，离心沉淀集菌法次之为14.5%，直接涂片抗酸染色法检出率最低为10.1%。结论离心沉淀集菌法找痰结核分枝杆菌快速、安全、简单易行，在肺结核的早期诊断中能发挥重 要作用。 【关键词】结核杆菌方法对照 近年来，伴随着经济发展，生活水平提高，人们对健康已普遍重视。然而随着全球人口流动性的增加、艾滋病的流行以及耐药结核菌株的出现，结核病的发病率不断增加，已成为严重威胁人类生命健康的传染性疾病，受到世界各国的广泛关注。肺结核如果没有及早得到确诊，一方面会危及患者生命;另一方面又会感染周围的人。“在我国结核病是国家重点控制的传染病，但结核病的疫情依然相当严重。部分地区有蔓延趋势。结核病的患者人数在世界各国中居于第二位。” [1] 面对这样一个严峻的客观情况，找到一种准确、快速的结核病检查方法是必需的。 检查肺结核，实验室诊断是主要的途经和手段，是确定结核病诊断和化疗方案的重要依据，也是考核疗效、评价治疗效果的可靠标准。痰中结核杆菌的检测方法常规采用痰涂片及痰培养。涂片虽简单易行，但阳性率低，培养虽为金标准，但周期太长，均难以满足临床需要。分子生物学虽敏感高、检出率也高，但在基层医疗单位中，由于条件、设备的限制，尚不能开展。本实验室通过对痰直接涂片法、痰离心沉淀浓集涂片、痰培养法三种方法进行对照。 1 材料与方法 1.1标本来源 2009年1月至2010年12月，本院住院和门诊疑似肺结核病人1042例，其中男性560例，女性482例，年龄10-81岁。嘱患者清晨嗽口，然后从深部咳痰2-4口分别于两个一次性塑料盒中送检。 1.2试剂萋尼氏染色试剂（按文献[2]的方法自行配制）、4%NaOH(自配)、痰前处理液和改良罗琴氏培养基均采用珠海贝索生物技术有限公司。 1.3 方法 1.3.1 直接涂片法：把专用瓶收集的痰液用接种环挑取选取标本一环，约为0.1ml，直接均匀涂在载玻片右2/3处，涂抹大小为10mm×20mm的卵圆形痰膜，连续送检三天。 1.3.2 离心沉淀集菌法将直接涂片用剩的痰液加1-2倍（视标本性状）痰前处理液（破坏痰液粘性，杀灭结核杆菌），混匀震荡数分钟，使标本充分液化，然后倒入一根试管里，3000r/min离心20分钟，弃去上清液，将沉淀用接种环取出均匀地涂到玻片上，与前面涂的片子一同干燥，固定，抗酸染色，镜检。连续送检三天。 1.3.3 培养法把收集的另一盒痰液加1-2倍的4%NaOH（液化痰液和杀死痰液的杂菌有利于结核菌生长），同上述一样混匀震荡数分钟，使标本充分液化，然后倒入一根试管里，3000r/min离心20分钟，弃去上清液，将沉淀接种于改良罗氏斜面培养基，35度培养2-8周，每周观察一次生长情况，8周仍未生长则报告阴性。 2 结果 按痰检质量保证手册中规定的标准判断结果。300 个油镜视野内见不到结核分枝杆菌时为－，见到1～8 条结核分枝杆菌时为±，3～9条/100 视野为1+，1～9 条/10 视野为2+，1～9 条/ 每视野为3+，≥10条/ 每视野为4+[1]。 1042例标本检测结果见表一，直接涂片法阳性105例，阳性率为10.1%，离心沉淀涂片也阳性，无漏检，但其中有46例直接涂片阴性的标本，沉淀检出结果为阳性，从而使阳性率提高到14.5%，而培养法的阳性154例，其中包括离心集菌的151例，阳性率为14.8%。 表一 3 讨论 结核病是一种感染性疾病，病因很明确，实验室诊断是确诊的主要依据。对肺结核诊断最有价值的是细菌学检查，由于菌阴肺结核在肺结核中占相当大的比例，抗酸染色阳性率低，灵敏度和特异性也很差，并受送检标本质量影响较大，结核菌培养所需时间较长，给肺结核的早期诊断带来困难。检查痰液中是否含有结核杆菌，是临床诊断或鉴别肺结核与其他肺部疾病的重要依据。本文结果表明： 3.1痰液直接涂片镜检法：是各级医院检验科的临床实验室都在使用的常规抗酸性杆菌检查法。其特点是简便、快速和价格便宜，但痰涂片阳性的病人的含菌量每毫升痰在5000-50000个，而涂在涂片上的细菌数就比较少了，因为在涂片时只是在载坡片上，只涂上薄薄一层，所以敏感度低，造成一部分病人漏检，因此检出率较低，且容易造成检验人员交叉感染，不是一种理想的方法。 3.2 痰结核菌培养法：是最可靠的方法，被誉为“黄金标准”，每毫升痰100个菌就能培养阳性，缺点是时间一般需要2～8周才能得出结果，影响病人的治疗时间，而且敏感度低。但培养法的优点是，其药敏实验结果，能为临床用药及细菌耐药性等方面提供准确有效的重要参考;结核菌的培养对临床上的难治病例，耐药病例意义较大，可以帮助医生正确选择敏感药物制订有效的治疗方案。 3.3离心沉淀集菌法：本文通过用痰前处理液，既能杀死结核菌又液化痰液，便于离心沉淀集菌，通过离心沉淀，将整个标本的抗酸杆菌全部浓缩在一张玻片上，从而提高了标本的阳性率，从10.1%提高到1 4.5%，方法简单易掌握，设备也简单、结果快速，且降低了工作人员感染结核病的机率，因此它对进一步提高肺结核病的实验室诊断水平具有重要的临床意义。
结核病实验室要求内容
、实验室生物安全 实验室环境安全：根据我国《病原微生物实验室生物安全管理条例》、《实验室生物安全通用要求》、《人间传染的病原微生物名录》和《医疗机构临床实验室管理办法》的规定，结核分枝杆菌大量活菌操作须在符合生物安全三级（Laboratory Biosafety Level 3）的环境中进行；样本检测（包括涂片、显微镜观察、样本的病原菌分离纯化、药物敏感性试验、生化鉴定、免疫学实验、PCR 核酸提取等初步检测活动），可以在符合生物安全二级（Laboratory Biosafety Level 2 ）的环境中进行。实验室所用设施、设备和材料（含防护屏障）均应符合国家相关的标准和要求。 实验室操作安全：由具有相关专业知识和操作技能的工作人员进行实验室操作，实验人员应该认真负责，严格按照标准化、规范化的操作程序进行各项实验室操作。 菌种或样本运输安全：为保障人体健康和公共卫生安全，在运输可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本时，须按照《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》的要求进行包装、运输、操作、保藏和管理。 废弃物处理安全：为防止疾病传播，保护环境，保障人体健康，医疗废弃物的处理应严格按照《中华人民共和国传染病防治法》和《中华人民共和国固体废物污染环境防治法》，以及《医疗废物管理条例》的相关规定妥善处理。 （一）痰涂片镜检实验室基本要求 1. 实验室应分区（痰涂片染色区域和读片镜检区域），布局应符合生物安全二级防护的要求。 2. 准入规定，在实验室门上应标有国际通用的生物危害警告标志，未经批准任何人不得进入实验室工作区域，实验室的门应随时关闭。 3. 个人防护，在实验室工作时，应穿防护服、隔离衣，并佩戴口罩（面具）和手套等。 4. 实验室墙壁、天花板和地板应易清洁、不渗液，并耐化学品和消毒剂的腐蚀，地面应防滑。 5. 实验操作台面应耐热、防水，耐消毒剂、酸、碱和有机溶剂的腐蚀。 6. 实验室内应保证操作时的照明，避免不必要的反光和闪光。 7. 实验室应设置洗手池、洗眼器或喷淋设备。 8. 实验室中的器具和实验台应坚固耐用，在实验台、生物安全操作柜和其他设备之间